CN110183500A - 一种植物半乳糖脂的制备方法 - Google Patents

一种植物半乳糖脂的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及药用天然辅料的制备技术领域，公开了一种植物半乳糖脂的制备方法。该方法包括以下步骤：(1)将农副产品进行烘干处理，然后用乙醇溶液提取2‑4次，将提取液合并；(2)从所述提取液中减压回收乙醇，向剩余物中加水，搅拌形成乳液；(3)将步骤(2)所得乳液静置，离心分离，将所得上清液减压回收水；(4)将步骤(3)中减压回收水后的剩余物溶解于乙醇溶液中，离心分离，接着将所得上清液在‑20℃至20℃下放置；(5)将步骤(4)所得上清液离心分离，然后将所得上清液减压回收乙醇，得到植物半乳糖脂。采用本发明所述的植物半乳糖脂制备方法，制备步骤简单，原料价格低廉，产品产率高以及整个制备过程安全环保。

Description

一种植物半乳糖脂的制备方法
技术领域
本发明涉及药用天然辅料的制备技术领域，具体涉及一种植物半乳糖脂的制备方法。
背景技术
植物光合膜是地球上分布最广、含量最为丰富的一类生物膜。在植物光合膜膜脂中，糖脂含量最多，约为膜脂总量的70％(摩尔百分比)以上，因此糖脂是地球上最为丰富的脂类物质，其主要成分是单半乳糖基二酰甘油酯(monogalactosyl diacylglycerol，MGDG)和双半乳糖基二酰甘油酯(digalactosyl diacylglycerol，DGDG)，DGDG比MGDG多一个半乳糖基。
DGDG与天然磷脂(PC)的几何结构非常相似。DGDG的半乳糖单元的羟基和半乳糖酰基甘油为亲水性基团，脂链为亲脂性基团，这使得半乳糖脂具有明显的两亲性，是一种天然的非离子型表面活性剂。PC与DGDG两者结构和性质的相似性决定了它们应用方面的相似性，这使得植物半乳糖脂与磷脂均可用于制备脂质体或囊泡，
目前，植物半乳糖脂在化妆品、食品和药物制剂中均具有很大的应用潜力，具有多种用途：①具有皮肤保湿作用；②是一种很好的天然食品乳化剂及添加剂：甘油基糖脂可以做为面包添加剂，提高面包品质和货架寿命、也可做为贝类生长的刺激剂；③能抑制胃肠道脂肪吸收，增加饱腹感，具有减肥作用。植物半乳糖脂会减缓消化道内脂肪的分解，随后刺激一种名为缩胆囊素的激素分泌，这种激素会向大脑发出“已经吃饱”的信息。因此，可以在食物中添加植物半乳糖脂开发出通过抑制食欲帮人减肥的零食、蛋糕、巧克力和饼干等食物。但是，时至今日，市场上并没有这种产品出现，究其原因，我们认为是目前的半乳糖脂制备工艺复杂，制备成本高，产量低，无法满足减肥食品开发的需求。
除此之外，植物半乳糖脂在靶向治疗方向也有很大的应用前景。肝细胞膜上有十分丰富的去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor，ASGPR)又称半乳糖(galactose)受体。ASGPR由三个或三个以上亚单位组成，这些亚单位在细胞外具有糖识别结构域，能特异地识别半乳糖残基或N-乙酰半乳糖胺残基，当糖识别结构域与其糖残基结合后，即发生受体介导的胞吞作用。纳米载药系统经半乳糖基配体修饰就可制成以ASGPR受体为介导的肝主动靶向纳米载体给药系统。但目前，ASGPR介导的肝靶向系统研究中，半乳糖基作为配体与纳米载体的连接修饰通常以化学合成为主，存在着操作繁琐、反应条件苛刻、副产物多、安全性存疑等不足之处，而天然来源的材料比之于合成材料通常具有更高的安全性。因此，植物半乳糖脂不仅含有半乳糖基，可作为肝靶向配体；还具有抗肿瘤、抗血管生成、抗炎等作用，而且来自天然，具有良好的安全性和成膜特性，这些优异的特性为将其作为新型抗肝癌纳米载体材料的开发提供了坚实的基础和保障。
磷脂同样作为生物膜的组成成分，目前已有较为成熟的提取纯化工艺，并且价格低廉，从而降低了研发成本，有力地促进了药物纳米新剂型的开发和应用。虽然半乳糖脂和磷脂一样同属于生物膜的组成成分，但因现有提取分离工艺复杂，成本高，产量低，致使市价昂贵，这样高昂的研发费用无疑会阻碍半乳糖脂作为膜材在药物新剂型研究中的推广与应用。因而，很长时间以来，国内外对植物半乳糖脂的研究主要集中在材料用量少的植物生理生化实验方面和抗肿瘤的细胞实验方面，而在材料用量大的作为载体材料的制剂研究方面，其相关研究报道很少，作为肝靶向载体材料的研究则尚未见报道。
目前，半乳糖脂的常见提取纯化工艺为：农产品用丙酮浸提→浸提液合并后减压浓縮→硅胶拌匀上样→硅胶分离柱中用不同比例有机溶剂(氯仿：甲醇)分段洗脱分离→减压回收有机溶剂得样品。采用这种工艺进行制备不仅步骤多、产量低、成本高，在洗脱分离过程中还需使用有毒的有机溶剂，以至于产品中残留有毒有机溶剂，不适合应用于药用材料、化妆品和食品添加剂的制备过程。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有的植物半乳糖脂的制备工艺中存在的步骤多、产量低、成本高和不环保的问题，提供一种植物半乳糖脂制备方法。
为了实现上述目的，本发明的发明人进行了深入研究，发现植物半乳糖脂在乙醇中稳定性大大高于丙酮；不同种类的植物半乳糖脂在不同温度下，在乙醇中溶解度不同；此外，其还具有在水中搅拌形成乳液的特性。基于这些研究发现，从而完成了本发明。
为此，本发明提供了一种植物半乳糖脂的制备方法，该方法包括以下步骤：
(1)将农副产品进行烘干处理，然后用乙醇溶液提取2-4次，将提取液合并；
(2)从所述提取液中减压回收乙醇，向剩余物中加水，搅拌形成乳液；
(3)将步骤(2)所得乳液静置，离心分离，将所得上清液减压回收水；
(4)将步骤(3)中减压回收水后的剩余物溶解于乙醇溶液中，离心分离，接着将所得上清液在-20℃至20℃下放置；
(5)将步骤(4)所得上清液离心分离，然后将所得上清液减压回收乙醇，得到植物半乳糖脂。
优选地，在步骤(1)中，所述农副产品为稻杆、米糠、谷壳、稻叶、麦秆、秸秆、大麦麸皮、小麦麸皮和燕麦麸皮中的至少一种。
优选地，在步骤(1)中，所述烘干处理的条件包括：温度为60-70℃，时间为30-90min。
优选地，在步骤(1)中，每次提取过程为：将干燥处理后的农副产品在所述乙醇溶液中浸泡30-120min，然后超声15-60min；或者将干燥处理后的农副产品在所述乙醇溶液中浸泡30-120min，然后继续浸泡60-120min。
优选地，所述乙醇溶液的浓度为50-100％(V/V)。
优选地，在步骤(3)中，所述静置的时间为12-24h。
本发明可以增加农产品附加值，改善环境污染。本发明将农副产物进行综合利用，从中制备出具有多功能的植物半乳糖脂，无疑对增加农产品附加值，增加农民收入，脱贫致富，改善环境具有重大现实意义。
而且，按照本发明所述的技术方案，制备过程使用廉价易得、无毒的乙醇和水作为提取纯化溶剂，乙醇可回收重复利用，整个制备过程产率高、步骤简单以及绿色环保。
另外，本发明所述的提取工艺，简化了流程，大幅降低了半乳糖脂制备成本，可以大量制备，使得植物半乳糖脂在抗肝癌药物新剂型研究中的开发应用和美容、减肥领域的应用成为可能。
具体实施方式
以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。
在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。
本发明所述的植物半乳糖脂的制备方法包括以下步骤：
(1)将农副产品进行烘干处理，然后用乙醇溶液提取2-4次，将提取液合并；
(2)从所述提取液中减压回收乙醇，向剩余物中加水，搅拌形成乳液；
(3)将步骤(2)所得乳液静置，离心分离，将所得上清液减压回收水；
(4)将步骤(3)中减压回收水后的剩余物溶解于乙醇溶液中，离心分离，接着将所得上清液在-20℃至20℃下放置；
(5)将步骤(4)所得上清液离心分离，然后将所得上清液减压回收乙醇，得到植物半乳糖脂。
在步骤(1)中，所述农副产品可以为本领域的常规选择。在具体的实施方式中，所述农副产品可以为稻杆、米糠、谷壳、稻叶、麦秆、秸秆、大麦麸皮、小麦麸皮和燕麦麸皮中的至少一种。
在本发明中，在步骤(1)中，所述农副产品进行烘干处理的温度可以为60-70℃，具体地，例如可以为60℃、61℃、62℃、63℃、64℃、65℃、66℃、67℃、68℃、69℃或70℃。
在本发明中，在步骤(1)中，所述农副产品进行烘干处理的时间可以为30-90min，具体地，例如可以为30min、35min、40min、45min、50min、55min、60分钟、65min、70min、75min、80min、85min或90min。
在本发明中，在步骤(1)中，所述乙醇溶液提取的次数可以为2-4次，具体地，例如可以为2次、3次和4次。
在本发明中，所述乙醇溶液的浓度可以为50-100％(V/V)，具体地，例如可以为50％(V/V)、55％(V/V)、60％(V/V)、65％(V/V)、70％(V/V)、75％(V/V)、80％(V/V)、85％(V/V)、90％(V/V)、95％(V/V)或100％(V/V)。
在优选情况下，在步骤(1)中，每次提取过程为：将干燥处理后的农副产品在所述醇溶液中浸泡一段时间，然后超声；或者将干燥处理后的农副产品在所述乙醇溶液中浸泡一段时间，然后继续浸泡。
在本发明中，在步骤(1)中，所述农副产品在乙醇中浸泡的时间可以为30-120min，具体地，例如可以为30min、35min、40min、45min、50min、55min、60min、65min、70min、75min、80min、85min、90min、95min、100min、105min、110min、115min或120min。
在本发明中，在步骤(1)中，所述超声的时间可以为15-60min，具体地，例如可以为15min、20min、25min、30min、35min、40min、45min、50min、55min或60min。
在本发明中，在步骤(1)中，所述继续浸泡的时间可以为60-120min，具体地，例如可以为60min、65min、70min、75min、80min、85min、90min、95min、100min、105min、110min、115min或120min。
在本发明中，在步骤(3)中，所述静置过程的时间可以为12-24h，具体地，例如可以为12h、13h、14h、15h、16h、17h、18h、19h、20h、21h、22h、23h或24h。
优选地，在步骤(4)中，所述放置温度为-20至20℃，具体地，例如可以为-20℃、-18℃、-16℃、-14℃、-12℃、-10℃、-8℃、-6℃、-4℃、-2℃、0℃、2℃、4℃、6℃、8℃、10℃、12℃、14℃、16℃、18℃或20℃。
以下将通过实施例对本发明进行详细描述，但本发明的保护范围并不仅限于此。
实施例1
植物半乳糖脂A1的具体制备过程如下：
(1)将稻杆粗粉于66℃的烘箱中烘干处理50min，然后用浓度为100％(V/V)的乙醇溶液提取3次，将提取液合并；
所述每次提取过程为：将干燥处理后的农副产品在乙醇溶液中浸泡90min，然后超声45min；
(2)从所述提取液中减压回收乙醇，向剩余物中加水，搅拌形成乳液；
(3)将步骤(2)所得乳液静置16h，离心分离，将所得上清液减压回收水；
(4)将步骤(3)中减压回收水后的剩余物溶解于浓度为100％(V/V)的乙醇溶液中，离心分离，接着将所得上清液在4℃下放置；
(5)将步骤(4)所得上清液离心分离，接着将所得上清液减压回收乙醇，得到植物半乳糖脂A1。
实施例2
植物半乳糖脂A2的具体制备过程如下：
(1)将稻杆粗粉于65℃的烘箱中烘干处理70min，然后用浓度为100％(V/V)的乙醇溶液提取3次，将提取液合并；
所述每次提取过程为：将干燥处理后的农副产品在乙醇溶液中浸泡60min，然后超声30min；
(2)从所述提取液中减压回收乙醇，向剩余物中加水，搅拌形成乳液；
(3)将步骤(2)所得乳液静置18h，离心分离，将所得上清液减压回收水；
(4)将步骤(3)中减压回收水后的剩余物溶解于浓度为100％(V/V)的乙醇溶液中，离心分离，接着将所得上清液在8℃下放置；
(5)将步骤(4)所得上清液离心分离，接着将所得上清液减压回收乙醇，得到植物半乳糖脂A2。
实施例3
植物半乳糖脂A3的具体制备过程如下：
(1)将稻杆粗粉于64℃的烘箱中烘干处理45min，然后用浓度为100％(V/V)的乙醇溶液提取3次，将提取液合并；
所述每次提取过程为：将干燥处理后的农副产品在乙醇溶液中浸泡100min，然后继续浸泡80min；
(2)从所述提取液中减压回收乙醇，向剩余物中加水，搅拌形成乳液；
(3)将步骤(2)所得乳液静置19h，离心分离，将所得上清液减压回收水；
(4)将步骤(3)中减压回收水后的剩余物溶解于浓度为100％(V/V)的乙醇溶液中，离心分离，接着将所得上清液在-10℃下放置；
(5)将步骤(4)所得混合物继续离心分离，接着将所得上清液减压回收乙醇，得到植物半乳糖脂A3。
实施例4
植物半乳糖脂A4的具体制备过程如下：
(1)将稻杆粗粉于67℃的烘箱中烘干处理60min，然后用浓度为95％(V/V)的乙醇溶液提取2次，将提取液合并；
所述每次提取过程为：将干燥处理后的农副产品在乙醇溶液中浸泡90min，然后继续浸泡90min；
(2)从所述提取液中减压回收乙醇，向剩余物中加水，搅拌形成乳液；
(3)将步骤(2)所得乳液静置14h，离心分离，将所得上清液减压回收水；
(4)将步骤(3)中减压回收水后的剩余物溶解于浓度为100％(V/V)的乙醇溶液中，离心分离，接着将所得上清液在-20℃下放置；
(5)将步骤(4)所得混合物继续离心分离，接着将所得上清液减压回收乙醇，得到植物半乳糖脂A4。
测试例
计算实施例1-4中植物半乳糖脂的产率，结果如下表1所示。
表1
植物半乳糖脂产率(g/100g)
实施例1 0.5
实施例2 0.4
实施例3 0.3
实施例4 0.2
通过表1的数据可以看出，按照本发明所述的方法制备的植物半乳糖脂产率高，制备过程简单，并且整个过程安全环保。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于此。在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，包括各个技术特征以任何其它的合适方式进行组合，这些简单变型和组合同样应当视为本发明所公开的内容，均属于本发明的保护范围。

Claims (6)

1.一种植物半乳糖脂的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
(1)将农副产品进行烘干处理，然后用乙醇溶液提取2-4次，将提取液合并；
(2)从所述提取液中减压回收乙醇，向剩余物中加水，搅拌形成乳液；
(3)将步骤(2)所得乳液静置，离心分离，将所得上清液减压回收水；
(4)将步骤(3)中减压回收水后的剩余物溶解于乙醇溶液中，离心分离，接着将所得上清液在-20℃至20℃下放置；
(5)将步骤(4)所得上清液离心分离，然后将所得上清液减压回收乙醇，得到植物半乳糖脂。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述农副产品为稻杆、米糠、谷壳、麦秆、秸秆、稻叶、大麦麸皮、小麦麸皮和燕麦麸皮中的至少一种。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述烘干处理的条件包括：温度为60-70℃，时间为30-90min。
4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，每次提取过程为：将干燥处理后的农副产品在所述乙醇溶液中浸泡30-120min，然后超声15-60min；
或者将干燥处理后的农副产品在所述乙醇溶液中浸泡30-120min，然后继续浸泡60-120min。
5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述乙醇溶液的浓度为50-100％(V/V)。
6.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述静置的时间为12-24h。
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