CN110257250A - 牟氏角毛藻的培养基组合物及培养方法及光生物反应器 - Google Patents

牟氏角毛藻的培养基组合物及培养方法及光生物反应器 Download PDF

Info

Publication number
CN110257250A
CN110257250A CN201910416691.6A CN201910416691A CN110257250A CN 110257250 A CN110257250 A CN 110257250A CN 201910416691 A CN201910416691 A CN 201910416691A CN 110257250 A CN110257250 A CN 110257250A
Authority
CN
China
Prior art keywords
bioreactor
culture media
media composition
cultural method
chaetoceros muelleri
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201910416691.6A
Other languages
English (en)
Inventor
张彬
朱昔恩
熊建华
谢达祥
赵永贞
陈晓汉
韦嫔媛
陈田聪
彭金霞
何苹萍
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangxi Academy of Fishery Sciences
Original Assignee
Guangxi Academy of Fishery Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangxi Academy of Fishery Sciences filed Critical Guangxi Academy of Fishery Sciences
Priority to CN201910416691.6A priority Critical patent/CN110257250A/zh
Publication of CN110257250A publication Critical patent/CN110257250A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M21/00—Bioreactors or fermenters specially adapted for specific uses
    • C12M21/02—Photobioreactors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/22—Transparent or translucent parts
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/24—Gas permeable parts
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/38—Caps; Covers; Plugs; Pouring means
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/48—Holding appliances; Racks; Supports
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
    • C12M29/06—Nozzles; Sprayers; Spargers; Diffusers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M31/00—Means for providing, directing, scattering or concentrating light
    • C12M31/10—Means for providing, directing, scattering or concentrating light by light emitting elements located inside the reactor, e.g. LED or OLED
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M39/00—Means for cleaning the apparatus or avoiding unwanted deposits of microorganisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/12—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of temperature
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/26—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of pH
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/30—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration
    • C12M41/32—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration of substances in solution
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/12—Unicellular algae; Culture media therefor

Abstract

本发明公开一种牟氏角毛藻的培养基组合物及高效的培养方法，所述培养基组合物由硝酸钠，磷酸二氢钾，硅酸钠，柠檬酸铁，氯化锰，硫酸铜，硫酸锌，钼酸钠，氯化钴，EDTA‑二钠，VB1，VB12等组成；所述的培养方法为：将所述培养基组合物放入经过消毒的封闭式光生物反应器中，充分曝气10‑15min，然后加入一级藻种液，接种密度为0.5‑1.4×106cell/mL，控制光生物反应器内的物料温度为25‑34℃，盐度为5‑40‰，pH为7.7‑8.3，光照强度为3500‑7000Lx，并根据水体中pH值变化确定向物料分别通入空气和二氧化碳，培养3‑5天即可以采收。

Description

牟氏角毛藻的培养基组合物及培养方法及光生物反应器
技术领域
本发明涉及水产养殖技术领域，具体涉及一种牟氏角毛藻的培养基组合物及培养方法及光生物反应器。
背景技术
微藻作为可再生的生物质能源也得到了越来越多的关注，规模化培养微藻产业化也有相关的研究并取得一定进展，但由于规模化培养微藻容易受到光照、营养盐、培养条件等因素的影响，现有的微藻产业化模式仍存在效率低、成本高和产量不稳定等不足。
牟氏角毛藻(Chaetoceros muelleri)隶属于硅藻门(Bacillariophyta)，中心纲(Centricae)，盒形藻目(Biddulphiales)，角毛藻科(Chaetoceraceae)，角毛藻属(Chaetoceros)。是一种小型的海洋浮游硅藻，细胞小，细胞壁薄，多数是单个生活，也有2-3个细胞相连组成群体。牟氏角毛藻具有耐高温、营养丰富等特点，作为幼体的优质饵料被广泛应用于虾类、梭子蟹育苗及牡蛎等贝类育苗的生产。因此，调配出适合牟氏角毛藻快速生长繁殖的培养基组合物具有重要意义。如何通过牟氏角毛藻培养基组合物来提高牟氏角毛藻的生长速度和培养密度是申请人一直致力于研究的方向。
随着水产动物家系选育育种方法的兴起，大水体培养角毛藻的方法不能满足水产动物育种对角毛藻的需要，并且由于近年来气候变化无常，依靠自然光源等自然条件来培养牟氏角毛藻的难度加大。目前应用的培养液中氮、磷、铁、硅的比例不甚合理，培养液浓度偏低，光照强度、温度等条件控制不合理，导致牟氏角毛藻的培养时间过长，且藻的营养成分难以得到保障。因此，优化牟氏角毛藻培养液的配方，并开发与之相适应的培养方法，成为目前水产动物育苗养殖生产的紧迫任务。
光生物反应器是指光生物设计有光源系统的主体为透明材料的生物反应器，主要用于可进行光合作用的微藻、植物细胞、光合细菌的培养。传统的光生物反应器在培养微藻时存在以下不足：
1、光能利用率不高。光生物反应器的采光方式主要有室外直接采光和人造光源采光两种。室外采光存在光率低、光能流失大、晚上不能保证供给的不足。采用人造光源则存在大量消耗电能的弊端，不利于降低微藻大规模培养的成本。
2、开放式的培养模式易造成微藻被其他杂藻和病原污染，影响培养的纯度、产量和稳定性，无法实现稳定优质高产。
3、二氧化碳利用率不高。微藻培养过程中需要吸收CO2进行光合作用，因此在进行微藻工业化养殖时需要提供大量的分散的CO2作为微藻光合作用的原料。目前多采用带有一个出口的管路系统将空气通入微藻悬浮液中，但用此方法培养时CO2在培养液中溶解度较低、气泡直径较大、停留时间短，不利于藻类吸收。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术存在的缺陷，提供一种牟氏角毛藻的培养基组合物及高效培养方法及光生物反应器。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
本发明的牟氏角毛藻的培养基组合物及培养方法及光生物反应器，所述培养基组合物各组分及浓度如下：
硝酸钠75-90mg/L，磷酸二氢钾5-10mg/L，硅酸钠35-50mg/L，柠檬酸铁3.9-5mg/L，氯化锰1.5-1.8×10-1mg/L，硫酸铜0.5-1.5×10-3mg/L，硫酸锌2-3×10-2mg/L，钼酸钠7-7.5×10-3mg/L，氯化钴1-2×10-2mg/L，EDTA-二钠4-5×10-3mg/L，VB10.05-0.15mg/L，VB124.5-5.5×10-4mg/L；
所述的培养方法包括如下步骤：
将所述培养基组合物放入经过消毒的光生物反应器中，充分曝气10-15min，然后加入一级藻种液，使接种密度为0.5-1.4×106cell/mL，控制光生物反应器内的物料温度为25-34℃，盐度为5-40‰，pH为7.7-8.3，光照强度为3500-7000Lx，并根据水体中pH值变化确定向物料分别通入空气和二氧化碳，培养3-5天即可以采收。
优选地，所述培养基组合物的制备方法如下：
(1)母液A：依次将硝酸钠、磷酸二氢钾、硅酸钠放入双蒸水中，放入时，待上一份原料完全溶解后再放入下一份原料，灭菌，得到母液A；
(2)母液B：将柠檬酸铁和钼酸钠放入双蒸水中，加热搅拌至沸腾，冷却后用滤纸过滤溶液，灭菌，得到母液B；
(3)母液C：将氯化锰、硫酸铜、硫酸锌、氯化钴和EDTA-二钠放入双蒸水中，完全溶解后灭菌，得到母液C；
(4)母液D：取双蒸水灭菌，冷却后加入VB1和VB12，得到母液D；
(5)取海水，经暗沉淀5-7天-粗砂滤-细砂过滤-微孔过滤处理后，再经过蛋白分离器处理-臭氧消毒-紫外消毒，然后与母液A、母液B、母液C、母液D混合均匀，得到所述培养基组合物。
优选地，所述培养方法中向物料分别通入空气和二氧化碳时，控制通入空气速率为3-5L/min。
优选地，所述培养方法中向物料分别通入空气和二氧化碳时，通入的空气和二氧化碳的体积比为8-12:1。
优选地，控制光生物反应器内物料的盐度为20-30‰。
优选地，控制光生物反应器内物料的温度为28-31℃。
优选地，所述光生物反应器包括底座、外圆筒、内圆筒和顶盖，其特征在于，所述外圆筒和内圆筒均竖直安装在底座上，内圆筒位于外圆筒的内部，外圆筒和内圆筒的中心线重合，外圆筒内壁上还设有温度自动调节装置；
所述外圆筒上自由放置有顶盖，所述顶盖对应内圆筒的位置缺失一内圆筒直径大小的圆，使内圆筒穿过顶盖；
所述底座上端面围绕着内圆筒设有圆环状的曝气管，所述曝气管壁间隔均匀设有多个出气孔；底座上端面、位于外圆筒和内圆筒之间，还设置有多个突起；
所述内圆筒内设有植物光源灯，内圆筒内壁上部设有电源控制开关，植物光源灯与电源控制开关电性连接。
优选地，所述顶盖设有4个清洗喷头，所述4个清洗喷头间隔均匀分布，且与顶盖中心的距离相同。
优选地，所述顶盖均布有8-10个通气孔，所述通气孔的直径为1-2cm。
优选地，所述外圆筒下部设有取样口。
优选地，所述底座设有出料管，所述出料管上设有出料阀。
