CN1102583C

CN1102583C - 噻唑正离子型多肽缩合剂、合成及其应用

Info

Publication number: CN1102583C
Application number: CN99113889A
Authority: CN
Inventors: 徐杰诚; 李鹏
Original assignee: Shanghai Institute of Organic Chemistry of CAS
Current assignee: Shanghai Institute of Organic Chemistry of CAS
Priority date: 1999-07-19
Filing date: 1999-07-19
Publication date: 2003-03-05
Anticipated expiration: 2019-07-19
Also published as: CN1243829A

Abstract

本发明涉及噻唑正离子型多肽缩合剂、合成及其应用，其分子通式为，其是由2-卤噻唑在0-60℃的条件下与N-烷基化试剂反应后，和/或在-30-25℃的条件下与活化组分反应得到相应的噻唑类正离子型多肽缩合剂，该多肽缩合剂可用于多肽的合成，尤其是应用于有空间位阻的多肽的合成，其性能优于目前已普遍使用的脲正离子和磷正离子型缩合剂，既能用于液相也能用于固相的合成，具有合成简便，原料易得，在室温下稳定，在应用上具有反应活性高、消旋小等诸多优点；可广泛应用于多肽酰胺、酯及活化酯的合成。

Description

噻唑正离子型多肽缩合剂、合成及其应用

本发明涉及一类多肽缩合剂，即噻唑正离子型多肽缩合剂、合成及其应用。

随着多肽以及蛋白质化学的发展，人们设计、合成了多种类型的缩合剂以满足多肽以及蛋白质合成的要求。例如1955年由Sheehan和Hess首先提出的缩合剂二环己基碳二亚胺DCC就很有代表性，至今仍被广泛使用。但DCC作缩合剂用于多肽合成会产生很多副反应，如反应过程中会形成N-酰基脲副产物，发生消旋。如D.R.Detar，R.Silverstein，F.F.Rogers，J.Am.Chem.Soc.，1966，88，1024.和D.R.Detar，R.Silverstein，J.Am.Chem.Soc.，1966，88，1020.中报道的DCC活化Asn和Gln时，还能引起ω-酰胺基脱水形成氰基的副反应。DCC法的另一个缺点是反应生成的N，N’-二环己基脲DCU在大多数有机溶剂中溶解度很小，有时会混在产物中而很难除尽.为此人们在DCCI的结构上进行了改进，发展了一些水溶性的碳二亚胺，如N-cyclohexyl-N’-(4-diethylaminocyclohexyl)-carbodiimide，N-cyclohexyl-N’-[2-(4-methyl morpholini)-ethyl]carbodiimide tosylate和N-ethyl-N’-(3-dimethyl aminopropyl)-carbodiimide来代替DCC，但都未得到广泛的应用。

自1975年，Castro等人设计、合成了第一个基于HOBt的磷正离子型缩合剂BOP以来，以1-羟基苯并三唑HOBt为活化酯的磷正离子型和碳正离子型试剂迅速发展，如Coste，J.，Le-Nguyen，D.AndCastro，B.，Tetrahedron Lett.，1990，31，205等文献中报道了PyBOP，HBTU，HBPyU，HBPipU，HBMDU，HBMTU等以HOBt为活化酯的缩合剂.但在这类试剂中，除BOP和HBTU在合成中已被应用外，其余的试剂都未被普遍使用。而BOP和HBTU也存在一些缺点，如在文献Rowell，R.M.，Appl.Biochem.Biotechnol，1984，9，447；Oustrin，M.L.，Moisand，C.，Cros，M.L.and Bonnefoux，J.，Ann.Pharm.Fr.，1972，30，685；Moisand，A.，Moisand，C.and Pitet，G.，Ann.Pharm.Fr.，1970，28，575中指出在制备和使用BOP时，会遇到有致癌毒性的六甲基磷酰三胺。HBTU也有同样的问题，在制备和使用过程中，遇到的四甲基脲素也是具有细胞毒的物质.产生消旋也是这类试剂的一个缺点。在young’s test中，Chen，S.Q.andXu，J.C.，Tetrahedron Let t.，1992，33，647-650用BOP试剂发现有39.8％的消旋产物，而HBTU试剂也有25.4％的消旋产物.Galpin，I.J.，Gordon，P.F.，Ramage，R.and Thorpe，W.D.，Tetrahedron，1976，32，2417中Galpin等人报道在用BOP缩合Z-Gly-Ala-OH和H-Leu-OCH₂Ph的过程中有29％的消旋，Steinauer，R.，Chen，F.M.F.and Benoiton，N.L.，Int.J.Peptide Protein Res.，1989，34，295中Steinauer等人认为BOP试剂由于本身的消旋程度而导致在肽的片段缩合中不适合性。

