CN110286110A - 一种肝癌早期诊断试剂盒 - Google Patents
一种肝癌早期诊断试剂盒 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110286110A CN110286110A CN201910687685.4A CN201910687685A CN110286110A CN 110286110 A CN110286110 A CN 110286110A CN 201910687685 A CN201910687685 A CN 201910687685A CN 110286110 A CN110286110 A CN 110286110A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- timer
- aluminium foil
- accommodation space
- cavity
- upper cartridge
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 title claims abstract description 29
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 114
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 63
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 63
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 claims abstract description 54
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims abstract description 48
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 48
- 239000006210 lotion Substances 0.000 claims abstract description 44
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 30
- 241000283707 Capra Species 0.000 claims abstract description 27
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 claims abstract description 27
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 claims abstract description 27
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 claims abstract description 27
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 claims abstract description 27
- 239000011616 biotin Substances 0.000 claims abstract description 27
- 238000002372 labelling Methods 0.000 claims abstract description 26
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims abstract description 26
- 230000037081 physical activity Effects 0.000 claims abstract description 4
- 239000005030 aluminium foil Substances 0.000 claims description 90
- 230000004308 accommodation Effects 0.000 claims description 76
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 claims description 49
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 42
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 claims description 19
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 claims description 19
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 240000007643 Phytolacca americana Species 0.000 claims description 16
- 235000009074 Phytolacca americana Nutrition 0.000 claims description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 16
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 claims description 12
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 12
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 9
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000004411 aluminium Substances 0.000 claims description 8
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 claims description 7
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- CGIHPACLZJDCBQ-UHFFFAOYSA-N acibenzolar Chemical compound SC(=O)C1=CC=CC2=C1SN=N2 CGIHPACLZJDCBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 6
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims description 6
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 claims description 6
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 claims description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 claims description 3
- 244000309466 calf Species 0.000 claims description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 3
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 claims description 3
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 3
