CN110257290B - 一种植物病原菌抑制剂及其所用菌株与应用 - Google Patents

一种植物病原菌抑制剂及其所用菌株与应用 Download PDF

Info

Publication number
CN110257290B
CN110257290B CN201910548314.8A CN201910548314A CN110257290B CN 110257290 B CN110257290 B CN 110257290B CN 201910548314 A CN201910548314 A CN 201910548314A CN 110257290 B CN110257290 B CN 110257290B
Authority
CN
China
Prior art keywords
streptomyces
strain
botrytis cinerea
disease
bacteria
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201910548314.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110257290A (zh
Inventor
赵娟
刘伟成
张殿朋
刘霆
刘德文
吴慧玲
卢彩鸽
董丹
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences
Original Assignee
Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences filed Critical Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences
Priority to CN201910548314.8A priority Critical patent/CN110257290B/zh
Publication of CN110257290A publication Critical patent/CN110257290A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110257290B publication Critical patent/CN110257290B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/10—Animals; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/465—Streptomyces

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

本发明公开了一种植物病原菌抑制剂及其所用菌株与应用。该菌株是白黑链霉菌T22，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.14190。白黑链霉菌T22对果蔬作物灰霉病菌、桃褐腐病菌及辣椒炭疽病菌等均具有抑制作用。白黑链霉菌T22无菌发酵滤液能够有效抑制草莓灰霉病菌、番茄灰霉病菌及黄瓜枯萎病菌菌丝生长。白黑链霉菌能够通过产生纤维素酶和几丁质酶，在产酶活性检测培养基上形成水解圈。说明白黑链霉菌T22能够通过产生抗生素类活性物质和水解酶类物质抑制植物病原真菌。白黑链霉菌T22无菌发酵滤液适当稀释后可显著促进番茄胚轴和/或胚根伸长，增强番茄种子发芽势。