近年来，人们又开发了一些基于7-氮杂-1-羟基苯并三唑HOAt的磷正离子型和碳正离子型缩合剂，如Albericio，F.，Cases，M.，Alsina，J.，Triolo，S.A.，Carpino，L.A.and Kates，S.A.，Tetrahedron Lett.，1997，38，4853；Carpino，L.A.，El-Faham，A.，Minor，C.A.and Albericio，F.，J.Chem.Soc.Chem.Commun.，1994，201；Angell，Y.M.，Thomas，T.L.and Rich，D.H.，Peptides：Chemistry，structure and Biology，Pravin，T.P.，Kaumaya andHodges，R.S.(Eds)，MayflowerScientific Ltd.，1996，p88；等中公开的AOP，PyAOP，HATU，HAPipU，HAPyU，HAMDU，HAMTU等试剂。此类试剂较相应的基于HOBt的缩合剂具有较高的活性和较小的消旋，但制备较困难，稳定性较差，价格也比较昂贵。Carpino，L.A.，J.Am.Chem.Soc，1993，115，4397；Raman，P.，Stokes，S.S.，Angll，Y.M.，Flentke，G.R.and Rich，D.H.，J.Org.Chem.，1998，63，5734；Angll，Y.M.，Thomas，T.L.，Flentke，G.R.and Rich，D.H.，Am.Chem.Soc.，1995，117，7279中主要是将HOAt作为添加剂与DIPCDI，DCC等缩合剂联合使用。Carpino，L.A.，El-Faham，A.，Minor，C.A.and Albericio，F.，J.Chem.Soc.Chem.Commun.，1994，201中证明了碳正离子型缩合剂与相应的磷正离子型缩合剂相比具有更高的活性。目前基于HOBt或HOAt的碳正离子型缩合剂均为脲正离子类型，其结构通式如下：

由于碳正离子邻位两个含有孤对电子的氮原子的存在，对此碳正离子具有极大的稳定作用，并且分子主要氮正离子形式存在，但由于碳正离子是此类缩合剂参与形成酰胺键的反应时的反应中心，因此人们习惯称此类缩合剂为碳正离子型缩合剂。

由于两个氨基取代基造成的两个等价的共振结构导致此类化合物的稳定，也可以说是钝化Wijkmans，J.C.H.M.，Blok，F.A.A.，vander Marel，G.A.，van Boom，J.H.and Bloemhoff，W.，TetrahedronLett.，1995，36，4643；Wijkmans，J.C.H.M.，Kruijtzer，A.W.，vander Marel，G.A.，van Boom，J.H.and Bloemhoff，W.，Recl.Trav.Chim.Pays-Bas，1994，113，394中在活化酯部分引入三氟甲基，硝基等吸电子取代基来提高缩合剂的活性。我们将脲正离子缩合剂中的一个氨基用烷基、芳基甚至氢取代来进一步提高缩合剂的活性，为此，在ZL99113545.8中我们将脲正离子缩合剂中的一个氨基用烷基、芳基甚至氢取代来进一步提高缩合剂的活性，成功设计并合成了一类亚胺正离子型缩合剂，实验证明这类缩合剂具有较好的性能。

此类缩合剂虽然在普通氨基酸间的缩合中具有较好的性能，接着我们合成了一类吡啶类正离子型多肽缩合剂，其在应用于有空间位阻的多肽的合成中表现出很优良的性能，可它们对于有空间位阻的含N-烷基化或α-碳二烷基化氨基酸的多肽合成结果却不能令人满意。为此我们在已开发出的脲、磷、亚胺和吡啶正离子型缩合剂的基础上，设计合成了噻唑正离子型多肽缩合剂。