优选地，所述外圆筒、内圆筒和顶盖均采用透明材料制备而成。
优选地，所述透明材料为亚克力高透明度材料。
优选地，所述底座上还设有pH和盐度显示器，所述pH和盐度显示器与设于外圆筒内壁的pH和盐度传感器相连接。
优选地，所述温度自动调节装置为温度自动控制器。
本发明由于采用了上述技术方案，具有以下有益效果：
1、本发明的培养基组合物对传统使用的f/2营养盐配方进行了优化，成分更加可科学、合理、均衡，培养基组合物的浓度较高，能够快速有效实现牟氏角毛藻的扩增，较普通配方培养时间大大缩短，从现有技术的5-7天缩短到3-5天，提高培养效率，藻细胞密度增大；摒弃传统培养基现用现配的做法，配制少容量角毛藻浓缩液母液，使用方便，工作量小，储存、运输方便，便于培养基的工厂化、标准化、市场化、商品化、专业化的生产，微量成分和元素定量准确，误差小，适于大规模生产。
2、本发明的培养方法针对牟氏角毛藻的生长规律，根据其在不同生长阶段对环境条件的特定要求，提供适宜的光照时间、强度和温度，有利于细胞中EPA、DHA等高不饱和脂肪酸的大量积累，获得的牟氏角毛藻细胞营养成分稳定，还具有培养密度高、培育成本低等特点；且在培养中后期可补充营养盐，促进牟氏角毛藻持续、快速生长，牟氏角毛藻培养结束后的藻细胞密度可达1-2×107cell/mL，实现高产稳产，可显著提升育苗场的经济效益。
3、发明人经过长期大量试验研究，针对培养牟氏角毛藻的盐度、温度和光照条件等因素进行试验，综合藻细胞生长速度、藻细胞密度、藻细胞活性稳定周期和藻体衰亡时间等关键指标，牟氏角毛藻在盐度为5-40‰水环境中均能生长，中盐度(20‰，30‰)是适合牟氏角毛藻规模化高效稳定培养的盐度范围，其中最佳盐度为20‰。在25℃-34℃条件下牟氏角毛藻均能生长，31℃条件下培养牟氏角毛藻最适合，在规模化生产中，考虑生长速度、藻细胞密度和稳定性的条件下，28-31℃温度下的角毛藻既能保障质量和数量，又能提高生产效率；25℃更适合藻种的保存；34℃适合需短期内供应育苗养殖所需牟氏角毛藻的数量。在4000Lx的光照条件下最适合牟氏角毛藻的生长，3天达到最大藻细胞密度。
结合申请人所处广西北部湾的海水情况和水产育苗高峰期，在规模化生产中，本发明中20-30‰的盐度、28-31℃的温度，与北部湾海区自然海水的盐度和温度接近，4000Lx的光照强度在可控范围，合理搭配以上三个环境条件可提高牟氏角毛藻的产量、降低成本。
4、本发明还提供一种大容积的光生物反应器，筒体由亚克力高透明度材料制成，植物光源灯置于高透光率的内圆筒内，底部的突起使光线在筒体内形成漫反射，提高了光能的利用率；植物光源灯设置在反应器中心，光照强度高且分布均匀，有效光源利用度高，显著降低能耗；圆环状的纳米材料曝气管设置有多个微小的出气孔，延长了CO2在培养液中的停留时间，同时可形成上升气流，促进各营养盐物质循环流动、温度均衡及降低微藻在桶壁上的附着几率，可起到良好的藻液混合、补充无机碳源和去除过饱和氧气的作用，减轻过饱和氧气对藻细胞产生的不利影响；反应器内装有温度自动控制器，用来调节藻液温度，有利于微藻在最适温度范围内生长；在顶盖设置了4个清洗喷头，喷淋效果好，无需人工喷吹挂壁菌体，有效保障了外圆筒内壁和内圆筒外壁的洁净度；除了用于培养牟氏角毛藻，本发明的光生物反应器还可用于培养其他种类的微藻。因此，本发明的光生物反应器具有占地面积小、可实现立体培育、操作简便高效、微藻生长快速稳定、单位水体藻产量高、藻细胞纯度高、不易污染等优点，显著提高了微藻培养效率，实用性好，适于在水产养殖饵料和食品工业海洋微藻培养中推广应用，也为进一步开发研究海洋微藻资源提供了条件。
附图说明
图1为牟氏角毛藻在不同盐度下的生长曲线；
图2为牟氏角毛藻在不同温度下的生长曲线；
图3为牟氏角毛藻在不同光照强度下的生长曲线；
图4为本发明光生物反应器的结构示意图；
图5为图1中曝气管5的局部放大视图。
附图中：1-底座；2-外圆筒；3-内圆筒；4-顶盖；5-曝气管；6-出气孔；7-突起；8-植物光源灯；9-电源控制开关；10-清洗喷头；11-通气孔；12-取样口；13-出料管；14-出料阀；15-pH和盐度显示器；16-pH和盐度传感器；17-温度自动控制器。
附图中未体现实施例所述的CO2气泵、水泵、纳米曝气管等。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下举出优选实施例，对本发明进一步详细说明。然而，需要说明的是，说明书中列出的许多细节仅仅是为了使读者对本发明的一个或多个方面有一个透彻的理解，即便没有这些特定的细节也可以实现本发明的这些方面。
实施例1
一种牟氏角毛藻的培养基组合物及高效的培养方法，所述培养基组合物的制备方法如下：
(a1)母液A：依次将硝酸钠、磷酸二氢钾、硅酸钠放入双蒸水中，放入时，待上一份原料完全溶解后再放入下一份原料，灭菌，得到母液A；
(a2)母液B：将柠檬酸铁和钼酸钠放入双蒸水中，加热搅拌至沸腾，冷却后用滤纸过滤溶液，灭菌，得到母液B；
(a3)母液C：将氯化锰、硫酸铜、硫酸锌、氯化钴和EDTA-二钠放入双蒸水中，完全溶解后灭菌，得到母液C；
(a4)母液D：取双蒸水灭菌，冷却后加入VB1和VB12，得到母液D；
(a5)取海水，经暗沉淀5天-粗砂滤-细砂过滤-微孔过滤处理后，再经过蛋白分离器处理-臭氧消毒-紫外消毒，然后与母液A、母液B、母液C、母液D混合均匀，得到培养基组合物，所述培养基组合物各组分及浓度如下：
硝酸钠75mg/L，磷酸二氢钾5mg/L，硅酸钠35mg/L，柠檬酸铁3.9mg/L，氯化锰1.5×10-1mg/L，硫酸铜0.5×10-3mg/L，硫酸锌2×10-2mg/L，钼酸钠7×10-3mg/L，氯化钴1×10- 2mg/L，EDTA-二钠4×10-3mg/L，VB10.05mg/L，VB124.5×10-4mg/L；
所述培养方法包括如下步骤：
(b1)在容积为500L的光生物反应器中加入浓度为8ppm的高锰酸钾溶液浸泡5min，再用消毒海水冲洗掉，所述消毒海水的消毒方式为：在海水中加入浓度为0.4％的次氯酸钠溶液，静置过夜，次日去氯，经高温煮沸灭菌，冷却后使用；
