CN110193016B - 一种产氧分子、产氧光敏剂纳米反应器及其制备方法和应用 - Google Patents

一种产氧分子、产氧光敏剂纳米反应器及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明属于光动力疗法领域，公开了一种产氧分子、产氧光敏剂纳米反应器及其制备方法和应用。该产氧分子的结构中含有‑COOOOC‑基团，将产氧分子、光敏剂溶于有机溶剂中，用纳米沉淀法或微流控法组装纳米粒子，最后除去有机溶剂得到产氧光敏剂纳米反应器。本发明的产氧分子在受热条件下氧氧键断裂产生氧气，可为光动力治疗提供氧气。在产氧光敏剂纳米反应器体系中，光照产生的热量会使产氧光敏剂纳米反应器解离产生氧气，可以解决多种因素导致的肿瘤乏氧问题，增强光动力治疗的效果。本发明不仅解决了放疗、化疗、光动力治疗中氧气不足的问题，还解决了传统光敏剂的产热效果导致产单线态氧效率低的问题，且适用于负载商品化的传统光敏剂。

Description

一种产氧分子、产氧光敏剂纳米反应器及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于光动力疗法领域，特别涉及一种产氧分子、产氧光敏剂纳米反应器及其制备方法和应用。
背景技术
肿瘤微环境(TME)的主要特点是低氧、低pH、间质高压、血管高渗透性和炎症反应性等。而低氧环境很大程度上抑制了光动力治疗、化疗及放疗等的治疗效果。
导致肿瘤本身缺氧的原因主要有以下两点：肿瘤组织生长迅速，对氧气以及葡萄糖等其他能量物质的需求较大；肿瘤体积高度膨胀，一部分肿瘤组织逐渐远离具有丰富营养来源的血管，导致肿瘤组织供血不足。
光动力疗法(Photodynamic Therapy，PDT)是一种氧气依赖型的光敏作用物理疗法。研究表明，氧气(3O2)是产生具有肿瘤杀伤作用的单线态氧(1O2)的必要条件。然而肿瘤组织微环境常呈现缺氧状态，加之光动力治疗过程也会消耗组织中大量的氧气，最终影响其对肿瘤细胞的杀伤效果。
总而言之，发展一种增加肿瘤部位氧气的光敏剂纳米反应器来增强光动力治疗效果是非常有意义的。目前报道的主要有以下几种方式：催化剂(MnO2、过氧化氢酶)催化肿瘤组织原位过表达的过氧化氢(H2O2)产生氧气，红细胞膜及仿生生物膜、全氟化碳携带氧气到肿瘤部位，光照下水裂解材料(碳氮化合物)使水电离产生氧气，氧化金(Au2O3)、过氧化钙(CaO2)分解产氧等，但是肿瘤组织内H2O2含量会限制光动力治疗效果，无机物的不可降解性会带来一定的毒副作用。因此设计一种能够产生氧气的光敏剂有机纳米载体对于解决以上问题是非常有意义的。
发明内容
为了克服上述现有技术的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一种产氧分子。
本发明另一目的在于提供上述产氧分子的制备方法。
本发明再一目的在于提供一种上述产氧分子作为载体在制备产氧光敏剂纳米反应器中的应用。
本发明再一目的在于提供一种产氧光敏剂纳米反应器。
本发明再一目的在于提供上述产氧光敏剂纳米反应器的制备方法。
本发明的目的通过下述方案实现：
一种产氧分子，其特征在于产氧分子的结构中含有-COOOOC-基团；
优选的，上述的产氧分子的结构如下式I所示：
Figure BDA0001842898350000021
其中，R1、R2独立地为-H、-CH3、-CH2CH3、-(CH2)nCH3或聚合度为2～200的高分子链；n＝2～200。
更优选的，上述的产氧分子的结构式如下式II所示：
Figure BDA0001842898350000022
一种上述产氧分子的制备方法，包括以下步骤：在催化剂的催化作用下，将含-COOH的分子和含-COOOH的分子在有机溶剂中反应，反应结束后将所得反应液纯化即得产氧分子；
当所述的产氧分子的结构式如式I所示，其中含-COOH的分子的结构式为R1COOH，含-COOOH的分子的结构式为R2COOOH，R1、R2的定义和式I中一致。反应式如下所示：
Figure BDA0001842898350000031
所述的产氧分子的制备方法中，催化剂选自DCC(N，N-二环己基碳二亚胺)、EDC(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺)中的至少一种，优选为DCC。
所述的产氧分子的制备方法中，有机溶剂选自二氯甲烷、1,4-二氧六环、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、四氢呋喃、氯仿、苯、甲苯、二甲苯、氯苯、二氯苯、异丙醇、丙酮、乙腈、乙醇、乙酸乙酯、环己烷、丁酮、丙酮、环己酮、石油醚、六甲基磷酰胺、N-甲基吡咯烷酮、吡啶、乙二醇单甲醚、1,2-二氯乙烷、乙醚、正辛烷等溶剂中的一种或多种混合物，优选为二氯甲烷。
所述产氧分子的制备方法中，含-COOH的分子、含-COOOH的分子和催化剂的摩尔比为1：1：1～1：3：2.5，优选为1:1.4:1.1。
所述的产氧分子的制备方法中，所述的反应是指在气体保护下于-10～10℃下反应2～200h，其中所述气体为氮气、氦气、氖气、氩气、氪气、氙气中的一种或多种，优选为氩气。优选在气体保护下于冰浴条件下反应7天。
所述的产氧分子的制备方法中，纯化步骤为：将所得反应液透析后冻干(透析袋的截留分子量为500～3500)；或将所得反应液利用柱层析的方法分离后旋蒸；或者将所得反应液用乙醚或石油醚沉淀，离心，再溶解在二氯甲烷中并重复前面的操作直至完全除去杂质，然后真空干燥即可。
上述的产氧分子在制备产氧光敏剂纳米反应器中的应用。
一种由上述产氧分子装载光敏剂制备得到的产氧光敏剂纳米反应器，具体由以下步骤制备得到：将产氧分子、光敏剂溶于有机溶剂中，用纳米沉淀法或微流控法组装纳米粒子，最后除去有机溶剂即得到产氧光敏剂纳米反应器。
所述的光敏剂为本领域通用的光敏剂，优选为吲哚菁绿、酞菁类(phthalocyanine)光敏剂、卟啉类(porplyrin)光敏剂、吩噻嗪类光敏剂中的一种或几种，更优选为吲哚菁绿或焦脱镁叶绿酸a。
所述的有机溶剂选自为二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺、异丙醇、1,4-二氧六环和四氢呋喃中的一种或多种，优选为二甲基亚砜。
所述的产氧分子和光敏剂的质量比为1：0.25～1：1；有机溶剂的用量满足每1mg的光敏剂对应加入0.2～1mL的有机溶剂；
所述纳米沉淀法中，水的用量满足每1mg的光敏剂对应加入2～10mL的水。
所述的除去有机溶剂是指用透析方法除去有机溶剂，所用透析袋的截留分子量为500～3500，透析的温度为0～25℃，时间为3～48h。
本发明的机理为：
本发明的产氧分子本身不稳定，在受热条件下化学键断裂产生氧气，可以为光动力治疗提供氧气。在产氧光敏剂纳米反应器体系中，光照产生的热量会使产氧光敏剂纳米反应器解离产生氧气，可以解决多种因素导致的肿瘤乏氧问题，增强光动力治疗的效果。
本发明相对于现有技术，具有如下的优点及有益效果：
(1)产氧光敏剂纳米反应器本身降解释放氧气，而不是单纯的物理载氧或外源供氧，避免了载氧效率低的问题以及高压氧治疗导致的气压性损伤或氧癫痫等；
(2)充分利用了光激发光敏剂过程中不可避免产生的热量，提高了激发光的利用效率，解决了传统光敏剂由于聚集诱导淬灭(ACQ效应)导致的光动力效率低的问题；
(3)产氧分子是一类通用光敏剂载体，不局限于某一种光敏剂，具有普适性；
(4)属于无药体系，避免了抗癌药物本身带来的副作用；
(5)相对于传统无机纳米载体，基于可降解高分子的产氧光敏剂纳米反应器具有更好的生物相容性和应用前景，且便于靶向修饰、诊疗一体化等。
附图说明
图1为实施例1制备的PEG大分子链转移剂PEG-CTA(a)、实施例2制备的含羧基的高分子聚合物PEG-b-PMAA(b)和实施例3中制备产氧分子PEG-b-PO(c)的核磁共振氢谱图。
图2为实施例4中制备得到的产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/ICG NPs)的透射电镜扫描图(a)和粒径图(b)。
图3为实施例5制备得到的不含光敏剂的产氧纳米反应器(PEG-b-PO NPs)和水在不同加热时间下的产氧情况图。
图4为实施例4制备的产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/ICG NPs)和水在光照条件下的产氧情况图。
图5为实施例4制备的产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/ICG NPs)和水在光照条件下SOSG的荧光强度图。
图6为实施例4制备的产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/ICG NPs)在不同光照条件下以及在不同浓度下对小鼠乳腺癌细胞(EMT6)的细胞活性影响图。
图7为实施例9制备的产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/PPa NPs)和焦脱镁叶绿酸a(PPa)水溶液的的吸收光谱图。
图8为实施例9制备的产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/PPa NPs)、焦脱镁叶绿酸a(PPa)和水在光照条件下SOSG的荧光强度图。
具体实施方式
下面结合实施例和附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例中所用试剂如无特殊说明均可从市场常规购得。
实施例中所用原料说明如下：甲基丙烯酸(MAA)、PEG45-OH、4-氰基-4-(苯基硫代甲酰硫基)戊酸(CPADB)、4-二甲氨基吡啶(DMAP)购自Sigma-Aldrich公司。偶氮二异丁腈(AIBN)购自Acros并用95％乙醇重结晶纯化。二氯甲烷用氢化钙干燥，然后蒸馏纯化。石油醚、无水乙醚、异丙醇等试剂均为分析纯，均购自国药集团化学试剂有限公司，未进一步纯化直接使用。过氧乙酸购自西亚试剂公司。SOSG购自上海恪敏生物科技有限公司。MTT(噻唑蓝)购自阿拉丁试剂有限公司。实验中所用的超纯水均由Milli-QSP智能超纯水系统制备，电阻率为18.4MΩ·cm。EMT6细胞来自上海盈公酶联检测试剂有限公司。
实施例1：PEG大分子链转移剂(PEG-CTA)的制备
将PEG45-OH(2.0g,1.0mmol)溶解到10毫升无水甲苯中，然后在50℃条件下共沸蒸馏除去大部分溶剂，加入CPADB(0.29g,1.2mmol)和50毫升无水二氯甲烷，最后用冰水混合物冷却至0℃，得到混合液A。然后将混合液B(DCC(0.42mg，2.0mmol)，DMAP(24.5mg，0.2mmol)，无水二氯甲烷(10mL))逐滴加入至混合液A(滴加1h)，得到反应液。将反应液在室温下搅拌48小时后过滤去除不溶性盐，再将滤液用旋转蒸发仪浓缩后用过量的冰乙醚沉降，离心，再溶解在二氯甲烷中并用大量冰乙醚沉淀，反复三次，冰乙醚的体积是二氯甲烷的10倍以上，得到纯化后的产物。将产物在真空烘箱中干燥一夜后，得到了粉红色粉末PEG大分子链转移剂(PEG-CTA)。
反应式为：
Figure BDA0001842898350000061
图1中的(a)为本实施例中制备的PEG大分子链转移剂(PEG-CTA)的核磁共振氢谱图，从图中可以看出本实施例成功合成了PEG-CTA，经过对比计算高分子聚合物中乙二醇上的亚甲基的质子在3.6ppm左右的积分面积与苯环上的氢在7.3ppm左右的积分面积，得到乙二醇的聚合度为45，其分子式表示为PEG-CTA。
实施例2：聚(乙二醇甲基丙烯酸)(PEG-b-PMAA)的制备
将实施例1制备的PEG-CTA(150mg,0.065mmol)、甲基丙烯酸(MAA,280mg,3.252mmol)和偶氮二异丁腈AIBN(2.4mg,0.015mmol)在安瓿瓶中溶于1mL异丙醇。然后用三冻三融法除去安瓿瓶中的空气，使其达到真空状态。即将安瓿瓶置于液氮中冷冻后用油泵抽气2～3min，然后关闭抽气阀使安瓿瓶密封，使反应混合物融化，然后再置于液氮中冷冻后抽气，如此冻融循环反复操作三次，最后再密封安瓿瓶，混合物溶解后置于70℃下搅拌反应1.5h后用液氮中止聚合反应，打开反应瓶，将反应后混合液在冰石油醚中沉淀，离心，再溶解在二氯甲烷中并用大量石油醚沉淀，反复三次，冰石油醚的体积是二氯甲烷的10倍以上。最终产物在真空干燥箱中室温过夜，得到橙色固体粉末(320mg,产率：74％)。
反应式为：
Figure BDA0001842898350000071
图1中的(b)为本实施例中制备的含羧基的高分子聚合物(聚乙二醇聚甲基丙烯酸：PEG-b-PMAA)的核磁共振氢谱图，从图中可以看出本实施例成功合成了高分子聚合物PEG-b-PMAA，经过对比计算高分子聚合物中乙二醇上的亚甲基的质子在3.45～3.65ppm处的积分面积与甲基丙烯酸中N上甲基的质子在1.68ppm处的积分面积，或者对比计算高分子聚合物中乙二醇上的亚甲基的质子在3.45～3.65ppm处的积分面积与甲基丙烯酸中N上羧基的质子在12.45ppm处的积分面积得到MAA的聚合度为21，其分子式表示为PEG-b-PMAA。
实施例3：产氧分子(PEG-b-PO)的制备
将含羧基的高分子聚乙二醇聚甲基丙烯酸(PEG-b-PMAA，100mg，0.699mmol)溶解于6mL DMF中，在冰浴、氩气保护下加入N，N-二环己基碳二亚胺(DCC，155mg，0.775mmol)后搅拌2小时，然后加入提前24小时配好的过氧乙酸溶液(PAA，74mg，0.979mmol)。冰浴条件下搅拌七天后透析48h(透析袋截留分子量：1000)，最后在冷冻干燥机中冻干得到白色固体粉末(55mg，产率：31.61％)。
反应式为：
Figure BDA0001842898350000081
图1(c)为本实施例制备的产氧分子(PEG-b-PO)的核磁共振氢谱图，经过对比计算高分子聚合物中甲基丙烯酸中N上亚甲基的质子在1.68ppm处与疏水端的甲基的质子在1.00ppm左右处的积分面积，以及甲基丙烯酸的羧基的质子在12.45处的化学位移的消失，表明乙酸与高分子的羧基反应并成功连接，本实施例成功合成了产氧分子PEG-b-PO。
实施例4：产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/ICG NPs)的构建
将2mg由实施例3所制备的PEG-b-PO和0.5mg光敏剂吲哚菁绿(ICG)溶于1mL DMSO中，一次性加入高速(>1000rpm)搅拌的9毫升水中，继续搅拌0.5h，然后通过分子量为1000的透析袋除去有机溶剂。每2h换一次水，透析12h后收集样品即为产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/ICG NPs)。对自组装形成的纳米粒子的形貌及尺寸进行了表征，结果如图2所示。
图2中(a)为PEG-b-PO/ICG NPs的透射电镜结果图，图2中(b)为采用粒度仪对PEG-b-PO/ICG NPs在水相中的尺寸的表征图，其中PEG-b-PO/ICG NPs的平均直径约为190nm，大小形态比较均一，适用于后期的治疗。透射电镜TEM的结果略小于动态光散射的结果，这是由于采用粒度仪对该纳米反应器在水相中的尺寸进行表征时，胶束外面形成一层水化层，造成粒径略大于TEM结果的现象。
实施例5：不含光敏剂的产氧纳米反应器(PEG-b-PO NPs)在加热条件下的产氧量
不含光敏剂的产氧纳米反应器(PEG-b-PO NPs)采用实施例4的方法制备得到，不同之处在于组装纳米粒子过程中不加入光敏剂。
将不含光敏剂的产氧纳米反应器(PEG-b-PO NPs)加入到去离子水中得到混合溶液，溶液中PEG-b-PO NPs的浓度为0.5mg/mL，然后溶液通氮气除去氧气，密封后置于50℃水浴锅中，用溶氧仪(Oxi-3310型)实时检测并记录混合溶液的氧气含量，同时设置单独的水作为对照，结果如图3所示。
图3为不含光敏剂的产氧纳米反应器和水在加热十分钟之内的氧气变化情况图，从图中可以看出，与对照组的水相比，不含光敏剂的产氧纳米反应器在加热条件下10分钟内的溶解氧逐渐增高，而对照组水中的溶解氧几乎没有变化。可以证明不含光敏剂的产氧纳米粒反应器(PEG-b-PO NPs)可以受热裂解产生氧气。
实施例6：产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/ICG NPs)在激光照射下的产氧量
将实施例4中得到的产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/ICG NPs，CICG＝15μg/mL，CPEG-b-PO＝0.4mg/mL)在波长为808nm的激光(0.55W/cm2)下照射10min，用溶氧仪(Oxi-3310型)实时检测并记录水中的氧气含量变化情况，同时设置单独的水作为对照，结果如图4所示。
图4为不同处理组在激光照射十分钟之内的氧气变化情况，从图中可以看出，与对照组水相比，产氧光敏剂纳米反应器在10min内的溶解氧逐渐增高，而对照组水中的溶解氧几乎没有变化。可以证明产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/ICG NPs)在光照条件下产热使其裂解产生氧气。
实施例7：产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/ICG NPs)在激光下的产单线态氧(1O2)的情况
将实施例4中得到的产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/ICG NPs，CICG＝15μg/mL，CPEG-b-PO＝0.4mg/mL)、水分别和单线态氧捕捉剂(SOSG，Ex:488nm，Em:525nm)配成混合液(混合溶液中SOSG的最终浓度为5μm)，在波长为808nm激光(0.55W/cm2)下照射10min后，用荧光分光光度计分别检测其荧光强度。
图5为不同处理组在激光照射十分钟后SOSG的荧光强度图，与对照组水相比，产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/ICG NPs)实验组在波长为525nm处的荧光强度明显较高，可以证明产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/ICG NPs)在光照条件下产生单线态氧(1O2)。
实施例8：MTT实验检测产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/ICG NPs)在光照条件下对EMT6细胞的杀伤效果
MTT实验选用小鼠乳腺癌细胞(EMT6)作为典型代表进行细胞活性检测。将EMT6细胞接到96孔板(1ⅹ104/孔)孵育24小时，然后用含有不同浓度实施例4制备的产氧光敏剂纳米反应器的培养液(0～200μg/mL)替换原有培养液，孵育4小时后用波长为808nm激光(0.35W/cm2)照射10min，继续孵育12h后加入20μL MTT溶液(5mg/mL)，4小时后移去MTT溶液，加入100μL DMSO震荡15min后用酶标仪检测其在540nm处的吸收值。
同样的，设置不用激光照射的对照组。
图6为产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/ICG NPs)在不同光照条件下以及在不同浓度下对小鼠乳腺癌细胞(EMT6)的细胞活性影响图，其中PEG-b-PO/ICG 808nm(-)的细胞活性远远低于PEG-b-PO/ICG 808nm(+)组的细胞活性(808nm(-)：不照光、808nm(+)：照光)。可以证明产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/ICG NPs)光照后能有效的对EMT6细胞造成杀伤效果，即产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/ICG NPs)光照后能有效的增强光动力治疗效果。
实施例9：产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/PPa NPs)的构建
将2mg由实施例3制备的PEG-b-PO和0.5mg光敏剂焦脱镁叶绿酸a(PPa)溶于1mLDMSO中，一次性加入高速(>1000rpm)搅拌的9mL水中，继续搅拌0.5h，然后通过分子量为1000的透析膜除去有机溶剂。每2h换一次水，透析12h后收集样品即为产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/PPaNPs)。检测PEG-b-PO/PPa NPs和PPa水溶液的吸光度，结果如图7所示。
图7为制备的产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/PPa NPs)和PPa水溶液的吸收光谱图，根据光谱图可知，产氧高分子成功装载上光敏剂PPa，且其吸收图谱变宽，更有利于其临床应用。
实施例10：产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/PPa NPs)在激光下的产单线态氧(1O2)的情况
将实施例9中得到的产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/PPa NPs，CPPa＝20μg/mL，CPEG-b-PO＝0.4mg/mL)、PPa和去离子水分别和单线态氧捕捉剂(SOSG，Ex:488nm，Em:525nm)配成混合液(溶液中SOSG的最终浓度为1μM)，在波长为730nm激光(0.5W/cm2)下照射10min后，用荧光分光光度计分别检测其荧光强度。
图8为不同处理组在激光照射十分钟后SOSG的荧光强度图，与对照组PPa和水相比，产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/PPa NPs)实验组的荧光强度在波长为525nm处明显较高，可以证明产氧光敏剂纳米反应器(PEG-b-PO/PPa NPs)在光照条件下产热使其裂解产生氧气，在光照条件下产生单线态氧(1O2)。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种产氧分子，其特征在于：结构如式II所示：
Figure 912941DEST_PATH_IMAGE001
。
2.一种根据权利要求1所述产氧分子的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
在催化剂的催化作用下，将含-COOH的分子和含-COOOH的分子在有机溶剂中反应，反应结束后将所得反应液纯化即得产氧分子。
3.根据权利要求2所述产氧分子的制备方法，其特征在于：
所述催化剂为DCC、EDC中的至少一种；
所述的有机溶剂为二氯甲烷、1,4-二氧六环、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、四氢呋喃、氯仿、苯、甲苯、二甲苯、氯苯、二氯苯、异丙醇、丙酮、乙腈、乙醇、乙酸乙酯、环己烷、丁酮、丙酮、环己酮、石油醚、六甲基磷酰胺、N-甲基吡咯烷酮、吡啶、乙二醇单甲醚、1,2-二氯乙烷、乙醚、正辛烷中的一种或多种混合物；
所述的含-COOH的分子、含-COOOH的分子和催化剂的摩尔比为1：1：1~1：3：2.5。
4.根据权利要求2所述产氧分子的制备方法，其特征在于：
所述的反应的条件为在气体保护下于-10~10℃下反应2~200 h，其中所述气体为氮气、氦气、氖气、氩气、氪气、氙气中的一种或多种；
所述的纯化的步骤为：将反应后的混合物透析后冻干；或将反应后的混合物用柱层析的方法分离后旋蒸；或者将反应后的混合物在乙醚或石油醚中沉淀，离心，再溶解在二氯甲烷中并重复前面的操作直至完全除去杂质，然后真空干燥。
5.根据权利要求1所述产氧分子在制备产氧光敏剂纳米反应器中的应用。
6.一种产氧光敏剂纳米反应器，其特征在于由权利要求1所述的产氧分子制备得到，具体包括以下步骤：将产氧分子、光敏剂溶于有机溶剂中，用纳米沉淀法或微流控法组装纳米粒子，最后除去有机溶剂即得到产氧光敏剂纳米反应器。
7.根据权利要求6所述的产氧光敏剂纳米反应器，其特征在于：
所述光敏剂为吲哚菁绿、酞菁类光敏剂、卟啉类光敏剂、吩噻嗪类光敏剂中的一种或多种；
所述的有机溶剂为二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺、异丙醇、1,4-二氧六环或四氢呋喃中的一种或多种。
8.根据权利要求6所述的产氧光敏剂纳米反应器，其特征在于：
所述的产氧分子和光敏剂的质量比为1：（0.25~1）；
所述有机溶剂的用量满足每1 mg的光敏剂对应加入0.2~1 mL的有机溶剂；
所述纳米沉淀法中，水的用量满足每1 mg的光敏剂对应加入2~10 mL的水；
所述的除去有机溶剂为用透析方法除去有机溶剂。
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