本发明的目的就是提供一类新型的噻唑类正离子型多肽缩合剂，其分子通式为：其中R₁、R₂、R₃＝H、C_nH_2n+1，n＝1-5、苯基、取代苯基；R₄＝F，Cl，Br其中45、R₆＝CF₃、NO₂，X＝CH、N，

R₇、R₈＝H、C_nH_2n+1，n＝1-5、CF₃、芳基， R₉、R₁₀＝NO₂、A＝SbCl₆，SbF₆，CF₃SO₃，PF₆，BPh₄，BF₄。

本发明另一目的是提供了合成此类缩合剂的方法，即由相应的2-卤噻唑在有机溶剂、0-60℃的条件下与N-烷基化试剂反应后，和/或在-30-25℃的温度下、与相应的活化组分反应得到相应的缩合剂，反应式如下：

其中N-烷基化试剂为(R₃)₃O⁺BF₄ ^-，(R₃)₃O⁺SbCl₆ ^-，(R₃)₃O⁺SbF₆ ^-，(R₃)₃O⁺BPh₄ ^-，CF₃SO₃R₃，(R₃)₃O⁺PF₆ ^-；有机溶剂为极性非质子性溶剂；活化组分为含有羟基的活性组分，即KR₄或HR₄+有机碱，其中R₄＝F，Cl，Br，

其中R₅、R₆＝CF₃、NO₂，X＝CH、N，

R₇、R₈＝H、C_nH_2n+1，n＝1-5、CF₃、芳基， R₉、R₁₀＝NO₂、

有机碱是三乙胺、二异丙基乙基胺，吡啶，N-甲基吗啡啉，N-甲基咪唑。

当噻唑正离子缩合剂为R₄＝F、Cl、Br时，其是由相应的2-卤噻唑在0℃-60℃下与N-烷基化试剂反应得到，反应式如下：

其中N-烷基化试剂为(R₃)₃O⁺BF₄ ^-，(R₃)₃O⁺SbCl₆ ^-，(R₃)₃O⁺SbF₆ ^-，(R₃)₃O⁺BPh₄ ^-，CF₃SO₃R₃，(R₃)₃O⁺PF₆ ^-；有机溶剂为极性非质子性溶剂。

本发明的另一目的是该类正离子型多肽缩合剂可用于多肽的合成，尤其是应用于有空间位阻的含N-烷基化或α-碳二烷基化氨基酸的多肽合成。此类缩合剂用于多肽合成时的通用合成步骤为：将N-端保护的氨基酸或多肽片段，C-端保护的氨基酸或多肽片段酯的盐酸盐或三氟醋酸盐和缩合剂溶于DMF或CH₂Cl₂中，在低温下缓慢加入碱剂二异丙基乙基胺或2，6-二甲基吡啶，加完后低温反应，然后室温反应，通过薄层色谱鉴定反应终点，即得到相应的多肽。

本发明所提供的新型噻唑正离子型多肽缩合剂无论在反应活性方面，还是在用于肽的合成时产品的消旋程度方面都优于目前已开发出的脲正离子和磷正离子型缩合剂。尤其是R₄为F、Cl、Br的吡啶正离子多肽缩合剂，其可应用于有空间位阻的含N-烷基化氨基酸和α，α-二烷基化氨基酸的多肽的合成，不但能用于液相合成中也能用于固相合成中。此外这类缩合剂还具有合成简便，原料廉价易得，室温下稳定，使用方便等诸多优点，是一类新型的反应性能和应用性能均十分优良的，值得进一步研究开发与广泛应用的缩合剂。

以下实施例有助于理解本发明，但不限于本发明的内容：

实施例1

^aReagents：i.a.CH₃COCH₃，I₂，reflux，4hr。；b.NaOH，

r.t.；ii.NaNO₂，NaBr，CuSO₄，H₂SO₄/H₃PO₄，0℃；

iii.Et₃OBF₄，ClCH₂CH₂Cl，60℃，1hr。

在500mL三口瓶中将100mL丙酮和1.0mol硫脲搅成乳白色悬浮液，一次性加入0.5mol碘，水浴加热回流。减压蒸去丙酮，将残余物倒入冰水中，在搅拌下加入5.0mol NaOH，静置分层，分出上层油层，水层用300mL乙醚提取，与油层合并，NaOH干燥，蒸去乙醚，减压蒸馏收集110-113℃/6mmHg馏分，得黄色结晶状产品2-氨基-4-甲基噻唑30.3g，收率53.1％。mp45-47℃，Rf＝0.63