Description

一种植物病原菌抑制剂及其所用菌株与应用
本申请是申请号为201710506536.4、申请日为2017年06月28日、发明创造名称为“一株防病促生的白黑链霉菌及其代谢产物的制备与应用”的分案申请。
技术领域
本发明属于微生物农药技术领域，具体涉及一种植物病原菌抑制剂及其所用菌株与应用。
背景技术
由半知菌亚门真菌灰葡萄孢(Botrytis cinera)侵染所致的灰霉病在多种果蔬作物栽培中发生普遍且严重。该病害可危害植物的茎、叶、花和果实，在潮湿多雨及温室大棚环境中发生尤为严重。我国果蔬灰霉病的防治目前主要依靠化学药剂，但是长期大量使用化学药剂存在农药残留、病原菌容易产生抗药性以及环境污染等问题。探索新型高效、广谱、低毒、环保的植物病害防治技术是当今农业生产研究的难点和热点。生物防治具有安全无污染、病原菌不易产生抗药性等特点，是果蔬病害绿色防控的有效途径。国内外目前已有关于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、多粘芽孢杆菌(Bacillus polymyxa)、木霉菌(Trichoderma spp.)等微生物对果蔬作物灰霉病防治效果的研究。由于灰霉病病原菌种内变异大，病害发生后传播速度快、有效防治困难，合理开发现有微生物资源，创制新型生防制剂、增添微生物农药种类，对于果蔬病害绿色防控和无公害农产品生产具有重要意义。
放线菌(Actinomycete)广泛存在于土壤、海洋等不同的自然生态环境中，具有种类繁多、代谢功能各异等特点，是一类具有实际应用价值的微生物种群。从微生物中发现的生物活性物质中有70％来自放线菌，其中约50％是链霉菌属的代谢产物。筛选具有拮抗植物病原真菌活性的放线菌资源，开发可逐步替代化学农药的新型微生物农药产品对于果蔬作物灰霉病绿色防控具有重要意义。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是如何抑制果蔬作物病原菌并促进果蔬作物生长。
为解决以上技术问题，本发明提供了一株白黑链霉菌。
本发明所提供的白黑链霉菌，是菌株号为T22的白黑链霉菌(Streptomycesalboniger)，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.14190。下文简称白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22。
白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22具有序列表中序列1所示的16S rDNA序列，白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22在高氏一号培养基上气生菌丝白色，无可溶性色素或日久产生淡黄色色素(图1)。显微镜下可观察到白黑链霉菌(Streptomycesalboniger)T22气生菌丝直至柔曲，孢子成链，卵圆形(图2)。
白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22的培养物也属于本发明的保护范围。
白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22的培养物是将白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22在微生物液体发酵培养基中培养得到的物质。
为解决以上技术问题，本发明提供了病原菌抑制剂。
本发明所提供的病原菌抑制剂，含有白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22和/或白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22的代谢物。
上述病原菌抑制剂的活性成分可为白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22和/或白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22的代谢物，上述病原菌抑制剂的活性成分还可含有其他生物成分或非生物成分，上述病原菌抑制剂的其他活性成分本领域技术人员可根据对病原菌的抑制效果确定。
上述病原菌抑制剂中，所述病原菌抑制剂可对下述至少一种病原菌具有抑制作用：
A、灰霉病菌；
B、核果褐腐病菌；
C、辣椒炭疽病菌；
D、枯萎病菌；
E、马铃薯早疫病菌；
F、小麦纹枯病菌；
G、茄子青枯病菌；
H、黄瓜角斑病菌。
为解决以上技术问题，本发明提供了病害抑制剂。
本发明所提供的病害抑制剂，含有白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22和/或白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22的代谢物。
上述病害抑制剂的活性成分可为白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22和/或白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22的代谢物，上述病害抑制剂的活性成分还可含有其他生物成分或非生物成分，上述病害抑制剂的其他活性成分本领域技术人员可根据对病害的抑制效果确定。
上述病害抑制剂中，所述病害为下述至少一种：
a、灰霉病；
b、核果褐腐病；
c、辣椒炭疽病；
d、枯萎病；
e、马铃薯早疫病；
f、小麦纹枯病；
g、茄子青枯病；
h、黄瓜角斑病。
白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22和/或白黑链霉菌(Streptomycesalboniger)T22的代谢物的下述任一种应用也属于本发明的保护范围：
1)在抑制病原菌中的应用；
2)在制备病原菌抑制剂中的应用；
3)在抑制病害中的应用；
4)在制备病害抑制剂中的应用。
上述应用中，所述病原菌可为下述至少一种：
A、灰霉病菌；
B、核果褐腐病菌；
C、辣椒炭疽病菌；
D、枯萎病菌；
E、马铃薯早疫病菌；
F、小麦纹枯病菌；
G、茄子青枯病菌；
H、黄瓜角斑病菌。
所述病害可为下述至少一种：
a、灰霉病；
b、核果褐腐病；
c、辣椒炭疽病；
d、枯萎病；
e、马铃薯早疫病；
f、小麦纹枯病；
g、茄子青枯病；
h、黄瓜角斑病。
白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22和/或白黑链霉菌(Streptomycesalboniger)T22的代谢物的下述任一种应用也属于本发明的保护范围：
H、在促进植物种子萌发中的应用；
I、在促进植物种子胚轴和/或胚根生长中的应用；
J在提高植物种子发芽势中的应用。
上述应用中，所述植物可为下述任一种植物：
P1)番茄；
P2)番茄属植物；
P3)茄科植物。
上文中，白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22的代谢物可从白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22的发酵液中获得。所述白黑链霉菌(Streptomycesalboniger)T22的代谢物可为白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22的无菌代谢物。白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22的无菌代谢物(无菌发酵滤液)具体可按照如下方法制备：在液体培养基中培养白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22，过滤除去液体培养物(发酵液)中的白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22即得到白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22的无菌代谢物。
