CN109757431B - 一种以日粮中碳水化合物组成为指标配制犊牛全混合日粮的方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于饲料配制领域，涉及一种以日粮中碳水化合物组成为指标配制犊牛全混合日粮的方法。本发明同时以日粮中中性洗涤纤维(NDF)、非纤维性碳水化合物(NFC)/NDF比例、物理有效NDF(peNDF)为指标配制犊牛全混合日粮，能够合理调控犊牛胃肠道发育，提高生长性能，饲喂期75天，体长增长率达19.1％，日增重达1.6kg/d，饲料转化率达3.8，并能够有效提高日粮中有机物表观消化率、总能表观消化率和氮沉积率，对犊牛瘤胃发育有积极的促进作用。本方法可用于指导生产实践中犊牛全混合日粮的配制和饲喂，填补我国反刍动物养殖业饲养标准指标不足，提高生产效益。

Description

一种以日粮中碳水化合物组成为指标配制犊牛全混合日粮的 方法

技术领域

本发明涉及一种配制犊牛全混合日粮的方法，具体涉及一种以碳水化合物组成为标准配制提高犊牛瘤胃发育的全混合日粮的方法，提高犊牛生长性能。

背景技术

犊牛全混合日粮(TMR)，其营养特点：0-8周龄犊牛TMR，以适应犊牛断奶前瘤胃尚未发育的情况，用单胃动物的营养模式，辅以促瘤胃发育反刍特点的精粗料配方，添加有益微生物和酶制剂，力求达到消除断奶应激，促进生理发育，符合饲料卫生的目的。9-16周龄犊牛TMR，以适应犊牛日益强大的瘤胃系统，用适宜的精粗料比例，辅以促反刍动物瘤胃区系微生物生长的方法，添加瘤胃促长剂，力求达到与犊牛体重增长相适应的消化系统和合理的微生物体系，为以后消化粗饲料打下良好的基础。16周龄后可再增加干草或专用青贮用量，以逐渐适应青年牛的饲养模式。

多年来，我国对犊牛的研究更多偏重于饲喂方法，饲料营养等方面的研究，缺乏日粮性质、碳水化合物组成、日粮形态等对犊牛生长发育影响的研究，忽略了犊牛的生长与发育。在NRC(2001)、中国《奶牛饲养标准》等文献中也未列入碳水化合物组成的适宜数据，生产中无所适从。幼龄阶段的培育质量直接关系到其成年以后的生产性能，提高犊牛胃肠道发育、促进犊牛阶段生长性能成为了行业中亟需解决的问题。

碳水化合物是动物主要的能源物质，在饲料中通常占到60％～70％。被划分为主要存在于细胞内的非纤维性碳水化合物(NFC，如单糖、双糖、多糖)和主要构成植物细胞壁的纤维性碳水化合物(FC)。据瘤胃降解的不同程度，FC被分为不可发酵的非消化性纤维和慢速发酵的可利用纤维，主要成分是纤维素、半纤维素、木质素、酸性或中性洗涤不溶物等。研究表明纤维素、半纤维素和木质素是中性洗涤纤维(NDF)主要成分，最能代表日粮中的纤维成分。通常人们认为NFC％＝100％-(NDF％+粗蛋白质％+粗脂肪％+粗灰分％)。

非纤维性碳水化合物(NFC)的作用如下：1)对采食量的影响：增加日粮NFC含量可提高奶牛的干物质采食量(DMI)，降低NDF采食量；2)对瘤胃代谢的影响：日粮NFC对瘤胃氮代谢具有调控作用，相对较高的NFC能够促进MCP的生成、降低瘤胃乙酸浓度和乙酸/丙酸，对瘤胃丙酸和丁酸等其他VFA也存在作用，这可能主要是由于NFC影响了瘤胃碳水化合物代谢相关的微生物所致。

中性洗涤纤维(Neutral-detergent Fiber，NDF)，其消化程度和降解速率影响食糜的体积和外流速度，并影响饲料的摄取量，它在瘤胃中发酵成乙酸、丙酸、丁酸等挥发性脂肪酸(VFA)，是成年奶牛能量来源以及合成体脂肪的原料。纤维的消化率和滞留时间决定纤维的消化率，调整反刍动物日粮纤维的组成和含量，可以调控瘤胃中碳水化合物的降解速度和降解程度、瘤胃pH值和VFA的产量与比例，调节氮源的利用，并最终影响微生物的活动和生产性能。日粮的纤维来源和粒度影响反刍动物瘤胃的缓冲能力、咀嚼时间和瘤胃的通过速率。

关于NFC/NDF二者比值的报道如下：

现有技术中已经公开，配比为1.35(A组)、1.23(B组)、0.94(C组)、0.80(D组)，实验结果显示：A组平均日增重、血清中瘦素浓度、甲烷能、尿能、尿氮和消化氮明显高于其他组，干物质、NDF和酸性洗涤纤维的表观消化率、总能代谢率和消化能代谢率随比值降低而降低。最终证实，比值为1.35可以满足3-6月龄夏南杂交牛犊牛对营养物质的需求(李岚捷等，饲粮非纤维性碳水化合物/中性洗涤纤维对肉犊牛生长性能和营养物质消化代谢的影响，动物营养学报，2017，29(6)：2143-2152)(李岚捷等，不同NFC/NDF水平饲粮对肉公犊牛生长性能和屠宰性能的营养，中国农业大学学报，2017，22(12)：101-109)(李岚捷，硕士论文，不同NFC/NDF水平日粮对公犊牛生长性能、瘤胃发育及微生物区系的影响，2017.05)。

另有山羊饲料的报道，其中NDF/NFC比例为2.75、1.71、1.12和0.74，最后一个折算后为NFC/NDF比值为1.35(陈小连等，不同中性洗涤纤维与非纤维性碳水化合物比例日粮对山羊瘤胃和血液氮素利用的影响，反刍动物营养，2007，43(3)：36-39)。

第三个文献报道，奶山羊日粮NFC/NDF比值为1.02、1.24、1.63、2.58(胡红莲等，日粮不同非纤维性碳水化合物与中性洗涤纤维的比值对奶山羊瘤胃液和血液中内毒素、组织胺含量的影响，中国畜牧兽医，2012，39(3)：104-109)。

另有文献报道，杜寒杂交母羊日粮NFC/NDF的比值为0.78、1.03、2.17(不同饲养模式下饲粮非纤维性碳水化合物/中性洗涤纤维对生长期杜寒杂交母羊生长性能、营养物质表观消化率和甲烷产量的影响，动物营养学报，2018，30(4)：1367-1376)。

另有文献报道NFC/NDF比值为2.14、1.05、0.40(赵鹏等，饲粮非纤维性碳水化合物/中性洗涤纤维对黔北麻羊瘤胃发酵参数、血浆生化指标和养分消化率的影响，动物营养学报，2017(29)：2565-2574)。

上述文献公开了NFC/NDF的多种比值关系，且在文中所述试验动物和试验日粮的范围内，比值增加则效果更好。但是，犊牛阶段是瘤胃快速增长的阶段，NDF也是必不可少的，NFC/NDF比值不能无限增长。NDF在维持犊牛瘤胃pH值处于生理正常范围方面具有不可忽视的作用。在不同动物品种(牛羊耐粗饲性能不同)、不同生产目的(育肥和产奶的品种对饲料的要求不同)、不同生理阶段(犊牛与成年牛对NDF的要求不同，成年牛TMR需要更高的粗饲料比例和NDF水平)，其适宜范围不同。但对于胃肠道尚未发育成熟的犊牛来说，与成年牛在消化机能上有一定区别。刚出生的犊牛由于前胃没有发育，所以消化方式与单胃动物相似。随着日龄的增加和日粮中碳水化合物发酵的刺激，前胃开始发育，微生物种类也趋于完整，瘤胃开始具有反刍功能，所以适宜的日粮结构对犊牛的生长发育有重要影响。日粮中饲料原料的组成对瘤胃微生物菌群的组成和胃肠道的发育有显著的影响，采食高NFC日粮会增加瘤胃中淀粉利用菌的数量，减少纤维分解菌的数量，同时丙酸和丁酸浓度增加，丙酸可通过糖异生作用生成葡萄糖，丁酸可刺激瘤胃发育，增强机体瘤胃功能，促进机体生长发育；另外NFC中的淀粉、糖等易发酵、释放能量的速度快，对于瘤胃未发育完善、消化功能较差的犊牛而言更易于消化吸收，所以在一定程度上可以提高机体生长发育。但NFC并不是越高越好，大量NFC经瘤胃发酵后使瘤胃VFA的含量增加，降低了瘤胃pH值，改变了胃肠道微生物区系，瘤胃壁角质层变厚，降低了养分的消化吸收，所以采食过高NFC日粮的动物生长发育并不是最好的。另外，尽管粗料中的纤维素、半纤维素等不易发酵，释放能量的速度慢，但利于瘤胃微生物的增殖，适量的纤维物质含量可以刺激反刍和唾液分泌，以维持瘤胃pH值的稳定，从而保证瘤胃微生物的正常活动，提高微生物菌体蛋白的含量。所以选择适宜的日粮碳水化合物组成对犊牛生长发育至关重要。

关于物理有效中性洗涤纤维(physically effective NDF，peNDF)，peNDF主要与纤维的碎片大小有关，采用宾州筛来筛分饲料，peNDF_<1.18mm则指能够通过1.18mm孔径筛的筛下物的NDF含量，peNDF_1.18-8mm指1.18mm孔径以上而8mm孔径以下的筛上物的NDF含量，peNDF_8mm指在8mm孔径筛上存留的筛上物的NDF含量，peNDF_19mm指在19mm孔径筛上存留的筛上物的NDF含量。19mm筛层主要针对可浮在瘤胃上层的粒径较大的粗饲料和饲料颗粒，这部分饲料需要不断反刍才能消化；8mm的筛层主要收集的是粗饲料颗粒，这部分饲料不需要牛过多地反刍，可以在瘤胃中更快地降解、更快地被微生物分解利用；1.18mm的筛层主要是评价饲料是否对牛具有物理有效性，标准是饲料颗粒度通过瘤胃，且在粪便中的残留低于5％。因此任一peNDF含量总是低于其NDF含量，peNDF能够刺激动物的咀嚼活动，促进瘤胃内容物固、液两相分层，通过调节唾液缓冲液分泌和瘤胃pH来影响动物的健康，NRC要求，为维持乳脂肪的稳定，奶牛日粮中应该含有19-21％的peNDF和25-30％的NDF。(薛红枫等，奶牛中性洗涤纤维营养研究进展，动物营养学报，2007，19(suppl)：454-458)在犊牛日粮的peNDF上暂无研究报导。

中国荷斯坦牛是我国育成的唯一的一个乳用型牛品种，产奶量高，但不耐粗饲(即对日粮中来源于牧草等的NDF含量和peNDF有限制)。相对于上述文献中的肉用牛、山羊、奶山羊、绵羊的幼龄期来说，其幼龄期——犊牛阶段的哺乳期最短(60天以内)，开始采食固体饲料(颗粒料或TMR)的时间早(从7日龄就可以开始驯饲)，初生重较高(35kg至40kg以上)而平均日增重快(断奶前0.6-0.8kg/d，断奶后1.2-1.5kg/d)，因此配制日粮时需要的易消化的营养物质浓度较高、粗饲料比例较低，peNDF较低。但同时犊牛又处于瘤胃快速发育的时期，瘤胃发育速度是体增重速度的1-3倍，瘤胃重量占复胃比例由初生的30％增至60日龄的50％～70％(刁其玉等，犊牛营养生理与高效健康养殖，中国农业出版社，2018)，这就需要一定的NDF和peNDF对瘤胃进行适当的物理刺激，促进瘤胃蠕动，增加胃肠道肌肉层的力量，尽快扩大瘤胃容积。因此，必须寻求一个制衡点，选定最佳的NFC/NDF比例和peNDF，满足中国荷斯坦犊牛对饲料的要求。

发明内容

在现有技术的基础上，发明人针对中国荷斯坦犊牛饲料配制中存在的不足，进行了深入研究，反复试验后，发明人意外发现在配制犊牛日粮时，若能够同时考虑NDF和物理有效NDF，两者相互配合，达到某个数值，以指导犊牛全混合日粮的组配，制得的日粮饲喂犊牛后，犊牛瘤胃的发育能得到更好的促进。

本发明提供了一种用碳水化合物组成配制提高犊牛胃肠道发育的全混合日粮的方法。本方法以日粮中碳水化合物组成为指标来配制日粮，具体是以中性洗涤纤维(NDF)、非纤维性碳水化合物(NFC)/(NDF)比例、物理有效NDF(peNDF)为指标配制犊牛全混合日粮，合理调控犊牛胃肠道发育，提高生长性能。

为了实现本发明的目的，本发明提供了一种将非纤维性碳水化合物/中性洗涤纤维比例、物理有效中性洗涤纤维，即一种以日粮中碳水化合物组成为指标配制犊牛全混合日粮的方法，所述方法包括：

(1)测定并计算饲料原料干物质中的中性洗涤纤维(NDF)，非纤维性碳水化合物(NFC)的含量，

(2)粉碎饲料原料；对于含有NDF的原料，以宾州筛筛分原料，测定出每层筛上物NDF占原料总NDF量的比例，得出每种原料的物理有效NDF(peNDF)含量，包括：peNDF_<1.18mm、peNDF_1.18-8mm、peNDF_8-19mm、peNDF_>19mm，

(3)计算日粮配方，以干物质计，使所配制的犊牛全混合日粮的NFC/NDF比例为1.80，NDF为25.6％-27.3％。粉碎后饲料通过宾州筛筛分，饲料粒径为<8mm的物理有效NDFpeNDF占犊牛全混合日粮的NDF的82％-100％。

本发明的方法，还包括步骤(4)，是依照步骤(3)的标准计算出干物质基础上的全混合日粮的配方，再依照每种原料的干物质含量折算鲜样基础上的全混合日粮配方。

本发明方法的步骤(3)中，犊牛全混合日粮的NDF中物理有效NDF所占百分比分别为：其中peNDF_<1.18mm为30.0％-40.0％、peNDF_1.18-8mm为60.0％-70.0％。

优选地，步骤(3)中，犊牛全混合日粮的NDF中peNDF所占百分比分别为：peNDF_<1.18mm为32.0％-35.0％、peNDF_1.18-8mm为64.0％-68.0％。

更优选地，步骤(3)中，犊牛全混合日粮的NDF中peNDF所占百分比分别为：peNDF_<1.18mm为33.6％、peNDF_1.18-8mm为66.4％，peNDF_>8.8mm为0。

本发明所述方法配制的全混合日粮优选适用于中国荷斯坦犊牛。

更优选地，所述犊牛为2-6月龄中国荷斯坦奶牛。

上述方法制备得到的犊牛全混合日粮属于本发明的保护范围。

本发明提供了上述方法或上述方法制得的犊牛全混合日粮的以下任一所述的应用，

(1)促进犊牛胃肠道发育、提高瘤胃发酵性能中的应用；

(2)提高犊牛对营养物质消化率中的应用；

(3)提高犊牛生长性能，促进饲料转化率中的应用。

本发明还提供了所述方法制得的犊牛全混合日粮的饲喂方法，每天饲喂2-3次，每天总干物质采食量为犊牛体重的3.3％-3.5％。

本发明与现有配制方法相比，具有以下优点和效果：

1.根据犊牛生长发育特点提供了最佳的碳水化合物组成和纤维颗粒度，提高了犊牛对营养物质的消化率。

2.促进犊牛胃肠道发育，提高生长性能。

实际生产试验证明：本发明提供的犊牛全混合日粮配制方法，配制出的全混合日粮可增进犊牛瘤胃发育，提高瘤胃发酵性能，提升犊牛对营养物质的消化和利用，提高生长性能从而促进犊牛增重和体躯的生长。其效果，在等能等蛋白等碳水化合物的条件下，优于高NDF或高颗粒度的日粮。本发明实验发现在犊牛饲喂本发明方法制备的全混合日粮的75天内，犊牛体长增长率达19.1％，日增重达1.6kg/d，饲料转化率达3.8，并能够有效提高日粮中有机物表观消化率、总能表观消化率和氮沉积率，对犊牛瘤胃发育有积极的促进作用。本发明方法可用于指导生产实践中犊牛全混合日粮的配制和饲喂，填补我国反刍动物养殖业饲养标准指标不足，提高生产效益。

具体实施方式

下面通过具体试验对本发明的技术方案及其所产生的技术效果进行进一步阐述，下属说明仅是为了解释本发明，并不对其内容进行限定。如无特别说明，下属百分数均为重量百分数。若未特别说明，本发明实施例所用的材料均为常规市售可得。

实施例1

1、材料与方法

1.1试验设计与日粮

本试验采用单因素设计方案，选用75头105日龄(约3月龄)断奶后的中国荷斯坦犊牛，按照随机区组设计分成5组，每组15头犊牛。因需要避免日粮其他因子变化造成的影响，本试验采用了五种等能等蛋白、总碳水化合物水平基本一致的全混合日粮(TMR，表1，表2)。其中：

日粮A：采用本发明提供的碳水化合物组成和颗粒大小配制；具体配制方法为：

(1)在市场上购买饲料原料，包括且不限于玉米、豆粕、麸皮、脂肪粉、大豆皮、石粉、磷酸氢钙、食盐、犊牛预混料等。

(2)以化学分析方法测定并计算饲料原料的干物质(DM)、粗蛋白质(CP)、粗灰分、粗脂肪(EE)、中性洗涤纤维(NDF)、非纤维性碳水化合物(NFC)等含量。

(3)粉碎饲料原料，原料粒径粉粹达到1.7mm以下的细度，对于植物性原料，以宾州筛筛分原料，测定出每层筛上物占总量的比例，分别记为1.18mm以下筛出物、1.18-8mm筛出物、8-19mm筛出物，分别测定该部分筛出物的NDF含量，计算出每种原料的物理有效NDF含量，包括：peNDF_<1.18mm、peNDF_1.18-8mm、peNDF_8-19mm、peNDF_19mm以上。

(4)以Excel建立计算表格或使用任一饲料配方计算软件，计算日粮配方，在常用饲料营养成分指标的基础上，增加指标：NFC、NFC/NDF、peNDF_<1.18mm、peNDF_1.18-8mm、peNDF_8-19mm、peNDF_19mm以上，配方标准达到：以干物质计，犊牛TMR的CP≥16％，NFC/NDF比例为1.80，NDF为26.5％，犊牛TMR的NDF中peNDF所占百分比分别为：peNDF_<1.18mm为33.6％、peNDF_1.18-8mm为66.4％、peNDF_8mm以上为0。

(5)依照上述标准计算出干物质基础上的TMR的配方，再依照每种原料的干物质含量折算鲜样基础上的生产用TMR配方。

(6)依照(4)生产用TMR配方进行饲料配制，先逐一称取配方中所需的饲料原料，添加饮用水至水分含量为50％，再进行混合，随后投放到饲槽中饲喂犊牛。

日粮B：采用与A相同的配制方法，但TMR的NFC/NDF提高到1.9，peNDF_<1.18mm为37.4，peNDF_1.18-8mm为45％，其总和降低到82.4％，而大颗粒的纤维peNDF_8-19mm增加到14.4％、peNDF_19mm以上增加到3.2％，即整体颗粒度增大。

日粮C：采用与A相同的配制方法，但TMR的NFC/NDF降低到1.7，NDF水平与A组一致，peNDF_<1.18mm和peNDF_1.18-8mm总和约为82.2％，与日粮B保持一致。

日粮D：采用与A相同的配制方法，NFC/NDF保持在1.8，NDF水平27.2％，peNDF_<1.18mm和peNDF_1.18-8mm总和约为82.2％，与日粮B保持一致。

日粮E：将日粮B中粗饲料粉碎至1.7mm以下后再配制日粮，NFC/NDF1.9，peNDF_<1.18mm为33.6％、peNDF_1.18-8mm为66.4％，与日粮A保持一致。

日粮的营养水平参照NRC(Nutrient Requirements of Dairy Cattle，NationalResearch Council，2001，P218,P277,P278)。试验期75天，其中预饲期15天，正试期60天。

表1试验日粮组成(干物质基础)％

原料组成	日粮A	日粮B	日粮C	日粮D	日粮E
						玉米	40.5	41.1	41.4	41.1	41.1
豆粕	15.5	5.5	15	5.5	5.5
						麸皮	15	15	15	15	15
脂肪粉	0.8	0.4	0.5	0.4	0.4
						大豆皮	25	0	0	10	0
竹叶	0	0	24.4	0	0
						苜蓿	0	35.4	0	24.4	35.4
细石粉	1.2	0.6	1.4	0.6	0.6
						磷酸氢钙	0.6	0.6	0.9	0.6	0.6
食盐	0.4	0.4	0.4	0.4	0.4
						预混料	1	1	1	1	1
合计	100	100	100	100	100

表2试验日粮的营养水平(干物质基础)％

注：1)预混料为每千克日粮提供:VA 15000IU,VD 5000IU,VE 50mg,Fe 90mg,Cu12.5mg，Mn 60mg，Zn 100mg，Se 0.3mg，I 1.0mg，Co 0.5mg。2)代谢能根据消化代谢试验数据计算，代谢能＝总能-粪能-尿能-甲烷能，其中甲烷能＝6.5％总能；其余营养水平为实测值。

1.2饲养管理

犊牛进场后清晨空腹称重，佩戴耳标和驱虫处理，并转至犊牛岛(4.5m×1.5m)内单栏饲养。每头牛提供单独的水槽和料槽，每天8:00和16:00投喂一次，自由采食、饮水，TMR的干物质投喂量按体重的3.5％供给，每周进行一次消毒和粪便清理。

1.3样品收集与试验数据测定

1.3.1饲料样品的采集与测定

每天晨饲前收集每头牛的剩料量并称量，计算每头牛每天的干物质采食量(DMI)。每天采集鲜料样及每头牛的剩料样200g左右，-20℃保存，并参照AOAC(2000)测定日粮的营养成分，其中粗蛋白(CP)用Ketuo KDY-9830凯氏定氮仪测定、NDF和ADF用ANKOM 200FiberAnalyzer测定、EE含量采用ANKOM-XT15i全自动脂肪分析仪测定、总能(GE)以PARR-6400全自动氧弹量热仪测定。木质素、NDF、酸性洗涤纤维(ADF)依照AOAC(2000)测定。

用四层宾州筛(美国嘉吉)测定TMR的物理有效纤维(peNDF)，并参照Kononoff等的方法计算不同粒径的peNDF含量。康乃尔净碳水化合物和净蛋白质体系(CNCPS)中的碳水化合物中糖类(CA)、淀粉、可溶性纤维(CB₂)、可消化纤维(CB₃)和不消化纤维(CC)部分参照VanAmburgh等的方法计算各指标含量。

1.3.2生长性能的测定

试验开始后分别在正试期每隔15天的清晨空腹称重，并计算每头牛15天的平均日增重(ADG)和饲料转化率(F/G)。

1.3.3粪、尿样的收集与分析

在荷斯坦公犊牛140和170日龄时分别进行消化代谢试验，采用消化代谢笼全收粪尿法进行试验。每次消化代谢试验每组选择6头体重相近的犊牛，试验期7天，预饲期3天，正试期4天，并记录每头犊牛每天的采食量、粪排出量和尿排出量。每天收集混匀后的100g粪样和100ml尿样，并分别加入50ml和10ml的10％硫酸溶液进行固氮，-20℃保存待测。

粪样中的CP、NDF、ADF、DM、Ash和粪能，以及尿能和尿氮依照AOAC(2000)测定，仪器设备如上所述。并计算日粮的代谢能，其中甲烷能按总能的6.5％计算。

1.3.4瘤胃发酵参数

试验正式开始后，每组选取6头体重居中、体况良好和健康的犊牛，晨饲后2h通过口腔真空抽取瘤胃液，分装于2个10ml离心管中，-20℃保存，用于测定挥发性脂肪酸(VFA)和氨态氮(NH₃-N)浓度。两管未过滤的立即投入液氮中保存，用于微生物的测定。

瘤胃pH值以便携式pH计(testo-206-pH2)及时测定；用苯酚-次氯酸钠比色法测定NH₃-N浓度，气相色谱法测定VFA浓度。

1.3.5屠宰性能、器官组织发育和胃肠道酶活的测定

试验犊牛180日龄时，每个日粮组选取6头健康、体重接近的犊牛，禁食16h后，称量犊牛的宰前活重，放血致死，解剖后称量胴体重、头、蹄、皮毛、心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏的鲜重，计算屠宰率、胴体重、净肉率、胴体出肉率、肉骨比和各器官占宰前活重的比例。

屠宰率(％)＝100×胴体重(kg)/宰前活重(kg)；

净肉率(％)＝100×净肉重(kg)/宰前活重(kg)；

胴体出肉率(％)＝100×净肉重(kg)/胴体重(kg)；

肉骨比＝净肉重(kg)/骨骼重(kg)。

在屠宰试验时采集胃肠道的食糜样品，保存待测。用比色法测定α-淀粉酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶活性，运用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)进行测定羧甲基纤维素酶、木聚糖酶和β-葡萄糖苷酶活性。

在瘤胃前背盲囊部分用利剪连续取下1cm²的组织块，用生理盐水冲洗残余内容物后，迅速将样品浸泡至入4％多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.4)中固定，4℃固定48h后，石蜡包埋，待做组织切片。然后除去复胃内容物将各胃室分开单独称重，并计算胃室比重和所占空体比重。用HE染色法对瘤胃组织形态进行测定。

1.4数据统计分析

试验数据用SAS 9.2软件one-way ANOVA或MIXED模型进行分析，差异显著时进行多重比较或最小显著差数法(LSD)两两比较。统计分析以P﹤0.05为差异显著，P在0.05～0.10之间为有提高或降低的趋势。

2、结果与分析

2.1生长性能

表3TMR不同配制方法对荷斯坦公犊牛生长性能的影响

注：同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)，下表同。

表3结果显示：本实施例中五种等能等蛋白等碳水化合物的TMR对犊牛生长性能的影响。可以看出，不同碳水化合物组成的日粮，并未影响犊牛的干物质采食量，但饲料转化率以A组最优(P<0.05)，A<B、C、D、E，B、C、D、E组差异不显著，数值上D<B，E＝B；犊牛的日增重在120-135、166-180日龄时出现显著性差异(P<0.05)，从高到低依次为，120-135日龄A>C、D>B、E，A组显著高于B、E组，B、C、D、E则差异不显著，数值上D>B＝E；166-180日龄A＝D>B、E>C，A组显著高于C组，B、C、E则差异不显著。犊牛体长在试验全期的增长率也出现显著性差异(P<0.05)，从高到低依次为A>D>B、C、E。

上述结果表明，以本发明提出的碳水化合物组成和颗粒度来配制犊牛日粮，可显著提高犊牛的生长性能，在饲料转化率、日增和体长增长率上皆有优势。相对来说，与本发明方法部分相同的D(NFC/NDF相同但颗粒度较大)、E(NFC/NDF较高但颗粒度相同)两种方法未能达到与本发明相同的性能，说明本发明将NFC/NDF、物理有效NDF指标联合应用的方法有效，同时给出推荐量更符合该阶段中国荷斯坦犊牛的营养需求。

2.2营养物质的消化和代谢

表4TMR不同配制方法对荷斯坦公犊牛营养物质消化率和代谢率的影响(％)

表4结果显示：犊牛的营养物质消化率和氮沉积率。可以看出，五组间差异显著(P<0.05)，使用不同的碳水化合物组成和颗粒度来配制TMR，会导致犊牛对日粮中营养物质的消化和利用不同。

结果表明：本发明技术所配制的TMR的有机物表观消化率、总能表观消化率和氮沉积率都显著高于其他四组(P<0.05)，干物质表观消化率、氮表观消化率在数值上高于其他四组(P>0.05)。相对来说，与本发明方法部分相同的D(NFC/NDF相同但颗粒度较大)、E(NFC/NDF较高但颗粒度相同)两种方法在干物质表观消化率、有机物表观消化率、总能表观消化率上未能达到与本发明相同的性能，在但表观消化率和氮沉积率上与本发明方法效果差异不显著但数值上有所降低。说明本发明将NFC/NDF、物理有效NDF指标联合应用的方法有效，同时给出推荐量更符合该阶段中国荷斯坦犊牛的营养需求。

2.3瘤胃发酵参数

表5TMR不同配制方法对荷斯坦公犊牛瘤胃发酵参数的影响

表5结果显示：犊牛瘤胃发酵参数的变化。可以看出，五组间差异显著(P<0.05)，说明使用不同的碳水化合物组成和颗粒度来配制的TMR，进入犊牛瘤胃中后发酵的速度和程度不同。具体来说，本发明技术所配制的TMR的在犊牛瘤胃中发酵所产生的VFA浓度显著高于B、C、E组(P<0.05)，高于D组但差异不显著(P>0.05)，其中乙酸占总VFA的比例低于B、C组，丙酸占总VFA的比例则显著高于B、C、D组(P<0.05)，数值上高于E组但差异不显著(P>0.05)，丁酸占总VFA的比例则显著高于B、D组(P<0.05)，数值上高于C、E组但差异不显著(P>0.05)，乙丙比则显著低于B、C组；瘤胃液中氨态氮浓度以A组最高，显示出该日粮有利于瘤胃中微生物的增殖；上述指标的变化使得瘤胃液pH值也出现变化，A组显著低于B、C、D组。

结果表明：本发明方法提供的TMR所使用的碳水化合物组成和颗粒度具有较高的发酵性能，产生了较多对瘤胃壁发育具有较大化学刺激作用的丙酸和丁酸，有利于瘤胃发育和消化。相对来说，与本发明方法部分相同的D(NFC/NDF相同但颗粒度较大)方法则发酵性能也较高，E(NFC/NDF较高但颗粒度相同)方法在总发酵性能上稍低瘤胃而丁酸比例上具有与本发明作用近似的作用，有可能在刺激瘤胃发育上也具有同样的效果。

2.4瘤胃发育

表6TMR不同配制方法对荷斯坦公犊牛瘤胃发育的影响

项目

日粮A

日粮B

日粮C

日粮D

日粮E

SEM

P值

重量

瘤胃重(kg)

6.3<sup>a</sup>

3.9<sup>b</sup>

3.2<sup>b</sup>

4.2<sup>b</sup>

5.8<sup>a</sup>

0.38

<0.001

瘤胃重占宰前活重的比例(％)

3.2<sup>a</sup>

2.0<sup>b</sup>

1.9<sup>b</sup>

2.2<sup>b</sup>

3.0<sup>a</sup>

0.18

<0.001

瘤胃重占复胃的比例(％)

70.0<sup>a</sup>

55.8<sup>b</sup>

50.8<sup>b</sup>

60.0<sup>b</sup>

64.3<sup>ab</sup>

2.33

<0.001

组织形态

瘤胃壁厚度(mm)

7.5<sup>a</sup>

4.5<sup>b</sup>

5.2<sup>b</sup>

5.3<sup>b</sup>

6.9<sup>ab</sup>

0.45

0.042

乳头高度(mm)

6.1<sup>a</sup>

3.4<sup>b</sup>

3.2<sup>b</sup>

3.6<sup>b</sup>

5.8<sup>a</sup>

0.28

0.041

乳头宽度(mm)

0.6<sup>a</sup>

0.3<sup>b</sup>

0.4<sup>b</sup>

0.4<sup>b</sup>

0.5<sup>ab</sup>

0.09

0.048

肌层厚度(mm)

2.8

2.0

2.1

2.0

2.5

0.24

0.076

瘤胃上皮厚度(μm)

78.8<sup>a</sup>

62.8<sup>b</sup>

65.3<sup>b</sup>

66.4<sup>b</sup>

72.5<sup>ab</sup>

4.33

0.062

角质层厚度(μm)

16.3

13.2

15.8

14.7

15.9

1.45

0.064

颗粒层厚度(μm)

12.4

14.2

13.5

13.0

13.2

1.16

0.464

棘层厚度(μm)

46.7<sup>a</sup>

39.5<sup>b</sup>

40.8<sup>b</sup>

39.2<sup>b</sup>

43.9<sup>a</sup>

2.00

0.049

基底层厚度(μm)

18.2

17.0

17.5

17.2

17.6

0.50

0.271

表6结果显示：犊牛瘤胃发育的变化。可以看出，A组与B、C、D组差异显著(P<0.05)，而数值上略高于E组(P>0.05)说明使用不同的碳水化合物组成和颗粒度来配制的TMR，会直接影响犊牛瘤胃大小和胃壁的发育；瘤胃占宰前活重的比例比B、C、D组提高了1.0至1.3个百分点(P<0.05)，占复胃的比例则分别提高了10.0至19.2个百分点(P<0.05)。而由于A、E组丙酸和丁酸产量的提升，刺激瘤胃组织的发育，提高了乳头高度、乳头宽度和胃壁上皮和棘层的厚度(P<0.05)，瘤胃壁厚度出现大幅度增长(P<0.05)。

结果表明：本发明方法提供的TMR所使用的碳水化合物组成和颗粒度对犊牛瘤胃发育具有极大的优势。相对来说，与本发明方法部分相同的E(NFC/NDF较高但颗粒度相同)方法在刺激瘤胃发育功能上效果相近，而D(NFC/NDF相同但颗粒度较大)方法效果降低。

本发明提供的犊牛全混合日粮配制方法，配制出的全混合日粮可增进犊牛瘤胃发育，提高瘤胃发酵性能，提升犊牛对营养物质的消化和利用，从而促进犊牛增重和体躯的生长。其效果，在等能等蛋白等碳水化合物的条件下，NFC/NDF和日粮颗粒度大小都是重要的影响因子，同时给出其推荐量更符合该阶段中国荷斯坦犊牛的营养需求。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (8)

1.一种以日粮中碳水化合物组成为指标配制中国荷斯坦犊牛全混合日粮的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)测定并计算饲料原料干物质中的中性洗涤纤维NDF，非纤维性碳水化合物NFC的含量；

(2)粉碎饲料原料；对于含有NDF的原料，以宾州筛筛分原料，测定出每层筛上物NDF占原料总NDF量的比例，得出每种原料的物理有效NDF即peNDF含量，包括：peNDF_<1.18mm、peNDF_1.18-8mm、peNDF_8-19mm、peNDF_>19mm；

(3)计算日粮配方，以干物质计，使所配制的犊牛全混合日粮的NFC/NDF比例为1.80，NDF为25.6％-27.3％；粉碎后饲料粒径<8mm的物理有效NDF占犊牛全混合日粮的NDF的82％-100％；

(4)依照步骤(3)的标准计算出干物质基础上的全混合日粮的配方，再依照每种原料的干物质含量折算鲜样基础上的全混合日粮配方。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，犊牛全混合日粮的NDF中物理有效NDF所占百分比分别为：其中peNDF_<1.18mm为30.0％-40.0％、peNDF_1.18-8mm为60.0％-70.0％。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，犊牛全混合日粮的NDF中peNDF所占百分比分别为：peNDF_<1.18mm为32.0％-35.0％、peNDF_1.18-8mm为64.0％-68.0％。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，犊牛全混合日粮的NDF中peNDF所占百分比分别为：peNDF_<1.18mm为33.6％、peNDF_1.18-8mm为66.4％、peNDF_>8mm为0。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述犊牛为2-6月龄中国荷斯坦奶牛。

6.权利要求1-5任一所述方法制备得到的犊牛全混合日粮。

7.权利要求1-5任一所述方法或权利要求6所述的犊牛全混合日粮的以下任一所述的应用，

(1)促进犊牛胃肠道发育、提高瘤胃发酵性能中的应用；

(2)提高犊牛对营养物质消化率中的应用；

(3)提高犊牛生长性能，促进饲料转化率中的应用。

8.权利要求6所述的犊牛全混合日粮的饲喂方法，其特征在于，每天饲喂2-3次，每天总干物质采食量为犊牛体重的3.3％-3.5％。