¹H-NMR(DMSO-d₆)：δ6.71(2H，br NH₂)，6.03(1H，s，aryl)，2.15(3H，s，CH₃)。

将0.303mol的2-氨基-4-甲基噻唑分批加入到120mL80％H₃PO₄中，5℃下滴加70克浓硫酸，滴加完后，于-5℃下缓慢滴加0.606molNaNO₂的水溶液，低温搅拌三十分钟后加入0.588mol NaBr和0.375molCuSO₄·5H₂O的水溶液。，室温反应，用Na₂CO₃固体中和至中性。水蒸气蒸馏，馏出液用乙醚提取，MgSO₄干燥，浓缩，减压蒸馏收集bP₂₃87-90℃馏分，得无色液体2-溴-4-甲基噻唑。Rf＝0.7

(AcOEt/Pe＝1/12)。

¹H NMR(CDCl₃)：δ＝6.85(S，1H，aryl)，2.45(S，3H，CH₃)。

EIMS：177(M，83.9％)，179(M+2，90.3％)，98(M-Br，59.6％)，72，71，45。

在室温、氩气保护，干燥条件下将0.0228mol 2-溴-4-甲基噻唑加入到0.0228mol Et₃O⁺BF₄ ^-的ClCH₂CH₂Cl溶液中，油浴加热至60℃，反应后自然冷却至室温，有大量产品析出，得无色晶体2-溴-3-乙基-4-甲基噻唑正离子四氟硼酸盐BEMT6.415g，收率95.7％。

mp 189-189.5℃；

¹H NMR(300MHz，[D₆]acetone，25℃，TMS)：δ＝8.15(s，1H，aryl)，4.72(q，³J(H，H)＝7.5Hz，2H，CH₂CH₂)，2.77(s，3H，CH₃)，1.55(t，³J(H，H)＝7.5Hz，3H，CH₂CH₃)；

IR(KBr)：ν＝3134，1581，1476，1442，1330，1065，958，869，763，522cm^-1；

FABMS：206[M-BF₄ ^-]，208[M-BF₄ ^-+2]。

实施例2

在室温、氩气保护，干燥条件下将0.025mol 2-溴-4-甲基噻唑加入到0.025molEt₃O⁺SbCl₆ ^-的ClCH₂CH₂Cl溶液中，油浴加热至60℃，反应后自然冷却至室温，有大量产品析出，得无色晶体2-溴-3-乙基-4-甲基噻唑正离子六氯锑酸盐12.21g，收率90.1％。

¹H NMR(300MHz，[D₆]acetone，25℃，TMS)：δ＝8.22(s，1H，aryl)，4.76(q，³J(H，H)＝7.5Hz，2H，CH₂CH₂)，2.80(s，3H，CH₃)，1.56(t，³J(H，H)＝7.5Hz，3H，CH₂CH₃)；

IR(KBr)：ν＝3130，1590，1470，1440，1330，1064，952，761cm^-1；

FABMS：206[M-SbCl₆ ^-]，208[M-SbCl₆ ^-+2]。

实施例3

将10.0mmol 2-溴-3-乙基-4-甲基噻唑正离子六氯锑酸盐溶于30ml干燥乙腈中，搅拌冷却至-30℃，加入10.0mmol 1-羟基-7-氮杂苯并三唑钾盐，低温反应后，撤去冷浴，室温反应后过滤，滤液浓缩至结晶状固体析出，得产品4.77克。收率为80％。

¹H NMR：δ＝8.04-8.92(m，4H，aryl)，4.69(q，³J＝(H，H)＝7Hz，2H，N-CH₂)，2.72(s，3H，CH₃)，1.49(t，³J(H，H)＝7Hz，3H，β-CH₂)；

FABMS：262[M-SbCl₆ ^-]；

elemental analysis calcd.for C₁₁H₁₂Cl₆N₅OSSb(596.73)：

C 22.14，H 2.03，N 11.74

found：C 22.19，H 2.11，N 11.65。

实施例4

实验步骤的第一步反应同实施例2，所不同的是2-卤噻唑是

N-烷基化试剂是CF₃SO₂OCH₃，有机溶剂为乙腈，第二步反应同实施例3，所不同的是搅拌冷却至-20℃，产物为

¹H NMR：δ＝7.45-8.08(m，5H，aryl)，4.45(s，3H，N-CH₃)，2.71(s，3H，CH₃)ppm；

IR(KBr)：ν＝3106，1605，1486，1443，1331，1165，1065，763，642cm^-1；

FABMS：247[M-CF₃SO₃ ^-]；249[M-CF₃SO₃ ^-+2]；

elemental analysis calcd.for C₁₃H₁₄FBN₄O₄S₂(411.392)：

C 37.95，H 3.43，N 13.62；

found：C 37.83，H 3.43，N 13.55。

实施例5

实验步骤的第一步反应同实施例2，所不同的是2-卤噻唑是，N-烷基化试剂是Me₃O⁺SbCl₆ ^-，有机溶剂为CH₂Cl₂，油浴加热至50℃，第二步反应同实施例3，所不同的是搅拌冷却至-25℃，产物为

¹H NMR：δ＝8.01-8.92(m，4H，aryl)，4.49(s，3H，N-CH₃)，2.75(s，3H，CH₃)ppm；

IR(KBr)：ν＝3112，1625，1463，1440，1165，1065，774，610cm^-1；

FABMS：248[M-SbCl₆ ^-]；

elemental analysis calcd.for C₁₀H₁₀Cl₆N₅OSSb(582.699)：

C 20.61，H 1.73，N 12.02，Cl 36.51

found：C 20.44，H 1.63，N 12.30，Cl 36.77

实施例6

实验步骤的第一步反应同实施例2，所不同的是2-卤噻唑是

N-烷基化试剂是Me₃O⁺SbCl₆ ^-，有机溶剂为四氢呋喃，第二步反应同实施例3，所不同的是活化组分为＇产物为

¹H NMR：δ＝8.02(s，lH，aryl)，4.38(s，3H，N-CH₃)，2.84(m，4H，2CH₂)，2.70(s，3H，CH₃)ppm；

FABMS：227[M-SbCl₆ ^-]；

elemental analysis calcd. for C₉H₁₁Cl₆N₂O₃SSb(561.674)：

C 19.25，H 1.97，N 4.99，Cl 37.87

found：C 19.01，H 1.99，N 4.72，Cl 37.97

实施例7

实验步骤的第一步反应同实施例2，第二步反应同实施例3，所不同的是活化组分为搅拌冷却至-15℃，低温反应完成后，25℃反应后过滤，产物为

¹H NMR：δ＝7.59-8.47(m，4H，aryl)，4.69(q，J＝7Hz，2H，N-CH₂)，2.74(s，3H，CH₃)，1.52(t，J＝7Hz，3H，β-CH₃)ppm；

FABMS：329[M-SbCl₆ ^-]；331[M-SbCl₆ ^-+2]；

elemental analysis calcd.for C₁₃H₁₂Cl₆F₃N₄OSSb(663.737)：

C 23.52，H 1.82，N 8.44

found：C 23.21，H 1.93，N 8.37

实施例8

实验步骤的第一步反应同实施例2，所不同的是在0℃条件下加入2-卤噻唑

有机溶剂为乙酸乙酯，第二步反应同实施例3，所不同的是搅拌冷却至-10℃，活化组分为产物为

¹H NMR：δ＝8.01(s，1H，aryl)，4.61(q，J＝7Hz，2H，N-CH₂)，2.72(s，3H，CH₃)，1.49(t，J＝7Hz，3H，β-CH₃)ppm；

¹⁹F NMR(CF₃COOH)：δ＝-76.29＿-76.99(m，2F)，-80.06＿-80.29(m，2F)，-85.78＿-85.96(m，1F)ppm；

IR(KBr)：ν＝3130，1705，1535，1510，1477，1440，1165，1035，950cm^-1；

FABMS：330[M-SbCl₆ ^-]；

elemental analysis calcd.for C₁₂H₉Cl₆F₅NOSSb(644.679)：

C 22.36，H 1.41，N 2.17，Cl 33.00

found：C 22.31，H 1.41，N 2.16，Cl 32.72

实施例9

实验步骤的第一步反应同实施例2，所不同的是2-卤噻唑是

，第二步反应同实施例3，所不同的是活化组分为

产物为

¹H NMR：δ＝7.75-8.40(m，6H，aryl)，4.59(q，J＝7Hz，2H，N-CH₂)，1.49(t，J＝7Hz，3H，β-CH₃)ppm；

FABMS：251[M-SbCl₆ ^-]；253[M-SbCl₆ ^-+2]；

elemental analysis calcd.for C₁₂H₁₁Cl₆N₂O₃SSb(585.696)：

C 22.56，H 1.89，N 4.78

found：C 22.41，H 1.81，N 5.03

实施例10

实验步骤的第一步反应同实施例2，所不同的是2-卤噻唑是N-烷基化试剂是Et₃O⁺PF₆ ^-，第二步反应同实施例3，所不同的是活化组分为

二异丙基乙基胺，产物为

¹H NMR：δ＝7.42-8.01(m，4H，aryl)，4.57(q，J＝7Hz，2H，N-CH₂)，2.70(s，3H，CH₃)，1.47(t，J＝7Hz，3H，β-CH₃)ppm；

FABMS：356[M-PF₆ ^-]；

elemental analysis calcd. for C₁₄H₁₂F₁₂NOSSb(501.269)：

C 33.55，H 2.41，N 2.79

found：C 33.40，H 2.41，N 2.67

实施例11

实验步骤的第一步反应同实施例2，所不同的是2-卤噻唑是

反应温度为35℃，第二步反应同实施例3，所不同的是活化组分为

+N-甲基吗啡啉，产物为

¹H NMR：δ＝7.49-8.11(m，5H，aryl)，4.61(q，J＝7Hz，2H，N-CH₂)，2.76(s，3H，CH₃)，1.51(t，J＝7Hz，3H，β-CH₃)ppm；

FABMS：289[M-SbF₆ ^-]；291[M-SbF₆ ^-+2]；

elemental analysis calcd.for C₁₃H₁₃F₆N₄O₂SSb(525.021)：

C 29.74，H 2.50，N 10.67

found：C 40.02，H 2.39，N 10.60

实施例12

实验步骤的第一步反应同实施例2，所不同的是2-卤噻唑是有机溶剂为乙酸乙酯，第二步反应同实施例3，所不同的是活化组分为搅拌冷却至-20℃，低温反应后，室温反应得产物为

¹H NMR：δ＝7.45-8.91(m，8H，aryl)，4.59(q，J＝7Hz，2H，N-CH₂)，2.72(s，3H，CH₃)，1.47(t，J＝7Hz，3H，β-CH₃)ppm；

IR(KBr)：ν＝3110，1650，1500，1463，1445，1160，1062，613cm^-1；

FABMS：338[M-SbCl₆ ^-]；

elemental analysis calcd.for C₁₇H₁₆Cl₆N₅OSSb(672.83)：

C 30.35，H 2.40，N 10.41

found：C 30.01，H 2.33，N 10.12

实施例13

实验步骤的第一步反应同实施例2，所不同的是2-卤噻唑是有机溶剂为CH₂Cl₂，第二步反应同实施例3，所不同的是活化组分为搅拌冷却至-25℃，产物为

¹H NMR：δ＝7.60-8.93(m，7H，aryl)，4.55(q，j＝7Hz，2H，N-CH₂)，2.74(s，3H，CH₃)，1.50(t，J＝7Hz，3H，β-CH₃)ppm；

IR(KBr)：ν＝3122，1600，1510，1455，1424，1106，710cm^-1；

FABMS：356[M-SbCl₆ ^-]；

elemental analysis calcd.for C₁₇H₁₅Cl₆FN₅OSSb(690.81)：

C 29.56，H 2.19，N 10.14

found：C 29.27，H 2.11，N 10.06

实施例14

实验步骤同实施例2，所不同的是2-卤噻唑是

有机溶剂为四氢呋喃，反应温度为0-45℃，产物为

¹H NMR：δ＝8.1(s，1H，aryl)，4.6(q，J＝7Hz，2H，N-CH₂)，2.7(s，3H，CH₃)，1.4(t，J＝7Hz，3H，β-CH₃)ppm；

