CN109593692A - 一种发光细菌培养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种发光细菌的培养基，包括以下重量份原料；酵母浸出汁、胰蛋白陈、NaCl、Na2HPO4、KH2PO4、甘油和蒸馏水；还提出了一种发光细菌培养方法，包括以下步骤：S1、将酵母浸出汁、胰蛋白陈、NaCl、Na2HPO4、KH2PO4、甘油和蒸馏水进行混合搅拌，得到培养液a；S2、将混合物a的PH调至7±0.5范围内，得到培养液b；S3、将培养液b控制在121℃的条件下灭菌21min；得到培养液c；S4、将培养液c冷却至室温，得到培养基；S5、在无菌操作条件下，用接种钩取发光细菌放置培养基中进行接种；S6、将接种后的培养基放置在20～28℃恒温箱内，并恒温培养2～3天。本发明具有方法简单，且易于操作，同时，制备培养基的原材料廉价，并容易获取的优点。
Description
技术领域
本发明涉及细菌培养领域，尤其涉及一种发光细菌培养方法。
背景技术
发光细菌是一类在正常的生理条件下能够发射可见荧光的细菌；研究发光细菌具有以下的意义：作为微生物学学术研究，发光细菌是微生物中很有特色的微生物。它们的发光能力是如何形成和发展的，仍然成谜，需要人们对此努力去研究解释；发光无毒无害，可自发发出美丽的蓝绿荧光，适合作为小学生、青少年接触科学，接触实验的有趣材料。激发青少年对科学实验动手的兴趣、体会亲手培养出发光细菌的快乐；发光细菌有巨大的应用价值。由于发光细菌非常敏感，对环境中的毒素反应迅速，可以用于生物毒性大小的检测。较之于传统的动物（小鼠、鱼类）或藻类毒性实验，不但耗时短，而且快速、灵敏，成本更低。早在20世纪40年代，就有关于利用发光细菌进行大气污染的监测，用于抗生素的筛选，麻醉药物的筛选等。对环境污染的监测，以及食品卫生方面的快速检测近年来更是得到极大的重视和广泛的关注。因此，我们提出了一种发光细菌培养方法。
发明内容
为解决背景技术中存在的技术问题，本发明提出一种发光细菌培养方法，具有方法简单，且易于操作，同时，制备培养基的原材料廉价，并容易获取的优点。
本发明提出的一种发光细菌的培养基，包括以下重量份原料；0.4-0.6份酵母浸出汁、0.4-0.6份胰蛋白陈、2-4份NaCl、0.4-0.6份Na2HPO4、0.05-0.15份KH2PO4、 0.2-0.4份甘油和98-102份蒸馏水。
优选的，包括以下重量份原料；0.4份酵母浸出汁、0.4份胰蛋白陈、2份NaCl、0.4份Na2HPO4、0.05份KH2PO4、 0.2份甘油和98份蒸馏水。
优选的，包括以下重量份原料；0.5份酵母浸出汁、0.5份胰蛋白陈、3份NaCl、0.5份Na2HPO4、0.1份KH2PO4、 0.3份甘油和100份蒸馏水。
优选的，包括以下重量份原料；0.6份酵母浸出汁、0.6份胰蛋白陈、4份NaCl、0.6份Na2HPO4、0.15份KH2PO4、 0.4份甘油和102份蒸馏水。
优选的，包括以下重量份原料；0.4-0.6份酵母浸出汁、0.4-0.6份胰蛋白陈、2-4份NaCl、0.4-0.6份Na2HPO4、0.05-0.15份KH2PO4、 0.2-0.4份甘油、98-102份蒸馏水和1-3份琼脂粉。
本发明还提出了一种发光细菌培养方法，包括以下步骤：
S1、将酵母浸出汁 、胰蛋白陈、NaCl、Na2HPO4、KH2PO4、甘油和蒸馏水进行混合搅拌，得到培养液a；
S2、将混合物a的PH调至7±0.5范围内，得到培养液b；
S3、将培养液b控制在121℃的条件下灭菌21min；得到培养液c；