本申请中，所述灰霉病菌可为番茄灰霉病菌、葡萄灰霉病菌和/或草莓灰霉病菌；所述核果褐腐病菌可为桃褐腐病菌；所述枯萎病菌可为黄瓜枯萎病菌、甘蓝枯萎病菌和/或棉花枯萎病菌。所述灰霉病可为番茄灰霉病、葡萄灰霉病和/或草莓灰霉病，所述核果褐腐病可为桃褐腐病；所述枯萎病可为黄瓜枯萎病、甘蓝枯萎病和/或棉花枯萎病。
上文中，所述病原菌抑制剂和病害抑制剂中，除所述活性成分外，还含有载体。所述载体可为农药领域常用的且在生物学上是惰性的载体。所述载体可为固体载体或液体载体；所述固体载体可为矿物材料、植物材料或高分子化合物；所述矿物材料可为粘土、滑石、高岭土、蒙脱石、白碳、沸石、硅石和硅藻土中的至少一种；所述植物材料可为玉米粉、豆粉和淀粉中的至少一种；所述高分子化合物可为聚乙烯醇和/或聚二醇；所述液体载体可为有机溶剂、植物油、矿物油或水；所述有机溶剂可为癸烷和/或十二烷。
所述病原菌抑制剂和病害抑制剂中，白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22可以孢子、菌丝或含有孢子和/或菌丝的培养物的形式存在。
所述病原菌抑制剂和病害抑制剂的剂型可为多种剂型，如液剂、乳剂、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、可湿性粉剂或水分散粒剂。
根据需要，所述病原菌抑制剂和病害抑制剂中还可添加表面活性剂(如吐温20、吐温80等)、粘合剂、稳定剂(如抗氧化剂)、pH调节剂等。
本发明以果蔬病害病原真菌为靶标，从青藏高原特殊生境土壤中分离筛选获得一株兼具防病促生作用的微生物菌种-白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22，对包括灰霉病菌在内的多种植物病原真菌具有良好的广谱拮抗活性，其无菌发酵滤液能够有效促进番茄种子发芽，并对番茄灰霉病具有良好的离体防效，因此可应用于果蔬真菌病害尤其是灰霉病的绿色防控，为制备微生物农药新产品提供新资源。
白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22对果蔬作物灰霉病菌、桃褐腐病菌及辣椒炭疽病菌等均具有抑制作用(表3，图4)。白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液能够有效抑制草莓灰霉病菌、番茄灰霉病菌及黄瓜枯萎病菌菌丝生长(图5)。同时白黑链霉菌T22能够通过产生纤维素酶和几丁质酶在产酶活性检测培养基上形成水解圈(图6)。说明白黑链霉菌T22能够通过产生抗生素类活性物质和水解酶类物质抑制植物病原真菌。白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液适当稀释后可显著促进番茄胚轴和/或胚根伸长，增强番茄种子发芽势。与对照相比，白黑链霉菌(Streptomycesalboniger)T22无菌发酵滤液100倍稀释液显著增加了番茄胚轴、胚根长度，提高了番茄种子发芽势，增幅分别高达15.1％、29.7％和43.9％；白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液200倍稀释液处理的番茄种子，其胚轴、胚根长度和种子发芽势较对照增加了8.8％、18.1％和32.3％(表4)。白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌代谢物(无菌发酵滤液)喷施处理番茄离体叶片能够明显降低番茄灰霉病病斑直径，白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌代谢物(无菌发酵滤液)处理对番茄灰霉病离体防效达到55.1％(表5)。说明白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液喷施处理对番茄离体叶片灰霉病具有良好的防治效果(图7)。白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22能够人工培养，培养条件简单、产孢良好，制成生防菌剂适于工业化生产，具有良好的开发应用前景。
保藏说明
菌种名称：白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)
菌株编号：T22
保藏机构：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
保藏机构简称：CGMCC
地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号
保藏日期：2017年05月25日
保藏中心登记入册编号：CGMCC No.14190
附图说明
图1为菌株T22在高氏一号琼脂培养基上的菌落形态。
图2为菌株T22在40倍光学显微镜下的菌丝和孢子形态。
图3为基于菌株T22 16S rDNA序列构建的系统进化树，其中菌株T22与白黑链霉菌Streptomyces alboniger菌株(NR043228、AB184331)聚在同一分支上，相似性达99％。
图4为菌株T22对病原真菌的平皿拮抗效果，其中a、b、c分别为菌株T22对番茄灰霉病菌、桃褐腐病菌、辣椒炭疽病菌的抑制作用。
图5为菌株T22无菌发酵滤液对植物病原真菌的抑制作用，a、c、e分别为未加入菌株T22无菌发酵液PDA培养基上黄瓜枯萎病菌、番茄灰霉病菌、草莓灰霉病菌菌落，b、d、f分别为加入菌株T22无菌发酵滤液PDA培养基上黄瓜枯萎病菌、番茄灰霉病菌、草莓灰霉病菌菌落。
图6为菌株T22产纤维素酶和几丁质酶情况，a、b分别为菌株T22在纤维素刚果红培养基和胶体几丁质刚果红培养基上产生的水解圈。
图7为菌株T22无菌发酵滤液对番茄灰霉病的离体防效其中，a、b未接种液体培养基喷施+灰霉病菌，c、d菌株T22无菌发酵滤液喷施+灰霉病菌，e、f 50％咯菌腈1000倍液喷施+灰霉病菌。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下述实施例中所用到的病原菌公众可从野外采集，也可从北京市农林科学院获得，以重复本申请实验：
番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporumf.sp.cucumerinum)、桃褐腐病菌(Monilinia fructicola)、辣椒炭疽病菌(Colletotrichum capsici)、棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum)、甘兰枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.conglutinans)、小麦纹枯病菌(Rhizoctoniacereali)、串珠镰刀病菌(Fusarium moniliforme)、茄子青枯病菌(Ralstoniasolanacearum)、大白菜黑腐病菌(Xanthomonas campestris pv.campsetris)(王俊丽等.一株芽孢杆菌QD-10的鉴定及生防特性分析.中国生物防治学报,2014,30(4):564-572.)。
马铃薯早疫病菌(Alternaria alternata)(Zheng,et al.Characterization ofAlternaria species associated with potato foliar diseases in China.Plantpathology,2015,64:425-433.)。
