CN110055196A - 一种处理土壤修复工艺废水的微生物菌剂的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种处理土壤修复工艺废水的微生物菌剂的制备方法,具体步骤如下:1)明胶加入到无菌水中,搅拌溶解后经均质处理和高温搅拌处理制得改性明胶;2)生物菌包衣液添加剂与改性明胶混合后加入到无菌水中,再加入环氧大豆油,制得生物菌包衣液;3)将剩余原料加入到生物菌包衣液中,加热搅拌后制成混合培养液;4)将微生物菌经振荡培养获得活化菌株培养液;5)活化菌株培养液离心静置后进行二次培养,然后用无菌水稀释后即可制得。本发明微生物菌剂具有反应时间短、便于操作等优点,能够持久有效的去除废水中的有机污染物以及重金属,处理废水时具有较好的生物活性并能够生长繁殖,实现微生物的重复利用。

Description

一种处理土壤修复工艺废水的微生物菌剂的制备方法
技术领域
本发明属于土壤修复技术领域,具体涉及一种处理土壤修复工艺废水的微生物菌剂的制备方法。
背景技术
化工制造、石油精炼、金属加工、汽车制造、防治印刷、制浆造纸、电镀等工业普遍存在由无机污染物和有机污染物等造成的土壤污染。农业用地多由于工业废水污染以及大量和不当施用农药和化肥而引起土壤不同程度的重金属和农药污染。这些污染物对土壤及地下水等环境和周围工作人员以及污染场地附近居民的健康会造成严重的危害。
目前,在对污染的深层土尤其是地下水位以下的土壤进行修复时。通常会使用表面活性剂、溶剂以及其它添加剂以溶解这些污染物以加速它们从污染区域的移除。然而,这样会产生大量的工艺废水,所以必须对这些工艺废水进行有效的处理,否则将会对环境产生二次污染。物理吸附和化学氧化/还原反应虽然可以有效的处理这些污染物,但是操作成本较高而且会产生大量需要进行处理或填埋的固体废弃物。
微生物修复法具有许多突出的优点,不产生二次污染,不增加周围环境负担,成本低,操作方便,安全性好,易于管理。现有的土壤修复方法通常使用常规生物废水处理工艺,然而这些工艺是为了处理容易被微生物降解的有机物而设计的,而且其处理废水的污染物浓度和有机负荷都比较低,因此这些工艺不适合用于处理含有重金属和难降解有机污染物的土壤修复废水。同时目前的微生物菌种单一,只能针对特定的土壤使用,不能提供一种普遍应用于各种不同土壤的生物菌剂,而且不同菌剂也难以起到协调作用。因此,为解决上述技术问题,确有必要提供一种具有广谱功效的微生物菌剂,以克服现有技术中的所述缺陷。
发明内容
本发明的目的是针对现有的问题,提供了一种处理土壤修复工艺废水的微生物菌剂的制备方法。
本发明是通过以下技术方案实现的:
一种处理土壤修复工艺废水的微生物菌剂的制备方法,具体方法如下:
1)取明胶20-30份,加入到10-15倍量的无菌水中,加热至40-50℃,搅拌溶解后制得明胶溶液,移至高压均质机中,在10000-15000psi压力下均质处理30-40min,然后再移至高温反应釜中,调节搅拌转速为200-300r/min,并设置反应釜的温度为100-130℃,保温搅拌10-15min后制得改性明胶;
2)取生物菌包衣液添加剂10-15份,与改性明胶混合后加入到150-200份无菌水中,混合搅拌后再加入环氧大豆油2-4份,置于磁力搅拌机上搅拌4-5h,即可制得生物菌包衣液;
3)取尿素2-3份、食盐1-2份、硝酸钾3-4份、过磷酸钙2-3份、碳酸氢铵1-2份,混合后加入到生物菌包衣液中,在200-300r/min下进行搅拌15-20min,然后加热至80-90℃,加热时间1-2h,待冷却后经高温蒸汽灭菌制成混合培养液;
4)分别从巨大芽孢杆菌、嗜酸性硫杆菌、铜绿假单胞菌的菌株中使用接种环刮取一环,接种至混合培养液中,在30-35℃的环境下进行摇床振荡培养20-25h,振荡转速为150-200r/min,获得活化菌株培养液;
5)将活化菌株培养液在4000-6000r/min下进行离心15-20min,静置2-3h后使用接种环刮取1环上清液,接种至混合培养液中进行二次培养,在50-55℃环境下进行摇床培养15-18h,振荡转速为260-320r/min,将振荡后的混合培养液在7000-8000r/min下进行离心10-15min,静置4-5h,取上清液,然后用无菌水稀释成1g湿菌体/L的菌悬液,即为微生物菌剂。
优选地,一种处理土壤修复工艺废水的微生物菌剂的制备方法,其中步骤2)中,所述生物菌包衣液添加剂的制备方法如下:
1)取甲壳素10-15份,加入到5-10倍量的次氯酸钠和过氧化氢的混合溶液中,加热至50-60℃,恒温反应2-3h,经固液分离形成透明的混合液,待混合液降温至室温后加入浓度为10-15%的盐酸溶液进行中和至中性,移至水中进行透析,将得到的透析液经浓缩、干燥制得改性壳聚糖,其中混合溶液中,次氯酸钠、过氧化氢和无菌水的质量比为2-4:3-5:80-90;
2)取麦饭石5-8份,使用石磨反复碾磨后过100目筛,然后加入到50-80份无菌水中,置于离心机中,在5000-7000r/min下离心20-30min,将得到的固体产物移至煅烧炉中,加热至400-500℃,高温煅烧2-3h,冷却至室温后再经研磨,过800目筛,制得麦饭石粉,取水溶性淀粉20-30份,加入到80-100份无菌水中,加热至60-70℃,混合搅拌后再加入过硫酸铵2-3份和麦饭石粉,恒温反应2-3h,制得改性淀粉溶液;
3)取羧甲基纤维素钠5-10份,加入到60-90份无菌水中,混合搅拌后形成透明溶液,然后加热至60-70℃,通入氮气20-30min,加入偶氮二异庚腈2-4份,保温5-10min后再加入氢氧化钠溶液0.5-1份、N, N- 亚甲基双丙烯酰胺1-2份、改性壳聚糖和改性淀粉溶液,混合搅拌后升温至80-85℃,恒温反应3-4h,即可制得。
优选地,一种处理土壤修复工艺废水的微生物菌剂的制备方法,其中步骤3)中,所述高温蒸汽灭菌的温度为130-150℃,蒸汽压力为0.15-0.18MPa,高温灭菌5-10min
优选地,一种处理土壤修复工艺废水的微生物菌剂的制备方法,其中步骤4)中,所述巨大芽孢杆菌中含有的活菌总数为2×107-5×108CFU/ml、嗜酸性硫杆菌中含有的活菌总数为5×107-8×108CFU/ml、铜绿假单胞菌中含有的活菌总数为2×108-7×109CFU/ml。
本发明相比现有技术具有以下优点:
1.本发明提供的微生物菌剂,使用不同菌种中不同种类的微生物菌相互配合、促进,使得废水处理效果明显提高,加快水体中有机质的分解速度和重金属的吸附效率,可以有效的改良水质,同时该生物菌剂具有反应时间短、便于操作等优点,能够持久有效的去除废水中有机污染物,处理废水时具有较好的生物活性并能够生长繁殖,实现微生物的重复利用。
2.本发明提供的微生物菌剂,首先,将明胶溶解后进行均质处理和加热搅拌处理,可以提高明胶溶胀后分散的均匀性和增大明胶的表面积,从而增加明胶的携载能力;其次,将微生物菌包衣液添加剂和改性明胶混合后加入到无菌水中,再加入环氧大豆油和剩余原料进行搅拌制得混合培养液,其中添加的微生物菌包衣液具有优异的成膜性,可以在微生物菌的表面形成透气性优异的“保护膜”,不仅可以提高微生物菌对环境的适应性,有利于微生物菌的生长繁殖,同时形成的“保护膜”上含有大量的羟基、胺基等基团,这些基团通过与废水中的重金属发生相互作用,从而吸附重金属,实现去除废水中重金属的效果;添加的环氧大豆油可以提高各组分的相容性,并且还可以提高“保护膜”的稳定性和耐候性,从而进一步提高微生物菌在废水中的生存能力;最后,将微生物菌接种至混合培养液中进行培养,经过两次振荡培养,可以加速微生物菌的生长繁殖,而且还可以有效的去除部分活性低的微生物菌,以及部分“保护膜”没有形成完全的微生物菌,从而确保制备的微生物菌剂的质量。
3.本发明提供的微生物菌剂,添加的微生物菌包衣液添加剂,首先,将壳聚糖经氧化处理,可以提高壳聚糖表面的含氧基团数量,增加壳聚糖在水中的分散性;其次,将麦饭石经反复研磨后再进行高温煅烧,在外界机械力的作用下,可以使麦饭石中原本紧密团聚的晶束部分被解离,并且晶束长度也变短,从而提高麦饭石的孔容孔径,使得麦饭石的透气性得到提高;将淀粉溶解后加入麦饭石粉和过硫酸铵,在过硫酸铵的作用下可以提高淀粉溶液的粘结性,从而使得麦饭石粘结在淀粉的分子链上,从而提高淀粉的透气性;再次,在引发剂和交联剂的作用下,壳聚糖与改性淀粉进行接枝聚合,从而提高改性淀粉的结构中含有的羟基、胺基等基团数量,添加的羧甲基纤维素钠可以提高微生物菌包衣液添加剂的黏稠性,有利于后续细菌表面的“保护膜”的形成。
具体实施方式
下面结合具体实施方法对本发明做进一步的说明。
实施例1
一种处理土壤修复工艺废水的微生物菌剂的制备方法,具体方法如下:
1)取明胶20份,加入到10倍量的无菌水中,加热至40℃,搅拌溶解后制得明胶溶液,移至高压均质机中,在10000psi压力下均质处理40min,然后再移至高温反应釜中,调节搅拌转速为200r/min,并设置反应釜的温度为100℃,保温搅拌15min后制得改性明胶;
2)取生物菌包衣液添加剂10份,与改性明胶混合后加入到150份无菌水中,混合搅拌后再加入环氧大豆油2份,置于磁力搅拌机上搅拌4h,即可制得生物菌包衣液;
3)取尿素2份、食盐1份、硝酸钾3份、过磷酸钙2份、碳酸氢铵1份,混合后加入到生物菌包衣液中,在200r/min下进行搅拌20min,然后加热至80℃,加热时间2h,待冷却后经高温蒸汽灭菌制成混合培养液;
4)分别从巨大芽孢杆菌、嗜酸性硫杆菌、铜绿假单胞菌的菌株中使用接种环刮取一环,接种至混合培养液中,在30℃的环境下进行摇床振荡培养20h,振荡转速为200r/min,获得活化菌株培养液;
5)将活化菌株培养液在4000r/min下进行离心20min,静置2h后使用接种环刮取1环上清液,接种至混合培养液中进行二次培养,在50℃环境下进行摇床培养15h,振荡转速为320r/min,将振荡后的混合培养液在7000r/min下进行离心15min,静置4h,取上清液,然后用无菌水稀释成1g湿菌体/L的菌悬液,即为微生物菌剂。
作为优选,其中步骤2)中,所述生物菌包衣液添加剂的制备方法如下:
1)取甲壳素10份,加入到5倍量的次氯酸钠和过氧化氢的混合溶液中,加热至50℃,恒温反应3h,经固液分离形成透明的混合液,待混合液降温至室温后加入浓度为10%的盐酸溶液进行中和至中性,移至水中进行透析,将得到的透析液经浓缩、干燥制得改性壳聚糖,其中混合溶液中,次氯酸钠、过氧化氢和无菌水的质量比为2:3:80;
2)取麦饭石5份,使用石磨反复碾磨后过100目筛,然后加入到50份无菌水中,置于离心机中,在5000r/min下离心30min,将得到的固体产物移至煅烧炉中,加热至400℃,高温煅烧3h,冷却至室温后再经研磨,过800目筛,制得麦饭石粉,取水溶性淀粉20份,加入到80份无菌水中,加热至70℃,混合搅拌后再加入过硫酸铵2份和麦饭石粉,恒温反应3h,制得改性淀粉溶液;
3)取羧甲基纤维素钠5份,加入到60份无菌水中,混合搅拌后形成透明溶液,然后加热至60℃,通入氮气30min,加入偶氮二异庚腈2份,保温10min后再加入氢氧化钠溶液0.5份、N, N- 亚甲基双丙烯酰胺1份、改性壳聚糖和改性淀粉溶液,混合搅拌后升温至80℃,恒温反应4h,即可制得。
作为优选,其中步骤3)中,所述高温蒸汽灭菌的温度为130℃,蒸汽压力为0.15MPa,高温灭菌10min
作为优选,其中步骤4)中,所述巨大芽孢杆菌中含有的活菌总数为2×107CFU/ml、嗜酸性硫杆菌中含有的活菌总数为5×107CFU/ml、铜绿假单胞菌中含有的活菌总数为2×108CFU/ml。
实施例2
一种处理土壤修复工艺废水的微生物菌剂的制备方法,具体方法如下:
1)取明胶25份,加入到12倍量的无菌水中,加热至45℃,搅拌溶解后制得明胶溶液,移至高压均质机中,在13000psi压力下均质处理35min,然后再移至高温反应釜中,调节搅拌转速为250r/min,并设置反应釜的温度为115℃,保温搅拌12min后制得改性明胶;
2)取生物菌包衣液添加剂13份,与改性明胶混合后加入到170份无菌水中,混合搅拌后再加入环氧大豆油3份,置于磁力搅拌机上搅拌4.5h,即可制得生物菌包衣液;
3)取尿素2.5份、食盐1.5份、硝酸钾3.5份、过磷酸钙2.5份、碳酸氢铵1.5份,混合后加入到生物菌包衣液中,在250r/min下进行搅拌17min,然后加热至85℃,加热时间1.5h,待冷却后经高温蒸汽灭菌制成混合培养液;
4)分别从巨大芽孢杆菌、嗜酸性硫杆菌、铜绿假单胞菌的菌株中使用接种环刮取一环,接种至混合培养液中,在32℃的环境下进行摇床振荡培养23h,振荡转速为170r/min,获得活化菌株培养液;
5)将活化菌株培养液在5000r/min下进行离心17min,静置2.5h后使用接种环刮取1环上清液,接种至混合培养液中进行二次培养,在53℃环境下进行摇床培养17h,振荡转速为300r/min,将振荡后的混合培养液在7500r/min下进行离心12min,静置4.5h,取上清液,然后用无菌水稀释成1g湿菌体/L的菌悬液,即为微生物菌剂。
作为优选,其中步骤2)中,所述生物菌包衣液添加剂的制备方法如下:
1)取甲壳素12份,加入到7倍量的次氯酸钠和过氧化氢的混合溶液中,加热至55℃,恒温反应2.5h,经固液分离形成透明的混合液,待混合液降温至室温后加入浓度为13%的盐酸溶液进行中和至中性,移至水中进行透析,将得到的透析液经浓缩、干燥制得改性壳聚糖,其中混合溶液中,次氯酸钠、过氧化氢和无菌水的质量比为3:4:85;
2)取麦饭石7份,使用石磨反复碾磨后过100目筛,然后加入到70份无菌水中,置于离心机中,在6000r/min下离心25min,将得到的固体产物移至煅烧炉中,加热至450℃,高温煅烧2.5h,冷却至室温后再经研磨,过800目筛,制得麦饭石粉,取水溶性淀粉25份,加入到90份无菌水中,加热至65℃,混合搅拌后再加入过硫酸铵2.5份和麦饭石粉,恒温反应2.5h,制得改性淀粉溶液;
3)取羧甲基纤维素钠7份,加入到80份无菌水中,混合搅拌后形成透明溶液,然后加热至65℃,通入氮气25min,加入偶氮二异庚腈3份,保温7min后再加入氢氧化钠溶液0.7份、N,N- 亚甲基双丙烯酰胺1.5份、改性壳聚糖和改性淀粉溶液,混合搅拌后升温至83℃,恒温反应3.5h,即可制得。
作为优选,其中步骤3)中,所述高温蒸汽灭菌的温度为140℃,蒸汽压力为0.16MPa,高温灭菌7min
作为优选,其中步骤4)中,所述巨大芽孢杆菌中含有的活菌总数为1×108CFU/ml、嗜酸性硫杆菌中含有的活菌总数为3×108CFU/ml、铜绿假单胞菌中含有的活菌总数为9×108CFU/ml。
实施例3
一种处理土壤修复工艺废水的微生物菌剂的制备方法,具体方法如下:
1)取明胶30份,加入到15倍量的无菌水中,加热至50℃,搅拌溶解后制得明胶溶液,移至高压均质机中,在15000psi压力下均质处理30min,然后再移至高温反应釜中,调节搅拌转速为300r/min,并设置反应釜的温度为130℃,保温搅拌10min后制得改性明胶;
2)取生物菌包衣液添加剂15份,与改性明胶混合后加入到200份无菌水中,混合搅拌后再加入环氧大豆油4份,置于磁力搅拌机上搅拌5h,即可制得生物菌包衣液;
3)取尿素3份、食盐2份、硝酸钾4份、过磷酸钙3份、碳酸氢铵2份,混合后加入到生物菌包衣液中,在300r/min下进行搅拌15min,然后加热至90℃,加热时间1h,待冷却后经高温蒸汽灭菌制成混合培养液;
4)分别从巨大芽孢杆菌、嗜酸性硫杆菌、铜绿假单胞菌的菌株中使用接种环刮取一环,接种至混合培养液中,在35℃的环境下进行摇床振荡培养20h,振荡转速为200r/min,获得活化菌株培养液;
5)将活化菌株培养液在6000r/min下进行离心20min,静置3h后使用接种环刮取1环上清液,接种至混合培养液中进行二次培养,在55℃环境下进行摇床培养15h,振荡转速为320r/min,将振荡后的混合培养液在8000r/min下进行离心10min,静置5h,取上清液,然后用无菌水稀释成1g湿菌体/L的菌悬液,即为微生物菌剂。
作为优选,其中步骤2)中,所述生物菌包衣液添加剂的制备方法如下:
1)取甲壳素15份,加入到10倍量的次氯酸钠和过氧化氢的混合溶液中,加热至60℃,恒温反应2h,经固液分离形成透明的混合液,待混合液降温至室温后加入浓度为15%的盐酸溶液进行中和至中性,移至水中进行透析,将得到的透析液经浓缩、干燥制得改性壳聚糖,其中混合溶液中,次氯酸钠、过氧化氢和无菌水的质量比为4:5:90;
2)取麦饭石8份,使用石磨反复碾磨后过100目筛,然后加入到80份无菌水中,置于离心机中,在7000r/min下离心20min,将得到的固体产物移至煅烧炉中,加热至500℃,高温煅烧2h,冷却至室温后再经研磨,过800目筛,制得麦饭石粉,取水溶性淀粉30份,加入到100份无菌水中,加热至70℃,混合搅拌后再加入过硫酸铵3份和麦饭石粉,恒温反应2h,制得改性淀粉溶液;
3)取羧甲基纤维素钠10份,加入到90份无菌水中,混合搅拌后形成透明溶液,然后加热至70℃,通入氮气20min,加入偶氮二异庚腈4份,保温5min后再加入氢氧化钠溶液1份、N,N- 亚甲基双丙烯酰胺2份、改性壳聚糖和改性淀粉溶液,混合搅拌后升温至85℃,恒温反应3h,即可制得。
作为优选,其中步骤3)中,所述高温蒸汽灭菌的温度为150℃,蒸汽压力为0.18MPa,高温灭菌5min
作为优选,其中步骤4)中,所述巨大芽孢杆菌中含有的活菌总数为5×108CFU/ml、嗜酸性硫杆菌中含有的活菌总数为8×108CFU/ml、铜绿假单胞菌中含有的活菌总数为7×109CFU/ml。
对比例1:去除步骤1),其余与实施例1相同。
对比例2:去除步骤2)中的生物菌包衣液添加剂,其余与实施例1相同。
对比例3:去除步骤5)中的二次接种培养,其余与实施例1相同。
试验例:将土壤修复工艺产生的废水输送进曝气池中,然后分别将实施例1-3和对比例1-3提供的微生物菌剂加入到曝气池中,投放量为100ml/L,运行5d和30d后,对曝气池中的废水处理性能分别进行测试,结果如表一所示:
表一
注:重金属包括铜、镍、锌、铬、铅、汞、镉等。
从表一可以看出,本发明提供的微生物菌剂对废水中的氨氮、重金属以及COD具有很好的去除效果,并且在废水处理运行的30d内,去除率没有下降。
以上所述,仅为本发明的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何不经过创造性劳动想到的变换或替换,都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims (4)

1.一种处理土壤修复工艺废水的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,具体方法如下:
1)取明胶20-30份,加入到10-15倍量的无菌水中,加热至40-50℃,搅拌溶解后制得明胶溶液,移至高压均质机中,在10000-15000psi压力下均质处理30-40min,然后再移至高温反应釜中,调节搅拌转速为200-300r/min,并设置反应釜的温度为100-130℃,保温搅拌10-15min后制得改性明胶;
2)取生物菌包衣液添加剂10-15份,与改性明胶混合后加入到150-200份无菌水中,混合搅拌后再加入环氧大豆油2-4份,置于磁力搅拌机上搅拌4-5h,即可制得生物菌包衣液;
3)取尿素2-3份、食盐1-2份、硝酸钾3-4份、过磷酸钙2-3份、碳酸氢铵1-2份,混合后加入到生物菌包衣液中,在200-300r/min下进行搅拌15-20min,然后加热至80-90℃,加热时间1-2h,待冷却后经高温蒸汽灭菌制成混合培养液;
4)分别从巨大芽孢杆菌、嗜酸性硫杆菌、铜绿假单胞菌的菌株中使用接种环刮取一环,接种至混合培养液中,在30-35℃的环境下进行摇床振荡培养20-25h,振荡转速为150-200r/min,获得活化菌株培养液;
5)将活化菌株培养液在4000-6000r/min下进行离心15-20min,静置2-3h后使用接种环刮取1环上清液,接种至混合培养液中进行二次培养,在50-55℃环境下进行摇床培养15-18h,振荡转速为260-320r/min,将振荡后的混合培养液在7000-8000r/min下进行离心10-15min,静置4-5h,取上清液,然后用无菌水稀释成1g湿菌体/L的菌悬液,即为微生物菌剂。
2.如权利要求1所述的一种处理土壤修复工艺废水的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,步骤2)中,所述生物菌包衣液添加剂的制备方法如下:
1)取甲壳素10-15份,加入到5-10倍量的次氯酸钠和过氧化氢的混合溶液中,加热至50-60℃,恒温反应2-3h,经固液分离形成透明的混合液,待混合液降温至室温后加入浓度为10-15%的盐酸溶液进行中和至中性,移至水中进行透析,将得到的透析液经浓缩、干燥制得改性壳聚糖,其中混合溶液中,次氯酸钠、过氧化氢和无菌水的质量比为2-4:3-5:80-90;
2)取麦饭石5-8份,使用石磨反复碾磨后过100目筛,然后加入到50-80份无菌水中,置于离心机中,在5000-7000r/min下离心20-30min,将得到的固体产物移至煅烧炉中,加热至400-500℃,高温煅烧2-3h,冷却至室温后再经研磨,过800目筛,制得麦饭石粉,取水溶性淀粉20-30份,加入到80-100份无菌水中,加热至60-70℃,混合搅拌后再加入过硫酸铵2-3份和麦饭石粉,恒温反应2-3h,制得改性淀粉溶液;
3)取羧甲基纤维素钠5-10份,加入到60-90份无菌水中,混合搅拌后形成透明溶液,然后加热至60-70℃,通入氮气20-30min,加入偶氮二异庚腈2-4份,保温5-10min后再加入氢氧化钠溶液0.5-1份、N, N- 亚甲基双丙烯酰胺1-2份、改性壳聚糖和改性淀粉溶液,混合搅拌后升温至80-85℃,恒温反应3-4h,即可制得。
3.如权利要求1所述的一种处理土壤修复工艺废水的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,步骤3)中,所述高温蒸汽灭菌的温度为130-150℃,蒸汽压力为0.15-0.18MPa,高温灭菌5-10min。
4.如权利要求1所述的一种处理土壤修复工艺废水的微生物菌剂的制备方法,其特征在于,步骤4)中,所述巨大芽孢杆菌中含有的活菌总数为2×107-5×108CFU/ml、嗜酸性硫杆菌中含有的活菌总数为5×107-8×108CFU/ml、铜绿假单胞菌中含有的活菌总数为2×108-7×109CFU/ml。
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