CN110115292A - 一种预防龋齿的益生菌奶片及其制备方法 - Google Patents
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- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
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Abstract
本发明公开了属于食品技术领域的一种预防龋齿的益生菌奶片及其制备方法。本发明利用成本低的增殖培养基将益生菌培养后，获得高浓度益生菌菌悬液后离心、真空冷冻干燥后制成菌粉；再将益生菌菌粉直接与奶粉和辅料混合、造粒，制备益生菌奶片。本发明直接将益生菌菌粉与主辅料混合压片，设备要求低、简单易行、使用成本低、易规模化推广；营养价格高，体积小，便于携带；且可有效预防牙菌斑的形成，抑制龋齿的形成。
Description
技术领域
本发明涉及食品加工技术领域，具体涉及一种预防龋齿的益生菌奶片及其制备方法。
背景技术
龋齿是我国的常见病、多发病，其主要形成原因是牙菌斑。牙菌斑是牙齿表面的一层几乎无色的薄膜，含有造成龋齿的细菌。一般我们认为，龋齿的发生与所食用的食物关系密切。食物中营养物质(如蛋白质、维生素、微量元素等)的摄入对牙齿的发育是十分有利的，但食物中的含糖成分(特别是蔗糖和精制碳水化合物)会与口腔中的致龋菌共同作用，黏附于牙齿表面形成生物膜，并在适宜温度、足够的时间下产酸，侵蚀牙齿从而产生龋齿。每次进食后，牙菌斑中的这些细菌会和食物中的糖分或淀粉发生化学反应，产生腐蚀牙齿的酸性物质，随之牙齿的牙釉质便会破坏，形成比较脆弱的小蛀斑，若继续恶化则会形成牙洞。且睡前摄入甜食，致龋率会大大增加，由于睡眠状态下口腔处于静止，唾液分泌量减小机械清洗作用降低。因此，减少含糖食物的摄入或食用代糖食物都是可以有效抑制龋齿的方法。
益生菌被世界卫生组织定义为摄入适当的量对食用者健康有益的一类活的微生物的总称。一般来说，益生菌与肠道健康联系紧密，可以促进或恢复肠道菌群平衡，常被用于预防或治疗一些肠道疾病，如克罗恩病、溃疡性结肠炎、肠易激综合征、感染性腹泻、抗生素相关性腹泻、坏死性结肠炎等。近年来，口腔益生菌用于防治口臭、龋齿、牙周病、咽扁桃体炎、念珠病、中耳炎等疾病日益受到研究者的重视，并取得了积极的预防及治疗效果。唾液链球菌是已知最早在婴儿体内定植的细菌，通常在出生后不久从母亲身上获得，在健康人体口腔微生物菌群中占主要地位，并作为细菌素样抑菌物质(BLISs)的主要产生菌，具有抑制其它多种微生物的活性，能够减少病原菌在口腔、呼吸道等部位的定植。因此唾液链球菌等被当作口腔益生菌的重要候选者。
龋齿和牙周疾病是影响口腔健康的常见感染疾病。随着抗生素的滥用和细菌耐药性问题的日益加剧，益生菌疗法用于防治口腔疾病已成为维持口腔健康的发展趋势之一。利用益生菌治疗并不会像抗生素类的药物将口腔微环境中的众多细菌杀死，从而导致其他疾病的感染，更不会提高微生物的耐药性；相反，因为益生菌的作用范围小，且具有目标性，所以并不会杀死其他无关细菌。虽然益生菌的来源非常广泛，但学者们还是经常从人体自身筛选出益生菌，用于治疗相应的疾病，因为，从其应用的器官中筛选的益生菌才能长期定植在所需部位而达到良好的治疗效果。
近年来国内外相继出现一些关于益生菌奶片的报道，据目前相关文献报道益生菌奶片多以奶粉为主要原料，再配合益生菌等其他成分，经压制而成的。它兼具了牛奶的全部营养以及益生菌的特殊生理生化功能等，将保健与营养合二为一。其次在运输上克服了液态乳制品的难贮藏，保质期短等明显缺点，并且体积变小，便于携带，是青少年年轻白领理想的营养补充剂。益生菌奶片具有更好的保健功能，与一般奶片相比产品功能齐全，营养价值更高。由于最终制得的产品中应含有一定数量的活性益生菌菌体，从而使得在加工这种奶片时，其预处理将要求的更加严格而准确，尽量在保证奶片原有营养的基础上提高益生菌奶片中益生菌的活菌数是研制高菌浓益生菌奶片的重要目标。
随着人们对益生菌功能的逐步认识，益生菌产品逐渐走入人们的眼帘，虽然国内奶片种类繁多，但是很少有将益生菌和奶片融为一体的产品，所以开发多功能益生菌奶片是目前国内的热点研究课题。
奶片主要是以鲜牛乳或乳粉作为主要原料，与鲜奶相比，奶片无需冷藏、无需加热食用，已成为乳制品中的亮点。牛乳中含有丰富的免疫因子同时还有丰富的乳铁蛋白、钙元素等一些营养物质，对于婴幼儿的身体非常的好，能够有效地促进幼儿的身体骨骼的生长与发育，婴幼儿能够从牛乳中吸取到足够身体发育和生长的必要的营养物质，同时还能够给宝宝提供足够的免疫力。将其制成奶片，不仅可享受到牛奶的风味和质地，独有的加工工艺，还保留了牛奶中多种营养成分。益生菌奶片不仅仅具有鲜奶的营养功效，同时又含有益生菌所独特的作用，是一种很营养又养生的食物，食物，平时生活中吃益生菌奶片的话能够补充到丰富的钙元素，以及一些其他的营养元素和微量元素，同时可以获得益生菌，这样又能促进肠胃的消化蠕动，并且帮助身体加快对钙元素以及其他微量元素的充分吸收与利用，使身体骨骼得到很好地发育生长。而开发出一种预防龋齿的益生菌食品，可以有效保护口腔微生态平衡，对龋病的产生采取预防措施，保证益生菌在生物群落中的正常地位和作用。
发明内容
本发明的一个目的在于提供一种预防龋齿的益生菌奶片。
采取的技术方案如下：
一种预防龋齿的益生菌奶片，由以下重量份数的原料制成：50-55份全脂乳粉、33-37份脱脂乳粉、3-4份益生菌菌粉、4-5份木糖醇粉、2-3份羧甲基纤维素钠和1.5-2份硬脂酸镁。
所述益生菌菌粉包含唾液链球菌和/或鼠李糖乳杆菌。
本发明的另一个目的在于提供一种预防龋齿的益生菌奶片的制备方法，包括以下步骤：
1).将益生菌接种到培养基中，37℃条件下培养16h-24h，然后将增殖培养的菌液在3-6℃下5000r/min离心10min，除去上清液，并用等体积生理盐水洗涤菌体至菌体洁白；
2).用冻干保护剂重悬收集的益生菌菌体，在-20℃预冻2h后放入-80℃冷冻24h，菌体置于冻干机中-55℃，5Pa真空冷冻干燥13h；收集冻干粉置于-70℃冰箱备用；
3).将50-55份全脂乳粉、33-37份脱脂乳粉、3-4份益生菌菌粉和4-5份木糖醇粉碎后过60目筛，得到奶片粗混合物；
4).将2-3份羧甲基纤维素钠和1.5-2份硬脂酸镁与奶片粗混合物混匀，然后压片，得到益生菌奶片。
其中步骤1)中所述培养基为含有1-2％蛋白胨、1-2％酵母浸粉、0.5-1％碳酸钙的胡萝卜培养基。
其中步骤2)中所述冻干保护剂包含10-14％脱脂乳粉、1-2％木糖醇、2.5-3％乙酸钠和7.5-8％谷氨酸钠。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：本发明制成的奶片口感好，成本低，对胞外多糖生成的抑制率达到89％，对生物膜形成抑制率达到95％。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作详细描述，但本发明的实施不仅限于此。
实施例1
一种预防龋齿的益生菌奶片，由以下重量份数的原料制成：53份全脂乳粉、34份脱脂乳粉、4份益生菌菌粉、5份木糖醇粉、2份羧甲基纤维素钠和1.5份硬脂酸镁。所述益生菌菌粉包含唾液链球菌4份。
上述预防龋齿的益生菌奶片的制备方法，包括以下步骤：
1).将益生菌接种到含有1.5％蛋白胨、1.5％酵母浸粉、0.8％碳酸钙的胡萝卜培养基中，37℃条件下培养18h，然后将增殖培养的菌液在5℃下5000r/min离心10min，除去上清液，并用等体积生理盐水洗涤菌体至菌体洁白；
2).用含有12％脱脂乳粉、2％木糖醇、2.6％乙酸钠和7.8％谷氨酸钠的冻干保护剂重悬收集的益生菌菌体，在-20℃预冻2h后放入-80℃冷冻24h，菌体置于冻干机中-55℃，5Pa真空冷冻干燥13h；收集冻干粉置于-70℃冰箱备用；
3).将53份全脂乳粉、34份脱脂乳粉、4份益生菌菌粉和5份木糖醇粉碎后过60目筛，得到奶片粗混合物；
4).将2份羧甲基纤维素钠和1.5份硬脂酸镁与奶片粗混合物混匀，然后压片，得到益生菌奶片。
实施例2
一种预防龋齿的益生菌奶片，由以下重量份数的原料制成：53份全脂乳粉、34份脱脂乳粉、4份益生菌菌粉、5份木糖醇粉、2份羧甲基纤维素钠和1.5份硬脂酸镁。所述益生菌菌粉包含鼠李糖乳杆菌4份。
上述预防龋齿的益生菌奶片的制备方法，包括以下步骤：
1).将益生菌接种到含有1.5％蛋白胨、1.5％酵母浸粉、0.8％碳酸钙的胡萝卜培养基中，37℃条件下培养18h，然后将增殖培养的菌液在5℃下5000r/min离心10min，除去上清液，并用等体积生理盐水洗涤菌体至菌体洁白；
2).用含有12％脱脂乳粉、2％木糖醇、2.6％乙酸钠和7.8％谷氨酸钠的冻干保护剂重悬收集的益生菌菌体，在-20℃预冻2h后放入-80℃冷冻24h，菌体置于冻干机中-55℃，5Pa真空冷冻干燥13h；收集冻干粉置于-70℃冰箱备用；
3).将53份全脂乳粉、34份脱脂乳粉、4份益生菌菌粉和5份木糖醇粉碎后过60目筛，得到奶片粗混合物；
4).将2份羧甲基纤维素钠和1.5份硬脂酸镁与奶片粗混合物混匀，然后压片，得到益生菌奶片。
实施例3
一种预防龋齿的益生菌奶片，由以下重量份数的原料制成：53份全脂乳粉、34份脱脂乳粉、4份益生菌菌粉、5份木糖醇粉、2份羧甲基纤维素钠和1.5份硬脂酸镁。所述益生菌菌粉包含唾液链球菌2份、鼠李糖乳杆菌2份。
上述预防龋齿的益生菌奶片的制备方法，包括以下步骤：
1).将益生菌接种到含有1.5％蛋白胨、1.5％酵母浸粉、0.8％碳酸钙的胡萝卜培养基中，37℃条件下培养18h，然后将增殖培养的菌液在5℃下5000r/min离心10min，除去上清液，并用等体积生理盐水洗涤菌体至菌体洁白；
2).用含有12％脱脂乳粉、2％木糖醇、2.6％乙酸钠和7.8％谷氨酸钠的冻干保护剂重悬收集的益生菌菌体，在-20℃预冻2h后放入-80℃冷冻24h，菌体置于冻干机中-55℃，5Pa真空冷冻干燥13h；收集冻干粉置于-70℃冰箱备用；
3).将53份全脂乳粉、34份脱脂乳粉、4份益生菌菌粉和5份木糖醇粉碎后过60目筛，得到奶片粗混合物；
4).将2份羧甲基纤维素钠和1.5份硬脂酸镁与奶片粗混合物混匀，然后压片，得到益生菌奶片。
实施例4
一种预防龋齿的益生菌奶片，由以下重量份数的原料制成：53份全脂乳粉、34份脱脂乳粉、4份益生菌菌粉、5份木糖醇粉、2份羧甲基纤维素钠和1.5份硬脂酸镁。所述益生菌菌粉包含唾液链球菌3份、鼠李糖乳杆菌1份。
上述预防龋齿的益生菌奶片的制备方法，包括以下步骤：
1).将益生菌接种到含有1.5％蛋白胨、1.5％酵母浸粉、0.8％碳酸钙的胡萝卜培养基中，37℃条件下培养18h，然后将增殖培养的菌液在5℃下5000r/min离心10min，除去上清液，并用等体积生理盐水洗涤菌体至菌体洁白；
2).用含有12％脱脂乳粉、2％木糖醇、2.6％乙酸钠和7.8％谷氨酸钠的冻干保护剂重悬收集的益生菌菌体，在-20℃预冻2h后放入-80℃冷冻24h，菌体置于冻干机中-55℃，5Pa真空冷冻干燥13h；收集冻干粉置于-70℃冰箱备用；
3).将53份全脂乳粉、34份脱脂乳粉、4份益生菌菌粉和5份木糖醇粉碎后过60目筛，得到奶片粗混合物；
4).将2份羧甲基纤维素钠和1.5份硬脂酸镁与奶片粗混合物混匀，然后压片，得到益生菌奶片。
实施例5
一种预防龋齿的益生菌奶片，由以下重量份数的原料制成：53份全脂乳粉、34份脱脂乳粉、4份益生菌菌粉、5份木糖醇粉、2份羧甲基纤维素钠和1.5份硬脂酸镁。所述益生菌菌粉包含唾液链球菌3份、鼠李糖乳杆菌1份。
上述预防龋齿的益生菌奶片的制备方法，包括以下步骤：
1).将益生菌接种到含有1.5％蛋白胨、1.5％酵母浸粉、0.8％碳酸钙的胡萝卜-平菇(胡萝卜占70％，平菇占30％)培养基中，37℃条件下培养18h，然后将增殖培养的菌液在5℃下5000r/min离心10min，除去上清液，并用等体积生理盐水洗涤菌体至菌体洁白；
2).用含有12％脱脂乳粉、2％木糖醇、2.6％乙酸钠和7.8％谷氨酸钠的冻干保护剂重悬收集的益生菌菌体，在-20℃预冻2h后放入-80℃冷冻24h，菌体置于冻干机中-55℃，5Pa真空冷冻干燥13h；收集冻干粉置于-70℃冰箱备用；
3).将53份全脂乳粉、34份脱脂乳粉、4份益生菌菌粉和5份木糖醇粉碎后过60目筛，得到奶片粗混合物；
4).将2份羧甲基纤维素钠和1.5份硬脂酸镁与奶片粗混合物混匀，然后压片，得到益生菌奶片。
实施例6
评价本发明益生菌奶片抑制龋齿生成的实验
变异链球菌的致病作用依赖于其对光滑牙面的黏附能力，一般来说，这种黏附作用主要通过两个阶段实现：首先是变异链球菌通过氢键和疏水作用等蔗糖非依赖性黏附实现初始黏附；然后是经蔗糖依赖性黏附，由于水溶性和水不溶性胞外多糖，使变异链球菌黏附到牙面上，成为变异链球菌及其他细菌附着的介质，产生生物膜，导致牙菌斑的形成，牙菌斑中的其他细菌发酵产酸后引发龋齿。
(1)对变异链球菌产胞外多糖的影响
等体积混合含1％蔗糖的BHI液体培养基与奶片稀释液，再将活化好的变异链球菌ATCC 25175以1％接种量接种于已混合好的培养基中，37℃下培养12h，对照组则是不含奶片稀释液的培养基。
具体操作步骤如下：
1)菌液4℃5000r/min离心10min，弃上清。
2)沉淀用5mL蒸馏水洗涤2次，4℃5000r/min离心10min，上清液合并，作为样1，用于检测水溶性多糖。
3)水洗后的细菌加0.4mol/L NaOH 5mL洗涤三次，4℃5000r/min离心10min合并上清液，作为样2，用于检测水不溶性多糖。
胞外多糖的测定采用苯酚-硫酸法，先用葡萄糖做标准曲线，进而从标准曲线得到胞外多糖的含量。
(2)对变异链球菌产生物膜的影响
将变异链球菌ATCC 25175与奶片稀释液各取2.5mL于灭菌试管中，再加含有0.25％蔗糖的BHI液体培养基共同培养，对照组将无菌生理盐水替代奶片稀释液。将试管放置37℃培养箱培养16h，磷酸盐缓冲液洗涤试管3次以上，尽可能去除浮游微生物，倾斜放置至自然干燥，然后每管加入5mL 0.0005％的结晶紫溶液，室温下染色使结合在底部的生物膜着色，20min后将染色液吸出并用磷酸盐缓冲液清洗至缓冲液不显染液颜色；37℃干燥1h后，加入10mL95％的乙醇复洗，使染料充分释放，测其在600nm处的吸光度。
实施例1-5制备成的奶片按照上述方法测定对变异链球菌产胞外多糖及生物膜形成的影响，计算结果如表1所示
以上公开的仅为本发明的具体实施例，但是，本发明并非局限于此，任何本领域的技术人员能思之的变化都应落入本发明的保护范围。
Claims (5)
1.一种预防龋齿的益生菌奶片，其特征在于，由以下重量份数的原料制成：50-55份全脂乳粉、33-37份脱脂乳粉、3-4份益生菌菌粉、4-5份木糖醇粉、2-3份羧甲基纤维素钠和1.5-2份硬脂酸镁。
2.根据权利要求1所述一种预防龋齿的益生菌奶片,其特征在于，所述益生菌菌粉包含唾液链球菌和/或鼠李糖乳杆菌。
3.权利要求1所述预防龋齿的益生菌奶片的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1).将益生菌接种到培养基中，37℃条件下培养16h-24h，然后将增殖培养的菌液在3-6℃下5000r/min离心10min，除去上清液，并用等体积生理盐水洗涤菌体至菌体洁白；
2).用冻干保护剂重悬收集的益生菌菌体，在-20℃预冻2h后放入-80℃冷冻24h，菌体置于冻干机中-55℃，5Pa真空冷冻干燥13h；收集冻干粉置于-70℃冰箱备用；
3).将50-55份全脂乳粉、33-37份脱脂乳粉、3-4份益生菌菌粉和4-5份木糖醇粉碎后过60目筛，得到奶片粗混合物；
4).将2-3份羧甲基纤维素钠和1.5-2份硬脂酸镁与奶片粗混合物混匀，然后压片，得到益生菌奶片。
4.根据权利要求3所述预防龋齿的益生菌奶片的制备方法，其特征在于，步骤1)中所述培养基为含有1-2％蛋白胨、1-2％酵母浸粉、0.5-1％碳酸钙的胡萝卜培养基。
5.根据权利要求3所述预防龋齿的益生菌奶片的制备方法，其特征在于，步骤2)中所述冻干保护剂包含10-14％脱脂乳粉、1-2％木糖醇、2.5-3％乙酸钠和7.5-8％谷氨酸钠。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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Application publication date: 20190813 |