草莓灰霉病菌(Botrytis cinerea)、葡萄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、黄瓜角斑病菌(Pseudomonas syringae pv.lachrymans)(卢彩鸽等.一株甘兰枯萎病拮抗细菌的筛选、鉴定及其抑菌活性测定.华北农学报,2014,29(1):195-202.)。
实施例1、白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22的分离与鉴定
1.1菌株分离
该菌株从中国青海省青藏高原特殊生境土样中分离获得。菌株采用稀释平板法分离，具体操作方法如下：称取土壤样品10g，倒入装有小玻璃珠和90mL无菌水的三角瓶中，振荡30min后静置5min，依次稀释10倍，分别配制成10-2、10-3、10-4、10-5、10-6的悬浮液，吸取不同浓度的悬浮液各0.1mL加到高氏一号培养基(加入终浓度为75mg/L的K2CrO7)平板上，均匀涂布后置于28℃培养观察，5-7天后挑取不同的单菌落划线纯化。将纯化后的菌株转接到高氏一号斜面培养基上培养，4℃保存备用。取编号为T22的菌株(简称菌株T22)进行下述鉴定。
1.2菌株鉴定
1.2.1菌株形态观察
将菌株T22接种于《链霉菌鉴定手册》推荐的培养基上，28℃培养7-10d观察菌株生长情况，记录气生菌丝的颜色、基内菌丝的颜色以及可溶性色素的有无及颜色。将菌株T22划线接种在高氏一号培养基上，以45度角斜插入无菌盖玻片，28℃培养7d后，取出盖玻片在光学显微镜下观察菌丝和孢子的形态特征。
菌株T22在高氏一号琼脂、葡萄糖天门冬素琼脂、马铃薯琼脂、酵母膏麦芽膏琼脂、燕麦粉琼脂培养基上生长良好，气生菌丝白色；在蔗糖硝酸盐琼脂、无机盐淀粉琼脂培养基上气生菌丝白色至淡橄榄软皮黄色、淡绿灰黄色。菌株T22在高氏一号琼脂、蔗糖硝酸盐琼脂培养基上无可溶性色素，在葡萄糖天门冬素琼脂、马铃薯琼脂、酵母膏麦芽膏琼脂、燕麦粉琼脂、无机盐淀粉琼脂培养基上可溶性色素暗黄色至黑色(表1)。显微镜下可以观察到菌株T22气生菌丝直至柔曲，孢子成链，卵圆形(图2)。根据以上形态特征将T22初步鉴定为链霉菌属(Streptomyces sp.)。
其中高氏一号琼脂：可溶性淀粉20.0g，NaCl 0.5g，KNO3 1.0g，K2HPO4 0.5g，MgSO4·7H2O 0.5g，FeSO4 0.02g，琼脂18.0g，蒸馏水1000mL，pH 7.2-7.4，121℃灭菌30min。
蔗糖硝酸盐琼脂：蔗糖50.0g，KNO3 0.2g，琼脂18.0g，蒸馏水1000mL，pH 7.2，121℃灭菌30min。
葡萄糖天门冬素琼脂：葡萄糖10.0g，天门冬素0.5g，牛肉膏2.0g，K2HPO40.5g，琼脂18.0g，蒸馏水1000mL，pH 7.2，121℃灭菌30min。
马铃薯琼脂：马铃薯浸汁200mL，蔗糖20.0g，琼脂18.0g，蒸馏水1000mL，pH 7.2-7.4，121℃灭菌30min。
酵母膏麦芽膏琼脂培养基(ISP2)：酵母膏4.0g，麦芽膏10.0g，葡萄糖4.0g，微量盐溶液1.0mL，琼脂18.0g，蒸馏水1000mL，pH 7.2，121℃灭菌30min。燕麦粉琼脂(ISP3)：燕麦片20.0g(加水1000m L煮沸20min后过滤并补水至1000mL)，微量盐溶液1.0mL，琼脂18.0g，蒸馏水1000mL，pH 7.2，121℃灭菌30min。
无机盐淀粉琼脂(ISP4)：可溶性淀粉10.0g，K2HPO4 2.0g，MgSO4·7H2O 1.0g，(NH4)2SO4 2.0g，CaCO3 2.0g，微量盐溶液1.0mL，琼脂18.0g，蒸馏水1000mL，pH 7.2，121℃灭菌30min。
微量盐溶液：FeSO4·7H2O 0.1g，MnCl2·4H2O 0.1g，ZnSO4·7H2O 0.1g，蒸馏水1000mL。
表1菌株T22在不同培养基上的形态特征
培养基 气生菌丝 基内菌丝 可溶性色素
高氏一号琼脂 白色 微黄至黄褐色 无
蔗糖硝酸盐琼脂 白色至淡绿灰黄色 白色 无
葡萄糖天门冬素琼脂 白色 黑灰色 黑灰色
马铃薯琼脂 白色 黄色 暗绿黑色
酵母膏麦芽膏琼脂(ISP2) 白色 微黄色 暗黄色
燕麦粉琼脂(ISP3) 白色 无色至微黄色 暗黄色
无机盐淀粉琼脂(ISP4) 白色至淡橄榄软皮黄色 微黄色 黑色
1.2.2菌株生理生化特性检测
生理生化特性主要检测菌株对主要碳源的利用情况以及产素活性。菌株T22能够利用D-葡萄糖、L-阿拉伯糖、D-甘露醇、肌醇、麦芽糖、棉子糖，不能利用L-鼠李糖、蔗糖、木糖、果糖。菌株T22牛奶胨化、淀粉水解、明胶液化阳性，不产生纤维素、黑色素、硫化氢(表2)。
表2菌株T22生理生化特性
Figure BDA0002104732440000081
Figure BDA0002104732440000091
注：“+”为阳性，“-”为阴性。
1.2.3菌株分子生物学鉴定
挑取菌株T22接种于高氏一号琼脂培养基上，28℃培养7d收集菌体。采用细菌基因组提取试剂盒提取菌株T22基因组DNA后，利用细菌通用引物27f：5’-AGA GTT TGA TCC TGGCTC AG-3’和1492r：5’-TAC GGC TAC CTT GTT ACG ACT T-3’进行菌株T22的16S rDNA序列PCR扩增。回收PCR扩增产物，经连接、转化、鉴定后，阳性克隆送北京博迈德生物技术公司测序，菌株T22具有序列表中序列1的16S rDNA序列。将所得序列采用Blast软件在GenBank进行同源性比较，Clustal X软件进行多序列比对，
MEGA5.0软件中Neighbor-Joining法构建系统进化树。
BLAST分析比对，发现与菌株T22同源性较高的菌株均属于链霉菌属，选取相似性较高菌株的16S rDNA序列采用MEGA5.0软件构建系统发育树(图3)。结果表明，菌株与Streptomyces alboniger(NR043228、AB184331)属于同一分支，相似性达到99％，并结合形态学特征和培养特征，将菌株T22鉴定为白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)。
白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22已于2017年05月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.14190。下文称为白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22或菌株T22。
实施例2、白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22的抑菌活性
2.1琼脂块法：无菌移液管吸取5mL无菌水于供试靶标病原菌培养物斜面，用竹签将菌丝刮下制备病原菌悬液，用1mL无菌移液管吸取0.1mL菌悬液均匀涂布于PDA(病原真菌)或LB(病原细菌)平板上。
供试病原真菌为番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、草莓灰霉病菌(Botrytiscinerea)、葡萄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、桃褐腐病菌(Monilinia fructicola)、辣椒炭疽病菌(Colletotrichum capsici)、交链格孢菌(Alternaria alternata)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum)、棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporumf.sp.vasinfectum)、甘蓝枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.conglutinans)、小麦纹枯病菌(Rhizoctonia cereali)、串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme)。
供试病原细菌为茄子青枯病菌(Ralstonia solanacearum)、大白菜黑腐病菌(Xanthomonas campestris pv.campsetris)、黄瓜角斑病菌(Pseudomonas syringaepv.lachrymans)。
打孔器切取高氏1号平板上培养7d的、直径为0.7cm的白黑链霉菌(Streptomycesalboniger)T22琼脂块，接种于涂有病原菌的平板上。病原真菌25℃培养4d、病原细菌28℃培养2d后，测量拮抗圈直径。结果表明白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22对包括番茄灰霉病菌在内的多种植物病原菌表现出良好的皿内拮抗性(图4)，拮抗圈直径为12-26mm(表3)。
表3白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22对供试病原菌的拮抗圈直径
Figure BDA0002104732440000101
2.2生长速率法
2.2.1白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液的制备
接种环挑取平板上生长好的白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22接种到装有100mL液体发酵培养基的500mL三角瓶中，28℃摇床180rpm振荡培养7d，收集发酵液，10000rpm、4℃离心10min去除菌体，发酵液上清液采用0.22μm微孔滤膜过滤发酵液除去培养物中的白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22菌体，得到白黑链霉菌(Streptomycesalboniger)T22无菌发酵滤液(简称菌株T22无菌发酵滤液)。其中，液体发酵培养基为高氏一号液体培养基：可溶性淀粉20g，KNO3 1g，K2HPO4 0.5g，MgSO4·7H2O 0.5g，NaCl 0.5g，FeSO4·7H2O 0.01g用蒸馏水定容到1000mL，121℃条件下灭菌20min，得液体发酵培养基。
2.2.2病原菌菌饼制备
向已培养5d的黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)和草莓灰霉病菌(Botrytis cinerea)斜面中各加入无菌水4mL，用竹签将菌丝刮下制备病原菌菌悬液。用1mL无菌移液管吸取0.1mL菌悬液涂布于PDA平板上，28℃培养5d后，病原菌菌落长满PDA平板，用无菌打孔器制成直径7mm圆形病原菌菌饼。
2.2.3拮抗菌无菌发酵滤液抑菌率测定
将白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液与冷却至50℃左右的PDA培养基按体积比1:4混匀后倒平板,用灭菌竹签挑取上述供试病原菌菌饼于平板中央菌面朝上，每处理重复3次，以无菌水代替无菌发酵滤液为对照。25℃培养4d用十字交叉法测量菌落直径，计算抑菌率。抑菌率％＝(对照菌落直径－处理菌落直径)/对照菌落直径×100。供试病原真菌在含有菌株T22无菌发酵滤液的PDA平板上几乎不生长，而在无菌水对照PDA平板上生长正常(图5)。菌株T22无菌发酵滤液对黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporumf.sp.cucumerinum)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)和草莓灰霉病菌(Botrytiscinerea)菌丝生长具有明显的抑制作用，抑菌率分别为79.1％、84.6％和85.5％。
实施例3、白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22产纤维素酶和几丁质酶活性
接种环挑取平板上生长好的白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22于产纤维素酶培养基和产几丁质酶培养基，28℃培养7d后，向平板中加入2g/L的刚果红染液5mL，染色30min后去离子水冲洗干净，再用1M的NaCl溶液脱色，去离子水冲洗干净，观察菌落周围形成水解圈情况。
产纤维素酶培养基：纤维素粉5.0g，(NH4)2SO4 2.0g，KH2PO4 1.0g，
NaCl 0.5g，MgSO4·7H2O 0.5g，琼脂18.0g，蒸馏水1000
mL。
产几丁质酶培养基：胶体几丁质2.5g，K2HPO4 0.7g，K2HPO4 0.3g，MgSO4·7H2O0.5g，FeSO4·7H2O 0.01g，琼脂18.0g，蒸馏水1000mL。
结果表明白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22周围有水解圈形成，说明白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22能够产生纤维素酶和几丁质酶(图6)。
实施例4、白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液对种子发芽的影响
4.1白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液的制备
接种环挑取平板上生长好的白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22接种到装有100mL液体发酵培养基的500mL三角瓶中，28℃摇床180rpm振荡培养7d，收集发酵液，采用0.22μm微孔滤膜过滤发酵液除去培养物中的白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22菌体，得到白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液。其中，液体发酵培养基为高氏一号液体培养基：可溶性淀粉20g，KNO3 1g，K2HPO4 0.5g，MgSO4·7H2O 0.5g，NaCl0.5g，FeSO4·7H2O 0.01g用蒸馏水定容到1000mL，121℃条件下灭菌20min，得液体发酵培养基。
4.2白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液稀释液制备
将步骤4.1的白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液分别用无菌水稀释10倍、100倍、200倍、500倍，得到白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液10倍稀释液、白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液100倍稀释液、白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液200倍稀释液和白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液500倍稀释液。
4.3种子发芽试验
