CN109563134A - 新型环肽及其用途 - Google Patents

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CN109563134A CN201780047922.XA CN201780047922A CN109563134A CN 109563134 A CN109563134 A CN 109563134A CN 201780047922 A CN201780047922 A CN 201780047922A CN 109563134 A CN109563134 A CN 109563134A
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H·昂格
张金强
D·M·穆鲁姆巴
S·马洛
R·G·欧姆
阿肖努拉
S·奥姆里
R·青格尔
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Les Johnson - Ruiche Waller Relaxation LP
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Abstract

描述了具有式(I)的新型环肽GHRP‑6类似物：(I)或其药学上可接受的酯或盐。这些环肽GHRP‑6类似物可以用于调节CD36活性，例如用于在受试者中治疗CD36相关疾病、紊乱或病症，例如动脉粥样硬化和年龄相关性黄斑变性。

Description

新型环肽及其用途
相关申请的交叉引用
本申请要求于2016年6月28日提交的美国临时申请序列号62/355,496和2016年9月2日提交的美国临时申请序列号62/823,016的权益，其通过引用整体并入本文。
技术领域
本发明一般涉及CD36的调节，更具体地涉及CD36的抑制剂及其用途。
背景技术
CD36也称为FAT、SCARB3、GP88、糖蛋白IV(gpIV)和糖蛋白IIIb(gpIIIb)，是在脊椎动物的许多细胞类型，特别是巨噬细胞泡沫细胞的表面上发现的完整膜蛋白。CD36是细胞表面蛋白的B类清道夫受体家族的成员。已显示CD36结合许多配体，包括胶原蛋白，血小板反应蛋白，寄生恶性疟原虫的红细胞，氧化的低密度脂蛋白，天然脂蛋白，氧化磷脂，β-淀粉样蛋白和长链脂肪酸。Toll样受体-2(TLR2)与CD36共表达，CD36作为携带TLR2的细胞(如巨噬细胞和微血管内皮细胞)上的共受体。此外，已经显示CD36调节由TLR2介导的炎症反应。因此，与CD36相互作用的配体可能具有通过变构机制调节TLR2信号传导途径的潜力。发现TLR2与抗Toll样受体-2抗体的拮抗作用可降低缺血再灌注损伤的风险，以及肾移植后的后续炎症10。鉴于抗体的成功，TLR2介导的信号传导的拮抗剂是有吸引力的治疗靶标。
失调或不受调节的CD36活性已与几种病理状况有关，包括动脉粥样硬化，炎症(如TLR2相关炎症)，异常血管生成，年龄相关性黄斑变性(干性和/或湿性)，脂质代谢异常，非酒精性脂肪肝病(NAFLD)，非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，异常去除凋亡细胞，缺血如脑缺血和心肌缺血，缺血再灌注损伤，输尿管梗阻，慢性肾病中的纤维蛋白原发生，中风，阿尔茨海默病，糖尿病，糖尿病肾病和肥胖症1-14。
因此需要开发新型CD36调节剂，其可用于治疗与失调或不受调节的CD36活性相关的病理状况。
本说明书涉及许多文献，其通过引用整体并入本文。
发明内容
本发明提供了以下项目1至176：
1.一种具有式(I)的环肽或其药学上可接受的盐或酯：
其中：
·R1表示氢原子或氨基末端修饰基团；
·R2表示-CO2H、-C(＝O)-NH2或羧基末端修饰基团；
·R3表示氢原子、烷基、烯基、炔基、烯炔基或芳基；
·A'表示-C(R10)(R16)-、-N(R10)-或-X-；
·B'表示共价键或-N(R3)-X-C(＝O)-；
·C'表示-C(R11)(R16)-、-N(R11)-或-X-；
·D'表示-C(R12)(R16)-、-N(R12)-或-X-；
·E'表示-C(R13)(R16)-、-N(R13)-、-X-或-Y-；
·F'表示-C(R14)(R16)-或-N(R14)-；和
·G'表示-C(R15)(R16)-、-N(R15)-或-Y-；
其中：
·R10表示氢原子、烷基、芳基、芳烷基、杂芳基或杂芳烷基；
·R11表示氢原子、烷基、芳基、芳烷基、杂芳基或杂芳烷基；
·R12表示氢原子、任选地被-N(R3)-和/或-O-中断的烷基、芳基、芳烷基，杂芳基或杂芳烷基；
·R13表示氢原子、烷基、芳基、芳烷基、杂芳基或杂芳烷基；
·R14表示氢原子、烷基、芳基、芳烷基、杂芳基或杂芳烷基；
·R15表示-烷基-N(R4)2，每个R4独立地表示氢原子、烷基、烯基、炔基、烯炔基、芳基或C(＝NH)-NH2；和
·R16独立地表示氢原子、烷基、芳基、芳烷基、杂芳基或杂芳烷基；
R10、R11、R12、R13、R14和R16中的芳基、芳烷基、杂芳基和杂芳烷基任选地被一个或多个以下基团取代：羟基、卤素原子、烷基、烷基氨基、卤代烷基、烷氧基、氰基、氨基、烷基氨基、硝基、-N(卤代烷基)2、芳基、芳烷基、芳烷氧基或-C(＝O)芳基，
条件是环肽包含正好一个-X-和正好一个-Y-，
和
条件是R11、R13和R14中不超过两个是氢原子，
其中-X-和-Y-一起形成式(II)或(II')的桥：
其中：
·*标识-X-的第一个原子，
·**标识-Y-的第一个原子，
·R5表示亚烷基、亚烯基、亚炔基或亚烯炔基，所述亚烷基、亚烯基、亚炔基或亚烯炔基任选地被-N(R9)-和/或-C(＝O)-中断，并且所述亚烷基、亚烯基、亚炔基或亚烯炔基任选地被一个或多个烷基或羟基取代，
·R6表示亚烷基、亚烯基、亚炔基、亚烯炔基或亚芳烷基，
·R7表示氢原子、烷基、烯基、环烷基烷基或芳烷基，
·R8表示氢原子或烷基，和
·R9表示氢原子、烷基或芳基。
2.项目1的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中氨基末端修饰基团是：
·直链或支链的1-8个碳原子的烷基，
·酰基RA-CO-，其中RA是疏水部分，或
·芳酰基(Ar-CO-)，其中Ar是芳基；
优选地，氨基末端修饰基团是所述酰基。
3.项目2的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中酰基是直链或支链的饱和或不饱和C1-C16或C3-C16酰基；优选直链或支链的饱和C1-C6酰基或直链或支链不饱和C3-C6酰基，更优选饱和C1-C6酰基，且最优选乙酰基。
4.项目1至3中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R1表示氢原子。
5.项目1至4中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中羧基末端修饰基团是：
·-C(＝O)-NHOH，
·-C(＝O)-NR20R21，其中R20和R21独立地表示氢原子，烷基、芳基或芳烷基，烷基优选为1-10个碳的烷基，
·腈基，或
·羟烷基，优选CH2OH。
6.项目5的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中-NR20R21是脂族胺，优选甲胺，异丁胺，异戊酰胺或环己胺。
7.项目5或6的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中-NR20R21是芳族胺或芳烷基胺，优选苯胺、萘胺、苄胺、肉桂胺或苯乙胺。
8.项目1至7中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R2表示-CO2H。
9.项目1至7中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R2表示羧基末端修饰基团。
10.项目1至7中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R2表示-C(＝O)-NH2。
11.项目1至10中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R3表示氢原子。
12.项目1至11中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R5中的亚烷基、亚烯基、亚炔基或亚烯炔基是C3-C6，优选C3-C5，且更优选C4。
13.项目1至12中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R5表示亚烷基、亚烯基或亚炔基，优选亚烷基或亚炔基，更优选亚炔基。
14.项目1至13中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R5中的亚烷基、亚烯基、亚炔基或亚烯炔基被-N(R9)-和/或-C(＝O)中断。
15.项目1至13中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R5中的亚烷基、亚烯基、亚炔基或亚烯炔基是不中断的。
16.项目1至15中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R5中的亚烷基、亚烯基、亚炔基或亚烯炔基被一个或多个烷基或羟基取代。
17.项目1至15中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R5中的亚烷基、亚烯基、亚炔基或亚烯炔基是未取代的。
18.项目1至17中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R5表示C4亚炔基或C4亚炔基，优选正丁-2-亚炔基或正丁烯基，更优选正丁-2-亚炔基。
19.项目1至18中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R6表示C3-C6亚烷基、C3-C6亚烯基、C3-C6亚炔基、C3-C6亚烯炔基或芳基-C3-C6亚烷基，优选C3-C5亚烷基、C3-C5亚烯基、C3-C5亚炔基、C3-C5亚烯炔或芳基-C3-C5亚烷基，更优选C3-C4亚烷基、C3-C4亚烯基、C3-C4亚炔基、C3-C6亚烯炔基或芳基-C3-C4亚烷基。
20.项目1至19中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R6表示亚烷基，优选C3-C6亚烷基或C3-C5亚烷基，更优选C3-C4亚烷基，且最优选正丙烯基或正丁烯基。
21.项目1至20中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R7中的芳烷基是芳甲基，优选苄基。
22.项目1至21中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R7中的烷基是C2-C6烷基，优选C2-C4烷基，更优选C3烷基，最优选正丙基和异丙基。
23.项目1至22中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R7中的烯基是C2-C6烯基，优选C2-C4烯基，更优选C3烯基，最优选正丙-2-烯基。
24.项目1至23中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R7中的环烷基烷基中的环烷基是C3-6环烷基，优选C3-5环烷基，且更优选C3环烷基。
25.项目1至24中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R7中的环烷基烷基中的烷基是C1-C6烷基，优选C1-C3烷基，且更优选甲基。
26.项目1至25中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R7中的环烷基烷基是环丙基甲基。
27.项目1至26中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R7表示烷基，烯基，环烷基烷基或芳烷基，优选烯基。
28.项目1至27中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R8表示烷基。
29.项目1至27中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R8表示氢原子。
30.项目1至29中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中式(II)的桥是式(II)的桥的(S)-对映体。
31.项目1至29中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中式(II)的桥是式(II)的桥的(R)-对映体。
32.项目1至29中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中式(II)的桥是式(II)的桥的对映体的混合物。
33.项目1至32中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中式(II)的桥是式(III)的桥：
其中*标识-X-的第一个原子，并且**标识-Y-的第一个原子。
34.项目1至33中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中式(II)的桥是式(IV)的桥：
其中*标识-X-的第一个原子，**标识-Y-的第一个原子，并且一个井号(#)标识与邻近的羰基连接的-Y-基团的键。
35.项目1至34中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中式(II')的桥是式(II')的桥的顺式-非对映体。
36.项目1至34中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中式(II')的桥是式(II')的桥的反式-非对映体。
37.项目1至36中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中式(II')的桥是式(II')的桥的非对映体的混合物。
38.项目1至37中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中式(II')的桥是式(V)的桥：
其中*标识-X-的第一个原子，并且**标识-Y-的第一个原子。
39.项目1至38中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中式(II')的桥是式(VI)的桥：
其中：
*标识-X-的第一个原子，
**标识-Y-的第一个原子，
一个井号(#)标识与邻近的羰基(C＝O)基团连接的-Y-基团的键，并且
两个井号(##)标识与邻近的羰基(C＝O)基团连接的-X-基团的键。
40.项目1至39中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中所述-X-和所述-Y-形成式(II)的桥。
41.项目1至39中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中所述-X-和所述-Y-形成式(II')的桥。
42.项目1至41中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中带有R10和R16的碳原子为D-或L-构型或其任何混合物。
43.项目1至41中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中带有R10和R16的碳原子为L构型。
44.项目1至41中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中带有R10和R16的碳原子为D构型。
45.项目1至44中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中带有R11和R16的碳原子为D-或L-构型或其任何混合物。
46.项目1至44中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中带有R11和R16的碳原子为L构型。
47.项目1至44中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中带有R11和R16的碳原子为D构型。
48.项目1至47中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中带有R12和R16的碳原子为D-或L-构型或其任何混合物。
49.项目1至47中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中带有R12和R16的碳原子为L构型。
50.项目1至47中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中带有R12和R16的碳原子为D构型。
51.项目1至50中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中带有R13和R16的碳原子为D-或L-构型或其任何混合物。
52.项目1至50中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中带有R13和R16的碳原子为L构型。
53.项目1至50中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中带有R13和R16的碳原子为D构型。
54.项目1至53中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中带有R14和R16的碳原子为D-或L-构型或其任何混合物。
55.项目1至53中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中带有R14和R16的碳原子为L-构型。
56.项目1至53中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中带有R14和R16的碳原子为D-构型。
57.项目1至56中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中带有R15和R16的碳原子为D-或L-构型或其任何混合物。
58.项目1至56中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中带有R15和R16的碳原子为L-构型。
59.项目1至56中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中带有R15和R16的碳原子为D-构型。
60.项目1至59中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中任选地取代R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基的烷基、卤代烷基和/或烷氧基是C1-6烷基、卤代烷基或烷氧基，优选C1-4烷基、卤代烷基或烷氧基，更优选C1-2烷基、卤代烷基或烷氧基，优选C1烷基、卤代烷基或烷氧基。
61.项目1至60中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中任选地取代R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基的卤代烷基是全卤代烷基，优选全氟烷基，更优选-CF3。
62.项目1至61中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中任选地取代R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基的-N(卤代烷基)2是-N(2-氯乙基)2。
63.项目1至62中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中任选地取代R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基的芳基是苯基。
64.项目1至63中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中任选地取代R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基的芳烷氧基是苄氧基。
65.项目1至64中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中任选地取代R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基的-C(＝O)芳基是苯甲酰基。
66.项目1至65中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳烷基和/或杂芳烷基中的烷基任选被烷基、羟基或芳基取代。
67.项目1至66中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基任选被2或3个相同或不同的取代基取代，优选相同的取代基，优选卤素原子、羟基或烷氧基。
68.项目1至67中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳烷基和/或杂芳烷基中的烷基为C1-6烷基，优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基，且最优选甲基。
69.项目1至68中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳基和/或芳烷基中的芳基是苯基或萘基，优选苯基。
70.项目1至69中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳基和/或芳烷基中的芳基是未取代的或被取代，优选未取代的或被一个羟基取代，优选在苯基上的位置4处被取代。
71.项目1至70中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳烷基是：
·未取代的苄基(因此形成苯丙氨酸残基的侧链)，
·被羟基取代的苄基，优选在苯环上的对位(4)处被羟基取代的苄基(因此形成酪氨酸残基的侧链)，或
·-CH2-CH2-苯基(因此形成高苯丙氨酸残基的侧链)。
72.项目1至71中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的杂芳基和/或杂芳烷基中的杂芳基是三唑基、咪唑基或吲哚基，优选咪唑基或吲哚基，优选1H-咪唑-4-基或1H-吲哚-3-基-。
73.项目1至72中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的杂芳基和/或杂芳烷基是未取代的。
74.项目1至73中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R10，R11、R12、R13、R14和/或R16中的杂芳烷基是：
·1H-吲哚-3-基-甲基(因此形成色氨酸残基的侧链)，或
·1H-咪唑-4-基-甲基(因此形成组氨酸残基的侧链)。
75.项目1至74中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R16中的烷基是C1-6烷基，优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基，且最优选甲基。
76.项目1至75中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R16表示氢原子或烷基，优选氢原子。
77.项目1至76中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中A'表示-C(R10)(R16)-或-N(R10)-。
78.项目1至76中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中A'表示-C(R10)(R16)-。
79.项目1至76中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中A'表示-N(R10)-。
80.项目1至76中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中A'表示-X-。
81.项目1至80中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R10中的烷基是C1-6烷基，优选C1-4烷基，更优选C1-4烷基，还更优选甲基，丙基，或丁基，甚至更优选甲基(因此形成丙氨酸残基的侧链，优选形成L-丙氨酸残基的侧链)，异丙基(因此形成缬氨酸残基的侧链，优选形成L-缬氨酸残基的侧链)，仲丁基(因此形成亮氨酸残基的侧链，优选形成L-亮氨酸残基的侧链)和异丁基(因此形成异亮氨酸残基的侧链，优选形成L-异亮氨酸残基的侧链)，更优选甲基或异丙基，且最优选甲基。
82.项目1至81中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R10中的杂芳烷基中的杂芳基是咪唑基，优选1H-咪唑-4-基。
83.项目1至84中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R10中的芳烷基和/或杂芳烷基中的烷基是C1-6烷基，优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基，且最优选甲基。
84.项目1至83中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R10中的杂芳烷基是1H-咪唑-4-基-甲基(因此形成组氨酸残基的侧链，优选优选L-组氨酸残基的侧链)。
85.项目1至84中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R10是氢原子、烷基、芳烷基或杂芳烷基，更优选氢原子、烷基或杂芳烷基，最优选烷基。
