CN110437288A - 一种新型海参岩藻多糖及其制备方法和应用 - Google Patents
一种新型海参岩藻多糖及其制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种新型海参岩藻多糖及其制备方法和应用。所述新型海参岩藻多糖重均分子量为150~200kDa，硫酸根的质量比为30~45%，具有由α‑1→3连接的岩藻糖组成的四糖重复单元，所述重复单元为：[→3‑α‑l‑Fucp‑1→3‑α‑l‑Fucp2(OSO3 −)‑1→3‑α‑l‑Fucp2(OSO3 −)‑1→3‑α‑l‑Fucp2,4(OSO3 −)‑1→]。所述海参岩藻多糖为首次从爱琴海海参Holothuria polii中分离得到的一种结构新颖的岩藻多糖。同时，本发明中的海参岩藻多糖可以恢复由环磷酰胺诱导的白细胞和中性粒细胞的减少，表明本发明中的岩藻多糖具有刺激造血的作用。此外，该海参岩藻多糖还具有良好的内源性抗凝血活性。
Description
技术领域
本发明属于天然高分子领域，具体涉及一种新型海参岩藻多糖及其制备方法和应用。
背景技术
几个世纪以来，海参一直被用作中国和其他亚洲国家的传统滋补食品。海参的主要食用和药用部分是体壁，其含有许多生物活性成分，例如多糖，海参皂苷，脑苷脂和神经节苷脂等。酸性多糖是海参中最重要的成分，主要分为两类：岩藻糖基硫酸软骨素（FCS）和岩藻多糖（Fucoidan）。据报道，从海参中获得的多糖具有抗癌，抗凝血，抗血栓，抗病毒和神经保护等作用，多糖结构解析对于构效关系阐明和相关药物开发至关重要。
Fucoidan属于一类富含岩藻糖和硫酸酯基的酸性多糖，通常存在于海藻和无脊椎动物中。自1913年，Kylin首次从褐藻中提取得到至今，在过去的一百多年中，海藻来源Fucoidan已得到广泛研究，其具有高度复杂的结构和化学组成。根据岩藻糖的不同连接方式可将其分为Type I型和Type II型。像来源于海带（Laminaria japonica）和厚叶切氏海带（Kjellmaniella crassifolia）等的Fucoidan，主链为α-1, 3连接方式的属于Type I型，而从墨角藻（Fucus vesiculosus）和泡叶藻（Ascophyllum nodosum）等分离的Fucoidan，其主链为α-1, 3/α-1, 4交替连接方式的为Type II型。从海胆和海参等海洋无脊椎动物中提取的岩藻多糖结构较为简单，多为重复单元组成的线性多糖。近年来，关于海参岩藻多糖结构的研究日益增多。像来自海地瓜（Acaudina molpadioides）和糙刺参（Stichhopus horrens）的岩藻多糖是α-1→3连接的线性多糖，但具有不同的重复单元。海地瓜岩藻多糖由四糖重复单元组成，而糙刺参岩藻多糖由单糖重复单元组成。来自仿刺参（Apostichopus japonicas）的岩藻多糖是以五糖重复单元为主要结构的支链多糖。来自象牙参（Holothuria fuscopunctata）的岩藻多糖由α-1→4连接的单糖重复单元组成。这些海参岩藻多糖的主要结构见图1。
许多研究表明岩藻多糖具有广泛的生物学和药理学活性，中国专利CN105399848A涉及岩藻多糖在制备抗肿瘤药物中的应用，通过与血管生成关键细胞因子BMP4结合，抑制其信号通路来发挥抗肿瘤活性。中国专利CN 108904524A涉及的是一种低分子量岩藻多糖在治疗肠炎中的应用。中国专利CN 104586878A报道了褐藻来源岩藻多糖在制备抗代谢综合症的药物和保健品中的应用，能有效改善胰岛素抵抗。中国专利CN 104523744A提供了褐藻岩藻多糖在制备降血脂和减肥药物中的应用。中国专利CN 103880975A涉及一种来源于笼目海带岩藻多糖在制备抗甲型流感病毒药物中的应用，对甲型H1N1感染的狗肾上皮细胞具有明显保护作用。