CN109700807B - 化合物rh-1402在制备抗急性肾损伤药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开化合物RH‑1402在制备抗急性肾损伤药物中的应用，化合物RH‑1402的结构如下所示：
本发明提供了化合物RH‑1402在治疗抗急性肾损伤中的应用，化合物RH‑1402不仅表现出了较佳的治疗效果，且未见副作用，因此，化合物RH‑1402可以用于制备成抗急性肾损伤药物。
Description
技术领域
本发明涉及医药领域，尤其涉及的是化合物RH-1402在制备抗急性肾损伤药物中的应用。
背景技术
急性肾损伤(acute Kidney Injury,AKI)是临床常见危重疾病，可导致肾脏不完全修复、持续慢性炎症和进展性纤维化，是引起继发性慢性肾脏病、肾衰竭及住院患者死亡的重要原因。迄今为止AKI尚无任何有效治疗措施，因此，寻找可以减轻组织损伤、促进修复、防止慢性纤维化发生的肾脏保护药物具有重要意义。
化合物RH-1402是促胃泌素释放肽受体(gastrin-releasing peptide receptor,GRPR)的抑制剂，其结构如下所示：
现有研究表明：化合物RH-1402具有较好的抗炎作用，但其防治急性肾损伤时的药理学作用尚未报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于提供了化合物RH-1402在制备抗急性肾损伤药物中的应用。
本发明是通过以下技术方案解决上述技术问题的：
化合物RH-1402在制备抗急性肾损伤药物中的应用，化合物RH-1402的结构如下所示：
优选地，以化合物RH-1402为活性化合物添加药物制剂上能够接受的辅料，制备成药物制剂。
优选地，所述药物制剂为片剂、胶囊剂、混悬剂、乳剂、粉针剂、注射剂中的任意一种剂型。
本发明相比现有技术具有以下优点：
细胞以及动物实验结果证实化合物RH-1402可有效减轻急性肾损伤，保护肾功能，其作用机制与化合物RH-1402降低炎症因子水平有关，应用前景广泛。
附图说明
图1a是本发明实施例1中MTT法试验结果图；
图1b是本发明实施例1中Western Blot的试验结果图；
图1c是本发明实施例1中半定量分析结果图；
图2a是本发明实施例2中化合物RH-1402对顺铂诱导HK2细胞中TNF-α的mRNA水平图；
图2b是本发明实施例2中化合物RH-1402对顺铂诱导HK2细胞中IL-1β的mRNA水平图；
图2c是本发明实施例2中化合物RH-1402对顺铂诱导HK2细胞中IL-6的mRNA水平图；；
图2d是本发明实施例2中化合物RH-1402对顺铂诱导HK2细胞中MCP-1的mRNA水平图；
图3a是本发明实施例3中不同浓度的化合物RH-1402对小鼠急性肾损伤模型中血肌酐的含量关系图；
图3b是本发明实施例3中化合物RH-1402与小鼠急性肾损伤模型中血尿素氮的含量关系图；
图4a是本发明实施例4中化合物RH-1402对小鼠急性肾损伤模型中TNF-αmRNA的水平图；
图4b是本发明实施例4中化合物RH-1402对小鼠急性肾损伤模型中IL-1βmRNA的水平图；
图4c是本发明实施例4中化合物RH-1402对小鼠急性肾损伤模型中IL-6mRNA水平图；
图4d是本发明实施例4中化合物RH-1402对小鼠急性肾损伤模型中MCP-1mRNA水平图。
具体实施方式
下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
实施例1
化合物RH-1402对顺铂诱导肾小管上皮细胞损伤的保护作用试验：
MTT法：将人肾小管上皮细胞(HK2)细胞接种于96孔板中，接种密度约为4000个细胞/孔。培养24h，换用无血清培养基饥饿12小时后，分组加入顺铂和化合物RH-1402，分别为正常组(NC)、模型组(Cisplatin 20μM)、治疗组(Cisplatin 20μM+化合物RH-1402，其中，化合物RH-1402的浓度依次为0.5μM、1μM、2μM、4μM、8μM、16μM、32μM、64μM)，继续培养24h。培养结束后每孔加入5g·L-1的MTT溶液20μL，继续培育4h。吸去培养基，每孔加入150μL的DMSO，振荡，混匀。用酶标仪在492nm处测定各孔OD值，记录结果。以细胞存活率(Cell viability)对剂量作图。结果计算：细胞存活率＝(试验组细胞OD值-空白组细胞OD值)/(对照组细胞OD值-空白组细胞OD值)×100％。
Western Blot：将对数生长期的HK2细胞接种于6孔板中，分别分为正常组(NC)、模型组(Cisplatin 20μM)和低剂量(Cisplatin 20μM+化合物RH-14021μM)、中剂量(Cisplatin 20μM+化合物RH-14022μM)、高剂量组(Cisplatin20μM+化合物RH-14024μM)，每组重复3-4次实验。接种密度约为1.0×105个细胞/ml，孵育24小时用无血清培养基饥饿12小时后分别加入刺激及药物。继续培养24小时。PBS洗三遍，收集细胞，提取总蛋白，通过Western Blot法检测肾脏损伤分子KIM-1的蛋白表达，并进行半定量分析。
实验结果如图1a所示，即MTT结果，由图1a可知：顺铂刺激的HK2细胞经过低、中、高浓度的化合物RH-1402处理后，该细胞的相对存活率值从顺铂刺激组的57.54％分别升高到72.71％、73.78％和69.76％，存活率增加约1.2倍。说明化合物RH-1402对顺铂刺激的肾小管上皮细胞具有较好的保护作用。
Western Blot如图1b所示，半定量分析结果如图1c所示。由图1b、图1c可知：顺铂刺激的HK2细胞经过化合物RH-1402处理后，肾脏损伤分子KIM-1的蛋白表达水平明显受到抑制，证明化合物RH-1402保护顺铂引起的肾小管上皮细胞损伤。
实施例2
化合物RH-1402对顺铂诱导炎症因子的抑制作用试验：
将HK2细胞接种于12孔板中，分别分为正常组(NC)、模型组(Cisplatin20μM)、低剂量(Cisplatin 20μM+化合物RH-14021μM)、中剂量(Cisplatin 20μM+化合物RH-14022μM)、高剂量组(Cisplatin 20μM+化合物RH-14024μM)，每组重复3-4次实验。接种密度约为0.5×105个细胞/孔，孵育24小时用无血清培养基饥饿12小时后，分别加入刺激及药物。继续培养24小时。PBS洗三遍，收集细胞，提RNA，逆转录，扩增。
Real time PCR结果如图2a、图2b、图2c，由图2a、图2b、图2c可知：顺铂明显诱导肾小管上皮细胞中TNF-αmRNA、IL-1βmRNA、IL-6mRNA水平的升高，而化合物RH-1402处理组TNF-αmRNA、IL-1βmRNA、IL-6mRNA表达明显被抑制，由图2d可知：肾小管上皮细胞受到顺铂刺激后经化合物RH-1402处理，其MCP-1mRNA表达明显下降，表明化合物RH-1402可显著抑制顺铂诱发的炎症反应。
实施例3
化合物RH-1402对急性肾损伤模型中肾功能的保护作用(血肌酐和血尿素氮)试验：
将6-8周龄C57BL/6小鼠适应性培养1-2天，分为正常对照组(NC)、模型组(Cisplatin 20mg/kg)、低剂量组(Cisplatin 20mg/kg+1mg/kg)、中剂量组(Cisplatin20mg/kg+2mg/kg)、高剂量组(Cisplatin 20mg/kg+4mg/kg)，每组6-10只。小鼠腹腔注射20mg/kg顺铂建立急性肾损伤模型并注射低、中、高剂量的化合物RH-1402进行药物干预，3天后麻醉状态下收取血清样本及肾组织，并根据血肌酐和尿素氮试剂盒说明书检测动物模型血清中肌酐和尿素氮的含量(购自南京建成生物工程研究所)，肌酐检测结果如表1所示，尿素氮检测结果如表2所示：
表1
肌酐测试
注：稀释因子K＝(加样量+酶溶液A体积)/(加样量+酶溶液A体积+酶溶液B体积)＝186/246；
肌酐含量(μmol/L)＝[(测定A2-K*测定A1)-(空白A2-K*空白A1)]/[(标准A2-K*标准A1)-(空白A2-K*空白)]*标准品浓度(442μmol/L)。
表2
尿素氮测试
尿素氮含量(mmol/L)＝(测定OD值-空白测定值)/(标准OD值-空白OD值)*标准浓度(10mmol/L)*样本测试前稀释倍数。
上述实验结果如图3a、图3b所示。图3a显示：顺铂诱导模型组中血肌酐含量明显升高，肾功能恶化，而不同浓度的化合物RH-1402有效降低模型组血肌酐水平，图3b结果同样显示：不同浓度的化合物RH-1402有效降低模型组尿素水平，进一步证实化合物RH-1402对急性肾损伤时肾功能具有保护作用。
实施例4
化合物RH-1402对急性肾损伤模型中炎症的抑制作用试验：
将6-8周龄C57BL/6小鼠适应性培养1-2天，分为正常对照组(NC)、模型组(Cisplatin 20mg/kg)、低剂量组(Cisplatin 20mg/kg+化合物RH-14021mg/kg)、中剂量组(Cisplatin 20mg/kg+化合物RH-14022mg/kg)、高剂量组(Cisplatin 20mg/kg+化合物RH-14024mg/kg)，每组6-10只。小鼠腹腔注射20mg/kg顺铂建立急性肾损伤模型并注射低、中、高剂量的化合物RH-1402，3天后麻醉状态下收取血样及肾组织，提取组织RNA，逆转录，扩增。
Real-time PCR结果如图4a、图4b、图4c所示，由图4a、图4b、图4c可知：急性肾损伤模型中炎症因子TNF-αmRNA、IL-1βmRNA、IL-6mRNA水平显著上升，而化合物RH-1402可明显降低炎症因子水平，改善炎症。同时，图4d结果同样显示：化合物RH-1402可降低顺铂引起的模型组肾脏MCP-1mRNA高表达，这可能是化合物RH-1402保护急性肾损伤的作用机制之一。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (3)
1.化合物RH-1402在制备抗急性肾损伤药物中的应用，化合物RH-1402的结构如下所示：
2.根据权利要求1所述的化合物RH-1402在制备抗急性肾损伤药物中的应用，其特征在于，以化合物RH-1402为活性化合物，添加药物制剂上能够接受的辅料，制备成药物制剂。
3.根据权利要求2所述的化合物RH-1402在制备抗急性肾损伤药物中的应用，其特征在于，所述药物制剂为片剂、胶囊剂、混悬剂、乳剂、粉针剂、注射剂中的任意一种剂型。
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| Anti-inflammatory Effects of a Small Molecule Gastrin-Releasing Peptide ReceptorAntagonist on Adjuvant-Induced Rheumatoid Arthritis in rats;Mei Wen-Yi等;《Chemical & pharmaceutical bulletin》;20180401;第66卷(第4期);第10页 * |
| 氨基丙酸乙酯类GRPR抑制剂的设计、合成和抗痒活性研究;姚日生等;《2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集》;20101101;1-9 * |
| 脂多糖诱导的急性肾损伤小鼠模型中JNK信号通路的激活;覃春美等;《基础医学与临床》;20150705;第35卷(第7期);摘要 * |
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