选取颗粒饱满、大小一致的番茄(佳粉1号)种子，采用步骤4.2的白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液10倍稀释液、100倍稀释液、200倍稀释液和500倍稀释液浸泡种子，用等体积的步骤4.1的液体发酵培养基(无菌)作为对照。每个处理设三次重复，每次重复设10粒种子。28℃培养24h，收集种子，无菌水冲洗干净种子后，将其放在铺有两层无菌水浸湿滤纸的培养皿中，28℃保湿培养5d，统计发芽率，测量胚轴、胚根长度。
实验结果表明，与对照相比白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液100倍稀释液显著增加了番茄胚轴、胚根长度，提高了番茄种子发芽势，增幅分别高达15.1％、29.7％和43.9％；白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液200倍稀释液处理的番茄种子，其胚轴、胚根长度和种子发芽势较对照增加了8.8％、18.1％和32.3％(表4)。
表4白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液对番茄种子发芽的影响
Figure BDA0002104732440000121
Figure BDA0002104732440000131
实施例5、白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22发酵液对番茄灰霉病离体防治效果
采用离体叶片法，选取30片大小一致的番茄植株顶端叶片，2％(w/v)次氯酸钠消毒3min，自来水冲洗晾干。试验设3组处理，每组处理10片叶片，包括未接种液体培养基喷施+灰霉病菌处理，菌株T22发酵液喷施+灰霉病菌处理，50％咯菌腈1000倍液喷施+灰霉病菌处理(图7)。
1、菌株T22发酵液喷施+灰霉病菌处理：用实施例4的步骤4.1的白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液对番茄叶片进行喷施处理，直到布满叶片，24h后采用灭菌打孔器切取直径7mm的番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)菌饼接种于处理叶片中央。
2、未接种液体培养基喷施+灰霉病菌处理：用实施例4的步骤4.1的液体发酵培养基(无菌)替换实施例4的步骤4.1的白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液，其它操作同步骤1。作为空白对照。
3、50％咯菌腈1000倍液喷施+灰霉病菌喷施处理：用50％咯菌腈1000倍液替换实施例4的步骤4.1的白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液，其它操作同步骤1。作为化学药剂对照。
7d后测量处理和对照番茄叶片病斑直径，根据公式：防效％＝(空白对照平均病斑直径—处理平均病斑直径)/空白对照平均病斑直径×100％，计算菌株T22发酵液对番茄灰霉病的离体防效。结果表明白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液(无菌代谢物)喷施处理番茄离体叶片能够明显降低番茄灰霉病病斑直径，白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液(无菌代谢物)处理番茄灰霉病的离体防效达到55.1％(表5)。
表5、白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)T22无菌发酵滤液对番茄灰霉病离体防效
处理 病斑直径cm 防效％
未接种液体培养基喷施+灰霉病菌 2.16±0.23 -
菌株T22发酵液喷施+灰霉病菌 0.97±0.21 55.1％
50％咯菌腈1000倍液喷施+灰霉病菌 0.84±0.09 61.1％
<110> 北京市农林科学院
<120> 一种植物病原菌抑制剂及其所用菌株与应用
<160> 1
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 1310
<212> DNA
<213> 白黑链霉菌（Streptomyces alboniger）
<400> 1
agtggcgaac gggtgagtaa cacgtgggca atctgccctt cactctggga caagccctgg 60
aaacggggtc taataccgga taacacctcc actctcctga gtggaggtta aaagctccgg 120
cggtgaagga tgagcccgcg gcctatcagc ttgttggtga ggtaatggct caccaaggcg 180
acgacgggta gccggcctga gagggcgacc ggccacactg ggactgagac acggcccaga 240
ctcctacggg aggcagcagt ggggaatatt gcacaatggg cgaaagcctg atgcagcgac 300
gccgcgtgag ggatgacggc cttcgggttg taaacctctt tcagcaggga agaagcgaaa 360
gtgacggtac ctgcagaaga agcgccggct aactacgtgc cagcagccgc ggtaatacgt 420
agggcgcaag cgttgtccgg aattattggg cgtaaagagc tcgtaggcgg cttgtcacgt 480
cgggtgtgaa agcccggggc ttaaccccgg gtctgcattc gatacgggct agctagagtg 540
tggtagggga gatcggaatt cctggtgtag cggtgaaatg cgcagatatc aggaggaaca 600
ccggtggcga aggcggatct ctgggccatt actgacgctg aggagcgaaa gcgtggggag 660
cgaacaggat tagataccct ggtagtccac gccgtaaacg gtgggaacta ggtgttggcg 720
acattccacg tcgtcggtgc cgcagctaac gcattaagtt ccccgcctgg ggagtacggc 780
cgcaaggcta aaactcaaag gaattgacgg gggcccgcac aagcagcgga gcatgtggct 840
taattcgacg caacgcgaag aaccttacca aggcttgaca tacaccggaa agcatcagag 900
atggtgcccc ccttgtggtc ggtgtacagg tggtgcatgg ctgtcgtcag ctcgtgtcgt 960
gagatgttgg gttaagtccc gcaacgagcg caacccttgt tctgtgttgc cagcatgccc 1020
ttcggggtga tggggactca cagaagaccg ccggggtcaa ctcggaggaa ggtggggacg 1080
acgtcaagtc atcatgcccc ttatgtcttg ggctgcacac gtgctacaat ggcaggtaca 1140
atgagctgcg ataccgtgag gtggagcgaa tctcaaaaag cctgtctcag ttcggattgg 1200
ggtctgcaac tcgaccccat gaagtcggag ttgctagtaa tcgcagatca gcattgctgc 1260
ggtgaatacg ttcccgggcc ttgtacacac cgcccgtcac gtcacgaaag 1310