中国专利CN 103288978A提供了一种褐藻岩藻多糖在制备抗糖尿病的α-糖苷酶抑制剂中的应用。中国专利CN 101040867公开了一种棘皮动物或褐藻来源岩藻多糖在制备防治神经退行性疾病和认知损伤药物中的应用。中国专利CN109432121A涉及墨角藻来源岩藻多糖在抑制LOX-1信号途径中的应用。中国专利CN108467436A涉及一种裙带菜来源的岩藻多糖用于免疫调节药物或保健品用途的开发。中国专利CN 108478594A涉及岩藻多糖的一种医药新用途，用于预防与治疗有机磷农药所致的胚胎毒性作用。中国专利CN 106727668A公开了一种海带来源岩藻多糖在制备抗肿瘤及抗氧化剂中的应用。中国专利CN 107334780A公开了一种岩藻多糖在制备增强正畸支抗的药物中的应用。但以上专利均明显区别于本发明岩藻多糖的结构及其在刺激骨髓造血和抗凝方面的应用。
发明内容
本发明目的是提供一种新型海参岩藻多糖及其制备方法和应用。本发明从爱琴海海参中提取一种岩藻多糖，并进行化学结构解析和生物活性评价。
为实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案予以实现：
本发明提供了一种新型海参岩藻多糖，它的化学结构式如式（Ⅰ）所示：
（Ⅰ）
所述新型海参岩藻多糖重均分子量为100~200kDa，硫酸根的质量比为35~45%，具有由α-1→3连接的岩藻糖组成的四糖重复单元，所述四糖重复单元为：
[→3-α-l-Fucp-1→3-α-l-Fucp2(OSO3 −)-1→3-α-l-Fucp2(OSO3 −)-1→3-α-l-Fucp2,4(OSO3 −)-1→]。
进一步的：所述海参岩藻多糖来源于爱琴海海参Holothuria polii。
进一步的：所述海参岩藻多糖中岩藻糖的质量比为90~100%。
本发明还提供了所述的新型海参岩藻多糖的制备方法，所述方法包括如下步骤：
（1）将干海参粉末于体积比为4~5：1的氯仿/甲醇混合溶液中浸泡脱脂，离心后去除上清液后复溶于水；
（2）然后在蛋白酶55~75℃下反应20~30h，离心去除沉淀，再用1~3倍体积的氯化十六烷基吡啶水溶液沉淀多糖；
（3）再次离心后去除上清液，将沉淀后的多糖再复溶于10~20倍体积的氯化钠水溶液和乙醇的混合溶液中，用2~4倍体积的乙醇沉淀；
（4）离心烘干得到固体粉末，溶于水后超滤脱盐，浓缩冻干得到多糖粗品；
（5）将步骤（4）所得多糖粗品分级分离，以NaCl水溶液为流动相进行洗脱，经阴离子交换柱分离纯化，透析除盐、冻干；
（6）将所得冻干组分以盐溶液为流动相，使用凝胶过滤色谱柱进一步纯化，苯酚/硫酸法检测，透析后减压浓缩、冻干，即得所述岩藻多糖。
进一步的：所述步骤（1）中的料液比为1:1-3。
进一步的：所述步骤（2）中蛋白酶为木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、组织蛋白酶、羧肽酶中的一种或多种。
进一步的：所述步骤（3）中氯化钠水溶液的浓度为3mol/L~5mol/L。
进一步的：所述步骤（4）中超滤采用截留分子量为300Da~10000Da的中空纤维膜。
进一步的：所述步骤（6）中盐溶液为醋酸铵或碳酸氢铵；所述凝胶过滤的分离介质为葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、丙烯葡聚糖凝胶或交联琼脂糖凝胶。
本发明还提供了所述的岩藻多糖在制备造血刺激剂与抗凝剂的药物中的应用。
进一步的：所述岩藻多糖能够加速环磷酰胺诱导的白细胞和中性粒细胞的恢复，活性优于阳性药重组人粒细胞集落刺激因子。
进一步的：所述海参岩藻多糖通过内源性凝血途径发挥作用，在100-300μg/mL浓度下抗凝血效果优于依诺肝素钠。
