CN110054651B - 一种靶向人膀胱癌药根碱铂(ii)配合物及其合成方法和应用 - Google Patents
一种靶向人膀胱癌药根碱铂(ii)配合物及其合成方法和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110054651B CN110054651B CN201910495358.9A CN201910495358A CN110054651B CN 110054651 B CN110054651 B CN 110054651B CN 201910495358 A CN201910495358 A CN 201910495358A CN 110054651 B CN110054651 B CN 110054651B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- complex
- platinum
- jatrorrhizine
- bladder cancer
- tumor
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- MXTLAHSTUOXGQF-UHFFFAOYSA-O Jatrorrhizine Chemical compound COC1=CC=C2C=C3C(C=C(C(=C4)O)OC)=C4CC[N+]3=CC2=C1OC MXTLAHSTUOXGQF-UHFFFAOYSA-O 0.000 title claims abstract description 49
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 29
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 title claims abstract description 29
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 29
- HRGDZIGMBDGFTC-UHFFFAOYSA-N platinum(2+) Chemical compound [Pt+2] HRGDZIGMBDGFTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 25
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 title abstract description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 17
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 33
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 32
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 18
- 239000003446 ligand Substances 0.000 abstract description 15
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 14
- 230000005918 in vitro anti-tumor Effects 0.000 abstract description 7
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 abstract description 7
- 230000008685 targeting Effects 0.000 abstract description 7
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 abstract description 6
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 abstract description 6
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 abstract description 4
- 230000005917 in vivo anti-tumor Effects 0.000 abstract description 4
- PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-2-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=CC=N1 PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 4
- -1 potassium halide Chemical class 0.000 abstract description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 abstract description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 abstract description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 abstract description 3
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 abstract description 3
- 239000011591 potassium Substances 0.000 abstract description 3
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 abstract description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 30
