CN109651485A - 一种葡萄籽蛋白质的提取及纯化方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了：一种葡萄籽蛋白质的提取及纯化方法，包括以下步骤：取葡萄籽，去除杂质后粉碎，将葡萄籽粉通过超临界CO2提取得脱脂葡萄籽粉，然后加入乙醇溶液，浸提得脱脂脱酚葡萄籽粉；取脱脂脱酚葡萄籽粉，加入NaOH溶液调节PH值至7.5～11；将料液放入提取器中，提取温度为50℃～95℃，提取时间为30min～155min，得提取液；将提取液离心，得上清液；在上清液中加入H2O2溶液，加入量为3％～15％，在60℃～70℃下搅拌脱色；加入硫酸铵固体搅拌静置，然后离心分离沉淀，以硫酸铵为离心液，加入直至无蛋白沉淀出现，得蛋白沉淀。本发明优点：充分利用葡萄酿酒后产生的资源性副产物葡萄籽的剩余价值，从中提取蛋白质，具有很高的营养和生物活性价值。

Description

一种葡萄籽蛋白质的提取及纯化方法
技术领域
本发明涉及一种蛋白质的提取及纯化方法，尤其是涉及一种葡萄籽蛋白质的提取及纯化方法。
背景技术
葡萄，是起源最古老、分布最广泛的植物之一，全世界每年的葡萄产量可以占水果总产量的25％，其不仅可以作为生食水果，而且可以酿酒，具有很高的营养价值和经济价值。
我国现代葡萄酒生产已有一百二十余年时间，葡萄籽是在酿酒过程中的产生的资源性副产物，其年产量就可达5万吨，葡萄籽含有丰富的蛋白质、脂肪其他生物活性成分，具有较高的研究利用价值，但是，目前对于葡萄酿酒后产生的资源性副产物葡萄籽的利用，还十分缺乏。
发明内容
发明目的：针对上述问题，本发明的目的是提供一种葡萄籽蛋白质的提取及纯化方法，充分利用葡萄酿酒后产生的资源性副产物葡萄籽的剩余价值。
技术方案：一种葡萄籽蛋白质的提取及纯化方法，包括以下步骤：
步骤一：取葡萄籽，去除杂质后粉碎，将葡萄籽粉通过超临界CO2提取得脱脂葡萄籽粉，然后加入乙醇溶液，浸提得脱脂脱酚葡萄籽粉；
步骤二：取脱脂脱酚葡萄籽粉，加入NaOH溶液调节PH值至7.5～11；
步骤三：将料液放入提取器中，提取温度为50℃～95℃，提取时间为30min～155min，得提取液；
步骤四：将提取液放入离心机中离心，得上清液；
步骤五：在上清液中加入H2O2溶液，加入量为3％～15％，在60℃～70℃下搅拌脱色40min～60min；
步骤六：加入硫酸铵固体搅拌静置，然后以5500r/min～6500r/min离心分离沉淀，以硫酸铵为离心液，加入直至无蛋白沉淀出现，得蛋白沉淀。
进一步的，在步骤一中，粉碎后的葡萄籽粉过60目筛。
进一步的，在步骤三中，脱脂脱酚葡萄籽粉与NaOH溶液的料液比为1:15～1:30。
进一步的，在步骤五中，H2O2溶液的浓度为30％。
进一步的，在步骤六中，硫酸铵饱和度为80％。
有益效果：与现有技术相比，本发明的优点是：充分利用葡萄酿酒后产生的资源性副产物葡萄籽的剩余价值，从中提取蛋白质，葡萄籽蛋白质作为优质蛋白质资源，具有很高的营养和生物活性价值，延长了葡萄的产业链，节约和充分利用资源，具有很高的经济价值。
具体实施方式
下面对本发明的较佳实施例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能更易于被本领域技术人员理解，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。
一种葡萄籽蛋白质的提取及纯化方法，包括以下步骤：
步骤一：取葡萄籽，去除杂质后粉碎，粉碎后的葡萄籽粉过60目筛，将葡萄籽粉通过超临界CO2提取得脱脂葡萄籽粉，然后加入乙醇溶液，浸提得脱脂脱酚葡萄籽粉；
步骤二：取脱脂脱酚葡萄籽粉，加入NaOH溶液调节PH值至7.5～11，脱脂脱酚葡萄籽粉与NaOH溶液的料液比为1:15～1:30；
步骤三：将料液放入提取器中，提取温度为50℃～95℃，提取时间为30min～155min，得提取液；
步骤四：将提取液放入离心机中离心，得上清液；
步骤五：在上清液中加入浓度为30％H2O2溶液，加入量为3％～15％，在60℃～70℃下搅拌脱色40min～60min；
步骤六：加入硫酸铵固体搅拌静置，然后以5500r/min～6500r/min离心分离沉淀，以硫酸铵为离心液，加入直至无蛋白沉淀出现，硫酸铵饱和度为80％，得蛋白沉淀。
当脱脂脱酚葡萄籽粉与NaOH溶液的料液比为1:25，提取温度为87℃、提取液pH值为11，提取时间为130min时，葡萄籽蛋白提取率为81.12％，且提取液颜色呈浅红色、无异味。
当H2O2的加入量为8％、温度为65℃、搅拌时间为55min时，蛋白提取液色素脱除率可达60％。蛋白提取液经分离、纯化后，蛋白相对含量超过90％，整个分离纯化过程蛋白得率为56.72％。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (5)

1.一种葡萄籽蛋白质的提取及纯化方法，其特征在于包括以下步骤：
步骤一：取葡萄籽，去除杂质后粉碎，将葡萄籽粉通过超临界CO2提取得脱脂葡萄籽粉，然后加入乙醇溶液，浸提得脱脂脱酚葡萄籽粉；
步骤二：取脱脂脱酚葡萄籽粉，加入NaOH溶液调节PH值至7.5～11；
步骤三：将料液放入提取器中，提取温度为50℃～95℃，提取时间为30min～155min，得提取液；
步骤四：将提取液放入离心机中离心，得上清液；
步骤五：在上清液中加入H2O2溶液，加入量为3％～15％，在60℃～70℃下搅拌脱色40min～60min；
步骤六：加入硫酸铵固体搅拌静置，然后以5500r/min～6500r/min离心分离沉淀，以硫酸铵为离心液，加入直至无蛋白沉淀出现，得蛋白沉淀。
2.根据权利要求1所述的一种葡萄籽蛋白质的提取及纯化方法，其特征在于：在步骤一中，粉碎后的葡萄籽粉过60目筛。
3.根据权利要求1所述的一种葡萄籽蛋白质的提取及纯化方法，其特征在于：在步骤三中，脱脂脱酚葡萄籽粉与NaOH溶液的料液比为1:15～1:30。
4.根据权利要求1所述的一种葡萄籽蛋白质的提取及纯化方法，其特征在于：在步骤五中，H2O2溶液的浓度为30％。
5.根据权利要求1所述的一种葡萄籽蛋白质的提取及纯化方法，其特征在于：在步骤六中，硫酸铵饱和度为80％。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110423263A (zh) * 2019-09-08 2019-11-08 浙江理工大学 一种从葡萄籽中提取蛋白质的方法
CN111840634A (zh) * 2020-08-14 2020-10-30 北方民族大学 一种葡萄籽提取物水凝胶的制备方法及应用
CN115868629A (zh) * 2022-11-30 2023-03-31 吉林工商学院 一种从葡萄籽中同步提取多种营养物质及活性成分的方法

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