CN109942696A - 长效化胰高血糖素样肽－1（glp－1）类似物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一类长效化胰高血糖素样肽‑1(GLP‑1)类似物及其合成方法。通过对GLP‑1进行改造得到具有更长药理作用时间的GLP‑1类似物，可增加缀合物与血清白蛋白的结合，延长肽链的作用时间，可避免肾脏的快速滤过和酶代谢失活，因而该类化合物的半衰期及体内降糖作用时间显著延长。

Description

长效化胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类似物及其应用

技术领域

本发明涉及糖尿病治疗领域的长效化胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类似物及其应用。

背景技术

糖尿病是继肿瘤、心血管疾病之后第三大严重威胁人类健康的慢性非传染性疾病。目前，全球约有3亿糖尿病患者，预计到2025年将增加至5亿。临床上采用胰岛素强化治疗的方法来延缓糖尿病进程，但是注射胰岛素会有低血糖的风险。治疗效果受到剂量、注射部位、注射途径等因素的影响，且个体差异较大，使用胰岛素稍有不慎，就会出现严重的低血糖副作用。

胰高血糖素样肽-1(GLP-1)是一种葡萄糖依赖性肠促降血糖多肽激素，GLP-1刺激胰岛素分泌而不出现低血糖，这种葡萄糖依赖性的促胰岛素分泌特性，避免了糖尿病治疗中常存在的低血糖危险。因此，GLP-1作为一种2型糖尿病治疗药物具有广阔的开发前景。

但是天然GLP-1在糖尿病治疗上具有诸多缺点，例如，它在体内易被二肽基肽酶IV(DPP-IV)快速降解。DPP-IV可特异性识别GLP-1的N末端8位丙氨酸(Ala)残基，从肽链N末端8位丙氨酸(Ala)处切除二肽，使其转变为无活性的形式，其体内半衰期仅5min左右。GLP-1肽链N末端是与GLP-1受体的结合部位，若其组氨酸残基丧失，将导致GLP-1完全失去生物活性。目前普遍使用的延长GLP-1体内半衰期的修饰策略主要是对8位进行修饰，使得GLP-1能抵抗DPP-IV酶的降解，另外，将GLP-1肽链N端8位和9位的氨基酸互换也可以达到此目的。例如，艾塞那肽和利西拉来是减少DPP-IV酶代谢的典型短效GLP-1受体激动剂。然而，由于GLP-1会被肾脏快速滤过消除，抵抗DPP-IV酶的降解只能一定程度地延长GLP-1的半衰期。

本专利中，在GLP-1(7-36)-NH₂的基础上，采用半胱氨酸-马来酰亚胺缀合策略，设计合成了一类GLP-1类似物。该策略通过半胱氨酸的巯基与马来酰亚胺发生迈克尔加成反应来方便高效地引入小分子基团，可避免在早期GLP-1受体长效化激动剂的研发过程中，采用赖氨酸作为小分子基团连接臂所引起的选择性差、反应不方便等问题。

本专利中，创新性的将带有羧基末端的脂肪酸缀合到GLP-1肽链上，意外的发现，与不带羧基末端的脂肪酸相比，带有羧基末端的脂肪酸具有较高的血清白蛋白结合率，可增加缀合物与血清白蛋白的结合率，大大的延长了化合物的半衰期，可避免GLP-1的肾脏快速滤过和代谢失活，因而该类化合物的半衰期及体内降糖作用时间显著延长。综上所述，该类化合物具有优秀的成药性，能够减少病人多次给药的痛苦，具有实用性，是II型糖尿病治疗领域中极具发展前景的药物。

发明内容

在第一方面，本发明涉及一类胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类似物，其序列为：

His-Xaa1-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Xaa2-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-

Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-NH₂；或

His-Xaa1-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-

Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Xaa2-NH₂；

其中

Xaa1取自Aib，Arg，Asn，Asp，Cys，Gln，Glu，Gly，His，Ile，Leu，Lys，Met，Phe，Pro，Ser，Thr，Trp，Tyr或Val；

Xaa2为化学修饰的Cys，其结构为：

这里：n选自1～20。

本发明的优选方案，其特征是，

His-Xaa1-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Xaa2-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-

Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-NH₂；或

His-Xaa1-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-

Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Xaa2-NH₂；

其中

Xaa1为Gly；

Xaa2为化学修饰的Cys，其结构为：

这里：n选自1～20。

其中，优选的化学修饰Cys结构为

在一个实施方案中，本发明涉及具有如下序列的GLP-1类似物：

在一个实施方案中，本发明涉及具有如下序列的GLP-1类似物：

在第二方面，本发明提供了一种药物组合物，包括治疗有效量的至少一种上述化合物和其药学上可接受的盐，或药学上可接受的载体或稀释剂。同时，本发明进一步提供了上述化合物和其药学上可接受的盐，或药学上可接受的载体或稀释剂在制备用于治疗和预防糖尿病的药物中的运用。

在第三方面，本发明还提供了上述化合物的制备方法，本发明采用固相合成策略高效快速地合成得到上述目标化合物。

本发明的有益效果：

1、提出的一种长效化GLP-1类似物，与上市药物艾塞那肽和利拉鲁肽相比，具有更强的GLP-1受体激动活性。

2、提出的一种长效化GLP-1类似物，具有优异的长效化降血糖作用，降糖作用维持时间高达30h以上，较每天给药一次的利拉鲁肽相比显著延长，该类长效化GLP-1类似物具有较好的成药性，能够减少病人多次给药的痛苦，是现有的新化学实体中具有发展前景的药物。

3、提出的一种长效化GLP-1类似物，收率高、合成周期短、粗品纯化容易、生产成本低，易于工业自动化生产。

综上所述，本发明提供的GLP-1类似物，结构全新，比内源性GLP-1更加稳定，比上市药物利拉鲁肽的降血糖作用时间更长，适合作为糖尿病治疗药物的新型活性成分，给糖尿病治疗领域带来新的突破。

以下是本发明中涉及的GLP-1类似物的相关药理实验方法以及结果：

1、GLP-1类似物的受体激动活性实验

HEK293细胞共转染编码GLP-1R的cDNA，细胞系表达并利用Western Blot检测已构建的HEK293细胞中GLP-1R的蛋白水平，以考察是否建立了稳定高表达的GLP-R-HEK293细胞株。受体激动活性实验中，首先，将细胞种于96孔板中，2h后，化合物用DMSO溶解，使用含有0.1％牛血清蛋白的培养基稀释至不同倍数，加入共转染的GLP-1R-HEK293细胞中。孵育20min后，使用Cisbo公司的ELISA试剂盒检测相应的cAMP值，非线性回归后计算化合物的EC₅₀数值。

表1 EC₅₀ values of compounds

如表1所示，所有化合物对GLP-1R的激动活性都得到保留，与上市药物利拉鲁肽相比有明显提高。其中化合物SEQ.ID NO：1对GLP-1R的激动活性与内源性GLP-1相近，较利拉鲁肽提高了10倍左右。

2、GLP-1类似物的腹腔葡萄糖耐量实验

正常昆明小鼠，随机分组，每组8只，小鼠饲养在标准化动物房中。实验前12小时禁食，只给予饮水。每组小鼠在给药GLP-1类似物之前，测初始血糖值，定为-30min，然后腹腔注射15nmol/kg的GLP-1类似物。30min后，腹腔注射18mmol/kg的葡萄糖溶液，定为0min，对照组注射同体积的生理盐水或50nmol/kg的艾塞那肽。在0，15，30，45，60，120min用血糖仪测定血糖水平，检测GLP-1类似物的降糖活性。

表2 GLP-1类似物的腹腔葡萄糖耐量实验结果

Results are expressed as mean±SD，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001 vssaline.

如表2所示，降血糖实验结果表明，本发明中涉及的GLP-1类似物降血糖效果与艾塞那肽50nmol/kg相当。

3、GLP-1类似物的隔日糖耐量实验

腹腔葡萄糖耐量实验结束后，立即正常饮食饮水10h，然后禁食12h，再次进行小鼠腹腔葡萄糖耐量实验。各组小鼠腹腔注射18mmol/kg的葡萄糖溶液，注射葡萄糖时间定为0min，在0、15、30、45、60和120min用血糖仪测定血糖水平。

表3 Exendin-4及GLP-1类似物隔日降血糖的效应

Results are expressed as mean±SD，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001 vssaline.

如表3所示，隔日糖耐量实验结果表明，本发明涉及的GLP-1类似物在体内代谢24h后仍然具有降低血糖作用，而艾塞那肽早已失去活性。说明修饰后得到的GLP-1类似物的降糖时间都显著延长，降血糖作用可维持近30h。

4、GLP-1类似物的稳定血糖实验

测定STZ诱导的糖尿病模型小鼠的血糖，选择数值高于20mmol/L的小鼠进行随机分组，每组六只，实验期间小鼠自由采食。阳性对照组腹腔注射艾塞那肽或利拉鲁肽，剂量为50nmol/kg，阴性对照组腹腔注射生理盐水，给药组分别注射50nmol/kg的GLP-1类似物。0h给予化合物，分别在0、0.5、1、2、3、4、6、8、10、12、16、24、36和48h使用血糖仪测定血糖水平。评价指标为腹腔注射化合物后，小鼠血糖数值低于8.35mmol/L的时间。

表4 GLP-1类似物的稳定血糖实验

Results are expressed as mean±SD，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001 vssaline.

由表4可见，SEQ.ID NO：6稳定血糖的时间可达29.9h，SEQ.ID NO：3稳定血糖的时间也达到了24.9h，高于利拉鲁肽的12.1h或艾塞那肽的3.5h。稳定血糖实验表明，本专利中涉及的长效化GLP-1类似物具有良好的长效化降糖效果，可以达到更优的长效化降糖效果，具有开发成为每两天给药1次的降糖药物的潜力。

具体实施方式

在本说明书全文中采用以下缩写：

Ala：丙氨酸；Arg：精氨酸；Asn：天冬酰胺；Asp：天门冬氨酸；DCM：二氯甲烷；DIC：N，N’-二异丙基碳二亚胺；DIEA：N，N′-二异丙基乙胺；DMF：二甲基甲酰胺；DMSO：二甲亚砜；ESI-MS：电喷雾质谱；Fmoc：N-9-芴甲氧羰基；Gln：谷氨酰胺；Glu：谷氨酸；Gly：甘氨酸；HBTU：苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯；His：组氨酸；HOBt：1-羟基-苯并三氮唑；Ile：异亮氨酸；Leu：亮氨酸；Lys：赖氨酸；Met：甲硫氨酸；NMP：N-甲基吡咯烷酮；Phe：苯丙氨酸；Pro：脯氨酸；Ser：丝氨酸；Thr：苏氨酸；Trp：色氨酸；Tyr：酪氨酸；Val：缬氨酸。

本发明是通过下列实施例来进行说明的，但这些实施例不做任何限制本发明的解释。

实施例1

的合成

1、半胱氨酸改构多肽肽链的合成

1.1、树脂的溶胀

称取Fmoc-Rink amide-MBHA Resin 50mg(取代度0.4mmol/g)，经DCM 7mL溶胀30min，抽滤去DCM，再用NMP 10mL溶胀30min，最后分别用NMP，DCM，NMP 7mL冲洗干净。

1.2、Fmoc保护基的脱除

将溶胀好的树脂放入反应器中，加入含0.1M HOBt的25％哌啶/NMP(V/V)溶液7mL，反应1min，结束后滤去溶液；再加入含0.1M HOBt的25％哌啶/NMP(V/V)溶液7mL，反应4min，结束后滤去溶液，用NMP洗涤干净。得到脱去初始连接的Fmoc保护基的树脂。1.3、Fmoc-Arg(pbf)-Rink amide-MBHA Resin的合成

将Fmoc-Arg(pbf)-OH(32.0mg，0.04mmol)，HBTU(15.1mg，0.04mmol)，HOBt(5.4mg，0.04mmol)和DIPEA(13.9μL，0.08mmol)溶于NMP 10mL中，再将此溶液加入步骤1.1得到的树脂中，反应7min，结束后滤去反应液，用DCM和NMP各7mL洗涤树脂3次。

1.4、偶合效率的检测

取少量树脂颗粒DMF洗涤，放入透明小瓶中加入3滴1％的溴酚蓝溶液，常温振摇3分钟，树脂显蓝色即为阳性，透明为阴性。若为阴性才可进入下一个偶合循环。

1.5、肽链的延长

按照肽链的序列，重复上述脱保护和偶合的步骤依次连接上相应的氨基酸，依次连接上相应的氨基酸直至肽链合成完毕，得到连有多肽链的树脂。

1.6、树脂上多肽的裂解

将上述得到的连有多肽链的树脂放入反应瓶中，加入裂解剂Reagent K(TFA/苯甲硫醚/水/苯酚/EDT，82.5∶5∶5∶5∶2.5，V/V)10mL，先在0℃下振摇30min，再在常温下反应3h。反应结束后抽滤，加少量TFA和DCM洗涤三次，合并滤液。将滤液加入大量的冰乙醚中析出白色絮状沉淀，冷冻离心得到目标多肽的粗品。最终得到化合物的粗品62.8mg，收率为95.2％。

2、化学修饰基的合成

3-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H-吡咯-1-基)丙酸的合成

将β-氨基丙氨酸(0.36g，4mmol)与马来酸酐(0.47g，4.8mmol)溶于冰醋酸中，超声溶解后，120℃回流反应6h，薄层板检测反应完全后，将反应液冷却至室温，倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次(3×20mL)，合并上层萃取液，萃取液使用饱和食盐水洗3次，无水Na₂SO₄干燥过夜。萃取液减压蒸馏，得到粗品，粗品经柱层析(乙酸乙酯/石油醚)分离得淡黄色纯品0.54g，产率80％，mp 107-109℃。

¹H-NMR(DMSO-d₆，300MHz)：δppm：12.83(s，1H，-COOH)，7.52(s，2H，-COCH＝CHCO-)，4.13(t，J＝7.1Hz，2H，-NCH₂ )，3.00(t，J＝7.2Hz，2H，-CH₂ COOH).MS(ESI，m/z)：168.0[M-H]^-。

3、化学修饰的Cys₁₂-GLP-1缀合物的合成与纯化

将上步得到的3-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H-吡咯-1-基)丙酸用DMSO溶解配成约10mg/mL的溶液，将Cys替换的改构GLP-1多肽类似物也溶解于DMSO，两者超声混合后室温下搅拌反应，加入20μl DIEPA以加快反应进行，使用LC-MS监测反应情况。色谱条件为：C18反相柱(1.7μm 2.1×50mm，Waters)；流动相A：0.1％甲酸/水(V/V)，流动相B：0.1％甲酸/乙腈(V/V)，流动相梯度：流动相B 10％～90％，2min，B 90％～90％，3min；流速为0.3ml/min；紫外检测波长为214nm。反应结束后，反应液使用含有1％三氟乙酸的乙腈稀释后高速离心并使用0.45μm的微孔滤膜过滤后，使用制备液相色谱进行纯化，色谱条件为：C18反相柱(320mm×28mm，5μm)；流动相A：0.1％三氟醋酸/水(V/V)，流动相B：0.1％三氟醋酸/乙腈(V/V)；流动相梯度：流动相B 40％～80％，30min；80％～85％，10min；85％～95％，10min；95％～40％，10min；流速为5ml/min，检测波长为214nm。收集溶液，减压蒸馏去除乙腈，冻干即得纯品。理论相对分子质量为3469.8。ESI-MS m/z：Calcd[M+3H]³⁺1157.6，[M+4H]⁴⁺868.5；Found[M+3H]³⁺1157.6，[M+4H]⁴⁺868.6。

实施例2

的合成。

6-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H-吡咯-1-基)己酸的合成

将6-氨基己酸(0.52g，4mmol)与马来酸酐(0.47g，4.8mmol)溶于冰醋酸中，超声溶解后，120℃回流反应6h，薄层板检测反应完全后，将反应液冷却至室温，倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次(3×20mL)，合并上层萃取液，萃取液使用饱和食盐水洗3次，无水Na₂SO₄干燥过夜。萃取液减压蒸馏，得到粗品，粗品经柱层析(乙酸乙酯/石油醚)分离得淡黄色纯品0.64g，产率75％，mp 90-92℃。

¹H-NMR(DMSO-d₆，300MHz)：δppm：12.45(s，1H，-COOH)，7.50(s，2H，-COCH＝CHCO-)，3.88(t，2H，J＝7.2Hz，-NCH₂-)，2.68(t，2H，J＝7.4Hz，-CH₂ COOH)，2.04-1.94(m，4H，-NCH₂ )，1.74-1.69(m，2H，-CH₂ -).MS(ESI，m/z)：210.2[M-H]^-。

根据实施例1所述的方法，根据相应的序列合成得到多肽链。将上步得到的6-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H-吡咯-1-基)己酸用DMSO溶解配成约10mg/mL的溶液，将Cys替换的改构GLP-1多肽类似物也溶解于DMSO，两者超声混合后室温下搅拌反应，加入20μl DIEPA以加快反应进行，纯化方法同实施例1。理论相对分子质量为3511.7。ESI-MS m/z：Calu[M+3H]³⁺1171.6，[M+4H]⁴⁺878.9，Found[M+3H]³⁺1171.8，[M+4H]⁴⁺878.0。

实施例3

12-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H-吡咯-1-基)十二酸的合成

将12-氨基十二酸(0.86g，4mmol)与马来酸酐(0.47g，4.8mmol)溶于冰醋酸中，超声溶解后，120℃回流反应6h，薄层板检测反应完全后，将反应液冷却至室温，倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次(3×20mL)，合并上层萃取液，萃取液使用饱和食盐水洗3次，无水Na₂SO₄干燥过夜。萃取液减压蒸馏，得到粗品，粗品经柱层析(乙酸乙酯/石油醚)分离得淡黄色纯品0.88g，产率75％，mp 91-92℃。

¹H-NMR(DMSO-d₆，300MHz)：δppm：12.42(s，1H，-COOH)，7.50(s，2H，-COCH＝CHCO-)，3.88(t，2H，J＝7.0Hz，-NCH₂-)，2.68(t，J＝7.3Hz，2H，-CH₂ COOH)，2.00-1.96(m，4H，-NCH₂CH₂ (CH₂)₇CH₂ )，1.73(s，14H，-NCH₂CH₂(CH₂)₇ CH₂).MS(ESI，m/z)：294.1[M-H]^-。

根据实施例1所述的方法，根据相应的序列合成得到多肽链。将上步得到的12-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H-吡咯-1-基)十二酸用DMSO溶解配成约10mg/mL的溶液，将Cys替换的改构GLP-1多肽类似物也溶解于DMSO，两者超声混合后室温下搅拌反应，加入20μl DIEPA以加快反应进行，纯化方法同实施例1。理论相对分子质量为3595.9。ESI-MS m/z：Calcd[M+3H]³⁺1199.6，[M+4H]⁴⁺900.0，Found[M+3H]³⁺1199.6，[M+4H]⁴⁺900.4。

实施例4

根据实施例1所述的方法，根据相应的序列合成得到多肽链。将上步得到的3-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H-吡咯-1-基)丙酸用DMSO溶解配成约10mg/mL的溶液，将Cys替换的改构GLP-1多肽类似物也溶解于DMSO，两者超声混合后室温下搅拌反应，加入20μl DIEPA以加快反应进行，纯化方法同实施例1。理论相对分子质量为3556.9。ESI-MS m/z：Calcd[M+3H]³⁺1186.6，[M+4H]⁴⁺890.2；Found[M+3H]³⁺1186.7，[M+4H]⁴⁺890.8。

实施例5

根据实施例1所述的方法，根据相应的序列合成得到多肽链。将上步得到的6-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H-吡咯-1-基)己酸用DMSO溶解配成约10mg/mL的溶液，将Cys替换的改构GLP-1多肽类似物也溶解于DMSO，两者超声混合后室温下搅拌反应，加入20μl DIEPA以加快反应进行，纯化方法同实施例1。理论相对分子质量为3598.8。ESI-MS m/z：Calcd[M+3H]³⁺1200.6，[M+4H]⁴⁺900.7；Found[M+3H]³⁺1200.2，[M+4H]⁴⁺900.3。

实施例6

根据实施例1所述的方法，根据相应的序列合成得到多肽链。将上步得到的12-(2，5-二氢-2，5-二氧代-1H-吡咯-1-基)十二酸用DMSO溶解配成约10mg/mL的溶液，将Cys替换的改构GLP-1多肽类似物也溶解于DMSO，两者超声混合后室温下搅拌反应，加入20μl DIEPA以加快反应进行，纯化方法同实施例1。理论相对分子质量为3686.0。ESI-MS m/z：Calcd[M+3H]³⁺1228.7，[M+4H]⁴⁺921.8；Found[M+3H]³⁺1228.3，[M+4H]⁴⁺921.0。

Claims (9)

1.本发明涉及一类缀有脂肪酸的胰高血糖素样肽-1类似物，其特征是，多肽氨基酸序列为：

His-Xaa1-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Xaa2-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-NH₂；或

His-Xaa1-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Xaa2-NH₂；

其中

Xaa1取自Aib，Arg，Asn，Asp，Cys，Gln，Glu，Gly，His，Ile，Leu，Lys，Met，Phe，Pro，Ser，Thr，Trp，Tyr或Val；

Xaa2为化学修饰的Cys，其结构为：

这里：n选自1～20。

2.根据权利要求1所述的化合物，其特征是，

His-Xaa1-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Xaa2-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-NH₂；或

His-Xaa1-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Xaa2-NH₂；

其中

Xaa1为Gly；

Xaa2为化学修饰的Cys，其结构为：

这里：n选自1～20。

3.根据权利要求1至2项中任意一项所述的化合物，选自：

4.根据权利要求1至3项中任意一项的化合物所制备一种药学上可接受的盐，所说的药学上可以接受的盐是与盐酸，氢溴酸，硫酸，硝酸或磷酸；琥珀酸，马来酸，醋酸，富马酸，柠檬酸，枸橼酸，酒石酸，苯甲酸，苯磺酸，甲磺酸或萘磺酸形成的盐。

5.根据权利要求1至3项中任意一项的化合物所制备的药剂，所说的药剂是任何一种药剂学上所说的片剂、胶囊、酏剂、糖浆、锭剂、吸入剂、喷雾剂、注射剂、膜剂、贴剂、散剂、颗粒剂、块剂、乳剂、栓剂、复方制剂。

6.根据权利要求1至3项中任意一项的化合物，在制备治疗或预防糖尿病的药物中的应用。

7.根据权利要求1至3项中任意一项的化合物所制备的一种药学上可接受的盐，在制备治疗或预防糖尿病的药物中的应用。

8.根据权利要求1至3项中任意一项的化合物所制备的药剂，在制备治疗或预防糖尿病的药物中的应用。

9.根据权利要求1至3项中任意一项的化合物的制备方法，包括生物表达、液相合成和固相合成制备方法。