FABMS：162[M-SbCl₆ ^-]；

实施例15

实验步骤同实施例2，所不同的是2-卤噻唑是反应温度为10-55℃，有机溶剂为乙酸乙酯，产物为

¹H NMR：δ＝8.3(m，1H，aryl)，4.6(m，2H，N-CH₂)，2.7(s，3H，CH₃)，1.4(m，3H，β-CH₃)ppm；

FABMS：146[M-SbCl₆ ^-]；

实施例16

实验步骤的第一步反应同实施例14，第二步反应同实施例3，所不同的是活化组分为

产物为

¹H NMR：δ＝7.25-7.91(m，6H，aryl)，4.50(q，J＝7Hz，2H，N-CH₂)，2.69(s，3H，CH₃)，1.44(t，J＝7Hz，3H，β-CH₃)ppm；

FABMS：338[M-SbCl₆ ^-]；

elemental analysis calcd.for C₁₇H₁₆Cl₆N₅OSSb(689.78)

C 26.12，H 2.05，N 8.12

found：C 36.54，H 2.23，N 8.12

实施例17

实验步骤的第一步反应同实施例14，所不同的是N-烷基化试剂是CF₃SO₂OCH₂CH₂CH₂CH₂CH₃，有机溶剂为CH₂Cl₂，第二步反应同实施例

3，所不同的是搅拌冷却至-5℃-25℃，产物为

¹H NMR：δ＝7.44-8.10(m，5H，aryl)，4.60(m，2H，α-CH₂)，2.52-2.88(m，7H，β-CH₂，γ-CH₂，CH₃)，1.67(m，2H，δ-CH₂)，1.08(m，3H，ε-CH₃)ppm；

FABMS：303[M-CF₃SO₃ ^-]；305[M-CF₃SO₃ ^-+2]；

elemental analysis calcd.for C₁₆H₁₉F₃N₄O₄S₂(452.46)：

C 42.47，H 4.23，N 12.38

found：C 42.11，H 4.01，N 12.44

实施例18

实验步骤的第一步反应同实施例15，所不同的是N-烷基化试剂是CF₃SO₂OPh，第二步反应同实施例3，所不同的是搅拌冷却至-20℃-25℃，产物为

¹H NMR：δ＝7.48-8.12(m，10H，aryl)，2.74(s，3H，CH₃)ppm；

IR(KBr)：ν＝3110，1600，1490，1445，1165，1055，764cm^-1；

FABMS：309[M-CF₃SO₃ ^-]；311[M-CF₃SO₃ ^-+2]；

elemental analysis calcd.for C₁₇H₁₃F₃N₄O₄S₂(458.43)：

C 44.54，H 2.86，N 12.22

found：C 44.20，H 3.71，N 12.34

实施例19

实验步骤的第一步反应同实施例2，所不同的是N-烷基化试剂是CF₃SO₂OC₆H₄-P，有机溶剂为DMSO，第二步反应同实施例3，所不同的是搅拌冷却至0-25℃，产物为

¹H NMR：δ＝7.54-8.09(m，9H，aryl)，2.77(s，3H，CH₃)ppm；

FABMS：343[M-CF₃SO₃ ^-]；345[M-CF₃SO₃ ^-+2]；

elemental analysis calcd.for C₁₇H₁₂ClF₃N₄O₄S₂(492.87)：

C 41.43，H 2.45，N 11.37

found：C 41.49，H 2.43，N 11.09

实施例20

以下列噻唑正离子多肽缩合剂：合成含N-烷基化氨基酸和α，α-二烷基化氨基酸的多肽：Z-MeVal-MeVal-OCH₃，Z-MeVal-MeVal-MeVal-OCH₃，Fmoc-MeLeu-MeVal-OCH₃，Fmoc-MeLeu-MeVal-MeVal-OBu^t等的合成中均以高收率，低消旋得到目标产物。合成通用步骤：将1mol N-端保护的氨基酸或多肽片段，1mol C-端保护的氨基酸或多肽片段酯的盐酸盐或三氟醋酸盐和1mol缩合剂溶于DMF或CH₂Cl₂中，在低温0℃＿-10℃的条件下缓慢加入3mol的有机碱二异丙基乙基胺或2，6-二甲基吡啶，加完后低温反应五分钟，然后室温反应，通过薄层色谱鉴定反应终点，产率结果依次如下：

