CN109867731A - 一种提取香菇多糖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于植物有效成分的提取领域,公开了一种提取香菇多糖的方法,该方法包括如下步骤:1)利用载冷剂浸渍冷冻剂香菇原料,将冷冻浸渍后的香菇原料粉碎过筛获得香菇粉末;2)将粉碎后的香菇粉末加水提取,离心收集提取液,浓缩;3)向浓缩液加入乙醇静置沉淀,离心分离出香菇多糖。本发明所述方法具有工艺简单,成本低,产品得率和稳定性高的特点。
Description
技术领域
本发明属于植物有效成分的提取领域,具体涉及一种提取香菇多糖的方法,尤其是一种可以提高香菇多糖提取率及稳定性的提取香菇多糖的方法方法。
背景技术
香菇,又名花菇、香蕈、香信、香菌、冬菇、香菰,为侧耳科植物香蕈的子实体。香菇是世界第二大食用菌,它是一种生长在木材上的真菌。味道鲜美,香气沁人,营养丰富。香菇富含维生素B群、铁、钾、维生素D原(经日晒后转成维生素D)。香菇素有山珍之王之称,是高蛋白、低脂肪的营养保健食品。香菇多糖是从优质香菇子实体中提取的有效活性成分,是香菇的主要活性成分,是一种宿主免疫增强剂。临床与药理研究报道香菇多糖具有调节免疫功能、抗肿瘤、抗病毒和刺激干扰素形成等作用;且大分子香菇多糖能显著提高生物活性。我国香菇多糖原料药的国家标准中对香菇多糖分子量的规定为:重均分子量为4×105~8×105Da,分子量大于2×104Da的组分不低于90%。
香菇多糖在医药和保健品领域的应用前景广阔。在医药领域,作为免疫辅助药物,能抑制肿瘤的发生、发展和转移,提高肿瘤对化疗药物的敏感性;与化疗剂联合使用,有减毒、增效、并增强患者机体的免疫功能。在保健品领域,香菇多糖胶囊(国药准字Z20080579),主要成份为葡聚糖、甘露糖肽等多糖以及多种氨基酸,具有抗肿瘤、治肝保肝、增强机体免疫力等作用;以香菇多糖为主要活性物的口服液,在增强机体免疫力方面作用显著。
目前,工业上主要采用热水浸提法对香菇子实体或粉碎颗粒进行多糖的提取,该方法能一定程度提取到香菇多糖,但无法最大效率的提取到具有活性成分的分子量相对较大的多糖组分,而且子实体和颗粒度的不均一很难提高多糖的提取效率及控制多糖的稳定性。目前,用子实体提取多糖的提取率仅有2%左右。
发明内容
有鉴于此,本发明的目的在于针对现有技术的缺陷,提供一种提取香菇多糖的方法,该方法可以提高大分子香菇多糖提取率及稳定性。
为实现本发明的目的,本发明采用如下技术方案:
一种提取香菇多糖的方法,包括如下步骤:
1)利用载冷剂完全浸渍冷冻香菇原料,将冷冻浸渍后的香菇原料粉碎过筛获得香菇粉末;
2)将粉碎后的香菇粉末加水提取,离心收集提取液,浓缩;
3)向浓缩液加入乙醇静置沉淀,离心分离出香菇多糖。
作为优选,步骤1)所述载冷剂由如下组分组成:
10~30wt%乙醇、5~15wt%甘油、1~5wt%氯化钠,余量为水。
作为优选,所述浸渍冷冻的时间为2~15min。
作为优选,步骤1)所述粉碎过程中加入液氮作为粉碎保护剂。即在液氮的保护下粉碎。
作为优选,步骤1)所述过筛后收集40~60目香菇粉末。
作为优选,步骤2)所述提取为搅拌控温式水提取。
作为优选,步骤2)所述搅拌控温式水提取的具体参数为:每次提取料液重量比为1:(8~15)、提取温度为100℃、提取时间为2~2.5h,提取次数为2次。
作为优选,步骤2)所述浓缩为提取液真空浓缩至可溶性固形物含量达到20~30%。