S4、将培养液c冷却至室温，得到培养基；
S5、在无菌操作条件下，用接种钩取发光细菌放置培养基中进行接种，并迅速用用聚丙烯塑料薄膜和乳胶圈封扎瓶口；
S6、将接种后的培养基放置在20～28℃恒温箱内，并恒温培养2～3天。
优选的，发光细菌培养前，需要通过高压灭菌锅对培养的仪器和器皿进行消毒灭菌。
优选的，S1中,通过添加琼脂粉制备使得培养液凝固，并可制备固体的培养基。
优选的，S6中，恒温培养时需要每天检查2次，及时淘汰染菌或劣势菌种。
本发明中，发光细菌培养方法简单，且易于操作，同时，制备培养基的原材料廉价，并容易获取，于是，可以将发光细菌培养的内容可推广扩展到本科生开放性操作实验或青少年科普教育演示实验中，提高学生的兴趣和动手操作能力，另外，对培养的发光细菌可以作进一步的研究和分析，目前，发光菌检测法是以一种非致病的明亮发光杆菌作指示生物，以其发光强度的变化为指标，测定环境中有害有毒物质的生物毒性的一种方法。这种发光过程极易受到外界条件的影响。凡是干扰或损害细菌呼吸或生理过程的任何因素都能使细菌发光强度发生变化。当有毒有害物质与发光菌接触时，发光强度立即改变，并随着毒物浓度的增加而发光减弱。这种发光强度的变化，可用一种精密测光仪定量地测定。
具体实施方式
实施例1
本发明提出的一种发光细菌的培养基，包括以下重量份原料；0.4-0.6份酵母浸出汁、0.4-0.6份胰蛋白陈、2-4份NaCl、0.4-0.6份Na2HPO4、0.05-0.15份KH2PO4、 0.2-0.4份甘油和98-102份蒸馏水。
实施例2
本发明提出的一种发光细菌的培养基，包括以下重量份原料；0.4份酵母浸出汁、0.4份胰蛋白陈、2份NaCl、0.4份Na2HPO4、0.05份KH2PO4、 0.2份甘油和98份蒸馏水。
实施例3
本发明提出的一种发光细菌的培养基，包括以下重量份原料；0.5份酵母浸出汁、0.5份胰蛋白陈、3份NaCl、0.5份Na2HPO4、0.1份KH2PO4、 0.3份甘油和100份蒸馏水。
实施例4
本发明提出的一种发光细菌的培养基，包括以下重量份原料；0.6份酵母浸出汁、0.6份胰蛋白陈、4份NaCl、0.6份Na2HPO4、0.15份KH2PO4、 0.4份甘油和102份蒸馏水。
实施例5
本发明提出的一种发光细菌的培养基，包括以下重量份原料；0.4-0.6份酵母浸出汁、0.4-0.6份胰蛋白陈、2-4份NaCl、0.4-0.6份Na2HPO4、0.05-0.15份KH2PO4、 0.2-0.4份甘油、98-102份蒸馏水和1-3份琼脂粉。
实施例6
根据上述实施例，本发明还提出了一种发光细菌培养方法，包括以下步骤：
S1、将酵母浸出汁 、胰蛋白陈、NaCl、Na2HPO4、KH2PO4、甘油和蒸馏水进行混合搅拌，得到培养液a；
S2、将混合物a的PH调至7±0.5范围内，得到培养液b；
S3、将培养液b控制在121℃的条件下灭菌21min；得到培养液c；
S4、将培养液c冷却至室温，得到培养基；
S5、在无菌操作条件下，用接种钩取发光细菌放置培养基中进行接种，并迅速用用聚丙烯塑料薄膜和乳胶圈封扎瓶口；
S6、将接种后的培养基放置在20～28℃恒温箱内，并恒温培养2～3天。
本实施例的主题的具体工作过程中，发光细菌培养方法简单，且易于操作，用途广泛，同时，制备培养基的原材料廉价，并容易获取，于是，可以将发光细菌培养的内容可推广扩展到本科生开放性操作实验或青少年科普教育演示实验中，提高学生的兴趣和动手操作能力，另外，对培养的发光细菌可以作进一步的研究和分析，目前，发光菌检测法是以一种非致病的明亮发光杆菌作指示生物，以其发光强度的变化为指标，测定环境中有害有毒物质的生物毒性的一种方法。这种发光过程极易受到外界条件的影响。凡是干扰或损害细菌呼吸或生理过程的任何因素都能使细菌发光强度发生变化。当有毒有害物质与发光菌接触时，发光强度立即改变，并随着毒物浓度的增加而发光减弱。这种发光强度的变化，可用一种精密测光仪定量地测定。
