CN110037984A - 一种治疗动物皮肤真菌病的微乳剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗动物皮肤真菌病的微乳剂及其制备方法，包括狼毒根和乙醇，本发明具有高效、低毒或者无毒、无污染、选择性高、不易产生抗药性还可以改善草原环境外，还可以降低治疗动物皮肤病药物成本，降低动物真菌皮肤病的复发。该狼毒微乳剂既可以高效治愈动物皮肤真菌病又稳定性良好，蒸馏水、去离子水、硬水、自来水对其影响较小，从节约成本来看，自来水即可满足要求，而且具有较宽的温度与酸碱度范围。

Description

一种治疗动物皮肤真菌病的微乳剂及其制备方法

技术领域：

本发明涉及畜牧业动物疫病防控产品领域领域，具体为一种治疗动物皮肤真菌病的微乳剂及其制备方法。

背景技术：

近年来，随着人们生活水平的提高，犬、猫受到越来越多人的亲睐。犬、猫在给人类带来欢乐的同时，也带来人畜共患病的威胁。因此，人和犬猫皮肤真菌的相互感染也成为危害社会公共卫生的一大难题。动物皮肤真菌病是由最容易感染的皮肤真菌包括全小孢子菌、石膏样小孢子菌和须毛癣菌三种病原。犬的皮肤癣菌病中有50-70％是由犬小孢子菌感染造成，兔子的高达90-98％。患病动物以皮肤发生明显的瘙痒，经常可以听/见到动物瘙痒的声音或者动作。近年来随着抗真菌化学药物大量使用，真菌耐药性增强，药物残留量增高，并且抗生素类药物产生的毒副作用也逐渐表现出来，治疗真菌感染愈发困难。瑞香狼毒来源于天然，与环境相容，可在环境中降解或者代谢为简单的天然化合物。将对草原有害的瑞香狼研制出外用药物，用来治疗浅部真菌感染，不但可以降低化学药的使用量，又可减少草原退化，同时降低药物成本。

发明内容：

本发明的目的是针对现有技术的缺陷，提供一种治疗动物皮肤真菌病的微乳剂及其制备方法，以解决上述背景技术提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种治疗动物皮肤真菌病的微乳剂，所述狼毒根为10公斤和适量的乙醇。

一种治疗动物皮肤真菌病的微乳剂的制备方法，具体步骤如下；

步骤一：将狼毒根干燥后，粉碎为60-80目，准确称取粉末10公斤，用75％的乙醇按照1∶4-1∶8的比例采用20-30℃浸泡48-72小时提取，或者采用间歇式超声波提取，提取温度为30-55℃，每批原材料采用同种溶剂连续提取3次，每次提取30-50min，超声功率为1.8w，每次超声时间为6s，两次超声之间的时间间隔为4s；

步骤二：提取液通过真空泵负压蒸除溶剂后，得狼毒根粗提物，回收溶剂可反复使用，总提取率一般为13％-20％；

步骤三：狼毒根粗提物直接用于配制狼毒微乳剂；

步骤四：以上狼毒根粗提物与75％乙醇按1g∶5ml的比例在30-50℃温度条件下溶解，加入4ml的吐温80，用蒸馏水定容20ml，放入反应釜混合均匀；

步骤五：在进行浸泡与配制时候，避免阳光直射，配制过程要当天完成罐装。

本发明的有益效果是：本发明具有高效、低毒或者无毒、无污染、选择性高、不易产生抗药性还可以改善草原环境外，还可以降低治疗动物皮肤病药物成本，降低动物真菌皮肤病的复发，该狼毒微乳剂既可以高效治愈动物皮肤真菌病又稳定性良好，蒸馏水、去离子水、硬水、自来水对其影响较小，从节约成本来看，自来水即可满足要求，而且具有较宽的温度与酸碱度范围。

附图说明

附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。

图1是本发明实验室抑菌试验结果图；

图2是本发明PH值对微乳剂的抗菌效果影响图；

具体实施方式：

下面对本发明的较佳实施例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能更易被本领域人员理解，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。

本发明提供一种技术方案：一种治疗动物皮肤真菌病的微乳剂，狼毒根为10公斤和适量的乙醇。

一种治疗动物皮肤真菌病的微乳剂的制备方法，具体步骤如下；

步骤一：将狼毒根干燥后，粉碎为60-80目，准确称取粉末10公斤，用75％的乙醇按照1∶4-1∶8的比例采用20-30℃浸泡48-72小时提取，或者采用间歇式超声波提取，提取温度为30-55℃，每批原材料采用同种溶剂连续提取3次，每次提取30-50min，超声功率为1.8w，每次超声时间为6s，两次超声之间的时间间隔为4s；

步骤二：提取液通过真空泵负压蒸除溶剂后，得狼毒根粗提物，回收溶剂可反复使用，总提取率一般为13％-20％；

步骤三：狼毒根粗提物直接用于配制狼毒微乳剂；

步骤四：以上狼毒根粗提物与75％乙醇按1g∶5ml的比例在30-50℃温度条件下溶解，加入4ml的吐温80，用蒸馏水定容20ml，放入反应釜混合均匀；

步骤五：在进行浸泡与配制时候，避免阳光直射，配制过程要当天完成罐装。

实施例1：

助溶剂的初选考虑其在动物体表的侵润、扩散、渗透问题，初步选定甲醇、乙醇、丙二醇、PEG400，4种有机溶剂与超纯水作为助溶剂，甲醇、乙醇、PEG400 可以溶解瑞香狼毒提取物，溶解量最多的甲醇与乙醇，一周后外观形状筛选结果见表1。

表1

注`“×”表示排除“√”表不可进行进一步分析。

表1结果显示，瑞香狼毒提取物在甲醇、75％乙醇、95％乙醇、乙醇中均能完全溶解。因此，对这4种助溶剂做进一步分析试验，测量10ml助溶剂对瑞香狼毒的溶解情况，从而进行筛选，结果见表2。

表2

表2结果显示，75％乙醇对瑞香狼毒提取物的溶解度最大，因而选择75％乙醇为最优的溶剂，也确定了本制剂的最大药物含量为0.2g/ml。

2、乳化剂的筛选是形成透明均一制剂的必要条件，乳化剂筛选一周后外观形状如下：

表3

表3结果显示，能产生透明均一微乳剂的是吐温-80，加入吐温 -60、SDS后溶液浑浊或不透明，不能形成标准的涂搽剂，因此选择吐温-80作为乳化剂。

3、在确定了主药为瑞香狼毒提取物、助溶剂为乙醇、乳化剂为吐温 -80后，通过以宠物皮肤癣菌病病原真菌犬小孢子菌为代表菌株，根据正交试验设计见下表4，最后用超纯水定容到20ml(主药成分含量为0.1g/ml)，经过实验室抑菌试验结果见图a-i。图a-c中乳化剂吐温-80∶助溶剂75％乙醇分别为：3∶5、3∶10、3∶15，图d-f中乳化剂吐温-80∶助溶剂75％乙醇分别为：4∶5、4∶10、4∶15，图d-f 中乳化剂吐温-80∶助溶剂75％乙醇分别为：5∶5、5∶10、5∶15，设置空白对照。有图中可以看出乳化剂吐温-80∶助溶剂75％乙醇为4∶ 10时，抑菌圈最大，抑菌效果最好。所以吐温-80为最佳乳化剂，75％乙醇为最佳助溶剂，吐温-80∶助溶剂75％乙醇＝4∶10，定容到20ml，药物含量为0.1g/ml时为瑞香狼毒涂搽剂最佳生产工艺。

表4

4、临床试验将自然感染皮肤真菌病比特成犬30条采取随机设3个组，阳性对照组盐酸特比萘酚10条、阴性对照组10条、治疗组10条，治疗组用本次研制的狼毒微乳剂涂搽，阳性对照组用盐酸特比茶酚凝胶涂搽，仅对患部涂搽治疗，隔日给药1次，连用3次；阴性对照组用水洗患部。首次给药后每日观察疗效。扩大临床试验根据临床症状，选取临床自然发病病例家兔186只，分成2组，对照组药物为酸特比茶酚凝胶，试验组用本狼毒微乳剂涂搽。统计并记录治疗效果和无效果情况。结果见表1与2。

表1

表2

5、用蒸馏水、去离子水、硬水、自来水分别配制微乳剂，超纯水作为对照，观察并记录水质对涂搽剂外观的影响，结果见表3。

表3

注：“+”表示澄清、透明、均一，“-”表示浑浊。

初始外观与静置72h(3d)后各溶液现象都没有变化，都形成了稳定均一的涂搽剂体系，水质对所配制的涂搽剂的影响不大，说明该制剂复配体系对水质的适应能力很强，自来水即可满足要求。

6、将配好的微乳剂冷储、热储及常温储存看其对稳定性的影响，并分别在0，3，6，9，12，15d时记录其外观。冷冻起来的一组于室温下化开再观察，结果见表5

表5

注：“+”表示澄清、透明、均一，“-”表示浑浊。

从表中可以看出，在北方随天气变化室内温度的范围内，冷储或热储对狼毒微乳剂基本无影响。冷储期间，溶液澄清透明，符合要求，但是从第3d开始，涂搽剂中的水分有点凝结，导致涂搽剂变得黏稠。热储和常温下的结果一致，涂搽剂仍然保持澄清透明，说明狼毒微乳剂能适应的环境温度变化范围较宽，能满足相关要求。

7、将配好微乳剂，测定其PH值为5.0，用准备的50％HCL、与50％NaOH 调节pH值，观察制剂的外观结果见表4。从表中可发现，微乳剂外观除颜色加深外，无其他变化。图w-z分别为培养基中加入20ul超纯水与PH值4.5、PH5.0、PH8.5的微乳剂后，冷却打孔注入犬小孢子菌的生长情况，从图中可以看出PH值对微乳剂的抗菌效果影响不明显。

表7

注：“+”表示澄清、透明、均一，“-”表示浑浊。如图2所示

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护。

Claims (2)

1.一种治疗动物皮肤真菌病的微乳剂，包括狼毒根和乙醇，其特征在于，所述狼毒根为10公斤和适量的乙醇。

2.一种如权利要求1所述的治疗动物皮肤真菌病的微乳剂的制备方法，其特征在于：具体步骤如下；

步骤一：将狼毒根干燥后，粉碎为60-80目，准确称取粉末10公斤，用75％的乙醇按照1∶4-1∶8的比例采用20-30℃浸泡48-72小时提取，或者采用间歇式超声波提取，提取温度为30-55℃，每批原材料采用同种溶剂连续提取3次，每次提取30-50min，超声功率为1.8w，每次超声时间为6s，两次超声之间的时间间隔为4s；

步骤二：提取液通过真空泵负压蒸除溶剂后，得狼毒根粗提物，回收溶剂可反复使用，总提取率一般为13％-20％；

步骤三：狼毒根粗提物直接用于配制狼毒微乳剂；

步骤四：以上狼毒根粗提物与75％乙醇按1g∶5ml的比例在30-50℃温度条件下溶解，加入4ml的吐温80，用蒸馏水定容20ml，放入反应釜混合均匀；

步骤五：在进行浸泡与配制时候，避免阳光直射，配制过程要当天完成罐装。