编号	Peptide^a	得率(％)				m.p.(℃)	[a]_D(conc.，solv.，temp)
编号	Peptide^a	得率(％)				m.p.(℃)	[a]_D(conc.，solv.，temp)	1	Z-MeVal-MeVal-OMe	88.2	87.6	89.4	88.5	oil	-207(1，MeOH，19℃)
2	Z-Aib*-Aib-OCH₃	94.6	93.2	95.6	94.7	109-110	-	1	Z-MeVal-MeVal-OMe	88.2	87.6	89.4	88.5	oil	-207(1，MeOH，19℃)
2	Z-Aib*-Aib-OCH₃	94.6	93.2	95.6	94.7	109-110	-	3	Fmoc-MeLeu*-MeVal-OBu^t	90.7	89.8	91.2	90.4	oil	-102.7(1，CHCl₃，22℃)
4	Fmoc-MeLeu*-MeLeu-MeVal-OBu^t	87.1	86.5	87.9	87.5	-	-152.1(1，CHCl₃，22℃)	3	Fmoc-MeLeu*-MeVal-OBu^t	90.7	89.8	91.2	90.4	oil	-102.7(1，CHCl₃，22℃)
4	Fmoc-MeLeu*-MeLeu-MeVal-OBu^t	87.1	86.5	87.9	87.5	-	-152.1(1，CHCl₃，22℃)	5^b	Fmoc-D-Ala*-MeLeu-MeLeu-MeVal-OBu^t	89.4	88.2	91.3	90.6	-	-168(0.1，CHCl₃，22℃)
6	Fmoc-Nva-Sar*-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-OBzl	85.7	85.1	88.3	87.2	80-81	-114.6(1，CHCl₃，22℃)	5^b	Fmoc-D-Ala*-MeLeu-MeLeu-MeVal-OBu^t	89.4	88.2	91.3	90.6	-	-168(0.1，CHCl₃，22℃)
6	Fmoc-Nva-Sar*-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-OBzl	85.7	85.1	88.3	87.2	80-81	-114.6(1，CHCl₃，22℃)	7^b	Fmoc-MeLeu*-Nva-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala-OBzl	92.1	90.4	95.3	94.1	48-49	-114.8(0.5，CHCl₃，22℃)

注：^b*代表CO-NH键形成位置，所有产品均经¹H NMR，EIMS和其他方式鉴定，结构正确无误。^b进一步经过HMQC和ESI-MS鉴定。

Claims

1、一种噻唑正离子型多肽缩合剂，其特征在于分子通式为：其中R₁、R₂、R₃＝H、C_nH_2n+1，n＝1-5、苯基、取代苯基；R₄＝F，Cl，Br其中R₅、R₆＝CF₃、NO₂，X＝CH、N，

2、如权利要求1所述的噻唑正离子型多肽缩合剂，其特征在于其中R₄＝F、Cl、Br。

3、一种如权利要求1所述的噻唑正离子型多肽缩合剂的合成方法，其特征在于以2-卤噻唑为原料，在有机溶剂、0-60℃的条件下与N-烷基化试剂反应后，和/或在-30-25℃的温度下、与相应的活化组分反应得到相应的缩合剂，反应式如下：其中：X＝F、Cl、Br；R₁＝H，C_nH_2n+1、n＝1-5，苯基，取代苯基；所述的活化组分为KR₄或HR₄+有机碱，R₄＝F，Cl，Br，

其中R₅、R₆＝CF₃、NO₂，X＝CH、N，

4、如权利要求3所述的吡啶正离子型多肽缩合剂的合成方法，其特征在于有机溶剂为极性非质子性溶剂；N-烷基化试剂为(R₁)₃O⁺BF₄ ^-，(R₁)₃O⁺SbCl₆ ^-，(R₁)₃O⁺SbF₆ ^-，(R₁)₃O⁺BOg₄ ^-，CF₃SO₂R₁，(R₁)₃O⁺PF₆ ^-。

5、如权利要求3所述的噻唑正离子型多肽缩合剂的合成方法，其特征在于有机碱是三乙胺，二异丙基乙基胺，吡啶，N-甲基吗啡啉，N-甲基咪唑。

6、如权利要求2所述的噻唑正离子型多肽缩合剂的用途，其特征在于应用于有空间位阻的含N-烷基化氨基酸或α-碳二烷基化氨基酸的多肽的合成。