86.项目1至85中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R10形成甘氨酸残基，丙氨酸残基(优选L-丙氨酸残基)，缬氨酸残基(优选L-缬氨酸残基)或组氨酸残基(优选L-组氨酸残基)的侧链；
87.项目1至86中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R10形成丙氨酸残基(优选L-丙氨酸残基)。
88.项目1至87中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中B'表示共价键。
89.项目1至87中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中B'表示-N(R3)-X-C(＝O)-。
90.项目1至89中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中C'表示-C(R11)(R16)-或-X-。
91.项目1至89中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中C'表示-C(R11)(R16)-。
92.项目1至89中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中C'表示-N(R11)-。
93.项目1至89中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中C'表示-X-。
94.项目1至93中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R11中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基被取代，优选被羟基取代。
95.项目1至93中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R11中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基是未取代的。
96.项目1至95中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R11中的芳烷基中的芳基被取代，更优选被一个羟基取代，优选在位置4处取代。
97.项目1至96中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中在R11中形成芳基和/或芳烷基的芳基是取代或未取代的苯基或萘基，优选未取代的苯基或被羟基取代的苯基，优选在位置4处取代。
98.项目1至97中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中在R11中形成杂芳基和/或杂芳烷基的杂芳基是取代或未取代的三唑基、咪唑基或吲哚基，优选咪唑基或吲哚基，更优选1H-咪唑-4-基或1H-吲哚-3-基-，更优选未取代的。
99.项目1至98中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R11中的芳烷基和/或杂芳烷基中的烷基是C1-6烷基，优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基，且最优选甲基。
100.项目1至99中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R11中的杂芳烷基为1H-吲哚-3-基-甲基(因此形成色氨酸残基的侧链，优选D-色氨酸残基的侧链)或1H-咪唑-4-基-甲基(因此形成组氨酸残基的侧链，优选D-组氨酸残基的侧链)，优选1H-咪唑-4-基-甲基。
101.项目1至100中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R11中的芳烷基是：
·未取代的苄基(因此形成苯丙氨酸残基的侧链，优选D-苯丙氨酸残基的侧链)，
·被羟基取代的苄基，优选在苯环上的对位处被羟基取代的苄基(因此形成酪氨酸残基的侧链，优选D-酪氨酸残基的侧链)，或
·-CH2-CH2-苯基(因此形成高苯丙氨酸残基的侧链，优选D-高苯丙氨酸残基的侧链)。
102.项目1至101中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R11表示芳基，芳烷基、杂芳基或杂芳烷基，优选芳烷基或杂芳烷基，更优选杂芳烷基。
103.项目1至102中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R11形成色氨酸残基(优选D-色氨酸残基)的侧链。
104.项目1至103中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中D'表示-C(R12)(R16)-或-X-。
105.项目1至103中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中D'表示-C(R12)(R16)-。
106.项目1至103中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中D'表示-N(R12)-。
107.项目1至103中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中D'表示-X-。
108.项目1至107中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R12是任选地被-N(R3)-和/或-O-中断的烷基，R12中的烷基优选是不中断的。
109.项目1至108中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R12中的烷基是C1-6烷基，优选C1-4烷基，更优选C1-3烷基，并且还更优选甲基(因此形成丙氨酸残基，优选L-丙氨酸残基的侧链)。
110.项目1至109中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中E'表示-C(R13)(R16)-。
111.项目1至109中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中E'表示-N(R13)-。
112.项目1至109中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中E'表示-X-。
113.项目1至109中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中E'表示-Y-。
114.项目1至113中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R13中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基被取代，优选在对位处被取代，优选被羟基或烷氧基取代，优选被烷氧基取代，更优选被甲氧基取代。
115.项目1至113中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R13中的芳基，芳烷基，杂芳基和/或杂芳烷基是未取代的。
116.项目1至115中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中在R13中形成芳基和/或芳烷基的芳基是取代或未取代的苯基或萘基，优选未取代的苯基或被羟基或烷氧基取代的苯基，优选被烷氧基取代的苯基，更优选被甲氧基取代的苯基，优选在对位处取代。
117.项目1至116中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中在R13中形成杂芳基和/或杂芳烷基的杂芳基是取代或未取代的三唑基、咪唑基或吲哚基，优选咪唑基或吲哚基，更优选1H-咪唑-4-基或1H-吲哚-3-基-，最优选未取代的。
118.项目1至117中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R13中的芳烷基和/或杂芳烷基中的烷基是C1-6烷基，优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基，且最优选甲基。
119.项目1至118中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R13中的杂芳烷基是1H-吲哚-3-基-甲基(因此形成色氨酸残基的侧链，优选形成L-色氨酸残基的侧链)，或1H-咪唑-4-基-甲基(因此形成组氨酸残基的侧链，优选形成L-组氨酸残基的侧链)，优选1H-吲哚-3-基-甲基。
120.项目1至119中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R13中的芳烷基是：
·未取代的苄基，由此形成苯丙氨酸残基的侧链，优选形成L-苯丙氨酸残基的侧链，
·被羟基取代的苄基，优选在苯环上的对位处被羟基取代的苄基，由此形成酪氨酸残基，优选形成L-酪氨酸残基的侧链，或
·被取代的苄基烷氧基，优选甲氧基取代的苄基，优选在苯环上的对位处被取代，由此形成O-甲基酪氨酸残基的侧链，优选形成L-O-甲基酪氨酸残基的侧链，或
·-CH2-CH2-苯基，由此形成高苯丙氨酸残基的侧链，优选形成L-高苯丙氨酸残基的侧链，
优选地，所述芳烷基是在对位处被甲氧基取代的苄基。
121.项目1至120中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R13形成色氨酸残基(优选L-色氨酸残基)，或O-甲基酪氨酸残基(优选L-O-甲基酪氨酸残基)，更优选R13形成色氨酸残基(优选L-色氨酸残基)。
122.项目1至121中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R13表示芳基、芳烷基、杂芳基或杂芳烷基，优选杂芳烷基或芳烷基，且更优选杂芳烷基。
123.项目1至122中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中F'表示-C(R14)-。
124.项目1至122中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中F'表示-N(R14)-。
125.项目1至124中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R14中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基被取代，优选在苯环上的对位处被取代，优选被羟基取代。
126.项目1至124中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R14中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基是未取代的。
127.项目1至126中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中在R14中形成芳基和/或芳烷基的芳基是取代或未取代的苯基或萘基，优选未取代的或被羟基取代的苯基，优选在苯环上的对位处被取代。
128.项目1至127中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中在R14中形成杂芳基和/或杂芳烷基的杂芳基是取代或未取代的三唑基、咪唑基或吲哚基，优选咪唑基或吲哚基，更优选1H-咪唑-4-基或1H-吲哚-3-基-，更优选未取代的。
129.项目1至128中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R14中的芳烷基和/或杂芳烷基中的烷基是C1-6烷基，优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基，且最优选甲基。
130.项目1至129中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R14中的杂芳烷基是1H-吲哚-3-基-甲基(因此形成色氨酸残基，优选D-色氨酸残基)或1H-咪唑-4-基-甲基(因此形成组氨酸残基，优选D-组氨酸残基)。
131.项目1至130中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R14中的芳烷基是：
·未取代的苄基，因此形成苯丙氨酸残基，优选形成D-苯丙氨酸残基，
·被羟基取代的苄基，优选在苯环上的对位处被羟基取代的苄基，因此形成酪氨酸残基，优选形成D-酪氨酸残基，或
·被烷氧基取代的苄基，优选在对位处被烷氧基，优选被甲氧基取代的苄基，优选在对位处被取代，由此形成O-甲基酪氨酸残基，优选形成D-O-甲基酪氨酸残基，或
·-CH2-CH2-苯基，因此形成高苯丙氨酸残基，优选形成D-高苯丙氨酸残基，优选地，芳烷基是未取代的苄基。
132.项目1至131中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R14表示芳基、芳烷基、杂芳基或杂芳烷基，优选芳烷基。
133.项目1至132中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R14形成苯丙氨酸残基(优选D-苯丙氨酸残基)。
134.项目1至133中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中G'表示-C(R15)(R16)-或-Y-。
135.项目1至133中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中G'表示-C(R15)-。
136.项目1至133中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中G'表示-N(R15)-。
137.项目1至133中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中G'表示-Y-。
138.项目1至137中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R15中的-烷基-N(R4)2是C1-6烷基，优选C3-5烷基，更优选C4烷基，优选正丁基。
139.项目1至138中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R4中的一个或两个表示氢原子，优选两个表示氢原子。
140.项目1至139中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中R15表示氨基丁基(因此形成赖氨酸残基，优选L-赖氨酸残基)。
141.项目1至140中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中A'表示-C(R10)-或-N(R10)-。
142.项目1至140中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中A'表示-X-。
143.项目1至141中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中B'表示-N(R3)-X-C(＝O)-。
144.项目1至141中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中C'表示-X-。
145.项目1至141中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中D'表示-X-。
146.项目1至141中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中E'表示-X-。
147.项目1至145中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中E'表示-Y-。
148.项目1至146中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中G'表示-Y-。
149.项目1至148中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，条件是当E'表示-Y-时，A'表示-X-或B'表示-N(R3)-X-C(＝O)-。
150.项目1至149中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，条件是当A'表示-X-时，G'表示-C(R15)-或-N(R15)-。
151.项目1至150中任一项的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其是：
或其药学上可接受的盐。
152.项目151的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其是MPE-075，MPE-111，MPE-189，MPE-191，MPE-192，MPE-266，MPE-267，MPE-298，MPE-300，MPE-308或MPE-310或其药学上可接受的盐。
153.项目152的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其是MPE-267，MPE-298，MPE-075或MPE-192或其药学上可接受的盐。
154.项目153的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其是MPE-267或其药学上可接受的盐。
155.项目153的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其是MPE-075或其药学上可接受的盐。
156.项目53的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其是MPE-298或其药学上可接受的盐。
157.项目153的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其是MPE-192或其药学上可接受的盐。
158.一种药物组合物，其包含项目1至157中任一项的环肽，其药学上可接受的盐或酯，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。
159.一种治疗CD36相关疾病、紊乱或病症的方法，该方法包括向有需要的受试者施用有效量的项目1至157中任一项的环肽，其药学上可接受的盐或酯，或项目158的药物组合物。
160.项目159的方法，其中所述疾病、紊乱或病症是TLR2介导的炎性疾病、紊乱或病症。
161.项目159或160的方法，其中所述疾病、紊乱或病症是动脉粥样硬化，异常血管生成，年龄相关性黄斑变性，脂质代谢异常，非酒精性脂肪肝病(NAFLD)，非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，异常去除凋亡细胞，缺血，缺血再灌注损伤，输尿管梗阻，慢性肾病中的纤维蛋白原发生，中风，阿尔茨海默病，糖尿病，糖尿病肾病或肥胖症。
162.项目161的方法，其中所述疾病、紊乱或病症是动脉粥样硬化。
163.项目161的方法，其中所述疾病、紊乱或病症是年龄相关性黄斑变性。
164.项目159至163中任一项的方法，其中受试者是人受试者。
165.项目1至157中任一项的环肽，其药学上可接受的酯或盐，或项目158的药物组合物在治疗受试者中CD36相关疾病、紊乱或病症中的用途。
166.项目1至157中任一项的环肽，其药学上可接受的酯或盐，或项目158的药物组合物在制备用于治疗受试者中CD36相关疾病、紊乱或病症的药物中的用途。
167.项目165或166的用途，其中所述疾病、紊乱或病症是TLR2介导的炎性疾病、紊乱或病症。
168.项目165至167中任一项的用途，其中所述疾病、紊乱或病症是动脉粥样硬化，异常血管生成，年龄相关性黄斑变性，脂质代谢异常，非酒精性脂肪肝病(NAFLD)，非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，异常去除凋亡细胞，缺血，缺血再灌注损伤，输尿管梗阻，慢性肾病中的纤维蛋白原发生，中风，阿尔茨海默病，糖尿病，糖尿病肾病或肥胖症。
169.项目168的用途，其中所述疾病、紊乱或病症是动脉粥样硬化。
170.项目168的用途，其中所述疾病、紊乱或病症是年龄相关性黄斑变性。
171.项目165至170中任一项的用途，其中受试者是人受试者。
172.项目1至157中任一项的环肽或其药学上可接受的酯或其盐，或项目158的药物组合物的环肽或其药学上可接受的酯或其盐，其用于治疗受试者中CD36相关疾病，紊乱或病症。
173.根据项目172所述的环肽或其药学上可接受的酯或其盐，或药物组合物的用途，其中所述疾病、紊乱或病症是TLR2介导的炎性疾病、紊乱或病症。
174.根据项目172或173所述的环肽或其药学上可接受的酯或其盐，或药物组合物的用途，其中所述疾病，紊乱或病症是动脉粥样硬化，异常血管生成，年龄相关性黄斑变性，脂质代谢异常，非酒精性脂肪肝病(NAFLD)，非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，异常去除凋亡细胞，缺血，缺血再灌注损伤，输尿管梗阻，慢性肾病中的纤维蛋白原发生，中风，阿尔茨海默病，糖尿病，糖尿病肾病或肥胖症。
175.根据项目174所述的环肽或其药学上可接受的酯或其盐，或药物组合物的用途，其中所述疾病、紊乱或病症是动脉粥样硬化。
176.根据项目174所述的环肽或其药学上可接受的酯或其盐，或药物组合物的用途，其中所述疾病、紊乱或病症是年龄相关性黄斑变性。
通过阅读以下仅通过示例的方式参考附图给出的本发明的特定实施方式的非限制性描述，本发明的其它目的，优点和特征将变得更加明显。
附图说明
在附图中：
图1显示了肽序列完成后通过'A3-大环化'合成的代表性环状氮杂肽的结构。18＝MPE-266；24＝MPE-267；25＝MPE-298。
图2显示了在肽序列中心具有ε-N-烷基化赖氨酸的代表性环状氮杂肽的结构。30＝MPE-290；31＝MPE-291；32＝MPE-293；33＝MPE-300。
图3A至3E显示了环肽的结构，测试了它们调节由巨噬细胞中TLR2激动剂R-FSL-1诱导的产生一氧化氮(NO)的能力和/或它们与CD36的结合。化合物MPE-315和MPE-316是在某些实验中用作对照的非环状氮杂肽。
图4A至4G显示了环肽对RAW巨噬细胞系中由TLR2激动剂R-FSL-1诱导的产生一氧化氮(NO)的影响。图4A至4C：以μM计的NO产生。图4D至4G：对照的百分比(仅R-FSL-1)。数据表示为平均值±SEM。使用具有Bartlett后测试的单向ANOVA测试统计学显著性。**，与对照相比P<0.01。将1×10-6M的肽用于图4C和4G中所述的实验。
图5A至5E显示了在大鼠心脏膜中用于结合可光活化的[125I]-Tyr-Bpa-Ala-海沙瑞林的环肽对CD36的竞争曲线。
图6A和6B显示了环状氮杂肽对来自鼠RAW巨噬细胞的TLR2介导的促炎细胞因子(TNF-α，图6A)和趋化因子(CCL-2，图6B)分泌的调节作用。与R-FSL-1对照相比，*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001；与阳性对照MPE-001(DBG178)相比，+P<0.05。
图7A显示了用于评估环肽MPE-298对用TLR配体引发的骨髓衍生的巨噬细胞(BMDM)分泌IL-1β和TNF-α的影响的实验方案设计的方案。
图7B和7C是显示在递增量的环肽MPE-298存在下用TLR配体引发的鼠BMDM分泌IL-1β(图7B)和TNF-α(图7C)的图。与R-FSL-1对照相比，*，P<0.05；**，P<0.01和***，P<0.001。
图8A显示了用于评估环肽在鼠动脉粥样硬化模型中的作用的实验方案设计的方案。每天通过皮下注射向4周龄喂食高脂肪高胆固醇饮食的ApoE-/-小鼠施用环肽或0.9％NaCl。
图8B是显示主动脉弓损伤的定量评估的图，表示为媒介物-(0.9％NaCl)、MPE-298-和MPE-267-处理的ApoE-/-小鼠中的％主动脉弓面积。与0.9％NaCl相比，**P<0.01。对于媒介物和MPE-298，n＝11，对于MPE-267，n＝10。
图9A显示了用于评估环肽MPE-298在鼠干性AMD模型中的作用的实验方案设计的方案。
图9B是呈现从野生型(WT)或CD36-/-(KO)小鼠的视神经两侧的外核层(ONL)厚度的蜘蛛图。WT CTL＝WT小鼠未暴露于蓝光，未经处理；WT6000Lux+NaCl＝WT小鼠暴露于蓝光下并用盐水溶液处理；WT 6000Lux+MPE-001＝WT小鼠暴露于蓝光并用MPE-001肽处理；WT6000Lux+MPE-298＝WT小鼠暴露于蓝光并用MPE-298环肽处理；CD36KO 6000Lux+NaCl＝CD36-/-小鼠暴露于蓝光并用盐水溶液处理。
图9C是显示不同组小鼠中ONL厚度测量的曲线下面积(AUC)的图。与WT 6000Lux+NaCl相比，**P<0.01，*P<0.05。
图10A显示了不同组小鼠中的代表性ERG应答。
图10B和10C是描绘在3.0cd-s/m2的光强度(暗适应)下测量的不同组小鼠中的a波(图10B)和b波(图10B)振幅的定量的图。与WT 6000Lux+NaCl相比，***P<0.001，**P<0.01。
图11A是来自暴露于蓝光照射，用盐水、MPE-001或MPE-298处理，并用抗F4/80抗体(白色)染色的小鼠的RPE铺片的共聚焦显微镜图像。O.N.＝视神经。
图11B和11C是显示在暴露于蓝光照射的用盐水、MPE-001或MPE-298处理的小鼠的RPE平板中总F4/80阳性细胞(图11B)和表达IL-1β的F4/80阳性细胞(图11C)的定量的图。与WT 6000Lux+NaCl相比，***P<0.001，**P<0.01。
具体实施方式
在描述本发明的上下文中使用术语“一个”和“一种”和“该”以及类似的指示物应被解释为涵盖单数和复数，除非本文另有说明或明确地与上下文相矛盾。
除非另有说明，否则术语“包含”、“具有”、“包括”和“含有”应被解释为开放式术语(即意味着“包括但不限于”)。
除非本文另有说明，否则本文中对数值范围的描述仅旨在用作单独提及落入该范围内的每个单独值的简写方法，并且每个单独的值并入本说明书中，如同其在本文中单独引用一样。范围内的所有值的子集也被并入说明书中，如同它们在本文中单独引用一样。
类似地，本文中具有各种取代基和对这些取代基列举的各种基团的一般化学结构旨在用作单独提及通过任何取代基的任何基团的组合获得的每个分子的简写方法。将每个单独的分子结合到说明书中，如同其在本文中单独引用一样。此外，一般化学结构内的所有分子子集也并入本说明书中，如同它们在本文中单独引用一样。
除非本文另有说明或上下文明显矛盾，否则本文所述的所有方法均可以任何合适的顺序进行。
除非另有声明，否则本文提供的任何和所有实例或示例性语言(“例如”，“诸如”等)的使用仅旨在更好地说明本发明，而不是对本发明的范围进行限制。
这里，术语“约”具有其普通含义。术语“约”用于表示值包括用于确定值的装置或方法的固有误差变化，或包含接近所述值的值，例如在所述值(或值的范围)的10％或5％内。
除非另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
本文公开的实施方式和特征的任何和所有组合和子组合都包括在本发明中。
本文中，术语“烷基”、“亚烷基”、“烯基”、“亚烯基”、“炔基”，“亚炔基”及其衍生物(如烷氧基，亚烷氧基等)具有其在本领域中的普通含义。为了更加确定，在本文中：
应注意，除非另有说明，这些基团的烃链可以是直链或支链的。此外，除非另有说明，这些基团可含有1至18个碳原子，更特别是1至12个碳原子，1至6个碳原子，1至3个碳原子，或含有1或2个碳原子。
本文中，术语“中断”如“任选地被官能团中断的亚烷基”是指至少一个所述官能团插入被中断的基团(在上述实施例中为亚烷基)的两个相邻碳原子之间。
本文中，术语“环烷基”，“芳基”，“杂环烷基”，“杂芳基”具有其在本领域中的普通含义。为了更加确定，在本文中：
应注意，除非另有说明，上述基团的环可包含4至8个，优选5或6个环原子。此外，除非另有说明，这些基团可含有总共5至12个碳原子，优选置于单个环中的5至6个碳原子，或置于两个环中的9至12个碳原子。优选的芳基是苯基。
在本文所述的研究中，本发明人已经描述了新型环肽GHRP-6类似物的合成和表征，并且已经表明这种环肽在表达CD36的巨噬细胞系中具有抑制由TLR2激动剂成纤维细胞刺激脂肽(R-FSL-1)诱导的一氧化氮(NO)过量产生的能力，这是氧化应激的一种量度。代表性的环肽显示出在动物模型中减少AMD和动脉粥样硬化的病理特征。
环肽
在第一方面，本发明提供了式(I)的环肽或其药学上可接受的盐或酯：
其中：
·R1表示氢原子或氨基末端修饰基团；
·R2表示-CO2H，-C(＝O)-NH2或羧基末端修饰基团；
·R3表示氢原子，烷基，烯基，炔基，烯炔基或芳基；
·A'表示-C(R10)(R16)-，-N(R10)-或-X-；
·B'表示共价键或-N(R3)-X-C(＝O)-；
·C'表示-C(R11)(R16)-，-N(R11)-或-X-；
·D'表示-C(R12)(R16)-，-N(R12)-或-X-；
·E'表示-C(R13)(R16)-，-N(R13)-，-X-或-Y-；
·F'表示-C(R14)(R16)-或-N(R14)-；和
·G'表示-C(R15)(R16)-，-N(R15)-或-Y-；
其中：
·R10表示氢原子，烷基，芳基，芳烷基，杂芳基或杂芳烷基；
·R11表示氢原子，烷基，芳基，芳烷基，杂芳基或杂芳烷基；
·R12表示氢原子，任选地被-N(R3)-和/或-O-中断的烷基，芳基，芳烷基，杂芳基或杂芳烷基；
·R13表示氢原子，烷基，芳基，芳烷基，杂芳基或杂芳烷基；
·R14表示氢原子，烷基，芳基，芳烷基，杂芳基或杂芳烷基；
·R15表示-烷基-N(R4)2，每个R4独立地表示氢原子，烷基，烯基，炔基，烯炔基，芳基或C(＝NH)-NH2；和
·R16独立地表示氢原子，烷基，芳基，芳烷基，杂芳基或杂芳烷基；
R10，R11，R12，R13，R14和R16中的芳基，芳烷基，杂芳基和杂芳烷基任选地被一个或多个以下基团取代：羟基，卤素原子，烷基，烷基氨基，卤代烷基，烷氧基，氰基，氨基，烷基氨基，硝基，-N(卤代烷基)2，芳基，芳烷基，芳烷氧基或-C(＝O)芳基，
条件是环肽包含正好一个-X-和正好一个-Y-，
和
条件是R11，R13和R14中不超过两个是氢原子，
其中-X-和-Y-一起形成式(II)或(II')的桥：
其中：
·*标识-X-的第一个原子，
·**标识-Y-的第一个原子，
·R5表示亚烷基，亚烯基，亚炔基或亚烯炔基，所述亚烷基，亚烯基，亚炔基或亚炔基任选地被-N(R9)-和/或-C(＝O)-中断，并且所述亚烷基，亚烯基，亚炔基或亚炔基任选地被一个或多个烷基或羟基取代，
·R6表示亚烷基，亚烯基，亚炔基，亚烯炔基或亚芳烷基，
·R7表示氢原子，烷基，烯基，环烷基烷基或芳烷基，
·R8表示氢原子或烷基，和
·R9表示氢原子，烷基或芳基。
R1，R2和R3
术语“氨基末端修饰基团”是指肽化学领域中常用的部分，用于取代或修饰肽的天然NH2末端基团，例如以增加其对蛋白酶消化的稳定性和/或易感性。在一个实施方式中，R1是具有1-8个碳的直链或支链烷基，或酰基(RA-CO-)，其中RA是疏水部分(例如烷基，例如甲基，乙基，丙基，丁基，异丙基或异丁基)，或芳酰基(Ar-CO-)，其中Ar是芳基。在一个实施方式中，酰基是C1-C16或C3-C16酰基(直链或支链，饱和或不饱和)；在另一个实施方式中，饱和的C1-C6酰基(直链或支链)或不饱和的C3-C6酰基(直链或支链)，例如乙酰基(CH3-CO-，Ac)。在一个实施方式中，R1表示氢原子(即环肽具有天然NH2末端基团)或酰基(直链或支链)，例如C1-C6酰基，优选乙酰基(CH3-CO-，Ac)。在更优选的实施方式中，R1表示氢原子。
术语“羧基末端修饰基团”是指肽化学领域中常用的部分，用于取代或修饰肽/肽模拟物的天然CO2H末端基团，例如以增加其对蛋白酶消化的稳定性和/或易感性。在实施方式中，羧基末端修饰基团是：
·与羧基(-C(＝O)-NHOH)连接的羟胺基(NHOH)，
·与羧基连接的胺(-C(＝O)-NR20R21)，胺是伯，仲或叔胺，优选胺是优选1-10个碳的脂族胺，例如甲胺，异丁胺，异戊酰胺或环己胺，芳胺或芳烷基胺，如苯胺，萘胺，苄胺，肉桂胺或苯乙胺，优选的胺是-NH2，
·腈基(C≡N)，或
·羟烷基(即醇)，优选CH2OH。
在一个实施方式中，R2表示CO2H(即环肽具有天然CO2H末端基团)。在另一个实施方式中，R2是羧基末端修饰基团，优选-C(＝O)-NR20R21，更优选-C(＝O)-NH2。
在一个实施方式中，R3表示氢原子。
式(II)或(II')的桥
在上述环肽中，有正好一个-X-和正好一个-Y-。换句话说，只有一个式(II)或(II')的桥；因此，环肽仅含有一个环，即它是单环的。
式(II)或(II')的桥是手性的，因为它包含一个(式(II))或两个(式(II'))四面体碳原子，具有四个不同的取代基(式(II)和(II')中的原子C**以及式(II')中的原子C*)。上式(II)和(II')意在涵盖桥的所有异构体及其任何混合物，包括外消旋混合物。在式(II)的优选实施方式中，所述-X-和所述-Y-一起形成式(II)桥的(S)-对映体。在另一个实施方式中，所述-X-和所述-Y-一起形成式(II)桥的(R)-对映体。在另一个实施方式中，所述-X-和所述-Y-一起形成式(II)桥的对映体的混合物，包括外消旋混合物。在式(II')的优选实施方式中，所述-X-和所述-Y-一起形成式(II')桥的顺式-非对映体。在另一个实施方式中，所述-X-和所述-Y-一起形成式(II')桥的反式-非对映体。在另一个实施方式中，所述-X-和所述-Y-一起形成式(II')桥的非对映体的混合物。
对于本领域技术人员显而易见的是，-X-基团的氮原子(式(II)中的N*)取代通常会在“常规”肽中发现的αC原子。因此，该氮原子与氨基酸的α氨基形成-N-N-基团，因此形成“氮杂”氨基酸，并因此环状氮杂肽。
在式(II)和(II')的实施方式中，R5表示亚烷基或亚烯基或亚炔基，优选亚烷基或亚炔基，更优选亚炔基。在一个实施方式中，R5中的亚烷基，亚烯基，亚炔基或亚烯炔基是C3-C6，优选C3-C5，更优选C4。在一个实施方式中，R5表示C4亚炔基或C4亚炔基，优选正丁-2-亚炔基(即-CH2-C≡C-CH2-)或正亚丁基，更优选正丁-2-亚炔基。在一个实施方式中，R5中的亚烷基，亚烯基，亚炔基或亚烯炔基被-N(R9)-和/或-C(＝O)-中断。在一个实施方式中，R5中的亚烷基，亚烯基，亚炔基或亚烯炔基是不中断的。在一个实施方式中，R5中的亚烷基，亚烯基，亚炔基或亚烯炔基被一个或多个烷基或羟基取代。在一个实施方式中，R5中的亚烷基，亚烯基，亚炔基或亚烯炔基是未取代的。
在式(II)和(II')的实施方式中，R6表示C3-C6亚烷基，C3-C6亚烯基，C3-C6亚炔基，C3-C6亚烯炔基或芳基-C3-C6亚烷基，优选C3-C5亚烷基，C3-C5亚烯基，C3-C5亚炔基，C3-C5亚烯炔基，或芳基-C3-C5亚烷基，更优选C3-C4亚烷基，C3-C4亚烯基，C3-C4亚炔基，C3-C6亚烯炔基或芳基-C3-C4亚烷基。在优选的实施方式中，R6表示亚烷基，如C3-C6亚烷基或C3-C5亚烷基，优选C3-C4亚烷基，更优选正丙烯基(-CH2-CH2-CH2-)或正丁烯基(即-CH2-CH2-CH2-CH2-)。
在式(II)和(II')的实施方式中，R7中的芳烷基是芳甲基(即被芳基取代的甲基)，优选苄基。在一个实施方式中，R7中的烷基是C2-C6烷基，优选C2-C4烷基，更优选C3烷基，包括正丙基和异丙基。在一个实施方式中，R7中的烯基是C2-C6烯基，优选C2-C4烯基，更优选C3烯基，最优选正丙-2-烯基(-CH2-CH＝CH2)，其也称为“烯丙基”。在一个实施方式中，R7中的环烷基烷基中的环烷基是C3-6环烷基，优选C3-5环烷基，更优选C3环烷基。在一个实施方式中，R7中的环烷基烷基中的烷基是C1-C6烷基，优选C1-C3烷基，更优选甲基。因此，优选的环烷基烷基是环丙基甲基(其中*表示带有R7取代基的氮原子的连接点)。在优选的实施方式中，R7表示烷基，烯基，环烷基烷基或芳烷基，优选如上定义的烯基。
在式(II)和(II')的实施方式中，R8表示烷基。
在式(II)和(II')的实施方式中，R8表示氢原子。
在一个实施方式中，-X-和-Y-一起形成式(II)的桥。
在一个实施方式中，-X-和-Y-一起形成式(III)的桥：
其中*标识-X-的第一个原子，并且**标识-Y-的第一个原子，并且其包括桥的(R)和(S)对映体及其任何混合物(包括外消旋混合物)。优选地，所述-X-和所述-Y-一起形成式(III)桥的(S)-对映体，即：
其中*标识-X-的第一个原子，**标识-Y-的第一个原子，并且一个井号(#)标识与邻近的羰基(C＝O)基团连接的-Y-基团的键(以区别与相邻氮原子相连的键)。
在一个实施方式中，-X-和-Y-一起形成式(II')的桥。
在一个实施方式中，-X-和-Y-一起形成式(V)的桥：
其中*标识-X-的第一个原子，并且**标识-Y-的第一个原子，并且C*和C**是D-或L-构型或其任何混合物。在实施方式中，C*是L-构型。在其它实施方式中，C**是L-构型。在实施方式中，C*是L-构型。在其它实施方式中，C**是L-构型。在一个最优选的实施方式中，C*和C**均是L-构型，即所述-X-和所述-Y-一起形成式(IV)桥的(顺式)-非对映体，即：
其中：
*标识-X-的第一个原子，
**标识-Y-的第一个原子，
一个井号(#)标识与邻近的羰基(C＝O)基团连接的-Y-基团的键(以区别与相邻氮原子相连的键)，并且
两个井号(##)标识与邻近的羰基(C＝O)基团连接的-X-基团的键(以区别与相邻氮原子相连的键)。
A'到G'
如上所述，A'可表示-C(R10)(R16)-，C'可表示-C(R11)(R16)-，D'可表示-C(R12)(R16)-，E'可表示-C(R13)(R16)-，F'可表示-C(R14)(R16)-，和/或G'可表示-C(R15)(R16)-。在这种情况下，带有R10至R15和R16取代基的碳与-C(＝O)-基团和与其连接的-NH-或-NR3-一起形成氨基酸残基。
在实施方式中，环肽如上所定义，条件是R11，R13和R14中的不超过一个(2)，优选不超过一个(1)，优选没有是氢原子。在实施方式中，环肽如上所定义，条件是R11，R13和R14中的不超过一个(2)，优选不超过一个(1)，优选没有是氢原子或烷基。在实施方式中，环肽如上所定义，条件是R11，R13和R14中的不超过一个(1)，优选没有是氢原子或烷基。
在上述基团中，带有R10至R15和R16取代基的碳是立体中心，因此可以是D-或L-构型，或其任何混合物。在实施方式中，所述碳原子是L-构型。在其它实施方式中，所述碳原子是D构型。在实施方式中，带有(R10)和(R16)的碳原子是D-或L-构型或其任何混合物，优选L-构型。在实施方式中，带有(R11)和(R16)的碳原子是D-或L-构型或其任何混合物，优选D-构型。在实施方式中，带有(R12)和(R16)的碳原子是D-或L-构型或其任何混合物，优选L构型。在实施方式中，带有(R13)和(R16)的碳原子是D-或L-构型或其任何混合物，优选L-构型。在实施方式中，带有(R14)和(R16)的碳原子是D-或L-构型或其任何混合物，优选D-构型。在实施方式中，带有(R15)和(R16)的碳原子是D-或L-构型或其任何混合物，优选L-构型。
如上所述，R10，R11，R12，R13，R14和/或R16中的芳基，芳烷基，杂芳基和杂芳烷基任选地被一个或多个以下基团取代：羟基，卤素原子，烷基，卤代烷基，烷氧基，氰基(-C≡N)，氨基(NH2)，硝基(NO2)，烷基氨基(-烷基-NH2)，-N(卤代烷基)2，芳基，芳烷基，芳烷氧基或-C(＝O)芳基。优选的烷基，卤代烷基和烷氧基是C1-6，优选C1-4，更优选C1-2，优选C1。优选的卤代烷基是全卤代烷基，优选全氟烷基，更优选-CF3。优选的-N(卤代烷基)2包括-N(2-氯乙基)2。优选的芳基(作为芳基，芳烷基，杂芳基或杂芳烷基的取代基)包括苯基。优选的芳烷氧基包括苄氧基。优选的-C(＝O)芳基包括苯甲酰基。芳烷基和杂芳烷基的烷基上的优选取代基包括烷基，羟基和芳基。
在实施方式中，芳基，芳烷基，杂芳基和杂芳烷基的芳基或杂芳基包括2或3个取代基，它们相同或不同，优选相同，并且优选是卤素原子，羟基或烷氧基。
在实施方式中，R10，R11，R12，R13，R14和/或R16中的芳烷基和/或杂芳烷基中的烷基是C1-6烷基，优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基，最优选甲基。
在实施方式中，R10，R11，R12，R13，R14和/或R16中的芳基和芳烷基中的芳基是苯基或萘基，优选苯基。
R10，R11，R12，R13，R14和/或R16中的芳基和芳烷基中的芳基是未取代的或如上所述被取代，优选是未取代的或优选在苯基的位置4处被一个羟基取代。
在实施方式中，芳烷基是：
·未取代的苄基(-CH2-苯基)，因此形成苯丙氨酸残基，优选L-苯丙氨酸残基的侧链，
·被羟基取代的苄基，优选在苯环上的对位(4)处被羟基取代的苄基，因此形成酪氨酸残基，优选L-酪氨酸残基的侧链，或
·-CH2-CH2-苯基，因此形成高苯丙氨酸残基，优选L-高苯丙氨酸残基的侧链。
在实施方式中，R10，R11，R12，R13，R14和/或R16中的杂芳基和杂芳烷基中的杂芳基是三唑基，咪唑基或吲哚基，优选咪唑基或吲哚基，优选1H-咪唑-4-基或1H-吲哚-3-基-。
R10，R11，R12，R13，R14和/或R16中的杂芳基和杂芳烷基中的杂芳基如上所述被取代或是未取代的，优选是未取代的。
在实施方式中，杂芳烷基是：
·1H-吲哚-3-基-甲基(其中*表示连接点)，因此形成色氨酸残基，优选L-色氨酸残基的侧链，或
·1H-咪唑-4-基-甲基(其中*表示连接点)，因此形成组氨酸残基，优选L-组氨酸残基的侧链。
在实施方式中，R16中的烷基是C1-6烷基，优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基，最优选甲基。在优选的实施方式中，R16(所有情况)是氢原子或烷基，优选氢。
如上所述，A'表示-C(R10)(R16)-，-N(R10)-或-X-。在优选的实施方式中，A'表示-C(R10)(R16)-或-X-。在实施方式中，A'表示-C(R10)(R16)-。在实施方式中，A'表示-N(R10)-。在实施方式中，A'表示-X-。
如上所述，R10表示氢原子(因此形成甘氨酸残基)，烷基，芳基，芳烷基，杂芳基或杂芳烷基。在优选的实施方式中，R10是氢原子，烷基，芳烷基或杂芳烷基，更优选氢原子，烷基或杂芳烷基，最优选烷基。在优选的实施方式中，R10中的烷基是C1-6烷基，优选C1-4烷基，更优选C1-2烷基，还更优选甲基，丙基或丁基，甚至更优选甲基(因此形成丙氨酸残基，优选L-丙氨酸残基的侧链)，异丙基(因此形成缬氨酸残基，优选L-缬氨酸残基)，仲丁基(因此形成亮氨酸残基，优选L-亮氨酸残基)和异丁基(因此形成异亮氨酸残基，优选L-异亮氨酸残基)，更优选甲基或异丙基，最优选甲基。在优选的实施方式中，R10中的杂芳烷基中的杂芳基是咪唑基，优选1H-咪唑-4-基。在实施方式中，芳烷基和杂芳烷基中的烷基是C1-6烷基，优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基，最优选甲基。因此，在优选的实施方式中，杂芳烷基是1H-咪唑-4-基-甲基，因此形成组氨酸残基，优选L-组氨酸残基的侧链。
在优选的实施方式中，R10形成甘氨酸残基，丙氨酸残基(优选L-丙氨酸残基)，缬氨酸残基(优选L-缬氨酸残基)或组氨酸残基(优选L-组氨酸残基)；更优选R10形成丙氨酸残基(优选L-丙氨酸残基)的侧链。
在实施方式中，B'表示共价键。在实施方式中，B'表示-N(R3)-X-C(＝O)-。
如上所述，C'表示-C(R11)(R16)-，-N(R11)-或-X-。在优选的实施方式中，C'表示-C(R11)(R16)-或-X-。在实施方式中，C'表示-C(R11)(R16)-。在实施方式中，C'表示-N(R11)-。在实施方式中，C'表示-X-。
在优选的实施方式中，R11表示芳基，芳烷基，杂芳基或杂芳烷基，优选芳烷基或杂芳烷基，更优选杂芳烷基。更通常地，在实施方式中，R11中的芳基，芳烷基，杂芳基和杂芳烷基被取代，优选被羟基取代。在其它实施方式中，芳基，芳烷基，杂芳基和杂芳烷基是未取代的。在优选的实施方式中，芳烷基中的芳基任选地如上所述被取代，更优选被一个羟基取代，优选在位置4处。在实施方式中，形成芳基或芳烷基的芳基是取代或未取代的苯基或萘基，优选未取代或优选在位置4处被羟基取代的苯基。在实施方式中，形成杂芳基或杂芳烷基的杂芳基是取代或未取代的三唑基，咪唑基或吲哚基，优选咪唑基或吲哚基，更优选1H-咪唑-4-基或1H-吲哚基-3-基-，更优选未取代的。在实施方式中，芳烷基和杂芳烷基中的烷基是C1-6烷基，优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基，最优选甲基。因此，在实施方式中，杂芳烷基是1H-吲哚-3-基-甲基，因此形成色氨酸残基，优选D-色氨酸残基的侧链，或1H-咪唑-4-基-甲基，因此形成组氨酸残基，优选D-组氨酸残基的侧链。优选地，杂芳烷基是1H-咪唑-4-基-甲基。此外，在实施方式中，芳烷基因此是未取代的苄基，因此形成苯丙氨酸残基，优选D-苯丙氨酸残基的侧链，优选在苯环上的对位处被羟基取代的苄基，因此形成酪氨酸残基，优选D-酪氨酸残基的侧链，或-CH2-CH2-苯基，因此形成高苯丙氨酸残基，优选D-高苯丙氨酸残基的侧链。
在优选的实施方式中，R11形成色氨酸残基，优选D-色氨酸残基的侧链。
如上所述，D'表示-C(R12)(R16)-，-N(R12)-或-X-。在优选的实施方式中，D'表示-C(R12)(R16)-或-X-。在实施方式中，D'表示-C(R12)(R16)-。在实施方式中，D'表示-N(R12)-。在实施方式中，D'表示-X-。
如上所述，R12表示氢原子，任选地被-N(R3)-和/或-O-，芳基，芳烷基，杂芳基或杂芳烷基中断的烷基，优选任选地被-N(R3)-和/或-O-中断的烷基。在优选的实施方式中，烷基是不中断的。在优选的实施方式中，烷基是C1-6烷基，优选C1-4烷基，更优选C1-3烷基，还更优选甲基(因此形成丙氨酸残基，优选L-丙氨酸残基的侧链)。
如上所述，E'表示-C(R13)(R16)-，-N(R13)-，-X-或-Y-。在实施方式中，E'表示-C(R13)(R16)-。在实施方式中，E'表示-N(R13)-。在实施方式中，E'表示-X-。在实施方式中，E'表示-Y-。
在优选的实施方式中，R13表示芳基，芳烷基，杂芳基或杂芳烷基，优选杂芳烷基(特别是当E'表示-C(R13)-时)或芳烷基(特别是当E'表示-N(R13)-时)，更优选杂芳烷基。在实施方式中，R13中的芳基，芳烷基，杂芳基和杂芳烷基优选在对位处优选被羟基或烷氧基，优选烷氧基，更优选甲氧基取代。在实施方式中，R13中的芳基，芳烷基，杂芳基和杂芳烷基是未取代的。在实施方式中，在R13中形成芳基或芳烷基的芳基是取代或未取代的苯基或萘基，优选未取代的苯基或优选在对位处被羟基或烷氧基，优选烷氧基，更优选甲氧基取代的苯基。在实施方式中，在R13中形成杂芳基或杂芳烷基的杂芳基是取代或未取代的取代或未取代的三唑基，咪唑基或吲哚基，优选咪唑基或吲哚基，更优选1H-咪唑-4-基或1H-吲哚-3-基-，更优选未取代的。在实施方式中，芳烷基和杂芳烷基中的烷基是C1-6烷基，优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基，最优选甲基。因此，在实施方式中，杂芳烷基是1H-吲哚-3-基-甲基，因此形成色氨酸残基，优选L-色氨酸残基，或1H-咪唑-4-基-甲基，因此形成组氨酸残基，优选L-组氨酸残基的侧链。优选地，杂芳烷基是1H-吲哚-3-基-甲基。此外，在实施方式中，芳烷基因此是：
·未取代的苄基，因此形成苯丙氨酸残基，优选L-苯丙氨酸残基的侧链，
·被羟基取代的苄基，优选在苯环上的对位处被羟基取代的苄基，因此形成酪氨酸残基，优选L-酪氨酸残基的侧链，或
·优选在苯环上的对位处被烷氧基，优选甲氧基取代的苄基，因此形成O-甲基酪氨酸残基，优选L-O-甲基酪氨酸残基的侧链，或
·-CH2-CH2-苯基，因此形成高苯丙氨酸残基，优选L-高苯丙氨酸残基。
优选地，芳烷基是在对位处被甲氧基取代的苄基。
在优选的实施方式中，R13形成色氨酸残基(优选L-色氨酸残基)的侧链，或O-甲基酪氨酸残基(优选L-O-甲基酪氨酸残基)的侧链，更优选R13形成色氨酸残基(优选L-色氨酸残基)的侧链。
如上所述，F'表示-C(R14)(R16)-或-N(R14)-。在实施方式中，F'表示-C(R14)-。在实施方式中，F'表示-N(R14)-。
在优选的实施方式中，R14表示芳基，芳烷基，杂芳基或杂芳烷基，优选芳烷基。在实施方式中，R14中的芳基，芳烷基，杂芳基和杂芳烷基优选在苯环上的对位处优选被羟基取代。在实施方式中，R14中的芳基，芳烷基，杂芳基和杂芳烷基是未取代的。在实施方式中，在R14中形成芳基或芳烷基的芳基是取代或未取代的苯基或萘基，优选未取代的或优选在苯环上的对位处被羟基取代的苯基。在实施方式中，在R14中形成杂芳基或杂芳烷基的杂芳基是取代或未取代的三唑基，咪唑基或吲哚基，优选咪唑基或吲哚基，更优选1H-咪唑-4-基或1H-吲哚-3-基-，更优选未取代的。在实施方式中，R14中的芳烷基和杂芳烷基中的烷基是C1-6烷基，优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基，最优选甲基。因此，在实施方式中，杂芳烷基是1H-吲哚-3-基-甲基，因此形成色氨酸残基，优选D-色氨酸残基的侧链，或1H-咪唑-4-基-甲基，因此形成组氨酸残基，优选D-组氨酸残基的侧链。此外，在实施方式中，芳烷基因此是：
·未取代的苄基，因此形成苯丙氨酸残基，优选D-苯丙氨酸残基的侧链，
·被羟基取代的苄基，优选在苯环上的对位处被羟基取代的苄基，因此形成酪氨酸残基，优选D-酪氨酸残基的侧链，或
·被烷氧基取代的苄基，优选被甲氧基取代的苄基，优选在对位处被取代，因此形成O-甲基酪氨酸残基，优选D-O-甲基酪氨酸残基的侧链，或
·-CH2-CH2-苯基，因此形成高苯丙氨酸残基，优选D-高苯丙氨酸残基的侧链。
优选地，芳烷基是未取代的苄基。因此，在优选实施方式中，
在优选的实施方式中，R14形成苯丙氨酸残基(优选D-苯丙氨酸残基)的侧链。
如上所述，G'表示-C(R15)(R16)-，-N(R15)-或-Y-。在优选的实施方式中，G'表示-C(R15)(R16)-或-Y-。在实施方式中，G'表示-C(R15)-。在实施方式中，G'表示-N(R15)-。在实施方式中，G'表示-Y-。
如上所述，R15表示-烷基-N(R4)2，其中每个R4独立地表示氢原子，烷基，烯基，炔基，烯炔基，芳基或C(＝NH)-NH2。在优选的实施方式中，-烷基-N(R4)2中的烷基是C1-6烷基，优选C3-5烷基，更优选C3烷基或C4烷基，优选正丁基。在优选的实施方式中，R4中的一个或两个，优选两个表示氢原子。因此，在优选的实施方式中，R15表示氨基丁基(-CH2-CH2-CH2-CH2-NH2)，因此形成赖氨酸残基，优选L-赖氨酸残基的侧链。在另一个实施方式中，R15表示氨基丙基(-CH2-CH2-CH2-NH2)，因此形成鸟氨酸残基，优选L-鸟氨酸残基的侧链。
-X-和-Y-的位置
如上所述，环肽包含正好一个-X-和正好一个-Y-。
在一个实施方式中，A'表示-X-。在另一个实施方式中，B'表示-N(R3)-X-C(＝O)-。在另一个实施方式中，C'表示-X-。在又一个实施方式中，D'表示-X-。在又一个实施方式中，E'表示-X-。在一个实施方式中，E'表示-Y-。在另一个实施方式中，G'表示-Y-。
因此，上式中的X和Y基团(对于A'，C'，D'，E'和G')构成以下基团或者(对于B')是其一部分：
实施方式 -X-的位置 -Y-的位置
I A’ E’
II A’ G’
III B’ E’
IV B’ G’
V C’ E’
VI C’ G’
VII D’ E’
VIII D’ G’
IX E’ G’
在一个实施方式中，环肽是根据上述实施方式I至IX中的任一个，所有上述实施方式I至IX，或任何子集实施方式I至IX。在优选的实施方式中，环肽是根据实施方式II，IV，IV，VIII或IX，优选实施方式IV，IV，VIII或IX，更优选实施方式IV或VI，最优选实施方式IV。
在一个实施方式中，环肽如上所定义，附加条件是当E'表示-Y-时，A'表示-X-或B'表示-N(R3)-X-C(＝O)-，因此排除实施方式V和VII。
在一个实施方式中，环肽如上所定义，附加条件是当A'表示-X-时，G'不表示-Y-(即G'表示-C(R15)-或-N(R15)-)，因此排除实施方式II。
在优选的实施方式中，A'表示-C(R10)-或-N(R10)-。换句话说，A'不表示-X-，因此排除实施方式I和II。
在优选的实施方式中，G'表示-Y-，因此排除实施方式I，III，V和VII。在最优选的实施方式中，B'表示-N(R3)-X-C(＝O)-并且G'表示-Y-，因此排除实施方式IV。
在实施方式中，环肽是：
或其药学上可接受的盐；优选地，环肽是MPE-075，MPE-111，MPE-189，MPE-191，MPE-192，MPE-266，MPE-267，MPE-298，MPE-300，MPE-308或MPE-310或其药学上可接受的盐；更优选地，环肽是MPE-267，MPE-298，MPE-075或MPE-192或其药学上可接受的盐。在一个实施方式中，环肽是MPE-267或其药学上可接受的盐。在另一个实施方式中，环肽是MPE-075或其药学上可接受的盐。在另一个实施方式中，环肽是MPE-298或其药学上可接受的盐。在另一个实施方式中，环肽是MPE-192或其药学上可接受的盐。
在一个实施方式中，环肽如上所定义，并且附加的条件是环肽不是：
或其药学上可接受的盐。
在另外的实施方式中，环肽具有如上定义的式I，除了肽主链中的一个或多个-C(＝O)-基团或-N(R3)-基团，即形成肽键的-C(＝O)-或-N(R3)-基团中的一个被类似的反应性基团取代。在优选的实施方式中，肽主链中的一个或多个-C(＝O)-基团被-S(＝O)2-取代。在优选的实施方式中，-S(＝O)2-基团与环肽主链中的氮杂官能团相邻。在另一个实施方式中，-S(＝O)2-基团取代C'和D'之间的C(＝O)-。
在另外的实施方式中，环肽具有如上定义的式I，除了肽主链中的一个或多个-N(R3)-基团，即形成肽键的-N(R3)-基团中的一个与β-碳原子，而不是与α碳原子相连。α和β碳原子如下(显示的示例是亮氨酸)：
如上所述，在本发明中，提供了如上定义的式(I)的环肽，或其药学上可接受的盐或酯。在一个实施方式中，提供了式(I)的环肽或其药学上可接受的盐(即在该实施方式中，排除药学上可接受的酯)。在另一个实施方式中，提供了式(I)的环肽(即在该实施方式中，排除药学上可接受的酯和盐)。
本文所用的术语“盐”表示与无机和/或有机酸形成的酸性盐，以及与无机和/或有机碱形成的碱性盐。用于药物组合物的盐是药学上可接受的盐，但是其它盐可用于制备本文所述的化合物。
术语“药学上可接受的盐”是指本文所述化合物的盐，其是药理学上可接受的并且对施用其的受试者基本上无毒。更具体地，这些盐保留了化合物的生物有效性和性质，并且由合适的无毒有机或无机酸或碱形成。
例如，这些盐包括本文所述化合物的酸加成盐，其足够碱性以形成这种盐。这种酸加成盐包括乙酸盐，己二酸盐，藻酸盐，低级烷磺酸盐如甲磺酸盐，三氟甲磺酸盐或乙磺酸盐，芳磺酸盐如苯磺酸盐，2-萘磺酸盐，或甲苯磺酸盐(也称为甲苯磺酸盐)，抗坏血酸盐，天冬氨酸盐，苯甲酸盐，苯磺酸盐，硫酸氢盐，硼酸盐，丁酸盐，柠檬酸盐，樟脑酸盐，樟脑磺酸盐，肉桂酸盐，环戊烷丙酸盐，二葡萄糖酸盐，十二烷基硫酸盐，乙磺酸盐，富马酸盐，葡庚酸盐，甘油磷酸盐，半硫酸盐，庚酸盐，己酸盐，盐酸盐，氢溴酸盐，氢碘酸盐，硫酸氢盐，2-羟基乙磺酸盐，衣康酸盐，乳酸盐，马来酸盐，扁桃酸盐，甲磺酸盐，烟酸盐，硝酸盐，草酸盐，双羟萘酸盐，果胶酸盐，高氯酸盐，过硫酸盐，3-苯基丙酸盐，磷酸盐，苦味酸盐，新戊酸盐，丙酸盐，水杨酸盐，琥珀酸盐，硫酸盐，磺酸盐，酒石酸盐，硫氰酸盐和十一酸盐等。
另外，通常认为适合于由碱性药物化合物形成药学上有用的盐的酸例如由P.Stahl等人，Camille G.(eds.)Handbook of Pharmaceutical Salts.Properties,Selection and Use.(2002)Zurich:Wiley-VCH；S.Berge等人，Journal ofPharmaceutical Sciences(1977)66(1)1–19；P.Gould,International J.ofPharmaceutics(1986)33 201–217；Anderson等人，The Practice of MedicinalChemistry(1996),Academic Press,New York；和在The Orange Book(Food&DrugAdministration,Washington,D.C.)中讨论。
此外，当本文所述的化合物具有足够的酸性时，本发明的盐包括与无机或有机碱形成的碱盐。这些盐包括碱金属盐，如钠盐，锂盐和钾盐；碱土金属盐，如钙盐和镁盐；金属盐，如铝盐，铁盐，锌盐，铜盐，镍盐和钴盐；无机胺盐如铵盐或取代铵盐，如三甲基铵盐；与有机碱(例如有机胺)的盐，如氯普鲁卡因盐，二苄胺盐，二环己胺盐，二乙醇胺盐，乙胺盐(包括二乙胺盐和三乙胺盐)，乙二胺盐，氨基葡萄糖盐，胍盐，甲胺盐(包括二甲胺盐和三甲胺盐)，吗啉盐，N,N'-二苄基乙二胺盐，N-苄基-苯乙胺盐，N-甲基葡糖胺盐，苯基甘氨酸烷基酯盐，哌嗪盐，哌啶盐，普鲁卡因盐，叔丁胺盐，四甲基铵盐，叔辛胺盐，三-(2-羟乙基)胺盐和三(羟甲基)氨基甲烷盐。
本领域技术人员使用标准技术可以非常容易地形成这种盐。实际上，将药物化合物(即药物)化学修饰成盐是药物化学家熟知的技术(参见例如H.Ansel等人，Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems(第6版，1995)，见第196和1456-1457页)。本文所述化合物的盐可以例如通过使化合物与一定量的酸或碱(例如等量)在诸如盐沉淀的介质中或在水性介质中然后冻干而形成。
本发明还包括本文定义的环肽的药学上可接受的前药或酯的用途。本文所用的术语“酯”是指本发明的环肽或其盐，其中羟基已经使用例如无机或有机酸酐，酸或酰氯转化为相应的酯。术语“药学上可接受的酯”是指本文所述的环肽的酯，其是药理学上可接受的并且对施用其的受试者基本上无毒。更具体地，这些酯保留了本文所述的环肽的生物有效性和性质，并且充当前药，当在体内施用时，其以产生母体环肽的方式被代谢或裂解。
酯的实例尤其包括以下基团：(1)羧酸酯；(2)磺酸酯，例如烷基-或芳基烷基-磺酸酯(例如甲磺酸酯)；(3)膦酸酯；(4)单磷酸酯，二磷酸酯或三磷酸酯(包括磷酰胺环酯)；(5)氨基甲酸酯(例如N-甲基氨基甲酸酯)；(6)通过羟基酯化得到的碳酸酯(例如甲基碳酸酯)，酯基包括例如直链或支链烷基(例如乙基，正丙基，叔丁基，正丁基，甲基，丙基，异丙基，丁基，异丁基或戊基)，烷氧基烷基(例如甲氧基甲基，乙酰氧基甲基和2,2-二甲基丙酰氧基甲基)，芳烷基(例如苄基)，芳氧基烷基(例如苯氧基甲基)，芳基(例如任选地被例如卤素，C1-4烷基或C1-4烷氧基或氨基取代的苯基)。关于用于递送药物化合物的酯的制备和使用的进一步信息可在Design of Prodrugs.Bundgaard H ed.(Elsevier,1985)中获得。还参见H.Ansel等人，Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems(第6版.1995)第108–109页；Krogsgaard-Larsen等人，Textbook of Drug Design and Development(第2版.1996)第152–191页；Jarkko Rautio等人，Nat.Rev.Drug Discov.,7,pp.255-270(2008)；和Pen-Wei Hsieh等人，Curr.Pharm.Des.,15(19),pp.2236-2250(2009)。
本文所述的环肽可通过各种常规方法酯化，包括使适当的酸酐，羧酸或酰氯与本文所述化合物的醇基反应。例如，适当的酸酐可以在碱如1,8-双[二甲基氨基]萘或N,N-二甲基氨基吡啶的存在下与醇反应，以促进酰化。此外，合适的羧酸可以在脱水剂如二环己基碳二亚胺，1-[3-二甲基氨基丙基]-3-乙基碳二亚胺或用于通过除去水来驱动反应的其它水溶性脱水剂和任选的酰化催化剂的存在下与醇反应。酯化也可以使用适当的羧酸进行。也可以进行酰氯与醇的反应。当本文所述的化合物含有许多游离羟基时，可以保护那些未转化为前药官能团的基团(例如使用叔丁基-二甲基甲硅烷基)，然后脱保护。而且，酶促方法可用于选择性地磷酸化或去磷酸化醇官能团。本领域技术人员将容易地知道如何成功地实施这些以及其它已知的醇酯化方法。
本文所述的化合物可以以非溶剂化形式以及与溶剂如水(水合物)和乙醇(乙醇化物)等的溶剂形式存在，并且本发明意图包括溶剂化和非溶剂化形式。
如下面将详细解释的，在实施方式中，上述环肽是GHRP-6类似物。因此，这些化合物可称为“环状GHRP-6类似物”或“环肽GHRP-6类似物”。
在一个实施方式中，在下面实施例中描述的竞争性CD36结合测定中，环肽表现出约1×10-5M或更低的IC50。在另一个实施方式中，在下面实施例中描述的竞争性CD36结合测定中，环肽表现出约0.5×10-6M或更低的IC50。在另一个实施方式中，在下面实施例中描述的竞争性CD36结合测定中，环肽表现出约1×10-6M或更低的IC50。在另一个实施方式中，在下面实施例中描述的竞争性CD36结合测定中，环肽表现出约0.5×10-6M或更低的IC50。在另一个实施方式中，在下面实施例中描述的竞争性CD36结合测定中，环肽表现出1×10-7M或更低的IC50。
CD36调节
在实施方式中，上述环肽(本文中也称为“化合物”)或其药学上可接受的酯或盐具有调节(例如抑制)CD36活性的能力(CD36调节剂)。如本文所用，术语“调节剂”是指改变或引发CD36活性的化合物。例如，与不存在调节剂时的活性大小相比，调节剂的存在可导致某种活性的量级的增加或减少。在某些实施方式中，调节剂是抑制剂或拮抗剂，其减少一种或多种活性的量级。在某些实施方式中，抑制剂完全阻止一种或多种生物活性。如本文所用，术语“抑制”，“降低”，“预防”或“拮抗”或本文所用的这些术语的任何变化是指生物活性的可测量减少。在一些实施方式中，相对于对照，降低是生物活性的10％，15％，20％，30％，40％，50％，60％，70％，80％，90％或95％减少。
CD36也称为FAT，SCARB3，SR-B2，GP88，糖蛋白IV(gpIV)和糖蛋白IIIb(gpIIIb)，是在脊椎动物的许多细胞类型的表面上发现的完整膜蛋白。CD36是细胞表面蛋白的B类清道夫受体家族的成员。已显示CD36结合许多配体，包括胶原蛋白，血小板反应蛋白，寄生于恶性疟原虫的红细胞，氧化的低密度脂蛋白，天然脂蛋白，氧化磷脂，β-淀粉样蛋白和长链脂肪酸。还显示CD36参与Toll样受体2(TLR2)信号传导(即充当TLR2的共受体)，更特别是通过TLR2/TLR6异二聚体信号传导。TLR2能够识别多种病原体相关基序，包括革兰氏阳性细菌的几种成分，如肽聚糖，脂磷壁酸(LTA)，脂阿拉伯甘露聚糖，脂蛋白，以及来自某些革兰氏阴性菌，酵母，螺旋体和真菌的不同LPS。其混杂性归因于其与TLR1和6异源二聚化的独特能力。已主要使用细菌脂蛋白研究TLR2异聚体的使用。使用二酰化和三酰化脂蛋白的研究已表明，TLR2/6异二聚体参与二酰化脂蛋白的活化，而三酰化脂蛋白独立于TLR6并主要通过TLR2/TLR1异二聚体来诱导先天免疫系统的活化。Hoebe等人(Nature 433，523-527)的研究和Triantafilou(The Journal of Biological Chemistry，281：31002-31011)通过证明TLR2/TLR6异二聚体也需要CD36来检测二酰化脂蛋白，而TLR2/TLR1异二聚体不是，已经对TLR2异型关联有了更多的了解。还有证据表明TLR4和CD36在氧化的低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的泡沫细胞形成中发挥相关作用，该蛋白参与动脉粥样硬化的发病机制(Chavez-Sanchez，Hum Immunol.2014年4月；75(4)：322-9)。还有证据表明CD36-TLR4-TLR6活化参与由致动脉粥样硬化脂质和β-淀粉样蛋白诱导的无菌炎症，其分别与动脉粥样硬化和阿尔茨海默病相关(Stewart等人，Nature Immunology 11，155-161(2010))。CD36表达/活性还与脂肪肝疾病和肝脂肪变性有关，更特别是非酒精性脂肪肝病(NAFLD)和非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。
另一方面，本发明提供了调节细胞中CD36活性的方法，所述方法包括使细胞与有效量的本文定义的化合物，其药学上可接受的酯或盐接触。本发明还提供了本文定义的化合物，其药学上可接受的酯或盐用于调节细胞中CD36活性的用途。本发明还提供了本文定义的化合物或其药学上可接受的酯或盐在制备用于调节细胞中CD36活性的药物中的用途。本发明还提供了本文定义的化合物或其药学上可接受的酯或盐，其用于调节细胞中的CD36活性。在一个实施方式中，调节是抑制。
鉴于CD36在动物的许多途径和条件中的重要性，化合物或其药学上可接受的酯或盐可用于治疗CD36相关疾病，紊乱或病症。本发明涉及通过其与化合物或其药学上可接受的酯或盐的相互作用来抑制或拮抗CD36活性的方法。
与CD36活性相关的疾病和病症的实例包括但不限于动脉粥样硬化，炎症(TLR2-，TLR4-和/或TLR6-相关炎症)，异常血管发生，年龄相关性黄斑变性(干和/或湿形式)脂代谢异常，非酒精性脂肪肝病(NAFLD)，非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，凋亡细胞异常去除，缺血如脑缺血和心肌缺血，缺血再灌注损伤，输尿管梗阻，慢性肾病中的纤维蛋白原发生，中风，阿尔茨海默病，糖尿病，糖尿病肾病和肥胖症。
另一方面，本发明提供了一种用于减少或抑制炎症的方法，例如生物系统(细胞，受试者)中的TLR2-，TLR4-和/或TLR6-相关炎症(例如，TLR2/6-相关炎症)，所述方法包括使所述生物系统与本文所述的环肽或其药学上可接受的酯或盐接触。在一个实施方式中，细胞是免疫细胞，例如巨噬细胞或单核细胞。另一方面，本发明提供了一种用于减少或抑制由细胞(例如免疫细胞，如巨噬细胞或单核细胞)中TLR2活化/刺激诱导的一氧化氮(NO)和/或促炎细胞因子/趋化因子(例如TNFα，IL-1β，CCL2)的产生的方法，所述方法包括使所述细胞与本文所述的环肽或其药学上可接受的酯或盐接触。本发明还涉及关于TLR2(例如TLR2/6)活化的医学病症的治疗，尤其是免疫介导的和炎性疾病。TLR2还涉及在多种过敏和免疫介导的炎性疾病中发挥作用，例如败血症，心脏或肾脏的缺血/再灌注损伤，心血管疾病，代谢疾病和动脉粥样硬化，过敏，哮喘，特应性，特应性皮炎，关节炎(类风湿性关节炎)，系统性红斑狼疮(SLE)和糖尿病(O'Neill等人，2009,Pharmacol.Rev.,vol.61,p.177)。在另一个实施方式中，该疾病与NLPR3炎性体相关。
在一个实施方式中，CD36相关疾病，紊乱或病症是动脉粥样硬化，年龄相关性黄斑变性(干和/或湿形式)，慢性肾病中的纤维蛋白原发生或心肌缺血/再灌注损伤。
药物组合物
在一个实施方式中，上述化合物或其药学上可接受的酯或盐包含在药物组合物中，所述药物组合物还包含一种或多种药学上可接受的载体，稀释剂和/或赋形剂。这些组合物可以以药学领域熟知的方式制备。补充的活性化合物/试剂也可以掺入组合物中。本文所用的“药学上可接受的载体”，“稀释剂”或“赋形剂”包括任何和所有溶剂，缓冲剂，分散介质，粘合剂，润滑剂，稀释剂，填充剂，增稠剂，崩解剂，增塑剂，涂料，阻隔层制剂，润滑剂，稳定剂，释放延迟剂，包衣，抗细菌剂和抗真菌剂等，它们在生理上相容并且不会干扰活性成分的生物活性的有效性。如本领域技术人员将认识到的，单个赋形剂可以同时实现两种以上的功能，例如，可以充当粘合剂和增稠剂。如技术人员也将认识到的，这些术语不一定是相互排斥的。载体，稀释剂和/或赋形剂可以适用于例如口服，静脉内，肠胃外，局部，皮内，皮下，肌肉内，颅内，眶内，结膜下，眼科，心室内，囊内，脊柱内，鞘内，硬膜外，脑池内，腹膜内，鼻内，子宫内，子宫内膜，舌下，阴道，直肠，硬膜外或肺部(例如气溶胶)施用(参见Remington：The Science and Practice of Pharmacy，Alfonso R.Gennaro，2003，第21版，Mack Publishing Company)。
有用的稀释剂例如填料包括例如但不限于磷酸二钙，二磷酸钙，碳酸钙，硫酸钙，乳糖，纤维素，高岭土，氯化钠，淀粉，糖粉，胶体二氧化硅，氧化钛，氧化铝，滑石，胶体二氧化硅，微晶纤维素，硅化微晶纤维素及其组合。可以以最小药物剂量增加片剂体积以制备足够大小和重量的片剂的填充剂包括交联羧甲基纤维素钠NF/EP(例如Ac-Di-)；无水乳糖NF/EP(例如PharmatoseTM DCL 21)；和/或聚维酮USP/EP。
粘合剂材料包括例如但不限于淀粉(包括玉米淀粉和预糊化淀粉)，明胶，糖(包括蔗糖，葡萄糖，葡萄糖和乳糖)，聚乙二醇，聚维酮，蜡，以及天然和合成的树胶，例如阿拉伯树胶海藻酸钠，聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，纤维素聚合物(例如羟丙基纤维素，羟丙基甲基纤维素(HPMC)，甲基纤维素，羟乙基纤维素，羧甲基纤维素，胶体二氧化硅NF/EP(例如Cab-O-SilTM M5P)，硅化微晶纤维素(SMCC)，例如硅化微晶纤维素NF/EP(例如ProsolvTM SMCC90)，和二氧化硅，及其混合物等)，veegum及其组合。
有用的润滑剂包括例如菜籽油，棕榈酸硬脂酸甘油酯，氢化植物油(I型)，氧化镁，硬脂酸镁，矿物油，泊洛沙姆，聚乙二醇，十二烷基硫酸钠，硬脂酸钠，硬脂酸，滑石和硬脂酸锌，甘油基酯，山嵛酸甘油酯十二烷基硫酸镁，硼酸，苯甲酸钠，乙酸钠，苯甲酸钠/乙酸钠(组合)，DL-亮氨酸，硬脂酸钙，硬脂酰富马酸钠，及其混合物等。
增量剂包括例如：微晶纤维素，例如(FMC Corp.)或(Mendell Inc.)，其也具有粘合剂性质；磷酸二钙，例如(MendellInc.)；硫酸钙，例如(Mendell Inc.)；和淀粉，例如淀粉1500；和聚乙二醇
崩解剂或溶解促进剂包括：淀粉，粘土，纤维素，藻酸盐，树胶，交联聚合物，胶体二氧化硅，渗透原，及其混合物等，例如交联羧甲基纤维素钠(AC-DI-)，交联羧甲基纤维素钠，羟基乙酸淀粉钠 交联聚乙烯聚吡咯烷酮(PLASONE-)，氯化钠，蔗糖，乳糖和甘露醇。
可用于核心和/或固体口服剂型包衣的抗粘附剂和助流剂可包括滑石，淀粉(例如玉米淀粉)，纤维素，二氧化硅，十二烷基硫酸钠，胶体二氧化硅和金属硬脂酸盐等。
二氧化硅流动调节剂的实例包括胶体二氧化硅，硅酸铝镁和瓜尔胶。
合适的表面活性剂包括药学上可接受的非离子，离子和阴离子表面活性剂。表面活性剂的实例是十二烷基硫酸钠。如果需要，待施用的药物组合物还可含有少量无毒辅助物质，例如润湿剂或乳化剂，和pH缓冲剂等，例如乙酸钠，脱水山梨糖醇单月桂酸酯，三乙醇胺乙酸钠，三乙醇胺油酸酯等。如果需要，也可加入调味剂，着色剂和/或甜味剂。
稳定剂的实例包括阿拉伯胶，白蛋白，聚乙烯醇，海藻酸，膨润土，磷酸二钙，羧甲基纤维素，羟丙基纤维素(HPC)，胶体二氧化硅，环糊精，单硬脂酸甘油酯，羟丙基甲基纤维素(HPMC)，三硅酸镁，硅酸铝镁，丙二醇，海藻酸丙二醇酯，海藻酸钠，巴西棕榈蜡，黄原胶，淀粉，硬脂酸酯，硬脂酸，硬脂酸单甘油酯和硬脂醇。
增稠剂的实例可以是例如滑石USP/EP，天然树胶，例如瓜尔胶或阿拉伯树胶，或纤维素衍生物，例如微晶纤维素NF/EP(例如AvicelTM PH 102)，甲基纤维素，乙基纤维素或羟乙基纤维素。有用的增稠剂是羟丙基甲基纤维素，一种可以各种粘度等级获得的佐剂。
增塑剂的实例包括：乙酰化单甘油酯；这些可以作为食品添加剂；柠檬酸烷基酯，其用于食品包装，医疗产品和化妆品；柠檬酸三乙酯(TEC)；乙酰基柠檬酸三乙酯(ATEC)，其沸点高于TEC，挥发性低于TEC；柠檬酸三丁酯(TBC)；乙酰基柠檬酸三丁酯(ATBC)，其与PVC和氯乙烯共聚物相容；柠檬酸三辛酯(TOC)，其也用于牙龈和控释药物；乙酰基柠檬酸三辛酯(ATOC)，其也用于印刷油墨；柠檬酸三己酯(THC)，其与PVC相容，也用于控释药物；柠檬酸乙酰基三己酯(ATHC)，其与PVC相容；丁酰基柠檬酸三己酯(BTHC，柠檬酸三己基邻丁酰基)，其与PVC相容；柠檬酸三甲酯(TMC)，其与PVC相容；烷基磺酸苯酯，聚乙二醇(PEG)或其任何组合。任选地，增塑剂可包含柠檬酸三乙酯NF/EP。
渗透增强剂的实例包括：亚砜(例如二甲基亚砜，DMSO)，氮酮(例如月桂酰胺)，吡咯烷酮(例如2-吡咯烷酮，2P)，醇和烷醇(乙醇或癸醇)，二醇(例如丙二醇和聚乙二醇)，表面活性剂和萜烯。
适于口服施用的制剂可包括(a)液体溶液，例如悬浮在稀释剂例如水，盐水或PEG400中的有效量的活性剂/组合物；(b)胶囊，小袋或片剂，各自含有预定量的活性成分，如液体，固体，颗粒或明胶；(c)在适当液体中的悬浮剂；(d)合适的乳液。片剂形式可包括乳糖，蔗糖，甘露醇，山梨糖醇，磷酸钙，玉米淀粉，马铃薯淀粉，微晶纤维素，明胶，胶体二氧化硅，滑石，硬脂酸镁，硬脂酸和其它赋形剂，着色剂，填充剂，粘合剂，稀释剂，缓冲剂，润湿剂，防腐剂，调味剂，染料，崩解剂和药学上相容的载体中的一种或多种。锭剂形式可包含活性成分在调味剂例如蔗糖中，并且包含活性成分在惰性基质例如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯胶乳剂和凝胶等中的锭剂含有除了活性成分之外本领域已知的载体。
用于非口服施用的制剂可例如包括赋形剂，无菌水或盐水，聚亚烷基二醇如聚乙二醇，源自植物的油，或氢化萘。可用于控制化合物的释放的生物相容的、生物可降解的丙交酯聚合物，丙交酯/乙交酯共聚物，或聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物。其他可能用于本发明的化合物/组合物的递送系统包括乙烯乙酸乙烯酯共聚物颗粒，渗透泵，植入式注射系统，以及脂质体。用于吸入的制剂可以包括赋形剂(例如，乳糖)，或可以为包含例如聚氧乙烯-9-月桂醚、甘胆酸盐和脱氧胆酸盐的水溶液，或可以是以滴鼻剂形式或如凝胶形式施用的油性溶液。
剂量
本发明范围内的组合物应含有有效量的活性剂(例如上述化合物或其药学上可接受的酯或盐)，以达到所需的治疗效果，同时使不良副作用最小化。对于化合物或其药学上可接受的酯或盐的施用，应选择施用量以使不良副作用最小化。有效治疗特定疾病，紊乱或病症的治疗或药物组合物的量将取决于疾病的性质和严重程度，作用靶位，患者体重，患者遵循的特殊饮食，使用的并发药物，施用途径和本领域技术人员将认识到的其它因素。临床医生将根据常规因素(例如疾病的程度和患者的不同参数)调整剂量。通常，将向受试者施用0.001至100mg/kg/天。此外，有效剂量可以是0.5mg/kg，1mg/kg，5mg/kg，10mg/kg，15mg/kg，20mg/kg，25mg/kg，30mg/kg，35mg/kg，40mg/kg，45mg/kg，50mg/kg，55mg/kg，60mg/kg，70mg/kg，75mg/kg，80mg/kg，90mg/kg或100mg/kg，或者可以在任何两个前述值之间。可以从源自体外或动物模型测试系统的剂量响应曲线外推有效剂量。例如，为了基于从大鼠研究产生的数据获得人的有效mg/kg剂量，将大鼠中的有效mg/kg剂量除以6。
用于进行本发明的模式
通过以下非限制性实施例进一步详细说明本发明。
实施例1：材料和方法
1.一般实验程序。
化学品：除非另有说明，否则化学品以商业来源原样使用而无需进一步纯化。聚苯乙烯Rink酰胺树脂(0.50mmol/g)购自Advanced ChemtechTM，并且制造商报道的树脂负载量用于计算最终产物的产率。MPE-308(26)，MPE-310(27)和MPE-312(34)的合成在CEMSpheriTide树脂(0.85mmol/g)上进行。试剂包括CuI，烯丙醇，异丙醇，37％甲醛水溶液，二苯甲酮腙，Cs2CO3，三苯基膦，偶氮二羧酸二异丙酯(DIAD)，80％炔丙基溴的甲苯溶液，盐酸羟胺，吡啶，甲酸(FA)，2-巯基乙醇和DBU(1,8-二氮杂双环庚烷-7-烯)购自Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-D-Phe-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Ala-OH，Fmoc-D-Trp(Boc)OH，Boc-His(Trt)-OH Boc-Lys-OH和偶联剂包括二异丙基碳二亚胺(DIC)，N,N'-二琥珀酰亚胺基碳酸酯(DSC)，羟基苯并三唑(HOBt)购自CS BioTM。根据文献方案合成Fmoc-Lys(o-NBS)-OH和Boc-Lys(o-NBS)-OH(DR Halpin，JALee，SJ Wrenn，PB Harbury，PlosBiol.2004,2,1031-1038)。所有溶剂均购自Fisher Scientific。通过溶剂过滤系统(Glass-Contour，Irvine，CA)得到无水四氢呋喃(THF)和甲醇。在MerckTM的硅胶60F254板上进行薄层色谱。LCMS分析在具有ESI离子源，单四极杆质量检测和正模式电离的AgilentTMTechnologies 1100系列仪器，或者具有ESI离子源，离子阱质量检测和正模式电离的ThermoFinniganTM LCQ Advantage MS上进行，并配备含有自动进样器和进样器的GilsonTMLC 322泵。使用SunfireTM C18柱(孔径：粒径：3.5μm；50×2.1mm)以0.4mL/min的流速使用含有0.1％FA在水中的MeOH或CH3CN的线性梯度测定粗肽样品的分析。制备型RP-HPLC使用反相SunfireTM C18柱(孔径：粒径：5μm；150×19mm)以10mL/min的流速在WatersTM PrepLC仪器上进行，并用在214nm和254nm处的UV检测器监测。含有0.1％FA的5-40％MeOH在含有0.1％FA的水中的线性梯度用于肽纯化。丙醇购自JT Baker Inc.，Fmoc-氯化物购自Chem-Impex International，Inc。水合肼，环丙基甲基醇和4-甲氧基苯甲醛购自Sigma Aldrich。
基于Fmoc的肽合成。基于Fmoc的肽合成使用聚苯乙烯Rink酰胺树脂(0.50mmol/g)在标准条件下(W.D.Lubell，J.W.Blankenship，G.Fridkin和R.Kaul(2005)“Peptides.”Science of Synthesis 21.11，Chemistry of Amides.Thieme，Stuttgart，713-809)在自动振荡器上进行。使用DIC(3当量)和HOBt(3当量)在N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中进行氨基酸(3当量)的偶联。通过用20％哌啶的DMF溶液处理树脂30分钟进行Fmoc脱保护。在每次偶联和脱保护步骤之后依次用DMF(3×10mL)，MeOH(3×10mL)，THF(3×10mL)和DCM(3×10mL)洗涤树脂。
氨基脲的氨基酰化。通过使用原位产生的氨基酸对称酸酐进行与氨基脲的偶联(J.Zhang，C.Proulx，A.Tomberg，W.D.Lubell，Org.Lett.2013,16,298-301)。将氨基酸(5当量)用DIC(2.5当量)在DCM(6mL)中处理30分钟。在使用旋转蒸发器浓缩反应混合物后，将得到的含有酸酐的残余物溶解在DMF(6mL)中并转移到装有TeflonTM过滤器，塞子和含有溶胀树脂的活塞(～300mg，0.15mmol)的塑料注射器管中。将树脂混合物在自动振荡器上振荡12小时。过滤后，依次用DMF(3×10mL)，MeOH(3×10mL)，THF(3×10mL)和DCM(3×10mL)洗涤树脂。
缩氨基脲脱保护。通过用1.5M NH2OH·HCl的吡啶(6mL)溶液在60℃下用超声处理12小时进行缩氨基脲脱保护(D.Sabatino，C.Proulx，S.Klocek，C.B.Bourguet，D.Boeglin，H.Ong，W.D.Lubell，Org.Lett.2009,11,3650-3653)。过滤树脂并用DMF(3×10mL)，MeOH(3×10mL)，THF(3×10mL)和DCM(3×10mL)洗涤。
树脂结合肽的裂解试验。将等分的肽结合树脂(3-5mg)用新制备的TFA/H2O/TES溶液(95：2.5：2.5，v/v/v，0.5mL)在室温下处理30分钟。过滤裂解混合物，将滤液浓缩至减少的体积，用冷乙醚(1.5mL)从中沉淀粗肽。在涡旋振荡器上搅拌后，将混合物在离心机中旋转，倾析上清液，留下沉淀，将其溶解在甲醇(或H2O，1mg/mL)中并进行LCMS分析。
氮杂肽脱保护和从树脂裂解。使用新制备的TFA/H2O/TES溶液(95：2.5：2.5，v/v/v，20mL/g肽树脂)在室温下将Rink-酰胺树脂结合的肽脱保护并从载体裂解2h。过滤树脂并用5mL TFA冲洗。浓缩滤液和冲洗液直至粗油持续存在，通过加入冷乙醚(10-15mL)从中获得沉淀物。离心(1200rpm，10分钟)后，除去上清液，将粗肽沉淀物溶于乙腈水溶液(10％v/v)中并冷冻干燥，然后进行分析和纯化。
2.在固相上采用'A3-大环化'合成环状氮杂-GHRP-6类似物
采用一系列方法合成环状氮杂-GHRP-6类似物。方法I涉及在固相上进行'A3-大环化'后完成肽序列伸长，并用于合成环状类似物8，9，17，18，19，30，31和32。方法II以'A3-大环化'为特征作为肽序列完成后的倒数第二步，用于合成环状类似物17，18，24，25，33，26，27，34和35。
使用方法I合成环状类似物8和9：
使用方法I合成环状类似物17，18和19：
合成环状氮杂肽17作为使用'A3-大环化'合成环状氮杂肽的代表
在固相上代表性合成缩氨基脲保护的氮杂-Gly，合成缩氨基脲11a。
在15分钟内用二苯甲酮腙(88mg，0.45mmol)在3mL DCM中的溶液逐滴处理N,N'-二琥珀酰亚胺基碳酸酯(DSC，115mg，0.45mmol)在DMF(3mL)中的溶液，在室温下搅拌1小时，并转移到配有TeflonTM过滤器，塞子和旋塞的注射器管中，其包含溶胀的D-Phe-Lys(o-NBS)树脂(～300mg，0.15mmol)。将树脂混合物用DIEA(157μL，0.90mmol)处理，在自动振荡器上振荡12小时并过滤。过滤后，依次用DMF(3×10mL)，MeOH(3×10mL)，THF(3×10mL)和DCM(3×10mL)洗涤树脂。通过LCMS检查裂解的树脂样品显示了完全偶联；LCMS(含有0.1％FA的70-95％MeOH在含有0.1％FA的水中经8分钟)R.T.＝3.40分钟；C35H38N7O7S[M+H]+的ESI-MS m/z计算值700.3，实测值700.2。
在固相上代表性ε-N-烷基化o-NBS保护的赖氨酸残基，合成氮杂三肽12a
在氩气下，将真空干燥的缩氨基脲树脂11a(～300mg，0.15mmol)悬浮在密封烧瓶中的无水THF(3mL)中。将烯丙醇(102μL，1.5mmol)的无水THF(1mL)溶液，PPh3(197mg，0.75mmol)的无水THF(1mL)溶液和DIAD(148μL，0.75mmol)的无水THF(1mL)溶液依次加入树脂混合物中。将树脂混合物在自动振荡器上振荡30分钟，并过滤。过滤后，依次用DMF(3×10mL)，MeOH(3×10mL)，THF(3×10mL)和DCM(3×10mL)洗涤树脂。通过LCMS检查裂解的树脂样品显示了完全烯丙基化：LCMS(含有0.1％FA的70-95％MeOH在含有0.1％FA的水中经8分钟)R.T.＝4.97分钟；C38H42N7O7S[M+H]+的ESI-MS m/z计算值740.3，实测值740.2。
在固相上代表性炔丙基化缩氨基脲保护的氮杂-Gly，合成氮杂三肽13a
将氮杂三肽树脂12a(～300mg，0.15mmol)的DMF(6mL)溶液在装有TeflonTM过滤器，塞子和旋塞的注射器管中溶胀30分钟。将树脂混合物用Cs2CO3(293mg，0.90mmol)和炔丙基溴(100μL，0.90mmol，80％在甲苯中)处理，在自动振荡器上振荡24小时，并过滤。过滤后，依次用DMF(3×10mL)，MeOH(3×10mL)，THF(3×10mL)和DCM(3×10mL)洗涤树脂。通过LCMS检查裂解的树脂样品显示了完全炔丙基化：LCMS(含有0.1％FA的70-95％MeOH在含有0.1％FA的水中经8分钟)R.T.＝5.40分钟；C35H41N6O3[M+H]+的ESI-MS m/z计算值778.3，实测值778.2。
用于在固相上去除o-NBS保护基团的代表性方案，合成氮杂三肽14a
将氮杂三肽树脂13a(～300mg，0.15mmol)的DMF(6mL)溶液在装有TeflonTM过滤器，塞子和旋塞的注射器管中溶胀30分钟，用DBU(224μL，0.1.5mmol)和2-巯基乙醇(53μL，0.75mmol)处理，在自动振荡器上振荡30分钟，并过滤。过滤后，依次用DMF(3×10mL)，MeOH(3×10mL)，THF(3×10mL)和DCM(3×10mL)洗涤树脂。通过LCMS检查裂解的树脂样品显示了完全脱保护：LCMS(含有0.1％FA的50-95％MeOH在含有0.1％FA的水中经8分钟)。＝1.99分钟；C35H41N6O3[M+H]+的ESI-MS m/z计算值593.3，实测值593.3。
用于在固相上的'A3-大环化'的代表性方案，合成环状氮杂肽15a
将氮杂三肽树脂14a(～300mg，0.15mmol)的DMSO(6mL)溶液在装有TeflonTM过滤器和塞子的注射器管中溶胀30分钟，并用CuI(5.7mg，0.03mmol)和甲醛水溶液(78μL，0.90mmol，37％在H2O中)处理，在自动振荡器上振荡24小时，并过滤。过滤后，依次用AcOH/H2O/DMF(5：15：80，v/v/v，3×10mL)，THF(3×10mL)，MeOH(3×10mL)和DCM(3×10mL)洗涤树脂。通过LCMS检查裂解的树脂样品显示了完全转化，并且观察到具有与环状氮杂肽15a一致的分子离子的峰：LCMS(含有0.1％FA的30-95％MeOH在含有0.1％FA的水中经8分钟)R.T.＝6.37分钟；C36H41N6O3[M+H]+的ESI-MS m/z计算值605.3，实测值605.3。
如上述一般实验程序中所述，通过除去缩氨基脲获得氨基脲16a。然后使用上述一般程序进行肽伸长和酰化。在从树脂最终裂解后，分离出环状氮杂肽17并通过制备型HPLC纯化。
使用方法II合成环状类似物17，18，24，25，26和27：
使用方法II在固相上合成环状类似物17，18，24，25，26和27与上述用于合成环状类似物17的方案类似地进行。
合成环状类似物30，31，32，33，34和35。
在固相上合成环状类似物30，31和32与上述使用方法I合成环状类似物17类似地进行。在固相上合成环状类似物33，34和35与上述使用方法II合成环状类似物17类似地进行。
纯化的环状氮杂肽的分析LCMS表征
环状氮杂肽8的LCMS分析使用以下的线性梯度进行：a)含有0.1％FA的5-60％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在5％MeOH中5分钟，R.T＝4.49分钟；b)含有0.1％FA的5-60％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在5％MeCN中5分钟，R.T＝8.39分钟；C41H53N12O6[M+H]+的HRMS m/z计算值809.4205，实测值809.4201。
环状氮杂肽17的LCMS分析使用以下的线性梯度进行：a)含有0.1％FA的0-95％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在100％H2O中5分钟，R.T＝5.98分钟；b)含有0.1％FA的0-95％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在100％H2O中5分钟，R.T＝5.87分钟；C43H55N12O6[M+H]+的HRMS m/z计算值835.4362.4205，实测值835.4376。
环状氮杂肽9(MPE-210)的LCMS分析使用以下的线性梯度：a)含有0.1％FA的5-60％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在5％MeOH中5分钟，R.T＝5.89分钟；b)含有0.1％FA的5-60％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在5％MeCN中5分钟，R.T＝4.40分钟；C49H58N13O6[M+H]+的HRMS m/z计算值924.4628，实测值924.4627。
环状氮杂肽18的LCMS分析使用以下的线性梯度进行：a)含有0.1％FA的0-95％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在100％H2O中5分钟，R.T＝6.92分钟；b)含有0.1％FA的0-95％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在100％H2O中5分钟，R.T＝4.67分钟；C51H60N13O6[M+H]+的HRMS m/z计算值950.4784，实测值950.4787。
环状氮杂肽19的LCMS分析使用以下的线性梯度：a)含有0.1％FA的10-80％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在10％MeOH中5分钟，R.T＝9.57分钟；b)含有0.1％FA的5-60％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在5％MeCN中5分钟，R.T＝7.98分钟；C48H58N11O6[M+H]+的HRMS m/z计算值884.4566，实测值884.4549。
环状氮杂肽24的LCMS分析使用以下的线性梯度：a)含有0.1％FA的10-95％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在10％MeOH中5分钟，R.T＝4.99分钟；b)含有0.1％FA的10-95％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在10％MeCN中5分钟，R.T＝5.28分钟；C40H53N10O6[M+H]+的HRMS m/z计算值769.4144，实测值769.4140。
环状氮杂肽25的LCMS分析使用以下的线性梯度：a)含有0.1％FA的10-95％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在10％MeOH中5分钟，R.T＝6.29分钟；b)含有0.1％FA的10-95％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在10％MeCN中5分钟，R.T＝6.10分钟；C51H63N12O7[M+H]+的HRMS m/z计算值955.4937，实测值955.4942。
环状氮杂肽26的LCMS分析使用以下的线性梯度：a)含有0.1％FA的10-95％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在10％MeOH中5分钟，R.T＝6.46分钟；b)含有0.1％FA的10-95％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在10％MeCN中5分钟，R.T＝5.66分钟；C53H65N12O8[M+H]+的HRMS m/z计算值997.5043，实测值997.5031。
环状氮杂肽27的LCMS分析使用以下的线性梯度：a)含有0.1％FA的10-95％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在10％MeOH中5分钟，R.T＝8.33分钟；b)含有0.1％FA的10-95％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在10％MeCN中5分钟，R.T＝5.63分钟；C50H60N11O7[M+H]+的HRMS m/z计算值926.4671，实测值926.4558。
环状氮杂肽30的LCMS分析使用以下的线性梯度：a)含有0.1％FA的10-95％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在10％MeOH中5分钟，R.T＝4.92分钟；b)含有0.1％FA的10-95％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在10％MeCN中5分钟，R.T＝5.88分钟；C41H58N11O6[M+H]+的HRMS m/z计算值800.4566，实测值800.4553。
环状氮杂肽31的LCMS分析使用以下的线性梯度：a)含有0.1％FA的10-95％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在10％MeOH中5分钟，R.T＝5.04分钟；b)含有0.1％FA的10-95％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在10％MeCN中5分钟，R.T＝4.71分钟；C43H60N11O6[M+H]+的HRMS m/z计算值826.4723，实测值826.4718。
环状氮杂肽32的LCMS分析使用以下的线性梯度：a)含有0.1％FA的10-95％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在10％MeOH中5分钟，R.T＝4.97分钟；b)含有0.1％FA的10-95％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在10％MeCN中5分钟，R.T＝4.70分钟；C43H62N11O6[M+H]+的HRMS m/z计算值828.4879，实测值828.4875。
环状氮杂肽33的LCMS分析使用以下的线性梯度：a)含有0.1％FA的0-95％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在100％H2O中5分钟，R.T＝4.62分钟；b)含有0.1％FA的0-95％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在100％H2O中5分钟，R.T＝4.47分钟；C46H65N12O7[M+H]+的HRMS m/z计算值897.5094，实测值897.5092。
环状氮杂肽34的LCMS分析使用以下的线性梯度：a)含有0.1％FA的10-95％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在10％MeOH中5分钟，R.T＝5.50分钟；b)含有0.1％FA的10-95％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在10％MeCN中5分钟，R.T＝3.95分钟；C45H62N11O7[M+H]+的HRMS m/z计算值939.5199，实测值939.5186。
环状氮杂肽35的LCMS分析使用以下的线性梯度：a)含有0.1％FA的10-95％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在10％MeOH中5分钟，R.T＝6.07分钟；b)含有0.1％FA的10-95％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经10分钟，然后在10％MeCN中5分钟，R.T＝4.96分钟；C48H67N12O8[M+H]+的HRMS m/z计算值868.4828，实测值868.4804。
环肽对RAW巨噬细胞系中由TLR2激动剂R-FSL-1诱导的一氧化氮(NO)释放的影响
小鼠RAW1巨噬细胞系获自American Type Cell Collection(ATCC#TIB-71)，以1.5×105个细胞/孔接种于在48孔板(#3548)上的含有100U/mL青霉素(Pen)和100μg/mL链霉素(Strep)的Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM)中，并在37℃下用5％CO2温育。2小时后，除去粘附细胞的细胞培养基，用含有0.2％牛血清白蛋白(BSA)的DMEM-Pen/Strep培养基代替，并补充浓度为10-6或10-7M的环肽。MPE-001(DBG178，His-D-Trp-Ala-AzaTyr-D-Phe-Lys-NH2)和[azaLys6]-GHRP-6(His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-azaLys-NH2，阴性对照)以10-6M分别用作阳性和阴性对照。在预温育1小时后，使用浓度为300ng/mL的TLR2配体成纤维细胞刺激脂肽(R-FSL-1)(#L7022)刺激细胞过夜。然后收集上清液，通过使用2,3-二氨基萘(DAN)的荧光进行亚硝酸盐产生分析。简言之，将25μL样品与0.5μl DAN在100μL终体积的磷酸盐缓冲液(50mM，pH 7.5)中在室温下在黑暗中温育。15分钟后，用20μLNaOH(2.8N)终止反应，并使用荧光板读数器(Safire，λexc 365nm和λem 430nm)读取板。
结合实验
大鼠心脏膜制剂作为CD36的来源用于结合研究。将来自Charles River的SpragueDawley大鼠(300-325g)的心脏切成小块并在缓冲液A(10mM NaHCO3，5mM NaN3，10μM0.1μM抑肽酶，1μM BststatinA，1μM亮肽素，pH 7.0)中以5ml/g组织的浓度用低速均化3×15秒。首先将均化物在离心机中以8700×g离心20分钟，并在冰上收集上清液。将沉淀重新悬浮并用Glass-Potter重新均化5次。将该均化物以8700×g再离心10分钟，并将所得上清液与第一次收集的上清液合并。将合并的上清液以35000×g离心20分钟。使用具有Teflon研杵的玻璃匀浆器将获得的沉淀级分重悬于体积对应于20mL/g新鲜组织的缓冲液B(20mM Tris-马来酸盐，0.6M KCl，pH6.8)中。将得到的悬浮液以35000×g再离心60分钟。将得到的沉淀级分重悬浮于缓冲液C(10mM Tris/HCl缓冲液pH 7.4)中，用研杵(20ml/g新鲜组织)在玻璃中充分均化。将该悬浮液以35000×g进行另一次离心60分钟。将收集的沉淀重悬于含有2mM EGTA的50mM Tris/HCl缓冲液(pH 7.4)中，最终体积相当于1-2mL/g新鲜组织。获得的膜制剂在-80℃冷冻。使用二辛可宁酸(BCA)方法测定蛋白质浓度，使用BSA作为标准。
可光活化配体的放射性碘化作为受体结合测定的示踪剂。如前所述进行Tyr-Bpa-Ala-海沙瑞林的放射性碘标记(Ong,H等人，Endocrinology 139：432-435.1998)。简言之，将10nmol Tyr-Bpa-Ala-海沙瑞林与100ng乳过氧化物酶和1mCi Na125I在30μl 0.1M乙酸钠缓冲液(pH 5.6)中混合。通过在室温下加入3nmol H2O2开始反应5分钟。对于每次添加，该步骤重复两次，每次温育5分钟。通过用1mL 0.1％TFA稀释混合物来终止反应。放射性碘标记的肽在具有20％至50％乙腈在0.1％TFA中的60-min线性梯度的反相C18柱上通过HPLC纯化。收集洗脱的放射性标记的示踪剂，等分(50×106cpm/级分)并储存在-80℃。
竞争结合曲线。可光活化配体的受体结合测定如下进行：将膜(50μg/25μl)在黑暗中在含有2mM EGTA(缓冲液A)的175μl的50mM Tris-HCl pH 7.4中，在固定浓度的[125I]-Tyr-Bpa-Ala-海沙瑞林(250000cpm/25μl)的缓冲液B(含有2mM EGTA和0.05％杆菌肽的50mM Tris-HCl pH 7.4)的存在下和在0.1至10μM增加浓度的竞争配体：海沙瑞林(作为参考标准)，环肽26(MPE-266)28(MPE-268)，32(MPE-267)，33(MPE-298)，25(MPE-210)，38(MPE-308)，35(MPE-300)39(MPE-310)，MPE-189，MPE-191，MPE-192，MPE-193，MPE-201，MPE-202，MPE-203，MPE-048，MPE-074，MPE-075，MPE-110，MPE-111和MPE-400的存在下温育。用0.01至5μM增加浓度的竞争配体进行MPE-298的结合研究。非特异性结合定义为未被50μM相应肽置换的结合。将所有含肽溶液在缓冲液B中稀释。将缓冲液A和B在真空下脱气，并用于加盖的管中以使脂质过氧化最小化。在温育期之前，将所有管置于低流量的氮气下。将所有材料保持在冰上，并在黑暗中进行结合测定。在22℃温育60分钟后(每15分钟涡旋一次)，使膜在4℃用UV灯(365nm)照射15分钟。在12000×g离心15分钟后，将沉淀重悬于40μl样品缓冲液(62mM Tris-HCl，pH 6.8，2％SDS，10％甘油，15％2-巯基乙醇和0.05％溴酚蓝)中，并在进行电泳前煮沸5分钟。在7.5％SDS-PAGE Bio-Rad Mini-Protean电泳系统(150V，1小时)上分离蛋白质(50μg/40μl)。将由SDS/PAGE产生的凝胶固定，在考马斯亮蓝R-250中着色，干燥，暴露于储存磷光体增强屏(Amersham Biosciences)，并使用PhosphorImager(GE Healthcare Life)进行分析。通过光密度测定法定量蛋白质条带，并通过光密度测定法和ImageQuantTM 5.0软件分析87kDa的共价结合信号以设定竞争曲线。通过使用软件包(prism version 7.0)分析曲线。
调节R-FSL-1诱导RAW巨噬细胞模型中环肽的促炎细胞因子(TNF-α)和趋化因子 (CCL2)释放
鼠RAW1巨噬细胞系获自American Type Cell Collection(ATCC#TIB-71)。将RAW细胞以每孔150000个细胞接种在48孔板(#3548)中，并在37℃，5％CO2下在培养基(补充1％青霉素/链霉素的DMEM)中断奶过夜。第二天，将培养基更换为补充有0.2％BSA的DMEM-1％青霉素/链霉素。首先用300μL氮杂肽DBG178(MPE-133，参考标准)，25(MPE-210)，26(MPE-266)，28(MPE-268)，32(MPE-267)，33(MPE-298)，38(MPE-308)，35(MPE-300)，39(MPE-310)和azaLys6-GHRP-6(作为阴性对照)以10-7M预处理细胞30分钟。然后，加入100μL TLR2激动剂，R-FSL-1(300ng/ml终浓度，R-FSL-1，#L7022)，在37℃，5％CO2温育4小时。在温育期结束时，收集培养基并在-80℃下储存用于使用ELISA试剂盒(#88-7391和#88-7324)进行TNF-α和CCL-2测定。使用Dunnett检验和统计软件包(Graph PadPrism 7.0版)，通过方差分析(ANOVA)和事后比较分析结果。P<0.05被认为具有统计学意义。
调节骨髓来源的巨噬细胞中IL-1β和TNF-α的分泌
骨髓来源的巨噬细胞分离和纯化。从4个月大的C57Bl/6小鼠的胫骨和股骨中分离骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)。将小鼠单独在CO2室中安乐死。去除皮肤和肌肉后，从死老鼠身上解剖胫骨和股骨，并在使用前储存在冷DMEM中。将骨头置于含有无菌PBS的培养皿中并浸入冰中。在层流培养中，将骨头浸入70％乙醇中1分钟，然后在无菌PBS中漂洗。使用无菌镊子和剪刀将骨头切成2片并放入穿孔的0.6mL管中，将其放入含有200μL DMEM的2mL离心管中。在6500RPM离心1分钟后，将骨髓细胞沉淀轻轻地重悬浮并合并在50mL管中。计数细胞，并使用EasySepTM小鼠单核细胞分离试剂盒(StemCell Technologies，#19861)根据制造商的说明从骨髓细胞中纯化单核细胞。纯化后，将单核细胞接种并在补充40ng/mL巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF，Biolegend#576406)的含有10％FBS和1％Pen/Strep的DMEM的100mm非粘附培养皿上诱导巨噬细胞6天。2天后更换培养基并更新。
诱导后，用磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤粘附的BMDM，用细胞提升器机械分离，在4℃下以400g离心10分钟，并在48孔板中铺板5×105细胞/孔(#3548)并用脂多糖(来自大肠杆菌，Sigma-Aldrich，#L4391的LPS200ng/mL)引发3小时。在引发期后，洗涤细胞并在含有1％青霉素/链霉素的DMEM中断奶过夜。第二天，更换培养基为补充有0.2％BSA的DMEM-1％青霉素/链霉素。首先用300μL MPE-298以10-6至10-11M的浓度预处理细胞30分钟。然后，加入100μL TLR2激动剂，R-FSL-1(300ng/ml终浓度，R-FSL-1，#L7022)，在37℃，5％CO2温育4小时。在温育期结束前30分钟，加入三磷酸腺苷(0.5mM ATP，Sigma-Aldrich#A2383)以诱导细胞释放IL-1β。在温育期结束时，收集培养基并使用ELISA试剂盒(EbioScience#88-7013-88和#88-7391)在-80℃下储存用于IL-1β和TNF-α测定。使用统计软件包(Graph Pad Prism version 7.0)的Dunnett检验，通过方差分析(ANOVA)和事后比较分析数据的统计显著性。P<0.05被认为具有统计学意义。
实施例2：通过A3-大环化合成环状氮杂-GHRP-6类似物
通过将氮杂-炔丙基甘氨酸和ε-N-烷基-赖氨酸残基初始掺入GHRP-6肽序列中，然后使用醛缩键进行铜催化的大环化，以将叔炔丙胺桥引入肽中。在引入氮杂炔丙基甘氨酸残基后立即检查A3-大环化，以及在完成肽序列后检查。为了寻求多样性导向合成，采用了两种策略，其中分别在肽序列的C-末端和中心残基处引入α-N-烷基-赖氨酸残基。在C-末端具有ε-N-烷基-赖氨酸残基，通过氮杂炔丙基甘氨酸位置扫描改变大环的环大小多样性，其中氮杂炔丙基甘氨酰残基在用甲醛大环化之前系统地前进到GHRP-6序列的N-末端。在ε-N-烷基-赖氨酸残基以序列为中心的情况下，研究了各种ε-氨基取代基对大环化的影响。
通过A3-大环化合成有效地多样性导向合成环状氮杂肽的重要步骤是开发固相方法，以使用缩醛键在铜催化的大环化之前将氮杂炔丙基甘氨酸残基和ε-N-烷基-赖氨酸残基安装到肽序列中。氮杂炔丙基甘氨酸可以通过氮杂肽的亚单体合成在固相上插入[13]。在溶液中制备ε-N-烷基化赖氨酸，然后与树脂结合的肽偶联；然而，Mitsunobu化学也对相应的ε-N-邻硝基苯磺酰基(邻-NBS)胺进行了赖氨酸的固相ε-N-烷基化[20]。
作为A3-大环化的概念验证，通过在肽C-末端放置ε-N-甲基赖氨酸并在i+2位置插入氮杂-炔丙基甘氨酸来追求环状氮杂肽8。在连接到Rink酰胺树脂之前，从溶液中的Boc-Lys-OH合成Fmoc-Lys(甲基，o-NBS)-OH 1。在使用DIC和HOBt用Fmoc-D-Phe-OH去除Fmoc基团和伸长后，用二苯甲酮腙和N,N'-二琥珀酰亚胺基碳酸酯(DSC)制备的活性肼基甲酸酯酰化二肽2a，以提供缩氨基脲3a[14]。使用Cs2CO3(300mol％)和丙基溴(600mol％)进行炔丙基化以提供良好纯度的氮杂-炔丙基甘氨酸4a，如通过裂解的等分试样的LCMS分析获得。在用2-巯基乙醇和DBU除去o-NBS-基团后，准备用二级ε-N-甲胺5a测试A3-大环化。如通过LCMS分析所证实，通过在室温下用CuI(20mol％)和37％甲醛水溶液(600mol％)在DMSO中将氮杂肽5a处理24小时成功制备大环6a。通过用吡啶中的羟胺盐酸盐除去缩氨基脲，使用来自用DIC处理Fmoc-Ala-OH的对称酸酐酰化所得的氨基脲7a，以及标准固相肽合成，脱保护和树脂裂解，实现大环6a伸长至环状GHRP-6类似物8。通过制备型HPLC纯化后，分离出GHRP-6大环8，总产率为3.5％。采用相同的策略，获得大环9，总产率为2.4％。
方案1.使用先前在溶液中合成的ε-N-甲基-赖氨酸通过'A3-大环化'合成环状氮杂肽。
对于手中的大环GHRP-6类似物8和9，通过系统地将氮杂炔丙基甘氨酸残基朝向序列的N-末端移动来研究环大小范围。此外，通过设计用于扩展ε-胺取代基的多样性的方法在固相上制备ε-N-烷基-赖氨酸残基。将Fmoc-Lys(o-NBS)-OH 10[19]与RINK酰胺树脂偶联并进行肽伸长后，合成缩氨基脲11a-d。通过使用Mitsunobu化学将前者烷基化来实现对ε-N-O-(NBS)胺氮的化学选择性改性。用烯丙醇，PPh3和偶氮二甲酸二异丙酯(DIAD)处理磺酰胺11a-d，选择性地提供ε-N-(烯丙基)赖氨酰肽12a-d，如通过裂解的等分试样的LCMS分析所证实。随后，使用Cs2CO3(300mol％)和炔丙基溴(600mol％)进行缩氨基脲的炔丙基化，以得到氮杂-炔丙基甘氨酸肽13a-d。然后使用与上述相同的条件进行A3-大环化，分别提供16-，19，21和24-元大环15a-d，如通过LCMS分析所证实。环化后，如上所述进行缩氨基脲去除，氨基脲酰化，肽伸长和树脂裂解，在通过制备型HPLC纯化后得到环状GHRP-6类似物17和18(表1)。然而，与相应的环状GHRP-6类似物的合成不能成功地与氨基脲大环16c和16d偶联。空间位阻明显受到抑制，与较大环大小的氨基脲的偶联。然而，在通过制备型HPLC纯化后，氨基脲16d从树脂裂解，以得到具有N-末端氨基脲的环状氮杂-六肽19。
方案2.使用在固相上合成的ε-N-烯丙基-赖氨酸通过'A3-大环化'合成环状氮杂肽。
方案3.肽序列完成后通过'A3-大环化'合成环状氮杂肽。
在环化后未能伸长氨基脲16c和16d促进了在A3-大环化之前进行伸长完整线性肽的策略研究，作为同时脱保护和树脂裂解之前的倒数第二步。因此，用羟胺盐酸盐处理缩氨基脲13a以释放氨基脲20a，并且如上文对其环状对应物所述，线性肽伸长。用DBU和2-巯基乙醇处理氮杂-六肽21a以选择性除去o-NBS基团。随后，使用标准的A3-大环化条件将氮杂-六肽23a有效地转化为大环17。树脂裂解产生环状氮杂肽17，其产率比早期方法高约2倍(1.2％)，涉及环化后的肽伸长。
采用肽延伸/A3-大环化方法，线性肽22b-d也成功转化为大环氮杂-GHRP-6类似物18，24和25。分别用N-末端丙氨酸残基制备环状氮杂肽24和25，以避免在与组氨酸偶联到氨基脲期间的外消旋化，加入可能有利于生物活性的N-末端碱性胺。
通过在Mitsunobu反应中使用不同醇作为亲电试剂的环状氮杂三肽30-32的合成来研究ε-胺取代基的多样性：甲醇，烯丙醇和异丙醇。将ε-N-烷基化赖氨酸插入肽序列中以取代色氨酸残基，并将氮杂炔丙基甘氨酸置于i+3位置以取代GHRP-6序列中的组氨酸残基。合成环状类似物33，其在N-末端具有另外的丙氨酸，用于与类似物31比较，以研究N-末端碱性胺的重要性。
方案4.在肽序列中用ε-N-烷基化赖氨酸合成环状氮杂肽。
通过A3-大环化方法合成环状氮杂肽GHRP-6类似物，其产率和纯度适于生物学评价(表1)。
表1.环状氮杂肽GHRP-6类似物的产率和纯度
[a]通过如上所述的LCMS分析确定。
环状类似物MPE-110，MPE-111，MPE-074和MPE-048的合成
溶液相化学
鸟氨酸构建块合成
Fmoc-Orn(o-NBS)-OH(RGO1)：将Fmoc-Orn(Boc)-OH(2.02g，4.44mmol)溶于用TFA(20mL)处理的CH2Cl2(30mL)中，在室温下搅拌3小时，通过旋转蒸发除去挥发物。将得到的黄色油状物与甲苯共蒸发，以得到残余物，将其溶于THF(40mL)和水(40mL)中，并用iPr2NEt(7.70mL，44.2mmol)和o-NBSCl(1.13g，5.08mmol)一次性处理。将反应在室温下搅拌3小时，用EtOAc(100mL)稀释，并依次用HCl水溶液(1M，100mL×3)，水(100mL)和盐水(100mL)洗涤。将有机层用MgSO4干燥，通过旋转蒸发除去挥发物，以得到磺酰胺RGO1(2.4g，定量)，为浅黄色固体。使用氨基酸而无需进一步纯化。
1H NMR(300MHz,DMSO)δ8.10(t,J＝5.6Hz,1H),8.03–7.92(m,2H),7.92–7.81(m,4H),7.72(d,J＝7.4Hz,2H),7.61(d,J＝8.0Hz,1H),7.41(t,J＝7.2Hz,2H),7.32(t,J＝7.1Hz,2H),4.34–4.16(m,3H),3.89(td,J＝8.7,4.6Hz,1H),2.90(q,J＝6.3Hz,2H),1.73(s,1H),1.65–1.43(m,3H).13C NMR(75MHz,DMSO)δ173.7,156.1,147.8,143.8,140.7,134.0,132.7,132.6,129.4,127.7,127.1,125.3,124.4,120.1,65.6,53.5,46.7,42.3,27.9,26.0。LCMS(含有0.1％甲酸的10-90％MeOH经10分钟)Rt＝11.04分钟。C26H26N3O8S+[M+H]+的ESI-MS m/z：计算值540.1，实测值540.1。熔点：108-110℃。
固相化学
使用标准条件(W.D.Lubell,J.W.Blankenship,G.Fridkin和R.Kaul(2005)“Peptides.”Science of Synthesis 21.11,Chemistry of Amides.Thieme,Stuttgart,713-809)使用聚苯乙烯Rink酰胺树脂在自动摇床上进行基于Fmoc的肽合成。在偶联第一个氨基酸后，从Fmoc-脱保护的UV吸光度计算负载量。使用DIC(3当量)和HOBt(3当量)在DMF中进行氨基酸(3当量)的偶联3-6小时。通过用20％哌啶的DMF溶液处理树脂30分钟进行Fmoc-脱保护。在每次偶联和脱保护步骤之后依次用DMF(×3)，MeOH(×3)THF(×3)和CH2Cl2(×3)洗涤树脂。
赖氨酸作为AA1
Fmoc-Lys(o-NBS)-Rink酰胺树脂RGO7：在装有TeflonTM过滤器的注射器中的Rink酰胺树脂(3.00g)上，通过用20％哌啶的DMF溶液处理树脂30分钟进行Fmoc去除。过滤树脂，并依次用DMF(×3)，MeOH(×3)和CH2Cl2(×3)洗涤。将Fmoc-Lys(o-NBS)-OH(1.62g，2.93mmol)溶解于DMF(20mL)中，用DIC(0.7mL，4.52mmol)和HOBt(611mg，4.52mmol)处理，搅拌3分钟，并加入含有树脂的注射器中。将混合物摇动14小时。然后过滤树脂，并依次用DMF(×3)，MeOH(×3)和CH2Cl2(×3)洗涤。干燥树脂，并测量负载量为0.345mmol/g树脂。
Fmoc-Lys(o-NBS,烯丙基)-Rink酰胺树脂RGO8：将真空干燥的Fmoc-Lys(o-NBS)-树脂RGO7(0.441mmol)置于装有TeflonTM过滤器的注射器中，悬浮于THF(干燥，5mL)中，并依次用烯丙醇(206μL，3.03mmol)的THF(干燥，1mL)溶液，PPh3(397mg，1.51mmol)的THF(干燥，1mL)溶液和DIAD(298μL，1.51mmol)的THF溶液(干燥，1mL)处理。将注射器中的混合物摇动90分钟。过滤树脂，并依次用DMF(×3)，MeOH(×3)，THF(×3)和CH2Cl2(×3)洗涤。通过LCMS检查裂解的树脂样品(5mg)显示了完全烯丙基化：LCMS(含有0.1％甲酸的30-95％MeOH在含有0.1％甲酸的水中经10分钟)Rt＝8.65分钟。C30H33N4O7S+[M+H]+的ESI-MS m/z：计算值593.2，实测值593.2。
Boc-Ala-D-Pra-Ala-Trp(Boc)-D-Phe-Lys(o-NBS,烯丙基)-Rink酰胺树脂RGO99：LCMS(含有0.1％甲酸的30-95％MeOH在含有0.1％甲酸的水中经10分钟)Rt＝5.73分钟。C46H57N10O10S+[M-2Boc+H]+的ESI-MS m/z：计算值941.4，实测值941.4。
Boc-Ala-L-Pra-Ala-Trp(Boc)-D-Phe-Lys(o-NBS,烯丙基)-Rink酰胺树脂RGO100：LCMS(含有0.1％甲酸的30-95％MeOH在含有0.1％甲酸的水中经10分钟)Rt＝5.77分钟。C46H57N10O10S+[M-2Boc+H]+的ESI-MS m/z：计算值941.4，实测值941.4。
Boc-Ala-D-Pra-D-Trp(Boc)-Ala-Trp-D-Phe-Lys(o-NBS,烯丙基)-Rink酰胺树脂RGO65：LCMS(含有0.1％甲酸的30-95％MeOH在含有0.1％甲酸的水中经10分钟)Rt＝6.48分钟。C57H67N12O11S+[M-3Boc+H]+的ESI-MS m/z：计算值1127.5，实测值1127.5。
Boc-Ala-L-Pra-D-Trp(Boc)-Ala-Trp-D-Phe-Lys(o-NBS,烯丙基)-Rink酰胺树脂RGO66：LCMS(含有0.1％甲酸的30-95％MeOH在含有0.1％甲酸的水中经10分钟)Rt＝6.66分钟。C57H67N12O11S+[M-3Boc+H]+的ESI-MS m/z：计算值1127.5，实测值1127.5。
Boc-Ala-D-Pra-Ala-Trp(Boc)-D-Phe-Lys(烯丙基)-Rink酰胺树脂RGO104：将o-NBS保护的六肽RGO99(～600mg，0.156mmol)在装有TeflonTM过滤器的注射器中在DMF(5mL)中溶胀并用DBU(210μL，1.40mmol)和2-巯基乙醇(50μL，0.71mmol)处理。将注射器中的混合物摇动1小时。过滤树脂，并依次用DMF(×3)，MeOH(×3)，THF(×3)和CH2Cl2(×3)洗涤。通过LCMS检查裂解的树脂样品(5mg)显示了完全去除o-NBS：LCMS(含有0.1％甲酸的30-95％MeOH在含有0.1％甲酸的水中经10分钟)Rt＝1.50分钟。C40H54N9O6 +[M-2Boc+H]+的ESI-MS m/z：计算值756.4，实测值756.4。
Boc-Ala-D-Pra-Ala-Trp(Boc)-D-Phe-Lys(烯丙基)-Rink酰胺树脂RGO105：将o-NBS保护的六肽RGO100(～600mg，0.14mmol)在装有TeflonTM过滤器的注射器中在DMF(5mL)中溶胀并用DBU(210μL，1.40mmol)和2-巯基乙醇(50μL，0.71mmol)处理。将注射器中的混合物摇动1小时。过滤树脂，并依次用DMF(×3)，MeOH(×3)，THF(×3)和CH2Cl2(×3)洗涤。通过LCMS检查裂解的树脂样品(5mg)显示了完全去除o-NBS：LCMS(含有0.1％甲酸的30-95％MeOH在含有0.1％甲酸的水中经10分钟)Rt＝1.51分钟。C40H54N9O6 +[M-2Boc+H]+的ESI-MS m/z：计算值756.4，实测值756.4。
Boc-Ala-D-Pra-D-Trp(Boc)-Ala-Trp(Boc)-D-Phe-Lys(烯丙基)-Rink酰胺树脂RGO69：将o-NBS保护的七肽RGO65(～300mg，0.10mmol)在装有TeflonTM过滤器的注射器中在DMF(6mL)中溶胀并用DBU(150μL，1.00mmol)和2-巯基乙醇(35μL，0.50mmol)处理。将注射器中的混合物摇动1小时。过滤树脂，并依次用DMF(×3)，MeOH(×3)，THF(×3)和CH2Cl2(×3)洗涤。通过LCMS检查裂解的树脂样品(5mg)显示了完全去除o-NBS：LCMS(含有0.1％甲酸的20-80％MeOH在含有0.1％甲酸的水中经10分钟)Rt＝4.79分钟。C51H64N11O7 +[M-3Boc+H]+的ESI-MS m/z：计算值942.5，实测值942.5。
Boc-Ala-D-Pra-D-Trp(Boc)-Ala-Trp(Boc)-D-Phe-Lys(烯丙基)-Rink酰胺树脂RGO70：将o-NBS保护的七肽RGO66(～300mg，0.09mmol)在装有TeflonTM过滤器的注射器中在DMF(6mL)中溶胀并用DBU(130μL，0.87mmol)和2-巯基乙醇(30μL，0.43mmol)处理。将注射器中的混合物摇动1小时。过滤树脂，并依次用DMF(×3)，MeOH(×3)，THF(×3)和CH2Cl2(×3)洗涤。通过LCMS检查裂解的树脂样品(5mg)显示了完全去除o-NBS：LCMS(含有0.1％甲酸的20-80％MeOH在含有0.1％甲酸的水中经10分钟)Rt＝5.05分钟。C51H64N11O7 +[M-3Boc+H]+的ESI-MS m/z：计算值942.5，实测值942.5。
环肽MPE-110：将六肽树脂RGO104(～600mg，0.156mmol)在装有TeflonTM过滤器和塞子的注射器管中在DMSO(6mL)中溶胀30分钟，用CuI(5.0mg，0.03mmol)和甲醛水溶液(70μL，0.94mmol，37％在H2O中)处理，在自动振荡器上振荡30小时，并过滤。过滤后，依次用AcOH/H2O/DMF(5：15：80，v/v/v，×3)，DMF(×3)，THF(×3)，MeOH(×3)和DCM(×3)洗涤树脂。通过LCMS检查裂解的树脂样品(5mg)显示了完全转化，观察到具有与环状六肽MPE-110一致的分子离子的峰：C41H54N9O6 +[M+H]+的MS m/z：计算值768.4，实测值768.4。
在室温下使用新制备的TFA/H2O/TES溶液(95：2.5：2.5，v/v/v，5mL)将树脂结合的环肽MPE-110脱保护并从载体裂解2小时。过滤树脂并用TFA(5mL)冲洗。浓缩滤液和冲洗液直至粗油持续存在，通过加入冷乙醚(10mL)从中获得沉淀物。离心(1200rpm，10分钟)后，除去上清液，将粗肽沉淀物溶于MeOH水溶液(10％v/v)中并冷冻干燥，然后纯化。通过制备型HPLC纯化得到的浅棕色蓬松物质，以得到环状五肽MPE-110(2.0mg，2％)，为白色蓬松物质。
环肽MPE-110的LCMS分析使用以下的线性梯度进行：a)含有0.1％甲酸的10-90％MeOH在H2O(0.1％甲酸)中经10分钟，然后在10％MeOH(0.1％甲酸)中5分钟，Rt＝4.24分钟；b)含有0.1％甲酸的10-90％MeCN在含有0.1％甲酸的H2O中经10分钟，然后在10％MeCN(0.1％甲酸)中5分钟，Rt＝1.70分钟；C41H54N9O6 +[M+H]+的HRMS m/z：计算值768.4192，实测值768.4176。
环肽MPE-111：将六肽树脂RGO105(～600mg，0.14mmol)在装有TeflonTM过滤器和塞子的注射器管中在DMSO(6mL)中溶胀30分钟，用CuI(5.0mg，0.03mmol)和甲醛水溶液(60μL，0.84mmol，37％在H2O中)处理，在自动振荡器上振荡30小时，并过滤。过滤后，依次用AcOH/H2O/DMF(5：15：80，v/v/v，×3)，DMF(×3)，THF(×3)，MeOH(×3)和DCM(×3)洗涤树脂。通过LCMS检查裂解的树脂样品(5mg)显示了完全转化，观察到具有与环状六肽MPE-111一致的分子离子的峰：C41H54N9O6 +[M+H]+的MS m/z：计算值768.4，实测值768.4。
在室温下使用新制备的TFA/H2O/TES溶液(95：2.5：2.5，v/v/v，5mL)将树脂结合的环肽MPE-111脱保护并从载体裂解2小时。过滤树脂并用TFA(5mL)冲洗。浓缩滤液和冲洗液直至粗油持续存在，通过加入冷乙醚(10mL)从中获得沉淀物。离心(1200rpm，10分钟)后，除去上清液，将粗肽沉淀物溶于MeOH水溶液(10％v/v)中并冷冻干燥，然后纯化。通过制备型HPLC纯化得到的浅棕色蓬松物质，以得到环状六肽MPE-111(2.0mg，2％)，为白色蓬松物质。
环肽MPE-111的LCMS分析使用以下的线性梯度进行：a)含有0.1％甲酸的10-90％MeOH在H2O(0.1％甲酸)中经10分钟，然后在10％MeOH(0.1％甲酸)中5分钟，Rt＝4.50分钟；b)含有0.1％甲酸的10-90％MeCN在含有0.1％甲酸的H2O中经10分钟，然后在10％MeCN(0.1％甲酸)中5分钟，Rt＝2.03分钟；C41H54N9O6 +[M+H]+的HRMS m/z：计算值768.4192，实测值768.4172。
环肽MPE-074：将七肽树脂RGO69(～300mg，0.10mmol)在装有TeflonTM过滤器和塞子的注射器管中在DMSO(5mL)中溶胀30分钟，用CuI(4.0mg，0.02mmol)和甲醛水溶液(50μL，0.69mmol，37％在H2O中)处理，在自动振荡器上振荡29小时，并过滤。过滤后，依次用AcOH/H2O/DMF(5：15：80，v/v/v，×3)，DMF(×3)，THF(×3)，MeOH(×3)和DCM(×3)洗涤树脂。通过LCMS检查裂解的树脂样品(5mg)显示了完全转化，观察到具有与环状七肽MPE-074一致的分子离子的峰：C52H63N11NaO7 +[M+Na]+的MS m/z：计算值976.5，实测值976.4。
在室温下使用新制备的TFA/H2O/TES溶液(95：2.5：2.5，v/v/v，5mL)将树脂结合的环肽MPE-074脱保护并从载体裂解2小时。过滤树脂并用TFA(5mL)冲洗。浓缩滤液和冲洗液直至粗油持续存在，通过加入冷乙醚(10mL)从中获得沉淀物。离心(1200rpm，10分钟)后，除去上清液，将粗肽沉淀物溶于MeOH水溶液(10％v/v)中并冷冻干燥，然后纯化。通过制备型HPLC纯化得到的浅棕色蓬松物质，以得到环状七肽MPE-074(0.7mg，1％)，为白色蓬松物质。
环肽MPE-074的LCMS分析使用以下的线性梯度进行：a)含有0.1％甲酸的10-90％MeOH在H2O(0.1％甲酸)中经10分钟，然后在10％MeOH(0.1％甲酸)中5分钟，Rt＝1.72分钟；b)含有0.1％甲酸的10-90％MeCN在含有0.1％甲酸的H2O中经10分钟，然后在10％MeCN(0.1％甲酸)中5分钟，Rt＝4.24分钟；C52H63N11NaO7 +[M+Na]+的HRMS m/z：计算值976.4804，实测值976.4817。
环肽MPE-075：将七肽树脂RGO69(～300mg，0.10mmol)在装有TeflonTM过滤器和塞子的注射器管中在DMSO(5mL)中溶胀30分钟，用CuI(3.0mg，0.02mmol)和甲醛水溶液(50μL，0.69mmol，37％在H2O中)处理，在自动振荡器上振荡29小时，并过滤。过滤后，依次用AcOH/H2O/DMF(5：15：80，v/v/v，×3)，DMF(×3)，THF(×3)，MeOH(×3)和DCM(×3)洗涤树脂。通过LCMS检查裂解的树脂样品(5mg)显示了完全转化，观察到具有与环状七肽MPE-075一致的分子离子的峰：C52H64N11O7 +[M+H]+的MS m/z：计算值954.5，实测值954.5。
在室温下使用新制备的TFA/H2O/TES溶液(95：2.5：2.5，v/v/v，5mL)将树脂结合的环肽MPE-075脱保护并从载体裂解2小时。过滤树脂并用TFA(5mL)冲洗。浓缩滤液和冲洗液直至粗油持续存在，通过加入冷乙醚(10mL)从中获得沉淀物。离心(1200rpm，10分钟)后，除去上清液，将粗肽沉淀物溶于MeOH水溶液(10％v/v)中并冷冻干燥，然后纯化。通过制备型HPLC纯化得到的浅棕色蓬松物质，以得到环状七肽MPE-075(1.5mg，2％)，为白色蓬松物质。
环肽MPE-075的LCMS分析使用以下的线性梯度进行：a)含有0.1％甲酸的10-90％MeOH在H2O(0.1％甲酸)中经10分钟，然后在10％MeOH(0.1％甲酸)中5分钟，Rt＝1.72分钟；b)含有0.1％甲酸的10-90％MeCN在含有0.1％甲酸的H2O中经10分钟，然后在10％MeCN(0.1％甲酸)中5分钟，Rt＝4.47分钟；C52H64N11O7 +[M+H]+的HRMS m/z：计算值954.4985，实测值954.4973。
鸟氨酸作为AA1
Fmoc-Orn(o-NBS)-Rink酰胺树脂RGO3：将Rink酰胺树脂(2.51g)置于装有TeflonTM过滤器的注射器中。通过用20％哌啶的DMF溶液处理树脂30分钟以进行Fmoc基团去除。过滤树脂，并依次用DMF(×3)，MeOH(×3)和CH2Cl2(×3)洗涤。将Fmoc-Orn(o-NBS)-OH(1.33g，2.46mmol)溶解于DMF(20mL)中，用DIC(0.7mL，4.52mmol)和HOBt(611mg，4.52mmol)处理并搅拌3分钟，然后转移到含有溶胀树脂的注射器中并将混合物摇动14小时。过滤树脂，并依次用DMF(×3)，MeOH(×3)和CH2Cl2(×3)洗涤。干燥树脂，并测量负载量为0.187mmol/g树脂。
Fmoc-Orn(o-NBS,烯丙基)-Rink酰胺树脂RGO4：将真空干燥的Fmoc-Orn(o-NBS)-树脂(0.362mmol)置于装有TeflonTM过滤器的注射器中，悬浮在THF(干燥，20mL)中并依次用烯丙醇(250μL，3.68mmol)的THF(干燥，1mL)溶液，PPh3(482mg，1.84mmol)的THF(干燥，2mL)溶液和DIAD(360μL，1.83mmol)的THF(干燥，1mL)溶液处理。将注射器中的树脂混合物摇动90分钟。过滤树脂，并依次用DMF(×3)，MeOH(×3)，THF(×3)和CH2Cl2(×3)洗涤。通过LCMS检查裂解的树脂样品(5mg)显示了完全烯丙基化：LCMS(含有0.1％甲酸的30-95％MeOH在含有0.1％甲酸的水中经10分钟)Rt＝8.47分钟。C29H31N4O7S+[M+H]+的ESI-MS m/z：计算值579.2，实测值579.2。
Fmoc-D-Trp(Boc)-Ala-Trp(Boc)-D-Phe-Orn(o-NBS,烯丙基)-Rink酰胺树脂RGO22：LCMS(含有0.1％甲酸的30-95％MeOH在含有0.1甲酸％的水中经10分钟)Rt＝6.13分钟。C48H55N10O9S+[M-Fmoc-2Boc+H]+的ESI-MS m/z：计算值947.4，实测值947.3。
Fmoc-azaPra-D-Trp(Boc)-Ala-Trp(Boc)-D-Phe-Orn(o-NBS,烯丙基)-Rink酰胺树脂RGO79：N'-炔丙基-芴甲基肼基甲酸酯(248mg，0.849mmol，通过芴甲基肼基甲酸酯与炔丙基溴的烷基化作为-N(R10)-如下所述制备)在氩气氛下溶解在CH2Cl2(干燥，40mL)中。将溶液冷却至0℃，用20％光气的甲苯溶液(1mL，1.87mmol)处理，温热至室温，搅拌50分钟，并通过旋转蒸发除去挥发物。将残余物重新溶解在CH2Cl2(10mL)中，并通过旋转蒸发再次除去挥发物。将得到的白色固体溶解在CH2Cl2(干燥，7mL)中，并在装有TeflonTM过滤器的注射器中加入到Fmoc-脱保护的五肽RGO22中。将注射器中的混合物摇动28小时。过滤树脂，并依次用DMF(×3)，MeOH(×3)，THF(×3)和CH2Cl2(×3)洗涤。通过LCMS检查裂解的树脂样品(5mg)显示了完全偶联：LCMS(含有0.1％甲酸的30-95％MeOH在含有0.1％甲酸的水中经10分钟)Rt＝8.26分钟。C52H59N12O10S+[M-Fmoc-2Boc+H]+的ESI-MS m/z：计算值1043.4，实测值1043.3。
Boc-Ala-azaPra-D-Trp(Boc)-Ala-Trp(Boc)-D-Phe-Orn(o-NBS,烯丙基)-Rink酰胺RGO29：通过使用原位产生的氨基酸对称酸酐进行氨基脲RGO79的偶联(J.Zhang,C.Proulx,A.Tomberg,W.D.Lubell,Org.Lett.2013,16,298–301)。对氨基脲RGO79重复该过程两次。通过LCMS检查裂解的树脂样品(5mg)显示了完全偶联：LCMS(含有0.1％甲酸的30-95％MeOH在含有0.1％甲酸的水中经10分钟)Rt＝6.39分钟。C55H64N13O11S+[M-3Boc+H]+的ESI-MS m/z：计算值1114.5，实测值1114.4。
Boc-Ala-azaPra-D-Trp(Boc)-Ala-Trp(Boc)-D-Phe-Orn(烯丙基)-Rink酰胺RGO30：将装有TeflonTM过滤器的注射器中的o-NBS保护的七肽RGO29(～1g，0.2mmol)在DMF(6mL)和DBU(300μL，2.01mmol)中溶胀，并用2-巯基乙醇(70μL，1.00mmol)处理。将注射器中的混合物摇动1小时。过滤树脂，并依次用DMF(×3)，MeOH(×3)，THF(×3)和CH2Cl2(×3)洗涤。通过LCMS检查裂解的树脂样品(5mg)显示了完全去除o-NBS：LCMS(含有0.1％甲酸的30-95％MeOH在含有0.1％甲酸的水中经10分钟)Rt＝4.49分钟。C49H61N12O7 +[M-3Boc+2Na]2+的ESI-MS m/z：计算值487.2，实测值487.3。
环状氮杂肽MPE-048：将氮杂七肽树脂RGO30(～1g，0.2mmol)在装有TeflonTM过滤器和塞子的注射器管中在DMSO(8mL)中溶胀30分钟，用CuI(7.0mg，0.04mmol)和甲醛水溶液(90μL，1.2mmol，37％在H2O中)处理，在自动振荡器上振荡31小时，并过滤。过滤后，依次用AcOH/H2O/DMF(5：15：80，v/v/v，×3)，DMF(×3)，THF(×3)，MeOH(×3)和DCM(×3)洗涤树脂。通过LCMS检查裂解的树脂样品(5mg)显示了完全转化，观察到具有与环状氮杂七肽MPE-048一致的分子离子的峰：C50H61N12O7 +[M+H]+的MS m/z：计算值954.5，实测值954.5。
在室温下使用新制备的TFA/H2O/TES溶液(95：2.5：2.5，v/v/v，5mL)将树脂结合的环状氮杂肽MPE-048脱保护并从载体裂解2小时。过滤树脂并用TFA(5mL)冲洗。浓缩滤液和冲洗液直至粗油持续存在，通过加入冷乙醚(10mL)从中获得沉淀物。离心(1200rpm，10分钟)后，除去上清液，将粗肽沉淀物溶于MeOH水溶液(10％v/v)中并冷冻干燥，然后纯化。通过制备型HPLC纯化得到的浅棕色蓬松物质，以得到环状氮杂七肽MPE-048(1.3mg，1％)，为白色蓬松物质。
环肽MPE-048的LCMS分析使用以下的线性梯度进行：a)含有0.1％甲酸的10-90％MeOH在H2O(0.1％甲酸)中经10分钟，然后在10％MeOH(0.1％甲酸)中5分钟，Rt＝1.80分钟；b)含有0.1％甲酸的10-90％MeCN在含有0.1％甲酸的H2O中经10分钟，然后在10％MeCN(0.1％甲酸)中5分钟，Rt＝4.30分钟；C50H60N12O7Na+[M+Na]+的HRMS m/z：计算值963.4600，实测值963.4573。
环状类似物MPE-189，MPE-201，MPE-202和MPE-203的合成
肼基甲酸酯2和3的合成
在0℃下，向充分搅拌的芴甲基肼基甲酸酯(1，1当量，2.8g，11mmol，根据参考文献1制备)和DIEA(2当量，2.85g，3.64mL，22mmol)的无水DMF(280mL)溶液中，用套管在30分钟内逐滴加入3-溴丙炔(0.9当量，1.47g，1.07mL，9.91mmol，80wt％在甲苯中)的无水DMF(10mL)溶液。移去冷却浴。将反应混合物温热至室温并搅拌16小时。将挥发物蒸发。将残余物在EtOAc和盐水之间分配。分离水层并用EtOAc萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。通过硅胶色谱纯化残余物，用40％EtOAc的己烷溶液作为溶剂体系，以得到N'-炔丙基-芴甲基肼基甲酸酯3(1.8g，62％)，为白色固体：Rf 0.42(60％EtOAc)；熔点148-149℃；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.82(s,1H),7.89(d,J＝7.5Hz,2H),7.70(d,J＝7.4Hz,2H),7.50–7.43(m,2H),7.37–7.28(m,2H),4.89(q,J＝4.6Hz,1H),4.29(d,J＝6.9Hz,2H),4.22(t,J＝6.1Hz,1H),3.48(s,2H),3.09(t,J＝2.3Hz,1H)；13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ156.7,143.8,140.7,127.7(2C),127.1(2C),125.3(2C),120.1(2C),81.2,74.2,65.6(2C),46.6,39.6(2C)。IR(neat)vmax/cm-1 3304，3290，2947，1699，1561，1489，1448，1265，1159，1021；C18H17N2O2[M+H]+的HRMS m/z计算值293.1285；实测值293.1275。
N'-4-甲氧基苄基-芴甲基肼基甲酸酯(2)
根据肼基甲酸酯合成的还原胺化程序的改进制备N'-4-甲氧基苄基-芴甲基肼基甲酸酯2(Boeglin,D.；Lubell,W.D."Aza-Amino Acid Scanning of Secondary StructureSuited for Solid-Phase Peptide Synthesis with Fmoc Chemistry and Aza-AminoAcids with Heteroatomic Side-Chains"J.Comb.Chem.2005,7(6),864-878)。将芴甲基肼基甲酸酯(1)在EtOH(0.2M)中的悬浮液用100mol％的4-甲氧基苯甲醛处理，加热回流2小时，并真空浓缩。将得到的亚甲基肼基甲酸酯溶解在THF(0.2M)中，依次用110mol％AcOH和110mol％NaBH3CN处理，搅拌1小时，如果需要，用另外的NaBH3CN处理直至通过TLC观察到反应完成。将混合物真空浓缩。将残余物溶于EtOAc中，用KHSO4水溶液(1M)和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并在减压下浓缩，以得到白色固体，将其溶于EtOH并加热回流1小时。减压浓缩混合物，以得到残余物，通过快速色谱纯化，以得到肼基甲酸酯2(76％)，为白色固体：Rf0.53(30％EtOAc)；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.78(d,J＝7.5Hz,2H),7.58(d,J＝7.6Hz,2H),7.45–7.27(m,6H),6.87(d,J＝7.2,2H),6.35(bs,1H),4.48(bs,2H),4.24(t,J＝2.3Hz,1H),3.94(bs,2H),3.81(s,3H)；13C NMR(75MHz,CDCl3)δ159.2,157.2,143.7,141.4,130.3,129.4,127.8,127.1,125.0,120.1,113.9,66.9,55.4,47.2；C23H22N2O3[M+H]+的HRMS m/z计算值375.1703；实测值375.1697。
使用N-(Fmoc)氮杂-氨基酸氯化物合成环状氮杂肽MPE-298，MPE-191和MPE-192
针对上述RG08描述了Fmoc-Lys(o-NBS,烯丙基)-Rink酰胺树脂方案。
Fmoc-Lys(o-NBS,烯丙基)-Rink酰胺树脂7a：7a的裂解树脂样品的LCMS分析显示了完全烷基化；LCMS(含有0.1％FA的10-95％MeOH在含有0.1％FA的水中经10分钟)；Rt＝8.67分钟；C30H32N4O7S[M+H]+的ESI-MS m/z计算值593.2，实测值593.2。
Fmoc-Lys(o-NBS,丙基)-Rink酰胺树脂7b：7b的裂解树脂样品的LCMS分析显示了完全烷基化；LCMS(含有0.1％FA的10-95％MeOH在含有0.1％FA的水中经10分钟)；Rt＝8.74分钟；C30H34N4O7S[M+H]+的ESI-MS m/z计算值595.2，实测值595.2。
Fmoc-Lys(o-NBS,环丙基甲基)-Rink酰胺树脂7c：7c的裂解树脂样品的LCMS分析显示了完全烷基化；LCMS(含有0.1％FA的10-95％MeOH在含有0.1％FA的水中经10分钟)；Rt＝10.46分钟；C31H34N4O7S[M+H]+的ESI-MS m/z计算值607.2，实测值607.2。
用于将N-(Fmoc)氮杂-氨基酸氯化物偶联至树脂结合肽的代表性方案。
在氩气和0℃下，向N'-炔丙基-芴甲基肼基甲酸酯(2，2.97mmol)的无水DCM(30mL)溶液中逐滴加入光气的甲苯(3.0mL，5.93mmol，1.93M)溶液。在完全消耗原料2(通常约15分钟，如TLC所示)后，将反应混合物真空浓缩，以得到相应的Fmoc-氮杂-氨基酸氯化物4，其不经进一步纯化而使用。将N-(Fmoc)氮杂-氨基酸氯化物悬浮在无水DCM(10mL)中，并加入到含有溶胀树脂8a的注射器管中，然后加入DIEA(5.93mmol，1.03mL)。将树脂混合物振荡16小时，过滤，并依次用DMF(3×10mL)，MeOH(3×10mL)，THF(3×10mL)和DCM(3×10mL)洗涤。通过LCMS检查裂解的树脂样品9a(5mg)显示了完全偶联；LCMS(含有0.1％FA的30-95％MeOH在含有0.1％FA的水中经10分钟)Rt＝9.66分钟；C68H70N12O12S[M+H]+的ESI-MS m/z计算值1279.5，实测值1279.5。
Fmoc-aza-Tyr(Me)-D-Phe-Lys(o-NBS,烯丙基)-Rink酰胺树脂16如使用N'-甲氧基苄基-芴甲基肼基甲酸酯2的使用N-(Fmoc)氮杂-氨基酸氯化物偶联的代表性方案所述制备：16的裂解树脂样品的LCMS显示了完全偶联；LCMS(含有0.1％FA的30-95％MeOH在含有0.1％FA的水中经10分钟)Rt＝9.48分钟；C48H51N7O10S[M+H]+的ESI-MS m/z计算值918.3，实测值918.3。
根据上述方法I和II进行包括o-NBS基团去除，氨基脲氨基酰化和A3-大环化的所有其它合成步骤，以得到最终的肽MPE-189。
使用方法III合成环状类似物MPE-189
环状类似物MPE-201，MPE-202，MPE-203的合成
Boc-Gly-aza-Pra-D-Trp(Boc)-Ala-Trp(Boc)-D-Phe-Lys(o-NBS,烯丙基)-Rink酰胺树脂22a：22a的裂解树脂样品的LCMS分析显示了完全耦合；LCMS(含有0.1％FA的30-95％MeOH在含有0.1％FA的水中经10分钟)Rt＝8.58分钟；C55H63N13O11S[M+H]+的ESI-MS m/z计算值1114.4，实测值1114.4。
Boc-D-Ala-aza-Pra-D-Trp(Boc)-Ala-Trp(Boc)-D-Phe-Lys(o-NBS,烯丙基)-Rink酰胺树脂22b：22b的裂解树脂样品的LCMS分析显示了完全耦合；LCMS(含有0.1％FA的30-95％MeOH在含有0.1％FA的水中经10分钟)Rt＝8.64分钟；C56H65N13O11S[M+H]+的ESI-MSm/z计算值1128.4，实测值1128.4。
Boc-Val-aza-Pra-D-Trp(Boc)-Ala-Trp(Boc)-D-Phe-Lys(o-NBS,烯丙基)-Rink酰胺树脂22c：22c的裂解树脂样品的LCMS分析显示了完全耦合；LCMS(含有0.1％FA的30-95％MeOH在含有0.1％FA的水中经10分钟)Rt＝8.73分钟；C58H69N13O11S[M+H]+的ESI-MS m/z计算值1156.4，实测值1156.4。
饱和环状氮杂肽(MPE-193)
将碳载钯(10wt％负载，1mg，0.005mmol，100mol％)悬浮于肽MPE-298(5mg，0.005mmol)的EtOH(0.5mL)溶液中，置于氢气球中并搅拌3小时。通过LCMS分析反应混合物观察到MPE-298完全消失后，滤出Pd/C，蒸发挥发物，以得到残余物，然后通过反相HPLC纯化(线性梯度为含有0.1％FA的5-50％MeOH在含有0.1％FA的水中经10分钟)，以得到MPE-193(3.7mg，74％产率)。
环肽MPE-298，MPE-191，MPE-192，MPE-189，MPE-201，MPE-202，MPE-203和MPE-193 的LCMS分析
环状氮杂肽MPE-191的LCMS分析使用以下的线性梯度进行：a)含有0.1％FA的5-50％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经9分钟，然后在5％MeOH中5分钟，R.T＝8.01分钟；b)含有0.1％FA的5-50％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经9分钟，然后在5％MeCN中5分钟，Rt＝5.86分钟；C51H65N12O7[M+H]+的HRMS m/z计算值957.5094，实测值955.5100。
环状氮杂肽MPE-192的LCMS分析使用以下的线性梯度进行：a)含有0.1％FA的5-50％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经9分钟，然后在5％MeOH中5分钟，R.T＝8.12分钟；b)含有0.1％FA的5-50％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经9分钟，然后在5％MeCN中5分钟，Rt＝8.09分钟；C52H62N12O7[M+H]+的HRMS m/z计算值969.5094，实测值969.5057。
环状氮杂肽MPE-189的LCMS分析使用以下的线性梯度进行：a)含有0.1％FA的5-50％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经9分钟，然后在5％MeOH中5分钟，R.T＝7.83分钟；b)含有0.1％FA的5-50％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经9分钟，然后在5％MeCN中5分钟，Rt＝5.65分钟；C49H62N12O8[M+H]+的HRMS m/z计算值947.4886，实测值947.4893。
环状氮杂肽MPE-201的LCMS分析使用以下的线性梯度进行：a)含有0.1％FA的5-50％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经9分钟，然后在5％MeOH中5分钟，R.T＝8.01分钟；b)含有0.1％FA的5-50％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经9分钟，然后在5％MeCN中5分钟，Rt＝5.77分钟；C50H61N12O7[M+H]+的HRMS m/z计算值941.4781，实测值941.4758。
环状氮杂肽MPE-202的LCMS分析使用以下的线性梯度进行：a)含有0.1％FA的5-50％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经9分钟，然后在5％MeOH中5分钟，R.T＝7.93分钟；b)含有0.1％FA的5-50％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经9分钟，然后在5％MeCN中5分钟，Rt＝5.75分钟；C51H63N12O7[M+H]+的HRMS m/z计算值955.4937，实测值955.4924。
环状氮杂肽MPE-203的LCMS分析使用以下的线性梯度进行：a)含有0.1％FA的5-50％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经9分钟，然后在5％MeOH中5分钟，R.T＝8.45分钟；b)含有0.1％FA的5-50％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经9分钟，然后在5％MeCN中5分钟，Rt＝5.95分钟；C53H66N12O7[M+H]+的HRMS m/z计算值983.5250，实测值983.5213。
环状氮杂肽MPE-193的LCMS分析使用以下的线性梯度进行：a)含有0.1％FA的5-50％MeOH在含有0.1％FA的H2O中经9分钟，然后在5％MeOH中5分钟，R.T＝8.09分钟；b)含有0.1％FA的5-50％MeCN在含有0.1％FA的H2O中经9分钟，然后在5％MeCN中5分钟，Rt＝5.83分钟；C51H69N12O7[M+H]+的HRMS m/z计算值961.5407，实测值961.5391。
表2：环肽GHRP-6类似物MPE-298，MPE-191，MPE-192，MPE-189，MPE-201，MPE-202，MPE-203和MPE-193的产率和纯度
环状类似物 分离产率(％) 纯度<sup>[a]</sup>(％) HRMS(M+H)<sup>+</sup>
MPE-298 2.2 99 955.4937(955.4924)
MPE-191 1.9 99 957.5094(955.5100)
MPE-192 2.1 99 969.5094(969.5057)
MPE-189 2.8 95 947.4886(947.4893)
MPE-201 3.1 99 941.4781(941.4758)
MPE-202 2.4 99 955.4937(955.4924)
MPE-203 1 99 983.5250(983.5213)
MPE-193 74 98 961.5407(961.5391)
[a]通过如上所述的LCMS分析确定。
环状氮杂磺酰基肽MPE-400的合成
环状氮杂硫肽MPE-400通过以下方式制备：特征在于将受保护的氮杂磺酰基三肽前体在溶液中组装，偶联至树脂结合的线性肽序列，去除o-NBS基团，A3-大环化和树脂裂解(方案10)
方案10环状氮杂磺酰基肽MPE-400的合成
N'-炔丙基-叔丁基肼基甲酸酯(1)：
将肼基甲酸叔丁酯(1当量，2g，15.1mmol)和粉末状K2CO3(1.5当量，3.14g，22.7mmol)溶于30mL 9：1THF：DMF中，冷却至0℃，并用炔丙基溴(0.8当量，1.3mL，12.1mmol，80％在甲苯中)的THF(10mL)溶液缓慢处理。移除冰浴。将反应混合物温热至室温并搅拌过夜。将反应混合物用H2O和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在减压下浓缩得到残余物，将其通过硅胶色谱纯化，用30-40％EtOAc的己烷溶液洗脱。蒸发收集的级分，得到肼基甲酸酯1(1.91g，6.54mmol，54％)，为白色固体：mp 54-55℃；Rf＝0.24(EtOAc：己烷1：4)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ6.20(s,1H),4.07(s,1H),3.62(d,J＝2.5Hz,2H),2.24(t,J＝2.5Hz,1H),1.46(s,9H)；13C NMR(125MHz,CD3OD)δ156.5,81.0,80.1,72.5,41.4,28.5(3C)；C8H15N2O2[M+H]+的HRMS m/z计算值171.1128；实测值171.1122。
N'-炔丙基-N'-Fmoc-叔丁基肼基甲酸酯(2)：
在-40℃下搅拌N'-炔丙基-叔丁基肼基甲酸酯(1，1当量，0.57g，3.35mmol)和DIEA(1.5当量，0.83mL，5.02mmol)的CH2Cl2(40mL)溶液。用9-芴甲基氯甲酸酯(1.1当量，0.95g，3.68mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液缓慢处理。移除冷却浴。将反应混合物温热至室温，搅拌过夜，用H2O和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，减压浓缩得到残余物，通过硅胶色谱纯化，用10-15％EtOAc的己烷溶液洗脱。蒸发收集的级分，得到肼基甲酸酯2(1.24g，3.15mmol，94％)，为白色固体：mp 93-94℃Rf＝0.4(EtOAc：己烷1：4)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.77(d,J＝7.6Hz,2H),7.62(d,J＝7.5Hz,2H),7.41(t,J＝7.5Hz,2H),7.34–7.29(m,2H),6.63(s,1H),4.41(brs,4H),4.26(brs,1H),2.30(s,1H),1.50(s,9H)；13C NMR(125MHz,CDCl3)δ156.7,154.4,143.7(2C),141.4(2C),128.0(2C),127.3(2C),125.4(2C),120.2(2C),82.2,78.1,72.9,69.1,47.1,39.9,28.3(3C)；C23H25N2O4[M+Na]+的HRMS m/z计算值415.1628；实测值415.1621。
N-炔丙基-N'-Fmoc-芴甲基肼基甲酸酯(3)：
将无水HCl气体鼓入肼基甲酸叔丁酯2(1当量，1.1g，2.8mmol)的搅拌溶液中。2小时后，通过TLC观察到原料的完全消耗。将所得溶液减压浓缩，以得到纯的芴甲基肼基甲酸酯3(1.09g，2.77mmol，99％)，为白色固体，其不经进一步纯化而使用。mp 176℃；1H NMR(500MHz,CD3OD)δ7.82(d,J＝7.6Hz,2H),7.66(dd,J＝7.5,0.8Hz,2H),7.45–7.39(m,2H),7.36–7.31(m,2H),4.64(d,J＝6.3Hz,2H),4.37–4.31(m,3H),3.03(t,J＝2.5Hz,1H)；13CNMR(125MHz,CD3OD)δ155.7,144.5(2C),142.7(2C),129.1(2C),128.3(2C),126.0(2C),121.1(2C),77.1,76.2,70.9,48.0,39.7；C18H17N2O2[M+H]+的HRMS m/z计算值293.1285；实测值293.1274。
芴甲基N-(Boc)-丙氨酰基-氮杂-炔丙基甘氨酸酯(4)：
将N-(Boc)-L-丙氨酸(1.1当量，0.513g，2.71mmol)的THF(10mL)溶液冷却至-15℃，依次用氯甲酸异丁酯(1.1当量，0.353mL，2.71mmol)和N-甲基吗啉(NMM，2当量，0.542mL，4.93mmol)处理，搅拌15分钟，并用肼基甲酸酯3(1当量，0.72g，2.46mmol)的THF溶液(15mL)和DIEA(1当量，0.407mL，2.46mmol)处理。在-15℃搅拌1小时后，在减压下除去挥发物，并通过硅胶色谱纯化残余物，用30-35％EtOAc的己烷溶液洗脱，以得到氮杂-二肽4(0.82g，1.77mmol，72％)，为白色固体：mp 78-79℃；Rf＝0.33(40％EtOAc的己烷溶液)；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ8.39(brs,1H),7.76(d,J＝7.5Hz,2H),7.57(s,2H),7.40(t,J＝7.4Hz,2H),7.34–7.27(m,2H),4.81(brs,1H),4.56–4.42(m,2H),4.37(s,2H),4.23(brs,2H),2.25(brs,1H),1.44(s,9H),1.31(brs,3H)；13C NMR(125MHz,CDCl3)δ180.1,156.0,143.7,143.6(2C),141.4(2C),128.0(2C),127.3(2C),125.2(2C),120.2(2C),80.9,77.7,73.2,68.5,48.5,47.1,39.4,28.5(3C),17.4；C26H30N3O5[M+H]+的HRMS m/z计算值464.2180；实测值464.2178。
N-(Boc)丙氨酸-N'-炔丙基-酰肼(5)：
将氮杂-二肽4(1当量，0.82g，1.77mmol)的MeCN(15mL)溶液用二乙胺(DEA，27.4当量，3.55g，5mL，48.5mmol)处理，并在室温下搅拌1.5小时。蒸发挥发物以得到残余物，通过硅胶快速色谱纯化，用含有2％三乙胺的60-80％EtOAc的己烷溶液梯度洗脱，以得到酰肼5(0.265g，1.1mmol，62％)，为白色固体：mp 75-76℃；Rf 0.21(含有2％三乙胺的40％EtOAc的己烷溶液)；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.96(s,1H),4.99(brs,1H),4.71(s,1H),4.16(s,1H),3.61(s,2H),2.23(t,J＝2.5Hz,1H),1.44(s,9H),1.37(d,J＝7.1Hz,3H)；13C NMR(125MHz,CDCl3)δ172.4,155.6,80.6,79.7,72.7,48.9,41.2,28.5(3C),18.2；C11H20N3O3[M+H]+的HRMS m/z计算值242.1499；实测值242.1494。
N-(Fmoc)-Nin-(Boc)-D-色氨酸2,4-二甲氧基苄酯(6)：