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 claims description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 claims description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 claims description 2
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 claims 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 abstract description 5
- 239000012466 permeate Substances 0.000 abstract description 3
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 abstract description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000700 radioactive tracer Substances 0.000 abstract description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 57
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 3
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- -1 1- ethyl-(3- dimethylaminopropyl) Chemical group 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 229920000049 Carbon (fiber) Polymers 0.000 description 1
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 206010073069 Hepatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 239000004917 carbon fiber Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000011810 insulating material Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- LGZXYFMMLRYXLK-UHFFFAOYSA-N mercury(2+);sulfide Chemical compound [S-2].[Hg+2] LGZXYFMMLRYXLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/645—Specially adapted constructive features of fluorimeters
- G01N21/6456—Spatial resolved fluorescence measurements; Imaging
- G01N21/6458—Fluorescence microscopy
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/5302—Apparatus specially adapted for immunological test procedures
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/531—Production of immunochemical test materials
- G01N33/532—Production of labelled immunochemicals
- G01N33/533—Production of labelled immunochemicals with fluorescent label
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
- G01N33/57438—Specifically defined cancers of liver, pancreas or kidney
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
- G01N33/582—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with fluorescent label
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明属于生物医药领域，具体涉及一种肝癌早期诊断试剂盒，包括有包括有上盒体结构、下盒体结构及工作模块；上盒体结构包括有上盒体、若干试剂管孔、若干孔板、伸缩柱、盖板、若干管体、洗涤液管；若干管体活动收容于若干试剂管孔内；其中为小牛血清白蛋白管；其中为固定液管；其中一管体渗透液管；其中一管体为封闭液管；其中一管体为生物素标记山羊抗兔IgG复合物管，其中一管体装为FA‑QDs复合物管；其中一管为Hank's液管。本肝癌早期诊断试剂盒能够作为一种多模式的靶向荧光探针应用到肝癌细胞的标记、成像，通过对肝癌细胞的标记、示踪，有望实现对肝癌发生、发展的准确诊断。
Description
【技术领域】
本发明属于生物医药领域，具体涉及一种肝癌早期诊断试剂盒。
【背景技术】
肝癌可以大致分为2类，一类是原发性肝癌，还是一种是转移性肝癌。原生性肝癌是的是，本身生长在肝脏表面的癌症；而转移性的肝癌，则因为其他组织和器官的癌细胞，慢慢转移到肝脏处，从而慢慢生长成肝癌。一般来说，原发性的肝癌恶化到晚期的进程，要比转移性肝癌时间久很多，大概要经过15年左右的时间，才会慢慢恶化成肝癌。
对于肝癌晚期的患者来说，当被发现晚期时，那就意味着体内的癌细胞已经大量扩散了，时间越久，恶化程度就越高，有的人甚至只有短短几个月的时间可以活。所以，确诊时间起着决定性的因素。但是目前没有一种能快速且简便的肝癌早期诊断试剂盒，使得肝癌的确诊时间延后，导致患者得不到及时治疗。
【发明内容】
鉴于以上问题，本发明提供了一种肝癌早期诊断试剂盒。
本发明所要解决的技术问题采用以下技术方案实现：
一种肝癌早期诊断试剂盒,包括有上盒体结构、下盒体结构及工作模块；
上盒体结构包括有上盒体、若干试剂管孔、若干孔板、伸缩柱、盖板、若干管体、洗涤液管；
若干管体及洗涤液管均为伸缩管；
若干管体活动收容于若干试剂管孔内；
若干管体为两端密封的结构，两端均为铝箔进行密封；
其中一管体装有小牛血清白蛋白为小牛血清白蛋白管；
其中一管体装有固定液为固定液管；
其中一管体装有渗透液为渗透液管；
其中一管体装有封闭液为封闭液管；
其中一管体装有生物素标记山羊抗兔IgG复合物为生物素标记山羊抗兔IgG复合物管；
其中一管体装有FA-QDs复合物为FA-QDs复合物管；
其中一管体装有Hank's液为Hank's液管；
洗涤液管包括有第一腔体、第二腔体、第三腔体、第四腔体及第五腔体，第一腔体、第二腔体、第三腔体、第四腔体及第五腔体内部均装有洗涤液，并且两端均通过铝箔进行密封；通过铝箔将第一腔体、第二腔体、第三腔体、第四腔体及第五腔体依次连接在一起；
若干试剂管孔设置在上盒体上；小牛血清白蛋白管、洗涤液管、固定液管、渗透液管、封闭液管、生物素标记山羊抗兔IgG复合物管、FA-QDs复合物管、Hank's液管分别活动收容于试剂管孔内；
每一若干试剂管孔对应设置有一孔板，若干孔板旋转设置在上盒体上，孔板用于密封试剂管孔；
伸缩柱一端与上盒体固定连接，另一端与盖板固定连接；盖板上设置有与若干试剂管孔对应的若干凸起部；凸起部上设置有贯穿凸起部及盖板的下料孔；
凸起部呈空心锥形结构；
下盒体结构可拆卸的固定在上盒体结构上；
下盒体结构包括有下盒体、过滤膜、排水槽、排水板、振动器；下盒体设置有容纳空间，过滤膜设置在容纳空间内，并将容纳空间分隔成两部分；排水槽设置在下盒体底部，用于将容纳空间中的液体排出；排水板活动收容在排水槽，用于控制排水槽的排水；下盒体上设置有插片，盖板上设置有与插片对应的插槽，下盒体通过插片插入插槽内与上盒体可拆卸的固定。
工作模块安装于上盒体上，工作模块包括有显示屏、计时器、蜂鸣器、电源；
电源均与显示屏、计时器、蜂鸣器、及振动器连接；
计时器分别与蜂鸣器及显示屏连接；
计时器分别通过电线与若干管体及洗涤液管上的铝箔连接并形成通路；
计时器型号为OHR-B200计时器。
针对上述的肝癌早期诊断试剂盒的用途，用于检测肝癌细胞，具体步骤如下：
1)先将小牛血清白蛋白管、固定液管、渗透液管、封闭液管、生物素标记山羊抗兔IgG 复合物管、FA-QDs复合物管、Hank's液管及洗涤液管分别装入试剂管孔，再旋转对应的孔板，将试剂管孔盖住，小牛血清白蛋白管、固定液管、渗透液管、封闭液管、生物素标记山羊抗兔IgG复合物管、FA-QDs复合物管、Hank's液管及洗涤液管相对凸起部的一端露出上盒体外；
2)将生物样本放入下盒体中的过滤膜上，将排水板对排水槽进行密封；然后将下盒体的插片插入插槽内，将上盒体与下盒体进行固定；
3)将上盒体朝盖板的方向下压；上盒体沿着伸缩柱向盖板的方向移动；小牛血清白蛋白管的铝箔最先被凸起部戳破；小牛血清白蛋白从凸起部的下料孔进入容纳空间内对生物样本细胞进行培养，同时由于小牛血清白蛋白管的铝箔被戳破，计时器与小牛血清白蛋白管的铝箔形成的通路变为断路，计时器开始计时并且在显示屏上显示时间；经过24小时的培养后，计时器启动蜂鸣器进行蜂鸣；将排水板抽出，将容纳空间中的液体从排水槽排出，得到生物样本细胞；
4)将容纳空间中的液体从排水槽排干净后，将排水槽进行密封，继续将上盒体朝盖板的方向下压；使洗涤液管的第一腔体的铝箔被凸起部戳破；洗涤液进入容纳空间内对生物样本细胞进行洗涤，同时计时器与第一腔体的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时，并且启动振动器进行振动下盒体，增强洗涤效果；洗涤5分钟后，计时器启动蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的洗涤液从排水槽排出；
5)将容纳空间中的洗涤液从排水槽排干净后，将排水槽进行密封，继续将上盒体朝盖板的方向下压；固定液管的铝箔被凸起部戳破；固定液进入容纳空间内对生物样本细胞进行固定，同时计时器与固定液管的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时，固定15分钟后，计时器启动蜂鸣器进行蜂鸣；需要将排水板抽出，将容纳空间中的固定液从排水槽排出；
6)继续将上盒体朝盖板的方向下压；使洗涤液管的第二腔体的铝箔被凸起部戳破；洗涤液进入容纳空间内对生物样本细胞进行洗涤，同时计时器与第二腔体的铝箔形成的通路断开，计时器开始计时，并且启动振动器进行振动下盒体，增强洗涤效果；洗涤5分钟后，计时器启动蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的洗涤液从排水槽排出；
7)继续将上盒体朝盖板的方向下压，渗透液管的铝箔被凸起部戳破；同时计时器与渗透液管的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；洗涤液进入容纳空间内对生物样本细胞进行渗透，渗透5分钟后，蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的渗透液从排水槽排出；
8)继续将上盒体朝盖板的方向下压，使洗涤液管的第三腔体的铝箔被凸起部戳破，同时计时器与的第三腔体的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；洗涤液进入容纳空间内对生物样本细胞进行洗涤，洗涤5分钟后，蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的洗涤液从排水槽排出；
9)继续将上盒体朝盖板的方向下压，使封闭液管的铝箔被凸起部戳破；同时计时器32 与封闭液管的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；封闭液进入容纳空间内对生物样本细胞进行封闭，5分钟后，蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的封闭液从排水槽排出；再将上盒体朝盖板的方向下压，使洗涤液管的第四腔体的铝箔被凸起部戳破；同时计时器与第四腔体的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；洗涤液进入容纳空间内对生物样本细胞进行洗涤，洗涤5分钟后，蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的洗涤液从排水槽排出；
10)继续将上盒体朝盖板的方向下压，使生物素标记山羊抗兔IgG复合物管的铝箔被凸起部戳破；同时计时器与生物素标记山羊抗兔IgG复合物管的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；生物素标记山羊抗兔IgG复合物进入容纳空间与生物样本细胞在常温下共孵育1小时后，蜂鸣器进行蜂鸣；再将上盒体朝盖板的方向下压，使洗涤液管的第五腔体的铝箔被凸起部戳破；同时计时器与第五腔体的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；洗涤液进入容纳空间内对生物样本细胞进行洗涤，洗涤5分钟后，蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的洗涤液从排水槽排出；
11)继续将上盒体朝盖板的方向下压，使FA-QDs复合物管的铝箔被凸起部戳破；同时计时器与FA-QDs复合物管的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；FA-QDs复合物进入容纳空间与生物样本细胞在常温下共孵育0.5小时后，蜂鸣器进行蜂鸣；继续将上盒体朝盖板的方向下压，使Hank's液管的铝箔被凸起部戳破；同时计时器32与Hank's液管的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；Hank's液进入容纳空间内对生物样本细胞进行冲洗脱去背景色10分钟后，蜂鸣器进行蜂鸣；立即将附在过滤膜的生物样本细胞在倒置荧光显微镜下观察荧光信号并通过荧光信号采集系统进行定量分析。
FA-QDs复合物制备方法如下：
1)用分析天平精密称取0.001gFA溶于10ml的PBS中，用超声仪FA充分溶解，制成FA溶液；用分析天平精密称取0.001gEDC和0.0005GNHS，将EDC和NHS分别溶于10mL甲醇溶液中，然后取上述FA溶液25μl放于20ml烧杯内，加入EDC、NHS甲醇溶液。将烧杯放置于 35℃水浴中搅拌15分钟，得到叶酸活化酯；
2)取PEG-QDs溶液放入烧杯中，将叶酸活化酯缓慢滴入PEG-QDs溶液中，于25℃水浴搅拌2小时，进行酰胺缩合反应，得到FA-QDs溶液。将反应后的溶液装入分子截留量为8000-14000的超滤器中进行透析，放于双蒸水中动态透析24小时，每半小时换一次水；透析后得到纯化的FA-QDs溶液；
3)将纯化的FA-QDs溶液进行冷冻干燥，得到淡红色的FA-QDs复合物。
EDC为(1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐)。
针对上述的肝癌早期诊断试剂盒的用途，用于检测肝癌细胞，具体步骤如下：
原理：FA-QDs复合物与生物样本细胞反应后，FA-QDs探针与肝癌细胞结合，并且FA-QDs 与肝癌细胞结合后在荧光信号下，能将肝癌细胞进行显色，更容易地检测出肝癌细胞。
洗涤液为TBS清洗液。
渗透液为pbs缓冲液。
固定液为4％戊二醛固定液。
其中生物样本包括肝组织、血液、血清或血浆。
铝箔被凸起部戳破后，计时器接收到断路信号后均开始计时。
进一步的，若干管体及洗涤液管均为塑料制成；
小牛血清白蛋白管、洗涤液管、固定液管、渗透液管、封闭液管、生物素标记山羊抗兔 IgG复合物管、FA-QDs复合物管、Hank's液管的长度依次缩短。
原理：FA-QDs复合物与生物样本细胞反应后，FA-QDs探针与肝癌细胞结合，并且FA-QDs 与肝癌细胞结合后在荧光信号下，能将肝癌细胞进行显色，通过荧光显微镜，能清楚观察到，肝癌细胞被FA-QDs复合物特异性识别，呈现橘红色荧光，相对其他检测肝癌细胞的探针更容易地检测出肝癌细胞。
由于采用了上述技术方案，本发明具有以下有益效果：肝癌早期诊断试剂盒使用了多种不同的试剂放入管体并且在使用洗涤液管在完成工作步骤之后进行洗涤，使用人员只需对肝癌早期诊断试剂盒进行按压就能完成对肝癌细胞的检测，极大方便了检测人员；并且若干管体活动收容于若干试剂管孔内及下盒体与上盒体可拆卸的固定，可以对试剂盒可以进行重复利用；将生物样本放入过滤膜进行密封培育，能及时将废液排出，保证生物样本细胞的培育；本肝癌早期诊断试剂盒能够作为一种多模式的靶向荧光探针应用到肝癌细胞的标记、成像，通过对肝癌细胞的标记、示踪，相对现有的肝癌检测诊断盒具有更高的准确性。
【附图说明】
图1是本发明一种肝癌早期诊断试剂盒的结构示意图。
图2是本发明一种肝癌早期诊断试剂盒的结构示意图。
图3是本发明一种肝癌早期诊断试剂盒的洗涤液管的结构示意图。
图4是本发明一种肝癌早期诊断试剂盒的工作模块的结构示意图。
图5是本发明一种肝癌早期诊断试剂盒的上盒体结构的结构示意图。
图6是本发明一种肝癌早期诊断试剂盒的下盒体结构的结构示意图。
图7是本发明一种肝癌早期诊断试剂盒的下盒体结构的结构示意图。
图8是本发明一种肝癌早期诊断试剂盒的结构示意图。
主要元件符号说明
【具体实施方式】
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
需要说明，本发明实施例中所有方向性指示(诸如上、下、左、右、前、后……) 仅用于解释在某一特定姿态(如附图所示)下各部件之间的相对位置关系、运动情况等，如果该特定姿态发生改变时，则该方向性指示也相应地随之改变。
另外，在本发明中涉及“第一”、“第二”等的描述仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示其相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。另外，全文中出现的“和/或”的含义为，包括三个并列的方案，以“A和/或B为例”，包括A方案，或B方案，或A和B同时满足的方案。另外，各个实施例之间的技术方案可以相互结合，但是必须是以本领域普通技术人员能够实现为基础，当技术方案的结合出现相互矛盾或无法实现时应当认为这种技术方案的结合不存在，也不在本发明要求的保护范围之内。
实施例
请参阅图1-8，一种肝癌早期诊断试剂盒,包括有上盒体结构1、下盒体结构2及工作模块3；
上盒体结构1包括有上盒体11、若干试剂管孔12、若干孔板13、伸缩柱14、盖板15、若干管体16、洗涤液管17；
若干管体16及洗涤液管17均为伸缩管；
若干管体16活动收容于若干试剂管孔12内；
若干管体16为两端密封的结构，两端均为铝箔4进行密封；
其中一管体16装有小牛血清白蛋白为小牛血清白蛋白管101；
其中一管体16装有固定液为固定液管102；
其中一管体16装有渗透液为渗透液管103；
其中一管体16装有封闭液为封闭液管104；
其中一管体16装有生物素标记山羊抗兔IgG复合物为生物素标记山羊抗兔IgG复合物管 105；
其中一管体16装有FA-QDs复合物为FA-QDs复合物管106；
其中一管体16装有Hank's液为Hank's液管107；
请参阅图3，洗涤液管17包括有第一腔体171、第二腔体172、第三腔体173、第四腔体 174及第五腔体175，第一腔体171、第二腔体172、第三腔体173、第四腔体174及第五腔体175内部均装有洗涤液，并且两端均通过铝箔4进行密封；通过铝箔4将第一腔体171、第二腔体172、第三腔体173、第四腔体174及第五腔体175依次焊接在一起；
若干试剂管孔12设置在上盒体11上；小牛血清白蛋白管101、洗涤液管17、固定液管 102、渗透液管103、封闭液管104、生物素标记山羊抗兔IgG复合物管105、FA-QDs复合物管106、Hank's液管107分别活动收容于试剂管孔12内；
每一若干试剂管孔12对应设置有一孔板13，在本实施例中，若干孔板13通过与旋转轴连接旋转设置在上盒体上11，孔板13用于密封试剂管孔12；
伸缩柱14一端与上盒体11固定连接，另一端与盖板15固定连接；盖板15上设置有与若干试剂管孔对应的若干凸起部151；凸起部151上设置有贯穿凸起部151及盖板15的下料孔152；
凸起部151呈空心锥形结构；
下盒体结构2可拆卸的固定在上盒体结构1上；
下盒体结构2包括有下盒体21、过滤膜22、排水槽23、排水板24、振动器25；下盒体21设置有容纳空间26，过滤膜22设置在容纳空间26内，并将容纳空间26分隔成两部分；排水槽23设置在下盒体21底部，用于将容纳空间26中的液体排出；排水板24活动收容在排水槽23内，用于控制排水槽23的排水；下盒体21上设置有插片27，盖板15上设置有与插片27对应的插槽153，下盒体21通过插片27插入插槽153内与上盒体11可拆卸的固定。
工作模块3安装于上盒体11上，工作模块包括有显示屏31、计时器32、蜂鸣器33、电源34；
请参阅图4，电源34均与显示屏31、计时器32、蜂鸣器33、及振动器25连接；
计时器32分别与蜂鸣器33及显示屏31连接；
计时器32分别通过电线与若干管体16及洗涤液管17上的铝箔4连接并形成通路，铝箔 4起到连接电机及计时器32的作用，铝箔4一旦被戳破，计时器32分别通过电线与若干管体16及洗涤液管17上的铝箔4形成断路，计时器32受到断路信号后开始计时，及时结束后，计时器32启动蜂鸣器33进行蜂鸣。
计时器32型号为OHR-B200计时器。
针对上述的肝癌早期诊断试剂盒的用途，用于检测肝癌细胞，具体步骤如下：
1)先将小牛血清白蛋白管101、固定液管102、渗透液管103、封闭液管104、生物素标记山羊抗兔IgG复合物管105、FA-QDs复合物管106、Hank's液管107及洗涤液管17分别装入试剂管孔12，再旋转对应的孔板13，将试剂管孔12盖住，小牛血清白蛋白管101、固定液管102、渗透液管103、封闭液管104、生物素标记山羊抗兔IgG复合物管105、FA-QDs复合物管106、Hank's液管107及洗涤液管17相对凸起部151的一端露出上盒体11外；
2)将生物样本放入下盒体21中的过滤膜22上，将排水板24对排水槽23进行密封；然后将下盒体21的插片27插入插槽153内，将上盒体11与下盒体21进行固定；
3)将上盒体11朝盖板15的方向下压；上盒体11沿着伸缩柱14向盖板15的方向移动；小牛血清白蛋白管101的铝箔最先被凸起部151戳破；小牛血清白蛋白从凸起部151的下料孔152进入容纳空间26内对生物样本细胞进行培养，同时由于小牛血清白蛋白管101的铝箔被戳破，计时器32与小牛血清白蛋白管101的铝箔形成的通路变为断路，计时器32开始计时并且在显示屏31上显示时间；经过24小时的培养后，计时器32启动蜂鸣器33进行蜂鸣；将排水板24抽出，将容纳空间26中的液体从排水槽23排出，得到生物样本细胞；
4)将容纳空间26中的液体从排水槽23排干净后，将排水槽23进行密封，继续将上盒体11朝盖板15的方向下压；使洗涤液管17的第一腔体171的铝箔被凸起部151戳破；洗涤液进入容纳空间26内对生物样本细胞进行洗涤，同时计时器32与第一腔体171的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器32开始计时，并且启动振动器25进行振动下盒体21，增强洗涤效果；洗涤5分钟后，计时器32启动蜂鸣器33进行蜂鸣；再将排水板24抽出，将容纳空间26中的洗涤液从排水槽23排出；
