CN110250021B - 一种适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置及其使用方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置及其使用方法,包含水箱、水箱控制柜、加热控温装置、N个计时装置、视频监控装置、水循环泵及PC机,其中,水箱包含方形外框及设置方形外框内的方形带孔内隔板、方形内网格框及若干个游泳筒;加热控温装置用于保持水箱内水温处于恒温状态,每个计时装置均包含一个独立计时器和独立的定时器,并与一个游泳筒相对应,用于记录小鼠负重游泳或不负重游泳;视频监控装置设在水箱外框壁上方,用于观察小鼠游泳试验状态;水循环泵用于保证水箱内水处于循环流动状态,防止小鼠漂浮不动。本发明具有结构简单、安拆、清洗、零件更换方便,试验范围广泛优点。

Description

一种适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置及其使用方法
技术领域
本发明涉及一种动物缓解疲劳功能试验的装置,具体的说是涉及一种适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置及其使用方法。
背景技术
在生命科学研究领域中,小鼠游泳实验是研究抗疲劳功能的一项重要手段,通过实验动物游泳时间的长短反映运动耐力的大小,是评价运动性疲劳非常直观的一种方法。在过去的小鼠缓解体力疲劳试验中,用于小鼠耐力实验用的游泳水箱通常采用的是普通铁质水桶,多只小鼠放置在一个水桶中,其通常存在如下问题:在游泳过程中,小鼠之间相互干扰,导致动物号模糊不清,且无法单独计时;水桶内的水温会受到外部环境的影响而产生波动,进而会影响试验结果及数据的精确性。
中国专利CN207022900U公开了一种小鼠恒温游泳测定仪,包括外壳、设置于外壳中用于储水的储水池、N个竖直设置于外壳上且与储水池密闭连接的游泳罩、设置于储水池中的加热棒、设置于外壳上的电源开关、分别设置于每个游泳罩下方的N个蠕动泵以及设置于外壳上的蠕动泵开关,N为大于等于2的自然数,所述游泳罩为圆筒形结构,所述加热棒通过电源开关连接电源,所述蠕动泵通过蠕动泵开关连接电源。为了避免小鼠依靠游泳罩的内壁借力,所述游泳罩上方设置有圆锥形的锥帽。为了精确控制水温,还包含设置于储水池中的温度传感器以及设置于外壳上的温度显示调节器,所述温度传感器连接于温度显示调节器。为了方便计时,还包含安装于外壳上的N个计时器,N个计时器分别与N个游泳罩对应安装。为了便于换水,还包括设置于外壳底部且与储水池相导通的排水孔。为了提高安全性,还包括水平设置于储水池中且位于游泳罩与加热棒之间的隔板,所述隔板上设置有若干透孔。
虽然上述专利给出了通过设置N个游泳罩解决小鼠之间相互干扰,导致动物号模糊不清的问题,通过给每个游泳罩配备一个计时器解决无法单独计时的问题以及通过加热棒、温度传感器及温度显示调节器调节水温,解决水桶内的水温会受到外部环境的影响而产生波动的问题,但是其结构较复杂、安拆清洗不便,其次,在整个试验过程需要操作者随时在侧,不能实时记录、保存小鼠在试验过程中的实验状态,功能单一,仅能用于记录小鼠负重游泳试验,不具备倒计时功能,不便于小鼠不负重游泳试验测定血清尿素或血乳酸的实验。
发明内容
针对背景技术中存在的问题,本发明的目的在于提供一个结构简单、安拆、清洗方便并带自动控温功能、水流循环功能、计时功能和倒计时功能的适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置及其使用方法。
为实现上述目的,本发明采取的技术方案为:
一种适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置,包含水箱、水箱控制柜、加热控温装置、N个计时装置、视频监控装置、水循环泵及PC机; 其中:
所述水箱包含方形外框以及设置在所述方形外框内的方形带孔内隔板、方形内网格框及N个游泳筒,所述方形带孔内隔板将所述方形外框的内腔分成上、下两个区间;所述方形内网格框位于所述方形外框内腔的上区间内,且将所述方形外框内腔的上区间分隔成若干方形游泳区,在每个所述方形游泳区内均嵌设有一个游泳筒;
所述加热控温装置包含设置在所述方形外框内腔下区间内的水温传感器、电加热器及设置在所述水箱控制柜上的温度数显调节器;所述水温传感器及电加热器均与所述温度数显调节器电连接,所述温度数显调节器与水箱控制柜上设有的控温开关电连接,所述控温开关与水箱控制柜上设有的电源接口电连接,所述电源接口通过电源线与外部电源电连接;
所述的N个计时装置均设置在所述水箱控制柜上,且每个计时装置均与水箱内的一个游泳筒相匹配对应,并与所述水箱控制柜内设有的PLC可编程控制器电连接,每个所述计时装置均包含一个数显计时器、一个数显定时器、一个警示灯A、一个警示灯B、一个蜂鸣器A及一个蜂鸣器B,每个所述计时装置中的警示灯A、警示灯B、蜂鸣器A及蜂鸣器B均与其对应的数显定时器)电连接;所述PLC可编程控制器通过水箱控制柜上设有的PC机数据接口与PC机电连接;
所述视频监控装置包含一个摄像头及一个视频监视器,所述摄像头通过摄像头支架固定在水箱的方形外框正上方,用于拍摄位于水箱的每个游泳筒内的小鼠负重游泳或不负重游泳画面;所述摄像头分别均与所述视频监视器及所述水箱控制柜上设有的摄像头接口电连接,所述视频监视器通过数据线与PC机电连接;所述摄像头接口与水箱控制柜上设有的摄像头开关电连接,所述摄像头开关与水箱控制柜上设有的电源接口电连接;
所述水循环泵设置在水箱方形外框内腔的下区间内,并与水箱控制柜上设有的水循环泵开关电连接,所述水循环泵开关与水箱控制柜上设有的电源接口电连接。
上述技术方案中,所述方形带孔内隔板、方形内网格框及N个游泳筒均可拆卸式设置在所述方形外框内腔中;
所述水箱控制柜设置在所述水箱方形外框的外框壁上或独立设置在水箱外部。
上述技术方案中,在所述方形带孔内隔板上均布有若干个密目的通孔,且每个通孔的孔径小于小鼠粪便的粒径。
上述技术方案中,在所述方形外框一外侧面的上部还设有一个进水管,下部还设有一个排水管;
在所述进水管上还设有一个手动进水阀,在所述排水管上还设有一个手动排水阀;所述水箱通过所述进水管与外部自来水管连通,通过排水管与外部排水槽连通。
上述技术方案中,每个所述游泳筒的上顶面均与所述方形外框及方形内网格框的上顶面平齐;每个所述游泳筒的下顶面均所述方形内网格框的下顶面平齐,并与所述方形带孔内隔板的上顶面贴合。
上述技术方案中,每个所述数显计时器均包含计时数字显示屏及设置在计时数字显示屏一侧的计时开始按钮、计时结束按钮、计时复位按钮;每个所述数显定时器均包含倒计时数字显示屏)以及设置在所述倒计时数字显示屏一侧的倒计时开始按钮A、倒计时结束按钮A、功能调节键A和设置在所述倒计时数字显示屏另一侧的倒计时开始按钮B、倒计时结束按钮B、功能设置键B。
上述技术方案中,在所述方形外框的外底壁上还固设有四个万向脚轮及四个可翻转式支撑腿。
上述技术方案中,每个所述游泳筒的高度为400mm~500mm,且采用有机玻璃制成;所述方形外框为一个上端四周带外翻边开口的方形框,在位于所述方形外框上端后侧的翻边部位和位于所述方形外框上端前侧的翻边部位均分别由一排标签,其中位于所述方形外框上端后侧的翻边部位上的一排标签与位于所述方形外框后排的若干个游泳筒相一一对应,位于所述方形外框上端前侧的翻边部位上的一排标签与位于所述方形外框前排的若干个游泳筒相一一对应。
一种使用适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置进行小鼠负重游泳试验的方法,其包含如下步骤:
S11、给水箱灌入适量小鼠负重游泳试验所需的自来水;
S12、接通电源,按下水箱控制柜上的控温开关,启动加热控温装置工作,然后再按下温度数显调节器上的加热按钮,启动电加热器作,通过加热控温装置中的电加热器给灌入到水箱内的自来水加热,通过加热控温装置中的水温传感器实时监测水箱内的水温变化,并将其监测的水温信号传输给加热控温装置中的温度数显调节器,由温度数显调节器将水温传感器监测到的水温信号数值显示出来;
S13、当操作者观察到温度数显调节器上显示的水温数值达到小鼠负重游泳试验所需的预设温度时,依次按下水箱控制柜上的摄像头开关,启动视频监控装置工作,按下水箱控制柜上的水循环泵开关,启动水循环泵工作,然后再依次在水箱的每个游泳筒内分别放入一只实验组小鼠或对照组小鼠,并在每个游泳筒放入小鼠的时刻按下与该游泳筒相对应的计时装置中数显计时器上的计时开始按钮,开始小鼠负重游泳计时,其中,在每个计时装置中数显计时器上的计时开始按钮被按下的初始时刻,与之对应的计时数字显示屏上显示的初始时刻均为0分:0秒;
S14、在每个计时装置中数显计时器上的计时开始按钮被按下后,操作者可以通过视频监控装置中的视频监视器观察到每只小鼠在相应游泳筒内的负重游泳状态,直至小鼠力竭死亡;
其中,当操作者观察到某游泳筒内的小鼠死亡时,需立即按下与该游泳筒相对应的计时装置中数显计时器上的计时结束按钮,记录下小鼠负重游泳力竭死亡时刻,并将死亡的小鼠从该游泳筒内捞出;
其中,在小鼠负重游泳的整个过程中,通过加热控温装置实时监控水箱内水温变化,若水箱内的水温低于小鼠负重游泳试验所需的预设温度时,可人为按下温度数显调节器上的加热按钮或由温度数显调节器自动调节,启动电加热器工作;若水箱内的水温高于小鼠负重游泳试验所需的预设温度时,可人为按下温度数显调节器上的暂停按钮或由温度数显调节器自动调节,使电加热器暂停工作;
S15、通过数据线将每个计时装置中数显计时器记录下的小鼠负重游泳力竭死亡时刻传输给PC机,由PC机以EXCEL表格形式计算出小鼠负重游泳时间,并统计小鼠负重游泳时间在30分钟以内的数量;
S16、待每组试验完成后,再依次按下每个计时装置中数显计时器上的计时复位按钮,将每个计时装置中计时数字显示屏上显示的数据清零,然后依次按下水箱控制柜上的控温开关、水循环泵开关及摄像头开关,断开电源,让加热控温装置、计时装置、视频监控装置及水循环泵停止工作;
S17、重复步骤S11至S16进行下一实验组或对照组小鼠负重游泳试验或结束试验;
其中,对照组小鼠,指未给予特殊处理的小鼠,并在放入水箱前尾根部均负荷5%体重铅皮;
实验组小鼠,指给予不同剂量受试物的小鼠,并在放入水箱前,尾根部均负荷5%体重的铅皮。
一种使用适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置进行小鼠不负重游泳测定血清尿素或血乳酸的试验方法,其包含如下步骤:
S21、给水箱灌入适量小鼠不负重游泳试验所需的自来水;
S22、接通电源,启动计时装置工作,并根据小鼠不负重游泳试验测定血清尿素或血乳酸的试验需要,按下每个计时装置中数显定时器上的功能调节键A设定小鼠不负重游泳时长和按下每个计时装置中数显定时器上的功能调节键B设定小鼠休息时长;
(1)当采用适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置进行小鼠不负重游泳测定血清尿素试验时,则需将每个计时装置中数显定时器上的倒计时开始按钮A被按下的初始时刻设定为小鼠血清尿素测定试验所需的不负重游泳时长,将每个计时装置中数显定时器上的倒计时开始按钮B被按下的初始时刻设定为小鼠血清尿素测定所需的休息时长,然后再进入步骤S23;
(2)当采用适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置进行小鼠不负重游泳测定血乳酸试验时,则需将每个计时装置中数显定时器上的倒计时开始按钮A被按下的初始时刻设定为小鼠血乳酸测定试验所需的不负重游泳时长,将每个计时装置中数显定时器上的倒计时开始按钮B被按下的初始时刻设定为小鼠血乳酸测定所需试验的休息时长,然后再进入步骤S23;
S23、按下温度数显调节器上的加热按钮,启动电加热器工作,通过加热控温装置中的电加热器给灌入到水箱内的自来水加热,通过加热控温装置中的水温传感器实时监测水箱内的水温变化,并将其监测的水温信号传输给加热控温装置中的温度数显调节器,由温度数显调节器将水温传感器监测到的水温信号数值显示出来;
S24、当操作者观察到温度数显调节器上显示的水温数值达到小鼠不负重游泳测定血清尿素或血乳酸试验所需的预设温度时,依次按下水箱控制柜上的摄像头开关,启动视频监控装置工作,按下水箱控制柜上的水循环泵开关,启动水循环泵工作;
(1)当采用适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置进行小鼠不负重游泳测定血清尿素试验时,按照S25进行下一步操作;
(2)当采用适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置进行小鼠不负重游泳测定血乳酸试验时,按照S26进行下一步操作;
S25、保持水箱当前水温处在小鼠不负重游泳测定血清尿素试验所需的预设温度,然后再依次在水箱的每个游泳筒内分别放入一只实验组小鼠或对照组小鼠,并在每个游泳筒放入小鼠的时刻按下与该游泳筒相对应的计时装置中数显定时器上的倒计时开始按钮A,开始小鼠不负重游泳倒计时;
(1)当某计时装置上的警示灯A开始闪烁和蜂鸣器A开始鸣音时,表示与该计时装置相对应的游泳筒内的小鼠不负重游泳时间到,则需立即按下该计时装置中数显定时器上的倒计时结束按钮A,使警示灯A熄灭、蜂鸣器A停止鸣音,然后将该游泳筒内小鼠捞出放入到指定休息区;其中,在小鼠从相应的游泳筒捞出时,需立即按下与之相对应的计时装置中数显定时器上的倒计时开始按钮B,开始小鼠休息倒计时;
(2)当某计时装置上的警示灯B开始闪烁、蜂鸣器B开始鸣音时,表示与该计时装置相对应的游泳筒内的小鼠,从水箱捞出到指定休息区内时的休息时间到,则需立即按下该计时装置中数显定时器上的倒计时结束按钮B,使警示灯B熄灭、蜂鸣器B停止鸣音,然后在该小鼠的尾根部采血0.5mL(不加抗凝剂),并置于4℃冰箱约3h,待血凝固后采用离心机以2000prn/min转速离心15min,取血清备用,最后再用二乙酰-肟法测定血清中的尿素含量;
其中,在小鼠不负重游泳的整个过程中,通过加热控温装置实时监控水箱内水温变化,若水箱内的水温低于小鼠不负重游泳测定血清尿素试验所需的预设温度时,可人为按下温度数显调节器上的加热按钮或由温度数显调节器自动调节,启动电加热器工作;若水箱内的水温高于小鼠不负重游泳测定血清尿素试验所需的预设温度时,可人为按下温度数显调节器上的暂停按钮或由温度数显调节器自动调节,使电加热器暂停工作;
S26、保持水箱当前水温处在小鼠不负重游泳测定血乳酸试验所需的预设温度,再依次在水箱的每个游泳筒中分别放入一只实验组小鼠或对照组小鼠,并在每个游泳筒放入小鼠的时刻按下与该游泳筒相对应的计时装置中数显定时器上的倒计时开始按钮A,开始小鼠不负重游泳倒计时;其中,在每只小鼠放入到相应游泳筒前,需在各小鼠的尾根部采血20μL,然后加入40μL破膜液中,并立即进行充分振荡破碎细胞,完成第一次采血;
(1)当某计时装置上的警示灯A开始闪烁、蜂鸣器A开始鸣音时,表示与该计时装置相对应的游泳筒内的小鼠不负重游泳时间到,则需立即按下该计时装置中数显定时器上的倒计时结束按钮A,使警示灯A熄灭、蜂鸣器A停止鸣音,然后将该游泳筒内小鼠捞出放入到指定休息区,并在其尾根部采血20μL后,加入到40μL破膜液中振荡,完成第二次采血;
(2)当每个游泳筒内小鼠在完成不负重游泳及第二次采血后,需立即按下与之相对应的计时装置中数显定时器上的倒计时开始按钮B,让其在指定休息区休息至系统预设的休息时间,然后进行第三次采血;
(3)当某计时装置上的警示灯B开始闪烁、蜂鸣器B开始鸣音时,表示与该计时装置相对应的游泳筒内的小鼠,从水箱捞出到指定休息区内时的休息时间到,则需立即按下该计时装置中数显定时器上的倒计时结束按钮B,使警示灯B熄灭、蜂鸣器B停止鸣音,然后再在其尾根部采血20μL,并加入40μL破膜液中振荡,完成第三次采血;
其中,在每次采完血后,均采用乳酸盐测定仪进行血乳酸含量的测定;
其中,在小鼠不负重游泳的整个过程中,通过加热控温装置实时监控水箱内水温变化,若水箱内的水温低于小鼠不负重游泳测定血乳酸试验所需的预设温度时,可人为按下温度数显调节器上的加热按钮或由温度数显调节器自动调节,启动电加热器工作;若水箱内的水温高于小鼠不负重游泳测定血乳酸试验所需的预设温度时,可人为按下温度数显调节器上的暂停按钮或由温度数显调节器自动调节,使电加热器暂停工作;
S27、待每组试验完成后,再依次按下水箱控制柜上的控温开关、水循环泵开关及摄像头开关,断开电源,让加热控温装置、计时装置、视频监控装置及水循环泵停止工作;
S28、重复步骤S21至S25、S27进行下一实验组或对照组小鼠不负重游泳测定血清尿素试验或结束试验;
S29、重复步骤S21至S24、S26至S27进行下一实验组或对照小鼠不负重游泳测定血乳酸试验或结束试验;
其中,对照组小鼠,指未给予特殊处理的小鼠;
实验组小鼠,指给予不同剂量受试物的小鼠。
与现有技术相比,本发明的优点和有益效果是:
1、水箱内部构件采用可拆卸式设计,不仅便于水箱的安拆,零件更换,又方便了对水箱内里的清洗,同时还可避免了游泳过程中,各小鼠相互之间的干扰,提高了实验结果的测试准确性;
2、采用由电加热管、水温传感器及温度数显调节器组成的加热控温装置,保证水箱内的水温能实时处在系统预设的试验范围内,减少了外部环境温度对水桶内的水温造成的波动影响,进一步保证了测试结构的准确性;
3、通过为每个游泳筒配备一个独立计时装置,用来独立记录每个游泳筒内小鼠的游泳时间,解决了人工计时困难的问题,保证了实验结果更准确可靠;
4、通过水循环泵的循环作用作用,使游泳筒内产生同温度同流速的水流,即能保证每个游泳筒内的水环境相同,又能避免每个游泳筒内的小鼠漂浮不动;
5、通过在水箱上配备的视频监控装置,方便记录小鼠负重游泳或不负重游泳的视频,无需操作人员随时在侧,就能很好的便于观察动物的实验状态,利于分析实验结果的准确性;
6、本发明提供的适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置,可以用于多种试验,用以解决了现有小鼠游泳箱功能单一的问题;例如:既可用于动物负重游泳试验测定力竭时长,也可以用于动物非负重游泳试验测定血清尿素或血乳酸含量,还可以用于动物红细胞携氧能力试验测定红细胞、血红蛋白含量等。
附图说明
图1为本发明的工作原理示意图;
图2为本发明的一种实施例;
图3为图2中水箱的结构示意图;
图4为图3中水箱的爆炸图;
图5为图3中水箱的俯视图;
图6为图5中A-A剖面图;
图7为图3中水箱控制柜的结构示意图;
图8为图7中单个计时装置的放大图;
图中:1、水箱;1.1、方形外框;1.2、方形带孔内隔板;1.3、方形内网格框;1.4、游泳筒;1.5、方形游泳区;1.6、进水管;1.7、排水管;1.8、手动进水阀;1.9、手动排水阀;1.10、万向脚轮;1.11、可翻转式支撑腿;1.12、标签;2、水箱控制柜;2.1、电源接口; 2.2、控温开关;2.3、水循环泵开关;2.4、摄像头开关; 2.5、摄像头接口;2.6、PC机数据接口;2.7、PLC可编程控制器; 3、加热控温装置;3.1、水温传感器;3.2、电加热器;3.3、温度数显调节器;3.3a、加热按钮;3.3b、暂停按钮;4、计时装置;4.1、数显计时器;4.1a、计时数字显示屏;4.1b、计时开始按钮;4.1c、计时结束按钮;4.1d、计时复位按钮;4.2、数显定时器4.2a、倒计时数字显示屏;;4.2b、倒计时开始按钮A;4.2c、倒计时结束按钮A;4.2d、功能调节键A;4.2ed、倒计时开始按钮B;4.2f、倒计时结束按钮B;4.2g、功能调节B; 4.3、警示灯A; 4.4、蜂鸣器A;4.5、警示灯B;4.6、蜂鸣器B;5、视频监控装置;5.1、摄像头;5.2、视频监视器;5.3、摄像头支架;6、水循环泵;7、PC机。
具体实施方式
为使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解,下面结合附图和具体实施方式,进一步阐述本发明是如何实施的。
参阅图1至图8所示,为本发明提供的一种适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置的实施例,其包含有水箱1、水箱控制柜2、加热控温装置3、12个计时装置4、视频监控装置5、水循环泵6及PC机7; 其中:
水箱1包含方形外框1.1以及设置在方形外框1.1内的方形带孔内隔板1.2、方形内网格框1.3及12个游泳筒1.4,方形带孔内隔板1.2将所方形外框1.1的内腔分成上、下两个区间;方形内网格框1.3位于方形外框1.1内腔的上区间内,且将方形外框1.1内腔的上区间分隔成若干方形游泳区1.5,在每个方形游泳区1.5内均嵌设有一个游泳筒1.4;加热控温装置3包含设置在方形外框1.1内腔下区间内的水温传感器3.1、电加热器3.2及设置在水箱控制柜2上的温度数显调节器3.3;水温传感器3.1及电加热器3.2均与温度数显调节器3.3电连接,温度数显调节器3.3与水箱控制柜2上设有的控温开关2.2电连接,控温开关2.2与水箱控制柜2上设有的电源接口2.1电连接,电源接口2.1通过电源线与外部电源电连接;
12个计时装置4均设置在水箱控制柜2上,且每个计时装置4均与水箱1内的一个游泳筒1.4相匹配对应,并与水箱控制柜2内设有的PLC可编程控制器2.7电连接,每个计时装置4均包含一个数显计时器4.1、一个数显定时器4.2、一个警示灯A4.3、一个警示灯B4.5、一个蜂鸣器A4.4及一个蜂鸣器B4.6,每个计时装置4中的警示灯A4.、警示灯B4.5、蜂鸣器A4.4及蜂鸣器B4.6均与其对应的数显定时器4.2电连接; PLC可编程控制器2.7通过水箱控制柜2上设有的PC机数据接口2.6与PC机7电连接;
视频监控装置5包含一个摄像头5.1及一个视频监视器5.2,摄像头5.1通过摄像头支架5.3固定在水箱1的方形外框1.1正上方,用于拍摄位于水箱1的每个游泳筒1.4内的小鼠负重游泳或不负重游泳画面;摄像头5.1分别与视频监视器5.2及水箱控制柜2上设有的摄像头接口2.5电连接,视频监视器5.2通过数据线与PC机7电连接;摄像头接口2.5与水箱控制柜2上设有的摄像头开关2.4电连接,摄像头开关2.4与电源接口2.1电连接;
水循环泵6设置在水箱1方形外框1.1内腔的下区间内,并与水箱控制柜2上设有的水循环泵开关2.3电连接,水循环泵开关2.3与电源接口2.1电连接。
为便于水箱内里的清洗和零部件的更换,在本发明实施例中,方形带孔内隔板1.2、方形内网格框1.3及若干个游泳筒1.4均可拆卸式设置在方形外框1.1内腔中;即当需要清洗水箱内里时,先通过将设置在水箱内里的方形带孔内隔板1.2、方形内网格框1.3及若干个游泳筒1.4抽出,然后再进行水箱内里清洗,待清洗完成后再重新将方形带孔内隔板1.2、方形内网格框1.3及若干个游泳筒1.4放回水箱内里。
根据实际设计需要,水箱控制柜2可以设置在水箱1方形外框1.1的外框壁上或独立设置在水箱1外部,在本发明实施例中,水箱控制柜2设置在方形外框1.1的前侧框壁上。
为防止小鼠与水箱1内电加热器3.2及水循环泵6接触,水箱1内腔通过方形带孔内隔板1.2分隔成上、下两个区间,其中水箱1内腔的上区间作为小鼠的游泳区域,水箱1内腔的下区间用作水箱1的水温控制区域。
为使水箱下部水温控制区域内的水能流动到上部小鼠的游泳区域内,在方形带孔内隔板1.2上均布有若干个密目的通孔;另外,为防止小鼠在游泳过程中排泄的粪便沉入水箱底部污染电加热器及水循环泵,每个通孔的孔径设计为小于小鼠粪便的粒径。
在本发明实施例中,在方形外框1.1左外侧面的上部设有一个进水管1.6,下部设有一个排水管1.7;在进水管1.6上还设有一个手动进水阀1.8;在排水管1.7上还设有一个手动排水阀1.9;水箱1通过进水管1.6与外部自来水管连通,通过排水管1.7与外部排水槽连通。
在本发明实施例中,每个游泳筒1.4的上顶面均与方形外框1.1及方形内网格框1.3的上顶面平齐,每个游泳筒1.4的下顶面均方形内网格框1.3的下顶面平齐,并与形带孔内隔板1.2的上顶面贴合。
在本发明实施例中,每个数显计时器4.1均包含计时数字显示屏4.1a及设置在计时数字显示屏4.1a一侧的计时开始按钮4.1b、计时结束按钮4.1c、计时复位按钮4.1d;每个数显定时器4.2均包含倒计时数字显示屏4.2a以及设置在倒计时数字显示屏4.2a一侧的倒计时开始按钮A4.2b、倒计时结束按钮A4.2c、功能调节键A4.2d和设置在倒计时数字显示屏4.2a另一侧的倒计时开始按钮B4.2e、倒计时结束按钮B4.2f、功能设置键B4.2g。
为便于移动水箱,在本发明实施例中,在水箱1方形外框1.1的外底壁上还固设有四个万向脚轮1.12及四个可翻转式支撑腿1.13;当需要移动水箱时,先将水箱底部的四个可翻转式支撑腿1.13向上翻起,由四个万向脚轮1.12承担水箱的重量,然后根据需要将水箱推移至工作所需的位置,待水箱移动至工作所需位置后,将水箱底部的翻起的四个可翻转式支撑腿1.13放下,由其承担水箱的重量,万向脚轮1.12不承担重量。
为防止小鼠沿着游泳筒的筒壁攀爬出水箱,在本发明实施例中,每个游泳筒1.4的截面均设置为圆形,且其高度根据选择在400mm~500mm范围内选取,并采用有机玻璃制成;每个游泳筒的优选高度为450mm;每个游泳筒的材质采用有机玻璃的目的是防止其使用过程发生磨损,影响其使用寿命。
为便于观察者能直观的区分每个游泳筒,方形外框1.1为一个上端四周带外翻边开口的方形框,在位于方形外框1.1上端后侧的翻边部位和位于方形外框1.1上端前侧的翻边部位均分别由一排标签1.12,其中位于方形外框1.1上端后侧的翻边部位上的一排标签1.12与位于方形外框1.1后排的6个游泳筒1.4相一一对应,位于方形外框1.1上端前侧的翻边部位上的一排标签1.12与位于方形外框1.1前排的6个游泳筒1.4相一一对应;根据实际需要,标签1.12可以是印设有数字编号的标签或是印设有字母编号的标签。
本发明提供的适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置,既可用于小鼠负重游泳试验测定小鼠力竭时长,也可以用于小鼠非负重游泳试验测定血清尿素或血乳酸含量,还可以用于小鼠红细胞携氧能力试验测定红细胞、血红蛋白含量等
(一)当采用本发明提供的适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置进行小鼠负重游泳试验时,其具体包含如下步骤:
S11、给水箱1灌入适量小鼠负重游泳试验所需的自来水;
S12、接通电源,按下水箱控制柜2上的控温开关2.2,启动加热控温装置3工作,然后再按下温度数显调节器3.3上的加热按钮3.3a,启动电加热器3.2工作,通过加热控温装置3中的电加热器3.2给灌入到水箱1内的自来水加热,通过加热控温装置3中的水温传感器3.1实时监测水箱1内的水温变化,并将其监测的水温信号传输给加热控温装置3中的温度数显调节器3.3,由温度数显调节器3.3将水温传感器2.1监测到的水温信号数值显示出来;
S13、当操作者观察到温度数显调节器3.3上显示的水温数值达到小鼠负重游泳试验所需的预设温度,25℃时,依次按下水箱控制柜2上的摄像头开关2.4,启动视频监控装置5工作,按下水箱控制柜2上的水循环泵开关2.3,启动水循环泵6工作,然后再依次在水箱1的每个游泳筒1.4内分别放入一只实验组小鼠或对照组小鼠,并在每个游泳筒1.4放入小鼠的时刻按下与该游泳筒1.4相对应的计时装置4中数显计时器4.1上的计时开始按钮4.1b,开始小鼠负重游泳计时,其中,在每个数显计时器4.1上的计时开始按钮4.1b被按下的初始时刻,与之对应的计时数字显示屏4.1a上显示的初始时刻均为0分:0秒;
S14、在每个计时装置4中数显计时器4.1上的计时开始按钮4.1a被按下后,操作者可以通过视频监控装置5中的视频监视器5.2观察到每只小鼠在相应游泳筒1.4内的负重游泳状态,直至小鼠力竭死亡;
其中,当操作者观察到某游泳筒1.4内的小鼠死亡时,需立即按下与该游泳筒1.4相对应的计时装置4中数显计时器4.1上的计时结束按钮4.1c,记录下小鼠负重游泳力竭死亡时刻,并将死亡的小鼠从该游泳筒1.4内捞出;
其中,在小鼠负重游泳的整个过程中,通过加热控温装置3实时监控水箱1内水温变化,若水箱1内的水温低于小鼠负重游泳试验所需的预设温度25℃时,可人为按下温度数显调节器3.3上的加热按钮3.3a或由温度数显调节器3.3自动调节,启动电加热器3.2工作;若水箱1内的水温高于小鼠负重游泳试验所需的预设温度25℃时,可人为按下温度数显调节器3.3上的暂停按钮3.3b或由温度数显调节器3.3自动调节,使电加热器3.2暂停工作;
S15、通过数据线将每个计时装置4中数显计时器4.1记录下的小鼠负重游泳力竭死亡时刻传输给PC机7,由PC机7以EXCEL表格形式计算出小鼠负重游泳时间,并统计小鼠负重游泳时间在30分钟以内的数量;
S16、待每组试验完成后,再依次按下每个计时装置4中数显计时器4.1上的计时复位按钮4.1d,将每个计时装置4中计时数字显示屏4.1a上显示的数据清零,然后依次按下水箱控制柜2上的控温开关2.2、水循环泵开关2.3及摄像头开关2.4,断开电源,让加热控温装置3、计时装置4、视频监控装置5及水循环泵6停止工作;
S17、重复步骤S11至S16进行下一实验组或对照组小鼠负重游泳试验或结束试验;
其中,对照组小鼠,指未给予特殊处理的小鼠,并在放入水箱前尾根部均负荷5%体重铅皮;
实验组小鼠,指给予不同剂量受试物的小鼠,并在放入水箱前,尾根部均负荷5%体重的铅皮。
(二)当采用本发明提供的适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置进行小鼠非负重游泳测定血清尿素或血乳酸试验时,其具体包含如下步骤:
S21、给水箱1灌入适量小鼠不负重游泳试验所需的自来水;
S22、接通电源,启动计时装置4工作,并根据小鼠不负重游泳试验测定血清尿素或血乳酸的试验需要,按下每个计时装置4中数显定时器4.2上的功能调节键A4.2d设定小鼠不负重时长和按下每个数显定时器4.2上的功能调节键B4.2g设定小鼠休息时长;
(1)当采用适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置进行小鼠不负重游泳测定血清尿素试验时,则需将每个计时装置4中数显定时器4.2上的倒计时开始按钮A4.2b被按下的初始时刻设定为小鼠血清尿素测定试验所需的不负重游泳时长,将每个计时装置4中数显定时器4.2上的倒计时开始按钮B4.2e被按下的初始时刻设定为小鼠血清尿素测定试验所需的休息时长,然后再进入步骤S23;
(2)当采用适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置进行小鼠不负重游泳测定血乳酸试验时,则需将每个计时装置4中数显定时器4.2上的倒计时开始按钮A4.2b被按下的初始时刻设定为小鼠血乳酸测定试验所需的不负重游泳时长,将每个计时装置4中数显定时器4.2上的倒计时开始按钮B4.2e被按下的初始时刻设定为小鼠血乳酸测定试验所需的休息时长,然后再进入步骤S23;
S23、按下温度数显调节器3.3上的加热按钮3.3a,启动电加热器3.2工作,通过加热控温装置3中的电加热器3.2给灌入到水箱1内的自来水加热,通过加热控温装置3中的水温传感器3.1实时监测水箱1内的水温变化,并将其监测的水温信号传输给加热控温装置3中的温度数显调节器3.3,由温度数显调节器3.3将水温传感器3.1监测到的水温信号数值显示出来;
S24、当操作者观察到温度数显调节器3.3上显示的水温数值达到小鼠不负重游泳测定血清尿素或血乳酸试验所需的预设温度,30℃时,按下温度数显调节器3.3上的暂停按钮3.3b,让电加热器3.2暂停作,然后再依次按下水箱控制柜2上的摄像头开关2.4,启动视频监控装置5工作,按下水箱控制柜2的水循环泵开关2.3,启动水循环泵6工作;
(1)当采用适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置进行小鼠不负重游泳测定血清尿素试验时,按照S25进行下一步操作;
(2)当采用适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置进行小鼠不负重游泳测定血乳酸试验时,按照S26进行下一步操作;
S25、保持水箱1当前水温处在小鼠不负重游泳测定血清尿素所需的预设温度30℃,然后再依次在水箱1的每个游泳筒1.4内分别放入一只实验组小鼠或对照组小鼠,并在每个游泳筒1.4放入小鼠的时刻按下与该游泳筒1.4相对应的计时装置4中数显定时器4.2上的倒计时开始按钮A4.2b,开始小鼠不负重游泳倒计时;
(1)当某计时装置4上的警示灯A4.3开始闪烁和蜂鸣器A4.4开始鸣音时,表示与该计时装置4中相对应的游泳筒1.4内的小鼠不负重游泳时间到,则立即按下该计时装置4中数显定时器4.2上的倒计时结束按钮A4.2d,使警示灯A4.3熄灭、蜂鸣器A4.4停止鸣音,然后将该游泳筒1.4内小鼠捞出放入到指定休息区;其中,在小鼠从相应的游泳筒1.4捞出时,需立即按下与之相对应的计时装置4中数显定时器4.2上的倒计时开始按钮B4.2e,开始小鼠休息倒计时;
(2)当某计时装置4上的警示灯B4.5开始闪烁、蜂鸣器B4.6开始鸣音时,表示与该计时装置4相对应的游泳筒1.4内的小鼠,从水箱1捞出到指定休息区内时的休息时间到,则需立即按下该计时装置4中数显定时器4.2上的倒计时结束按钮B4.2f,使警示灯B4. 5熄灭、蜂鸣器B4.6停止鸣音,然后在该小鼠的尾根部采血0.5mL(不加抗凝剂),并置于4℃冰箱约3h,待血凝固后采用离心机以2000prn/min转速离心15min,取血清备用,最后再用二乙酰-肟法测定血清中的尿素含量;
其中,在小鼠不负重游泳的整个过程中,通过加热控温装置3实时监控水箱1内水温变化,若水箱1内的水温低于小鼠不负重游泳测定血清尿素试验所需的预设温度30℃时,可人为按下温度数显调节器3.3上的加热按钮3.3a或由温度数显调节器3.3自动调节,启动电加热器3.2工作;若水箱1内的水温高于小鼠不负重游泳测定血清尿素试验所需的预设温度30℃时,可人为按下温度数显调节器3.3上的暂停按钮3.3b或由温度数显调节器3.3自动调节,使电加热器3.2暂停工作;
S26、保持水箱1当前水温处在小鼠不负重游泳测定血乳酸试验所需的预设温度30℃,再依次在水箱1的每个游泳筒1.4中分别放入一只实验组小鼠或对照组小鼠,并在每个游泳筒1.4放入小鼠的时刻按下与该游泳筒1.4相对应的计时装置4中数显定时器4.2上的倒计时开始按钮A4.2b,开始小鼠不负重游泳倒计时;其中,在每只小鼠放入到相应游泳筒1.4前,需在各小鼠的尾根部采血20μL,然后加入40μL破膜液中,并立即进行充分振荡破碎细胞,完成第一次采血;
(1)当某计时装置4上的警示灯A4.3开始闪烁、蜂鸣器A4.4开始鸣音时,表示与该计时装置4相对应的游泳筒1.4内的小鼠不负重游泳时间到,则需立即按下该计时装置4上的倒计时结束按钮A4.2c,使警示灯A4.3熄灭、蜂鸣器A4.4停止鸣音,然后将该游泳筒1.4内小鼠捞出放入到指定休息区,并在其尾根部采血20μL后,加入到40μL破膜液中振荡,完成第二次采血;
(2)当每个游泳筒1.4内小鼠在完成不负重游泳及第二次采血后,需立即按下与之相对应的计时装置4中数显定时器4.2上的倒计时开始按钮B4.2e,让其在指定休息区休息至系统预设的休息时间,然后进行第三次采血;
(3)当某计时装置4上的警示灯B4.5开始闪烁、蜂鸣器B4.6开始鸣音时,表示与该计时装置4相对应的游泳筒1.4内的小鼠,从水箱1捞出到指定休息区内时的休息时间到,则需立即按下该计时装置4中数显定时器4.2上的倒计时结束按钮B4.2e,使警示灯B4.5熄灭、蜂鸣器B4.6停止鸣音,然后再在其尾根部采血20μL,并加入40μL破膜液中振荡,完成第三次采血;
其中,在每次采完血后,均采用乳酸盐测定仪进行血乳酸含量的测定;
其中,在小鼠不负重游泳的整个过程中,通过加热控温装置3实时监控水箱1内水温变化,若水箱1内的水温低于小鼠不负重游泳测定血乳酸试验所需的预设温度30℃时,可人为按下温度数显调节器3.3上的加热按钮3.3a或由温度数显调节器3.3自动调节,启动电加热器3.2工作;若水箱1内的水温高于小鼠不负重游泳测定血乳酸试验所需的预设温度30℃时,可人为按下温度数显调节器3.3上的暂停按钮3.3b或由温度数显调节器3.3自动调节,使电加热器3.2暂停工作;
S27、待每组试验完成后,再依次按下水箱控制柜2上的控温开关2.12、水循环泵开关2.3及摄像头开关2.4,断开电源,让加热控温装置3、计时装置4、视频监控装置5及水循环泵6停止工作;
S28、重复步骤S21至S25、S27进行下一实验组或对照组小鼠不负重游泳测定血清尿素试验或结束试验;
S29、重复步骤S21至S24、S26至S27进行下一实验组或对照小鼠不负重游泳测定血乳酸试验或结束试验;
其中,对照组小鼠,指未给予特殊处理的小鼠;
实验组小鼠,指给予不同剂量受试物的小鼠。
(三)当采用本发明提供的适用评价小鼠缓解疲劳功能试验的装置进行小鼠红细胞携氧能力试验时,其具体包含如下步骤:
S31、给水箱1灌入适量小鼠负重游泳试验所需的自来水;
S32、接通电源,启动计时装置4工作,并根据小鼠红细胞携氧能力试验需要,按下每个计时装置4中数显定时器4.2上的功能调节键A4.2d设定小鼠负重游泳时长,即将每个计时装置4中数显定时器4.2上的倒计时开始按钮A4.2b被按下的初始时刻设定为小鼠红细胞携氧能力试验小鼠负重游泳所需的游泳时长,10min;
S33、按下温度数显调节器3.3上的加热按钮3.3a,启动电加热器3.2工作,通过加热控温装置3中的电加热器3.2给灌入到水箱1内的自来水加热,通过加热控温装置3中的水温传感器3.1实时监测水箱1内的水温变化,并将其监测的水温信号传输给加热控温装置3中的温度数显调节器3.3,由温度数显调节器3.3将水温传感器3.1监测到的水温信号数值显示出来;
S34、当操作者观察到温度数显调节器3.3上显示的水温数值达到小鼠红细胞携氧能力试验负重游泳所需的预设温度,30℃时,依次按下水箱控制柜2上的摄像头开关2.4,启动视频监控装置5工作,按下水箱控制柜2上的水循环泵开关2.3,启动水循环泵6工作,然后再依次在水箱1的每个游泳筒1.4内分别放入一只试验组小鼠或对照组小鼠,并在每个游泳筒1.4放入小鼠的时刻按下与该游泳筒1.4相对应的计时装置4中数显计时器4.1上的倒计时开始按钮A4.2b,开始小鼠负重游泳计时;
其中,当小鼠在水箱1负重游泳的过程中,通过加热控温装置3实时监控水箱1内水温变化,若水箱1内的水温低于小鼠不负重游泳测定血乳酸试验所需的预设温度30℃时,可人为按下温度数显调节器3.3上的加热按钮3.3a或由温度数显调节器3.3自动调节,启动电加热器3.2工作;若水箱1内的水温高于小鼠不负重游泳测定血乳酸试验所需的预设温度30℃时,可人为按下温度数显调节器3.3上的暂停按钮3.3b或由温度数显调节器3.3自动调节,使电加热器3.2暂停工作;
S35、当某计时装置4上的警示灯A4.3开始闪烁和蜂鸣器A4.4开始鸣音时,表示与该计时装置4中相对应的游泳筒1.4内的小鼠负重游泳时间到,则需立即按下该计时装置4中数显定时器4.2上的倒计时结束按钮A4.2d,使警示灯A4.3熄灭、蜂鸣器A4.4停止鸣音,然后将该游泳筒1.4内小鼠捞出放入到指定休息区;
S36、在小鼠从游泳筒1.4内捞出并放入到指定休息区后,立即其摘眼球取血,并分离出血清,备用;
S37、将步骤S36中分离出的小鼠眼球血清,放置到自动血球计数仪中,测定出红细胞计数(RBC)、红细胞压积(Hct)与血红蛋白(Hb);
S38、待每组试验完成后,再依次按下水箱控制柜2上的控温开关2.12、水循环泵开关2.3及摄像头开关2.4,断开电源,让加热控温装置3、计时装置4、视频监控装置5及水循环泵6停止工作;
S39、重复步骤S31至S39进行下一试验组或对照组小鼠红细胞携氧能力试验或结束试验;
其中,对照组小鼠,指腹部剔毛并与对照布料接触一定时间后的小鼠,并在放入水箱前尾根部均负荷5%体重铅皮;
实验组小鼠,指腹部剔毛并与受试布料接触一定时间后的小鼠,并在放入水箱前尾根部均负荷5%体重铅皮。
最后说明,以上所述仅为本发明的实施例,并非因此限制本发明的专利范围,凡是利用本发明说明书及附图内容所作的等效结构或等效流程变换,或直接或间接运用在其他相关的技术领域,均同理包括在本发明的专利保护范围内。

Claims (9)

1.一种基于适用评价小鼠缓解疲劳功能试验装置的小鼠负重游泳试验方法,其特征在于:
所述适用评价小鼠缓解疲劳功能试验装置,包含水箱(1)、水箱控制柜(2)、加热控温装置(3)、N个计时装置(4)、视频监控装置(5)、水循环泵(6)及PC机(7);
所述水箱(1)包含方形外框(1.1)以及设置在所述方形外框(1.1)内的方形带孔内隔板(1.2)、方形内网格框(1.3)及N个游泳筒(1.4),所述方形带孔内隔板(1.2)将所述方形外框(1.1)的内腔分成上、下两个区间;所述方形内网格框(1.3)位于所述方形外框(1.1)内腔的上区间内,且将所述方形外框(1.1)内腔的上区间分隔成N个方形游泳区(1.5),在每个所述方形游泳区(1.5)内均嵌设有一个游泳筒(1.4);
所述加热控温装置(3)包含设置在所述方形外框(1.1)内腔下区间内的水温传感器(3.1)、电加热器(3.2)及设置在所述水箱控制柜(2)上的温度数显调节器(3.3);所述水温传感器(3.1)及电加热器(3.2)均与所述温度数显调节器(3.3)电连接,所述温度数显调节器(3.3)与水箱控制柜(2)上设有的控温开关(2.2)电连接,所述控温开关(2.2)与水箱控制柜(2)上设有的电源接口(2.1)电连接,所述电源接口(2.1)通过电源线与外部电源电连接;
所述的N个计时装置(4)均设置在所述水箱控制柜(2)上,且每个计时装置(4)均与水箱(1)内的一个游泳筒(1.4)相匹配对应,并与所述水箱控制柜(2)内设有的PLC可编程控制器(2.7)电连接,每个所述计时装置(4)均包含一个数显计时器(4.1)、一个数显定时器(4.2)、一个警示灯A(4.3)、一个警示灯B(4.5)、一个蜂鸣器A(4.4)及一个蜂鸣器B(4.6),每个所述计时装置(4)中的警示灯A(4.3)、警示灯B(4.5)、蜂鸣器A(4.4)及蜂鸣器B(4.6)均与其对应的数显定时器(4.2)电连接;所述PLC可编程控制器(2.7)通过水箱控制柜(2)上设有的PC机数据接口(2.6)与PC机(7)电连接;
所述视频监控装置(5)包含一个摄像头(5.1)及一个视频监视器(5.2),所述摄像头(5.1)通过摄像头支架(5.3)固定在水箱(1)正上方,用于拍摄位于水箱(1)内的每个游泳筒(1.4)内的小鼠负重游泳或不负重游泳画面;所述摄像头(5.1)分别与所述视频监视器(5.2)及所述水箱控制柜(2)上设有的摄像头接口(2.5)电连接,所述视频监视器(5.2)通过数据线与PC机(7)电连接;所述摄像头接口(2.5)与水箱控制柜(2)上设有的摄像头开关(2.4)电连接,所述摄像头开关(2.4)与水箱控制柜(2)上设有的电源接口(2.1)电连接;
所述水循环泵(6)设置在水箱(1)方形外框(1.1)内腔的下区间内,并与水箱控制柜(2)上设有的水循环泵开关(2.3)电连接,所述水循环泵开关(2.3)与水箱控制柜(2)上设有的电源接口(2.1)电连接;
所述基于适用评价小鼠缓解疲劳功能试验装置的小鼠负重游泳试验方法,包含如下步骤:
S11、给水箱(1)灌入适量小鼠负重游泳试验所需的自来水;
S12、接通电源,按下水箱控制柜(2)上的控温开关(2.2),启动加热控温装置(3)工作,然后再按下温度数显调节器(3.3)上的加热按钮(3.3a),启动电加热器(3.2)工作,通过加热控温装置(3)中的电加热器(3.2)给灌入到水箱(1)内的自来水加热,通过加热控温装置(3)中的水温传感器(3.1)实时监测水箱(1)内的水温变化,并将其监测的水温信号传输给加热控温装置(3)中的温度数显调节器(3.3),由温度数显调节器(3.3)将水温传感器(3.1)监测到的水温信号数值显示出来;
S13、当操作者观察到温度数显调节器(3.3)上显示的水温数值达到小鼠负重游泳试验所需的预设温度时,依次按下水箱控制柜(2)上的摄像头开关(2.4),启动视频监控装置(5)工作,按下水箱控制柜(2)上的水循环泵开关(2.3),启动水循环泵(6)工作,然后再依次在水箱(1)的每个游泳筒(1.4)内分别放入一只实验组小鼠或对照组小鼠,并在每个游泳筒(1.4)放入小鼠的时刻按下与该游泳筒(1.4)相对应的计时装置(4)中数显计时器(4.1)上的计时开始按钮(4.1b),开始小鼠负重游泳计时;其中,在每个数显计时器(4.1)的计时开始按钮(4.1b)被按下的初始时刻,与之对应的计时数字显示屏(4.1a)上显示的初始时刻均为0分:0秒;
S14、在每个计时装置(4)中数显计时器(4.1)上的计时开始按钮(4.1b)被按下后,操作者可以通过视频监控装置(5)中的视频监视器(5.2)观察到每只小鼠在相应游泳筒(1.4)内的负重游泳状态,直至小鼠力竭死亡;
其中,当操作者观察到某游泳筒(1.4)内的小鼠死亡时,需立即按下与该游泳筒(1.4)相对应的计时装置(4)中数显计时器(4.1)上的计时结束按钮(4.1c),记录下小鼠负重游泳力竭死亡时刻,并将死亡的小鼠从该游泳筒(1.4)内捞出;
其中,在小鼠负重游泳的整个过程中,通过加热控温装置(3)实时监控水箱(1)内水温变化,若水箱(1)内的水温低于小鼠负重游泳试验所需的预设温度时,可人为按下温度数显调节器(3.3)上的加热按钮(3.3a)或由温度数显调节器(3.3)自动调节,启动电加热器(3.2)工作;若水箱(1)内的水温高于小鼠负重游泳试验所需的预设温度时,可人为按下温度数显调节器(3.3)上的暂停按钮(3.3b)或由温度数显调节器(3.3)自动调节,使电加热器(3.2)暂停工作;
S15、通过数据线将每个计时装置(4)中数显计时器(4.1)记录下的小鼠负重游泳力竭死亡时刻传输给PC机(7),由PC机(7)以EXCEL表格形式计算出小鼠负重游泳时间,并统计小鼠负重游泳时间在30分钟以内的数量;
S16、待每组试验完成后,再依次按下每个计时装置(4)中数显计时器(4.1)上的计时复位按钮(4.1d),将每个计时装置(4)中计时数字显示屏(4.1a)上显示的数据清零,然后依次按下水箱控制柜(2)上的控温开关(2.2)、水循环泵开关(2.3)及摄像头开关(2.4),断开电源,让加热控温装置(3)、计时装置(4)、视频监控装置(5)及水循环泵(6)停止工作;
S17、重复步骤S11至S16进行下一实验组或对照组小鼠负重游泳试验或结束试验;
其中,对照组小鼠,指未给予特殊处理的小鼠,并在放入水箱前尾根部均负荷5%体重铅皮;
实验组小鼠,指给予不同剂量受试物的小鼠,并在放入水箱前,尾根部均负荷5%体重的铅皮。
2.根据权利要求1所述的基于适用评价小鼠缓解疲劳功能试验装置的小鼠负重游泳试验方法,其特征在于:所述方形带孔内隔板(1.2)、方形内网格框(1.3)及N个游泳筒(1.4)均可拆卸式设置在所述方形外框(1.1)内腔中;
所述水箱控制柜(2)设置在所述水箱(1)方形外框(1.1)的外框壁上或独立设置在水箱(1)外部。
3.根据权利要求2所述的基于适用评价小鼠缓解疲劳功能试验装置的小鼠负重游泳试验方法,其特征在于:在所述方形带孔内隔板(1.2)上均布有若干个密目的通孔,且每个通孔的孔径小于小鼠粪便的粒径。
4.根据权利要求1所述的基于适用评价小鼠缓解疲劳功能试验装置的小鼠负重游泳试验方法,其特征在于:在所述方形外框(1.1)一外侧面的上部还设有一个进水管(1.6),下部还设有一个排水管(1.7);
在所述进水管(1.6)上还设有一个手动进水阀(1.8),在所述排水管(1.7)上还设有一个手动排水阀(1.9);
所述水箱(1)通过所述进水管(1.6)与外部自来水管连通,通过排水管(1.7)与外部排水槽连通。
5.根据权利要求1所述的基于适用评价小鼠缓解疲劳功能试验装置的小鼠负重游泳试验方法,其特征在于:
每个所述游泳筒(1.4)的上顶面均与所述方形外框(1.1)及方形内网格框(1.3)的上顶面平齐;
每个所述游泳筒(1.4)的下顶面均所述方形内网格框(1.3)的下顶面平齐,并与所述方形带孔内隔板(1.2)的上顶面贴合。
6.根据权利要求1所述的基于适用评价小鼠缓解疲劳功能试验装置的小鼠负重游泳试验方法,其特征在于:
每个所述数显计时器(4.1)均包含计时数字显示屏(4.1a)及设置在计时数字显示屏(4.1a)一侧的计时开始按钮(4.1b)、计时结束按钮(4.1c)、计时复位按钮(4.1d);
每个所述数显定时器(4.2)均包含倒计时数字显示屏(4.2a)以及设置在所述倒计时数字显示屏(4.2a)一侧的倒计时开始按钮A(4.2b)、倒计时结束按钮A(4.2c)、功能调节键A(4.2d)和设置在所述倒计时数字显示屏(4.2a)另一侧的倒计时开始按钮B(4.2e)、倒计时结束按钮B(4.2f)、功能设置键B(4.2g)。
7.根据权利要求1所述的基于适用评价小鼠缓解疲劳功能试验装置的小鼠负重游泳试验方法,其特征在于:在所述方形外框(1.1)的外底壁上还固设有四个万向脚轮(1.10)及四个可翻转式支撑腿(1.11)。
8.根据权利要求1所述的基于适用评价小鼠缓解疲劳功能试验装置的小鼠负重游泳试验方法,其特征在于:每个所述游泳筒(1.4)的高度为400mm~500mm,且采用有机玻璃制成;
所述方形外框(1.1)为一个上端四周带外翻边开口的方形框,在位于所述方形外框(1.1)上端后侧的翻边部位和位于所述方形外框(1.1)上端前侧的翻边部位均分别由一排标签(1.12),其中位于所述方形外框(1.1)上端后侧的翻边部位上的一排标签(1.12)与位于所述方形外框(1.1)后排的若干个游泳筒(1.4)相一一对应,位于所述方形外框(1.1)上端前侧的翻边部位上的一排标签(1.12)与位于所述方形外框(1.1)前排的若干个游泳筒(1.4)相一一对应。
9.一种使用权利要求1中所述的适用评价小鼠缓解疲劳功能试验装置进行小鼠不负重游泳测定血清尿素或血乳酸的试验方法,其特征在于:包含如下步骤:
S21、给水箱(1)灌入适量小鼠不负重游泳试验所需的自来水;
S22、接通电源,启动计时装置(4)工作,并根据小鼠不负重游泳测定血清尿素或血乳酸的试验需要,按下每个计时装置(4)中数显定时器(4.2)上的功能调节键A(4.2d)设定小鼠不负重游泳时长和按下每个数显定时器(4.2)上的功能调节键B(4.2g)设定小鼠休息时长;
(1)当采用适用评价小鼠缓解疲劳功能试验装置进行小鼠不负重游泳测定血清尿素试验时,则需将每个计时装置(4)中数显定时器(4.2)上的倒计时开始按钮A(4.2b)被按下的初始时刻设定为小鼠血清尿素测定试验所需的不负重游泳时长,将每个计时装置(4)中数显定时器(4.2)上的倒计时开始按钮B(4.2e)被按下的初始时刻设定为小鼠血清尿素测定试验所需的休息时长,然后再进入步骤S23;
(2)当采用适用评价小鼠缓解疲劳功能试验装置进行小鼠不负重游泳测定血乳酸试验时,则需将每个计时装置(4)中数显定时器(4.2)上的倒计时开始按钮A(4.2b)被按下的初始时刻设定为小鼠血乳酸测定试验所需的不负重游泳时长,将每个计时装置(4)中数显定时器(4.2)上的倒计时开始按钮B(4.2e)被按下的初始时刻设定为小鼠血乳酸测定试验所需的休息时长,然后再进入步骤S23;
S23、按下温度数显调节器(3.3)上的加热按钮(3.3a),启动电加热器(3.2)工作,通过加热控温装置(3)中的电加热器(3.2)给灌入到水箱(1)内的自来水加热,通过加热控温装置(3)中的水温传感器(3.1)实时监测水箱(1)内的水温变化,并将其监测的水温信号传输给加热控温装置(3)中的温度数显调节器(3.3),由温度数显调节器(3.3)将水温传感器(3.1)监测到的水温信号数值显示出来;
S24、当操作者观察到温度数显调节器(3.3)上显示的水温数值达到小鼠不负重游泳测定血清尿素或血乳酸试验所需的预设温度时,依次按下水箱控制柜(2)上的摄像头开关(2.4),启动视频监控装置(5)工作,按下水箱控制柜(2)上的水循环泵开关(2.3),启动水循环泵(6)工作;
(1)当采用适用评价小鼠缓解疲劳功能试验装置进行小鼠不负重游泳测定血清尿素试验时,按照S25进行下一步操作;
(2)当采用适用评价小鼠缓解疲劳功能试验装置进行小鼠不负重游泳测定血乳酸试验时,按照S26进行下一步操作;
S25、保持水箱(1)当前水温处在小鼠不负重游泳测定血清尿素试验所需的预设温度,然后再依次在水箱(1)的每个游泳筒(1.4)内分别放入一只实验组小鼠或对照组小鼠,并在每个游泳筒(1.4)放入小鼠的时刻按下与该游泳筒(1.4)相对应的计时装置(4)中数显定时器(4.2)上的倒计时开始按钮A(4.2b),开始小鼠不负重游泳倒计时;
(1)当某计时装置(4)上的警示灯A(4.3)开始闪烁和蜂鸣器A(4.4)开始鸣音时,表示与该计时装置(4)相对应的游泳筒(1.4)内的小鼠不负重游泳时间到,则需立即按下该计时装置(4)中数显定时器(4.2)上的倒计时结束按钮A(4.2c),使警示灯A(4.3)熄灭、蜂鸣器A(4.4)停止鸣音,然后将该游泳筒(1.4)内小鼠捞出放入到指定休息区;其中,在小鼠从相应的游泳筒(1.4)捞出时,需立即按下与之相对应的计时装置(4)中数显定时器(4.2)上的倒计时开始按钮B(4.2e),开始小鼠休息倒计时;
(2)当某计时装置(4)上的警示灯B(4.5)开始闪烁、蜂鸣器B(4.6)开始鸣音时,表示与该计时装置(4)相对应的游泳筒(1.4)内的小鼠,从水箱(1)捞出到指定休息区内时的休息时间到,则需立即按下该计时装置(4)中数显定时器(4.2)上的倒计时结束按钮B(4.2f),使警示灯B(4.5)熄灭、蜂鸣器B(4.6)停止鸣音,然后在该小鼠的尾根部采血0.5mL(不加抗凝剂),并置于4℃冰箱3h,待血凝固后采用离心机以2000prn/min转速离心15min,取血清备用,最后再用二乙酰-肟法测定血清中的尿素含量;
其中,在小鼠不负重游泳的整个过程中,通过加热控温装置(3)实时监控水箱(1)内水温变化,若水箱(1)内的水温低于小鼠不负重游泳测定血清尿素试验所需的预设温度时,可人为按下温度数显调节器(3.3)上的加热按钮(3.3a)或由温度数显调节器(3.3)自动调节,启动电加热器(3.2)工作;若水箱(1)内的水温高于小鼠不负重游泳测定血清尿素试验所需的预设温度时,可人为按下温度数显调节器(3.3)上的暂停按钮(3.3b)或由温度数显调节器(3.3)自动调节,使电加热器(3.2)暂停工作;
S26、保持水箱(1)当前水温处在小鼠不负重游泳测定血乳酸试验所需的预设温度,再依次在水箱(1)的每个游泳筒(1.4)中分别放入一只实验组小鼠或对照组小鼠,并在每个游泳筒(1.4)放入小鼠的时刻按下与该游泳筒(1.4)相对应的计时装置(4)中数显定时器(4.2)上的倒计时开始按钮A(4.2b),开始小鼠不负重游泳倒计时;其中,在每只小鼠放入到相应游泳筒(1.4)前,需在各小鼠的尾根部采血20μL,然后加入40μL破膜液中,并立即进行充分振荡破碎细胞,完成第一次采血;
(1)当某计时装置(4)上的警示灯A(4.3)开始闪烁、蜂鸣器A(4.4)开始鸣音时,表示与该数显定时器(4.2)相对应的游泳筒(1.4)内的小鼠不负重游泳时间到,则需立即按下计时装置(4)中数显定时器(4.2)上的倒计时结束按钮A(4.2c),使警示灯A(4.3)熄灭、蜂鸣器A(4.4)停止鸣音,然后将该游泳筒(1.4)内小鼠捞出放入到指定休息区,并在其尾根部采血20μL后,加入到40μL破膜液中振荡,完成第二次采血;
(2)当每个游泳筒(1.4)内小鼠在完成不负重游泳及第二次采血后,需立即按下与之相对应的相对应的计时装置(4)中数显定时器(4.2)上的倒计时开始按钮B(4.2e),让其在指定休息区休息至系统预设的休息时间,然后进行第三次采血;
(3)当某计时装置(4)上的警示灯B(4.5)开始闪烁、蜂鸣器B(4.6)开始鸣音时,表示与该计时装置(4)相对应的游泳筒(1.4)内的小鼠,从水箱(1)捞出到指定休息区内时的休息时间到,则需立即按下该计时装置(4)中数显定时器(4.2上的倒计时结束按钮B(4.2f),使警示灯B(4.5)熄灭、蜂鸣器B(4.6)停止鸣音,然后再在其尾根部采血20μL,并加入40μL破膜液中振荡,完成第三次采血;
其中,在每次采完血后,均采用乳酸盐测定仪进行血乳酸含量的测定;
其中,当小鼠在水箱(1)不负重游泳的过程中,通过加热控温装置(3)实时监控水箱(1)内水温变化,若水箱(1)内的水温低于小鼠不负重游泳测定血乳酸试验所需的预设温度时,可人为按下温度数显调节器(3.3)上的加热按钮(3.3a)或由温度数显调节器(3.3)自动调节,启动电加热器(3.2)工作;若水箱(1)内的水温高于小鼠不负重游泳测定血乳酸试验所需的预设温度时,可人为按下温度数显调节器(3.3)上的暂停按钮(3.3b)或由温度数显调节器(3.3)自动调节,使电加热器(3.2)暂停工作;
S27、待每组试验完成后,再依次按下水箱控制柜(2)上的控温开关(2.2)、水循环泵开关(2.3)及摄像头开关(2.4),断开电源,让加热控温装置(3)、计时装置(4)、视频监控装置(5)及水循环泵(6)停止工作;
S28、重复步骤S21至S25、S27进行下一实验组或对照组小鼠不负重游泳测定血清尿素试验或结束试验;
S29、重复步骤S21至S24、S26至S27进行下一实验组或对照小鼠不负重游泳测定血乳酸试验或结束试验;
其中,对照组小鼠,指未给予特殊处理的小鼠;
实验组小鼠,指给予不同剂量受试物的小鼠。
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