与现有技术相比，本发明的优点和积极效果是：
（1）本发明通过酸降解结合串联质谱分析和核磁共振波谱分析相结合的方法，阐明了本发明中海参岩藻多糖的精细结构。该结构是由一个新的四糖重复单元[→3-α-l-Fucp-1→3-α-l-Fucp2(OSO3 −)-1→3-α-l-Fucp2(OSO3 −)-1→3-α-l-Fucp2,4(OSO3 −)-1→]组成。
（2）本发明所述的海参岩藻多糖在由环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠模型中表现出了刺激造血作用。通过腹膜注射该多糖可加速白细胞和中性粒细胞的恢复，其活性优于阳性药重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）。此外该岩藻多糖还具有内源性抗凝血活性，在100-300µg/mL浓度下，其抗凝活性要优于依诺肝素钠。
附图说明
图1是现有已报道的海参岩藻多糖的结构；
图2是本发明所述的海参岩藻多糖的高效液相色谱图；
图3是本发明所述的海参岩藻多糖的NMR图谱；
图4是本发明所述的海参岩藻寡糖的傅立叶变换质谱图谱；
图5是本发明所述的海参岩藻多糖对免疫抑制小鼠刺激造血活性图；
图6是本发明所述的海参岩藻多糖抗凝血活性图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明的技术方案进一步的详细说明。
实施例1、新型海参岩藻多糖的制备
1、本发明所述的海参岩藻多糖的制备方法
（1）将购买的爱琴海干海参（市售）置于60℃烘箱中干燥10 h，粉碎至60-80目颗粒，取适量海参粉末在氯仿/甲醇（4：1，v/v）的混合溶液中浸泡脱脂24 h，料液比为1：1。离心弃去上清液，残余物干燥后，溶解于25倍体积的水中。
（2）然后与质量比为0.4%的木瓜蛋白酶（含有5mM EDTA和5mM半胱氨酸，pH6.0）在60℃下反应24 h，离心除去沉淀，随后用1.6倍体积氯化十六烷基吡啶水溶液沉淀上清液中的多糖，在室温下静置24 h。
（3）将混合物离心，弃去上清液，收集沉淀的多糖并重新溶解在15倍体积的混合液中，所述混合液由3mol/L的NaCl水溶液和乙醇混合而成（NaCl水溶液：乙醇=100：15，v/v）中，然后用2倍体积95%乙醇进一步沉淀，于4℃下静置24 h。离心弃去上清液，残余物分别用80%和95%乙醇洗2-3遍，至基本无咸味。
（4）离心得沉淀，于60℃下烘干2 h，得固体粉末。将固体粉末溶于水中并用截留分子量（Da）为7000Da的中空纤维膜超滤并脱盐。最后，浓缩多糖溶液并冷冻干燥得海参多糖粗品。
（5）阴离子交换柱纯化：使用ÄKTAprimeplus系统将获得的多糖粗品在Q-Sepharose Fast Flow强阴离子交换柱分级分离，洗脱条件是：以0-2.0M NaCl溶液为洗脱液，用10倍柱体积洗脱液进行线性洗脱，收集得到两个级分，通过单糖组成测定确认含有岩藻多糖的级分，透析除盐、冷冻干燥，得岩藻多糖粗品。
（6）凝胶色谱柱纯化：将粗品在凝胶过滤色谱柱上进一步纯化，所述凝胶色谱柱填料为Sephacryl S-300或Sephacryl S-400。洗脱条件是：以0.3M NH4HCO3溶液为洗脱液，0.2mL/min流速洗脱2倍柱体积，采用苯酚/硫酸法检测含糖组分，收集并减压浓缩除盐、冷冻干燥，得岩藻多糖纯品。
实施例2、新型海参岩藻多糖理化性质和结构表征
1、理化性质测定
经高效液相（HPLC）分析表明，海参岩藻多糖的纯度为100%，如图2所示。经高效凝胶柱层析（HPGPC）分析表明海参岩藻多糖的分子量为103.1 ± 2.8 kDa。