(b2)在步骤(b1)的光生物反应器中加入480L步骤(a5)的培养基组合物，通入经过空气过滤器过滤的空气，充分曝气10min，然后加入牟氏角毛藻的一级藻种液，使接种密度为0.5×106cell/mL，所述一级藻种液采用常规的角毛藻一级培养方法得到，控制光生物反应器内的物料温度为25℃，盐度为5‰，pH为7.7，光照强度为3500Lx，并根据水体中pH值变化确定向物料分别通入空气和二氧化碳，此时控制通入空气的速率为3L/min，通入的空气和二氧化碳的体积比为8:1，培养3天后即可以采收。
上述的光生物反应器包括底座1、外圆筒2、内圆筒3和顶盖4，所述外圆筒2、内圆筒3和顶盖4均采用亚克力高透明度的材料制备而成；所述外圆筒2和内圆筒3均竖直安装在底座2上，内圆筒3位于外圆筒2的内部，外圆筒2和内圆筒3的中心线重合，外圆筒2内壁上还设有温度自动控制器17，外圆筒2下部设有取样口12；所述外圆筒2上自由放置有顶盖4，所述顶盖4对应内圆筒3的位置缺失一内圆筒3直径大小的圆，使内圆筒3穿过顶盖4；所述底座2上端面围绕着内圆筒3设有圆环状的曝气管5，本实施例的曝气管5为市面上销售的纳米管微孔曝气管，所述曝气管5壁间隔均匀设有多个直径为0.03mm的出气孔6；底座1上端面、位于外圆筒2和内圆筒3之间，还设置有多个突起7；底座1设有出料管13，所述出料管13上设有出料阀14；所述底座1上还设有pH显示器15，所述pH显示器15与设于外圆筒2内壁的pH传感器16电连接；所述内圆筒3内设有植物光源灯8，本实施例中采用黄蓝白植物光源灯，内圆筒3内壁上部设有电源控制开关9，植物光源灯8与电源控制开关9电性连接。所述顶盖4设有4个清洗喷头10，所述4个清洗喷头10间隔均匀分布，且与顶盖4中心的距离相同；顶盖4还均布有8个通气孔11，所述通气孔11的直径为2cm。
使用时，将顶盖4取下，向外圆筒3内加入培养基组合物，然后再将顶盖4盖回外圆筒2上，并通过通气孔11向反应器内伸入2根经过消毒的纳米曝气管，该纳米曝气管的壁上设有多个孔径为0.1μm的微孔，通过纳米曝气管向反应器内的培养基组合物充分曝气，再向培养基组合物中加入一级藻种液接种，有严重沉淀或颜色变化很大的一级藻种液直接倒掉，使用电源控制开关9控制植物光源灯8的光照强度，底座1上的突起7可提高光线的漫反射，提高植物光源灯8发出光线的利用率，曝气管5和外部的CO2气泵连通，曝气管5通过出气孔6向藻液提供无机碳源，温度自动控制器17可以自动调节藻液的培养温度，使其温度稳定；pH和盐度传感器16可检测藻液的pH值和盐度，并将检测结果显示在pH和盐度显示器15上，工作人员可根据pH和盐度显示器15上显示的数据，调整加注的培养基组合物的pH值和盐度，以及二氧化碳的通入量，使反应器内培养基组合物的原料保持在步骤(a5)所述的培养基组合物浓度以及步骤(b2)所述的盐度，以保证反应器内的藻液pH值和盐度适宜牟氏角毛藻的培养繁殖。工作人员可以通过外圆筒2下部的取样口12在牟氏角毛藻培养过程中随时采样检测牟氏角毛藻的生长情况、浓度和纯度。底座1上的出料管13与外圆筒2连通，微藻培养完成后，打开出料阀14，收集从出料管13排出的藻液，进行下一步处理即可。排空藻液后的反应器需要清洗，将清洗喷头10与外部水泵连通，向反应器内喷淋清水，冲洗掉挂壁菌体，有效保障了外圆筒2内壁和内圆筒3外壁的洁净度。每天观察藻的生长，表现不正常要镜检，染有原生动物的藻液直接从出料阀14放掉，将所有器具都消毒灭菌后再进行下一次培养。
所述的温度自动控制器17、电源控制开关9、清洗喷头10、pH和盐度显示器15、pH和盐度传感器16、CO2气泵、水泵、纳米曝气管等均为现有技术。
实施例2
一种牟氏角毛藻的培养基组合物及高效的培养方法，所述培养基组合物的制备方法与实施例1的区别在于，步骤(a5)的海水的暗沉淀时间为5.5天；所述培养基组合物各组分及浓度如下：
硝酸钠78mg/L，磷酸二氢钾6mg/L，硅酸钠39mg/L，柠檬酸铁4.2mg/L，氯化锰1.6×10-1mg/L，硫酸铜0.7×10-3mg/L，硫酸锌2.3×10-2mg/L，钼酸钠7.1×10-3mg/L，氯化钴1.2×10-2mg/L，EDTA-二钠4.3×10-3mg/L，VB10.07mg/L，VB124.6×10-4mg/L；
所述培养方法包括如下步骤：
(b1)在容积为500L的光生物反应器中加入浓度为9ppm的高锰酸钾溶液浸泡6min，再用消毒海水冲洗掉，所述消毒海水的消毒方式为：在海水中加入浓度为0.5％的次氯酸钠溶液，静置过夜，次日去氯，经高温煮沸灭菌，冷却后使用；
(b2)在步骤(b1)的光生物反应器中加入480L步骤(a5)的培养基组合物，通入经过空气过滤器过滤的空气，充分曝气11min，然后加入牟氏角毛藻的一级藻种液，使接种密度为0.6×106cell/mL，所述一级藻种液采用常规的角毛藻一级培养方法得到，控制光生物反应器内的物料温度为27℃，盐度为10‰，pH为7.8，光照强度为4000Lx，并根据水体中pH值变化确定向物料分别通入空气和二氧化碳，此时控制通入空气的速率为3.4L/min，通入的空气和二氧化碳的体积比为9:1，培养3.5天后即可以采收。
步骤(b2)所述光生物反应器为实施例1所述的光生物反应器。
实施例3
一种牟氏角毛藻的培养基组合物及高效的培养方法，所述培养基组合物的制备方法与实施例1的区别在于，步骤(a5)的海水的暗沉淀时间为6天；所述培养基组合物各组分及浓度如下：
硝酸钠82mg/L，磷酸二氢钾7mg/L，硅酸钠42mg/L，柠檬酸铁4.5mg/L，氯化锰1.7×10-1mg/L，硫酸铜0.9×10-3mg/L，硫酸锌2.6×10-2mg/L，钼酸钠7.2×10-3mg/L，氯化钴1.4×10-2mg/L，EDTA-二钠4.6×10-3mg/L，VB10.10mg/L，VB124.8×10-4mg/L；
所述培养方法包括如下步骤：
(b1)在容积为500L的光生物反应器中加入浓度为10ppm的高锰酸钾溶液浸泡3min，再用消毒海水冲洗掉，所述消毒海水的消毒方式为：在海水中加入浓度为0.3％的次氯酸钠溶液，静置过夜，次日去氯，经高温煮沸灭菌，冷却后使用；
(b2)在步骤(b1)的光生物反应器中加入480L步骤(a5)的培养基组合物，通入经过空气过滤器过滤的空气，充分曝气12min，然后加入牟氏角毛藻的一级藻种液，使接种密度为0.9×106cell/mL，所述一级藻种液采用常规的角毛藻一级培养方法得到，控制光生物反应器内的物料温度为28℃，盐度为16‰，pH为7.9，光照强度为5000Lx，并根据水体中pH值变化确定向物料分别通入空气和二氧化碳，此时控制通入空气的速率为3.5L/min，通入的空气和二氧化碳的体积比为10:1，培养4天后即可以采收。
步骤(b2)所述光生物反应器为实施例1所述的光生物反应器。
实施例4
一种牟氏角毛藻的培养基组合物及的高效培养方法，所述培养基组合物的制备方法与实施例1的区别在于，步骤(a5)的海水的暗沉淀时间为6.5天；所述培养基组合物各组分及浓度如下：
硝酸钠86mg/L，磷酸二氢钾8.4mg/L，硅酸钠47mg/L，柠檬酸铁4.8mg/L，氯化锰1.8×10-1mg/L，硫酸铜1.2×10-3mg/L，硫酸锌2.8×10-2mg/L，钼酸钠7.3×10-3mg/L，氯化钴1.7×10-2mg/L，EDTA-二钠4.8×10-3mg/L，VB10.12mg/L，VB125.1×10-4mg/L；
所述培养方法包括如下步骤：
(b1)在容积为500L的光生物反应器中加入浓度为7ppm的高锰酸钾溶液浸泡5min，再用消毒海水冲洗掉，所述消毒海水的消毒方式为：在海水中加入浓度为0.6％的次氯酸钠溶液，静置过夜，次日去氯，经高温煮沸灭菌，冷却后使用；
(b2)在步骤(b1)的光生物反应器中加入480L步骤(a5)的培养基组合物，通入经过空气过滤器过滤的空气，充分曝气14min，然后加入牟氏角毛藻的一级藻种液，使接种密度为1.0×106cell/mL，所述一级藻种液采用常规的角毛藻一级培养方法得到，控制光生物反应器内的物料温度为31℃，盐度为20‰，pH为8.0，光照强度为6000Lx，并根据水体中pH值变化确定向物料分别通入空气和二氧化碳，此时控制通入空气的速率为4L/min，通入的空气和二氧化碳的体积比为11:1，培养4.5天后即可以采收。
步骤(b2)所述光生物反应器为实施例1所述的光生物反应器。
实施例5
一种牟氏角毛藻的培养基组合物及高效的培养方法，所述培养基组合物的制备方法与实施例1的区别在于，步骤(a5)的海水的暗沉淀时间为6.8天；所述培养基组合物各组分及浓度如下：
硝酸钠88mg/L，磷酸二氢钾9.2mg/L，硅酸钠48mg/L，柠檬酸铁4.9mg/L，氯化锰1.5×10-1mg/L，硫酸铜1.4×10-3mg/L，硫酸锌2.9×10-2mg/L，钼酸钠7.4×10-3mg/L，氯化钴1.8×10-2mg/L，EDTA-二钠4.9×10-3mg/L，VB10.14mg/L，VB125.3×10-4mg/L；
所述培养方法包括如下步骤：
(b1)在容积为500L的光生物反应器中加入浓度为8ppm的高锰酸钾溶液浸泡6min，再用消毒海水冲洗掉，所述消毒海水的消毒方式为：在海水中加入浓度为0.7％的次氯酸钠溶液，静置过夜，次日去氯，经高温煮沸灭菌，冷却后使用；
(b2)在步骤(b1)的光生物反应器中加入480L步骤(a5)的培养基组合物，通入经过空气过滤器过滤的空气，充分曝气15min，然后加入牟氏角毛藻的一级藻种液，使接种密度为1.1×106cell/mL，所述一级藻种液采用常规的角毛藻一级培养方法得到，控制光生物反应器内的物料温度为31℃，盐度为30‰，pH为8.1，光照强度为6800Lx，并根据水体中pH值变化确定向物料分别通入空气和二氧化碳，此时控制通入空气的速率为4.3L/min，通入的空气和二氧化碳的体积比为12:1，培养4.8天后即可以采收。
步骤(b2)所述光生物反应器为实施例1所述的光生物反应器。
实施例6
一种牟氏角毛藻的培养基组合物及高效的培养方法，所述培养基组合物的制备方法与实施例1的区别在于，步骤(a5)的海水的暗沉淀时间为6.8天；所述培养基组合物各组分及浓度如下：
硝酸钠90mg/L，磷酸二氢钾9.5mg/L，硅酸钠49mg/L，柠檬酸铁5mg/L，氯化锰1.6×10-1mg/L，硫酸铜1.5×10-3mg/L，硫酸锌3×10-2mg/L，钼酸钠7.5×10-3mg/L，氯化钴1.9×10-2mg/L，EDTA-二钠5×10-3mg/L，VB10.15mg/L，VB125.4×10-4mg/L；
所述培养方法包括如下步骤：
(b1)在容积为500L的光生物反应器中加入浓度为9ppm的高锰酸钾溶液浸泡5min，再用消毒海水冲洗掉，所述消毒海水的消毒方式为：在海水中加入浓度为0.4％的次氯酸钠溶液，静置过夜，次日去氯，经高温煮沸灭菌，冷却后使用；
(b2)在步骤(b1)的光生物反应器中加入480L步骤(a5)的培养基组合物，通入经过空气过滤器过滤的空气，充分曝气14min，然后加入牟氏角毛藻的一级藻种液，使接种密度为1.2×106cell/mL，所述一级藻种液采用常规的角毛藻一级培养方法得到，控制光生物反应器内的物料温度为32℃，盐度为36‰，pH为8.2，光照强度为6900Lx，并根据水体中pH值变化确定向物料分别通入空气和二氧化碳，此时控制通入空气的速率为4.6L/min，通入的空气和二氧化碳的体积比为10.5:1，培养5天后即可以采收。
步骤(b2)所述光生物反应器为实施例1所述的光生物反应器。
实施例7
一种牟氏角毛藻的培养基组合物及高效的培养方法，所述培养基组合物的制备方法与实施例1的区别在于，步骤(a5)的海水的暗沉淀时间为6.8天；所述培养基组合物各组分及浓度如下：
硝酸钠86mg/L，磷酸二氢钾10mg/L，硅酸钠39mg/L，柠檬酸铁4.6mg/L，氯化锰1.8×10-1mg/L，硫酸铜1.4×10-3mg/L，硫酸锌2.3×10-2mg/L，钼酸钠7.1×10-3mg/L，氯化钴2×10-2mg/L，EDTA-二钠4.7×10-3mg/L，VB10.15mg/L，VB125.5×10-4mg/L；
所述培养方法包括如下步骤：
(b1)在容积为500L的光生物反应器中加入浓度为10ppm的高锰酸钾溶液浸泡5min，再用消毒海水冲洗掉，所述消毒海水的消毒方式为：在海水中加入浓度为0.5％的次氯酸钠溶液，静置过夜，次日去氯，经高温煮沸灭菌，冷却后使用；
(b2)在步骤(b1)的光生物反应器中加入480L步骤(a5)的培养基组合物，通入经过空气过滤器过滤的空气，充分曝气15min，然后加入牟氏角毛藻的一级藻种液，使接种密度为1.4×106cell/mL，所述一级藻种液采用常规的角毛藻一级培养方法得到，控制光生物反应器内的物料温度为34℃，盐度为40‰，pH为8.3，光照强度为6800Lx，并根据水体中pH值变化确定向物料分别通入空气和二氧化碳，此时控制通入空气的速率为5L/min，通入的空气和二氧化碳的体积比为11.2:1，培养5天后即可以采收。
步骤(b2)所述光生物反应器为实施例1所述的光生物反应器。
试验分析
为了验证本发明的培养基组合物及培养方法和光生物反应器对牟氏角毛藻的培养效果，申请人分别进行盐度试验、温度试验、光照试验，取指数生长期的牟氏角毛藻接种，均接入20ml一级藻种液放入盛有200ml培养液的250ml锥形瓶中，置于光照培养架上；盐度试验设计7个梯度，分别为：0、5、10、20、30、35、40，设定温度25±1℃、光照强4000Lx；温度试验设计4个梯度，分别为：35、28、31、34，设定盐度20‰、光照强4000Lx；光照试验设计3个梯度，分别为：1000、4000、7000，设定盐度20‰、温度25±1℃；pH均为8.0±0.1，光暗周期均为L:D＝12h:12h。每天定时测定藻细胞浓度，每个样品计数三次。藻细胞密度测定采用XB-K-25血球计数板在Nikon ECLIPSE-E100型号显微镜下计数，每个样品计数3次，取均值。生长速率按公式K＝(lnNt-lnNto/t)×100％计算，其中Nt是培养第t天的藻细胞密度，Nt0是初始藻细胞密度，t为培养时间d。利用SPSS17.0软件对数据进行平均值和标准差(Mean±SD)计算以及单因素方差分析，若组间差异显著(P<0.05)，则作Duncan′s多重比较分析，采用Excel软件进行图表制作。
试验结果见表1、表2、表3、图1、图2、图3。
表1不同盐度下牟氏角毛藻指数生长期的生长速率和最大藻细胞密度
注：结果用平均数和该处理的标准差(STDEV)表示(n＝3)，表中不同行中数据字母不同者表示有显著差异(p<0.05)。
由表1和图1可以看出，牟氏角毛藻在0‰盐度中，其生长速率缓慢，和其他盐度组均差异显著；低盐度组(5‰，10‰)藻细胞虽处于持续生长状态，但达不到中盐度组(20‰，30‰)的藻细胞密度；说明牟氏角毛藻在低盐度下依能正常生长，但达不到规模化育苗中对其产量的要求。中盐度组(20‰，30‰)藻生长速度和藻细胞密度均达到最佳，两者增长速率差异不显著，但盐度20‰的藻体保持活性周期较长，优于30‰盐度。低盐度组(5‰，10‰)和高盐组(35‰，40‰)在各个生长时期的藻细胞密度和生长速率差异不明显。
表2不同温度下牟氏角毛藻指数生长期的生长速率和最大藻细胞密度
注：结果用平均数和该处理的标准差(STDEV)表示(n＝3)，表中不同行中数据字母不同者表示有显著差异(p<0.05)。
从表2和图2可以看出，不同温度件下牟氏角毛藻在生长期的生长速度差异显著(P<0.05)，温度与生长速率呈正相关性，随着温度的升高，生长速率逐渐升高。31℃条件下藻细胞密度达到最大，与34℃差异不显著，但与25℃和28℃差异显著。温度范围的波动较大对牟氏角毛藻藻细胞密度和生长速率影响极其显著。
表3不同光照强度下牟氏角毛藻指数生长期的生长速率和最大藻细胞密度
注：结果用平均数和该处理的标准差(STDEV)表示(n＝3)，表中不同行中数据字母不同者表示有显著差异(p<0.05)。
如表3和图3显示，牟氏角毛藻最适生长强度出现在4000Lx处，明显高于1000Lx和7000Lx，与后两者的藻细胞密度和生长速率都有显著差异，而1000Lx和7000Lx整个生长期，最大藻细胞密度差异不显著，生长速率差异显著。
综上所述，牟氏角毛藻在盐度为5-40‰水环境中均能生长，综合藻细胞生长速度、藻细胞密度、藻细胞活性稳定周期和藻体衰亡时间等关键指标，中盐度组(20‰，30‰)是适合牟氏角毛藻规模化高效稳定培养的盐度范围，其中最佳盐度为20‰；本试验中，低盐度(5-10‰)的生长速率和藻细胞浓度在生长期始终高于低盐度(30-40‰)，稳定和衰亡期差异却不显著，说明牟氏角毛藻对盐度环境的适应逐渐增强，牟氏角毛藻在0‰下也能生长接种时藻种自生携带一定盐度，导致后期牟氏角毛藻类逐渐适应低盐环境，所以出现藻细胞密度增加的情况。
在25℃-34℃条件下牟氏角毛藻均能生长，31℃条件下培养牟氏角毛藻最适合；34℃虽生长速度优于前者，但最大藻细胞密度较低，且死亡速度较快；25℃在整个试验过程中生长过程最稳定，但藻细胞密度一直处于劣势；28℃相较于25℃稳定性较差，但生长速率和藻细胞密度优于25℃。在规模化生产中，考虑生长速度、藻细胞密度和稳定性的条件下，28-31℃温度下的角毛藻既能保障质量和数量，又能提高生产效率；25℃更适合藻种的保存；34℃适合需短期内供应育苗养殖所需牟氏角毛藻的数量。
在4000Lx的光照条件下最适合牟氏角毛藻的生长，3天达到最大藻细胞密度；低于4000Lx，光照强度与生长速呈正向相关性，高于4000Lx，则呈负相关性。图表还显示光照越强，越稳定。
结合申请人所处的广西北部湾的海水情况和水产育苗高峰期，在规模化生产中，本发明中20-30‰的盐度、28-31℃的温度，与北部湾海区自然海水的盐度和温度接近，4000Lx的光照强度在可控范围，合理搭配以上三个环境条件可提高牟氏角毛藻的产量、降低成本。

Claims (9)

1.牟氏角毛藻的培养基组合物及培养方法及光生物反应器，其特征在于，所述培养基组合物各组分及浓度如下：
硝酸钠75-90mg/L，磷酸二氢钾5-10mg/L，硅酸钠35-50mg/L，柠檬酸铁3.9-5mg/L，氯化锰1.5-1.8×10-1mg/L，硫酸铜0.5-1.5×10-3mg/L，硫酸锌2-3×10-2mg/L，钼酸钠7-7.5×10-3mg/L，氯化钴1-2×10-2mg/L，EDTA-二钠4-5×10-3mg/L，VB1 0.05-0.15mg/L，VB12 4.5-5.5×10-4mg/L；
所述的培养方法包括如下步骤：
将所述培养基组合物放入经过消毒的光生物反应器中，充分曝气10-15min，然后加入一级藻种液，使接种密度为0.5-1.4×106cell/mL，控制光生物反应器内的物料温度为25-34℃，盐度为5-40‰，pH为7.7-8.3，光照强度为3500-7000Lx，并根据水体中pH值变化确定向物料分别通入空气和二氧化碳，培养3-5天即可以采收。
2.根据权利要求1所述的牟氏角毛藻的培养基组合物及培养方法及光生物反应器，其特征在于，所述培养基组合物的制备方法如下：
(1)母液A：依次将硝酸钠、磷酸二氢钾、硅酸钠放入双蒸水中，放入时，待上一份原料完全溶解后再放入下一份原料，灭菌，得到母液A；
(2)母液B：将柠檬酸铁和钼酸钠放入双蒸水中，加热搅拌至沸腾，冷却后用滤纸过滤溶液，灭菌，得到母液B；
(3)母液C：将氯化锰、硫酸铜、硫酸锌、氯化钴和EDTA-二钠放入双蒸水中，完全溶解后灭菌，得到母液C；
(4)母液D：取双蒸水灭菌，冷却后加入VB1和VB12，得到母液D；
(5)取海水，经暗沉淀5-7天-粗砂滤-细砂过滤-微孔过滤处理后，再经过蛋白分离器处理-臭氧消毒-紫外消毒，然后与母液A、母液B、母液C、母液D混合均匀，得到所述培养基组合物。
3.根据权利要求1所述的牟氏角毛藻的培养基组合物及培养方法及光生物反应器，其特征在于，所述培养方法中向物料分别通入空气和二氧化碳时，控制通入空气速率为3-5L/min。
4.根据权利要求1所述的牟氏角毛藻的培养基组合物及培养方法及光生物反应器，其特征在于，所述培养方法中向物料分别通入空气和二氧化碳时，通入的空气和二氧化碳的体积比为8-12:1。
5.根据权利要求1所述的牟氏角毛藻的培养基组合物及培养方法及光生物反应器，其特征在于，控制光生物反应器内物料的盐度为20-30‰。
6.根据权利要求1所述的牟氏角毛藻的培养基组合物及培养方法及光生物反应器，其特征在于，控制光生物反应器内物料的温度为28-31℃。
7.根据权利要求1所述的牟氏角毛藻的培养基组合物及培养方法及光生物反应器，其特征在于，所述光生物反应器包括底座、外圆筒、内圆筒和顶盖，其特征在于，所述外圆筒和内圆筒均竖直安装在底座上，内圆筒位于外圆筒的内部，外圆筒和内圆筒的中心线重合，外圆筒内壁上还设有温度自动调节装置；
所述外圆筒上自由放置有顶盖，所述顶盖对应内圆筒的位置缺失一内圆筒直径大小的圆，使内圆筒穿过顶盖；
所述底座上端面围绕着内圆筒设有圆环状的曝气管，所述曝气管壁间隔均匀设有多个出气孔；底座上端面、位于外圆筒和内圆筒之间，还设置有多个突起；
所述内圆筒内设有植物光源灯，内圆筒内壁上部设有电源控制开关，植物光源灯与电源控制开关电性连接。
8.根据权利要求7所述的牟氏角毛藻的培养基组合物及培养方法及光生物反应器，其特征在于，所述底座上还设有pH和盐度显示器，所述pH和盐度显示器与设于外圆筒内壁的pH和盐度传感器相连接。
9.根据权利要求7所述的牟氏角毛藻的培养基组合物及培养方法及光生物反应器，其特征在于，所述顶盖均布有8-10个通气孔，所述通气孔的直径为1-2cm。
CN201910416691.6A 2019-05-20 2019-05-20 牟氏角毛藻的培养基组合物及培养方法及光生物反应器 Pending CN110257250A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910416691.6A CN110257250A (zh) 2019-05-20 2019-05-20 牟氏角毛藻的培养基组合物及培养方法及光生物反应器

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910416691.6A CN110257250A (zh) 2019-05-20 2019-05-20 牟氏角毛藻的培养基组合物及培养方法及光生物反应器

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN110257250A true CN110257250A (zh) 2019-09-20

Family

ID=67913336

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910416691.6A Pending CN110257250A (zh) 2019-05-20 2019-05-20 牟氏角毛藻的培养基组合物及培养方法及光生物反应器

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110257250A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116555039A (zh) * 2023-05-13 2023-08-08 华南理工大学 一种高品质高生物量蛋白核小球藻的快速养殖方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101696389A (zh) * 2009-10-29 2010-04-21 新奥科技发展有限公司 一种微藻培养方法及其光生物反应器系统
CN106754391A (zh) * 2016-12-30 2017-05-31 宁波浮田生物技术有限公司 一种牟氏角毛藻培养基组合物
CN210193886U (zh) * 2019-05-20 2020-03-27 广西壮族自治区水产科学研究院 一种高效封闭式海洋微藻培养光生物反应器

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101696389A (zh) * 2009-10-29 2010-04-21 新奥科技发展有限公司 一种微藻培养方法及其光生物反应器系统
CN106754391A (zh) * 2016-12-30 2017-05-31 宁波浮田生物技术有限公司 一种牟氏角毛藻培养基组合物
CN210193886U (zh) * 2019-05-20 2020-03-27 广西壮族自治区水产科学研究院 一种高效封闭式海洋微藻培养光生物反应器

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116555039A (zh) * 2023-05-13 2023-08-08 华南理工大学 一种高品质高生物量蛋白核小球藻的快速养殖方法
CN116555039B (zh) * 2023-05-13 2024-01-26 华南理工大学 一种蛋白核小球藻的快速养殖方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107404862B (zh) 牡蛎的陆地养殖方法
CN210193886U (zh) 一种高效封闭式海洋微藻培养光生物反应器
CN111248139B (zh) 一种高密度轮虫的培养装置及方法
CN101638620B (zh) 一种模拟蓝藻水华上浮的方法和装置
US6673592B1 (en) Continuous cultivation of microorganisms in large open tanks in sunlight
CN105638525B (zh) 一种大泷六线鱼的封闭式循环水养殖方法
CN104719669A (zh) 一种栉孔扇贝幼体饵料的制作和投喂方法
CN208144215U (zh) 一种鱼植共生的综合套养循环养殖模式
CN206294733U (zh) 一种折叠式对虾养殖池
CN105838585B (zh) 硅藻培养装置与方法
KR101710301B1 (ko) 제주도 용암 해수로부터 분리된 부착성 규조류를 이용한 해삼양식방법
EP1508272A1 (en) Bioreactor system for the cultivation of aquatic organisms
CN105660357A (zh) 一种浒苔人工半咸水生态育苗法
CN103004662B (zh) 一种利用淡水底栖硅藻培育泥鳅水花苗的方法
CN100392061C (zh) 舟形藻的一种开放式培养方法及其专用培养基
CN110257250A (zh) 牟氏角毛藻的培养基组合物及培养方法及光生物反应器
CN105766742B (zh) 毛蚶苗种生态聚合型繁育方法
TW201529843A (zh) 用於微生物大量培養之系統及其所獲得之產物
CN102578006B (zh) 海水青鳉的实验室周年养殖方法
CN102453685A (zh) 一种利用二氧化碳培养海洋绿藻积累淀粉的方法
CN101781622A (zh) 植物性饵料培养方法
CN102358885B (zh) 一种筒柱藻的生产方法
CN211932151U (zh) 一种高密度轮虫的培养装置
CN107201313A (zh) 一种杜氏盐藻光发酵培养液配方及其快速培养方法
CN105441313A (zh) 热区微藻培养系统

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination