CN109006689A - 一种体力疲劳的大鼠动物模型的建立方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于动物模型构建技术领域，涉及一种体力疲劳的大鼠动物模型的建立方法。所述的方法是在游泳缸中加入氧含量降低的水，将负重或非负重的大鼠放入所述的游泳缸中后，在所述的游泳缸中通入氮气并然后封闭所述的游泳缸，以使大鼠在缺氧的环境下在所述的游泳缸中游泳进行大鼠力竭试验。利用本发明的体力疲劳的大鼠动物模型的建立方法，能够周期短、费用低、操作简便、重现性好的建立体力疲劳的大鼠动物模型，并能避免传统建模方法因水温低而使动物能量过度消耗而达不到乳酸堆积的效果和因水温较高而使动物运动量少而使游泳时间过长的缺点，且营造的缺氧环境使动物在更短的时间内疲劳乳酸堆积更高。
Description
技术领域
本发明属于动物模型构建技术领域，涉及一种体力疲劳的大鼠动物模型的建立方法。
背景技术
现今人们生活节奏加快，工作压力越来越大，疲劳作为一种慢性疾病，在逐渐侵蚀着人们的健康。
疲劳是一种人体主观不适感觉，但客观上会在同等条件下使人失去其原来从事正常活动或工作的能力，如运动员运动能力下降，一般人工作效率降低或在工作中容易犯错。因而如何延缓运动性疲劳的发生和促进疲劳的恢复成为军事医学及运动医学等学科的研究重点。在低氧情况下，人体动脉血氧分压降低时通过脑血流量增加来保护脑组织；然而，在大强度运动时，体内积蓄二氧化碳较多，大脑的氧运输不足导致疲劳的发生。
运动疲劳机制的研究一直是运动医学领域备受关注的课题之一，阐明运动疲劳机理的研究主要以动物实验为主，所以建立可靠的实验动物模型是进行此类研究的基础。
目前国内外建立运动疲劳动物模型主要以大鼠为研究对象，运动方式以跑轮和游泳为主。跑轮运动需要电刺激来使动物产生疲劳状态，运动过程中容易产生运动以外的应激源；而游泳是大鼠本能的一种运动方式，通过给予适宜水温和充足的运动空间，可以使大鼠的运动能力得以充分的发挥。
发明内容
本发明的目的是提供一种体力疲劳的大鼠动物模型的建立方法，以能够周期短、费用低、操作简便、重现性好的建立体力疲劳的大鼠动物模型，并能避免传统建模方法的一些缺点。
为实现此目的，在基础的实施方案中，本发明提供一种体力疲劳的大鼠动物模型的建立方法，所述的方法是在游泳缸中加入氧含量降低的水，将负重或非负重的大鼠放入所述的游泳缸中后，在所述的游泳缸中通入氮气并然后封闭所述的游泳缸，以使大鼠在缺氧的环境下在所述的游泳缸中游泳进行大鼠力竭试验。
在一种优选的实施方案中，本发明提供一种体力疲劳的大鼠动物模型的建立方法，其中所述的氧含量降低的水是将清水煮沸冷却后得到。
在一种优选的实施方案中，本发明提供一种体力疲劳的大鼠动物模型的建立方法，其中所述的氧含量降低的水的温度为28-32℃。
在一种优选的实施方案中，本发明提供一种体力疲劳的大鼠动物模型的建立方法，其中所述的游泳缸为有机玻璃材质圆柱形的游泳缸，其直径为110-130cm，高度为90-94cm。
在一种优选的实施方案中，本发明提供一种体力疲劳的大鼠动物模型的建立方法，其中所述的游泳缸中加入的所述的氧含量降低的水的高度为78-82cm。
在一种优选的实施方案中，本发明提供一种体力疲劳的大鼠动物模型的建立方法，其中所述的游泳缸中通入氮气后其内部上方空气中的体积含氧量为10-12％。
在一种优选的实施方案中，本发明提供一种体力疲劳的大鼠动物模型的建立方法，其中所述的游泳缸的封闭采用凡士林和玻璃盖封口。
在一种优选的实施方案中，本发明提供一种体力疲劳的大鼠动物模型的建立方法，其中所述的大鼠力竭试验时负重所用材料为电阻丝和强力夹，将电阻丝和强力夹配重为每只大鼠体重的0％-2.5％，然后将强力夹夹于大鼠背部靠下的皮肤，电阻丝缠绕于强力夹上不得晃动影响到大鼠游泳。
在一种优选的实施方案中，本发明提供一种体力疲劳的大鼠动物模型的建立方法，其中所述的大鼠力竭试验的大鼠力竭的标准为大鼠位于水面下8秒以上的时间。
本发明的有益效果在于，利用本发明的体力疲劳的大鼠动物模型的建立方法，能够周期短、费用低、操作简便、重现性好的建立体力疲劳的大鼠动物模型，并能避免传统建模方法因水温低而使动物能量过度消耗而达不到乳酸堆积的效果和因水温较高而使动物运动量少而使游泳时间过长的缺点，且营造的缺氧环境使动物在更短的时间内疲劳乳酸堆积更高。因此，本发明建立的大鼠动物模型可以用于抗体力疲劳的食品和药物的研究，可以对这些食品和药物的乳酸清除率和运动耐力进行很好的评价。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明的具体实施方式作出进一步的说明。
实施例1：体力疲劳的大鼠动物模型的建立(一)
成年SD雄性大鼠24只，SPF级，体重180-200g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司。试验前将它们适应性饲养于中国辐射防护研究院药物安全性评价中心啮齿类动物房。
将上述SD雄性大鼠适应性喂养1周后，按照体重随机分为正常对照组与模型组，每组12只。
在有机玻璃材质的圆柱形透明的游泳缸(直径110cm，高90cm)中加入煮沸后冷却的清水至78cm高度(这一水深为大鼠身长的两倍，可有效防止大鼠将其尾部支撑在游泳缸底休息而影响运动负荷)处，并严格控制游泳缸中的水温为28℃。将负重为0％的模型组大鼠置于游泳缸中，然后在游泳缸中通入一定体积氮气后使游泳缸剩余空间体积含氧量为12％(相当于海拔5000米高处的含氧量)。然后用凡士林和玻璃盖对游泳缸封口，营造缺氧环境使大鼠在其中游泳进行大鼠力竭试验。正常对照组大鼠于敞口的同样水深的游泳缸中游泳。将力竭的模型组大鼠(大鼠力竭的标准为大鼠位于水面下8秒以上的时间)从游泳缸中捞出(若是大鼠不沉入水面之下，则以其游泳180min为时间结点)并即刻用尾静脉针刺采血，采血量不低于0.5μL。对所取血样测定乳酸值，正常对照组也于同一时间取血样测定乳酸值。
血样乳酸值测定结果如下表1所示，表示为平均值(Mean)±标准偏差(SD)。
表1实施例1的大鼠疲劳试验游泳力竭时间和血乳酸值测定结果
注：与正常对照组动物乳酸曲线下面积比较，*P<0.05，**P<0.01。
同时试验过程中观察到的试验现象为：
(1)正常对照组大鼠游泳活动正常，50min后主动游泳活动减少，至游泳运动3h时无一只大鼠出现力竭现象；
(2)模型组大鼠游泳运动20min后，主动游泳活动显著减少，甚至漂浮于水面上不运动，至游泳运动90min时所有动物均出现力竭现象。
这样的试验结果表明模型组与正常对照组相比游泳力竭时间著性缩短，模型组的血乳酸值显著高于正常对照组，说明在缺氧环境下动物血乳酸堆积严重。
实施例2：体力疲劳的大鼠动物模型的建立(二)
成年SD雄性大鼠24只，SPF级，体重180-200g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司。试验前将它们适应性饲养于中国辐射防护研究院药物安全性评价中心啮齿类动物房。
将上述SD雄性大鼠适应性喂养1周后，按照体重随机分为正常对照组与模型组，每组12只。
在有机玻璃材质的圆柱形透明的游泳缸(直径130cm，高94cm)中加入煮沸后冷却的清水至82cm高度(这一水深为大鼠身长的两倍，可有效防止大鼠将其尾部支撑在游泳缸底休息而影响运动负荷)处，并严格控制游泳缸中的水温为32℃。将负重2.5％的模型组大鼠置于游泳缸中，然后在游泳缸中通入一定体积氮气后使游泳缸剩余空间体积含氧量为12％(相当于海拔5000米高处的含氧量)。然后用凡士林和玻璃盖对游泳缸封口，营造缺氧环境使大鼠在其中游泳进行大鼠力竭试验。正常对照组大鼠于敞口的同样水深的游泳缸中负重游泳。将力竭的模型组大鼠(大鼠力竭的标准为大鼠位于水面下8秒以上的时间)从游泳缸中捞出(若是大鼠不沉入水面之下，则以其游泳180min为时间结点)并记录力竭时间。
力竭时间测定结果如下表2所示，表示为平均值(Mean)±标准偏差(SD)。
表2实施例2的大鼠疲劳试验游泳力竭时间测定结果
注：与正常对照组动物游泳力竭时间比较，*P<0.05。
试验过程中观察到的试验现象为：
(1)正常对照组大鼠游泳活动呈连续性，至游泳运动100min时所有大鼠均出现力竭现象；
(2)模型组大鼠至游泳运动40min时均出现力竭现象。
这样的试验结果表明模型组与正常对照组相比游泳力竭时间显著性缩短。这一结果说明在这一模型下动物在更短时间达到力竭。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若对本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其同等技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。上述实施例或实施方式只是对本发明的举例说明，本发明也可以以其它的特定方式或其它的特定形式实施，而不偏离本发明的要旨或本质特征。因此，描述的实施方式从任何方面来看均应视为说明性而非限定性的。本发明的范围应由附加的权利要求说明，任何与权利要求的意图和范围等效的变化也应包含在本发明的范围内。
Claims (9)
1.一种体力疲劳的大鼠动物模型的建立方法，其特征在于：所述的方法是在游泳缸中加入氧含量降低的水，将负重或非负重的大鼠放入所述的游泳缸中后，在所述的游泳缸中通入氮气并然后封闭所述的游泳缸，以使大鼠在缺氧的环境下在所述的游泳缸中游泳进行大鼠力竭试验。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的氧含量降低的水是将清水煮沸冷却后得到。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的氧含量降低的水的温度为28-32℃。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的游泳缸为有机玻璃材质圆柱形的游泳缸，其直径为110-130cm，高度为90-94cm。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的游泳缸中加入的所述的氧含量降低的水的高度为78-82cm。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的游泳缸中通入氮气后其内部上方空气中的体积含氧量为10-12％。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的游泳缸的封闭采用凡士林和玻璃盖封口。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的大鼠力竭试验时负重所用材料为电阻丝和强力夹，将电阻丝和强力夹配重为每只大鼠体重的0％-2.5％，然后将强力夹夹于大鼠背部靠下的皮肤，电阻丝缠绕于强力夹上不得晃动影响到大鼠游泳。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的大鼠力竭试验的大鼠力竭的标准为大鼠位于水面下8秒以上的时间。
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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