单糖组成分析结果表明，海参岩藻多糖主要由岩藻糖组成，占比95.7%，其余还含有少量的氨基葡萄糖、氨基半乳糖和半乳糖。硫酸苯酚法测得总糖含量为55.02%；离子色谱法测得硫酸根含量为39.5 ± 1.4%；与咔唑一硫酸反应呈阴性，表明结构中不含糖醛酸；与考马斯亮蓝G-250反应呈阴性，表明多糖组成中不含蛋白质。
2、精细结构分析
（1）、核磁共振（NMR）分析
取本发明中的海参岩藻多糖30 mg，与D2O（99.96%）共减压蒸馏3次以替换多糖中的活泼质子，然后最终溶解在500μL的D2O中。在Bruker BioSpin GmbH 600-MHz装置上在333K下测定其1H NMR谱、DEPTQ NMR谱、1H-1H COSY谱，1H-1H TOCSY谱，1H-1H NOESY谱，1H-13C HSQC谱和1H-13C HMBC谱。以3-三甲基甲硅烷基丙烷磺酸（DSS）为内标，显示化学位移为0.00ppm。如图3A所示，在1H NMR谱中1.2-1.3 ppm左右的强信号是L-岩藻糖残基中甲基质子的特征信号。此外，在1H NMR谱中δ ＞ 5.00 ppm的低场区可以明确地观察到四个异头质子信号，其化学位移分别为δ 5.41 ppm、δ 5.36 ppm、δ 5.34 ppm和δ 5.07 ppm，提示该多糖含有四种α 糖苷键，且四个信号比例大致相同，说明四种糖苷键分布均衡。如图3B所示，在DEPTQ NMR谱中δ 95.00-105.00 ppm的低场区观察到四个异头碳的信号峰，其化学位移分别为δ 101.06 ppm、δ 99.09 ppm、δ 96.75 ppm和δ 96.66 ppm，与1H NMR谱中四个异头氢信号峰相对应。四个异头氢/碳化学位移存在较大差异，说明结构中存在不同的硫酸盐基团取代，由于残基A的H-2和H-4信号明显向低场转移，推断残基A为2,4-O-硫酸化岩藻糖残基。同样的，残基B和C的H-2信号明显向低场转移，推断残基B和C为2-O-硫酸化的岩藻糖残基，而残基D是未硫酸化的岩藻糖残基。
如图3C所示，在1H-1H COSY谱中观察到从四个异头质子开始的四个自旋系统。四个自旋信号可归因于四种α-构型岩藻糖残基A，B，C和D的异头共振。它们的强度积分大致相等，这表明在岩藻多糖中存在四糖重复单元。如图3D所示，在1H-1H NOESY谱，可以观察到残基DH-1与残基CH-3的相关信号，残基CH-1与残基BH-3的相关信号，残基BH-1与残基AH-3的相关信号以及残基AH-1与残基DH-3的相关信号，这表明四个岩藻糖残基之间均以1→3糖苷键相连，且四个残基的连接顺序为→3D1→3C1→3B1→3A1→。另外结合1H-1H TOCSY谱、1H-13C HSQC谱和1H-13C HMBC谱推导出所有碳氢信号化学位移。
（2）、岩藻寡糖的HILIC-FTMS分析
将本发明中的海参岩藻多糖1 mg与100 μL 0.05M H2SO4在80℃水解0.5小时，用饱和Ba(OH)2中和水解产物，并将其加载至Carbograph SPE柱上，先用3倍柱体积蒸馏水洗脱除盐，再用3倍柱体积50%乙腈（含有0.1%TFA）洗脱降解产物并冻干。最后，将冻干粉末重新溶解用于HILIC-FTMS分析。
使用Decon Tools对原始数据进行解卷积，然后由GlycResoft处理Decon Tools的输出数据以生成匹配结构并根据离子丰度归一化提供相对定量信息。如 图4所示，在岩藻寡糖的总离子流色谱图和相对定量结果图中，共匹配得到从2 个聚合度到10个聚合度的37种寡糖组分，主要以偶数寡糖为主，尤其是四聚糖 (带有三个或四个硫酸盐基团)。这些结果表明该岩藻多糖中存在四糖重复单元。 与核磁共振分析得到的结果一致。
综上，本发明中的海参岩藻多糖由残基序列为→D→C→B→A→的四糖重复单元以α-1→3连接而成，因此其化学结构式可阐明为：[→3-α-l-Fucp2,4(OSO3 −)-1→3-α-l-Fucp2(OSO3 −)-1→3-α-l-Fucp2(OSO3 −)-1→3-α-l-Fucp-1→]n。它是从海参中发现的一种具有新型四糖重复单元的岩藻多糖。
