CN109628223A - 一种菊花精油的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种菊花精油的制备方法，属于天然物质提取技术领域，包括以下步骤：1)将菊花粉与饱和氯化钠溶液混合后浸泡，得到浸泡物；所述菊花粉的粒径为100～200目；所述菊花粉与饱和氯化钠溶液的质量比为1:(10～14)；所述浸泡的时间为8～12h；2)将所述步骤1)得到的浸泡物与正己烷混合后进行蒸馏，得到菊花精油；所述蒸馏的时间为9～13h。采用本发明的方法，菊花精油的提取率在0.5％以上，按照《中国药典第一部》中的水蒸气蒸馏法，菊花精油的提取率为0.325％，与现有技术相比，本发明提供的菊花精油的制备方法提高了菊花精油的提取率。

Description

一种菊花精油的制备方法
技术领域
本发明涉及天然物质提取技术领域，具体涉及一种菊花精油的制备方法。
背景技术
菊花是菊科植物菊(Chrysanthemum morifolium Ramat)的干燥头状花序，是我国常用中药，不仅具有很高的药用价值,而且具有很高的营养功效。传统中医理论认为：菊花具有散风清热、平肝明目作用。可用于风热感冒、头痛眩晕、眼目昏花。现代国内外药理研究表明，菊花具有抗肿瘤、消炎、抗菌、抗氧化、增加冠脉流量、抗心肌缺血、抗病毒等多种生理活性。同时，菊花中还含有人体所必需的脂肪酸、维生素和微量元素，具有很高的营养价值，能够维持人体正常的生命活动。其中精油是其主要活性成分之一。
菊花精油的提取方法有水蒸气蒸馏法、有机溶剂提取法、超临界流体萃取法等。其中有机溶剂法容易引入杂质，造成有机溶剂残留；超临界流体萃取法的成本较高；水蒸气蒸馏法简单，容易操作，《中国药典第一部》中记载了采用水蒸气蒸馏法提取菊花精油，提取率为0.325％，提取率并不理想。
发明内容
本发明的目的在于提供一种菊花精油的制备方法，采用本发明提供的制备方法，能够提高菊花精油的提取率。
本发明提供了一种菊花精油的制备方法，包括以下步骤：
1)将菊花粉与饱和氯化钠溶液混合后浸泡，得到浸泡物；
所述菊花粉的粒径为100～200目；
所述菊花粉与饱和氯化钠溶液的质量比为1:(10～14)；
所述浸泡的时间为8～12h；
2)将所述步骤1)得到的浸泡物与正己烷混合后进行蒸馏，得到菊花精油；
所述蒸馏的时间为9～13h。
优选的，所述步骤2)浸泡物与正己烷的体积比为150:(1～1.5)。
优选的，所述步骤1)菊花粉的粒径为120～180目。
优选的，所述步骤1)菊花粉与饱和氯化钠溶液的质量比为1:(11～13)。
优选的，所述步骤1)浸泡的时间为9～11h。
优选的，所述步骤1)菊花粉的含水量在6％以下。
优选的，所述步骤2)蒸馏的温度为95～100℃。
优选的，所述蒸馏的时间为10～12h。
优选的，所述步骤2)蒸馏后还包括：将得到的蒸馏物去除水后在45～55℃下处理2.5～3.5h，得到菊花精油。
优选的，所述蒸馏物除去水后在50℃下处理3h，得到菊花精油。
本发明提供了提供了一种菊花精油的制备方法，100～200目的菊花粉用10～14倍的饱和氯化钠溶液浸泡8～12后，再与正己烷混合后进行蒸馏9～13h，提高了菊花精油的提取率。
本发明实施例的结果显示：采用本发明的方法，菊花精油的提取率在0.5％以上，按照《中国药典第一部》中的水蒸气蒸馏法，菊花精油的提取率为0.325％，与现有技术相比，本发明提供的菊花精油的制备方法提高了菊花精油的提取率。
附图说明
图1为本发明提供的菊花精油的总离子流图。
具体实施方式
本发明提供了一种菊花精油的制备方法，包括以下步骤：
1)将菊花粉与饱和氯化钠溶液混合后浸泡，得到浸泡物；
所述菊花粉的粒径为100～200目；
所述菊花粉与饱和氯化钠溶液的质量比为1:(10～14)；
所述浸泡的时间为8～12h；
2)将所述步骤1)得到的浸泡物与正己烷混合后进行蒸馏，得到菊花精油；
所述蒸馏的时间为9～13h。
本发明将菊花粉与饱和氯化钠溶液混合后浸泡，得到浸泡物；所述菊花粉的粒径为100～200目；所述菊花粉与饱和氯化钠溶液的质量比为1:(10～14)；所述浸泡的时间为8～12h。
在本发明中，所述饱和氯化钠溶液相较于水浸泡菊花粉，提高了菊花精油的提取率。
在本发明中，所述菊花优选为杭白菊。
在本发明中，所述菊花粉的粒径为100～200目，优选为120～180目，更优选为130～170目。
在本发明中，所述菊花粉的含水量优选在6％以下。
在本发明中，所述菊花粉与饱和氯化钠溶液的质量比为1:(10～14)，优选为1:(11～13)，更优选为1:12。
在本发明中，所述浸泡的时间为8～12h，优选为9～11h，更优选为10h。
本发明将得到的浸泡物与正己烷混合后进行蒸馏，得到菊花精油；所述蒸馏的时间为9～13h。
在本发明中，所述浸泡物与正己烷的体积比优选为150:(1～1.5)。在本发明中，所述正己烷能够促进菊花精油的聚集，避免了菊花精油中密度较大的成分沉降而无法被聚集。
在本发明中，所述蒸馏优选采用水蒸气蒸馏法进行蒸馏，所述蒸馏的温度优选为95～100℃；所述蒸馏的时间为9～13h，优选为10～12h，更优选为11h。
在本发明中，蒸馏后还优选包括：将得到的蒸馏物去除水后在45～55℃下处理2.5～3.5h，得到菊花精油。
在本发明中，所述除去蒸馏物中的水使用的试剂优选为无水硫酸钠，本发明对除去水的方法没有特殊限定，采用无水硫酸钠常规脱除水的方法即可。
在本发明中，所述蒸馏物去除水后在50℃下处理3h，得到菊花精油，所述处理优选在水浴的条件下进行，所述处理能够除去蒸馏物中的正己烷。
下面结合具体实施例对本发明所述的一种菊花精油的制备方法做进一步详细的介绍，本发明的技术方案包括但不限于以下实施例。
实施例1
杭白菊进行热风干燥处理，使菊花含水量在6％以下，经万能粉碎机粉碎后过筛，粉碎粒度为100目，得到菊花粉；
将25g菊花粉置1000ml圆底烧瓶中，加300g饱和氯化钠溶液与数粒玻璃珠，振摇混合静置浸泡8h后，连接精油测定器与回流冷凝管，自冷凝管上端加水使充满精油测定器的刻度部分，并溢流入烧瓶时为止，再从冷凝管上端加入3ml正己烷，然后将烧瓶置电热套中加热至沸，调温并保持微沸9h，至测定器中油量不在增加，停止加热，放置片刻，开启测定器下端活塞将水缓缓放出，收集精油得菊花精油粗提物；
菊花精油粗提物经无水硫酸钠脱水除去水分，之后置于50℃水浴3小时挥去粗提物中正己烷，得到淡黄色精油，精密称重，计算提取率。精油提取率＝杭白菊中精油含量/杭白菊重量×100％。
采用上述提取方法，菊花精油的提取率为0.516％。
实施例2
杭白菊进行热风干燥处理，使菊花含水量在6％以下，经万能粉碎机粉碎后过筛，粉碎粒度为200目，得到菊花粉；
将50g菊花粉置2000ml圆底烧瓶中，加700g饱和氯化钠溶液与数粒玻璃珠，振摇混合静置浸泡12h后，连接精油测定器与回流冷凝管，自冷凝管上端加水使充满精油测定器的刻度部分，并溢流入烧瓶时为止，再从冷凝管上端加入6ml正己烷，然后将烧瓶置电热套中加热至沸，调温并保持微沸13h，至测定器中油量不在增加，停止加热，放置片刻，开启测定器下端活塞将水缓缓放出，收集精油得菊花精油粗提物；
菊花精油粗提物经无水硫酸钠脱水除去水分，之后置于45℃水浴2.5小时挥去粗提物中正己烷，得到淡黄色精油，精密称重，计算提取率。精油提取率＝杭白菊中精油含量/杭白菊重量×100％。
采用上述提取方法，菊花精油的提取率为0.524％。
实施例3
杭白菊进行热风干燥处理，使菊花含水量在6％以下，经万能粉碎机粉碎后过筛，粉碎粒度为200目，得到菊花粉；
将75g菊花粉置2000ml圆底烧瓶中，加750g饱和氯化钠溶液与数粒玻璃珠，振摇混合静置浸泡10h后，连接精油测定器与回流冷凝管，自冷凝管上端加水使充满精油测定器的刻度部分，并溢流入烧瓶时为止，再从冷凝管上端加入5.5ml正己烷，然后将烧瓶置电热套中加热至沸，调温并保持微沸10h，至测定器中油量不在增加，停止加热，放置片刻，开启测定器下端活塞将水缓缓放出，收集精油得菊花精油粗提物；
菊花精油粗提物经无水硫酸钠脱水除去水分，之后置于55℃水浴3.5小时挥去粗提物中正己烷，得到淡黄色精油，精密称重，计算提取率。精油提取率＝杭白菊中精油含量/杭白菊重量×100％。
采用上述提取方法，菊花精油的提取率为0.532％。
将实施例1～3制备的菊花精油用环己烷稀释100倍后进行GC-MS分析，得到菊花精油的总离子流图，结果见图1，从图1中可以得出，菊花精油经毛细管气相色谱分析，共分离出125个峰，鉴定出59个化合物，占挥发油总量的61.74％，其中，2-甲基-1-戊烯、樟脑、龙脑、乙酸龙脑酯、β-榄香烯、正葵酸、反-β-合金欢烯、姜黄烯、α-香柠檬烯、β-没药烯、β-杜松烯、环氧石竹烯、β-马榄烯、α-木香醇、十六烷酸、9,12-十八碳二烯酸、二十三碳烷、二十五烷的含量在杭白菊挥发油中的相对含量＞1％。
对比例1
杭白菊进行热风干燥处理，使菊花含水量在6％以下，经万能粉碎机粉碎后过筛，粉碎粒度为200目，得到菊花粉；
将50g菊花粉置2000ml圆底烧瓶中，加700g水与数粒玻璃珠，振摇混合后，连接精油测定器与回流冷凝管，自冷凝管上端加水使充满精油测定器的刻度部分，并溢流入烧瓶时为止，然后将烧瓶置电热套中加热至沸，调温并保持微沸5h，至测定器中油量不在增加，停止加热，放置片刻，开启测定器下端活塞将水缓缓放出，至油层上端到达刻度0线上面5mm处为止。放置1h以上，再开启活塞使油层下降至其上端恰与刻度0线齐平，读取挥发油量，并计算菊花粉中挥发油的含量。
采用上述提取方法，菊花精油的提取率为0.325％。
抑菌活性研究：
利用实施例1～3制备的菊花精油制备精油稀释液Ⅰ和精油稀释液Ⅱ。
精油稀释液Ⅰ，杭白菊精油以正己烷稀释成50％，25％，12.5％，6.25％，3.125％(v/v)的精油稀释液。
精油稀释液Ⅱ，杭白菊精油以95％乙醇助溶(1ml精油：4ml 95％乙醇)，用无菌水稀释成2倍比浓度(v/v)的挥发油稀释液，精油浓度依次为10％，5％，2.5％，1.25％，0.63％；相对应的含乙醇浓度依次为38％，19％，9.5％，4.75％，2.38％。
1抑菌环试验
利用抑菌剂不断溶解经琼脂扩散形成不同浓度梯度，以显示其抑菌作用。实验通过抑菌环大小以判断其是否具有抑菌能力。
1.1抑菌剂样片制作
用5mm直径园形新华一号定性滤纸片，经压力蒸汽灭菌处理后，置120℃烤干2h。取无菌并干燥的滤纸片，滴加精油稀释液Ⅰ20μl，然后将滤纸片平放于清洁的无菌平皿内，室温下自然干燥后使用，同时制作含有正己烷的圆形滤纸片，作为对照。用无菌棉拭子蘸取浓度为5×105cfu/ml～5×106cfu/ml试验菌悬液，在培养基平板表面均匀涂抹3次。每涂抹1次，平板应转动60°，最后将棉拭子绕平板边缘涂抹一周。盖好平皿，置室温干燥5min。
1.2抑菌剂样片贴放
每次试验贴放1个染菌平板，每个平板贴放4片试验样片，1片阴性对照样片，共5片。用无菌镊子取样片贴放于平板表面。各样片中心之间相距25mm以上，与平板的周缘相距15mm以上。贴放好后，用无菌镊子轻压样片，使其紧贴于平板表面。细菌在37℃恒温倒置培养24h，霉菌在28℃恒温倒置培养48h，观察抑菌情况，用游标卡尺测量抑菌环的直径(包括贴片)并记录。试验重复3次，求其平均值，以此评价其抑菌效果。
2最小抑菌浓度(MIC)的测定及最小杀菌浓度(MBC)的测定
用无菌移液枪吸取精油稀释液Ⅱ1ml，注入直径90mm的无菌培养皿中，加入己溶解的约15ml无菌培养基(温度<45℃)，充分混匀后冷却制成含样液平板，并编号，以无菌水和50％乙醇作对照。吸取菌悬液或孢子悬液0.1ml于平板表面，涂布均匀，置适温(细菌37℃，霉菌28℃)下，培养一定时间(细菌培养24h，霉菌培养48h)后，观察测试菌的生长情况。以完全没有菌生长的最低浓度作为该精油的最小抑菌浓度MIC，实验重复3次，求其平均值。
把上述没有长菌的平板继续培养(细菌再培养24h，霉菌再培养48h)，以完全没有菌生长的最低浓度作为杭白菊精油的最小杀菌浓度MBC，实验重复3次，求其平均值。
3抑菌环试验法测定杭白菊精油的抑菌活性
结果判断：抑菌环直径大于7mm者，判为有抑菌作用。抑菌环直径小于或等于7mm者，判为无抑菌作用。3次重复试验均有抑菌作用结果者，判为合格。阴性对照组应无抑菌环产生，否则试验无效。
结果见表1，结果表明，正己烷对照无抑菌环，杭白菊精油对大肠杆菌、绿脓杆菌、福氏志贺菌3种革兰氏阴性杆菌均无抑制作用，从试验结果可以认为，杭白菊精油对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性球菌、霉菌有抑菌作用，可能对革兰氏阴性杆菌没有作用。
表1杭白菊精油的抑菌环直径(mm)
注：“—”表示无抑菌环
4最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC)
结果见表2，结果表明，无菌水和50％乙醇对照均有细菌生长，杭白菊精油对枯草芽孢杆菌、甲型溶血性链球菌、肺炎球菌、新生隐球菌抑菌、杀菌作用较强。对大肠杆菌、绿脓杆菌、福氏志贺菌不具有抑菌和杀菌能力。
表2杭白菊精油的MIC和MBC
注：“—”表示无作用
由以上实施例可以得出，采用本发明提供的制备方法，制备得到的菊花精油的提取率在0.5％以上，采用药典的制备方法，菊花精油的提取率为0.325％，与药典相比，提高了菊花精油的提取率，而且本发明制备的菊花精油具有抑菌的作用。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种菊花精油的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将菊花粉与饱和氯化钠溶液混合后浸泡，得到浸泡物；
所述菊花粉的粒径为100～200目；
所述菊花粉与饱和氯化钠溶液的质量比为1:(10～14)；
所述浸泡的时间为8～12h；
2)将所述步骤1)得到的浸泡物与正己烷混合后进行蒸馏，得到菊花精油；
所述蒸馏的时间为9～13h。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)浸泡物与正己烷的体积比为150:(1～1.5)。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)菊花粉的粒径为120～180目。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)菊花粉与饱和氯化钠溶液的质量比为1:(11～13)。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)浸泡的时间为9～11h。
6.根据权利要求1、3和4任一项所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)菊花粉的含水量在6％以下。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)蒸馏的温度为95～100℃。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述蒸馏的时间为10～12h。
9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)蒸馏后还包括：将得到的蒸馏物去除水后在45～55℃下处理2.5～3.5h，得到菊花精油。
10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述蒸馏物除去水后在50℃下处理3h，得到菊花精油。
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