在一个可选的实施例中，发光细菌培养前，需要通过高压灭菌锅对培养的仪器和器皿进行消毒灭菌。
在一个可选的实施例中，S1中,通过添加琼脂粉制备使得培养液凝固，并可制备固体的培养基。
在一个可选的实施例中，S6中，恒温培养时需要每天检查2次，及时淘汰染菌或劣势菌种。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种发光细菌的培养基，其特征在于，包括以下重量份原料；0.4-0.6份酵母浸出汁、0.4-0.6份胰蛋白陈、2-4份NaCl、0.4-0.6份Na2HPO4、0.05-0.15份KH2PO4、 0.2-0.4份甘油和98-102份蒸馏水。
2.根据权利要求1所述的一种发光细菌的培养基，其特征在于，包括以下重量份原料；0.4份酵母浸出汁、0.4份胰蛋白陈、2份NaCl、0.4份Na2HPO4、0.05份KH2PO4、 0.2份甘油和98份蒸馏水。
3.根据权利要求1所述的一种发光细菌的培养基，其特征在于，包括以下重量份原料；0.5份酵母浸出汁、0.5份胰蛋白陈、3份NaCl、0.5份Na2HPO4、0.1份KH2PO4、 0.3份甘油和100份蒸馏水。
4.根据权利要求1所述的一种发光细菌的培养基，其特征在于，包括以下重量份原料；0.6份酵母浸出汁、0.6份胰蛋白陈、4份NaCl、0.6份Na2HPO4、0.15份KH2PO4、 0.4份甘油和102份蒸馏水。
5.根据权利要求1所述的一种发光细菌的培养基，其特征在于，包括以下重量份原料；0.4-0.6份酵母浸出汁、0.4-0.6份胰蛋白陈、2-4份NaCl、0.4-0.6份Na2HPO4、0.05-0.15份KH2PO4、 0.2-0.4份甘油、98-102份蒸馏水和1-3份琼脂粉。
6.根据权利要求1至5任一项所述的发光细菌的培养基，还提出了一种发光细菌培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、将酵母浸出汁 、胰蛋白陈、NaCl、Na2HPO4、KH2PO4、甘油和蒸馏水进行混合搅拌，得到培养液a；
S2、将混合物a的PH调至7±0.5范围内，得到培养液b；
S3、将培养液b控制在121℃的条件下灭菌21min；得到培养液c；
S4、将培养液c冷却至室温，得到培养基；
S5、在无菌操作条件下，用接种钩取发光细菌放置培养基中进行接种，并迅速用用聚丙烯塑料薄膜和乳胶圈封扎瓶口；
S6、将接种后的培养基放置在20～28℃恒温箱内，并恒温培养2～3天。
7.根据权利要求6所述的一种发光细菌培养方法，其特征在于，发光细菌培养前，需要通过高压灭菌锅对培养的仪器和器皿进行消毒灭菌。
8.根据权利要求6所述的一种发光细菌培养方法，其特征在于，S1中,通过添加琼脂粉制备使得培养液凝固，并可制备固体的培养基。
9.根据权利要求6所述的一种发光细菌培养方法，其特征在于，S6中，恒温培养时需要每天检查2次，及时淘汰染菌或劣势菌种。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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Application publication date: 20190409 |