CN110470587B - 一种五分类血细胞分析仪用嗜碱性粒细胞计数套装 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种五分类血细胞分析仪用嗜碱性粒细胞计数套装，属于细胞检测技术领域。本发明对白细胞、嗜碱性粒细胞进行染色，而红细胞和脂肪滴不会被染色，去除了不良影响，比现有其他技术测定人全血中白细胞、嗜碱性粒细胞计数更加准确。溶血剂为含有阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂的缓冲溶液，其中，阳离子表面活性剂的浓度为0.1g/L～20g/L，非离子表面性剂的浓度为0.5g/L～30g/L，缓冲溶液的pH值为2.0～5.0；染色液为含有聚次甲基染料、乙二醇的溶液，其中，聚次甲基染料浓度为0.005％，乙二醇99.9％。为本发明简化了溶血剂的组分，加入了染色液，反应时间仅需10‑20s，即可完成对嗜碱性粒细胞和白细胞进行分类计数的测定，具有高度的准确性。
Description
技术领域
本发明涉及一种五分类血细胞分析仪用嗜碱性粒细胞计数套装，属于细胞检测技术领域。
背景技术
嗜碱性粒细胞是在正常人全血中占比例最少的一种粒细胞，占白细胞总数的0～1％，在临床上，出现骨髓增生性疾病、重金属中毒、慢性粒细胞性白血病、感染、某些食物过敏等疾病时，嗜碱性粒细胞的数量会出现明显的变化，因此对人全血中嗜碱性粒细胞的准确计数对这些疾病的诊断有直接指导意义。
在五分类血细胞分析仪上市之前，临床上对嗜碱性粒细胞进行化学染料染色计数，其中有甲苯胺蓝染色法、瑞氏-吉姆萨复合染色法以及中性红染色法等，这些方法直观有效，但是操作时间长，容易受操作者主观意识影响，因此不适合临床大标本量的检测。
目前，对全血中嗜碱性粒细胞准确分类和计数的方法主要包括阻抗法和光学法。比如国产五分类血液分析仪中的代表迈瑞系列，早期的嗜碱性粒细胞都是通过阻抗法检测，后期仪器升级，随着大量新技术在仪器上的不断应用，逐步发展到采用光学方法来检测，但因为破碎红细胞、血小板和脂肪滴的干扰等，仍存在很大的影响。早期的溶血剂不光要检测嗜碱性粒细胞、白细胞总数还要检测血红蛋白，后期对试剂功能进行细分，只检测嗜碱性粒细胞和白细胞总数；进口五分类血液分析仪中的代表希森美康系列，一直采用光学法。不管是阻抗法还是光学法，单一试剂在检测嗜碱性粒细胞和白细胞总数时，总有其他小细胞和碎片影响分析结果，而本发明的试剂套装在五分类血细胞分析仪工作进行时，染色液只会对有细胞核的细胞进行染色，不会对脂肪滴和红细胞进行染色，所以不存在其他颗粒和红细胞溶血不良的影响。
发明内容
为解决上述技术问题，本发明提供一种五分类血细胞分析仪用嗜碱性粒细胞计数套装，本发明相比较阻抗法来说，排除了其他不良影响，结果更加准确。同时成本比原装进口试剂更加低廉，改变了国内进口仪器只能使用昂贵进口试剂的现状，降低对进口试剂的依赖。
本发明的第一个目的是提供一种五分类血细胞分析仪用嗜碱性粒细胞计数套装，包括溶血剂和染色液；所述的溶血剂包括阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂以及将溶血剂pH值控制在2.0-5.0的缓冲溶液；所述的阳离子表面活性剂的浓度为0.1-20g/L，所述的非离子表面活性剂的浓度为0.5-30g/L；所述的染色液为含有聚次甲基染料和乙二醇的溶液。
进一步地，所述的聚次甲基染料的质量百分浓度为0.05％，所述的乙二醇的质量百分浓度为99.9％。
进一步地，所述的阳离子表面活性剂为十二烷基三甲基氯化铵、十二烷基三甲基溴化铵、十四烷基三甲基氯化铵、十四烷基三甲基溴化铵、十六烷基三甲基氯化铵、十六烷基三甲基溴化铵、十八烷基三甲基氯化铵、十八烷基三甲基溴化铵中的一种或多种。
进一步地，所述的非离子表面活性剂为聚氧乙烯月桂醚、聚氧乙烯油基醚、聚氧乙烯单硬脂酸酯、聚氧乙烯烷基芳基醚中的一种或多种。
进一步地，所述的缓冲溶液为柠檬酸/柠檬酸钠缓冲体系、柠檬酸/柠檬酸钾缓冲体系、丁二酸、邻苯二甲酸/盐酸缓冲体系、磷酸氢二钠/盐酸缓冲体系、甘氨酸/盐酸缓冲体系、柠檬酸/氢氧化钠/盐酸缓冲体系中的一种。
进一步地，所述的溶血剂中还包括稳定剂。
进一步地，所述的稳定剂为乙二胺四乙酸或其钠盐或钾盐，浓度为0.1-10g/L。
进一步地，所述的溶血剂中还包含防腐剂。
进一步地，所述的防腐剂为异噻唑啉酮类防腐剂，浓度为0.1-5ml/L。
本发明的有益效果是：
本发明的五分类血细胞分析仪用嗜碱性粒细胞试剂套装配方简单，检测结果准确，性能稳定，能够代替进口试剂，降低对进口试剂的依赖，同时还能降低各级医疗机构的成本。
附图说明
图1是实施例1WNR散点图；
图2是实施例1的试剂检测白细胞总数与原装试剂的相关性图；
图3是实施例1的试剂检测嗜碱性粒细胞数量与原装试剂的相关性图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好地理解本发明并能予以实施，但所举实施例不作为对本发明的限定。
本发明提供一种五分类血细胞分析仪用嗜碱性粒细胞试剂套装，包括溶血剂和染色液。其中溶血剂中含有非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、缓冲剂；染色液中含有聚次甲基染料0.05％，乙二醇99.9％，所述为质量百分浓度。所述试剂套装用于五分类血细胞分析仪在其通道中检测嗜碱性粒细胞、白细胞总数和有核红细胞。
本发明实施例中所采用的试剂纯度均为分析纯。本发明中溶血剂各组分含量可调，染色液各组分含量固定不变。
实施例1：
本发明提供的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数的溶血剂，其配方组成如下：
将上述组分比例混合，加纯化水定容至1L，室温下搅拌至溶解完全，用0.2μm滤膜进行过滤，其中染色液为聚次甲基染料0.05％、乙二醇99.9％，所述为质量百分浓度。在希森美康XN-1000上进行测试，空白值满足要求。
实施例2：
本发明提供的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数的溶血剂，其配方组成如下：
将上述组分比例混合，加纯化水定容至1L，室温下搅拌至溶解完全，用0.2μm滤膜进行过滤，其中染色液为聚次甲基染料0.05％、乙二醇99.9％，所述为质量百分浓度。在希森美康XN-1000上进行测试，空白值满足要求。
实施例3：
本发明提供的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数的溶血剂，其配方组成如下：
将上述组分比例混合，加纯化水定容至1L，室温下搅拌至溶解完全，用0.2μm滤膜进行过滤，其中染色液为聚次甲基染料0.05％、乙二醇99.9％，所述为质量百分浓度。在希森美康XN-1000上进行测试，空白值满足要求。
实施例4：
本发明提供的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数的溶血剂，其配方组成如下：
将上述组分比例混合，加纯化水定容至1L，室温下搅拌至溶解完全，用0.2μm滤膜进行过滤，其中染色液为聚次甲基染料0.05％、乙二醇99.9％，所述为质量百分浓度。在希森美康XN-1000上进行测试，空白值满足要求。
实施例5：
本发明提供的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数的溶血剂，其配方组成如下：
将上述组分比例混合，加纯化水定容至1L，室温下搅拌至溶解完全，用0.2μm滤膜进行过滤，其中染色液为聚次甲基染料0.05％、乙二醇99.9％，所述为质量百分浓度。在希森美康XN-1000上进行测试，空白值满足要求。
取20份临床全血样本，分别采用实施例1-5的试剂，使用希森美康XN-1000全自动五分类血细胞分析仪检测白细胞总数和嗜碱性粒细胞数量，再使用原装进口溶血剂和染色液进行对比，结果如表1所示。
表1
由上表可知，采用本发明的试剂套装通过光学法检测嗜碱性粒细胞和白细胞总数在五分类血液分析仪SYSMEX XN-1000上对比数据比较接近，具有高度的准确性，并且本发明的试剂套装与原装进口试剂测试的结果线性关系好，白细胞相关系数达到0.99以上，嗜碱性粒细胞相关系数达到0.84以上，由于嗜碱性粒细胞在正常人血液中含量在0-1％之间，达到0.84以上相关性属于较好的线性关系。
以上所述实施例仅是为充分说明本发明而所举的较佳的实施例，本发明的保护范围不限于此。本技术领域的技术人员在本发明基础上所作的等同替代或变换，均在本发明的保护范围之内。本发明的保护范围以权利要求书为准。
Claims (1)
1.一种五分类血细胞分析仪用嗜碱性粒细胞计数套装，其特征在于，包括溶血剂和染色液；所述的溶血剂包括阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂以及将溶血剂pH值控制在2.0-5.0的缓冲溶液；所述的阳离子表面活性剂的浓度为0.1-20g/L，所述的非离子表面活性剂的浓度为0.5-30g/L；所述的染色液为含有聚次甲基染料和乙二醇的溶液；
所述的聚次甲基染料的质量百分浓度为0.05%，所述的乙二醇的质量百分浓度为99.9%；
所述的阳离子表面活性剂为十二烷基三甲基氯化铵、十二烷基三甲基溴化铵、十四烷基三甲基氯化铵、十四烷基三甲基溴化铵、十六烷基三甲基氯化铵、十六烷基三甲基溴化铵、十八烷基三甲基氯化铵、十八烷基三甲基溴化铵中的一种或多种；
所述的非离子表面活性剂为聚氧乙烯月桂醚、聚氧乙烯油基醚、聚氧乙烯单硬脂酸酯、聚氧乙烯烷基芳基醚中的一种或多种；
所述的缓冲溶液为柠檬酸/柠檬酸钠缓冲体系、柠檬酸/柠檬酸钾缓冲体系、丁二酸、邻苯二甲酸/盐酸缓冲体系、磷酸氢二钠/盐酸缓冲体系、甘氨酸/盐酸缓冲体系、柠檬酸/氢氧化钠/盐酸缓冲体系中的一种；
所述的溶血剂中还包括稳定剂；所述的稳定剂为乙二胺四乙酸或其钠盐或钾盐，浓度为0.1-10g/L；
所述的溶血剂中还包含防腐剂；所述的防腐剂为异噻唑啉酮类防腐剂，浓度为0.1-5ml/L。
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2019
- 2019-08-12 CN CN201910740356.1A patent/CN110470587B/zh active Active
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