作为优选,步骤3)所述加入乙醇具体为加入2~5倍体积的75~95%乙醇水溶液。
作为优选,步骤3)所述静置为4℃中静止6~12小时。
作为优选,步骤2)和步骤3)所述离心为连续式高速离心分离设备离心。
由上述技术方案可知,本发明提供了一种提取香菇多糖的方法,该方法包括如下步骤:1)利用载冷剂完全浸渍冷冻香菇原料,将冷冻浸渍后的香菇原料粉碎过筛获得香菇粉末;2)将粉碎后的香菇粉末加水提取,离心收集提取液,浓缩;3)向浓缩液加入乙醇静置沉淀,离心分离出香菇多糖。本发明所述方法具有工艺简单,成本低,产品得率和稳定性高的特点。与现有技术相比,本发明所述方法至少具有以下优点之一:
1、通过载冷剂对香菇原料进行预处理及加液氮作为粉碎保护剂,使香菇原料变硬、变脆,对冷冻后香菇实体进行粉碎,可改善粉碎效果及减少香菇中活性多糖成分的损失,同时又有效地除去香菇的小分子糖,为制备大分子量香菇多糖提取液奠定基础;
2、对比现有工艺整个香菇提取,本发明所述方法将香菇粉碎至40~60目,能够显著提高香菇多糖的提取率。该原料颗粒度既能在水提后固液分离快速通过80目滤网,又能在连续式高速离心分离设备中快速分离出细小的水不溶物,突破了现有工艺中粉碎原料难以过滤或离心的问题,可实现产业化,显著降低生产成本和提高经济效益;
3、经过多批次生产,该工艺下的香菇多糖产品稳定性良好,多糖得率稳定,高于产品标准,解决现有工艺因产品稳定性问题产生的经济损失。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1实施例1中不同规格香菇样品对香菇多糖提取率的影响图;
图2实施例1中不同规格香菇样品提取的香菇多糖的GPC图;
图3实施例1中香菇多糖水溶液稳定性实验中多糖含量变化图;
图4实施例1中60目香菇样品提取的香菇多糖在不同时间的GPC图,图中由上至下依次是0、30、60、90天。
具体实施方式
本发明公开了一种提取香菇多糖的方法。本领域技术人员可以借鉴本文内容,适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是,所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的,它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及产品已经通过较佳实施例进行了描述,相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法进行改动或适当变更与组合,来实现和应用本发明技术。
为实现本发明的目的,本发明采用如下技术方案:
1、一种提取香菇多糖的方法,包括如下步骤:
1)利用载冷剂完全浸渍冷冻香菇原料,将冷冻浸渍后的香菇原料粉碎过筛获得香菇粉末;
2)将粉碎后的香菇粉末加水提取,离心收集提取液,浓缩;
3)向浓缩液加入乙醇静置沉淀,离心分离出香菇多糖。
本发明所述提取香菇多糖的方法首先步骤1)将载冷剂完全浸渍冷冻处理后的香菇原料,粉碎过筛获得香菇粉末。通过冷冻过程中载冷剂与香菇原料进行有效地热交换,使其变硬、变脆,有利于香菇原料后续粉碎,同时又有效地除去香菇的小分子糖,为制备大分子量香菇多糖提取液奠定基础。
在一些实施方案中,步骤1)所述载冷剂由如下组分组成:
10~30wt%乙醇、5~15wt%甘油、1~5wt%氯化钠,余量为水。
所述浸渍冷冻的时间为2~15min。
在一些具体实施例中,所述载冷剂为由30%乙醇、5%甘油、1%氯化钠与64%水组成。在另一些具体实施例中,所述载冷剂为由10%乙醇、15%甘油、5%氯化钠与70%水组成。
在一些实施方案中,步骤1)所述粉碎是在液氮的保护下粉碎,以使粉碎效果得到改善,同时减少香菇中的活性成分的损失。
进一步的,在一些实施方案中,步骤1)所述过筛后收集40~60目香菇粉末。粉碎后的香菇原料在40~60目之间的颗粒度范围内,既能在后续水提后固液分离快速通过80目滤网,又能在后续离心过程中通过连续式高速离心分离设备快速分离出细小的水不溶物。
本发明所述提取香菇多糖的方法步骤2)将粉碎后的香菇粉末加水提取,离心收集提取液,浓缩。
在一些实施方案中,步骤2)所述提取为搅拌控温式水提取。与常见的非搅拌式浸渍的工艺相比,不仅缩短了提取过程,而且香菇多糖提取率显著升高,固形物提取率达到5.0%左右,是常见的非搅拌式浸渍工艺的2~3倍。
进一步的,在一些实施方案中,所述搅拌控温式水提取的具体参数为:每次提取料液重量比为1:(8~15)、提取温度为100℃、提取时间为2~2.5h,提取次数为2次。在一些具体实施例中,所述搅拌控温式水提取具体为:每次加入10倍重量的水,100℃,提取2次,每次提取2h。
在一些实施方案中,在提取后还包括提取液过筛的步骤。在一些具体实施例中,所述过筛为过80目筛。
本发明所述提取香菇多糖的方法步骤2)在加水提取香菇多糖后离心收集提取液。
在一些实施方案中,步骤2)所述离心为连续式高速离心分离设备离心。以去除香菇多糖水提物中残存的细小的水不溶物。
本发明所述提取香菇多糖的方法步骤2)在加水提取香菇多糖后离心收集提取液。
在一些实施方案中,步骤2)所述浓缩为提取液真空浓缩至可溶性固形物含量达到20~30%。
本发明所述提取香菇多糖的方法步骤3)采用醇沉工艺加入乙醇静置分离香菇多糖。
在一些实施方案中,步骤3)所述加入乙醇具体为加入2~5倍体积的75~95%乙醇水溶液。在一些具体实施例中,加入3倍浓缩液体积的85%乙醇,通过搅拌充分混匀。
在一些实施方案中,步骤3)所述静置为4℃中静止6~12小时。在一些具体实施例中,在4℃中静止8小时。
在一些实施方案中,步骤3)所述离心为连续式高速离心分离设备离心获得多糖沉淀。
本发明所述方法制得的香菇多糖可以作为原料制成含有香菇多糖的相关产品,如含有香菇多糖的药品、含有香菇多糖的保健食品等。
在一些实施方案中,本发明采用控温搅拌进行香菇多糖产品的配制。将制得的香菇多糖复溶后,加入配料罐中,温度保持在50~60℃,配制成香菇多糖含量3~5%的香菇多糖水溶液。物料充分搅拌均匀后,经过2次200目筛网过滤,并灌装进口服液瓶。在119℃±1℃条件下灭菌26分钟,获得香菇多糖口服液产品。
由上述技术方案可知,本发明提供了一种提取香菇多糖的方法,该方法包括如下步骤:1)利用载冷剂完全浸渍冷冻剂香菇原料,将冷冻浸渍后的香菇原料粉碎过筛获得香菇粉末;2)将粉碎后的香菇粉末加水提取,离心收集提取液,浓缩;3)向浓缩液加入乙醇静置沉淀,离心分离出香菇多糖。本发明所述方法具有工艺简单,成本低,产品得率和稳定性高的特点。与现有技术相比,本发明所述方法至少具有以下优点之一:
1、通过载冷剂对香菇原料进行预处理及加液氮作为粉碎保护剂,使香菇原料变硬、变脆,对冷冻后香菇实体进行粉碎,可改善粉碎效果及减少香菇中活性多糖成分的损失,同时又有效地除去香菇的小分子糖,为制备大分子量香菇多糖提取液奠定基础;
2、对比现有工艺整个香菇提取,本发明所述方法将香菇粉碎至40~60目,能够显著提高香菇多糖的提取率。该原料颗粒度既能在水提后固液分离快速通过80目滤网,又能在连续式高速离心分离设备中快速分离出细小的水不溶物,突破了现有工艺中粉碎原料难以过滤或离心的问题,可实现产业化,显著降低生产成本和提高经济效益;
3、经过多批次生产,该工艺下的香菇多糖产品稳定性良好,多糖得率稳定,高于产品标准,解决现有工艺因产品稳定性问题产生的经济损失。
为了进一步理解本发明,下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
如无特殊说明,本发明实施例中所涉及的试剂均为市售产品,均可以通过商业渠道购买获得。
实施例1:不同规格香菇样品对香菇多糖提取的影响
1、不同规格香菇样品(香菇子实体、1.5cm块茎、1cm块茎、3目、6目、10目、20目、40目、60目、80目、100目)分别取150g,沸水搅拌提取,料液比1:10,温度100℃,提取两次,提取时间为2.0小时,每次用200目筛子过滤,合并滤液,提取液合并浓缩至固形物约为30%,将浓缩液称重,送检固形物,再用95%乙醇醇沉,复溶后,用苯酚-硫酸法(测试参照中华人民共和国《SN/T 4260-2015出口植物源食品中粗多糖的测定苯酚-硫酸法》所述的方法进行)检测,试验重复3次,结果见图1。由图1结果可知,随着颗粒度增大,多糖提取率逐步降低。
2、不同规格香菇样品提取的香菇多糖的GPC
采用GPC法,条件:视差折光检测器;色谱柱:东曹G5000-G3000、流速:0.6mL/min;恒定柱温箱温度40℃;洗脱时间:45min;流动相:水。准确配制2.0mg/mL的分子量为5000、12000、25000、50000、80000、150000、270000、410000、670000Da的葡聚糖标准品,测定其在GPC上的洗脱时间,并与分子量相对应,绘制葡聚糖标准品的洗脱时间曲线。待测样品浓度:5mg/mL,上机检测。图2显示,60目颗粒度的香菇原料多糖提取物大分子多糖占比明显大于香菇子实体。
3、不同规格香菇样品提取的香菇多糖的稳定性
按照1的方法提取不同规格香菇样品(香菇子实体、40目、60目)然后在温度为37℃,湿度为75%环境下,分别检测在0、30、60、90天多糖的含量及结构变化结果见图3和4,结果显示香菇多糖产品能够稳定贮存90天以上。
实施例2:一种提取香菇多糖的方法,包括以下步骤:
(1)称取原料香菇(香菇子实体)100Kg,投入到由质量分数30%乙醇、5%甘油、1%氯化钠与64%水组成的载冷剂中完全浸渍冷冻,浸渍15min,冷冻后的香菇迅速置于粉碎机中进行粉碎,粉碎过程中加液氮保护,获得60目颗粒的香菇粉末。
(2)将香菇粉末投入提取罐中,加入10倍水进行搅拌提取,在提取温度100℃条件下提取2h。再从提取罐中放出提取液(过80目筛网),提取液经连续式高速离心机离心后进入贮液罐内保温暂存。再往提取罐加入10倍水进行搅拌提取,在提取温度100℃条件下提取2h,再从提取罐中放出提取液(过80目筛网),提取液经连续式高速离心机离心后进入贮液罐内保温暂存,合并两次提取液。
(3)将合并后的香菇提取液泵入双效真空浓缩装置中浓缩至可溶性固形物含量20%左右(得188Kg浓缩液)。
(4)将浓缩液泵入醇沉罐,加入5倍浓缩液体积的75%乙醇,通过搅拌充分混匀。在4℃环境下静置8小时,采用连续式离心分离出多糖沉淀。
(5)将香菇多糖沉淀转移至配料罐,加水溶解,温度保持在50℃左右,制备成多糖沉淀量3~5%的香菇多糖水溶液,并经过2次200目筛网过滤,再进行口服液灌装。
(6)经灌装后的口服液在119℃±1℃条件下灭菌26分钟,获得香菇多糖口服液产品。
(7)经检测,所制得的香菇多糖口服液产品粗多糖含量(以葡萄糖计)为3%,测试参照中华人民共和国《SN/T 4260-2015出口植物源食品中粗多糖的测定苯酚-硫酸法》所述的方法进行。
实施例3:一种提取香菇多糖的方法,包括以下步骤:
(1)称取原料香菇(香菇子实体)100Kg,投入到由10%乙醇、15%甘油、5%氯化钠与70%水组成的载冷剂中完全浸渍冷冻,浸渍2min,冷冻后的香菇迅速置于粉碎机中进行粉碎,获得40目颗粒的香菇粉末。
(2)将香菇粉末投入提取罐中,加入15倍水进行搅拌提取,在提取温度100℃条件下提取2h。再从提取罐中放出提取液(过80目筛网),提取液经连续式高速离心机离心后进入贮液罐内保温暂存。再往提取罐加入8倍水进行搅拌提取,在提取温度100℃条件下提取2.5h,再从提取罐中放出提取液(过80目筛网),提取液经连续式高速离心机离心后进入贮液罐内保温暂存,合并两次提取液。
(3)将合并后的香菇提取液泵入双效真空浓缩装置中浓缩至可溶性固形物含量30%左右(得178Kg浓缩液)。
(4)将浓缩液泵入醇沉罐,加入2倍浓缩液体积的95%乙醇,通过搅拌充分混匀。在4℃环境下静置8小时,采用连续式离心分离出多糖沉淀。
(5)将香菇多糖沉淀转移至配料罐,加水溶解,温度保持在50℃左右,制备成多糖沉淀量3~5%的香菇多糖水溶液,并经过2次200目筛网过滤,再进行口服液灌装。
(6)经灌装后的口服液在119℃±1℃条件下灭菌26分钟,获得香菇多糖口服液产品。
(7)经检测,所制得的香菇多糖口服液产品粗多糖含量(以葡萄糖计)为3%,测试参照中华人民共和国《SN/T 4260-2015出口植物源食品中粗多糖的测定苯酚-硫酸法》所述的方法进行。
Claims (10)
1.一种提取香菇多糖的方法,包括如下步骤:
1)利用载冷剂完全浸渍冷冻香菇原料,将冷冻浸渍后的香菇原料粉碎过筛获得香菇粉末;
2)将粉碎后的香菇粉末加水提取,离心收集提取液,浓缩;
3)向浓缩液加入乙醇静置沉淀,离心分离出香菇多糖。
2.根据权利要求1所述方法,步骤1)所述载冷剂由如下组分组成:10~30wt%乙醇、5~15wt%甘油、1~5wt%氯化钠,余量为水;
所述浸渍冷冻的时间为2~15min。
3.根据权利要求1所述方法,步骤1)所述粉碎过程中加入液氮作为粉碎保护剂。
4.根据权利要求1所述方法,步骤1)所述过筛后收集40~60目香菇粉末。
5.根据权利要求1所述方法,步骤2)所述提取为搅拌控温式水提取。
6.根据权利要求5所述方法,步骤2)所述搅拌控温式水提取的具体参数为:每次提取料液重量比为1:(8~15)、提取温度为100℃、提取时间为2~2.5h,提取次数为2次。
7.根据权利要求1所述方法,步骤2)所述浓缩为提取液真空浓缩至可溶性固形物含量达到20~30%。
8.根据权利要求1所述方法,步骤3)所述加入乙醇具体为加入2~5倍体积的75~95%乙醇水溶液。
9.根据权利要求1所述方法,步骤3)所述静置为4℃中静止6~12小时。
10.根据权利要求1所述方法,步骤2)和步骤3)所述离心为连续式高速离心分离设备离心。
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