5)将容纳空间26中的洗涤液从排水槽23排干净后，将排水槽23进行密封，继续将上盒体11朝盖板15的方向下压；固定液管102的铝箔被凸起部151戳破；固定液进入容纳空间26内对生物样本细胞进行固定，同时计时器32与固定液管102的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器32开始计时，固定15分钟后，计时器32启动蜂鸣器33进行蜂鸣；需要将排水板24抽出，将容纳空间26中的固定液从排水槽23排出；
6)继续将上盒体11朝盖板15的方向下压；使洗涤液管17的第二腔体172的铝箔被凸起部151戳破；洗涤液进入容纳空间26内对生物样本细胞进行洗涤，同时计时器32与第二腔体172的铝箔形成的通路断开，计时器32开始计时，并且启动振动器25进行振动下盒体21，增强洗涤效果；洗涤5分钟后，计时器32启动蜂鸣器33进行蜂鸣；再将排水板24抽出，将容纳空间26中的洗涤液从排水槽23排出；
7)继续将上盒体11朝盖板15的方向下压，渗透液管103的铝箔被凸起部151戳破；同时计时器32与渗透液管103的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器32开始计时；洗涤液进入容纳空间26内对生物样本细胞进行渗透，渗透5分钟后，蜂鸣器33进行蜂鸣；再将排水板24抽出，将容纳空间26中的渗透液从排水槽23排出；
8)继续将上盒体11朝盖板15的方向下压，使洗涤液管17的第三腔体173的铝箔被凸起部151戳破，同时计时器32与的第三腔体173的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器 32开始计时；洗涤液进入容纳空间26内对生物样本细胞进行洗涤，洗涤5分钟后，蜂鸣器33进行蜂鸣；再将排水板24抽出，将容纳空间26中的洗涤液从排水槽23排出；
9)继续将上盒体11朝盖板15的方向下压，使封闭液管104的铝箔被凸起部151戳破；同时计时器32与封闭液管104的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器32开始计时；封闭液进入容纳空间26内对生物样本细胞进行封闭，5分钟后，蜂鸣器33进行蜂鸣；再将排水板24抽出，将容纳空间26中的封闭液从排水槽23排出；再将上盒体11朝盖板15的方向下压，使洗涤液管17的第四腔体174的铝箔被凸起部151戳破；同时计时器32与第四腔体 174的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器32开始计时；洗涤液进入容纳空间26内对生物样本细胞进行洗涤，洗涤5分钟后，蜂鸣器33进行蜂鸣；再将排水板24抽出，将容纳空间26中的洗涤液从排水槽23排出；
10)继续将上盒体11朝盖板15的方向下压，使生物素标记山羊抗兔IgG复合物管105 的铝箔被凸起部151戳破；同时计时器32与生物素标记山羊抗兔IgG复合物管105的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器32开始计时；生物素标记山羊抗兔IgG复合物进入容纳空间26与生物样本细胞在常温下共孵育1小时后，蜂鸣器33进行蜂鸣；再将上盒体11朝盖板 15的方向下压，使洗涤液管17的第五腔体175的铝箔被凸起部151戳破；同时计时器32与第五腔体175的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器32开始计时；洗涤液进入容纳空间26内对生物样本细胞进行洗涤，洗涤5分钟后，蜂鸣器33进行蜂鸣；再将排水板24抽出，将容纳空间26中的洗涤液从排水槽23排出；
11)继续将上盒体11朝盖板15的方向下压，使FA-QDs复合物管106的铝箔被凸起部151戳破；同时计时器32与FA-QDs复合物管106的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器32开始计时；FA-QDs复合物进入容纳空间26与生物样本细胞在常温下共孵育0.5小时后，蜂鸣器33进行蜂鸣；继续将上盒体11朝盖板15的方向下压，使Hank's液管107的铝箔被凸起部151戳破；同时计时器32与Hank's液管107的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器32开始计时；Hank's液进入容纳空间26内对生物样本细胞进行冲洗脱去背景色10分钟后，蜂鸣器33进行蜂鸣；立即将附在过滤膜22的生物样本细胞在倒置荧光显微镜下观察荧光信号并通过荧光信号采集系统进行定量分析。
FA-QDs复合物制备方法如下：
1)用分析天平精密称取0.001gFA溶于10ml的PBS中，用超声仪FA充分溶解，制成FA溶液；用分析天平精密称取0.001gEDC和0.0005GNHS，将EDC和NHS分别溶于10mL甲醇溶液中，然后取上述FA溶液25μl放于20ml烧杯内，加入EDC、NHS甲醇溶液。将烧杯放置于 35℃水浴中搅拌15分钟，得到叶酸活化酯；
2)取PEG-QDs溶液放入烧杯中，将叶酸活化酯缓慢滴入PEG-QDs溶液中，于25℃水浴搅拌2小时，进行酰胺缩合反应，得到FA-QDs溶液。将反应后的溶液装入分子截留量为8000-14000的超滤器中进行透析，放于双蒸水中动态透析24小时，每半小时换一次水；透析后得到纯化的FA-QDs溶液；
3)将纯化的FA-QDs溶液进行冷冻干燥，得到淡红色的FA-QDs复合物。
EDC为(1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐)。
原理：FA-QDs复合物与生物样本细胞反应后，FA-QDs探针与肝癌细胞结合，并且FA-QDs 与肝癌细胞结合后在荧光信号下，能将肝癌细胞进行显色，更容易地检测出肝癌细胞。
在本实施例中，洗涤液为TBS清洗液。
在本实施例中，渗透液为pbs缓冲液。
在本实施例中，固定液为4％戊二醛固定液。
在本实施例中，其中生物样本包括肝组织、血液、血清或血浆。
在本实施例中，铝箔被凸起部151戳破后，计时器32接收到断路信号后均开始计时。
在本实施例中，计时器32驱动蜂鸣器33进行蜂鸣的时间均为预先在计时器32设定好的时间。
在本实施例中，过滤膜22为醋酸纤维膜或者醋酸纤维素膜
原理：FA-QDs复合物与生物样本细胞反应后，FA-QDs探针与肝癌细胞结合，并且FA-QDs 与肝癌细胞结合后在荧光信号下，能将肝癌细胞进行显色，更容易地检测出肝癌细胞。
在本实施例中，洗涤液为TBS清洗液。
在本实施例中，渗透液为pbs缓冲液。
在本实施例中，固定液为4％戊二醛固定液。
在本实施例中，其中生物样本包括肝组织、血液、血清或血浆。
在本实施例中，凸起部151为绝缘材料制成，例如塑料。
在本实施例中，伸缩柱14为淄博朗达复合材料有限公司生产的型号为：6009的碳纤维伸缩管。伸缩柱14在肝癌试剂盒未使用的时候处于拉伸的状态。
在本实施例中，小牛血清白蛋白管101、第一腔体171、固定液管102、第二腔体172、渗透液管103、第三腔体173、封闭液管104及第四腔体174、生物素标记山羊抗兔IgG复合物管105、第五腔体175、FA-QDs复合物管106及Hank's液管107相对凸起部151的一端露出上盒体11出的长度依次递减；
请参阅图8，在本实施例中，上盒体结构1及下盒体结构2之间设置有易撕铝膜5，易撕铝膜5通过胶水与上盒体结构1及下盒体结构2连接；易撕铝膜5用于将上盒体结构1及下盒体结构2之间的管体16及洗涤液管17围住，防止管体16及洗涤液管17在未使用之前受到污染或者受到外力下压使管体16及洗涤液管17中的试剂流出、损坏，在需要使用肝癌早期诊断试剂盒之前将易撕铝膜5撕开即可漏出管体16及洗涤液管17。
实验例
在临床实际样本中，选取100例肝癌患者血液和100例无病人员血液使用该试剂盒检测后表明，92例肝癌患者血液中发现肝癌细胞，而在无病人员的血液中中未发现肝癌细胞。
表1临床实际样本的肝癌细胞检测结果