实施例3、新型海参岩藻多糖在刺激骨髓造血及抗凝中的应用
材料与试剂：所述海参岩藻多糖（经HPLC检测为均一多糖）；环磷酰胺（江苏恒瑞医药股份有限公司）；重组人粒细胞集落刺激因子（齐鲁药业有限公司）；APTT、TT、PT试剂盒（南京建城生物工程研究所）；绵羊血浆（山东兰陵向明生化助剂厂）；依诺肝素钠（赛诺菲安万特）。
仪器：BC-2800vet型兽用全自动血液细胞分析仪（迈瑞医疗国际有限公司）；SL-318型凝血分析仪（济南森蓝科贸有限公司）
1、海参岩藻多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠造血功能的影响，具体步骤如下：
将30只重20-25 g的无病原体Balb/c小鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组和高低剂量组5组，每组6只。为了诱导骨髓抑制，除空白对照组外其余四组每天腹腔注射80mg/kg剂量的环磷酰胺一次，连续注射3天。造模成功后，阳性对照组每天腹腔注射100 μg/kg剂量的重组人粒细胞集落刺激因子一次，连续注射7天。高低剂量组分别每天腹腔注射8mg/kg和2 mg/kg剂量的海参岩藻多糖一次，连续注射7天。空白对照组和模型组仅给予生理盐水。因小鼠本身具有自我恢复的能力，所以造模后的第三天除空白对照组外其余四组补加80 mg/kg剂量的环磷酰胺一次。1天后通过眼球取血将每只小鼠的血液收集至一次性负压采血管中，并在自动血细胞分析仪上对血液学参数进行分析，确定白细胞，中性粒细胞，红细胞，血红蛋白和血小板的浓度。
结果如图5所示，注射环磷酰胺后会导致白细胞、中性粒细胞、红细胞和血红蛋白浓度降低（p<0.003），同时导致血小板水平增加（p<0.045）。当注射岩藻多糖之后，白细胞和中性粒细胞显著增加（p<0.014），并且其作用比重组人粒细胞集落刺激因子更显著，这表明该岩藻多糖能用于恢复环磷酰胺诱导的白细胞和中性粒细胞减少症。使用所述岩藻多糖治疗后会使血小板水平趋于正常化。因此，这些结果表明本发明中的海参岩藻多糖在环磷酰胺诱导的免疫抑制下具有刺激造血的作用，其有望在未来开发为一种有潜力的造血刺激剂。
2、海参岩藻多糖抗凝血活性研究，具体步骤如下：
（1）、活化部分凝血活酶时间（APTT）测定
取不同浓度的海参岩藻多糖样品和依诺肝素钠（LMWH）10 μL加至血凝仪样品杯中，加入一粒去磁钢珠、90 μL血浆和100 μL恢复至室温的APTT试剂，于凝血槽37℃下孵育3 min，然后加入100 μL已预热至37℃的CaCl2溶液，设置4组平行试验，记录凝血仪显示时间。使用蒸馏水作为阴性对照，依诺肝素钠作为阳性对照。
（2）、凝血酶时间（TT）测定
取不同浓度的海参岩藻多糖样品和依诺肝素钠（LMWH）10 μL加至血凝仪样品杯中，加入一粒去磁钢珠、90 μL血浆于凝血槽37℃下孵育3 min，然后加入100μL已预热至37℃的TT试剂，设置4组平行试验，记录凝血仪显示时间。使用蒸馏水作为阴性对照，依诺肝素钠作为阳性对照。
（3）、凝血酶原时间（PT）测定
取不同浓度的海参岩藻多糖样品和依诺肝素钠（LMWH）10 μL加至血凝仪样品杯中，加入一粒去磁钢珠、90 μL血浆于凝血槽37℃下孵育3 min，然后加入200 μL已预热至37℃的PT试剂，设置4组平行试验，记录凝血仪显示时间。使用蒸馏水作为阴性对照，依诺肝素钠作为阳性对照。
结果如图6所示，APTT显著延长，本发明中的海参岩藻多糖表现出与依诺肝素钠相似的内在抗凝活性，对TT和PT几乎没有影响。此外，该岩藻多糖的APTT活性呈剂量依赖性抑制，并且当样品浓度介于100μg/mL-300 μg/mL时，其活性要优于依诺肝素钠，因此本发明中的海参岩藻多糖可用作低剂量抗凝剂。
本发明中的海参岩藻多糖是一种多功能化合物，既可以在环磷酰胺诱导的免疫抑制下刺激造血，又表现出了良好的内源性抗凝血活性，所以，本发明中的海参岩藻多糖可以成为一种多用途药物。
以上实施例仅说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。
Claims (10)
1.一种新型海参岩藻多糖，其特征在于：它的化学结构式如式（Ⅰ）所示：
（Ⅰ）
所述新型海参岩藻多糖重均分子量为100~200kDa，硫酸根的质量比为35~45%，具有由α-1→3连接的岩藻糖组成的四糖重复单元，所述四糖重复单元为：
[→3-α-l-Fucp-1→3-α-l-Fucp2(OSO3 −)-1→3-α-l-Fucp2(OSO3 −)-1→3-α-l-Fucp2,4(OSO3 −)-1→]。
2.根据权利要求1所述的新型海参岩藻多糖，其特征在于：所述海参岩藻多糖来源于爱琴海海参Holothuria polii。
3.根据权利要求1所述的新型海参岩藻多糖，其特征在于：所述海参岩藻多糖中岩藻糖的质量比为90~100%。
4.权利要求1所述的新型海参岩藻多糖的制备方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：
（1）将干海参粉末于体积比为4~5：1的氯仿/甲醇混合溶液中浸泡脱脂，离心后去除上清液后复溶于水；
（2）然后在蛋白酶55~75℃下反应20~30h，离心去除沉淀，再用1~3倍体积的氯化十六烷基吡啶水溶液沉淀多糖；
（3）再次离心后去除上清液，将沉淀后的多糖再复溶于10~20倍体积的氯化钠水溶液和乙醇的混合溶液中，用2~4倍体积的乙醇沉淀；
（4）离心烘干得到固体粉末，溶于水后超滤脱盐，浓缩冻干得到多糖粗品；
（5）将步骤（4）所得多糖粗品分级分离，以NaCl水溶液为流动相进行洗脱，经阴离子交换柱分离纯化，透析除盐、冻干；
（6）将所得冻干组分以盐溶液为流动相，使用凝胶过滤色谱柱进一步纯化，苯酚/硫酸法检测，透析后减压浓缩、冻干，即得所述岩藻多糖。
5.根据权利要求4所述的新型海参岩藻多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中蛋白酶为木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、组织蛋白酶、羧肽酶中的一种或多种。
6.根据权利要求4所述的新型海参岩藻多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中氯化钠水溶液的浓度为3mol/L~5mol/L。
7.根据权利要求4所述的新型海参岩藻多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤（6）中盐溶液为醋酸铵或碳酸氢铵；所述凝胶过滤的分离介质为葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、丙烯葡聚糖凝胶或交联琼脂糖凝胶。
8.权利要求1~3任一所述的岩藻多糖在制备造血刺激剂与抗凝剂的药物中的应用。
9.根据权利要求8所述的岩藻多糖在制备造血刺激剂与抗凝辅助的药物中的应用，其特征在于：所述岩藻多糖能够加速环磷酰胺诱导的白细胞和中性粒细胞的恢复。
10.根据权利要求8所述的岩藻多糖在制备造血刺激剂与抗凝辅助的药物中的应用，其特征在于：所述海参岩藻多糖通过内源性凝血途径发挥作用，在100-300μg/mL浓度下抗凝血效果优于依诺肝素钠。
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