Claims (5)

1.白黑链霉菌(Streptomyces alboniger)，其菌株号为T22，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.14190。
2.权利要求1所述的白黑链霉菌在抑制病原菌中的应用；所述病原菌为下述至少一种：
A、灰霉病菌，
B、桃褐腐病菌，
C、辣椒炭疽病菌，
D、枯萎病菌，
F、小麦纹枯病菌，
G、茄子青枯病菌，
H、黄瓜角斑病菌。
3.权利要求1所述的白黑链霉菌在制备病原菌抑制剂中的应用；所述病原菌为下述至少一种：
A、灰霉病菌，
B、桃褐腐病菌，
C、辣椒炭疽病菌，
D、枯萎病菌，
F、小麦纹枯病菌，
G、茄子青枯病菌，
H、黄瓜角斑病菌。
4.权利要求1所述的白黑链霉菌在抑制病害中的应用；所述病害为下述至少一种：
a、灰霉病，
b、桃褐腐病，
c、辣椒炭疽病，
d、枯萎病，
f、小麦纹枯病，
g、茄子青枯病，
h、黄瓜角斑病。
5.权利要求1所述的白黑链霉菌在制备病害抑制剂中的应用；
所述病害为下述至少一种：
a、灰霉病，
b、桃褐腐病，
c、辣椒炭疽病，
d、枯萎病，
f、小麦纹枯病，
g、茄子青枯病，
h、黄瓜角斑病。
CN201910548314.8A 2017-06-28 2017-06-28 一种植物病原菌抑制剂及其所用菌株与应用 Active CN110257290B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910548314.8A CN110257290B (zh) 2017-06-28 2017-06-28 一种植物病原菌抑制剂及其所用菌株与应用

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910548314.8A CN110257290B (zh) 2017-06-28 2017-06-28 一种植物病原菌抑制剂及其所用菌株与应用
CN201710506536.4A CN107083349B (zh) 2017-06-28 2017-06-28 一株防病促生的白黑链霉菌及其代谢产物的制备与应用

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710506536.4A Division CN107083349B (zh) 2017-06-28 2017-06-28 一株防病促生的白黑链霉菌及其代谢产物的制备与应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110257290A CN110257290A (zh) 2019-09-20
CN110257290B true CN110257290B (zh) 2020-11-17

Family

ID=59606554

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910548314.8A Active CN110257290B (zh) 2017-06-28 2017-06-28 一种植物病原菌抑制剂及其所用菌株与应用
CN201710506536.4A Active CN107083349B (zh) 2017-06-28 2017-06-28 一株防病促生的白黑链霉菌及其代谢产物的制备与应用

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710506536.4A Active CN107083349B (zh) 2017-06-28 2017-06-28 一株防病促生的白黑链霉菌及其代谢产物的制备与应用

Country Status (1)

Country Link
CN (2) CN110257290B (zh)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107603914B (zh) * 2017-10-24 2019-12-13 北京市农林科学院 防治草莓根腐病等蔬菜真菌病害的菌剂及其所用菌株
CN108424861B (zh) * 2017-12-26 2021-06-04 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 一种伊朗链霉菌及其应用
CN108949607A (zh) * 2018-02-02 2018-12-07 天津农学院 一种花椒内生放线菌hjg-5及其应用
CN108753663A (zh) * 2018-06-28 2018-11-06 四川大学 一株具有抗菌活性的链霉菌及其应用
CN108949622B (zh) * 2018-07-11 2021-08-17 中国科学院东北地理与农业生态研究所 一株产几丁质酶的链霉菌及其应用
CN109136142B (zh) * 2018-09-10 2021-10-08 天津科技大学 一种白黄链霉菌及利用该微生物制备生防微生物菌剂的方法与应用
CN109762753B (zh) * 2018-11-01 2020-06-30 福建省农业科学院植物保护研究所 一株特殊生境链霉菌菌株及其应用
CN109694838B (zh) * 2019-03-13 2022-03-04 东北农业大学 一株链霉菌及其应用
CN110301455B (zh) * 2019-07-05 2020-09-08 海南大学 阿孙链霉菌产生的挥发性物质在植物病害防治中的应用
CN111363696B (zh) * 2020-02-25 2023-05-23 东北农业大学 一种链霉菌及其筛选方法与应用
CN113005048B (zh) * 2020-12-14 2022-07-15 河南农业大学 一种产黑链霉菌cys22、其代谢产物及应用
CN113684150A (zh) * 2021-08-25 2021-11-23 天津农学院 一种花椒内生放线菌hjg-5及其应用

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4283391A (en) * 1978-11-30 1981-08-11 St. Louis, University Pamamycin
CN102174398B (zh) * 2010-12-14 2012-10-31 北京沃土天地生物科技有限公司 用于玉米秸秆还田的复合微生物菌剂及其制备方法和用途
CN106434493B (zh) * 2016-12-01 2019-07-19 北京市农林科学院 一株生防链霉菌及其应用
CN106591157B (zh) * 2017-02-23 2019-08-23 北京市农林科学院 一株防病促生的塔宾曲霉及其代谢产物的制备和应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN107083349A (zh) 2017-08-22
CN107083349B (zh) 2019-07-26
CN110257290A (zh) 2019-09-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110257290B (zh) 一种植物病原菌抑制剂及其所用菌株与应用
CN109055281B (zh) 贝莱斯芽胞杆菌zf2及其在植物病害防治中的应用
CN109182137B (zh) 一株防病促生的非洲哈茨木霉及其应用
CN107151641B (zh) 一株抑制水稻纹枯病菌的侧孢短芽孢杆菌及其应用
CN107974427B (zh) 一株具有抑菌活性的海洋链霉菌
CN105886428A (zh) 一株微白黄链霉菌及其在微生物肥料中的应用
CN101525587B (zh) 一株链霉菌菌株及其应用
CN111500501B (zh) 一株米修链霉菌及其在防治小麦根腐病和茎基腐病中的应用
CN110292051B (zh) 一种果蔬病害抑制剂及其应用
CN113969247B (zh) 一种抑制烟草病害病原菌的细菌及应用
CN111073825B (zh) 具有抗植物土传病害作用的细菌及其用途
CN110452832A (zh) 一株耐酸性解淀粉芽孢杆菌Kc-5及其应用
CN109112069B (zh) 一种生防内生真菌及其应用
CN110964654A (zh) 一种拮抗枯萎病的芽孢杆菌及其应用
CN109628341B (zh) 深红紫链霉菌及其生物防治菌剂和制备方法
CN114164137B (zh) 一种抗香蕉枯萎病的淀粉酶产色链霉菌及其应用
CN113604376B (zh) 一株甘蔗内生枯草芽孢杆菌及其应用
CN107699526B (zh) 一株防治灰霉病的放线菌菌株及其应用
CN112760267A (zh) 一株拮抗野油菜黄单胞菌的产酶溶杆菌cx06及其应用
CN115960777B (zh) 一株假真菌样芽孢杆菌及其在蔬菜疫病防治中的应用
CN114456973B (zh) 一株烟草内生娄彻链霉菌及在烟草病害防控中的应用
CN112646757B (zh) 丁香链霉菌及其在植物病害防治中的应用
CN110885769B (zh) 一株链霉菌、抑菌药物及其应用
CN115011486A (zh) 一株淡紫拟青霉及其应用
CN109182216B (zh) 一株对多肉植物茎腐病具有抑制作用的海洋链霉菌scfj-05

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant