CN110073896A - 利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种及栽培方法 - Google Patents
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Abstract
利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种及栽培方法，利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种为糙皮侧耳HS‑PG05，保藏编号为：CGMCC No.10005；一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种的栽培方法是以糙皮侧耳HS‑PG05为母种进行培育、发菌、出菇管理及采收的：利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种生产工艺包括子实体选择、母种培养、母种筛选、原种转接、原种筛选、栽培种接种、栽培种培养；利用金针菇菌糠生产糙皮的栽培方法工艺包括栽培料搅拌、装袋、灭菌、冷却、栽培料接种、发菌管理、出菇管理、采收管理。该发明生产的糙皮侧耳营养丰富，味道鲜美，具有追风散寒，舒筋活络、减少胆固醇、降低高血压功效。
Description
技术领域
本发明涉及食用菌工厂化生产的工艺技术领域中的一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种及栽培方法，特别涉及食用菌的工厂化栽培菌种制备及其栽培方法。
背景技术
糙皮侧耳（Pleurotus ostreatus；又名平菇、粗皮侧耳、青蘑、侧耳），是一种秋、冬、春广泛发生于阔叶树枯干上的食用菌，为世界上主要人工栽培食用菌之一，属白蘑科侧耳属。
生存环境:春、秋季生于各种阔叶树的枯干、倒木或伐桩上。
形态特征:子实体覆瓦状丛生。大型，菌盖初扁半球形，后呈扇形、肾形、浅喇叭形，直径5-21厘米；初期蓝黑色，其后颜色渐淡，成熟时呈灰白色至白色；肉质，有后沿，表面而光滑，下凹的部分有时有白色绒毛。菌肉肥厚，白色。菌褶白色，稍密集至稍稀疏，长短不一，延生，在菌柄上交织成网络。菌柄侧生；短或无，内实，白色，长1-3厘米，粗1-2厘米，基部常有白色绒毛。孢子印白色，在显微镜下，孢子无色，光滑，近圆柱形，3-l0微米×2.5-5.5微米。
功能与作用:可食用。子实体肥嫩，味道鲜美，是著名的食用菌之一。除食用外还可入药。有追风散寒，舒筋活络、减少胆固醇、降低高血压、预防动脉硬化、治疗植物性神经系统机能紊乱和抗肿瘤功效。营养价值每100g干菇含粗蛋白19.5g(含纯蛋白11克)、粗脂肪3.8g、碳水化合物50.2g，粗纤维6.2g，以及钙、磷、铁等矿质元素和维生素B1、维生素B2、维生素C、维生素D等。
糙皮侧耳（Pleurotus ostreatus）是我国栽培量最大、产量最高、分布最广的食用菌。随着其生产规模逐年扩大，培养料日趋紧张。近年来，主要栽培原料棉籽壳、木屑价格不断上涨，制约了产业的发展。有关栽培料研究比较多，但未发现对常用原料比较研究的报道。研究棉籽壳、玉米芯、大豆秸、棉柴屑、金针菇菌糠、废棉、木屑7种常见培养料对糙皮侧耳熟料栽培。
专利号201510525011.6公开了一种平菇室内袋装栽培方法，该栽培方法存在的问题是：采用固体菌种，发菌速度慢，20-30天满袋；发菌不整齐，出菇参差不齐。
现有技术中糙皮侧耳栽培原料为棉籽壳、玉米芯、大豆秸、棉柴屑、金针菇菌糠、废棉、木屑，但是在供试原料、栽培方法、培养料含水量及pH值测定、糙皮侧耳熟料栽培期间培养料含水量变化、糙皮侧耳熟料栽培期间培养料pH变化等方面的配制及运用上还存在一些问题。采用固体菌种，发菌速度慢，发菌不整齐，出菇参差不齐。因此，研制开发一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种及栽培方法一直是急待解决的课题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种及栽培方法，实现糙皮侧耳液体菌种的工厂化生产，经人工培育后，利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳的栽培技术。
本发明的糙皮侧耳（Pleurotus ostreatus）HS-PG05，已经于2014年11月21日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC,地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。保藏编号为：CGMCC No.10005。
本发明的糙皮侧耳（Pleurotus ostreatus）HS-PG05，经中科院微生物研究所的培养特征、显微特征以及rRNA基因序列等实验数据综合分析，确认HS- PG05的鉴定结果为Pleurotus ostreatus糙皮侧耳。
本发明的目的是这样实现的：一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种，所述的一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种为糙皮侧耳HS-PG05，保藏编号为：CGMCC No.10005；
所述的一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种rRNA基因序列是：
5’-GAGGTCAATTGTCAAATTGTCCTTGCGGACGATTAGAGAGCTGGACTCTATTCATGCGTGCTATTGATGAGTGATAATTATCACATCATGCGCAGAGGCAATGAGAAGTCCTGCTAATGCATTTAAGAGGAGCCGACCTGTCAAGGCCAGCAGCCCCCAACAATCCAAACATCACAATTGGAAAGAAACCAAAGTGAGTTTGAGAATTTAATGACACTCAAACAGGCATGCCCCTCGGAATACCAAGGGGCGCAAGGTGCGTTCAAAGATTCGATGATTCACTGAATTCTGCAATTCACATTACTTATCGCATTTCGCTGCGTTCTTCATCGATGCGAGAGCCAAGAGATCCGTTGTTGAAAGTTGTATTATGGTTTAAAGGCACAAGGCCCATTAAATGACATTCGTAGACATACATTTGGGGTGTGTAAGTAAATAGACTGCGTAGTCACACCGAGACGTTTAAATCCCAGCAACCAAGTCTGACGACTTGAGAGACGACTTCACAGATCTATCAAAAGTTCACAGGTGGTTGAAAGACTAGTGAAGCGTGCACATGCCCCTAGAGGCCAGCAACAACTCCATAGTGAATTCATTAATGATCCTTCCGCAGGTTCACCTACGGAAACCTTGTT-3’；
所述的一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种的栽培方法是以糙皮侧耳HS-PG05为母种进行培育、发菌、出菇管理及采收的：
（1）利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种生产工艺流程：
①子实体选择：清晨在未浇水之前，采摘8分成熟的糙皮侧耳子实体，无病害感染、虫害咬食的健康糙皮侧耳作为种菇，菇形与其母本的外观形态相似度越高越好；采菇后，装入灭菌后的样本袋中，做好标签；
②母种培养：母种培养基:PDA按比例加水，加热溶解后，装至试管1/3处，塞好棉塞，放入高压灭菌锅，121℃灭菌20分钟，摆成斜面，冷却；在超净台下对子实体进行消毒，将糙皮侧耳菌帽与菌柄处掰断，将菇帽部分放到一边，只用菌柄部分，取0.5cm见方的一块糙皮侧耳组织，接入试管斜面培养基中部，塞好棉塞；24-26℃，培养8-10天；
③母种筛选：注意每天观察长势，杂菌感染严重的及时挑出；
④原种转接：原种培养基配制，1000ml三角瓶，装液体培养基600ml，塞好棉塞；每升培养基中加白糖20 g，豆粕粉10g，玉米粉4g，酵母粉2g，硫酸镁1g，磷酸二氢钾1g；放入高压灭菌锅中，121℃灭菌30分钟，冷却后，接种1cm见方斜面菌种5-6块，24-26℃ 静置培养48h,26℃摇床160-180r/min震荡培养5天；
⑤原种筛选：摇瓶摇动时有菌丝挂壁，培养液浑浊度80-90%；
⑥栽培种接种：栽培种培养液配制，用700L发酵罐，装栽培种培养液500L；每升栽培种培养液加入白糖25g，豆粕粉4g，玉米粉3g，硫酸镁1g，磷酸二氢钾1g，消泡剂0.3 ml，自然pH值；推入高压灭菌器，121℃灭菌120分钟，通气水淋至26-28℃，无菌操作，接入原种菌种5-6L；
⑦栽培种培养：温度26-28℃，通气量为3L/min，培养6-7天；
（2）利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳的栽培方法工艺流程：
①栽培料搅拌、装袋、灭菌、冷却：栽培料搅拌，按配方配制栽培料，进行搅拌；装袋，冬天用23cm×47cm；夏天22cm×45cm,每袋装量3Kg；灭菌，常压灭菌，100℃保持36h；高压灭菌，121℃保持3h；冷却，冷却至26-28℃；
②栽培料接种：每袋接种35ml；
③发菌管理：接种后，将料袋转移至培养室，进行黑暗培养，适当通入新风，培养18-21天，温度26-28℃，湿度70-85%，二氧化碳浓度2500-4500ppm；菌丝长速与长势检测：菌丝日均生长量1.0-1.2cm,菌丝粗壮浓密；菌丝满袋18-21天；
④出菇管理：菌丝长满栽培料后，相对湿度调至80-90%；开袋，出菇；达到生理成熟的菌丝体扭结成很多灰白色小米粒状的菌蕾堆；这时可向空间喷雾，将室内空气相对湿度调至80-85% ，室内温度可保持在15-18℃；菌蕾堆形成后生长迅速,2-3天菌柄延伸，顶端有灰黑色或褐色扁圆形的原始菌盖形成时，可向料面喷少量水，保持室内空气相对湿度在85-90%；温度保持在15-18℃；平均每袋出菇1150g；
⑤采收管理：当糙皮侧耳菌盖基本展开，颜色由深灰色变为淡灰色或灰白色，孢子即将弹射时，是糙皮侧耳的最适收获期；这时采收的糙皮侧耳，菇体肥厚，产量高且味道美；采收方法，要用一手按住培养料，另一手握住菌柄，轻轻旋转扭下；也可用刀子在菌柄基部紧贴料面处割下；采大朵留小朵，一般情况下，播种一次可采收3-4茬菇；每茬采收后，都要将床面残留的死菇，菌柄清理干净，以防止下茬产生烂菇；停止喷水4-5天，然后再少喷水，保持料面潮湿；经过9-11天，料面再度长出菌蕾；仍按第一茬菇的管理方法管理；生物转化率110%；
所述的一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种的配方由以下各组分重量配比制成栽培料：金针菇新鲜菌糠35%,花生壳7-9%,玉米秸秆7-9%,白灰1%,水48%。
本发明的有益效果：糙皮侧耳（学名：Pleurotus ostreatus）HS-PG05营养丰富，可食用，子实体肥嫩，味道鲜美，是著名的食用菌之一，除食用外还可入药，有追风散寒，舒筋活络、减少胆固醇、降低高血压、预防动脉硬化、治疗植物性神经系统机能紊乱和抗肿瘤功效；含纯蛋白、粗脂肪、碳水化合物，粗纤维，以及钙、磷、铁等矿质元素和维生素B1、维生素B2、维生素C、维生素D。
附图说明
下面结合附图及实施例对本发明进行详细说明。
图1是本发明的利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种生产工艺流程图。
图2是本发明的利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳的栽培方法工艺流程图。
图3是本发明在显微镜下平菇菌丝情况图。
图4是本发明的平板菌种1培养图。
图5是本发明的平板菌种2培养图。
图6是本发明的三角瓶菌种培养图。
图7是本发明的发酵罐菌种1培养图。
图8是本发明的发酵罐菌种2培养图。
图9是本发明的袋栽发菌1情况图。
图10是本发明的袋栽发菌2情况图。
图11是本发明的开袋前培养图。
图12是本发明的开袋后培养图。。
图13是本发明的袋栽出菇1情况图。
图14是本发明的袋栽出菇2情况图。
图15是本发明的袋栽出菇3情况图。
图16是本发明的采收情况图。
具体实施方式
本发明的糙皮侧耳（Pleurotus ostreatus）HS-PG05，已经于2014年11月21日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC,地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。保藏编号为：CGMCC No.10005。
本发明的糙皮侧耳（Pleurotus ostreatus）HS-PG05，经中科院微生物研究所的培养特征、显微特征以及rRNA基因序列等实验数据综合分析，确认HS- PG05的鉴定结果为Pleurotus ostreatus糙皮侧耳。
一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种，所述的一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种为糙皮侧耳HS-PG05，保藏编号为：CGMCC No.10005。
所述的一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种rRNA基因序列是：
5’-GAGGTCAATTGTCAAATTGTCCTTGCGGACGATTAGAGAGCTGGACTCTATTCATGCGTGCTATTGATGAGTGATAATTATCACATCATGCGCAGAGGCAATGAGAAGTCCTGCTAATGCATTTAAGAGGAGCCGACCTGTCAAGGCCAGCAGCCCCCAACAATCCAAACATCACAATTGGAAAGAAACCAAAGTGAGTTTGAGAATTTAATGACACTCAAACAGGCATGCCCCTCGGAATACCAAGGGGCGCAAGGTGCGTTCAAAGATTCGATGATTCACTGAATTCTGCAATTCACATTACTTATCGCATTTCGCTGCGTTCTTCATCGATGCGAGAGCCAAGAGATCCGTTGTTGAAAGTTGTATTATGGTTTAAAGGCACAAGGCCCATTAAATGACATTCGTAGACATACATTTGGGGTGTGTAAGTAAATAGACTGCGTAGTCACACCGAGACGTTTAAATCCCAGCAACCAAGTCTGACGACTTGAGAGACGACTTCACAGATCTATCAAAAGTTCACAGGTGGTTGAAAGACTAGTGAAGCGTGCACATGCCCCTAGAGGCCAGCAACAACTCCATAGTGAATTCATTAATGATCCTTCCGCAGGTTCACCTACGGAAACCTTGTT-3’。
实施例一
所述的一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种的栽培方法是以糙皮侧耳HS-PG05为母种进行培育、发菌、出菇管理及采收的：
（1）利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种生产工艺流程（详见附图1）：
①子实体选择：清晨在未浇水之前，采摘8分成熟的糙皮侧耳子实体，无病害感染、虫害咬食的健康糙皮侧耳作为种菇，菇形与其母本的外观形态相似度越高越好；采菇后，装入灭菌后的样本袋中，做好标签；
②母种培养：母种培养基:PDA按比例加水，加热溶解后，装至试管1/3处，塞好棉塞，放入高压灭菌锅，121℃灭菌20分钟，摆成斜面，冷却；在超净台下对子实体进行消毒，将糙皮侧耳菌帽与菌柄处掰断，将菇帽部分放到一边，只用菌柄部分，取0.5cm见方的一块糙皮侧耳组织，接入试管斜面培养基中部，塞好棉塞；24℃，培养8天；
③母种筛选：注意每天观察长势，杂菌感染严重的及时挑出；
④原种转接：原种培养基配制，1000ml三角瓶，装液体培养基600ml，塞好棉塞；每升培养基中加白糖20 g，豆粕粉10g，玉米粉4g，酵母粉2g，硫酸镁1g，磷酸二氢钾1g；放入高压灭菌锅中，121℃灭菌30分钟，冷却后，接种1cm见方斜面菌种5块，24℃ 静置培养48h, 26℃摇床160r/min震荡培养5天；
⑤原种筛选：摇瓶摇动时有菌丝挂壁，培养液浑浊度80%；
⑥栽培种接种：栽培种培养液配制，用700L发酵罐，装栽培种培养液500L；每升栽培种培养液加入白糖25g，豆粕粉4g，玉米粉3g，硫酸镁1g，磷酸二氢钾1g，消泡剂0.3 ml，自然pH值；推入高压灭菌器，121℃灭菌120分钟，通气水淋至26℃，无菌操作，接入原种菌种5L；
⑦栽培种培养：温度26℃，通气量为3L/ min，培养6天；
（2）利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳的栽培方法工艺流程（详见附图2）：
①栽培料搅拌、装袋、灭菌、冷却：栽培料搅拌，按配方配制栽培料，金针菇新鲜菌糠350克（金针菇干菌糠175克）,花生壳90克,玉米秸秆70克,白灰10克,水480克（水655克）；进行搅拌；装袋，冬天用23cm×47cm；夏天22cm×45cm,每袋装量3Kg；灭菌，常压灭菌，100℃保持36h；高压灭菌，121℃保持3h；冷却，冷却至26℃；
②栽培料接种：每袋接种35ml；
③发菌管理：接种后，将料袋转移至培养室，进行黑暗培养，适当通入新风，培养18天，温度26℃，湿度70%，二氧化碳浓度2500ppm；菌丝长速与长势检测：菌丝日均生长量1.0cm,菌丝粗壮浓密；菌丝满袋18天；
④出菇管理：菌丝长满栽培料后，相对湿度调至80%；开袋，出菇；达到生理成熟的菌丝体扭结成很多灰白色小米粒状的菌蕾堆；这时可向空间喷雾，将室内空气相对湿度调至80%，室内温度可保持在15℃；菌蕾堆形成后生长迅速,2天菌柄延伸，顶端有灰黑色或褐色扁圆形的原始菌盖形成时，可向料面 喷少量水，保持室内空气相对湿度在85%；温度保持在15℃；平均每袋出菇1150g；
⑤采收管理：当糙皮侧耳菌盖基本展开，颜色由深灰色变为淡灰色或灰白色，孢子即将弹射时，是糙皮侧耳的最适收获期；这时采收的糙皮侧耳， 菇体肥厚，产量高且味道美；采收方法，要用一手按住培养料，另一手握住菌柄，轻轻旋转扭下；也可用刀子在菌柄基部 紧贴料面处割下；采大朵留小朵，一般情况下，播种一次可采收3-4茬菇；每茬采收后，都要将床面残留的死菇，菌柄清理干净，以防止下茬产生烂菇；停止喷水4天，然后再少喷水，保持料面潮湿；经过9天，料面再度长出菌蕾；仍按第一茬菇的管理方法管理；生物转化率110%。
实施例二
所述的一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种的栽培方法是以糙皮侧耳HS-PG05为母种进行培育、发菌、出菇管理及采收的：
（1）利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种生产工艺流程（详见附图1）：
①子实体选择：清晨在未浇水之前，采摘8分成熟的糙皮侧耳子实体，无病害感染、虫害咬食的健康糙皮侧耳作为种菇，菇形与其母本的外观形态相似度越高越好；采菇后，装入灭菌后的样本袋中，做好标签；
②母种培养：母种培养基:PDA按比例加水，加热溶解后，装至试管1/3处，塞好棉塞，放入高压灭菌锅，121℃灭菌20分钟，摆成斜面，冷却；在超净台下对子实体进行消毒，将糙皮侧耳菌帽与菌柄处掰断，将菇帽部分放到一边，只用菌柄部分，取0.5cm见方的一块糙皮侧耳组织，接入试管斜面培养基中部，塞好棉塞；26℃，培养10天；
③母种筛选：注意每天观察长势，杂菌感染严重的及时挑出；
④原种转接：原种培养基配制，1000ml三角瓶，装液体培养基600ml，塞好棉塞；每升培养基中加白糖20 g，豆粕粉10g，玉米粉4g，酵母粉2g，硫酸镁1g，磷酸二氢钾1g；放入高压灭菌锅中，121℃灭菌30分钟，冷却后，接种1cm见方斜面菌种5-6块，26℃ 静置培养48h, 26℃摇床180r/min震荡培养5天；
⑤原种筛选：摇瓶摇动时有菌丝挂壁，培养液浑浊度90%；
⑥栽培种接种：栽培种培养液配制，用700L发酵罐，装栽培种培养液500L；每升栽培种培养液加入白糖25g，豆粕粉4g，玉米粉3g，硫酸镁1g，磷酸二氢钾1g，消泡剂0.3 ml，自然pH值；推入高压灭菌器，121℃灭菌120分钟，通气水淋至28℃，无菌操作，接入原种菌种5-6L；
⑦栽培种培养：温度28℃，通气量为3L/ min，培养7天；
（2）利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳的栽培方法工艺流程（详见附图2）：
①栽培料搅拌、装袋、灭菌、冷却：栽培料搅拌，按配方配制栽培料，金针菇新鲜菌糠350克（金针菇干菌糠175克）,花生壳70克,玉米秸秆90克,白灰10克,水480克（水655克）；进行搅拌；装袋，冬天用23cm×47cm；夏天22cm×45cm,每袋装量3Kg；灭菌，常压灭菌，100℃保持36h；高压灭菌，121℃保持3h；冷却，冷却至28℃；
②栽培料接种：每袋接种35ml；
③发菌管理：接种后，将料袋转移至培养室，进行黑暗培养，适当通入新风，培养21天，温度28℃，湿度85%，二氧化碳浓度4500ppm；菌丝长速与长势检测：菌丝日均生长量1.2cm,菌丝粗壮浓密；菌丝满袋21天；
④出菇管理：菌丝长满栽培料后，相对湿度调至90%；开袋，出菇；达到生理成熟的菌丝体扭结成很多灰白色小米粒状的菌蕾堆。这时可向空间喷雾，将室内空气相对湿度调至85%，室内温度可保持在18℃；菌蕾堆形成后生长迅速,2-3天菌柄延伸，顶端有灰黑色或褐色扁圆形的原始菌盖形成时，可向料面 喷少量水，保持室内空气相对湿度在90%。温度保持在18℃；平均每袋出菇1150g；
⑤采收管理：当糙皮侧耳菌盖基本展开，颜色由深灰色变为淡灰色或灰白色，孢子即将弹射时，是糙皮侧耳的最适收获期；这时采收的糙皮侧耳，菇体肥厚，产量高且味道美；采收方法，要用一手按住培养料，另一手握住菌柄，轻轻旋转扭下；也可用刀子在菌柄基部 紧贴料面处割下；采大朵留小朵，一般情况下，播种一次可采收3-4茬菇；每茬采收后，都要将床面残留的死菇，菌柄清理干净，以防止下茬产生烂菇；停止喷水5天，然后再少喷水，保持料面潮湿；经过11天，料面再度长出菌蕾；仍按第一茬菇的管理方法管理；生物转化率110%。
序列表
<110> 沈阳恒生生物科技发展有限公司 沈阳恒生农业发展有限公司
<120> 利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种及栽培方法
<160> 5
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 17
<212> DNA
<213> 糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)
<400> 1
gaggtcaatt gtcaaat 17
<210> 2
<211> 191
<212> DNA
<213> 糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)
<400> 2
tgtccttgcg gacgattaga gagctggact ctattcatgc gtgctattga tgagtgataa 60
ttatcacatc atgcgcagag gcaatgagaa gtcctgctaa tgcatttaag aggagccgac 120
ctgtcaaggc cagcagcccc caacaatcca aacatcacaa ttggaaagaa accaaagtga 180
gtttgagaat t 191
<210> 3
<211> 158
<212> DNA
<213> 糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)
<400> 3
taatgacact caaacaggca tgcccctcgg aataccaagg ggcgcaaggt gcgttcaaag 60
attcgatgat tcactgaatt ctgcaattca cattacttat cgcatttcgc tgcgttcttc 120
atcgatgcga gagccaagag atccgttgtt gaaagttg 158
<210> 4
<211> 230
<212> DNA
<213> 糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)
<400> 4
tattatggtt taaaggcaca aggcccatta aatgacattc gtagacatac atttggggtg 60
tgtaagtaaa tagactgcgt agtcacaccg agacgtttaa atcccagcaa ccaagtctga 120
cgacttgaga gacgacttca cagatctatc aaaagttcac aggtggttga aagactagtg 180
aagcgtgcac atgcccctag aggccagcaa caactccata gtgaattcat 230
<210> 5
<211> 39
<212> DNA
<213> 糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)
<400> 5
taatgatcct tccgcaggtt cacctacgga aaccttgtt 39
Claims (4)
1.一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种，其特征在于：所述的一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种为糙皮侧耳HS-PG05，保藏编号为：CGMCCNo.10005。
2.一种如权利要求1所述的利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种，其特征在于：所述的一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种rRNA基因序列是：
5’-GAGGTCAATTGTCAAATTGTCCTTGCGGACGATTAGAGAGCTGGACTCTATTCATGCGTGCTATTGATGAGTGATAATTATCACATCATGCGCAGAGGCAATGAGAAGTCCTGCTAATGCATTTAAGAGGAGCCGACCTGTCAAGGCCAGCAGCCCCCAACAATCCAAACATCACAATTGGAAAGAAACCAAAGTGAGTTTGAGAATTTAATGACACTCAAACAGGCATGCCCCTCGGAATACCAAGGGGCGCAAGGTGCGTTCAAAGATTCGATGATTCACTGAATTCTGCAATTCACATTACTTATCGCATTTCGCTGCGTTCTTCATCGATGCGAGAGCCAAGAGATCCGTTGTTGAAAGTTGTATTATGGTTTAAAGGCACAAGGCCCATTAAATGACATTCGTAGACATACATTTGGGGTGTGTAAGTAAATAGACTGCGTAGTCACACCGAGACGTTTAAATCCCAGCAACCAAGTCTGACGACTTGAGAGACGACTTCACAGATCTATCAAAAGTTCACAGGTGGTTGAAAGACTAGTGAAGCGTGCACATGCCCCTAGAGGCCAGCAACAACTCCATAGTGAATTCATTAATGATCCTTCCGCAGGTTCACCTACGGAAACCTTGTT-3’。
3.一种如权利要求1或2所述的利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种的栽培方法，其特征在于：所述的一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种的栽培方法是以糙皮侧耳 HS-PG05为母种进行培育、发菌、出菇管理及采收的：
（1）利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种生产工艺流程：
①子实体选择：清晨在未浇水之前，采摘8分成熟的糙皮侧耳子实体，无病害感染、虫害咬食的健康糙皮侧耳作为种菇，菇形与其母本的外观形态相似度越高越好；采菇后，装入灭菌后的样本袋中，做好标签；
②母种培养：母种培养基:PDA按比例加水，加热溶解后，装至试管1/3处，塞好棉塞，放入高压灭菌锅，121℃灭菌20分钟，摆成斜面，冷却；在超净台下对子实体进行消毒，将糙皮侧耳菌帽与菌柄处掰断，将菇帽部分放到一边，只用菌柄部分，取0.5cm见方的一块糙皮侧耳组织，接入试管斜面培养基中部，塞好棉塞；24-26℃，培养8-10天；
③母种筛选：注意每天观察长势，杂菌感染严重的及时挑出；
④原种转接：原种培养基配制，1000ml三角瓶，装液体培养基600ml，塞好棉塞；每升培养基中加白糖20 g，豆粕粉10g，玉米粉4g，酵母粉2g，硫酸镁1g，磷酸二氢钾1g；放入高压灭菌锅中，121℃灭菌30分钟，冷却后，接种1cm见方斜面菌种5-6块，24-26℃ 静置培养48h,26℃摇床160-180r/min震荡培养5天；
⑤原种筛选：摇瓶摇动时有菌丝挂壁，培养液浑浊度80-90%；
⑥栽培种接种：栽培种培养液配制，用700L发酵罐，装栽培种培养液500L；每升栽培种培养液加入白糖25g，豆粕粉4g，玉米粉3g，硫酸镁1g，磷酸二氢钾1g，消泡剂0.3 ml，自然pH值；推入高压灭菌器，121℃灭菌120分钟，通气水淋至26-28℃，无菌操作，接入原种菌种5-6L；
⑦栽培种培养：温度26-28℃，通气量为3L/min，培养6-7天；
（2）利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳的栽培方法工艺流程：
①栽培料搅拌、装袋、灭菌、冷却：栽培料搅拌，按配方配制栽培料，进行搅拌；装袋，冬天用23cm×47cm；夏天22cm×45cm,每袋装量3Kg；灭菌，常压灭菌，100℃保持36h；高压灭菌，121℃保持3h；冷却，冷却至26-28℃；
②栽培料接种：每袋接种35ml；
③发菌管理：接种后，将料袋转移至培养室，进行黑暗培养，适当通入新风，培养18-21天，温度26-28℃，湿度70-85%，二氧化碳浓度2500-4500ppm；菌丝长速与长势检测：菌丝日均生长量1.0-1.2cm,菌丝粗壮浓密；菌丝满袋18-21天；
④出菇管理：菌丝长满栽培料后，相对湿度调至80-90%；开袋，出菇；达到生理成熟的菌丝体扭结成很多灰白色小米粒状的菌蕾堆；这时可向空间喷雾，将室内空气相对湿度调至80-85% ，室内温度可保持在15-18℃；菌蕾堆形成后生长迅速,2-3天菌柄延伸，顶端有灰黑色或褐色扁圆形的原始菌盖形成时，可向料面喷少量水，保持室内空气相对湿度在85-90%；温度保持在15-18℃；平均每袋出菇1150g；
⑤采收管理：当糙皮侧耳菌盖基本展开，颜色由深灰色变为淡灰色或灰白色，孢子即将弹射时，是糙皮侧耳的最适收获期；这时采收的糙皮侧耳，菇体肥厚，产量高且味道美；采收方法，要用一手按住培养料，另一手握住菌柄，轻轻旋转扭下；也可用刀子在菌柄基部紧贴料面处割下；采大朵留小朵，一般情况下，播种一次可采收3-4茬菇；每茬采收后，都要将床面残留的死菇，菌柄清理干净，以防止下茬产生烂菇；停止喷水4-5天，然后再少喷水，保持料面潮湿；经过9-11天，料面再度长出菌蕾；仍按第一茬菇的管理方法管理；生物转化率110%。
4.一种如权利要求1或2或3所述的一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种的栽培方法，其特征在于：所述的一种利用金针菇菌糠生产糙皮侧耳工厂化栽培菌种的配方由以下各组分重量配比制成栽培料：金针菇新鲜菌糠35%,花生壳7-9%,玉米秸秆7-9%,白灰1%,水48%。
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| CN107034147A (zh) * | 2017-06-08 | 2017-08-11 | 河南省农业科学院植物营养与资源环境研究所 | 用于工厂化瓶栽平菇品种的选育方法及栽培方法 |
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