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 28
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 12
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 11
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 10
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 10
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 7
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 7
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 7
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 6
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 6
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 5
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N Fluorine atom Chemical compound [F] YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- 244000309466 calf Species 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 3
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M potassium iodide Chemical compound [K+].[I-] NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 3
- 238000004293 19F NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 2,6-dimethylpyridine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=N1 OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 2
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 2
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- KDADQDWVKZJTDQ-UHFFFAOYSA-L methylsulfinylmethane;platinum(2+);dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Pt+2].CS(C)=O.CS(C)=O KDADQDWVKZJTDQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- 230000005760 tumorsuppression Effects 0.000 description 2
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 206010051779 Bone marrow toxicity Diseases 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 240000002853 Nelumbo nucifera Species 0.000 description 1
- 235000006508 Nelumbo nucifera Nutrition 0.000 description 1
- 235000006510 Nelumbo pentapetala Nutrition 0.000 description 1
- 206010029350 Neurotoxicity Diseases 0.000 description 1
- 206010033109 Ototoxicity Diseases 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 229910019032 PtCl2 Inorganic materials 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010044221 Toxic encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 210000001099 axilla Anatomy 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000007630 basic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- YBHILYKTIRIUTE-UHFFFAOYSA-N berberine Chemical compound C1=C2CC[N+]3=CC4=C(OC)C(OC)=CC=C4C=C3C2=CC2=C1OCO2 YBHILYKTIRIUTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940093265 berberine Drugs 0.000 description 1
- QISXPYZVZJBNDM-UHFFFAOYSA-N berberine Natural products COc1ccc2C=C3N(Cc2c1OC)C=Cc4cc5OCOc5cc34 QISXPYZVZJBNDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 231100000366 bone marrow toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000009702 cancer cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000000006 cell growth inhibition assay Methods 0.000 description 1
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 150000004696 coordination complex Chemical class 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- HPYNZHMRTTWQTB-UHFFFAOYSA-N dimethylpyridine Natural products CC1=CC=CN=C1C HPYNZHMRTTWQTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 1
- 230000009982 effect on human Effects 0.000 description 1
- 230000000095 emetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000017066 negative regulation of growth Effects 0.000 description 1
- 231100000417 nephrotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 231100000228 neurotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007135 neurotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000262 ototoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 150000003057 platinum Chemical class 0.000 description 1
- CLSUSRZJUQMOHH-UHFFFAOYSA-L platinum dichloride Chemical compound Cl[Pt]Cl CLSUSRZJUQMOHH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 208000020016 psychiatric disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 125000003039 tetrahydroisoquinolinyl group Chemical class C1(NCCC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 231100000820 toxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F15/00—Compounds containing elements of Groups 8, 9, 10 or 18 of the Periodic Table
- C07F15/0006—Compounds containing elements of Groups 8, 9, 10 or 18 of the Periodic Table compounds of the platinum group
- C07F15/0086—Platinum compounds
- C07F15/0093—Platinum compounds without a metal-carbon linkage
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明涉及一种靶向人膀胱癌药根碱铂(II)配合物，其合成方法以及该配合物在制备抗肿瘤药物中的应用。所述靶向人膀胱癌药根碱铂(II)配合物的合成方法包括以下步骤：(1)将溴代药根碱衍生物、卤化钾和二甲基吡啶胺溶解于溶剂中，在85～90℃下反应得到J‑TFA配体(2)将步骤(1)制备的J‑TFA配体与二氯·二(二甲基亚砜)合铂(II)溶解于乙腈溶液中，进行配位反应4～6小时，将产物洗涤、干燥，即得。本发明首次以新型的药根碱衍生物J‑TFA作为活性配体，合成其铂配合物，表现出优越的体内外抗肿瘤活性和靶向性，具有潜在的药用价值，有望用于各种抗肿瘤药物的制备。所述靶向人膀胱癌药根碱铂(II)配合物的结构式如下：
Description
技术领域
本发明涉及铂类高活性配合物以及合成方法，特别涉及一种靶向人膀胱癌药根碱铂(II)配合物及其合成方法。本发明还涉及靶向人膀胱癌药根碱铂(II)配合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
背景技术
恶性肿瘤是世界公认的对人类健康危害最严重的疾病之一，其危害仅次于心血管疾病。因此，加强肿瘤药物的研发和肿瘤治疗手段的研究，是目前临床和科学家们的急迫需解决的重大问题之一。在肿瘤治疗中，化疗是当前肿瘤治疗的重要方法之一，在众多化疗药物中，铂类配合物是一类抗肿瘤作用较强、抗肿瘤谱较广的药物。然而，顺铂类药物在临床治疗中产生明显的耳毒性、肾脏毒性、骨髓毒性、催吐性、外周神经毒性及耐药性，使用其在临床使用受到了一定的限制。为此，靶向性药物的开发，为解决金属抗肿瘤药物的靶向性问题提供了一个新的契机。
药根碱是一种来自于天然产物的四氢异喹啉生物碱，其结构与小檗碱类似，具有治疗炎症、细菌和病毒感染、糖尿病、心血管疾病、精神疾病和抗肿瘤等多方面具有药效作用。以药根碱衍生物为中药活性成分配体来合成其金属配合物及其作用机制的研究，至今未曾有相关的报道。因此，设计和寻找高水溶性、疗效高、毒副作用低和靶向性强的新型药根碱抗肿瘤金属铂配合物前药成为当前亟待解决的问题。
发明内容
本发明的第一个目的是提供一种靶向人膀胱癌药根碱铂(II)配合物。
为实现本发明的第一个目的，本发明提供了以下的技术方案：
一种靶向人膀胱癌药根碱铂(II)配合物，具有下述通式I：
本发明的第二个目的是提供一种靶向人膀胱癌药根碱铂(II)配合物的合成方法。
为实现本发明的第二个目的，本发明提供了以下的技术方案：
一种靶向人膀胱癌药根碱铂(II)配合物的合成方法，包括以下步骤：
(1)将溴代药根碱衍生物、卤化钾和二甲基吡啶胺溶解于溶剂中，在90℃下反应得到J-TFA配体；
(2)将步骤(1)制备的J-TFA配体与二氯·二(二甲基亚砜)合铂(II)溶解于乙腈溶液中，进行配位反应4～6小时，将产物洗涤、干燥，即得。
进一步地，所述步骤(1)中溶剂为乙腈。
进一步地，所述溴代药根碱衍生物1、卤化钾和二甲基吡啶胺的摩尔比为1:0.8:1～1.5。
进一步地，所述步骤(1)的反应温度为90℃。
进一步地，所述步骤(2)的反应温度为50～60℃。
进一步地，所述步骤(2)中乙腈溶液的体积为5.0～50.0mL。
进一步地，所述步骤(2)中干燥为真空干燥，温度为40～50℃。
本发明的第三个目的在于提供一种靶向人膀胱癌药根碱铂(II)配合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
1.本发明首次以一种新型的药根碱衍生物J-TFA作为活性配体，合成其铂配合物[Pt(J-TFA)Cl]Cl(其中TFA为三氟乙酸)，而且合成路线简单、反应条件温和，产率高。
2.本发明研究了配合物对T-24、SK-OV-3/DDP、A549肿瘤细胞和正常HL-7702细胞的活性和毒性实验。实验结果发现，配合物对人肿瘤细胞有很好的抑制作用，IC50值为10.0nM-9.3μM；尤其是对人膀胱癌细胞T-24的抑制作用较好，其IC50值分别为10.0±0.2nM，其体外抗肿瘤活性远远大于临床经典的金属基抗癌药物顺铂10.4±1.2μM。
3.本发明的靶向人膀胱癌药根碱铂(II)配合物，对正常细胞HL-7702的毒性很小(IC50＞150μM)，体现出很好的靶向抑制人膀胱癌细胞的增殖作用。更为重要的是，在荷瘤裸鼠的体内抑瘤实验显示，对人膀胱癌细胞T-24裸鼠模型具有良好的抑瘤效果，抑制率为50.4％，远远高于临床药物顺铂37.1％。
4.本发明的靶向人膀胱癌药根碱铂(II)配合物表现出优越的体内外抗肿瘤活性和靶向性，具有潜在的药用价值，有望用于各种抗肿瘤药物的制备。
5.本发明在合成靶向人膀胱癌药根碱铂(II)配合物时，药根碱衍生物与二甲基吡啶胺的物质的量比应为1:1～1.5，反应才能进行；且反应温度为85～90℃，温度高于90℃产物粘底和发生碳链断链，温度低于85℃，该反应几乎不发生。
附图说明
下面结合附图中的具体实施例对本发明的技术方案做进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制。
图1为本发明实施例1制得的J-TFA的电喷雾质谱图；
图2为本发明实施例1制得的J-TFA核磁共振氢谱图；
图3为本发明实施例1制得的J-TFA核磁共振氟谱图；
图4为本发明实施例1制得的配合物Pt1的电喷雾质谱图；
图5为本发明实施例1制得的Pt1的核磁共振氢谱图；
图6为本发明实施例1制得的Pt1的核磁共振碳谱图；
图7为本发明实施例1制得的Pt1核磁共振氟谱图。
具体实施方式
本发明实施例中涉及的原料溴代药根碱衍生物1参照考现有文献(Song,D.；etal.Eur.J.Med.Chem.,2018,143:1858–1868.)进行制备；另外，二氯·二(二甲基亚砜)合铂(II)可参考现有文献(Al-Allaf,T.A.K.；et al.Transit.Met.Chem.,1998,23:403-406.)进行制备，简写为cis-PtCl2(DMSO)2。
实施例1
在圆底烧瓶中分别称取1.0mol衍生物1、0.8mol碘化钾和1.50mol二甲基吡啶胺，加入乙腈5.0毫升，所加的溶剂刚好试固体溶解完，使其反应更充分，在90℃下反应4小时后，得到黄色固体粉末J-TFA配体，其产率为88.9％。
在100.0mL的圆底烧瓶中加入1.0mol配体J-TFA和1.0mol的二氯·二(二甲基亚砜)合铂(II)，溶解于25.0mL乙腈溶液中，在60℃下进行配位反应4.0h，用乙腈洗涤后在45℃温度下真空干燥，即得到黄色的目标产物Pt1。产率为93.0％。
本发明的靶向人膀胱癌药根碱铂(II)配合物的合成路线如下：
实施例2
与实施例1的不同之处在于，在100.0mL的圆底烧瓶中加入1.0mol配体J-TFA和1.0mol的二氯·二(二甲基亚砜)合铂(II)，溶解于50.0mL乙腈溶液中，在60℃下进行配位反应4.0h，用乙腈洗涤后在45℃温度下真空干燥，即得到黄色的目标产物Pt1。产率为85.2％。
实施例3
与实施例1的不同之处在于，在100.0mL的圆底烧瓶中加入1.0mol配体J-TFA和1.0mol的二氯·二(二甲基亚砜)合铂(II)，溶解于5.0mL乙腈溶液中，在60℃下进行配位反应4.0h，用乙腈洗涤后在45℃温度下真空干燥，即得到黄色的目标产物Pt1。产率为90.0％。
实验例1
为进一步确定配体与配合物的结构，对实施例1产物的结构进行表征。
1.对所得J-TFA进行鉴定
(1)电喷雾质谱，其谱图如图1所示。
ESI-MS m/z:660.9[M-(TFA-H)]+，其中M为化合物J-TFA的分子量。
(2)核磁共振氢谱图，如图2所示。
1H NMR(400MHz,CH3OH-d4)δ9.78(s,1H)，8.82(s,1H)，8.69(d,J＝4.8Hz,2H)，8.18-8.12(m,1H)，8.03(d,J＝9.1Hz,1H)，7.93(dt,J＝1.6,7.7Hz,2H)，7.69(s,1H)，7.53(d,J＝7.8Hz,2H)，7.48(dd,J＝5.2,7.3Hz,2H)，7.05(s,1H)，4.95(br t,J＝6.3Hz,2H)，4.63(s,4H)，4.23(s,3H)，4.15-4.09(m,5H)，4.02(s,3H)，3.33(br s,2H),3.29(s,2H)，1.92-1.81(m,4H)，1.59-1.49(m,2H)，1.38(br s,8H)。
(3)核磁共振氟谱图，如图3所示。
19F NMR(471MHz,CHCl3-d)δ-77.337。
(4)元素分析结果，如表1所示。
表1实施例中化合物J-TFA和Pt1的元素分析结果
因此，可以确定所得黄色目标产物为化合物J-TFA，其结构式如下：
2.对所得配合物Pt1进行鉴定
(1)电喷雾质谱，其谱图如图4所示。
ESI-MS m/z:928.0[M-(TFA-H)]+，其中M为化合物Pt1的分子量。
(2)核磁共振氢谱图，如图5所示。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.89(s,1H)，9.05(s,1H)，8.80–8.76(m,2H)，8.30(td,J＝7.8,1.6Hz,2H)，8.19(d,J＝9.2Hz,1H)，8.05(d,J＝9.1Hz,1H)，7.83(d,J＝7.9Hz,2H)，7.69(s,1H)，7.68-7.65(m,2H)，7.05(s,1H)，5.36(d,J＝15.9Hz,2H)，4.97(t,J＝6.3Hz,2H)，4.87(d,J＝15.8Hz,2H)，4.11(s,3H)，4.07(s,3H)，4.02(t,J＝6.6Hz,2H)，3.94(s,3H)，3.23(t,J＝6.4Hz,2H)，3.06-2.99(m,2H)，1.69(p,J＝6.8Hz,2H)，1.49(td,J＝11.3,9.6,5.9Hz,2H)，1.34(t,J＝7.8Hz,2H)，1.25–1.19(m,4H)，1.12(dt,J＝13.4,7.2Hz,4H)。
(2)核磁共振碳谱图，如图6所示。
13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ166.33，161.67，158.87，158.61，158.35，158.10，151.34，150.64，149.45，149.21，145.85，144.03，141.79，138.15，133.57，129.00，127.16，125.81，123.93，123.89，121.79，120.89，120.32，119.21，118.52，116.14，113.78，112.49，109.28，68.87，68.39，64.71，62.36，57.48，56.64，55.87，40.51，40.35，40.18，40.01，39.84，39.68，39.51，29.03，28.97，28.95，28.90，27.45，26.43，26.19，25.81。
(3)核磁共振氟谱图，如图7所示。
19F NMR(471MHz,DMSO-d6)δ-73.86。
(4)元素分析结果，如表1所示。
因此，可以确定所得黄色目标产物为配合物Pt1，其结构式如下：
实验例2
为了充分说明本发明所述的靶向人膀胱癌药根碱铂(II)配合物Pt1在制药中的用途，对其进行了体内外抗肿瘤活性实验。
一、铂(II)配合物Pt1对多种人肿瘤细胞株的增殖抑制活性实验
1、细胞株与细胞培养
本实验选用人卵巢癌顺铂耐药SK-OV-3/DDP细胞、人膀胱癌T-24细胞、人膀胱癌A549细胞以及人正常肝HL-7702细胞等4种人类细胞株。
所有人源细胞株均培养在含100U/mL青霉素、10wt％小牛血、100U/mL链霉素的RPMI-1640培养液内，置37℃含体积浓度5％CO2孵箱中培养。
2、待测化合物的配制
所用的配体J-TFA和Pt1的纯度均需≥95％，将它们的DMSO储液用生理缓冲液稀释成20μmol/L的终溶液(DMSO的终浓度≤1％)，测试该浓度下各个化合物对正常细胞或所选的肿瘤细胞生长的抑制程度。
3、细胞生长抑制实验(MTT法)
(1)取对数生长期的正常细胞或肿瘤细胞，经胰蛋白酶消化后，用含10％小牛血清的培养液配制成浓度为5000个/mL的细胞悬液，以每孔190μL接种于96孔培养板中，使待测细胞密度至1000～10000孔(边缘孔用无菌PBS填充)；
(2)5％CO2，37℃孵育24h，至细胞单层铺满孔底，每孔加入一定浓度梯度的药物10μL，每个浓度梯度设4个复孔；
(3)5％CO2，37℃孵育48小时，倒置显微镜下观察；
(4)每孔加入10μL的MTT溶液(5mg/mL PBS，即0.5％MTT)，继续培养4h；
(5)终止培养，小心吸去孔内培养液，每孔加入150μL的DMSO充分溶解甲瓒沉淀，振荡器混匀后，在酶标仪用波长为570nm，参比波长为450nm测定各孔的光密度值；
(6)同时设置调零孔(培养基、MTT、DMSO)，对照孔(细胞、培养液、MTT、相同浓度的药物溶解介质、DMSO)。
(7)根据测得的光密度值(OD值)，来判断活细胞数量，OD值越大，细胞活性越强。利用公式：
计算各个化合物对所选细胞生长的抑制率，再以Bliss法分别计算各受试化合物对所选的各个细胞株的IC50值。其结果如以下表2所示。
表2化合物对各种细胞株的IC50值(μM)
从IC50活性筛选结果来看，配合物Pt1对三种受测的人肿瘤细胞株(SK-OV-3/DDP、T-24和A549细胞)的增殖抑制活性明显高于金属盐cis-Pt(DMSO)2Cl2及其配体J-TFA和TFA，体现了配体J-TFA与铂中心原子的协同作用。其中配合物Pt1对T-24细胞的抑制作用较好，其IC50值为10.0±0.2nM，其体外抗肿瘤活性远远大于临床经典的金属基抗癌药物顺铂(10.4±1.2μM)；此外，配合物Pt1对正常细胞HL-7702的几乎没有毒性(IC50值＞150μM)，体现出很好的靶向抑制癌细胞增殖的作用。总之，配合物Pt1表现出优越的体外抗肿瘤活性和靶向选择性，具有潜在的药用价值，有望用于各种抗肿瘤药物的制备。
二、荷瘤裸鼠的体内抑瘤实验
(1)动物要求：
品系：BALB/c-nu；等级：SPF级；周龄：5-6w；体重：18-20g；性别：雄性；
(2)动物来源来源：
北京华阜康生物科技股份有限公司，许可证号：SCXK(京)2014-0004。
(3)动物实验的场所：
中国医学科学院放射医学研究所(天津)，实验单位使用许可证编号：SYXK(津)2014-0002。
(4)饲养环境的要求：
SPF级，IVC独立通风系统；保持恒定温度(26±2℃)和湿度(40-70％)，开灯、熄灯各12h。
(5)饲料：
选用SPF小鼠繁殖饲料，购自北京科澳协力饲料有限公司。
(6)实验用到的主要试剂和器械：
试剂：DMSO、0.9％生理盐水、75％医用酒精、4％多聚甲醛；器械：手术剪刀、镊子、套管针、电子游标卡尺。
(7)实验的基本过程与操作
①细胞培养
本实验选用人卵巢癌顺铂耐药SK-OV-3/DDP细胞、人膀胱癌T-24细胞、人膀胱癌A549细胞以及人正常肝HL-7702细胞等4种人类细胞株。
所有人源细胞株均培养在含100U/mL青霉素、10wt％小牛血、100U/mL链霉素的RPMI-1640培养液内，置37℃含体积浓度5％CO2孵箱中培养。
②荷T-24裸鼠皮下移植瘤模型的制备
收集处于对数生长期的T-24细胞，用无血清培养基细胞调制成5×107个/mL活细胞浓度悬液。用1.0mL注射器抽取0.2mL悬液，约含1×107个活细胞，然后接种于裸小鼠右腋窝皮下,待皮下肿瘤长至约1cm3时，作为皮下移植瘤模型制作的瘤源，在裸小鼠身上传代。T-24在裸鼠身上传4代待其生长稳定后，选取肿瘤生长旺盛且无溃破的荷瘤鼠，颈椎脱位处死，用75％医用酒精消毒动物皮肤，剖离组织块，除去坏死部分，将瘤组织剪成1.5mm3左右小块，用套管针接种于裸鼠右腋窝皮下。用电子游标卡尺测量移植瘤瘤径，待肿瘤体积生长至100-300mm3时，将动物随机分组。
③药效实验
荷HeLa瘤裸小鼠随机分成空白组、加药组和顺铂阳性对照组，每组7只动物。于分组当天开始腹腔注射给药，加药组每两天给药，顺铂隔天给药。每隔三天用电子游标卡尺测瘤径，量体重。于第13天颈椎脱位处死、剖离肿瘤、称重、拍照、计算抑瘤率。
肿瘤体积计算公式：V＝a×b2/2，其中a为长径，b为短径；
相对肿瘤体积RTV＝Vt/V0，其中Vt为每次测量时的体积，V0为分组时的体积；
相对肿瘤增值率T/C％＝(TRTV/CRTV)×100％；
肿瘤生长抑制率(％)＝(溶媒组平均瘤重-治疗组平均瘤重)/溶媒组组平均瘤重×100％。
从上表3中验结果来可知，配合物Pt1对于荷人T-24瘤裸鼠具有较好的增殖抑制率为50.4％，明显强于临床化疗药物顺铂37.1％。
表3配合物Pt1对荷人T-24裸鼠的体内抑瘤结果
综上所述，本发明所述的体内外靶向人膀胱癌药根碱铂(II)配合物Pt1表现出优异的体外和体内抗肿瘤活性，以及良好的细胞毒性选择性，表明本发明为所合成新型抗肿瘤铂配合物的设计思路和合成方法是切实可行的。
以上所述为本发明的部分实施方式，并不限制于本发明。对本领域技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下做出的若干改进和变型，也应视为本发明的保护范围。
Claims (2)
1.一种靶向人膀胱癌药根碱铂(II)配合物，具有下述通式：
2.权利要求1所述的靶向人膀胱癌药根碱铂(II)配合物在制备治疗卵巢癌或膀胱癌的抗肿瘤药物中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910495358.9A CN110054651B (zh) | 2019-06-10 | 2019-06-10 | 一种靶向人膀胱癌药根碱铂(ii)配合物及其合成方法和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910495358.9A CN110054651B (zh) | 2019-06-10 | 2019-06-10 | 一种靶向人膀胱癌药根碱铂(ii)配合物及其合成方法和应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110054651A CN110054651A (zh) | 2019-07-26 |
| CN110054651B true CN110054651B (zh) | 2021-08-27 |
Family
ID=67325821
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910495358.9A Active CN110054651B (zh) | 2019-06-10 | 2019-06-10 | 一种靶向人膀胱癌药根碱铂(ii)配合物及其合成方法和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110054651B (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111187303B (zh) * | 2020-01-17 | 2022-10-04 | 玉林师范学院 | 高抗肿瘤活性白叶藤碱铂(ii)配合物及其合成方法和应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108659051A (zh) * | 2018-05-07 | 2018-10-16 | 玉林师范学院 | 一种靶向于卵巢癌的高活性香豆素-铂(ii)配合物及其合成方法与应用 |
| CN108774270A (zh) * | 2018-07-20 | 2018-11-09 | 玉林师范学院 | 靶向于人肺癌耐药细胞的索拉非尼抗肿瘤铂(ii)配合物及其制备方法与应用 |
| CN108774269A (zh) * | 2018-07-20 | 2018-11-09 | 玉林师范学院 | 新型靶向苯并咪唑类衍生物抗肿瘤铂(ii)和钌(ii)配合物及其制备方法与应用 |
-
2019
- 2019-06-10 CN CN201910495358.9A patent/CN110054651B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108659051A (zh) * | 2018-05-07 | 2018-10-16 | 玉林师范学院 | 一种靶向于卵巢癌的高活性香豆素-铂(ii)配合物及其合成方法与应用 |
| CN108774270A (zh) * | 2018-07-20 | 2018-11-09 | 玉林师范学院 | 靶向于人肺癌耐药细胞的索拉非尼抗肿瘤铂(ii)配合物及其制备方法与应用 |
| CN108774269A (zh) * | 2018-07-20 | 2018-11-09 | 玉林师范学院 | 新型靶向苯并咪唑类衍生物抗肿瘤铂(ii)和钌(ii)配合物及其制备方法与应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Synthesis and biological evaluation of new berberine derivatives as cancer immunotherapy agents through targeting IDO1;Yane Xiang Wang et al.;《European Journal of Medicinal Chemistry》;20171111;1858-1868页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN110054651A (zh) | 2019-07-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110054652B (zh) | 一种药根碱铂(ii)配合物及其合成方法和应用 | |
| CN107746418B (zh) | 一种靶向于肝癌的9-氯-1,2,3,4-四氢吖啶-铂(ii)配合物的合成及其应用 | |
| CN111039990B (zh) | 低毒性的铱配合物及其合成方法和应用 | |
| CN110950914B (zh) | 一种铱配合物及其合成方法和应用 | |
| CN111187303B (zh) | 高抗肿瘤活性白叶藤碱铂(ii)配合物及其合成方法和应用 | |
| CN108774270B (zh) | 靶向于人肺癌耐药细胞的索拉非尼抗肿瘤铂(ii)配合物及其制备方法与应用 | |
| CN113683644B (zh) | 一种治疗顺铂耐药癌细胞的双喹啉铱配合物及其制备方法和应用 | |
| CN113527370B (zh) | 一种靶向于肺癌顺铂耐药细胞的喹啉铱配合物及其合成方法和应用 | |
| CN109810148B (zh) | 一种双核三联吡啶铂(ii)配合物及其制备方法和应用 | |
| CN108774269B (zh) | 新型靶向苯并咪唑类衍生物抗肿瘤铂(ii)和钌(ii)配合物及其制备方法与应用 | |
| CN111116667B (zh) | 基于8-羟基喹啉衍生物和1-苯基吡唑铱二聚体构筑的铱配合物及其合成方法和应用 | |
| CN111205311A (zh) | 新型高抗肿瘤活性白叶藤碱锌(ii)配合物及其合成方法和应用 | |
| CN111153916A (zh) | 白叶藤碱锌(ii)配合物及其合成方法和应用 | |
| CN110054651B (zh) | 一种靶向人膀胱癌药根碱铂(ii)配合物及其合成方法和应用 | |
| CN111253418A (zh) | 新型白叶藤碱锌(ii)配合物及其合成方法和应用 | |
| CN114573598B (zh) | 具有体内外高活性的白叶藤锌(ii)配合物及合成方法和应用 | |
| CN110950915B (zh) | 一种新型大黄酸类-铂(iv)前体抗癌配合物及其合成方法与应用 | |
| CN110938033A (zh) | 硒氰化合物及其用途 | |
| CN110172075B (zh) | 一种新型香豆素-喹啉-铂(ii)配合物及其合成方法和应用 | |
| CN114539294A (zh) | 靶向人肺腺癌耐顺铂细胞白叶藤-菲罗啉锌(ii)配合物、合成方法及其应用 | |
| CN108997436B (zh) | 一种瑞格非尼抗肿瘤铂(ii)配合物及其制备方法与应用 | |
| CN110016048B (zh) | 线粒体靶向ir780碘化物的衍生物及制备方法与应用 | |
| CN110105402B (zh) | 一种黄连素抗肿瘤铂(ii)配合物及其合成方法和应用 | |
| CN115850347A (zh) | 一种肺癌细胞抑制剂及其制备方法及应用 | |
| CN114106020B (zh) | 基于嘧啶席夫碱合邻菲罗啉-铜的高抗癌活性配合物及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| EE01 | Entry into force of recordation of patent licensing contract |
Application publication date: 20190726 Assignee: Guangxi Dingcong Technology Industry Co.,Ltd. Assignor: Yulin Normal University Contract record no.: X2022450000345 Denomination of invention: A Drug Root Base Platinum (II) Complex Targeting Human bladder cancer and Its Synthesis and Application Granted publication date: 20210827 License type: Common License Record date: 20221219 |
|
| EE01 | Entry into force of recordation of patent licensing contract |