由表1可知，本发明一种肝癌早期诊断试剂盒,对肝癌患者的肝癌细胞检出率为92％，从而可用于早期肝癌的检测。本发明检测肝癌结果为阳性后，可以进一步的采用其他技术手段对肝癌进行确诊。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (5)
1.一种肝癌早期诊断试剂盒，其特征在于，包括有上盒体结构、下盒体结构及工作模块；
上盒体结构包括有上盒体、若干试剂管孔、若干孔板、伸缩柱、盖板、若干管体、洗涤液管；
若干管体及洗涤液管均为伸缩管；
若干管体活动收容于若干试剂管孔内；
若干管体为两端密封的结构，两端均为铝箔进行密封；
其中一管体装有小牛血清白蛋白为小牛血清白蛋白管；
其中一管体装有固定液为固定液管；
其中一管体装有渗透液为渗透液管；
其中一管体装有封闭液为封闭液管；
其中一管体装有生物素标记山羊抗兔IgG复合物为生物素标记山羊抗兔IgG复合物管；
其中一管体装有FA-QDs复合物为FA-QDs复合物管；
其中一管体装有Hank's液为Hank's液管；
洗涤液管包括有第一腔体、第二腔体、第三腔体、第四腔体及第五腔体，第一腔体、第二腔体、第三腔体、第四腔体及第五腔体内部均装有洗涤液，并且两端均通过铝箔进行密封；通过铝箔将第一腔体、第二腔体、第三腔体、第四腔体及第五腔体依次连接在一起；
若干试剂管孔设置在上盒体上；小牛血清白蛋白管、洗涤液管、固定液管、渗透液管、封闭液管、生物素标记山羊抗兔IgG复合物管、FA-QDs复合物管、Hank's液管分别活动收容于试剂管孔内；
每一若干试剂管孔对应设置有一孔板，若干孔板旋转设置在上盒体上；
伸缩柱一端与上盒体固定连接，另一端与盖板固定连接；盖板上设置有与若干试剂管孔对应的若干凸起部；凸起部上设置有贯穿凸起部及盖板的下料孔；
下盒体结构可拆卸的固定在上盒体结构上；
下盒体结构包括有下盒体、过滤膜、排水槽、排水板、振动器；下盒体设置有容纳空间，过滤膜设置在容纳空间内，并将容纳空间分隔成两部分；排水槽设置在下盒体底部，用于将容纳空间中的液体排出；排水板活动收容在排水槽，用于控制排水槽的排水；下盒体上设置有插片，盖板上设置有与插片对应的插槽，下盒体通过插片插入插槽内与上盒体可拆卸的固定；
工作模块安装于上盒体上，工作模块包括有显示屏、计时器、蜂鸣器、电源；
电源均与显示屏、计时器、蜂鸣器、及振动器连接；
计时器分别与蜂鸣器及显示屏连接；
计时器分别通过电线与若干管体及洗涤液管上的铝箔连接并形成通路。
2.根据权利要求1所述的一种肝癌早期诊断试剂盒，其特征在于，凸起部呈空心锥形结构。
3.根据权利要求2所述的一种肝癌早期诊断试剂盒，其特征在于，上盒体结构及下盒体结构之间设置有易撕铝膜，易撕铝膜通过与上盒体结构及下盒体结构连接。
4.一种如权利要求3所述肝癌早期诊断试剂盒用于检测肝癌细胞的方法，其特征在于：具体步骤如下：
1)先将小牛血清白蛋白管、固定液管、渗透液管、封闭液管、生物素标记山羊抗兔IgG复合物管、FA-QDs复合物管、Hank's液管及洗涤液管分别装入试剂管孔，再旋转对应的孔板，将试剂管孔盖住，小牛血清白蛋白管、固定液管、渗透液管、封闭液管、生物素标记山羊抗兔IgG复合物管、FA-QDs复合物管、Hank's液管及洗涤液管相对凸起部的一端露出上盒体外；
2)将生物样本放入下盒体中的过滤膜上，将排水板对排水槽进行密封；然后将下盒体的插片插入插槽内，将上盒体与下盒体进行固定；
3)将上盒体朝盖板的方向下压；上盒体沿着伸缩柱向盖板的方向移动；小牛血清白蛋白管的铝箔最先被凸起部戳破；小牛血清白蛋白从凸起部的下料孔进入容纳空间内对生物样本细胞进行培养，同时由于小牛血清白蛋白管的铝箔被戳破，计时器与小牛血清白蛋白管的铝箔形成的通路变为断路，计时器开始计时并且在显示屏上显示时间；经过24小时的培养后，计时器启动蜂鸣器进行蜂鸣；将排水板抽出，将容纳空间中的液体从排水槽排出，得到生物样本细胞；
4)将容纳空间中的液体从排水槽排干净后，将排水槽进行密封，继续将上盒体朝盖板的方向下压；使洗涤液管的第一腔体的铝箔被凸起部戳破；洗涤液进入容纳空间内对生物样本细胞进行洗涤，同时计时器与第一腔体的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时，并且启动振动器进行振动下盒体；洗涤5分钟后，计时器启动蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的洗涤液从排水槽排出；
5)将容纳空间中的洗涤液从排水槽排干净后，将排水槽进行密封，继续将上盒体朝盖板的方向下压；固定液管的铝箔被凸起部戳破；固定液进入容纳空间内对生物样本细胞进行固定，同时计时器与固定液管的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时，固定15分钟后，计时器启动蜂鸣器进行蜂鸣；需要将排水板抽出，将容纳空间中的固定液从排水槽排出；
6)继续将上盒体朝盖板的方向下压；使洗涤液管的第二腔体的铝箔被凸起部戳破；洗涤液进入容纳空间内对生物样本细胞进行洗涤，同时计时器与第二腔体的铝箔形成的通路断开，计时器开始计时，并且启动振动器进行振动下盒体，增强洗涤效果；洗涤5分钟后，计时器启动蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的洗涤液从排水槽排出；
7)继续将上盒体朝盖板的方向下压，渗透液管的铝箔被凸起部戳破；同时计时器与渗透液管的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；洗涤液进入容纳空间内对生物样本细胞进行渗透，渗透5分钟后，蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的渗透液从排水槽排出；
8)继续将上盒体朝盖板的方向下压，使洗涤液管的第三腔体的铝箔被凸起部戳破，同时计时器与的第三腔体的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；洗涤液进入容纳空间内对生物样本细胞进行洗涤，洗涤5分钟后，蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的洗涤液从排水槽排出；
9)继续将上盒体朝盖板的方向下压，使封闭液管的铝箔被凸起部戳破；同时计时器32与封闭液管的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；封闭液进入容纳空间内对生物样本细胞进行封闭，5分钟后，蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的封闭液从排水槽排出；再将上盒体朝盖板的方向下压，使洗涤液管的第四腔体的铝箔被凸起部戳破；同时计时器与第四腔体的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；洗涤液进入容纳空间内对生物样本细胞进行洗涤，洗涤5分钟后，蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的洗涤液从排水槽排出；
10)继续将上盒体朝盖板的方向下压，使生物素标记山羊抗兔IgG复合物管的铝箔被凸起部戳破；同时计时器与生物素标记山羊抗兔IgG复合物管的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；生物素标记山羊抗兔IgG复合物进入容纳空间与生物样本细胞在常温下共孵育1小时后，蜂鸣器进行蜂鸣；再将上盒体朝盖板的方向下压，使洗涤液管的第五腔体的铝箔被凸起部戳破；同时计时器与第五腔体的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；洗涤液进入容纳空间内对生物样本细胞进行洗涤，洗涤5分钟后，蜂鸣器进行蜂鸣；再将排水板抽出，将容纳空间中的洗涤液从排水槽排出；
11)继续将上盒体朝盖板的方向下压，使FA-QDs复合物管的铝箔被凸起部戳破；同时计时器与FA-QDs复合物管的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；FA-QDs复合物进入容纳空间与生物样本细胞在常温下共孵育0.5小时后，蜂鸣器进行蜂鸣；继续将上盒体朝盖板的方向下压，使Hank's液管的铝箔被凸起部戳破；同时计时器32与Hank's液管的铝箔连接的电线形成的通路断开，计时器开始计时；Hank's液进入容纳空间内对生物样本细胞进行冲洗脱去背景色10分钟后，蜂鸣器进行蜂鸣；立即将附在过滤膜上的生物样本细胞在倒置荧光显微镜下观察荧光信号并通过荧光信号采集系统进行定量分析。
5.一种如权利要求1中所述的肝癌早期诊断试剂盒中的FA-QDs复合物的制备方法的方法，其特征在于：具体步骤如下：
1)用分析天平精密称取0.001gFA溶于10ml的PBS中，用超声仪FA充分溶解，制成FA溶液；用分析天平精密称取0.001gEDC和0.0005GNHS，将EDC和NHS分别溶于10mL甲醇溶液中，然后取上述FA溶液25μl放于20ml烧杯内，加入EDC、NHS甲醇溶液，将烧杯放置于35℃水浴中搅拌15分钟，得到叶酸活化酯；
2)取PEG-QDs溶液放入烧杯中，将叶酸活化酯缓慢滴入PEG-QDs溶液中，于25℃水浴搅拌2小时，进行酰胺缩合反应，得到FA-QDs溶液；将反应后的溶液装入分子截留量为8000-14000的超滤器中进行透析，放于双蒸水中动态透析24小时，每半小时换一次水；透析后得到纯化的FA-QDs溶液；
3)将纯化的FA-QDs溶液进行冷冻干燥，得到淡红色的FA-QDs复合物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910687685.4A CN110286110B (zh) | 2019-07-29 | 2019-07-29 | 一种肝癌早期诊断试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910687685.4A CN110286110B (zh) | 2019-07-29 | 2019-07-29 | 一种肝癌早期诊断试剂盒 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110286110A true CN110286110A (zh) | 2019-09-27 |
| CN110286110B CN110286110B (zh) | 2024-03-19 |
Family
ID=68024006
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910687685.4A Active CN110286110B (zh) | 2019-07-29 | 2019-07-29 | 一种肝癌早期诊断试剂盒 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110286110B (zh) |
Citations (22)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1304030A2 (en) * | 1998-01-12 | 2003-04-23 | Embrex Inc. | Automated in ovo injection apparatus |
| US20030185658A1 (en) * | 2002-03-26 | 2003-10-02 | Probitas Pharama, S.A. | Gripping means for handling blood plasma containers |
| KR20040039597A (ko) * | 2002-11-04 | 2004-05-12 | 김진우 | 인간 ｈｃｃｒ-1 단백질 검출 방법 및 이를 이용한 간암진단키트 |
| JP2005185311A (ja) * | 2003-12-24 | 2005-07-14 | Nemoto Kyorindo:Kk | 薬液注入用具 |
| US20070059763A1 (en) * | 2004-08-03 | 2007-03-15 | Kazunori Okano | Cellomics system |
| US20070287149A1 (en) * | 2006-05-30 | 2007-12-13 | Sysmex Corporation | Novel kit for preparing cancer cell detection sample and kit for cancer cell detection using the same |
| US20080027368A1 (en) * | 2000-09-27 | 2008-01-31 | Sorin Group Usa, Inc. | Disposable cartridge for a blood perfusion system |
| CN101458252A (zh) * | 2008-12-31 | 2009-06-17 | 杭州博日科技有限公司 | 乳品抗生素快速检测试剂盒 |
| WO2010087524A2 (en) * | 2009-01-30 | 2010-08-05 | Terumo Kabushiki Kaisha | Injection needle assembly and drug injection device |
| JP2011232353A (ja) * | 2011-07-21 | 2011-11-17 | Sysmex Corp | 検体分析装置 |
| CN104523380A (zh) * | 2014-12-01 | 2015-04-22 | 丽水市金源通汇知识产权服务有限公司 | 新型多功能药箱 |
| CN204426996U (zh) * | 2015-03-17 | 2015-07-01 | 丽水市人民医院 | 带药瓶放置装置的新型多功能药箱 |
| KR20160023069A (ko) * | 2014-08-21 | 2016-03-03 | 주식회사 중정 | 제1유체를 제2유체에 혼입하는 장치 |
| CN105408466A (zh) * | 2013-08-08 | 2016-03-16 | 伊鲁米那股份有限公司 | 用于向流动池的试剂输送的流体系统 |
| CN105562132A (zh) * | 2016-01-04 | 2016-05-11 | 上海医脉赛科技有限公司 | 一种提取及检测生物样本的装置 |
| CN105807070A (zh) * | 2016-06-08 | 2016-07-27 | 广西中医药大学附属瑞康医院 | 一种检测乙肝病毒的试剂盒 |
| CN106423349A (zh) * | 2016-10-17 | 2017-02-22 | 无锡市日升化工有限公司 | 一种化工实验用的试管放置架 |
| EP3162443A1 (de) * | 2015-10-28 | 2017-05-03 | Bruker BioSpin GmbH | Nadelführung mit zentrierung für septum-piercing |
| CN108977344A (zh) * | 2018-09-21 | 2018-12-11 | 西安佰奥莱博生物科技有限公司 | 一种分离提取装置及分离提取方法 |
| CN209033337U (zh) * | 2015-10-20 | 2019-06-28 | 泉州市科茂利通智能科技有限公司 | 自动换瓶输液器、液体瓶集装箱及简易医疗箱 |
| CN110007075A (zh) * | 2019-05-10 | 2019-07-12 | 苏州仁端生物医药科技有限公司 | 一种检测试剂条及其应用 |
| CN210803280U (zh) * | 2019-07-29 | 2020-06-19 | 邓鑫 | 一种肝癌早期诊断试剂盒 |
-
2019
- 2019-07-29 CN CN201910687685.4A patent/CN110286110B/zh active Active
Patent Citations (22)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1304030A2 (en) * | 1998-01-12 | 2003-04-23 | Embrex Inc. | Automated in ovo injection apparatus |
| US20080027368A1 (en) * | 2000-09-27 | 2008-01-31 | Sorin Group Usa, Inc. | Disposable cartridge for a blood perfusion system |
| US20030185658A1 (en) * | 2002-03-26 | 2003-10-02 | Probitas Pharama, S.A. | Gripping means for handling blood plasma containers |
| KR20040039597A (ko) * | 2002-11-04 | 2004-05-12 | 김진우 | 인간 ｈｃｃｒ-1 단백질 검출 방법 및 이를 이용한 간암진단키트 |
| JP2005185311A (ja) * | 2003-12-24 | 2005-07-14 | Nemoto Kyorindo:Kk | 薬液注入用具 |
| US20070059763A1 (en) * | 2004-08-03 | 2007-03-15 | Kazunori Okano | Cellomics system |
| US20070287149A1 (en) * | 2006-05-30 | 2007-12-13 | Sysmex Corporation | Novel kit for preparing cancer cell detection sample and kit for cancer cell detection using the same |
| CN101458252A (zh) * | 2008-12-31 | 2009-06-17 | 杭州博日科技有限公司 | 乳品抗生素快速检测试剂盒 |
| WO2010087524A2 (en) * | 2009-01-30 | 2010-08-05 | Terumo Kabushiki Kaisha | Injection needle assembly and drug injection device |
| JP2011232353A (ja) * | 2011-07-21 | 2011-11-17 | Sysmex Corp | 検体分析装置 |
| CN105408466A (zh) * | 2013-08-08 | 2016-03-16 | 伊鲁米那股份有限公司 | 用于向流动池的试剂输送的流体系统 |
| KR20160023069A (ko) * | 2014-08-21 | 2016-03-03 | 주식회사 중정 | 제1유체를 제2유체에 혼입하는 장치 |
| CN104523380A (zh) * | 2014-12-01 | 2015-04-22 | 丽水市金源通汇知识产权服务有限公司 | 新型多功能药箱 |
| CN204426996U (zh) * | 2015-03-17 | 2015-07-01 | 丽水市人民医院 | 带药瓶放置装置的新型多功能药箱 |
| CN209033337U (zh) * | 2015-10-20 | 2019-06-28 | 泉州市科茂利通智能科技有限公司 | 自动换瓶输液器、液体瓶集装箱及简易医疗箱 |
| EP3162443A1 (de) * | 2015-10-28 | 2017-05-03 | Bruker BioSpin GmbH | Nadelführung mit zentrierung für septum-piercing |
| CN105562132A (zh) * | 2016-01-04 | 2016-05-11 | 上海医脉赛科技有限公司 | 一种提取及检测生物样本的装置 |
| CN105807070A (zh) * | 2016-06-08 | 2016-07-27 | 广西中医药大学附属瑞康医院 | 一种检测乙肝病毒的试剂盒 |
| CN106423349A (zh) * | 2016-10-17 | 2017-02-22 | 无锡市日升化工有限公司 | 一种化工实验用的试管放置架 |
| CN108977344A (zh) * | 2018-09-21 | 2018-12-11 | 西安佰奥莱博生物科技有限公司 | 一种分离提取装置及分离提取方法 |
| CN110007075A (zh) * | 2019-05-10 | 2019-07-12 | 苏州仁端生物医药科技有限公司 | 一种检测试剂条及其应用 |
| CN210803280U (zh) * | 2019-07-29 | 2020-06-19 | 邓鑫 | 一种肝癌早期诊断试剂盒 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN110286110B (zh) | 2024-03-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4950277B2 (ja) | 細胞ブロック作製システム及びその使用方法 | |
| CN110161266B (zh) | 一种收集液体样本的方法 | |
| EP0138833B1 (en) | Cell viability assay methods and apparatus | |
| CN208736801U (zh) | 序贯粪隐血采集检测一体装置 | |
| US4393141A (en) | Method and device for examining urine for particulate constituents | |
| CN110286110A (zh) | 一种肝癌早期诊断试剂盒 | |
| CN210803280U (zh) | 一种肝癌早期诊断试剂盒 | |
| US20190185802A1 (en) | Cell culturing device, cell culturing system and cell culturing method | |
| CN212622612U (zh) | 一种检测装置 | |
| CN108680573A (zh) | 序贯粪隐血采集检测一体装置 | |
| US6448063B2 (en) | Experimental apparatus for sliced specimen of biological tissue and specimen holder | |
| CN102876633B (zh) | 一种联合细胞模型及其制备方法和用途 | |
| EP0092914A2 (en) | Method and apparatus for collecting and washing sputum specimens for clinical diagnosis | |
| CN207793276U (zh) | 一种固液分流反应提取系统 | |
| CN206788186U (zh) | 一种用于检测人体体液异质性增生细胞的联检试剂瓶和联检试剂盒 | |
| CN208038427U (zh) | 一种便捷式膜式细胞收集器 | |
| CN213943180U (zh) | 一种可拆式的样本容器 | |
| CN105662894B (zh) | 痰液收集器 | |
| CN220284109U (zh) | 一种贴壁细胞透射电镜样本原位固定制样装置 | |
| CN110105335A (zh) | 酰胺键联接的萘酰亚胺多功能化合物的合成及应用 | |
| CN213078498U (zh) | 一种可拆分的检测装置 | |
| CN208420487U (zh) | 一种可快速拆装的微孔滤膜制片装置 | |
| CN214320193U (zh) | 一种检测装置 | |
| CN214844327U (zh) | 一种快速提取生物样本的处理装置 | |
| CN214320190U (zh) | 一种检测装置内的密封元件 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |