CN110225912A

CN110225912A - Gsk-3抑制剂

Info

Publication number: CN110225912A
Application number: CN201780084338.1A
Authority: CN
Inventors: R·A·哈尔茨; V·T·阿呼佳; P·西瓦拉卡萨姆; G·M·杜博奇克; J·E·玛考
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2016-11-28
Filing date: 2017-11-27
Publication date: 2019-09-10
Anticipated expiration: 2037-11-27
Also published as: CN110225912B; ES2896938T3; KR20190085112A; EP3544980A1; MA46888A; KR102611539B1; WO2018098411A1; JP2019535790A; JP6977038B2; US20190276463A1; EP3544980B1; US10774086B2

Abstract

本公开文本总体上涉及式I的化合物，包括其盐，以及组合物和使用所述化合物治疗与GSK‑3相关的障碍的方法。

Description

GSK-3抑制剂

相关申请的交叉引用

本申请要求2016年11月28日提交的美国临时序列号62/426,630的优先权，将其通过引用并入本文。

背景技术

本公开文本总体上涉及式I的化合物(包括其盐)以及组合物和使用所述化合物的方法。所述化合物抑制GSK-3，并且可用于多种中枢神经系统障碍的治疗。

GSK-3是脯氨酸定向丝氨酸/苏氨酸激酶，其对多种蛋白质底物进行磷酸化。许多这些蛋白质参与多种不同的细胞功能的调节，包括代谢、分化、增殖和凋亡。取决于亚型，GSK-3具有组成型活性，其基本活性水平受Tyr216/219的磷酸化的正向调节。GSK-3具有独特的底物选择特性，其通过对最佳地位于GSK-3磷酸化位点C末端的四个氨基酸处的磷酸化残基的存在的强烈偏好进行区分。最常见的是，GSK-3活性与诱导底物功能的丧失相关，使得GSK-3抑制常常导致下游底物活性增加。

GSK-3以两种亚型存在，即具有84％的总体同一性并且在其各自的催化结构域内具有大于98％的同一性的GSK-3α(51kDa)和GSK-3β(47kDa)。这两种主要的亚型普遍表达，其中在脑中(尤其是在皮质与海马中)观察到以高水平表达。在大部分脑区中，GSK-3β为占优势的亚型。然而，一些研究表明GKS-3α和GSK-3β在许多细胞过程中具有非常相似的(若非完全冗余的)功能。GSK-3β的活性通过N末端结构域中Ser9处的磷酸化显著降低(最值得注意的是蛋白激酶B(PKB或AKT))。已经提出在多种情绪障碍进行药物治疗后，这种抑制途径可导致神经保护、神经发生和有利的结果。

阿尔茨海默病(AD)的病理明显与β-淀粉样蛋白(Aβ)斑块、可溶形式的Aβ(如Aβ1-42)(与神经元毒性增加相关)以及神经纤维缠结(NFT)的形成相关。有证据表明AD的某些病理机制(如Aβ1-42)引起脑中GSK-3活性的增加。这种调节异常的主要后果是微管相关蛋白tau的过度磷酸化。GSK-3的这种功能已经在细胞培养以及在观察tau和NFT形成的体内研究中均得到了证实。过度磷酸化的tau从微管中脱离，从而导致微管结构不稳定，同时对细胞内结构和转运机制产生负面影响。另外，未复合的过度磷酸化的tau组装成双螺旋丝(paired helical filament，PHF)，其聚集以产生与AD相关的定型细胞内NFT。GSK-3过度活化的其他潜在的病理后果包括神经炎症和神经元凋亡。另外，已经证实GSK-3可参与记忆与学习的机制，并且GSK-3功能的调节异常可以解释一些在AD中观察到的早期认知缺陷。

已知GSK-3在葡萄糖代谢中也起着关键作用，并且首先被鉴定为负责影响糖原合酶的抑制性磷酸化的酶，抑制性磷酸化的结果是降低葡萄糖到糖原的转化率，从而提高血糖水平。GSK-3的这种功能受胰岛素控制。胰岛素与其受体的结合间接导致AKT的活化，并且随后导致GSK-3的抑制性Ser9磷酸化。

这些结果和观察结果表明，GSK-3活性的调节可用于阿尔茨海默病以及其他神经退行性疾病的神经病理学和症状方面的治疗。这些疾病包括但不限于tau蛋白病(例如，额颞痴呆、进行性核上性麻痹、嗜银颗粒病、皮质基底节变性、匹克病)、帕金森病、肌萎缩侧索硬化、中风、亨廷顿病、周围神经病变、创伤性脑损伤、脊髓创伤和血管性痴呆。

抑制GSK-3的化合物也可用于糖尿病、炎性疾病(如类风湿性关节炎和骨关节炎)、难治性抑郁症、精神分裂症、双相情感障碍、躁狂抑郁症、骨质疏松症、心肌保护以及多种癌症(如神经胶质瘤、非小细胞肺癌、胰腺癌、乳腺癌、T细胞或B细胞白血病和多发性骨髓瘤)的治疗。还已经显示对GSK-3的抑制可下调T-reg细胞中的PD-1，从而增强体内病毒清除率(Immunity,第44卷,第2期,2016年2月16日)。

关于GSK-3的功能、潜在的治疗应用和抑制酶的其他化合物的最新进展列出如下：Kaidanovich-Beilin O和Woodgett JR(2011)GSK-3:functional insights from cellbiology and animal models.Front.Mol.Neurosci.4:40.doi:10.3389/fnmol.2011.00040；“Glycogen Synthase Kinase 3(GSK-3)and Its Inhibitors”,Martinez,Ana/Castro,Ana/Medina,Miguel(编辑),John Wiley and Sons(2006)；以及Gentles,RG,Hu,S.和Dubowchik,GM(2009)Recent Advances in the Discovery of GSK-3Inhibitors and a Perspective on their Utility for the Treatment of Alzheimer's Disease.Annual Reports in Medicinal Chemistry 44,3-26。

本发明提供了技术优势，例如，所述化合物是GSK-3的新型抑制剂，并且可用于多种中枢神经系统障碍的治疗。另外，所述化合物例如就其作用机制、结合、抑制功效、靶标选择性、可溶性、安全特性或生物利用度中的一个或多个方面而言为药物用途提供了优势。

发明内容

本发明包括式I的化合物(包括药学上可接受的盐)、药学组合物及其在治疗与GSK-3相关的障碍中的用途。

本发明的一个方面是式I的化合物：

其中：

R¹是氢或N(R³)(R⁴)；

R²是氢、烷基、环烷基或环烯基；

或者R²是吡啶基或苯基，并且被0-3个选自氰基、卤基、烷基、卤代烷基、烷氧基和卤代烷氧基的取代基取代；

R³是氢、烷基、(环烷基)烷基、环烷基、烷基羰基或环烷基羰基；

R⁴是氢；

Ar¹是3-吡啶基、3-哒嗪基、4-哒嗪基、5-嘧啶基或2-吡嗪基，并且被0-3个选自卤基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷基磺酰基、N(R³)(R⁴)或Ar²的取代基取代；并且

Ar²是被0-3个选自氰基、卤基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基的取代基取代的苯基；

或其药学上可接受的盐。

本发明的另一个方面是式I的化合物，其中R¹是N(R³)(R⁴)并且R²是氢。

本发明的另一个方面是式I的化合物，其中R¹是氢并且R²不是氢。

本发明的另一个方面是式I的化合物，其中Ar¹是被0-3个选自氰基、卤基、烷基、卤代烷基、(R²)烷基、烷氧基、卤代烷氧基和R²的取代基取代的3-吡啶基。

本发明的另一个方面是式I的化合物，其中Ar¹是被0-3个选自氰基、卤基、烷基、卤代烷基、(R²)烷基、烷氧基、卤代烷氧基和R²的取代基取代的5-嘧啶基。

本发明的另一个方面是式I的化合物，其中Ar²是被0-3个选自氰基、卤基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷基亚磺酰基和烷基磺酰基的取代基取代的苯基。

对于式I的化合物，可变取代基(包括R¹、R²、R³、R⁴、Ar¹和Ar²)的任何例子的范围可以独立地与可变取代基的任何其他例子的范围使用。因此，本发明包括不同方面的组合。

除非另有说明，这些术语具有如下含义。“卤基”包括氟、氯、溴和碘。“烷基”意指由1至6个碳构成的直链或支链的烷基基团。“烯基”意指具有至少一个双键的由2至6个碳构成的直链或支链的烷基基团。“炔基”意指具有至少一个三键的由2至6个碳构成的直链或支链的烷基基团。“环烷基”意指由3至7个碳构成的单环的环系统。“卤代烷基”和“卤代烷氧基”包括从单卤代到全卤代所有卤化异构体。具有烃部分的术语(例如烷氧基)包括烃部分的直链和支链的异构体。“芳基”意指具有6至12个碳原子的单环或双环的芳香族烃基，或双环的稠环系统(其中一个或两个环为苯基基团)。双环的稠环系统由与四元至六元芳香族或非芳香族碳环的环稠合的苯基基团组成。芳基基团的代表性例子包括但不限于茚满基、茚基、萘基、苯基和四氢萘基。“杂芳基”意指具有1-5个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的5至7元单环的或8至11元双环的芳香族环系统。括号中的和多重括号中的术语旨在向本领域技术人员阐明键合关系。例如，术语如((R)烷基)意指烷基取代基进一步被R取代基取代。

本发明包括化合物的所有药学上可接受的盐形式。药学上可接受的盐是其中抗衡离子不显著促进化合物的生理活性或毒性，并因此起药理学等效物作用的那些盐。这些盐可以根据常用的有机技术采用可商购获得的试剂来制备。一些阴离子盐形式包括乙酸盐、醋硬脂酸盐、苯磺酸盐、溴化物、氯化物、柠檬酸盐、富马酸盐、葡糖醛酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、碘化物、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐和昔萘酸盐(xinofoate)。一些阳离子盐形式包括铵、铝、苯乍生(benzathine)、铋、钙、胆碱、二乙胺、二乙醇胺、锂、镁、葡甲胺、4-苯基环己胺、哌嗪、钾、钠、氨丁三醇和锌。

一些式I的化合物含有至少一个不对称碳原子。本发明包括化合物的所有立体异构体形式，包括混合物和分离的异构体。立体异构体的混合物可以通过本领域已知的方法分离成各个异构体。

本发明旨在包括在本发明的化合物中出现的原子的所有同位素。同位素包括原子序数相同但质量数不同的那些原子。作为一般例子而非限制，氢的同位素包括氘和氚。碳的同位素包括¹³C和¹⁴C。本发明的同位素标记的化合物通常可以通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与本文所述的那些类似的方法，使用适当的同位素标记的试剂代替原本使用的未标记的试剂来制备。此类化合物可以具有很多潜在的用途，例如在测定生物活性时作为标准和试剂。在稳定同位素的情况下，此类化合物可以具有有利地改变生物学、药理学或药物动力学特性的潜力。

生物学方法

在V形底384孔板中进行激酶测定。最终测定体积为30μL，通过在测定缓冲液(100mM HEPES pH 7.4、10mM MgCl₂、25mM β-甘油磷酸、0.015％Brij35和0.25mM DTT)中添加15μL酶、底物(荧光素化的肽FL-KRREILSRRP[ps]ERYR-NH2和ATP)和测试化合物来制备。将反应在室温下孵育20小时，并且通过向每个样品中添加45μL 35mM EDTA来终止。在Caliper LabChip3000(Caliper，马萨诸塞州霍普金顿)上通过电泳分离非磷酸化底物和磷酸化产物来分析反应混合物。通过与100％抑制的无酶对照反应和0％抑制的仅含媒介物的反应进行比较来计算抑制数据。测定中试剂的最终浓度为250pM GSK3α或GSK3β、20uM ATP、1.5uM FL-KRREILSRRP[ps]ERYR-NH2和1.6％DMSO。生成剂量反应曲线以确定抑制50％激酶活性所需的浓度(IC₅₀)。将化合物以10mM溶于二甲基亚砜(DMSO)中，并且在十一个浓度下进行评价。IC₅₀值通过非线性回归分析导出。

药物组合物和治疗方法

式I的化合物可用于治疗神经或精神障碍。因此，本发明的另一个方面是组合物，其包含式I的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。

本发明的另一个方面是用于调节GSK-3活性的治疗方法，其可用于阿尔茨海默病以及其他神经退行性疾病的神经病理学和症状方面的治疗。这些疾病包括但不限于tau蛋白病(例如，额颞痴呆、进行性核上性麻痹、嗜银颗粒病、皮质基底节变性、匹克病)、帕金森病、肌萎缩侧索硬化、中风、亨廷顿病、周围神经病变、创伤性脑损伤、脊髓创伤和血管性痴呆，其包括向患者给予治疗有效量的式I的化合物。

本发明的另一个方面是用于治疗糖尿病、炎性疾病(如类风湿性关节炎和骨关节炎)、难治性抑郁症、精神分裂症、双相情感障碍、躁狂抑郁症、骨质疏松症、心肌保护以及多种癌症(如神经胶质瘤、非小细胞肺癌、胰腺癌、乳腺癌、T细胞或B细胞白血病和多发性骨髓瘤)的方法，其包括向患者给予治疗有效量的式I的化合物。

本发明的另一个方面是用于治疗阿尔茨海默病的方法，其包括向患者给予治疗有效量的式I的化合物。

本发明的另一个方面是式I的化合物在制造用于治疗阿尔茨海默病的药剂中的用途。

“患者”意指在情感障碍、神经退行性疾病、精神障碍、癌症、代谢障碍或炎性障碍领域的从业人员所理解的适合治疗的人。

“治疗”、“疗法”和相关术语如神经和精神障碍领域的从业人员所理解的使用。

本发明的化合物通常作为药物组合物来给予，所述药物组合物包含治疗有效量的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体，并且可以含有常规赋形剂。药学上可接受的载体是具有可接受的安全特性的那些常规已知载体。组合物包括所有常见的固体和液体形式，包括例如胶囊剂、片剂、糖锭剂和粉剂以及液体混悬剂、糖浆剂、酏剂和溶液剂。组合物是使用常用的配制技术来制备，并且常规赋形剂(如粘合剂和润湿剂)和媒介物(如水和乙醇)通常用于组合物。参见例如，Remington's Pharmaceutical Sciences,MackPublishing Company,Easton,PA,第17版,1985。

固体组合物通常以剂量单位来配制，并且优选每剂提供约1mg至1000mg活性成分的组合物。剂量的一些例子是1mg、10mg、100mg、250mg、500mg和1000mg。通常，其他药剂将以与临床上所用的该类药剂相似的单位范围存在。通常，此范围为0.25-1000mg/单位。

液体组合物通常以剂量单位范围来配制。通常，液体组合物将在1-100mg/mL的单位剂量范围内。剂量的一些例子是1mg/mL、10mg/mL、25mg/mL、50mg/mL和100mg/mL。通常，其他药剂将以与临床上所用的该类药剂相似的单位范围存在。通常，此范围为1-100mg/mL。

本发明包括所有常规给予方式；优选口服和肠胃外方法。通常，给药方案将与临床上所用的其他药剂相似。通常，每日剂量将为每日1-100mg/kg体重。通常，口服给予需要化合物较多，而肠胃外给予需要化合物较少。然而，具体的给药方案将由医生使用合理的医学判断来决定。

合成方法

式I的化合物可以通过本领域已知的方法(包括下文所述的那些方法并且包括本领域技术内的变化)来制备。一些试剂和中间体是本领域已知的。其他试剂和中间体可以通过本领域已知的方法使用现有的材料来制备。用于描述化合物的合成的变量(例如编号“R”的取代基)仅旨在说明如何制备化合物，而不应与权利要求中或本说明书的其他部分中使用的变量混淆。以下方法用于说明目的，并不旨在限制本发明的范围。方案包括本领域已知的合理的变化。

本申请中(特别包括下文的说明性方案和实施例中)使用的缩写是本领域技术人员公知的。所使用的一些缩写如下：BOC或Boc代表叔丁氧基羰基；RT或rt或r.t.代表室温或保留时间(根据语境决定)；t_R代表保留时间；HATU代表O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐；BOP代表苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐；EDC或EDCI代表1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚铵盐酸盐；TBTU代表O-苯并三唑-1-基-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓四氟硼酸盐；SPhos代表2-二环己基膦基-2',6'-二甲氧基联苯；XPhos代表2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯；i-Pr或iPr代表异丙基；THF代表四氢呋喃；EtOH代表乙醇；Ac代表乙酰基；DMAP代表N,N-二甲基氨基吡啶；TEA或Et₃N代表三乙胺；DIEA或i-Pr₂NEt代表N,N-二异丙基乙胺；Me代表甲基；TFA代表三氟乙酸；Ph代表苯基；DMF代表N,N-二甲基甲酰胺；DMSO代表二甲基亚砜；NMP代表N-甲基吡咯烷；MeCN代表乙腈；HOBt代表1-羟基苯并三唑；dppf代表1,1'-双(二苯基磷烷基)二茂铁；Et代表乙基；h或hr或hrs代表小时；min或mins代表分钟；EtOAc代表乙酸乙酯；DCM代表二氯甲烷；MeOH代表甲醇；AcOH代表乙酸；并且MeOD代表CD₃OD。

制备式I的化合物的一般化学方案：

可以如方案1中所述的来制备式I的化合物。通过1的乙酯的形成来制备化合物2。在DMAP以及溶剂(如二氯甲烷、二氯乙烷、DMF或THF)的存在下，使用标准偶联试剂(如HATU、BOP、EDC、T3P或TBTU)在范围从20℃至80℃的温度下进行反应以形成化合物2。在溶剂(如二噁烷或THF)中，在碱(如N,N-二异丙基乙胺)的存在下，用4-甲氧基苄胺处理2得到化合物3。在三氟乙酸的存在下，可以通过加热3除去3中的保护基团以得到4。在溶剂(如二噁烷、THF或DMF)中，在取代的2-溴代酮的存在下，在范围从25℃至120℃的温度下通过加热4来制备5。然后可以通过在10％钯碳的存在下进行氢化反应除去5中的氯取代基以得到6。在THF或二噁烷和水的混合物中，使用氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾水解6中的酯以形成7。通过7与多种胺之间的偶联反应来制备式I的化合物。在碱(如N,N-二异丙基乙胺)和溶剂(如二氯甲烷、二氯乙烷、DMF或THF)的存在下，可以使用标准肽偶联试剂(如HATU、BOP、EDC、T3P或TBTU)在范围从20℃至80℃的温度下进行偶联反应以形成式I的化合物。

方案1

制备式I的化合物的一般化学方案的替代途径：

可替代地，可以通过方案2中所示的途径来制备式I的化合物。将来自方案1的化合物3用在溶剂(如二噁烷)中的双(频哪醇合)二硼、PdCl₂(dppf)和乙酸钾处理以得到8。在三氟乙酸的存在下，可以通过加热8除去8中的保护基团以得到9。在溶剂(如二噁烷、THF或DMF)中，在取代的2-溴代酮的存在下，在范围从25℃至120℃的温度下通过加热9来制备6。使用在THF或二噁烷和水的混合物中的氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾水解6中的酯以形成7。通过7与多种胺之间的偶联反应来制备式I的化合物。在碱(如N,N-二异丙基乙胺)和溶剂(如二氯甲烷、二氯乙烷、DMF或THF)的存在下，可以使用标准肽偶联试剂(如HATU、BOP、EDC、T3P或TBTU)在范围从20℃至80℃的温度下进行偶联反应以形成式I的化合物。

方案2

制备式II的化合物的一般化学方案：

可以如方案3中所述的来制备式II的化合物。在溶剂(如异丙醇、二噁烷、THF或DMF)中，在氯乙醛的存在下，在范围从25℃至120℃的温度下通过加热4来制备10。然后在发烟硝酸/硫酸的存在下硝化10得到化合物11。然后通过在10％钯碳的存在下进行氢化反应除去11中的氯取代基以得到12。在乙酸和甲醇中，在还原剂(如氰基硼氢化钠或三乙酰氧基硼氢化钠)的存在下，通过12与醛的还原胺化反应来制备化合物13。在THF或二噁烷和水的混合物中，使用氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾水解13中的酯以形成14。通过14与多种胺之间的偶联反应来制备式II的化合物。在碱(如N,N-二异丙基乙胺)和溶剂(如二氯甲烷、二氯乙烷、DMF或THF)的存在下，可以使用标准肽偶联试剂(如HATU、BOP、EDC、T3P或TBTU)在范围从20℃至80℃的温度下进行偶联反应以形成式II的化合物。

方案3

表1列出了使用方案1-2合成的多种类似物。表1.

表2列出了使用方案1-2合成的多种类似物。

表2

实施例	R<sup>1</sup>	R<sup>2</sup>
			37	Ph	OEt
38	Ph	OCH<sub>2</sub>CF<sub>3</sub>

表3列出了使用方案3合成的多种类似物。

表3

在以下实施例中，质子NMR谱是在Bruker 400或500MHz NMR质谱仪上记录的。化学位移是以相对于四甲基硅烷的δ值报告的。液相色谱(LC)/质谱是在与Waters MicromassZQ连接的Shimadzu LC上运行的。

制备型HPLC方法

方法A

柱：Waters Sunfire 30x 150mm，5um

流动相A：5％乙腈/95％含0.1％TFA的水

流动相B：95％乙腈/5％含0.1％TFA的水

梯度：在20分钟内10％B至100％B的梯度；在100％B下保持5min

流速：40mL/min

检测器波长：254nm

分析型HPLC方法

方法A

柱：Waters Sunfire C18，4.6x 150mm，3.5μm

流动相A：含0.1％TFA的水

流动相B：含0.1％TFA的乙腈

梯度：在15min内10％B至95％B的梯度；在100％B下保持5min

流速：1mL/min

检测器波长：254nm

方法B

柱：Waters Xbridge Phenyl，4.6x 150mm，3.5μm

流动相A：含0.1％TFA的水

流动相B：含0.1％TFA的乙腈

梯度：在15min内10％B至95％B的梯度；在100％B下保持5min

流速：1mL/min

检测器波长：254nm

方法C

柱：Waters XTERRA C18 4.6x 30mm，3.5μm

流动相A：10％甲醇/90％含0.1％TFA的水

流动相B：90％甲醇/10％含0.1％TFA的水

梯度：在12min内0％B至100％B的梯度；在100％B下保持10min

流速：1mL/min

检测器波长：254nm

方法D

柱：Phenomenex LUNA Phenyl-Hex 4.6x 150mm，3.5μm

流动相A：10％甲醇/90％含0.1％TFA的水

流动相B：90％甲醇/10％含0.1％TFA的水

梯度：在12min内0％B至100％B的梯度；在100％B下保持10min

流速：1mL/min

检测器波长：254nm

使用以下缩写：THF(四氢呋喃)，MeOH(甲醇)，DMF(N,N-二甲基甲酰胺)，EtOH(乙醇)，MeCN(乙腈)，DCE(二氯乙烷)，DCM(二氯甲烷)，TFA(三氟乙酸)，HCl(盐酸)，DMAP(二甲基氨基吡啶)，n-BuLi(正丁基锂)，DIPEA(N,N-二异丙基乙胺)，HATU(O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸盐)，TBTU(N,N,N′,N′-四甲基-O-(苯并三唑-1-基)脲鎓四氟硼酸盐)，TLC(薄层色谱)，NMR(核磁共振)，LC/MS或LCMS(液相色谱/质谱)，HPLC(高压液相色谱)。

通过方案1制备2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸

A部分。3,6-二氯哒嗪-4-甲酸乙酯

向3,6-二氯哒嗪-4-甲酸(15.0g，78mmol)在THF(150mL)中的混合物中添加乙醇(18.15mL，311mmol)和DMAP(0.950g，7.77mmol)。然后经1min分批添加EDC(16.39g，85mmol)。反应温和地放热。将反应在室温下搅拌16h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(150mL)的分液漏斗中。将水层用醚(3x 250mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(20％→40％在己烷中的乙酸乙酯；300g柱)纯化，以得到呈无色油状物的3,6-二氯哒嗪-4-甲酸乙酯(13.2g，59.7mmol，产率77％)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.88(s,1H),4.50(q,J＝7.0Hz,2H),1.46(t,J＝7.2Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 221.1[(M+H)⁺,针对C₇H₇Cl₂N₂O₂的计算值为221.0]。

B部分。6-氯-3-((4-甲氧基苄基)氨基)哒嗪-4-甲酸乙酯

向3,6-二氯哒嗪-4-甲酸乙酯(10.0g，45.2mmol)和(4-甲氧基苯基)甲胺(7.09mL，54.3mmol)在二噁烷(200mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(23.70mL，136mmol)。将反应混合物在70℃下加热1h。将混合物冷却至室温并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(20％→30％在己烷中的乙酸乙酯)纯化，以得到呈浅黄色固体的6-氯-3-((4-甲氧基苄基)氨基)哒嗪-4-甲酸乙酯(6.00g，18.65mmol，产率41％)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.86(br.s.,1H),7.76(s,1H),7.36(d,J＝8.8Hz,2H),6.90(d,J＝8.8Hz,2H),4.80(d,J＝5.3Hz,2H),4.39(q,J＝7.1Hz,2H),3.82(s,3H),1.41(t,J＝7.0Hz,3H)；LC/MS(ESI)m/e 322.1[(M+H)⁺,针对C₁₅H₁₇ClN₃O₃的计算值为322.1]。

C部分。3-氨基-6-氯哒嗪-4-甲酸乙酯

将6-氯-3-((4-甲氧基苄基)氨基)哒嗪-4-甲酸乙酯(1.2g，3.73mmol)和TFA(5.75ml，74.6mmol)的混合物在回流下加热3h。将反应混合物浓缩并且转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(15mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(60％→80％在己烷中的乙酸乙酯；12g柱)纯化，以得到呈绿色固体的3-氨基-6-氯哒嗪-4-甲酸乙酯(700mg，3.47mmol，产率93％)：¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.77(s,1H),7.00(s br,2H),4.40(q,J＝7.0Hz,2H),1.40(t,J＝7.2Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 202.0[(M+H)⁺,针对C₇H₉N₃O₂Cl的计算值为202.6)]。

D部分。6-氯-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯

将3-氨基-6-氯哒嗪-4-甲酸乙酯(600mg，2.98mmol)添加至在DMF(10mL)中的2-溴-1-苯基乙酮(711mg，3.57mmol)中。将溶液在60℃下加热4h。将反应混合物在醚(30mL)和饱和NaHCO₃水溶液(20mL)之间分配。将有机层用水(20mL)和饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(5％→20％在己烷中的乙酸乙酯；40g柱)纯化，以得到呈黄色固体的6-氯-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(600mg，1.989mmol，产率67％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.08(s,1H),8.12-8.08(m,2H),7.74(s,1H),7.55-7.49(m,2H),7.45-7.40(m,1H),4.49(q,J＝7.2Hz,2H),1.42(t,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 302.0[(M+H)⁺,针对C₁₅H₁₃N₃O₂Cl的计算值为302.1]。

E部分。2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯

在50mL圆底烧瓶中，将6-氯-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(1.30g，4.31mmol)和10％钯碳(0.459g，0.215mmol)在氯仿(15mL)和乙醇(15mL)中的混合物在H₂气氛(气球)下搅拌14h。通过硅藻土垫过滤除去催化剂并且将滤液浓缩，以得到2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(500mg，产率43％)。将粗产物直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/e268.1[(M+H)⁺,针对C₁₅H₁₄N₃O₂的计算值为268.1]。

F部分。2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸

将2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(235mg，0.879mmol)和一水合氢氧化锂(111mg，2.64mmol)在水(0.500mL)和THF(10mL)中的混合物在室温下持续搅拌2h。将溶剂浓缩，以得到2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(220mg，产率99％)，将其可直接用于下一步骤：LCMS(ESI)m/e 240.1[(M+H)⁺,针对C₁₃H₁₀N₃O₂的计算值为240.1]。

通过方案2制备2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸

A部分。3,6-二氯哒嗪-4-甲酸乙酯

B部分。6-氯-3-((4-甲氧基苄基)氨基)哒嗪-4-甲酸乙酯

C部分。3-((4-甲氧基苄基)氨基)哒嗪-4-甲酸乙酯

将6-氯-3-((4-甲氧基苄基)氨基)哒嗪-4-甲酸乙酯(3.00g，9.32mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧杂环戊硼烷)(2.60g，10.26mmol)、乙酸钾(2.75g，28.0mmol)和二噁烷(30mL)合并于圆底烧瓶中。添加1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁二氯化钯(II)·CH₂Cl₂(0.767g，0.932mmol)，并且将反应混合物在95℃下加热6.5h。将混合物冷却至室温。将反应混合物通过硅藻土垫过滤(用乙酸乙酯冲洗)，并且转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(50mL)和水(50mL)的分液漏斗中。将各层分离并且将水层用乙酸乙酯(2x50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(40％→60％在己烷中的乙酸乙酯；120g柱)纯化，以得到呈棕色油状物的3-((4-甲氧基苄基)氨基)哒嗪-4-甲酸乙酯(2.42g，8.42mmol，产率90％)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.71(d,J＝5.0Hz,1H),7.87(br.s.,1H),7.73(d,J＝4.8Hz,1H),7.40-7.35(m,2H),6.94-6.87(m,2H),4.85(d,J＝5.3Hz,2H),4.37(q,J＝7.3Hz,2H),3.82(s,3H),1.40(t,J＝7.2Hz,3H)；LC/MS(ESI)m/e 288.1[(M+H)⁺,针对C₁₅H₁₈N₃O₃的计算值为288.1]。

D部分。3-氨基哒嗪-4-甲酸乙酯

将3-((4-甲氧基苄基)氨基)哒嗪-4-甲酸乙酯(1.5g，5.22mmol)在TFA(20mL)中的混合物在回流下加热3h。将反应混合物浓缩，然后转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(100mL)的分液漏斗中。将水层用二氯甲烷(3x 100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(2％→10％在CH₂Cl₂中的甲醇；160g柱)纯化，以得到呈棕褐色固体的3-氨基哒嗪-4-甲酸乙酯(752mg，4.50mmol，产率86％)：¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.75(d,J＝5.0Hz,1H),7.76(d,J＝4.8Hz,1H),6.53(br.s.,1H),4.42(q,J＝7.1Hz,2H),1.43(t,J＝7.2Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 168.1[(M+H)⁺,针对C₇H₁₀N₃O₂的计算值为168.1]。

E部分。2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯

将3-氨基哒嗪-4-甲酸乙酯(30mg，0.179mmol)和2-溴-1-苯基乙酮(107mg，0.538mmol)在二噁烷(1mL)中的混合物在80℃下加热3h。将混合物冷却至室温并且转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(5mL)的分液漏斗中。将水层用二氯甲烷(3x 10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(10％→40％在己烷中的乙酸乙酯；12g柱)纯化，以得到呈黄色薄膜状物的2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(9.1mg，0.034mmol，产率19％)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.43(d,J＝4.8Hz,1H),8.40(s,1H),8.11-8.07(m,2H),7.61(d,J＝4.5Hz,1H),7.52-7.46(m,2H),7.43-7.37(m,1H),4.59(q,J＝7.0Hz,2H),1.54(t,J＝7.2Hz,3H)；LC/MS(ESI)m/e 268.1[(M+H)⁺,针对C₁₅H₁₄N₃O₂的计算值为268.1]。

F部分。2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸

将2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(235mg，0.879mmol)和一水合氢氧化锂(111mg，2.64mmol)在水(0.500mL)和THF(10mL)中的混合物在室温下持续搅拌2h。将溶剂浓缩，以得到2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(220mg，产率99％)，将其可直接用于下一步骤：LCMS(ESI)m/e240.1[(M+H)⁺,针对C₁₃H₁₀N₃O₂的计算值为240.1]。

实施例1

2-苯基-N-(吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(35mg，0.146mmol)和吡啶-3-胺(6.0mg，0.062mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.036mL，0.210mmol)，随后添加HATU(32mg，0.084mmol)。将反应混合物在室温下搅拌14h。将反应混合物浓缩并且将产物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈黄色无定形固体的2-苯基-N-(吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(5.5mg，产率42％)：¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ12.11(s,1H),9.15(s,1H),9.08(d,J＝2.3Hz,1H),8.80(d,J＝4.6Hz,1H),8.48(dd,J＝4.7,1.4Hz,1H),8.41-8.38(m,1H),8.20(dd,J＝8.3,1.1Hz,2H),7.88(d,J＝4.7Hz,1H),7.61-7.54(m,3H),7.47-7.42(m,1H)；LC/MS(ESI)m/e 316.1[(M+H)⁺,针对C₁₈H₁₄N₅O的计算值为316.1]；HPLC(方法A)：t_R＝9.32min；(方法B)t_R＝9.56min。

实施例2

N-(4-甲基吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

在室温下，向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(30mg，0.125mmol)、4-甲基吡啶-3-胺(27.1mg，0.251mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.131mL，0.752mmol)在DMF(2mL)中的溶液中添加HATU(95mg，0.251mmol)。将反应混合物在室温下搅拌6h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(15mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(20％→60％在己烷中的乙酸乙酯；12g柱)纯化，以得到呈黄色固体的N-(4-甲基吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(16mg，0.046mmol，产率37％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.75(s,1H),9.35(s,1H),9.16(s,1H),8.82(d,J＝4.8Hz,1H),8.35(d,J＝4.8Hz,1H),8.21-8.11(m,2H),7.94(d,J＝4.8Hz,1H),7.60-7.51(m,2H),7.48-7.40(m,2H),2.61(s,3H)；LCMS(ESI)m/e 330.2[(M+H)⁺,针对C₁₉H₁₆N₅O的计算值为330.1]；HPLC(方法A)：t_R＝8.96min；(方法B)t_R＝10.00min。

实施例3

N-(4-异丙氧基吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

A部分。6-氯-N-(4-异丙氧基吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向6-氯-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(50mg，0.166mmol)、4-异丙氧基吡啶-3-胺2HCl(74.6mg，0.331mmol)在DMF(1mL)中的混合物中添加LiHMDS(1M在THF中)(0.679mL，0.679mmol)并且将反应混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(15mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(40％→60％在己烷中的乙酸乙酯；12g柱)纯化，以得到呈绿色固体的6-氯-N-(4-异丙氧基吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(25mg，0.056mmol，产率34％)：¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ11.84(s,1H),9.64(s,1H),8.37(d,J＝5.8Hz,1H),8.34(s,1H),8.08-8.03(m,2H),8.00(s,1H),7.55-7.41(m,3H),6.92(d,J＝5.8Hz,1H),4.77(dt,J＝12.2,6.2Hz,1H),1.39(d,J＝6.0Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 408.2[(M+H)⁺,针对C₂₁H₁₉N₅O₂Cl的计算值为408.1]。

B部分。N-(4-异丙氧基吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

将6-氯-N-(4-异丙氧基吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(30mg，0.074mmol)和10％钯碳(15.66mg，0.015mmol)在EtOH(2mL)中的混合物置于parr振荡器中在45psi的氢下持续6h。将混合物通过硅藻土垫过滤并且浓缩。将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈黄色固体的N-(4-异丙氧基吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(12mg，0.020mmol，产率27％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.12(s,1H),9.65(s,1H),9.18(s,1H),8.83(d,J＝4.8Hz,1H),8.66(d,J＝6.5Hz,1H),8.23-8.18(m,2H),7.96(d,J＝4.5Hz,1H),7.78(d,J＝6.8Hz,1H),7.59-7.53(m,2H),7.52-7.44(m,1H),5.19(quin,J＝6.1Hz,1H),1.42(d,J＝6.0Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 374.2[(M+H)⁺,针对C₂₁H₂₀N₅O₂的计算值为374.2]；HPLC(方法A)：t_R＝10.13min；(方法B)t_R＝10.62min。

实施例4

2-苯基-N-(4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

在室温下，向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(20mg，0.084mmol)、4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-胺(32.1mg，0.167mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.088mL，0.502mmol)在DMF(2mL)中的溶液中添加HATU(63.6mg，0.167mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。将混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(15mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(30％→80％在己烷中的乙酸乙酯；12g柱)纯化，以得到呈黄色固体的2-苯基-N-(4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(15mg，0.034mmol，产率41％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.95(s,1H),9.52(s,1H),9.14(s,1H),8.80(d,J＝4.8Hz,1H),8.43(d,J＝5.8Hz,1H),8.17(d,J＝7.3Hz,2H),7.93(d,J＝4.8Hz,1H),7.60-7.49(m,3H),7.47-7.38(m,1H),5.21(q,J＝8.8Hz,2H)；LCMS(ESI)m/e 414.0[(M+H)⁺,针对C₂₀H₁₅N₅O₂F₃的计算值为414.1]；HPLC(方法C)：t_R＝10.95min；(方法D)t_R＝11.90min。

实施例5

N-(4-(甲基磺酰基)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

在0℃下，向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(10mg，0.042mmol)在二氯甲烷(1mL)中的悬浮液中添加DMF(0.647μl，8.36μmol)和草酰氯(10.98μl，0.125mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时。将混合物浓缩并且将残余物在真空下干燥1小时。在0℃下，将残余物悬浮于二氯甲烷(1mL)中，随后添加三乙胺(0.023mL，0.167mmol)、DMAP(10.21mg，0.084mmol)和4-(甲基磺酰基)吡啶-3-胺(7.92mg，0.046mmol)。将冷却浴除去并且将反应在室温下搅拌4h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(15mL)的分液漏斗中。将水层用CH₂Cl₂(3x 15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过反相HPLC(方法A)，随后通过制备型TLC(5％在二氯甲烷中的甲醇)纯化，以得到呈黄色固体的N-(4-(甲基磺酰基)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(2.0mg，5.03μmol，产率12％)：¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ9.53(s,1H),8.76(s,1H),8.74(d,J＝5.3Hz,1H),8.67(d,J＝4.8Hz,1H),8.29(d,J＝1.5Hz,1H),8.27(s,1H),8.06(d,J＝5.0Hz,1H),7.99(d,J＝4.5Hz,1H),7.50-7.43(m,3H),3.29(s,3H)；LCMS(ESI)m/e 394.1[(M+H)⁺,针对C₁₉H₁₆N₅O₃S的计算值为394.1]；HPLC(方法A)：t_R＝16.74min；(方法B)t_R＝17.89min。

实施例6

2-苯基-N-(4-苯基吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(50mg，0.209mmol)、4-苯基吡啶-3-胺(71.1mg，0.418mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.219mL，1.254mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加HATU(159mg，0.418mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。将混合物浓缩并且将残余物通过硅胶柱色谱(30％→50％在己烷中的乙酸乙酯；12g柱)纯化，以得到呈棕褐色固体的2-苯基-N-(4-苯基吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(32mg，0.081mmol，产率39％)：¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.83(s,1H),9.37(s,1H),9.03(s,1H),8.78(d,J＝4.8Hz,1H),8.54(d,J＝5.0Hz,1H),7.91(d,J＝4.8Hz,1H),7.77-7.66(m,2H),7.52-7.43(m,5H),7.38(dd,J＝5.0,1.8Hz,3H),7.35-7.27(m,1H)；LCMS(ESI)m/e 392.3[(M+H)⁺,针对C₂₄H₁₈N₅O的计算值为392.2]；HPLC(方法A)：t_R＝8.87min；(方法B)t_R＝9.30min。

实施例7

N-(4-(4-氟苯基)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(30mg，0.125mmol)、4-(4-氟苯基)吡啶-3-胺(47.2mg，0.251mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.131mL，0.752mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加HATU(95mg，0.251mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12h。将溶剂蒸发并且将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈黄色固体的N-(4-(4-氟苯基)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(22mg，0.034mmol，产率27％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.92(s,1H),9.48(s,1H),9.06(s,1H),8.79(d,J＝4.8Hz,1H),8.59(d,J＝5.3Hz,1H),7.93(d,J＝4.8Hz,1H),7.86-7.80(m,2H),7.62(d,J＝5.0Hz,1H),7.49-7.42(m,2H),7.42-7.37(m,3H),7.33-7.24(m,2H)；LCMS(ESI)m/e 410.2[(M+H)⁺,针对C₂₄H₁₇N₅OF的计算值为410.1]；HPLC(方法A)：t_R＝10.75min；(方法B)t_R＝11.06min。

实施例8

N-(4-(4-氰基苯基)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(25mg，0.105mmol)、4-(3-氨基吡啶-4-基)苄腈(40.8mg，0.209mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.110mL，0.627mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加HATU(79mg，0.209mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12h。将溶剂蒸发并且将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈黄色固体的N-(4-(4-氰基苯基)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(8mg，0.012mmol，产率11％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.89(s,1H),9.47(s,1H),9.06(s,1H),8.79(d,J＝4.8Hz,1H),8.61(d,J＝5.0Hz,1H),8.00-7.88(m,5H),7.60(d,J＝5.3Hz,1H),7.46-7.38(m,5H)；LCMS(ESI)m/e 417.2[(M+H)⁺,针对C₂₅H₁₇N₆O的计算值为417.4]；HPLC(方法A)：t_R＝10.63min；(方法B)t_R＝10.83min。

实施例9

2-苯基-N-(4-(哌啶-1-基)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(40mg，0.167mmol)、4-(哌啶-1-基)吡啶-3-胺2HCl(84mg，0.334mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.175mL，1.003mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加HATU(127mg，0.334mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。将溶剂蒸发并且将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈棕褐色固体的2-苯基-N-(4-(哌啶-1-基)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(41mg，0.063mmol，产率38％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.79(s,1H),9.21(s,1H),9.04(d,J＝0.5Hz,1H),8.84(d,J＝4.5Hz,1H),8.44(dd,J＝6.8,1.0Hz,1H),8.26-8.12(m,2H),7.94(d,J＝4.8Hz,1H),7.61-7.33(m,4H),3.53-3.38(m,4H),1.61(br.s.,4H),1.46(d,J＝4.5Hz,2H)；LCMS(APCI)m/e 399.3[(M+H)⁺,针对C₂₃H₂₃N₆O的计算值为399.2]；HPLC(方法A)：t_R＝16.70min；(方法B)t_R＝18.07min。

实施例10

N-(4-(4-氰基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(30mg，0.125mmol)、1-(3-氨基吡啶-4-基)哌啶-4-甲腈(50.7mg，0.251mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.131mL，0.752mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加HATU(95mg，0.251mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12h。将混合物浓缩并且将残余物通过反相HPLC(方法A)，随后通过制备型TLC(10％在二氯甲烷中的甲醇)纯化，以得到呈黄色固体的N-(4-(4-氰基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(10mg，0.022mmol，产率18％)：¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ11.83(br.s.,1H),9.45(s,1H),8.59(d,J＝4.8Hz,1H),8.41(s,2H),8.07-7.95(m,3H),7.56-7.45(m,3H),7.02(d,J＝5.3Hz,1H),3.30-3.18(m,2H),3.13-3.00(m,2H),2.55-2.44(m,1H),2.04-1.92(m,2H),1.91-1.80(m,2H)；LCMS(ESI)m/e 424.2[(M+H)⁺,针对C₂₄H₂₂N₇O的计算值为424.3]；HPLC(方法A)：t_R＝8.91min；(方法B)t_R＝9.57min。

实施例11

N-(4-(4-氟哌啶-1-基)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(30mg，0.125mmol)、4-(4-氟哌啶-1-基)吡啶-3-胺(49.0mg，0.251mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.131mL，0.752mmol)在DMF(2mL)中的溶液中添加HATU(95mg，0.251mmol)。将反应混合物在室温下搅拌6h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(15mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(20％→60％在己烷中的乙酸乙酯；12g柱)纯化，以得到呈黄色固体的N-(4-(4-氟哌啶-1-基)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(16mg，0.038mmol，产率31％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.74(s,1H),9.18(s,2H),8.82(d,J＝4.5Hz,1H),8.33(d,J＝5.5Hz,1H),8.22-8.16(m,2H),7.96(d,J＝4.5Hz,1H),7.56-7.50(m,2H),7.48-7.41(m,1H),4.68-4.46(m,1H),3.26-3.15(m,2H),3.12-3.03(m,2H),2.00-1.86(m,2H),1.79(d,J＝13.8Hz,2H)；LCMS(ESI)m/e 417.1[(M+H)⁺,针对C₂₃H₂₂N₆OF的计算值为417.2]；HPLC(方法A)：t_R＝9.96min；(方法B)t_R＝10.56min。

实施例12

N-(4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸TFA(100mg，0.283mmol)和4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-胺(72.4mg，0.340mmol)在DMF(2mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.247mL，1.415mmol)，随后添加HATU(129mg，0.340mmol)。将反应混合物在室温下搅拌18h。将混合物浓缩并且将产物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈黄色无定形固体的N-(4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(58mg，0.125mmol，产率44％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.77(s,1H),9.21(s,1H),9.17(s,1H),8.83(d,J＝4.8Hz,1H),8.35(d,J＝5.5Hz,1H),8.17(d,J＝7.0Hz,2H),7.97(d,J＝4.8Hz,1H),7.58-7.50(m,2H),7.48-7.42(m,1H),7.27(d,J＝5.5Hz,1H),3.22(t,J＝5.0Hz,4H),2.10-1.95(m,4H)；LC/MS(ESI)m/e 435.1[(M+H)⁺,针对C₂₃H₂₁F₂N₆O的计算值为435.2]；HPLC(方法A)：t_R＝10.26min；(方法B)t_R＝10.24min。

实施例13

N-(4-吗啉代吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

A部分。6-氯-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸

将6-氯-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(55mg，0.182mmol)和一水合氢氧化锂(22.95mg，0.547mmol)在水(0.150mL)和THF(3mL)中的混合物在室温下搅拌2h。将溶剂浓缩，以得到6-氯-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(50mg，产率100％)。将产物直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/e 274.1[(M+H)⁺,针对C₁₃H₉N₃O₂Cl的计算值为274.0]。

B部分。6-氯-N-(4-吗啉代吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向6-氯-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(50mg，0.183mmol)、4-吗啉代吡啶-3-胺(65.5mg，0.365mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.128mL，0.731mmol)在DMF(3mL)中的溶液中添加HATU(139mg，0.365mmol)。将反应混合物在室温下搅拌4h。将混合物浓缩并且将残余物通过硅胶色谱(30％→40％在己烷中的乙酸乙酯，12g柱)纯化，以得到6-氯-N-(4-吗啉代吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(32mg，0.074mmol，产率40％)：¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ11.79(s,1H),9.37(s,1H),8.42(d,J＝5.5Hz,1H),8.36(s,1H),8.11-8.04(m,2H),8.02(s,1H),7.56-7.41(m,3H),7.02(d,J＝5.5Hz,1H),3.75-3.66(m,4H),3.16-3.06(m,4H)；LCMS(ESI)m/e 435.2[(M+H)⁺,针对C₂₂H₂₀ClN₆O₂的计算值为435.1]。

C部分。N-(4-吗啉代吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

将6-氯-N-(4-吗啉代吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(30mg，0.069mmol)和10％钯碳(14.68mg，0.014mmol)在CHCl₃(5mL)和MeOH(5.00mL)中的混合物置于在45psi的氢下并且在Parr振荡器上振荡3h。将混合物通过硅藻土垫过滤并且将滤液浓缩。将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈黄色无定形固体的N-(4-吗啉代吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(13mg，0.020mmol，产率30％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.92(s,1H),9.21(s,1H),9.14(s,1H),8.84(d,J＝4.8Hz,1H),8.51(d,J＝6.3Hz,1H),8.24(d,J＝7.3Hz,2H),7.95(d,J＝4.8Hz,1H),7.60-7.53(m,3H),7.50-7.43(m,1H),3.65(d,J＝4.8Hz,4H)(4H被3.54ppm处的水峰掩盖)；LCMS(ESI)m/e 401.3[(M+H)⁺,针对C₂₂H₂₁N₆O₂的计算值为401.2]；HPLC(方法A)：t_R＝9.18min；(方法B)t_R＝9.79min。

实施例14

N-(4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(30mg，0.125mmol)、4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-胺(48.5mg，0.251mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.131mL，0.752mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加HATU(95mg，0.251mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。将溶剂蒸发并且将残余物通过硅胶柱色谱(30％→50％在己烷中的乙酸乙酯；12g柱)纯化，以得到呈黄色固体的N-(4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(22mg，0.053mmol，产率42％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.83(s,1H),9.19(d,J＝3.3Hz,2H),8.82(d,J＝4.8Hz,1H),8.35(d,J＝5.5Hz,1H),8.27-8.22(m,2H),7.95(d,J＝4.8Hz,1H),7.54(t,J＝7.4Hz,2H),7.49-7.44(m,1H),7.21(d,J＝5.3Hz,1H),3.77-3.52(m,3H),2.92-2.89(m,2H),2.76-2.73(m,2H),0.95(d,J＝6.3Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 415.2[(M+H)⁺,针对C₂₃H₂₃N₆O₂的计算值为415.2]；HPLC(方法A)：t_R＝10.04min；(方法B)t_R＝10.15min。

实施例15

手性分离外消旋N-(4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(柱：ChiralPak AS-H，30x 250mm，5μm；流动相：15％EtOH(ww 0.1％DEA)/85％CO₂；120巴；35℃；70mL/min；370nm)。峰1的分析数据(对映异构体1)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.83(s,1H),9.19(d,J＝3.3Hz,2H),8.82(d,J＝4.8Hz,1H),8.35(d,J＝5.5Hz,1H),8.27-8.22(m,2H),7.95(d,J＝4.8Hz,1H),7.54(t,J＝7.4Hz,2H),7.49-7.44(m,1H),7.21(d,J＝5.3Hz,1H),3.77-3.52(m,3H),2.92-2.89(m,2H),2.76-2.73(m,2H),0.95(d,J＝6.3Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 415.2[(M+H)⁺,针对C₂₃H₂₃N₆O₂的计算值为415.2]；分析型手性HPLC(柱：ChiralPak AS-H，4.6x 250mm，5μm；流动相：15％EtOH(ww 0.1％DEA)/85％CO₂；120巴；35℃；3mL/min；370nm)，t_R＝8.38min；HPLC(方法A)：t_R＝8.55min；(方法B)t_R＝9.76min。

实施例16

手性分离外消旋N-(4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(柱：ChiralPak AS-H，30x 250mm，5μm；流动相：15％EtOH(ww 0.1％DEA)/85％CO₂；120巴；35℃；70mL/min；370nm)。峰2的分析数据(对映异构体2)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.83(s,1H),9.19(d,J＝3.3Hz,2H),8.82(d,J＝4.8Hz,1H),8.35(d,J＝5.5Hz,1H),8.27-8.22(m,2H),7.95(d,J＝4.8Hz,1H),7.54(t,J＝7.4Hz,2H),7.49-7.44(m,1H),7.21(d,J＝5.3Hz,1H),3.77-3.52(m,3H),2.92-2.89(m,2H),2.76-2.73(m,2H),0.95(d,J＝6.3Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 415.2[(M+H)⁺,针对C₂₃H₂₃N₆O₂的计算值为415.2]；分析型手性HPLC(柱：ChiralPak AS-H，4.6x 250mm，5μm；流动相：15％EtOH(ww 0.1％DEA)/85％CO₂；120巴；35℃；3mL/min；370nm)，t_R＝10.10min；HPLC(方法A)：t_R＝9.42min；(方法B)t_R＝9.89min。

实施例17

(R)-N-(4-(3-甲基吗啉代)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(40mg，0.167mmol)、(R)-4-(3-甲基吗啉代)吡啶-3-胺(64.6mg，0.334mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.175mL，1.003mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加HATU(127mg，0.334mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12h。将混合物浓缩并且将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈黄色固体的(R)-N-(4-(3-甲基吗啉代)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(33mg，0.051mmol，产率30％)：¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.86(s,1H),9.28(s,1H),9.17(s,1H),8.81(d,J＝4.8Hz,1H),8.38(d,J＝5.3Hz,1H),8.27-8.21(m,2H),7.94(d,J＝4.8Hz,1H),7.57-7.50(m,2H),7.50-7.42(m,1H),7.30(d,J＝5.3Hz,1H),3.66(dd,J＝11.2,3.1Hz,1H),3.61-3.50(m,2H),3.50-3.40(m,1H),3.27-3.17(m,2H),2.73-2.64(m,1H),0.98(d,J＝6.3Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 415.1[(M+H)⁺,针对C₂₃H₂₃N₆O₂的计算值为415.2]；HPLC(方法A)：t_R＝12.77min；(方法B)t_R＝14.12min。

实施例18

(S)-N-(4-(3-甲基吗啉代)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(40mg，0.167mmol)、(S)-4-(3-甲基吗啉代)吡啶-3-胺(64.6mg，0.334mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.175mL，1.003mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加HATU(127mg，0.334mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。将混合物浓缩并且将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈黄色固体的(S)-N-(4-(3-甲基吗啉代)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(36mg，0.055mmol，产率33％)：¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.86(s,1H),9.28(s,1H),9.17(s,1H),8.81(d,J＝4.8Hz,1H),8.38(d,J＝5.5Hz,1H),8.27-8.21(m,2H),7.94(d,J＝4.5Hz,1H),7.57-7.50(m,2H),7.50-7.42(m,1H),7.30(d,J＝5.5Hz,1H),3.66(dd,J＝11.2,3.1Hz,1H),3.61-3.51(m,2H),3.50-3.43(m,1H),3.27-3.19(m,2H),2.68(td,J＝7.8,3.8Hz,1H),0.98(d,J＝6.3Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 415.2[(M+H)⁺,针对C₂₃H₂₃N₆O₂的计算值为415.2]；HPLC(方法A)：t_R＝14.27min；(方法B)t_R＝14.37min。

实施例19

N-(5-甲氧基吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(30mg，0.125mmol)和5-甲氧基吡啶-3-胺(31.1mg，0.251mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.131mL，0.752mmol)和HATU(95mg，0.251mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12h。将混合物浓缩并且将残余物通过硅胶柱色谱(5％在二氯甲烷中的甲醇；12g柱)纯化，以得到呈黄色固体的N-(5-甲氧基吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(21mg，0.060mmol，产率48％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.13(br.s.,1H),9.15(s,1H),8.79(d,J＝4.8Hz,1H),8.54(s,1H),8.23-8.16(m,3H),8.06(br.s.,1H),7.86(d,J＝4.5Hz,1H),7.57(t,J＝7.5Hz,2H),7.48-7.42(m,1H),3.92(s,3H)；LCMS(ESI)m/e 346.1[(M+H)+,针对C₁₉H₁₆N₅O₂的计算值为346.2]；HPLC(方法A)：t_R＝10.50min；(方法B)t_R＝10.52min。

实施例20

N-(4-(4,4-二氟哌啶-1-基)-6-氟吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(10mg，0.042mmol)、4-(4,4-二氟哌啶-1-基)-6-氟吡啶-3-胺(9.67mg，0.042mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.029mL，0.167mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加HATU(19.07mg，0.050mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(15mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈黄色固体的N-(4-(4,4-二氟哌啶-1-基)-6-氟吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(8mg，0.012mmol，产率28％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.72(s,1H),9.17(s,1H),8.85-8.77(m,2H),8.16(d,J＝7.0Hz,2H),7.96(d,J＝4.8Hz,1H),7.59-7.50(m,2H),7.48-7.38(m,1H),3.28(br.s.,4H),2.08-1.95(m,4H)；LCMS(APCI)m/e 453.2[(M+H)⁺,针对C₂₃H₂₀F₃N₆O的计算值为453.2]；HPLC(方法A)：t_R＝16.05min；(方法B)t_R＝15.05min。

实施例21

N-(6-氟-4-吗啉代吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(30mg，0.094mmol)和6-氟-4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-胺(19.87mg，0.094mmol)在DMF(0.7mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.082mL，0.470mmol)，随后添加HATU(42.9mg，0.113mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2.5h。将反应混合物浓缩并且将产物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈黄色无定形固体的N-(6-氟-4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(18.5mg，0.028mmol，产率30％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.75(s,1H),9.18(s,1H),8.82(d,J＝4.8Hz,1H),8.77(s,1H),8.26-8.19(m,2H),7.93(d,J＝4.8Hz,1H),7.60-7.51(m,2H),7.50-7.42(m,1H),6.95(s,1H),3.76-3.53(m,3H),3.49-3.39(m,2H),2.77(td,J＝11.7,3.6Hz,1H),2.64-2.55(m,1H),0.94(d,J＝6.3Hz,3H)；LC/MS(ESI)m/e 433.1[(M+H)⁺,针对C₂₃H₂₂FN₆O₂的计算值为433.2]；HPLC(方法A)：t_R＝15.85min；(方法B)t_R＝14.22min。

实施例22

N-(6-氯-4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(10mg，0.042mmol)、6-氯-4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-胺(10.35mg，0.042mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.029mL，0.167mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加HATU(19.07mg，0.050mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(15mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈黄色固体的N-(6-氯-4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(10mg，0.014mmol，产率34％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.76(s,1H),9.17(s,1H),9.01(s,1H),8.83(d,J＝4.5Hz,1H),8.19-8.10(m,2H),7.96(d,J＝4.8Hz,1H),7.57-7.50(m,2H),7.48-7.40(m,1H),3.27(br.s.,4H),2.01(t,J＝13.8Hz,4H)；LCMS(ESI)m/e 469.2[(M+H)⁺,针对C₂₃H₂₀F₂N₆OCl的计算值为469.2]；HPLC(方法A)：t_R＝17.06min；(方法B)t_R＝15.53min。

2-(2-甲氧基苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸的制备

A部分。6-氯-2-(2-甲氧基苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯

将3-氨基-6-氯哒嗪-4-甲酸乙酯(200mg，0.992mmol)添加至在DMF(3mL)中的2-溴-1-(2-甲氧基苯基)乙酮(227mg，0.992mmol)中。将溶液加热至60℃持续4h。添加另外的2-溴-1-(2-甲氧基苯基)乙酮(227mg，0.992mmol)并且将反应加热至60℃持续12h。将反应混合物在醚(30mL)和饱和NaHCO₃水溶液(20mL)之间分配。将有机层用水(20mL)和饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经MgSO₄干燥、过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(5％→20％在己烷中的乙酸乙酯；25g柱)纯化，以得到呈黄色固体的6-氯-2-(2-甲氧基苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(200mg，0.603mmol，产率61％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.78(s,1H),8.34(dd,J＝7.8,1.8Hz,1H),7.73(s,1H),7.45-7.39(m,1H),7.19(d,J＝7.8Hz,1H),7.13(td,J＝7.5,1.0Hz,1H),4.49(q,J＝7.0Hz,2H),4.01(s,3H),1.42(t,J＝7.2Hz,3H)。

B部分。2-(2-甲氧基苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯

在50mL圆底烧瓶中，将6-氯-2-(2-甲氧基苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(150mg，0.452mmol)和10％钯碳(72.2mg，0.034mmol)在氯仿(2mL)和乙醇(5mL)中的混合物在氢气下在大气压下搅拌14h。通过硅藻土垫过滤除去催化剂。将滤液浓缩并且将残余物通过硅胶柱色谱(20％→50％在己烷中的乙酸乙酯；12g柱)纯化，以得到呈黄色固体的2-(2-甲氧基苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(65mg，0.219mmol，产率48％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.75(s,1H),8.66(d,J＝4.8Hz,1H),8.37(dd,J＝7.8,1.8Hz,1H),7.64(d,J＝4.5Hz,1H),7.44-7.38(m,1H),7.19(d,J＝8.3Hz,1H),7.13(td,J＝7.5,1.0Hz,1H),4.48(q,J＝7.0Hz,2H),4.02(s,3H),1.42(t,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 298.1[(M+H)⁺,针对C₁₆H₁₆N₃O₃的计算值为298.1]。

C部分。2-(2-甲氧基苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸

将2-(2-甲氧基苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(65mg，0.219mmol)和一水合氢氧化锂(10.47mg，0.437mmol)在THF(5mL)和水(0.250mL)中的混合物在室温下搅拌12h。将反应混合物浓缩，以得到呈黄色固体的2-(2-甲氧基苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(60mg，0.223mmol，产率100％)。将产物直接用于下一步骤。¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ6.95(s,1H),6.86(d,J＝4.3Hz,1H),6.57(d,J＝7.0Hz,1H),6.00(d,J＝4.0Hz,1H),5.72(t,J＝7.9Hz,1H),5.48(d,J＝8.3Hz,1H),5.41(t,J＝7.3Hz,1H),2.36(s,3H)；LCMS(ESI)m/e 270.1[(M+H)⁺,针对C₁₄H₁₂N₃O₃的计算值为270.1]。

实施例23

N-(4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-基)-2-(2-甲氧基苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-(2-甲氧基苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(15mg，0.056mmol)、4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-胺(23.76mg，0.111mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.058mL，0.334mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加HATU(42.4mg，0.111mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(15mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(20％→80％在己烷中的乙酸乙酯；12g柱)纯化，以得到呈黄色固体的N-(4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-基)-2-(2-甲氧基苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(10mg，0.020mmol，产率37％)：¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ11.98(s,1H),9.40(s,1H),8.74(s,1H),8.58(d,J＝4.5Hz,1H),8.41(d,J＝5.3Hz,1H),8.38(dd,J＝7.9,1.6Hz,1H),8.01(d,J＝4.8Hz,1H),7.45-7.40(m,1H),7.13-7.06(m,2H),7.06-7.02(m,1H),4.06(s,3H),3.27-3.21(m,4H),2.10-1.96(m,4H)；LCMS(ESI)m/e 465.2[(M+H)⁺,针对C₂₄H₂₃N₆O₂F₂的计算值为465.2]；HPLC(方法A)：t_R＝10.45min；(方法B)t_R＝11.07min。

实施例24

2-(2-甲氧基苯基)-N-(4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-(2-甲氧基苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(15mg，0.056mmol)、4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-胺(21.53mg，0.111mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.058mL，0.334mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加HATU(42.4mg，0.111mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(15mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(20％→80％在己烷中的乙酸乙酯；12g柱)纯化，以得到呈黄色固体的2-(2-甲氧基苯基)-N-(4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(10mg，0.022mmol，产率40％)：¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ12.03(s,1H),9.40-9.31(m,1H),8.75(s,1H),8.56(d,J＝4.5Hz,1H),8.51(dd,J＝7.8,1.8Hz,1H),8.41(d,J＝5.5Hz,1H),7.99(d,J＝4.8Hz,1H),7.44-7.39(m,1H),7.10-7.04(m,2H),7.02(d,J＝5.5Hz,1H),4.07(s,3H),3.82-3.76(m,1H),3.76-3.70(m,2H),3.34-3.27(m,2H),2.87(ddd,J＝12.2,10.2,4.6Hz,1H),2.64(dd,J＝11.8,10.3Hz,1H),1.04(d,J＝6.3Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 445.1[(M+H)⁺,针对C₂₄H₂₅N₆O₃的计算值为445.2]；HPLC(方法A)：t_R＝9.76min；(方法B)t_R＝10.19min。

2-(4-(三氟甲基)苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸的制备

A部分。6-氯-2-(4-(三氟甲基)苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯

将3-氨基-6-氯哒嗪-4-甲酸乙酯(270mg，1.339mmol)添加至在DMF(6mL)中的2-溴-1-(4-(三氟甲基)苯基)乙酮(358mg，1.339mmol)中。将溶液在60℃下加热4h。将所得的橙色液体在醚(30mL)和饱和NaHCO₃水溶液(20mL)之间分配。将有机层用水(20mL)和饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经MgSO₄干燥、过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(5％→20％在己烷中的乙酸乙酯；40g柱)纯化，以得到呈黄色固体的6-氯-2-(4-(三氟甲基)苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(190mg，0.514mmol，产率38％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.23(s,1H),8.31(d,J＝8.0Hz,2H),7.89(d,J＝8.0Hz,2H),7.79(s,1H),4.49(q,J＝7.1Hz,2H),1.42(t,J＝7.2Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 370.0[(M+H)⁺,针对C₁₆H₁₂N₃O₂F₃Cl的计算值为370.1]。

B部分。6-氯-2-(4-(三氟甲基)苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯

在50mL圆底烧瓶中，将6-氯-2-(4-(三氟甲基)苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(190mg，0.514mmol)和10％钯碳(82mg，0.039mmol)在氯仿(2mL)和乙醇(5mL)中的混合物在氢气下在大气压下搅拌6h。通过硅藻土垫过滤除去催化剂。将滤液浓缩并且将残余物通过硅胶柱色谱(20％→50％在己烷中的乙酸乙酯；12g柱)纯化，以得到呈黄色固体的2-(4-(三氟甲基)苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(90mg，0.268mmol，产率52％)：¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.21(s,1H),8.71(d,J＝4.5Hz,1H),8.33(d,J＝8.0Hz,2H),7.88(d,J＝8.3Hz,2H),7.69(d,J＝4.5Hz,1H),4.48(q,J＝7.0Hz,2H),1.42(t,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 336.1[(M+H)⁺,针对C₁₆H₁₃N₃O₂F₃的计算值为336.1]。

C部分。2-(4-(三氟甲基)苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸

将2-(4-(三氟甲基)苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(90mg，0.268mmol)和一水合氢氧化锂(19.29mg，0.805mmol)在THF(5mL)和水中的混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，以得到呈黄色固体的2-(4-(三氟甲基)苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(80mg，0.260mmol，产率97％)。将产物直接用于下一步骤。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.04(s,1H),8.62(d,J＝4.5Hz,1H),8.35(d,J＝8.0Hz,2H),7.80(d,J＝8.3Hz,2H),7.58(d,J＝4.5Hz,1H)；LCMS(ESI)m/e 308.1[(M+H)⁺,针对C₁₄H₉N₃O₂F₃的计算值为308.1]。

实施例25

N-(4-吗啉代吡啶-3-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

在0℃下，向2-(4-(三氟甲基)苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(30mg，0.059mmol)在二氯甲烷(4mL)中的悬浮液中添加DMF(0.907μl，0.012mmol)和草酰氯(0.015mL，0.176mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时。将混合物浓缩并且将残余物在真空下干燥1小时。在0℃下，将残余物悬浮于二氯甲烷(4mL)中，随后添加三乙胺(0.033mL，0.234mmol)、DMAP(14.32mg，0.117mmol)和4-吗啉代吡啶-3-胺(21.00mg，0.117mmol)。将反应在室温下搅拌4h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(15mL)的分液漏斗中。将水层用CH₂Cl₂(3x 15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过反相HPLC(方法A)，随后通过制备型TLC(5％在二氯甲烷中的甲醇)纯化，以得到呈黄色固体的N-(4-吗啉代吡啶-3-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(7mg，0.014mmol，产率24％)：LCMS(ESI)m/e 469.2[(M+H)⁺,针对C₂₃H₂₀N₆O₂F₃的计算值为469.2]；HPLC保留时间(方法A)：t_R＝11.23min；HPLC(方法B)：t_R＝10.73min。

实施例26

N-(4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

在0℃下，向2-(4-(三氟甲基)苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(50mg，0.098mmol)在二氯甲烷(4mL)中的悬浮液中添加DMF(1.512μl，0.020mmol)和草酰氯(0.026mL，0.293mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1h。将溶剂蒸发并且将残余物在真空下干燥1h。在0℃下，将残余物悬浮于二氯甲烷(4mL)中，随后添加三乙胺(0.054mL，0.391mmol)、DMAP(23.86mg，0.195mmol)和4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-胺(37.7mg，0.195mmol)。将冷却浴除去并且将反应混合物在室温下搅拌4h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(15mL)的分液漏斗中。将水层用CH₂Cl₂(3x 15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过反相HPLC(方法A)，随后通过制备型TLC(5％在二氯甲烷中的甲醇)纯化，以得到呈黄色固体的N-(4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(15mg，0.030mmol，产率30％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.73(s,1H),9.36(s,1H),9.04(br.s.,1H),8.88(d,J＝4.5Hz,1H),8.50(br.s.,1H),8.46-8.41(m,J＝8.0Hz,2H),7.97(d,J＝4.5Hz,1H),7.94-7.90(m,J＝8.3Hz,2H),7.59(br.s.,1H),3.95(t,J＝13.8Hz,2H),3.74-3.62(m,2H),3.56(t,J＝10.8Hz,1H),3.14(t,J＝10.9Hz,1H),2.92-2.85(m,1H),0.94(d,J＝6.3Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 483.1[(M+H)⁺,针对C₂₄H₂₂N₆O₂F₃的计算值为483.2]；HPLC(方法A)：t_R＝10.63min；(方法B)t_R＝10.63min。

咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸的制备

A部分。6-氯咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯

将氯乙醛(50％在H₂O中)(5.04mL，39.7mmol)添加至在异丙醇(20mL)中的3-氨基-6-氯哒嗪-4-甲酸乙酯(1.00g，4.96mmol)中。将溶液在80℃下加热4h。将反应混合物浓缩并且将所得的橙色液体在醚(30mL)和饱和NaHCO₃水溶液(20mL)之间分配。将有机层用水(20mL)和饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(60％→80％在己烷中的乙酸乙酯；25g柱)纯化，以得到呈绿色固体的6-氯咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(750mg，3.32mmol，产率67％)：¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)d 8.23(d,J＝1.5Hz,1H),7.88(d,J＝1.3Hz,1H),7.73(s,1H),4.52(q,J＝7.0Hz,2H),1.45(t,J＝7.2Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e226.0[(M+H)⁺,针对C₉H₉N₃O₂Cl的计算值为226.0]。

B部分。咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸

将咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(165mg，0.733mmol)、10％钯碳(130mg，0.122mmol)和三乙胺(0.169mL，1.22mmol)在EtOH(8mL)和DMF(8mL)中的混合物置于Parr振荡器中在45psi的氢气氛下持续4h。通过硅藻土垫过滤除去催化剂并且将滤液浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(10％在二氯甲烷中的甲醇；25g柱)纯化，以得到3-氨基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(100mg，产率80％)。将咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(100mg，0.485mmol)和一水合氢氧化锂(81mg，1.940mmol)在水(0.2mL)和THF(5mL)中的混合物在室温下搅拌2h。然后将溶剂浓缩，以得到咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(60mg，产率76％)。将粗产物直接用于下一步骤。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.60(d,J＝4.8Hz,1H),8.33(d,J＝1.3Hz,1H),7.76(d,J＝1.3Hz,1H),7.52(d,J＝4.3Hz,1H)；LCMS(ESI)m/e 164.0[(M)⁺,针对C₇H₆N₃O₂的计算值为164.1]。

实施例27

N-(4-(哌啶-1-基)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸TFA(40mg，0.144mmol)和4-(哌啶-1-基)吡啶-3-胺2HCl(72.2mg，0.289mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.151mL，0.866mmol)和HATU(110mg，0.289mmol)。将反应混合物在室温下搅拌4h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(5mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈红色固体的N-(4-(哌啶-1-基)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2TFA(18mg，0.029mmol，产率20％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.90(s,1H),9.15(s,1H),8.86(d,J＝4.5Hz,1H),8.61(d,J＝1.3Hz,1H),8.43(d,J＝6.5Hz,1H),8.09-8.04(m,1H),7.94(d,J＝4.5Hz,1H),7.47(d,J＝6.5Hz,1H),3.41(d,J＝5.3Hz,4H),3.22-3.11(m,2H),1.74-1.68(m,4H)；LCMS(ESI)m/e 323.2[(M+H)⁺,针对C₁₇H₁₉N₆O的计算值为323.2]；HPLC(方法A)：t_R＝7.54min；(方法B)t_R＝7.83min。

实施例28

N-(4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸TFA(30mg，0.108mmol)和4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-胺(46.2mg，0.216mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.113mL，0.649mmol)和HATU(82mg，0.216mmol)。将反应混合物在室温下搅拌4h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(5mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈黄色固体的N-(4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(17mg，0.029mmol，产率27％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.02(s,1H),9.32(s,1H),8.87(d,J＝4.8Hz,1H),8.62(d,J＝1.3Hz,1H),8.53(dd,J＝6.5,0.8Hz,1H),8.03(d,J＝1.3Hz,1H),7.97(d,J＝4.5Hz,1H),7.62(d,J＝6.5Hz,1H),3.53(t,J＝5.5Hz,4H),2.31-2.19(m,4H)；LCMS(ESI)m/e 359.2[(M+H)⁺,针对C₁₇H₁₇N₆OF₂的计算值为359.1]；HPLC(方法A)：t_R＝7.90min；(方法B)t_R＝8.48min。

实施例29

N-(4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸TFA(30mg，0.108mmol)和4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-胺(41.8mg，0.216mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.113mL，0.649mmol)和HATU(82mg，0.216mmol)。将反应混合物在室温下搅拌4h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(5mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈红色固体的N-(4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(15mg，0.025mmol，产率23％)：¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ12.20(br.s.,1H),9.69(s,1H),8.65(d,J＝4.5Hz,1H),8.55(d,J＝6.5Hz,1H),8.19(d,J＝1.0Hz,1H),8.02(d,J＝4.5Hz,1H),7.89(d,J＝1.0Hz,1H),7.32(d,J＝6.8Hz,1H),4.17-3.96(m,2H),3.62(d,J＝12.3Hz,2H),3.18(td,J＝11.9,3.3Hz,1H),2.94-2.78(m,2H),1.22(d,J＝6.3Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 339.2[(M+H)⁺,针对C₁₇H₁₉N₆O₂的计算值为339.2]；HPLC(方法A)：t_R＝6.71min；(方法B)t_R＝7.21min。

2-环丙基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸的制备

A部分。2-环丙基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯

将3-氨基哒嗪-4-甲酸乙酯(300mg，1.795mmol)和2-溴-1-环丙基乙酮(585mg，3.59mmol)在二噁烷(6mL)中的混合物在80℃下加热1h。将混合物冷却至室温并且转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(10mL)的分液漏斗中。将水层用二氯甲烷(3x 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(10％→40％在己烷中的乙酸乙酯；12g柱)纯化，以得到呈深绿色油状物的2-环丙基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(112mg，0.484mmol，产率27％)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.35(d,J＝4.8Hz,1H),7.79(s,1H),7.52(d,J＝4.8Hz,1H),4.54(q,J＝7.0Hz,2H),2.22(tt,J＝8.4,5.1Hz,1H),1.48(t,J＝7.2Hz,3H),1.12-1.04(m,2H),1.02-0.96(m,2H)；LC/MS(ESI)m/e232.1[(M+H)⁺,针对C₁₂H₁₄N₃O₂的计算值为232.1]。

B部分。2-环丙基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸

将2-环丙基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(110mg，0.476mmol)和一水合氢氧化锂(59.9mg，1.427mmol)在水(0.150mL)和THF(3mL)中的混合物在室温下搅拌2h。将溶剂浓缩，以得到2-环丙基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(112mg，产率74％)。将产物不经进一步纯化而用于下一步骤。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.79(d,J＝4.8Hz,1H),8.41(s,1H),7.80(d,J＝4.0Hz,1H),2.27-2.18(m,1H),1.14-1.06(m,2H),0.98-0.92(m,2H)；LC/MS(ESI)m/e204.2[(M+H)⁺,针对C₁₀H₁₀N₃O₂的计算值为204.1]。

实施例30

2-环丙基-N-(4-(4-氟苯基)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-环丙基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸TFA(35mg，0.110mmol)和4-(4-氟苯基)吡啶-3-胺(29.1mg，0.154mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.096mL，0.552mmol)，随后添加HATU(58.7mg，0.154mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3h。将反应混合物浓缩。将产物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈黄色无定形固体的2-环丙基-N-(4-(4-氟苯基)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(43.3mg，0.071mmol，产率65％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.74(s,1H),9.48(s,1H),8.70(d,J＝4.8Hz,1H),8.59(d,J＝5.3Hz,1H),8.26(s,1H),7.83(d,J＝4.8Hz,1H),7.73-7.67(m,2H),7.60(d,J＝5.3Hz,1H),7.41-7.33(m,2H),1.79(tt,J＝8.3,5.0Hz,1H),0.92-0.84(m,2H),0.54-0.46(m,2H)；LC/MS(ESI)m/e 374.1[(M+H)⁺,针对C₂₁H₁₇FN₅O的计算值为374.1]；HPLC(方法A)：t_R＝10.03min；(方法B)t_R＝10.50min。

实施例31

2-环丙基-N-(4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-环丙基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸TFA(35mg，0.110mmol)和4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-胺(32.9mg，0.154mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.096mL，0.552mmol)，随后添加HATU(58.7mg，0.154mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3h。将反应混合物浓缩。将产物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈黄色无定形固体的2-环丙基-N-(4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(55.7mg，0.088mmol，产率80％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.78(s,1H),9.22(s,1H),8.76(d,J＝4.8Hz,1H),8.53(dd,J＝6.8,1.0Hz,1H),8.40(s,1H),7.89(d,J＝4.5Hz,1H),7.63(d,J＝6.5Hz,1H),3.60(t,J＝5.4Hz,4H),2.31-2.13(m,5H),1.12-1.05(m,2H),0.98-0.91(m,2H)；LC/MS(ESI)m/e 399.1[(M+H)⁺,针对C₂₀H₂₁F₂N₆O的计算值为399.2]；HPLC(方法A)：t_R＝9.36min；(方法B)t_R＝9.99min。

实施例32

2-环丙基-N-(4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-环丙基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸TFA(35mg，0.110mmol)和4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-胺(29.9mg，0.154mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.096mL，0.552mmol)，随后添加HATU(58.7mg，0.154mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1.5h。将反应混合物浓缩。将产物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈黄色无定形固体的2-环丙基-N-(4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(62.6mg，0.099mmol，产率90％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.70(s,1H),9.09(s,1H),8.75(d,J＝4.8Hz,1H),8.48(dd,J＝6.9,0.9Hz,1H),8.41(s,1H),7.85(d,J＝4.8Hz,1H),7.55(d,J＝7.0Hz,1H),3.93-3.80(m,4H),3.79-3.71(m,1H),3.23-3.14(m,1H),2.89(dd,J＝12.7,10.2Hz,1H),2.25-2.16(m,1H),1.14-1.07(m,2H),1.05(d,J＝6.3Hz,3H),1.00-0.94(m,2H)；LC/MS(ESI)m/e 379.1[(M+H)⁺,针对C₂₀H₂₃N₆O₂的计算值为379.2]；HPLC(方法A)：t_R＝8.45min；(方法B)t_R＝8.74min。

2-(环己-1-烯-1-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸的制备

A部分。2-(环己-1-烯-1-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯

将3-氨基哒嗪-4-甲酸乙酯(175mg，1.047mmol)和2-溴-1-(环己-1-烯-1-基)乙酮(319mg，1.570mmol)在二噁烷(3.5mL)中的混合物在80℃下加热1h。将混合物冷却至室温并且转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(10mL)的分液漏斗中。将水层用二氯甲烷(3x 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(10％→30％在己烷中的乙酸乙酯；12g柱)纯化，以得到呈黄色油状物的2-(环己-1-烯-1-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(82mg，0.302mmol，产率29％)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.36(d,J＝4.8Hz,1H),7.97(s,1H),7.56(d,J＝4.8Hz,1H),6.96(dt,J＝4.0,2.2Hz,1H),4.55(q,J＝7.1Hz,2H),2.54-2.45(m,2H),2.35-2.25(m,2H),1.89-1.79(m,2H),1.77-1.68(m,2H),1.51(t,J＝7.0Hz,3H)；LC/MS(ESI)m/e 272.1[(M+H)⁺,针对C₁₅H₁₈N₃O₂的计算值为272.1]。

B部分。2-(环己-1-烯-1-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸

将2-(环己-1-烯-1-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(72mg，0.265mmol)、一水合氢氧化锂(19.07mg，0.796mmol)在THF(3mL)和水(0.15mL)中的混合物在室温下搅拌2h。添加另外的在水(0.15mL)中的一水合氢氧化锂(19mg)并且将反应混合物在50℃下加热2h。将反应混合物浓缩。将产物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈黄色无定形固体的2-(环己-1-烯-1-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸TFA(79.6mg，0.223mmol，产率84％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.67(d,J＝4.5Hz,1H),8.52(s,1H),7.66(d,J＝4.5Hz,1H),6.78(dt,J＝3.6,2.1Hz,1H),2.44(d,J＝1.8Hz,2H),2.28-2.21(m,2H),1.79-1.72(m,2H),1.70-1.62(m,J＝5.7,5.7,3.6Hz,2H)；LC/MS(ESI)m/e 244.1[(M+H)⁺,针对C₁₃H₁₄N₃O₂的计算值为244.1]。

实施例33

2-(环己-1-烯-1-基)-N-(4-(4-氟苯基)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-(环己-1-烯-1-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸TFA(20mg，0.056mmol)和4-(4-氟苯基)吡啶-3-胺(10.54mg，0.056mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.049mL，0.280mmol)，随后添加HATU(25.5mg，0.067mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2.5h。将混合物浓缩。将产物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈黄色无定形固体的2-(环己-1-烯-1-基)-N-(4-(4-氟苯基)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(6.4mg，9.68μmol，产率17％)：¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ11.92(s,1H),9.43(s,1H),8.70(d,J＝4.7Hz,1H),8.55(d,J＝5.0Hz,1H),8.41(s,1H),7.87(d,J＝4.7Hz,1H),7.75-7.70(m,2H),7.55(d,J＝5.0Hz,1H),7.29(t,J＝8.9Hz,2H),5.83(t,J＝3.9Hz,1H),5.76(s,1H),2.15(br.s.,2H),2.08(br.s.,2H),1.69-1.63(m,2H),1.62-1.56(m,2H)；LC/MS(ESI)m/e 414.1[(M+H)⁺,针对C₂₄H₂₁FN₅O的计算值为414.2]；HPLC(方法A)：t_R＝11.72min；(方法B)t_R＝11.88min。

实施例34

2-(环己-1-烯-1-基)-N-(4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-(环己-1-烯-1-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸TFA(40mg，0.112mmol)和4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-胺(28.6mg，0.134mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.098mL，0.560mmol)，随后添加HATU(51.1mg，0.134mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2.5h。将混合物浓缩。将产物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈黄色无定形固体的2-(环己-1-烯-1-基)-N-(4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2TFA(55mg，0.081mmol，产率72％)：¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ11.84(s,1H),9.20(s,1H),8.76(d,J＝4.7Hz,1H),8.57(s,1H),8.47(d,J＝6.4Hz,1H),7.92(d,J＝4.7Hz,1H),7.52(d,J＝6.4Hz,1H),6.84(s,1H),3.52-3.47(m,4H),2.46(d,J＝1.7Hz,2H),2.24(d,J＝3.5Hz,2H),2.18-2.07(m,4H),1.80-1.72(m,2H),1.70-1.63(m,2H)；LC/MS(ESI)m/e 439.2[(M+H)⁺,针对C₂₃H₂₅F₂N₆O的计算值为439.2]；HPLC(方法A)：t_R＝11.15min；(方法B)t_R＝11.71min。

实施例35

2-(环己-1-烯-1-基)-N-(4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-(环己-1-烯-1-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸TFA(20mg，0.056mmol)和4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-胺(12.98mg，0.067mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.049mL，0.280mmol)，随后添加HATU(25.5mg，0.067mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2.5h。将混合物浓缩。将产物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈黄色无定形固体的2-(环己-1-烯-1-基)-N-(4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2TFA(3.3mg，5.00μmol，产率9％)：¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ11.83(s,1H),9.11(br.s.,1H),8.75(d,J＝4.7Hz,1H),8.56(s,1H),8.42(br.s.,1H),7.89(d,J＝4.7Hz,1H),7.42(d,J＝4.9Hz,1H),6.89(t,J＝3.8Hz,1H),3.78-3.59(m,5H),3.04-2.96(m,1H),2.77(t,J＝11.0Hz,1H),2.29-2.22(m,J＝5.9,2.9,2.9Hz,2H),1.80-1.74(m,2H),1.72-1.65(m,J＝5.8Hz,2H),1.28-1.22(m,2H),1.02(d,J＝6.3Hz,3H)；LC/MS(ESI)m/e 419.2[(M+H)⁺,针对C₂₃H₂₇N₆O₂的计算值为419.2]；HPLC(方法A)：t_R＝10.08min；(方法B)t_R＝10.47min。

实施例36

N-(4-吗啉代吡啶-3-基)-2-(吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

A部分。6-氯-2-(吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯

将3-氨基-6-氯哒嗪-4-甲酸乙酯(300mg，1.488mmol)添加至在乙醇(10mL)中的2-溴-1-(吡啶-3-基)乙酮(357mg，1.786mmol)中。将溶液加热至80℃持续4h。添加另外的2-溴-1-(吡啶-3-基)乙酮(200mg，1mmol，06当量)并且将反应加热至80℃持续12h。LCMS显示50％的起始材料转化为所需产物。添加另外的2-溴-1-(吡啶-3-基)乙酮(200mg，1mmol，06当量)并且将反应加热至80℃持续12h。将反应混合物浓缩以除去乙醇。将所得的橙色液体在醚(30mL)和饱和NaHCO₃水溶液(20mL)之间分配。将有机层用水(20mL)和饱和NaCl水溶液(20mL)洗涤，经MgSO₄干燥、过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(50％→80％在己烷中的乙酸乙酯；40g柱)纯化，以得到呈红色油状物的6-氯-2-(吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(70mg，0.231mmol，产率16％)：¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ9.20(d,J＝1.8Hz,1H),8.61(dd,J＝4.8,1.5Hz,1H),8.38-8.32(m,2H),7.62(s,1H),7.44-7.36(m,1H),4.56(q,J＝7.0Hz,2H),1.50(t,J＝7.2Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 303.1[(M+H)⁺,针对C₁₄H₁₂N₄O₂Cl的计算值为303.1]。

B部分。2-(吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯和2-(吡啶-3-基)-5,6-二氢咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯

将6-氯-2-(吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(60mg，0.198mmol)和10％钯碳(42.2mg，0.040mmol)在甲醇(010mL)中的混合物于Parr振荡器中在45psi的H₂下振荡1.5。LCMS表明形成了所需产物连同过度还原的产物。将混合物浓缩并且将残余物按原样用于下一步骤。LCMS(ESI)m/e 269.1[(M+H)⁺,针对C₁₄H₁₃N₄O₂的计算值为269.1]和LCMS(ESI)m/e 271.1[(M+H)⁺,针对C₁₄H₁₅N₄O₂的计算值为271.1]。

C部分。2-(吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯

将2-(吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(60mg，0.224mmol)和2-(吡啶-3-基)-5,6-二氢咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(0mg)和2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(55.8mg，0.246mmol)在THF(5mL)中的混合物在室温下搅拌1h。将混合物浓缩并且将残余物通过硅胶柱色谱(5％→10％在二氯甲烷中的甲醇；12g柱)纯化，以得到呈红色固体的2-(吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(15.00mg，0.056mmol，产率25％)：¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ9.54(d,J＝1.5Hz,1H),9.09(dt,J＝8.2,1.7Hz,1H),8.99(s,1H),8.78(d,J＝5.5Hz,1H),8.67(d,J＝4.8Hz,1H),8.05(dd,J＝8.0,5.5Hz,1H),7.82(d,J＝4.5Hz,1H),4.56(q,J＝7.0Hz,2H),1.49(t,J＝7.2Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 269.1[(M+H)⁺,针对C₁₄H₁₃N₄O₂的计算值为269.1]。

D部分。2-(吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸

将2-(吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(25mg，0.093mmol)、一水合氢氧化锂(11.73mg，0.280mmol)在水(0.100mL)和THF(2mL)中的混合物在室温下搅拌2h。将混合物浓缩，以得到2-(吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(25mg，产率78％)。将产物直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/e 241.1[(M+H)⁺,针对C₁₂H₉N₄O₂的计算值为241.1]。

E部分。N-(4-吗啉代吡啶-3-基)-2-(吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

在室温下，向2-(吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(20mg，0.083mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.087mL，0.500mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加4-吗啉代吡啶-3-胺(29.8mg，0.167mmol)和HATU(63.3mg，0.167mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。将混合物浓缩并且将残余物通过硅胶柱色谱(30％→50％在己烷中的乙酸乙酯；12g柱)纯化，以得到呈棕褐色固体的N-(4-吗啉代吡啶-3-基)-2-(吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(5mg，0.012mmol，产率15％)。将产物通过反相HPLC(方法A)进一步纯化，以得到呈黄色固体的N-(4-吗啉代吡啶-3-基)-2-(吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(1mg，1.315μmol)：¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ9.46(br.s.,1H),9.20(s,1H),9.02(s,1H),8.81-8.64(m,3H),8.41(d,J＝6.5Hz,1H),8.06(d,J＝4.8Hz,1H),7.75(d,J＝7.3Hz,1H),7.59(d,J＝7.0Hz,1H),3.77-3.69(m,4H),3.69-3.60(m,4H)；LCMS(ESI)m/e 402.2[(M+H)⁺,针对C₂₁H₂₀N₇O₂的计算值为402.2]；HPLC(方法A)：t_R＝10.28min；(方法B)t_R＝10.93min。

实施例37

N-(4-乙氧基嘧啶-5-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(40mg，0.167mmol)和4-乙氧基嘧啶-5-胺(46.5mg，0.334mmol)在DMF(2mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.175mL，1.003mmol)和HATU(127mg，0.334mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(15mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(80％→90％在己烷中的乙酸乙酯；24g柱)纯化，以得到呈黄色固体的N-(4-乙氧基嘧啶-5-基)-2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(20mg，0.055mmol，产率33％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.28(s,1H),9.64(s,1H),9.17(s,1H),8.81(d,J＝4.8Hz,1H),8.65(s,1H),8.27-8.23(m,2H),7.92(d,J＝4.8Hz,1H),7.60-7.55(m,2H),7.50-7.45(m,1H),4.79(q,J＝7.0Hz,2H),1.47(t,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 361.1[(M+H)⁺,针对C₁₉H₁₇N₆O₂的计算值为361.1]；HPLC(方法A)：t_R＝13.50min；(方法B)t_R＝12.55min。

实施例38

2-苯基-N-(4-(2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向2-苯基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(40mg，0.167mmol)和4-(2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-5-胺(64.6mg，0.334mmol)在DMF(2mL)中的溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.175mL，1.003mmol)和HATU(127mg，0.334mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(15mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(10％→40％在己烷中的乙酸乙酯；25g柱)纯化，以得到呈黄色固体的2-苯基-N-(4-(2,2,2-三氟乙氧基)嘧啶-5-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(22mg，0.053mmol，产率32％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.14(s,1H),9.70(s,1H),9.17(s,1H),8.81(d,J＝4.8Hz,1H),8.75(s,1H),8.22-8.17(m,2H),7.94(d,J＝4.8Hz,1H),7.58-7.51(m,2H),7.48-7.41(m,1H),5.44(q,J＝8.8Hz,2H)；LCMS(ESI)m/e 415.2[(M+H)⁺,针对C₁₉H₁₄N₆O₂F₃的计算值为415.1]；HPLC(方法A)：t_R＝15.99min；(方法B)t_R＝14.10min。

3-((环丙基甲基)氨基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸的制备

A部分。3,6-二氯哒嗪-4-甲酸乙酯

B部分。6-氯-3-((4-甲氧基苄基)氨基)哒嗪-4-甲酸乙酯

在密封的管中，将3,6-二氯哒嗪-4-甲酸乙酯(2.00g，9.05mmol)、(4-甲氧基苯基)甲胺(1.241g，9.05mmol)和N,N-二异丙基乙胺(4.74mL，27.1mmol)在二噁烷(20mL)中的混合物在80℃下加热20分钟。将溶剂蒸发并且将残余物通过硅胶柱色谱(20％→30％在己烷中的乙酸乙酯；25g柱)纯化，以得到呈绿色固体的6-氯-3-((4-甲氧基苄基)氨基)哒嗪-4-甲酸乙酯(2.50g，7.77mmol，产率86％)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.86(br.s.,1H),7.76(s,1H),7.36(d,J＝8.8Hz,2H),6.90(d,J＝8.8Hz,2H),4.80(d,J＝5.3Hz,2H),4.39(q,J＝7.1Hz,2H),3.82(s,3H),1.41(t,J＝7.0Hz,3H)；LC/MS(ESI)m/e322.1[(M+H)⁺,针对C₁₅H₁₇ClN₃O₃的计算值为322.1]。

C部分。3-氨基-6-氯哒嗪-4-甲酸乙酯

将6-氯-3-((4-甲氧基苄基)氨基)哒嗪-4-甲酸乙酯(2.50g，7.77mmol)和TFA(11.97ml，155mmol)的混合物在回流下加热3h。将反应混合物浓缩并且转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(15mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(60％→80％在己烷中的乙酸乙酯；12g柱)纯化，以得到呈绿色固体的3-氨基-6-氯哒嗪-4-甲酸乙酯(1.00g，4.96mmol，产率64％)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.77(s,1H),7.00(s br,2H),4.40(q,J＝7.0Hz,2H),1.40(t,J＝7.2Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 202.0[(M+H)⁺,针对C₇H₉N₃O₂Cl的计算值为202.6)]。

D部分。6-氯咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯

将氯乙醛(50％在H₂O中)(5.04mL，39.7mmol)添加至在异丙醇(20mL)中的3-氨基-6-氯哒嗪-4-甲酸乙酯(1.00g，4.96mmol)中。将溶液在80℃下加热4h。将反应混合物浓缩以除去异丙醇。将所得的橙色液体在醚(30mL)和饱和NaHCO₃水溶液(20mL)之间分配。将有机层用水(20mL)和盐水(20mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(60％→80％在己烷中的乙酸乙酯；25g柱)纯化，以得到呈绿色固体的6-氯咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(750mg，3.32mmol，产率67％)：¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.23(d,J＝1.5Hz,1H),7.88(d,J＝1.3Hz,1H),7.73(s,1H),4.52(q,J＝7.0Hz,2H),1.45(t,J＝7.2Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 226.0[(M+H)⁺,针对C₉H₉N₃O₂Cl的计算值为226.0]。

E部分。6-氯-3-硝基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯

在50mL圆底烧瓶中加入6-氯咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(600mg，2.66mmol)并且冷却至0℃。将硫酸(3mL，56.3mmol)添加至烧瓶中，随后添加发烟硝酸(3.57mL，80mmol)。将混合物在0℃下搅拌30min，然后在室温下搅拌5h。将混合物用饱和Na₂CO₃水溶液中和。将混合物转移至分液漏斗中并且用乙酸乙酯(3x 50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，并且浓缩，以得到呈黄色固体的6-氯-3-硝基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(480mg，1.774mmol，产率67％)：¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.74(s,1H),8.12(s,1H),4.55(q,J＝7.1Hz,2H),1.46(t,J＝7.2Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 271.0[(M+H)⁺,针对C₉H₈N₄O₄Cl的计算值为271.0]。

F部分。3-氨基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯

将6-氯-3-硝基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(480mg，1.774mmol)、10％钯碳(378mg，0.355mmol)和三乙胺(0.494mL，3.55mmol)在EtOH(10mL)和DMF(10.00mL)中的混合物置于Parr振荡器中在45psi的氢气氛下持续4h。通过硅藻土垫过滤除去催化剂并且将滤液浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(10％在二氯甲烷中的甲醇；25g柱)纯化，以得到呈深红色油状物的3-氨基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(300mg，1.455mmol，产率82％)：¹H NMR(400MHz,甲醇-d₄)δ8.52(d,J＝4.8Hz,1H),7.44(d,J＝4.8Hz,1H),7.24(s,1H),4.50(q,J＝7.0Hz,2H),1.44(t,J＝7.2Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 207.1[(M+H)⁺,针对C₉H₁₁N₄O₂的计算值为207.1]。

G部分。3-((环丙基甲基)氨基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯

向3-氨基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(150mg，0.727mmol)和乙酸(0.083mL，1.455mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中添加环丙烷甲醛(0.055mL，0.727mmol)。将混合物在室温下搅拌1h。添加氰基硼氢化钠(91mg，1.455mmol)并且将混合物在室温下搅拌2h。将混合物浓缩并且将残余物通过硅胶柱色谱(30％→80％在己烷中的乙酸乙酯；12g柱)纯化，以得到呈红色固体的3-((环丙基甲基)氨基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(95mg，0.365mmol，产率50％)：¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.35(d,J＝4.8Hz,1H),7.36(d,J＝4.8Hz,1H),7.29(s,1H),4.55(q,J＝7.0Hz,2H),3.19(d,J＝7.0Hz,2H),1.46(t,J＝7.2Hz,3H),1.28-1.12(m,1H),0.64-0.56(m,2H),0.34-0.28(m,2H)；LCMS(ESI)m/e 261.2[(M+H)⁺,针对C₁₃H₁₇N₄O₂的计算值为261.1]。

H部分。3-((环丙基甲基)氨基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸

将3-((环丙基甲基)氨基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(110mg，0.423mmol)和一水合氢氧化锂(70.9mg，1.690mmol)在水(0.200mL)和THF(5mL)中的混合物在室温下搅拌2h。然后将溶剂浓缩，以得到呈红色固体的3-((环丙基甲基)氨基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(180mg，0.388mmol，产率92％)。将粗产物直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/e 233.1[(M+H)⁺,针对C₁₁H₁₃N₄O₂的计算值为233.1]。

实施例39

3-((环丙基甲基)氨基)-N-(吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向3-((环丙基甲基)氨基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(25mg，0.108mmol)、吡啶-3-胺(20.26mg，0.215mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.056mL，0.323mmol)在DMF(1mL)中的混合物中添加HATU(61.4mg，0.161mmol)。将反应混合物在室温下搅拌4h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(10mL)的分液漏斗中。将水层用二氯甲烷(3x 10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈红色固体的3-((环丙基甲基)氨基)-N-(吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(10mg，0.017mmol，产率16％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.96(s,1H),8.96(d,J＝2.3Hz,1H),8.69(d,J＝4.8Hz,1H),8.42(dd,J＝4.8,1.5Hz,1H),8.28-8.25(m,1H),7.56(d,J＝4.8Hz,1H),7.50(dd,J＝7.9,4.6Hz,1H),7.38(s,1H),6.05(t,J＝6.3Hz,1H),3.17(t,J＝6.4Hz,2H),1.19(t,J＝7.0Hz,1H),0.51-0.46(m,2H),0.33-0.29(m,2H)；LCMS(ESI)m/e 309.2[(M+H)⁺,针对C₁₆H₁₇N₆O的计算值为309.1]；HPLC(方法A)：t_R＝6.12min；(方法B)t_R＝6.50min。

实施例40

3-((环丙基甲基)氨基)-N-(4-甲基吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向3-((环丙基甲基)氨基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(25mg，0.108mmol)、4-甲基吡啶-3-胺(23.28mg，0.215mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.056mL，0.323mmol)在DMF(1mL)中的混合物中添加HATU(61.4mg，0.161mmol)。将反应混合物在室温下搅拌4h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(10mL)的分液漏斗中。将水层用二氯甲烷(3x 10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈红色固体的3-((环丙基甲基)氨基)-N-(4-甲基吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺(10mg，0.030mmol，产率28％)：¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ11.87(br.s.,1H),9.48(s,1H),8.49(d,J＝4.5Hz,1H),8.36(d,J＝5.0Hz,1H),7.75(d,J＝4.8Hz,1H),7.29(s,1H),7.22(d,J＝5.0Hz,1H),7.18(s,1H),3.22(t,J＝6.5Hz,2H),2.55(s,3H),1.29-1.20(m,1H),0.69-0.62(m,2H),0.38-0.31(m,2H)；LCMS(ESI)m/e 323.2[(M+H)⁺,针对C₁₇H₁₉N₆O的计算值为323.2]；HPLC(方法A)：t_R＝7.47min；(方法B)t_R＝8.06min。

实施例41

3-((环丙基甲基)氨基)-N-(4-异丙氧基吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向3-((环丙基甲基)氨基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(20mg，0.086mmol)、4-异丙氧基吡啶-3-胺2HCl(38.8mg，0.172mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.075mL，0.431mmol)在DMF(1mL)中的混合物中添加HATU(49.1mg，0.129mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12h。将混合物浓缩并且将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈红色固体的3-((环丙基甲基)氨基)-N-(4-异丙氧基吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(24mg，0.040mmol，产率46％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.82(s,1H),9.71(s,1H),8.71(d,J＝4.5Hz,1H),8.68(d,J＝6.5Hz,1H),7.81(d,J＝6.3Hz,1H),7.62(d,J＝4.5Hz,1H),7.38(s,1H),5.25(dt,J＝12.0,5.9Hz,1H),3.18(d,J＝6.8Hz,2H),1.57(d,J＝6.0Hz,6H),1.25-1.13(m,1H),0.52-0.46(m,2H),0.34-0.28(m,2H)；LCMS(ESI)m/e 367.3[(M+H)⁺,针对C₁₉H₂₃N₆O₂的计算值为367.2]；HPLC(方法A)：t_R＝9.52min；(方法B)t_R＝9.90min。

实施例42

3-((环丙基甲基)氨基)-N-(4-苯基吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向3-((环丙基甲基)氨基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(20mg，0.086mmol)、4-苯基吡啶-3-胺2HCl(41.9mg，0.172mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.075mL，0.431mmol)在DMF(1mL)中的混合物中添加HATU(49.1mg，0.129mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12h。将混合物浓缩并且将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈红色固体的3-((环丙基甲基)氨基)-N-(4-苯基吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(15mg，0.023mmol，产率27％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.87(s,1H),9.59(s,1H),8.65(d,J＝4.8Hz,1H),8.56(d,J＝5.0Hz,1H),7.63-7.48(m,8H),6.87(s,1H),3.09(d,J＝6.8Hz,2H),0.90-0.81(m,1H),0.53-0.40(m,2H),0.32-0.22(m,2H)；LCMS(ESI)m/e 385.2[(M+H)⁺,针对C₂₂H₂₁N₆O的计算值为385.2]；HPLC(方法A)：t_R＝9.76min；(方法B)t_R＝10.16min。

实施例43

3-((环丙基甲基)氨基)-N-(4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向3-((环丙基甲基)氨基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(30mg，0.129mmol)、4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-胺(55.1mg，0.258mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.135mL，0.775mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加HATU(98mg，0.258mmol)。将反应混合物在室温下搅拌4h。将混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(5mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈红色油状物的3-((环丙基甲基)氨基)-N-(4-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2TFA(26mg，0.039mmol，产率30％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.00(s,1H),9.34(s,1H),8.79(d,J＝4.8Hz,1H),8.73(d,J＝4.8Hz,1H),8.52(d,J＝6.5Hz,1H),7.64(d,J＝4.8Hz,1H),7.62(d,J＝6.5Hz,1H),7.35(s,1H),3.53-3.48(m,4H),3.17(d,J＝6.8Hz,2H),2.32-2.18(m,4H),1.22-1.13(m,1H),0.52-0.45(m,2H),0.33-0.28(m,2H)；LCMS(ESI)m/e 428.2[(M+H)⁺,针对C₂₁H₂₄N₇OF₂的计算值为428.2]；HPLC(方法A)：t_R＝9.10min；(方法B)t_R＝9.50min。

实施例44

3-((环丙基甲基)氨基)-N-(4-吗啉代吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向3-((环丙基甲基)氨基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(30mg，0.129mmol)、4-吗啉代吡啶-3-胺(46.3mg，0.258mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.135mL，0.775mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加HATU(98mg，0.258mmol)。将反应混合物在室温下搅拌4h。将混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(5mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈红色油状物的3-((环丙基甲基)氨基)-N-(4-吗啉代吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(28mg，0.043mmol，产率33％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)12.01(s,1H),9.34(s,1H),8.72(d,J＝4.5Hz,1H),8.49(d,J＝5.8Hz,1H),7.62(d,J＝4.5Hz,1H),7.51(d,J＝6.5Hz,1H),7.47(s,1H),3.91-3.81(m,4H),3.40(br.s.,4H),3.18(d,J＝6.8Hz,2H),1.22-1.12(m,1H),0.54-0.43(m,2H),0.35-0.25(m,2H)；LCMS(ESI)m/e 394.3[(M+H)⁺,针对C₂₀H₂₄N₇O₂的计算值为394.2]；HPLC(方法A)：t_R＝7.69min；(方法B)t_R＝7.93min。

实施例45

3-((环丙基甲基)氨基)-N-(4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向3-((环丙基甲基)氨基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(30mg，0.129mmol)、4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-胺(49.9mg，0.258mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.135mL，0.775mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加HATU(98mg，0.258mmol)。将反应混合物在室温下搅拌4h。LCMS表明形成了所需产物。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(5mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈红色油状物的3-((环丙基甲基)氨基)-N-(4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(29mg，0.043mmol，产率34％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.95(s,1H),9.28(s,1H),8.72(d,J＝4.8Hz,1H),8.53-8.46(m,1H),7.61(d,J＝4.5Hz,1H),7.55(d,J＝6.8Hz,1H),7.45(s,1H),3.94-3.70(m,7H),3.18(d,J＝6.8Hz,2H),1.23-1.15(m,1H),1.07(d,J＝6.3Hz,3H),0.53-0.45(m,2H),0.35-0.27(m,2H)；LCMS(ESI)m/e 408.2[(M+H)⁺,针对C₂₁H₂₆N₇O₂的计算值为408.2]；HPLC(方法A)：t_R＝8.50min；(方法B)t_R＝8.35min。

实施例46

3-(环丙烷甲酰胺基)-N-(4-异丙氧基吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

A部分。3-(环丙烷甲酰胺基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯

在室温下，向3-氨基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(50mg，0.242mmol)在吡啶(1mL)中的溶液中添加环丙烷甲酰氯(0.024mL，0.267mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12h。将混合物浓缩并且将残余物通过硅胶柱色谱(40％→60％在己烷中的乙酸乙酯；12g柱)纯化，以得到呈红色油状物的3-(环丙烷甲酰胺基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(15mg，0.055mmol，产率23％)：LCMS(ESI)m/e 275.1[(M+H)⁺,针对C₁₃H₁₅N₄O₃的计算值为275.1]。

B部分。3-(环丙烷甲酰胺基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸

将3-(环丙烷甲酰胺基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(15mg，0.055mmol)和一水合氢氧化锂(3.93mg，0.164mmol)在THF(0.5mL)和水(0.100mL)中的混合物在室温下搅拌2h。将混合物浓缩，以得到3-(环丙烷甲酰胺基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(12mg，产率89％)。将产物直接用于下一步骤。LCMS(ESI)m/e 247.1[(M+H)⁺,针对C₁₁H₁₁N₄O₃的计算值为247.2]。

C部分。3-(环丙烷甲酰胺基)-N-(4-异丙氧基吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

向3-(环丙烷甲酰胺基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(15mg，0.061mmol)、4-异丙氧基吡啶-3-胺(18.54mg，0.122mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.064mL，0.366mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加HATU(46.3mg，0.122mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。将混合物浓缩并且将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈红色油状物的3-(环丙烷甲酰胺基)-N-(4-异丙氧基吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(7mg，10.93μmol，产率18％)：¹HNMR(500MHz,甲醇-d₄)9.84(s,1H),8.75(d,J＝4.6Hz,1H),8.56(dd,J＝6.8,1.0Hz,1H),8.07(s,1H),7.92(d,J＝4.6Hz,1H),7.75(d,J＝6.7Hz,1H),5.27(dt,J＝12.2,6.0Hz,1H),2.13-2.07(m,1H),1.56(d,J＝3.8Hz,6H),1.14-1.04(m,2H),1.03-0.95(m,2H)；LCMS(ESI)m/e 379.3[(M-H)-,针对C₁₉H₁₉N₆O₃的计算值为379.2]；HPLC(方法A)：t_R＝8.95min；(方法B)t_R＝9.20min。

实施例47

3-(环丁烷甲酰胺基)-N-(4-异丙氧基吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

A部分。3-氨基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸

将3-氨基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸乙酯(150mg，0.727mmol)和LiOH(52.3mg，2.182mmol)在四氢呋喃(2mL)和水(0.100mL)中的混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，以得到呈灰白色固体的3-氨基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(150mg，0.842mmol，产率116％)。将粗产物直接用于下一步骤。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)8.50(d,J＝4.5Hz,1H),7.31(d,J＝4.5Hz,1H),6.98(s,1H),5.49(s,2H)；LCMS(ESI)m/e 179.1[(M+H)⁺,针对C₇H₇N₄O₂的计算值为179.1]。

B部分。3-氨基-N-(4-异丙氧基吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

将3-氨基咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酸(150mg，0.842mmol)、4-异丙氧基吡啶-3-胺(384mg，2.53mmol)、N,N-二异丙基乙胺(0.735mL，4.21mmol)和HATU(640mg，1.684mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温下搅拌4h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(10mL)的分液漏斗中。将水层用二氯甲烷(3x 10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈红色固体的3-氨基-N-(4-异丙氧基吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺3TFA(150mg，0.229mmol，产率27％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)12.85(s,1H),9.71(d,J＝1.0Hz,1H),8.71(d,J＝4.5Hz,1H),8.69(dd,J＝6.8,1.0Hz,1H),7.83(d,J＝6.8Hz,1H),7.60(d,J＝4.5Hz,1H),7.23(s,1H),5.26(dt,J＝12.1,6.1Hz,1H),1.56(d,J＝6.0Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 313.2[(M+H)⁺,针对C₁₅H₁₇N₆O₂的计算值为313.1]。

C部分。3-(环丁烷甲酰胺基)-N-(4-异丙氧基吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺

在室温下，向3-氨基-N-(4-异丙氧基吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺3TFA(60mg，0.092mmol)、环丁烷甲酸(0.018mL，0.183mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.096mL，0.550mmol)在DMF(1mL)中的溶液中添加HATU(69.7mg，0.183mmol)。将反应混合物在室温下搅拌4h。将混合物浓缩并且将残余物通过反相HPLC(方法A)纯化，以得到呈红色固体的3-(环丁烷甲酰胺基)-N-(4-异丙氧基吡啶-3-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-8-甲酰胺2 TFA(10mg，0.015mmol，产率17％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)12.76(s,1H),10.68(s,1H),9.71(s,1H),8.88(d,J＝4.5Hz,1H),8.67(d,J＝6.3Hz,1H),8.12(s,1H),7.91(d,J＝4.5Hz,1H),7.80(d,J＝6.8Hz,1H),5.25(quin,J＝6.0Hz,1H),2.36-2.11(m,5H),2.07-1.94(m,1H),1.92-1.79(m,1H),1.57(d,J＝6.0Hz,6H)；LCMS(ESI)m/e 395.3[(M+H)⁺,针对C₂₀H₂₃N₆O₃的计算值为395.2]；HPLC(方法A)：t_R＝8.80min；(方法B)t_R＝8.34min。

胺中间体的制备

上述实施例中使用的以下胺中间体如Lou等人在WO 2015/069594中所述的来制备。

用于制备上述实施例的另外的胺中间体如下所述的来制备：

4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-胺的制备

A部分。3-硝基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶

将4-氯-3-硝基吡啶(1.00g，6.31mmol)、2,2,2-三氟乙醇(3.15g，31.5mmol)和三乙胺(2.64mL，18.92mmol)在THF(10mL)中的混合物在回流下搅拌12h。将反应混合物转移至含有水(25mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩，以得到呈棕褐色固体的3-硝基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶(1.3g，5.85mmol，产率93％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.09(s,1H),8.79(d,J＝6.0Hz,1H),7.58(d,J＝6.0Hz,1H),5.16(q,J＝8.7Hz,2H)；LCMS(ESI)m/e 223.0[(M+H)⁺,针对C₇H₆N₂O₃F₃的计算值为223.0]。

B部分。4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-胺

将3-硝基-4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶(1.3g，5.85mmol)和10％钯碳(0.623g，0.293mmol)在甲醇(20mL)中的混合物在1atm的H₂下搅拌2h。通过硅藻土垫过滤除去催化剂。将混合物浓缩，以得到呈红色油状物的4-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-3-胺(1.0g，5.20mmol，产率89％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.96(s,1H),7.76(d,J＝5.5Hz,1H),6.96(d,J＝5.3Hz,1H),4.93(s,2H),4.84(q,J＝8.9Hz,2H)；LCMS(ESI)m/e 193.1[(M+H)⁺,针对C₇H₈N₂OF₃的计算值为193.1]。

4-苯基吡啶-3-胺的制备

A部分。3-硝基-4-苯基吡啶

将4-氯-3-硝基吡啶(500mg，3.15mmol)、苯基硼酸(577mg，4.73mmol)和Na₂CO₃(2M)(3.94mL，7.88mmol)在甲苯(10mL)和乙醇(2.00mL)中的混合物脱气。添加双(三苯基膦)氯化钯(II)(111mg，0.158mmol)，并且将反应混合物加热至100℃持续4h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(20mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(30％→50％在己烷中的乙酸乙酯；40g柱)纯化，以得到呈棕褐色固体的3-硝基-4-苯基吡啶(600mg，3.00mmol，产率95％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)9.19(s,1H),8.92(d,J＝5.0Hz,1H),7.69(dd,J＝5.0,0.5Hz,1H),7.58-7.51(m,3H),7.48-7.41(m,2H)；LCMS(APCI)m/e201.1[(M+H)⁺,针对C₁₁H₉N₂O₂的计算值为201.1]。

B部分。4-苯基吡啶-3-胺

将3-硝基-4-苯基吡啶(600mg，3.00mmol)和10％钯碳(319mg，0.150mmol)在甲醇(20mL)中的混合物在1atm的H₂下搅拌3h。通过硅藻土垫过滤除去催化剂。将混合物浓缩，以得到呈灰白色固体的4-苯基吡啶-3-胺(420mg，2.468mmol，产率82％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.11(s,1H),7.85(d,J＝4.8Hz,1H),7.54-7.47(m,4H),7.45-7.38(m,1H),7.00(d,J＝4.5Hz,1H),5.10(br.s.,2H)；LCMS(ESI)m/e 171.1[(M+H)⁺,针对C₁₁H₁₁N₂的计算值为171.1]。

4-(4-氟苯基)吡啶-3-胺的制备

A部分。4-(4-氟苯基)-3-硝基吡啶

将4-氯-3-硝基吡啶(1.00g，6.31mmol)、(4-氟苯基)硼酸(1.32g，9.46mmol)和Na₂CO₃(2M)(7.88mL，15.77mmol)在甲苯(20mL)和乙醇(4.00mL)中的混合物脱气。添加双(三苯基膦)氯化钯(II)(0.221g，0.315mmol)，并且将反应混合物加热至100℃持续4h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(20mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(30％→50％在己烷中的乙酸乙酯；40g柱)纯化，以得到呈无色固体的4-(4-氟苯基)-3-硝基吡啶(1.1g，5.04mmol，产率80％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.21(s,1H),8.92(d,J＝5.3Hz,1H),7.74-7.64(m,1H),7.58-7.48(m,2H),7.45-7.32(m,2H)；LCMS(ESI)m/e219.0[(M+H)⁺,针对C₁₁H₈N₂O₂F的计算值为219.1]。

B部分。4-(4-氟苯基)吡啶-3-胺

将4-(4-氟苯基)-3-硝基吡啶(1.1g，5.04mmol)和10％钯碳(0.537g，0.252mmol)在甲醇(30mL)中的混合物在1atm的H₂下搅拌3h。通过硅藻土垫过滤除去催化剂。将混合物浓缩，以得到呈无色固体的4-(4-氟苯基)吡啶-3-胺(865mg，4.60mmol，产率91％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.11(s,1H),7.84(d,J＝5.0Hz,1H),7.63-7.46(m,2H),7.39-7.23(m,2H),6.98(d,J＝4.8Hz,1H),5.12(s,2H)；LCMS(APCI)m/e 189.1[(M+H)⁺,针对C₁₁H₁₀N₂F的计算值为189.1]。

4-(3-氨基吡啶-4-基)苄腈的制备

A部分。4-(3-硝基吡啶-4-基)苄腈

将4-氯-3-硝基吡啶(600mg，3.78mmol)、4-氰基苯基硼酸(834mg，5.68mmol)和Na₂CO₃(2M)(4.73mL，9.46mmol)在甲苯(20mL)和乙醇(4.00mL)中的混合物脱气。添加双(三苯基膦)氯化钯(II)(133mg，0.189mmol)，并且将反应混合物加热至100℃持续4h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(20mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(30％→50％在己烷中的乙酸乙酯；40g柱)纯化，以得到呈棕褐色固体的4-(3-硝基吡啶-4-基)苄腈(450mg，1.998mmol，产率53％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.30(s,1H),8.98(d,J＝5.0Hz,1H),8.21-7.92(m,2H),7.85-7.52(m,3H)；LCMS(ESI)m/e 226.0[(M+H)⁺,针对C₁₂H₈N₃O₂的计算值为226.1]。

B部分。4-(3-氨基吡啶-4-基)苄腈

将4-(3-硝基吡啶-4-基)苄腈(450mg，1.998mmol)和10％钯碳(425mg，0.200mmol)在甲醇(15mL)中的混合物在1atm的H₂下搅拌3h。通过硅藻土垫过滤除去催化剂。将混合物浓缩并且将残余物通过硅胶柱色谱(30％→70％在己烷中的乙酸乙酯；25g柱)纯化，以得到呈棕褐色固体的4-(3-氨基吡啶-4-基)苄腈(210mg，1.076mmol，产率54％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.14(s,1H),7.99-7.93(m,2H),7.86(d,J＝5.0Hz,1H),7.73-7.66(m,2H),5.30(s,2H)；LCMS(ESI)m/e 196.1[(M+H)⁺,针对C₁₂H₁₀N₃的计算值为196.1]。

1-(3-氨基吡啶-4-基)哌啶-4-甲腈的制备

A部分。1-(3-硝基吡啶-4-基)哌啶-4-甲腈

将4-氯-3-硝基吡啶(2.00g，12.61mmol)、哌啶-4-甲腈(2.78g，25.2mmol)和三乙胺(5.27mL，37.8mmol)在THF(20mL)中的混合物在室温下搅拌2h。将溶剂蒸发并且悬浮于己烷中。将固体过滤并且干燥，以得到呈黄色固体的1-(3-硝基吡啶-4-基)哌啶-4-甲腈(2.50g，10.76mmol，产率85％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.80(s,1H),8.39(d,J＝6.0Hz,1H),7.23(d,J＝6.3Hz,1H),3.35-3.28(m,2H),3.23-3.13(m,3H),2.00(ddt,J＝13.2,6.6,3.5Hz,2H),1.89-1.76(m,2H)。

B部分。1-(3-氨基吡啶-4-基)哌啶-4-甲腈

将1-(3-硝基吡啶-4-基)哌啶-4-甲腈(2.50g，10.76mmol)和10％钯碳(1.146g，10.76mmol)在甲醇(50mL)中的混合物在1atm的H₂下搅拌2h。通过硅藻土垫过滤除去催化剂。将混合物浓缩，以得到呈棕褐色固体的1-(3-氨基吡啶-4-基)哌啶-4-甲腈(2.1g，10.38mmol，产率96％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.93(s,1H),7.74(d,J＝5.3Hz,1H),6.78(d,J＝5.3Hz,1H),4.82(s,2H),3.18(d,J＝4.5Hz,1H),3.04(d,J＝4.3Hz,3H),2.78(br.s.,2H),2.11-1.99(m,2H),1.97-1.86(m,2H)；LCMS(ESI)m/e 203.2[(M+H)⁺,针对C₁₁H₁₅N₄的计算值为203.2]。

4-(4-氟哌啶-1-基)吡啶-3-胺的制备

A部分。4-(4-氟哌啶-1-基)-3-硝基吡啶

将4-氯-3-硝基吡啶(1g，6.31mmol)、4-氟哌啶(0.781g，7.57mmol)和三乙胺(2.64mL，18.92mmol)在THF(30mL)中的混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(20mL)的分液漏斗中。将水层用乙酸乙酯(3x 25mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(20％→50％在己烷中的乙酸乙酯；40g柱)纯化，以得到呈黄色固体的4-(4-氟哌啶-1-基)-3-硝基吡啶(750mg，3.33mmol，产率53％)：¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.85-8.76(m,1H),8.33(d,J＝6.0Hz,1H),6.86(d,J＝5.8Hz,1H),5.13-4.71(m,1H),3.43-3.31(m,2H),3.16(dt,J＝12.9,4.7Hz,2H),2.11-1.92(m,4H)；LCMS(ESI)m/e 226.1[(M+H)⁺,针对C₁₀H₁₃N₃O₂F的计算值为226.1]。

B部分。4-(4-氟哌啶-1-基)吡啶-3-胺

将4-(4-氟哌啶-1-基)-3-硝基吡啶(750mg，3.33mmol)和10％钯碳(354mg，0.167mmol)在甲醇(20mL)中的混合物在1atm的H₂下搅拌2h。通过硅藻土垫过滤除去催化剂。将混合物浓缩，以得到呈棕褐色固体的4-(4-氟哌啶-1-基)吡啶-3-胺(600mg，3.07mmol，产率92％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.93(s,1H),7.80(d,J＝5.5Hz,1H),6.89(d,J＝5.5Hz,1H),5.01(br.s.,2H),4.96-4.74(m,1H),3.09(t,J＝9.5Hz,2H),2.91(ddd,J＝11.6,7.2,3.8Hz,2H),2.13-1.97(m,2H),1.91(dddd,J＝13.5,10.3,7.1,3.5Hz,2H)；LCMS(ESI)m/e 196.2[(M+H)⁺,针对C₁₀H₁₅N₃F的计算值为196.1]。

4-吗啉代吡啶-3-胺的制备

A部分。4-(3-硝基吡啶-4-基)吗啉

将4-氯-3-硝基吡啶(5.00g，31.5mmol)、吗啉(5.50mL，63.1mmol)和三乙胺(13.19mL，95mmol)在THF(50mL)中的混合物在室温下搅拌2h。将混合物浓缩并且将残余物悬浮于己烷中。将固体通过过滤收集并且干燥，以得到呈黄色固体的4-(3-硝基吡啶-4-基)吗啉(6.00g，28.7mmol，产率91％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.79(s,1H),8.41(d,J＝6.0Hz,1H),7.22(d,J＝6.0Hz,1H),3.74-3.65(m,4H),3.27-3.18(m,4H)；LCMS(ESI)m/e210.1[(M+H)⁺,针对C₉H₁₂N₃O₃的计算值为210.1]。

B部分。4-吗啉代吡啶-3-胺

将4-(3-硝基吡啶-4-基)吗啉(6.00g，28.7mmol)和10％钯碳(1.526g，1.434mmol)在MeOH(50mL)中的混合物在1atm的H₂下搅拌3h。通过硅藻土垫过滤除去催化剂。将混合物浓缩并且将残余物通过硅胶柱色谱(10％在二氯甲烷中的甲醇；160g柱)纯化，以得到呈灰白色固体的4-吗啉代吡啶-3-胺(4.30g，23.99mmol，产率84％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.94(s,1H),7.76(d,J＝5.3Hz,1H),6.78(d,J＝5.3Hz,1H),4.84(s,2H),3.82-3.70(m,4H),2.94-2.85(m,4H)；LCMS(ESI)m/e 180.1[(M+H)⁺,针对C₉H₁₄N₃O的计算值为180.1]。

4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-胺的制备

A部分。2-甲基-4-(3-硝基吡啶-4-基)吗啉

将4-氯-3-硝基吡啶(2.00g，12.61mmol)、2-甲基吗啉(1.718mL，15.14mmol)和三乙胺(5.27mL，37.8mmol)在THF(30mL)中的混合物在室温下搅拌2h。将溶剂蒸发并且将残余物通过硅胶柱色谱(30％→40％在己烷中的乙酸乙酯，40g柱)纯化，以得到呈黄色固体的2-甲基-4-(3-硝基吡啶-4-基)吗啉(2.00g，8.96mmol，产率71％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.79(s,1H),8.39(d,J＝6.0Hz,1H),7.23(d,J＝6.3Hz,1H),3.91-3.82(m,1H),3.70-3.52(m,2H),3.41-3.32(m,1H),3.25(dd,J＝12.9,1.9Hz,1H),3.16-3.05(m,1H),2.81(dd,J＝12.9,10.2Hz,1H),1.12(d,J＝6.3Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 224.2[(M+H)⁺,针对C₁₀H₁₄N₃O₃的计算值为224.2]。

B部分。4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-胺

将2-甲基-4-(3-硝基吡啶-4-基)吗啉(2.0g，8.96mmol)和10％钯碳(0.953g，0.448mmol)在甲醇(20mL)中的混合物在1atm的H₂下搅拌2h。通过硅藻土垫过滤除去催化剂。将混合物浓缩，以得到呈棕褐色固体的4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-胺(740mg，3.83mmol，产率43％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ7.93(s,1H),7.75(d,J＝5.3Hz,1H),6.77(d,J＝5.3Hz,1H),4.82(s,2H),3.91-3.81(m,1H),3.81-3.51(m,2H),3.24-2.98(m,2H),2.58(td,J＝11.5,3.0Hz,1H),2.29(t,J＝10.8Hz,1H),1.11(d,J＝6.3Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 194.1[(M+H)⁺,针对C₁₀H₁₆N₃O的计算值为194.1]。

4-乙氧基吡啶-3-胺的制备

将4-乙氧基-3-硝基吡啶HCl(1g，4.89mmol)和二水合氯化锡(II)(2.78g，14.66mmol)在乙醇(20mL)中的混合物在回流下加热3h。添加饱和NaHCO₃水溶液(30mL)并且将混合物通过硅藻土垫过滤。将滤液浓缩，以得到呈棕褐色固体的4-乙氧基吡啶-3-胺2HCl(320mg，1.516mmol，产率31％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.52-8.40(m,1H),8.17(s,1H),7.95(d,J＝5.5Hz,1H),7.84(s,1H),6.87(d,J＝5.5Hz,1H),4.10(q,J＝7.0Hz,2H),1.37-1.32(m,3H)；LCMS(ESI)m/e 139.1[(M+H)⁺,针对C₇H₁₁N₂O的计算值为139.2]。

4-乙氧基嘧啶-5-胺的制备

将2,4-二氯嘧啶-5-胺(400mg，2.439mmol)、乙醇(12.200g，265mmol)、NaOH(195mg，4.88mmol)和10％钯碳(260mg，0.122mmol)在THF(4mL)中的混合物在氢气氛下在室温下搅拌24h。将混合物浓缩并且将残余物通过硅胶柱色谱(40％→70％在己烷中的乙酸乙酯；25g柱)纯化，以得到呈黄色固体的4-乙氧基嘧啶-5-胺(140mg，1.006mmol，产率41％)：¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.03(s,1H),7.85(s,1H),5.07(s,2H),4.39(q,J＝7.0Hz,2H),1.35(t,J＝7.0Hz,3H)；LCMS(ESI)m/e 140.1[(M+H)⁺,针对C₆H₁₀N₃O的计算值为140.1]。

6-氟-4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-胺的制备

A部分。2,4-二氟-5-硝基吡啶

将2,4-二氯-5-硝基吡啶(450mg，2.332mmol)、氟化钾(406mg，7.00mmol)和18-冠-6(99mg，0.373mmol)在NMP(2mL)中的混合物在氮气下在100℃下加热2h。将反应混合物转移至含有水(5mL)和醚(50mL)的分液漏斗中。将各层分离并且将有机层用水(2x 5mL)、盐水(5mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(10％→20％在己烷中的乙酸乙酯；40g柱)纯化，以得到呈无色固体的2,4-二氟-5-硝基吡啶(177mg，1.106mmol，产率47％)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.07(d,J＝9.5Hz,1H),6.95(dd,J＝9.4,2.4Hz,1H)；¹⁹F NMR(376MHz,CDCl₃)δ-52.17(d,J＝27.7Hz,1F),-98.12(dt,J＝29.5,8.7Hz,1F)。

B部分。4-(2-氟-5-硝基吡啶-4-基)-2-甲基吗啉

在-40℃下，通过套管向2,4-二氟-5-硝基吡啶(335mg，2.093mmol)在THF(10mL)中的溶液中添加溶于THF(1mL)中的2-甲基吗啉(80mg，0.791mmol)，随后添加Et₃N(0.583mL，4.19mmol)。将浑浊的黄色混合物在-40℃下搅拌1h并且使其升温至0℃。在搅拌另外2h后，TLC(50％在己烷中的乙酸乙酯)显示极性更大的点并且剩余少量起始材料。将混合物浓缩。将产物通过硅胶柱色谱(20％→50％在己烷中的乙酸乙酯；25g柱)纯化，以得到呈黄色油状物的4-(2-氟-5-硝基吡啶-4-基)-2-甲基吗啉(264mg，1.094mmol，产率52％)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.63(s,1H),6.42(s,1H),4.04-3.95(m,1H),3.89-3.76(m,2H),3.26-3.17(m,3H),2.87(dd,J＝12.8,10.0Hz,1H),1.24(d,J＝6.3Hz,3H)；¹⁹F NMR(376MHz,CDCl₃)δ-61.49(s,1F)；LC/MS(ESI)m/e 242.1[(M+H)⁺,针对C₁₀H₁₃FN₃O₃的计算值为242.1]。

C部分。6-氟-4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-胺

向4-(2-氟-5-硝基吡啶-4-基)-2-甲基吗啉(244mg，1.012mmol)在乙醇(8mL)中的溶液中添加氯化铵(433mg，8.09mmol)和锌(粉末)(661mg，10.12mmol)。将反应混合物在50℃下加热2h。将混合物通过硅藻土垫过滤并且浓缩。将反应混合物转移至含有饱和NaHCO₃水溶液(15mL)的分液漏斗中。将水层用二氯甲烷(3x 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，并且浓缩，以给出6-氟-4-(2-甲基吗啉代)吡啶-3-胺(224mg，产率93％)：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.61(s,1H),6.43(d,J＝0.8Hz,1H),4.05-3.98(m,1H),3.88-3.74(m,2H),3.58(br.s.,2H),3.35-3.21(m,2H),2.79(td,J＝11.6,3.1Hz,1H),2.46(dd,J＝11.8,10.0Hz,1H),1.25(d,J＝6.3Hz,3H)；LC/MS(ESI)m/e 212.2[(M+H)⁺,针对C₁₀H₁₅FN₃O的计算值为212.1]。

7-(3-硝基吡啶-4-基)-2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬烷的制备

A部分。7-(3-硝基吡啶-4-基)-2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬烷

将三乙胺(0.330mL，2.365mmol)添加至4-氯-3-硝基吡啶(125mg，0.788mmol)和2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬烷(100mg，0.788mmol)在THF(1.5mL)中的混合物中，并且将混合物在室温下搅拌2.5h。然后将反应混合物在50℃下加热30min。没有发生进一步的反应。将混合物冷却至室温并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(2％→7％在CH₂Cl₂中的甲醇；12g柱)纯化，以得到呈黄色油状物的7-(3-硝基吡啶-4-基)-2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬烷(153mg，0.614mmol，产率78％)：¹H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.86(s,1H),8.38(d,J＝6.0Hz,1H),6.88(d,J＝6.0Hz,1H),4.52(s,4H),3.21-3.12(m,4H),2.09-2.02(m,4H)；LC/MS(ESI)m/e250.1[(M+H)⁺,针对C₁₂H₁₆N₃O₃的计算值为250.1]。

B部分。7-(3-硝基吡啶-4-基)-2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬烷

将7-(3-硝基吡啶-4-基)-2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬烷(150mg，0.602mmol)和10％钯碳(128mg，0.060mmol)在MeOH(3mL)中的混合物在氢气球下搅拌2.5h。将混合物通过硅藻土垫过滤并且浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱(4％→8％在CH₂Cl₂中的甲醇；25g柱)纯化，以得到呈无色油状物的4-(2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)吡啶-3-胺(93mg，0.424mmol，产率71％)：¹H NMR(400MHz,氯仿-d)d 8.05(s,1H),7.99(d,J＝5.0Hz,1H),6.77(d,J＝5.3Hz,1H),4.51(s,4H),2.89(br.s.,4H),2.04(t,J＝5.0Hz,4H)；LC/MS(ESI)m/e 220.2[(M+H)⁺,针对C₁₂H₁₈N₃O的计算值为220.1]。

对于本领域技术人员来说应清楚的是，本公开文本并不限于前述说明性实施例，并且其可以在不背离本公开文本的基本属性的情况下体现为其他具体形式。因此，希望所述实施例在所有方面都被视为说明性的而非限制性的，参考所附的权利要求而不是前述实施例，并且因此落入权利要求的等同内容的含义和范围内的所有变化均旨在包含在其中。

Claims

1.一种式I的化合物

其中：

R¹是氢或N(R³)(R⁴)；

R²是氢、烷基、环烷基或环烯基；

R⁴是氢；

或其药学上可接受的盐。

2.权利要求1的化合物，其中R¹是N(R³)(R⁴)并且R²是氢。

3.权利要求1的化合物，其中R¹是氢并且R²不是氢。

4.权利要求1的化合物，其中Ar¹是被0-3个选自氰基、卤基、烷基、卤代烷基、(R²)烷基、烷氧基、卤代烷氧基和R²的取代基取代的3-吡啶基。

5.权利要求1的化合物，其中Ar¹是被0-3个选自氰基、卤基、烷基、卤代烷基、(R²)烷基、烷氧基、卤代烷氧基和R²的取代基取代的5-嘧啶基。

6.权利要求1的化合物，其中Ar²是被0-3个选自氰基、卤基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烷基亚磺酰基和烷基磺酰基的取代基取代的苯基。

7.一种药物组合物，其包含权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。

8.一种用于治疗选自神经退行性障碍、精神障碍、癌症、代谢障碍和炎性障碍的疾病、障碍或病症的方法，其包括向患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物。

9.一种用于治疗选自阿尔茨海默病、额颞痴呆、进行性核上性麻痹、嗜银颗粒病、皮质基底节变性、匹克病、帕金森病、肌萎缩侧索硬化、中风、亨廷顿病、周围神经病变、创伤性脑损伤、脊髓创伤和血管性痴呆的病症的方法，其包括向患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物。

10.权利要求9的方法，其针对阿尔茨海默病的治疗。