将N-(Fmoc)-Nin-(Boc)-D-色氨酸(1当量，4.5g，8.55mmol)，TBTU(1当量，2.74g，8.55mmol)和二异丙基乙胺(DIEA，2当量，2.82mL，17.1mmol)溶于DMF(20mL)中，在室温和氩气氛下搅拌30分钟，注入2,4-二甲氧基苄醇溶液(1.1当量，1.58g，9.4mmol，根据Feng,L.；Lv,K.；Liu,M.；Wang,S.；Zhao,J.；You,X.；Li,S.；Cao,J.；Guo,H.Eur.J.Med.Chem.2012,55,125-136制备)的DMF(5mL)溶液进行处理，并在室温下搅拌4小时。将反应混合物用EtOAc稀释，并用水(2×100mL)和盐水(2×100mL)洗涤。合并有机相，用Na2SO4干燥，过滤并蒸发至残余物，通过硅胶快速色谱纯化，用20％EtOAc的己烷溶液洗脱，以得到酯6(4.97g，7.35mmol，86％)，为白色固体：mp 67-68℃；Rf 0.29(20％EtOAc的己烷溶液)；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.11(brs,1H),7.76(d,J＝7.6Hz,2H),7.58–7.48(m,3H),7.44(s,1H),7.42–7.36(m,2H),7.33–7.26(m,3H),7.21(t,J＝7.3Hz,1H),7.11(d,J＝8.0Hz,1H),6.46–6.39(m,2H),5.44(d,J＝8.0Hz,1H),5.12(s,2H),4.78(dd,J＝13.6,5.4Hz,1H),4.40–4.28(m,2H),4.19(t,J＝7.3Hz,1H),3.80(s,3H),3.79(s,3H),3.33–3.20(m,2H),1.65(s,9H)；13C NMR(125MHz,CDCl3)δ171.7,161.7,159.2,155.8,149.7,144.0,143.9,141.4(2C),131.7(2C),127.8(2C),127.2(2C),125.3(2C),124.6(2C),124.5,124.4,122.8,120.1,119.0,115.8,115.4,115.1,104.2,98.7,83.8,67.3,63.4,55.5(2C),54.4,47.3,28.3(3C),28.0；C40H41N2O8[M+H]+的HRMS m/z计算值677.2857；实测值677.2859。
Nin-(Boc)-D-色氨酸2,4-二甲氧基苄酯(7)：
将酯6(1当量，4.2g，6.21mmol)溶解在MeCN(62mL)中，用二乙胺(18.3mL，334mmol)处理，在室温下搅拌2小时，并将溶液蒸发至残留物，通过硅胶快速色谱纯化，用含有2％三乙胺的40％EtOAc的己烷溶液洗脱，以得到胺7(2.48mg，5.46mmol，88％)，为油状物。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.12(s,1H),7.55(d,J＝7.6Hz,1H),7.47(s,1H),7.33–7.28(m,1H),7.25–7.20(m,1H),7.14(d,J＝8.1Hz,1H),6.47–6.43(m,2.3Hz,2H),5.12(s,2H),3.84(dd,J＝7.7,5.0Hz,1H),3.81(s,3H),3.81(s,3H),3.23–3.15(m,1H),3.01–2.94(m,1H),1.66(s,9H)；13C NMR(125MHz,CDCl3)δ175.3,161.5,159.2,149.7,135.6,131.6,130.6,124.5,124.3,122.6,119.1,116.4,116.2,115.4,104.1,98.7,83.6,62.6,55.53,55.50,54.7,30.5,28.3(3C)；C25H31N2O6[M+H]+的HRMS m/z计算值455.2177；实测值455.2172。
Nin-(Boc)-D-色氨酸2,4-二甲氧基苄酯的4-硝基苯磺酰胺(8)：
将4-硝基苯氯磺酸酯(2当量，2.3g，9.68mmol，根据Fettes,K.J.；Howard,N.；Hickman,D.T.；Adah,S.；Player,M.R.；Torrence,P.F.；Micklefield,J.J.Chem.Soc.,Perkin Trans.1 2002,485-495制备)的无水DCM(25mL)溶液在-78℃下用胺7(1当量，2.2g，4.84mmol)，4-硝基苯酚(3当量，2.02g，14.5mmol)和三乙胺(TEA，6当量，4.04mL，29mmol)的无水DCM(100mL)溶液逐滴处理，并搅拌1.5小时。移除冷却浴，使反应混合物在室温下温热并搅拌1小时。将反应混合物蒸发至残余物，通过快速色谱纯化，用40％Et2O的石油醚溶液洗脱，以得到被4-硝基苯酚污染的级分。将收集的级分蒸发，溶于DCM(25mL)中，用饱和NaHCO3(水溶液，3×25mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并蒸发，以得到磺酰胺8(1.08g，1.65mmol，34％)，为白色固体：mp 48-50℃；Rf 0.30(40％Et2O的石油醚溶液)；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.11–8.10(m,1H),8.10–8.09(m,1H),7.50(d,J＝7.7Hz,1H),7.45(s,1H),7.35–7.30(m,1H),7.26–7.18(m,3H),7.10(d,J＝8.0Hz,1H),6.92–6.88(m,1H),6.46–6.41(m,2H),5.63(d,J＝8.5Hz,1H),5.17–5.08(m,2H),4.59–4.53(m,1H),3.82(s,3H),3.79(s,3H),3.32–3.22(m,2H),1.67(s,9H)；13C NMR(125MHz,CDCl3)δ170.6,162.0,161.5,159.4,154.4,149.6,146.0,132.2,130.2,126.4,125.5,124.91,124.86,122.9,122.3,118.9,115.8,115.5,115.2,113.7,104.3,98.7,84.3,64.2,57.2,55.59,55.55,28.8,28.3(3C)。C31H33N3O11S[M+Na]+的HRMS m/z计算值678.1728；实测值678.1720。
N-(Boc)-丙氨酰基-氮杂-炔丙基硫酰基甘氨酰基-Nin-(Boc)-D-色氨酸2,4-二甲氧基苄酯(9)：
将酰肼5(1.2当量，0.2g，0.829mmol)加入到含有磺酰胺8(1当量，0.453g，0.691mmol)的二氯乙烷(4.5mL)溶液的微波容器中。将混合物用TEA(2当量，0.14g，0.192mL，1.38mmol)处理，此时溶液变为黄色。将容器密封并使用微波辐射加热至60℃达3小时。挥发物蒸发。通过硅胶快速色谱纯化残余物，用40-50％EtOAc的己烷溶液洗脱。将收集的级分蒸发至残余物，将其溶于DCM(25mL)中，用饱和NaHCO3(3×25mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并蒸发，以得到氮杂磺酰基三肽9(0.29g，0.383mmol，55％)，为白色固体：Rf 0.25(40％EtOAc的己烷溶液)；mp 79℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.30(s,1H),8.08(brs,1H),7.58(d,J＝7.7Hz,1H),7.45(s,1H),7.29(t,J＝7.3Hz,1H),7.22(t,J＝7.2Hz,1H),7.12(d,J＝7.8Hz,1H),6.46–6.41(m,2H),5.47(d,J＝7.0Hz,1H),5.08(d,J＝2.7Hz,2H),4.95(brs,1H),4.65–4.58(m,1H),4.32–4.24(m,1H),4.23–4.16(m,1H),4.16–4.08(m,1H),3.82(s,3H),3.80(s,3H),3.27(t,J＝4.5Hz,2H),2.32(t,J＝2.4Hz,1H),1.66(s,9H),1.42(s,9H),1.33(d,J＝7.1Hz,3H)；13C NMR(125MHz,CDCl3)δ171.8,171.6,161.7,159.2,149.7,131.9,130.7 126.3,124.8,124.6,122.8,119.4,115.8,115.5,115.3,114.4,104.3,98.7,83.8,81.0,76.4,75.0,63.9,56.4,55.5(2C),49.2,42.0,28.49,28.42(3C),28.35(3C),17.3；C36H48N5O11S[M+H]+的HRMS m/z计算值758.3066；实测值758.3061。
Ala-Trp-D-Phe-Lys(o-NBS,烯丙基)-NH-Rink树脂(11)：
将真空干燥的树脂10(1当量，4.26g，1.5mmol)在装有TeflonTM过滤器的注射器中悬浮在无水THF(42.6mL)中，置于氩气下，并依次用烯丙醇溶液(10当量，1.02mL，15mmol)的无水THF(14.2mL)溶液，PPh3(5当量，1.97g，7.5mmol)的无水THF(14.2mL)溶液和DIAD(5当量，1.49mL，7.5mmol)的THF(14.2mL)溶液处理。将树脂混合物在自动振荡器上振荡30分钟，并过滤，并依次用DMF(3次)，MeOH(3次)和DCM(3次)使用15秒搅拌连续洗涤。将树脂真空干燥。将0.5g树脂样品用20％哌啶的DMF(10mL)溶液处理，以得到树脂11。通过LCMS检查裂解的树脂样品(2-3mg)显示了完全烯丙基化：LCMS[含有0.1％甲酸(FA)的10-90％MeOH在水(0.1％FA)中经9分钟，然后10％MeOH(0.1％FA)在水(0.1％FA)中5分钟]Rt＝7.937分钟。C38H47N8O8S[M-Boc+H]+的HRMS m/z计算值775.32；实测值775.3。
N-(Boc)-Ala-氮杂磺酰基炔丙基甘氨酰基-D-Trp(Boc)-Ala-Trp-D-Phe-Lys(o-NBS,烯丙基)-NH-Rink树脂(13)：
将2,4-二甲氧基苄酯9(180mg，0.238mmol)用1％TFA的DCM(5mL)溶液在室温下处理1小时。蒸发挥发物，并将残余物用Et2O(5mL)处理，以得到沉淀物，将其过滤。蒸发滤液，以得到N-(Boc)丙氨酰基-氮杂磺酰基炔丙基甘氨酰基-D-Nin(Boc)色氨酸(12)。将树脂11(1当量，460mg，0.173mmol)在装有TeflonTM过滤器的注射器中的DMF(5mL)中溶胀。同时，将三肽12(1.2当量，126mg，0.208mmol)和HOBt(1.2当量，28.1mg，0.208mmol)的DMF(5mL)溶液搅拌5分钟，用DIC(1.2当量，32.4μL，0.208mmol)处理，搅拌5分钟，然后加入树脂中。将树脂混合物在室温下振荡18小时。将树脂过滤，依次用DMF(3次)，MeOH(3次)和DCM(3次)使用15秒搅拌连续洗涤并过滤，以得到树脂13。通过LCMS检查裂解的树脂样品(2-3mg)显示了偶联产物：LCMS[含有0.1％FA的50-90％MeOH在水(0.1％FA)中经8.5分钟，然后50％MeOH(0.1％FA)在水(0.1％FA)中5.5分钟]Rt＝6.251分钟。C55H66N13O12S[M–3Boc+H]+的HRMS m/z计算值1164.43；实测值1164.3。
N-(Boc)-Ala-氮杂磺酰基炔丙基甘氨酰基-D-Trp(Boc)-Ala-Trp-D-Phe-Lys(烯丙基)-NH-Rink树脂14：
在装有TeflonTM过滤器、塞子和旋塞阀的注射器管中，将氮杂三肽树脂13(1当量，300mg，0.0925mmol)在DMF(6mL)中溶胀30分钟，用DBU(10当量，138μL，0.925mmol)和2-巯基乙醇(5当量，32.5μL，0.462mmol)处理，在自动振荡器上振荡30分钟，并过滤。过滤后，依次用DMF(3次)，MeOH(3次)和DCM(3次)使用15秒搅拌连续洗涤和过滤树脂，以得到树脂14。通过LCMS检查裂解的树脂样品(2-3mg)显示了完全除去o-NBS基团：LCMS[10-90％MeOH(0.1％FA)在水(0.1％FA)中经10分钟，然后10％MeOH(0.1％FA)在水(0.1％FA)中5分钟]Rt＝7.464分钟。C49H63N13O8S[M-3Boc+H]+的HRMS m/z计算值979.45；实测值979.4。
环状氮杂磺酰基肽MPE-400：
在装有TeflonTM过滤器和塞子的注射器管中，将氮杂磺酰基肽树脂14(1当量，282mg，0.0925mmol)在DMSO(6mL)中溶胀30分钟，用CuI(0.2当量，3.52mg，0.0185mmol)和甲醛水溶液(6当量，41.6μL，0.555mmol)处理，在自动振荡器上振荡24小时，并过滤。过滤后，依次用AcOH/H2O/DMF(5：15：80，v/v/v，3×10mL)，THF(3×10mL)，MeOH(3×10mL)和DCM(3×10mL)洗涤树脂。通过LCMS检查裂解的树脂样品(2-3mg)显示了完全转化并且观察到具有与环状氮杂磺酰基肽MPE-400一致的分子离子的峰：LCMS[10-90％MeOH(0.1％FA)在水(0.1％FA)中经10分钟，然后10％MeOH(0.1％FA)在水(0.1％FA)中5分钟]Rt＝7.75；C50H63N12O8S[M+H]+的ESI-MS m/z计算值991.45；实测值991.4。
将树脂结合的环肽使用新制备的TFA：H2O：TES(95：2.5：2.5，v/v/v，6mL)溶液在4℃的冷室中脱保护并从载体裂解3小时。过滤树脂并用TFA(6mL)冲洗。浓缩滤液和冲洗液直至粗油持续存在，通过加入冷乙醚(10-15mL)从中获得沉淀物。离心(1200rpm，10分钟)后，倾析出醚类溶剂，回收粗肽沉淀，溶于乙腈水溶液(10％v/v)中并冷冻干燥。通过制备型HPLC纯化得到的浅棕色蓬松物质，以得到环状肽MPE-400(1.0mg，1％)，为白色蓬松物质：纯化的环状氮杂磺酰基肽MPE-400的LCMS分析使用线性梯度在SunfireTM柱上进行：[5％-50％MeOH(0.1％FA)在水(0.1％FA)中经9分钟，然后5％MeOH(0.1％FA)在水(0.1％FA)中5.0分钟]>99％纯度，Rt 8.115分钟；[5％-50％MeCN(0.1％FA)经9分钟，然后5％MeCN(0.1％FA)5.0分钟]>99％纯度，Rt 5.987分钟；[M+H]+C50H63N12O8S的HRMS m/z计算值991.4607；实测值991.4657。
实施例3：环肽对R-FSL-1介导的一氧化氮产生的影响
通过测量RAW巨噬细胞系中的亚硝酸盐产生来检测环肽GHRP-6类似物调节由TLR2激动剂成纤维细胞刺激脂肽(R-FSL-1)诱导的一氧化氮(NO)过量产生的能力。如图4A至4F中所示，用环肽18(MPE-266)，24(MPE-267)，25(MPE-298)，33(MPE-300)，MPE-189，MPE-191，MPE-192，MPE-075和MPE-111处理导致在测试浓度下显著抑制R-FSL-1介导的NO产生。使用环肽19(MPE-268)，26(乙酰化，MPE-308)和27(MPE-310)(约80％的对照)也观察到NO产生显著减少，尽管根据统计学测试和使用的阈值没有达到显著性(与对照相比，P<0.01，具有Bartlett后测试的单向ANOVA)。对选定的环肽(MPE-298，MPE-268，MPE-308，MPE-310和MPE-315)的进一步分析表明，用环肽MPE-268，MPE-298，MPE-308和MPE-310处理导致在10-7M浓度下显着抑制R-FSL-1介导的NO产生，这比在相同浓度下用阳性对照MPE-001获得的更重要(图4F)。在用非环状氮杂肽MPE-315处理的细胞中没有测量到对R-FSL-1介导的NO产生的显著影响，与图4B和4E中所示的结果一致。
实施例4：环肽对CD36的亲和力
代表性环肽的CD36结合亲和力，包括在RAW细胞中对R-FSL-1诱导的NO产生具有显著或明显抑制作用的那些，基于它们与放射性标记的[125I]-Tyr-Bpa-Ala-海沙瑞林在来自心脏大鼠的纯化膜上竞争CD36的能力进行评估。结果如图5A-G和表2所示，与海沙瑞林相比，环状氮杂肽25(MPE-298)和24(MPE-267)的特征在于对CD36具有最高的结合亲和力，IC50分别为0.07和0.24μM。由MPE-298的N-末端酰化产生的环状氮杂肽26(MPE-308)的特征在于对CD36的亲和力结合转移，IC50为0.67μM。环状氮杂肽18(MPE-266)和27(MPE-310)也显示出与海沙瑞林(0.5-0.89μM)相似的亲和力。环状氮杂肽9(MPE-210)和33(MPE-300)能够以较低的亲和力结合CD36(IC50分别为2.06和10μM)。测试的几种其它环肽(MPE-189，MPE-191，MPE-192，MPE-193，MPE-048，MPE-074，MPE-075，MPE-110，MPE-111，MPE-201，MPE-202，MPE-203和MPE-400)显示出对CD36的可检测结合，IC50范围为0.24μM(对于MPE-111)至14.3μM(对于MPE-202)(图5C-5G)。测试的环肽的亲和力通常高于阳性对照MPE-001的亲和力或与其相当，表现出约2μM的IC50。
表2：环肽对CD36的结合亲和力
化合物 IC<sub>50</sub>(μM) 化合物 IC<sub>50</sub>(μM)
海沙瑞林 0.50 MPE-192 0.98
9(MPE-210) 2.06 MPE-193 2.21
18(MPE-266) 0.68 MPE-048 13.7
24(MPE-267) 0.24 MPE-074 1.04
19(MPE-268) ND MPE-075 0.66
25(MPE-298) 0.07 MPE-110 3.32
33(MPE-300) 10.6 MPE-111 0.24
26(MPE-308) 0.67 MPE-201 12.9
27(MPE-310) 0.89 MPE-202 14.3
MPE-189 3.26 MPE-203 2.26
MPE-191 1.49 MPE-400 11.6
分别测试特征在于显著或明显的NO产生抑制作用的代表性环肽调节R-FSL-1诱导的促炎细胞因子(TNF-α)和趋化因子(CCL-2)释放的能力；结果分别如图6A和6B所示。环状氮杂肽18(MPE-266)，24(MPE-267)，25(MPE-298)，26(MPE-308)和27(MPE-310)对R-FSL-1诱导的TNF-α和CCL-2释放在测试浓度(10-7M)下具有显著的抑制作用。环状氮杂肽25(MPE-298)和27(MPE-310)对R-FSL-1诱导的CCL-2释放的抑制作用显著高于参考标准氮杂肽DBG178(MPE-001)。环状氮杂肽19(MPE-268)在上述测定中对CD36没有显示显著的结合亲和力，化合物9(MPE-210)对R-FSL-1诱导的TNF-α和CCL-2释放在测试浓度下(10-7M)没有显著影响。
环肽298还能够抑制由骨髓来源的巨噬细胞中R-FSL-1诱导的促炎细胞因子IL-1β和TNF-α的分泌(图7B-7C)，从而提供了环肽干扰NLRP3炎性体活性的证据。
实施例5：环肽MPE-298在动脉粥样硬化模型中的作用
方法。在从4周龄开始喂养致动脉粥样化饮食(D12108，无胆酸盐的AIN-76A半纯化饮食，Research Diets Inc.，New Brunswick，NJ)的雄性apoE-/-小鼠中进行实验。从12周龄开始，通过皮下(sc)注射每天施用MPE-298(300nmol/kg)，MPE-267(300nmol/kg)或媒介物(0.9％NaCl)共8周，如图8A示意性所示。
结果和讨论。结果如图8B所示，相对于0.9％NaCl(媒介物)，用环肽MPE-267和MPE-298对动物的长期治疗分别使主动脉损伤减少28％和42％(p<0.01)，提供了环肽表现出抗动脉粥样硬化活性的证据。
实施例6：环肽MPE-298在干性年龄相关性黄斑变性(AMD)模型中的作用
实验模型。光诱导的视网膜变性的急性模型使用短时间暴露于蓝光以诱导感光细胞死亡导致视力丧失(Grimm和Remé，Methods Mol Biol.2013；935：87-97)。小鼠将小鼠暴露于强蓝光(波长＝425nm；曝光强度＝6000lux)五天。在蓝光曝光(D1)开始后一天开始治疗，以289nmol/kg测试项目溶液(MPE-001和MPE-298)每天皮下(s.c)施用连续七(7)天。在第7天，小鼠是暗适应于视网膜电图(ERG)分析。在第8天，将一组电极设置在小鼠上，将其暴露于闪光灯以进行ERG记录。然后，处死小鼠并收集眼睛进行组织学和免疫荧光研究(图9A)。
视网膜电图(ERG)分析。在ERG Diagnosys机器和Ganzfeld刺激器(Diagnosys LLC，Lowell，MA)上记录来自野生型和年龄匹配的敲除小鼠的ERG。将小鼠暗适应过夜，并用氯胺酮(100mg/kg)和甲苯噻嗪溶液(20m/kg)的混合物腹膜内麻醉。使用阿托品和去氧肾上腺素使瞳孔扩张。将一滴甲基纤维素置于角膜表面上以防止角膜脱水。使用加热的水垫将小鼠体温维持在37℃。
使用角膜DTL Plus电极(LLC)测量Flash ERG。将电极置于角膜表面上。额头上的针电极用作参比电极，尾部基部附近的针电极用作接地电极。在以下增加的光强度下，从暗适应动物的两只眼同时记录暗视响应：0.5，1.0，3.0和10.0cd-s/m2。在每个步骤中平均十个波形响应。所有程序均在昏暗的红光照射下在暗室中进行。使用软件(LLC)测量主要ERG组分的幅度和潜伏期。ERG结果以3.0cd-s/m2的光强度呈现。从基线到初级负峰值测量ERG a波振幅，并且从a波波谷到第四个正峰值的最大值测量b波。
视网膜组织制剂和免疫荧光。对于冷冻切片，将小鼠眼睛固定在4％多聚甲醛中并使用30％蔗糖冷冻保护。将它们嵌入最佳切割温度(OCT)化合物中，在液氮中冷冻，并在-80℃下储存。制备低温恒温器冷冻切片(10μm厚；CM 3050S)并将其固定在明胶包被的载玻片上用于免疫荧光分析。对于铺片，将鼠眼在室温下在4％多聚甲醛中固定15分钟，并在角膜缘处切开；将前段丢弃。收集并制备由RPE/脉络膜/巩膜复合物组成的后眼杯用于免疫荧光分析。
用含有0.1％x100和10％FBS或5％BSA(饱和缓冲液)的PBS溶液处理视网膜切片和RPE/脉络膜铺片45分钟。将样本在4℃下与在饱和缓冲液中稀释的一抗温育过夜。我们使用单克隆大鼠抗F4/80(ab6640，)和多克隆兔抗IL-1β(ab9722，Abcam)进行免疫荧光。相应的二抗：488-共轭(Invitrogen Life)和647-共轭(New England)的用于揭示一抗，并且切片用DAPI(Sigma-)复染。将组织制备物在饱和缓冲液中以5分钟洗涤循环洗涤3次，并制备用于荧光显微镜的铺片(IX81Olympus，Richmond Hill，Canada)。所有免疫染色重复至少三次，并且省略一抗的染色用作阴性对照。
视网膜下空间中活化小胶质细胞/巨噬细胞的定量。使用至少3个视网膜铺片来计数视网膜下免疫细胞。在来自对照和注射有盐水，MPE-001或MPE-298的照射小鼠的RPE铺片上计数F4/80染色的细胞。细胞数表示为每mm2的F4/80阳性细胞的平均数。
光感受器层厚度的定量。每只眼睛和每种条件至少3次视网膜冷冻切片用于测量光感受器层的厚度。在视神经周围的上面和下面进行每个视网膜切片12次测量。使用ImageJ软件(http://imagej.nih.gov/)进行层厚度分析。使用统计分析程序(软件版本5.01；Software，San Diego，CA)整合曲线下面积。
统计分析。所有实验重复至少3次。使用Prism软件进行统计学分析。使用具有Newman Keuls后测试的单向ANOVA分析具有3个条件的数据。使用具有Dunnett的后测试的单向ANOVA分析具有超过3种条件的数据。数值结果表示为平均值±SEM。统计显著性基于P值设定。n.s.P>0.05；*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。
结果。暴露于强烈的蓝光会引起与年龄相关性黄斑变性(AMD)相关的损伤相当的视网膜损伤。鉴于CD36参与AMD，检查了代表性环状GHRP-6类似物(MPE-298)能够预防或减少由强烈蓝光暴露引起的损伤的潜在可能性。图9B和9C中所示的结果显示了用环状氮杂肽MPE-298处理在暴露于强蓝光的小鼠中保持ONL厚度，并因此在该模型中诱导针对光感受器变性的保护。MPE-298处理的小鼠中的ONL厚度与CD36KO小鼠中测量的相当。为了确定这种针对光感受器变性的保护是否与改善的视网膜功能相关，对不同组的小鼠进行ERG分析。如图10A-10C所示，相对于用盐水溶液的对照治疗，MPE-298治疗与视网膜功能的显著改善相关，如通过a波和b波振幅的增加所证明的。MPE-298治疗显示了减少由蓝光暴露诱导的视网膜下炎症，如通过视网膜中免疫细胞浸润减少，特别是表达IL-1β的(促炎性)免疫细胞所证明的(图11A-C)。
因此，结果提供了证据，即本文所述的环状GHRP-6类似物可用于治疗视网膜的炎性病症，例如AMD。
尽管上文已经通过其特定实施方式描述了本发明，但是在不脱离所附权利要求限定的本发明的精神和本质的情况下，可以对其进行修改。在权利要求中，词语“包括”用作开放式术语，基本上等同于短语“包括但不限于”。除非上下文另有明确规定，否则单数形式“一个”，“一种”和“该”包括相应的复数形式。
参考文献
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(14)Wilson等,Endocrinology.2016Feb；157(2):570-85。

Claims (176)

1.一种具有式(I)的环肽或其药学上可接受的盐或酯：
其中：
·R1表示氢原子或氨基末端修饰基团；
·R2表示-CO2H、-C(＝O)-NH2或羧基末端修饰基团；
·R3表示氢原子、烷基、烯基、炔基、烯炔基或芳基；
·A'表示-C(R10)(R16)-、-N(R10)-或-X-；
·B'表示共价键或-N(R3)-X-C(＝O)-；
·C'表示-C(R11)(R16)-、-N(R11)-或-X-；
·D'表示-C(R12)(R16)-、-N(R12)-或-X-；
·E'表示-C(R13)(R16)-、-N(R13)-、-X-或-Y-；
·F'表示-C(R14)(R16)-或-N(R14)-；和
·G'表示-C(R15)(R16)-、-N(R15)-或-Y-；
其中：
·R10表示氢原子、烷基、芳基、芳烷基、杂芳基或杂芳烷基；
·R11表示氢原子、烷基、芳基、芳烷基、杂芳基或杂芳烷基；
·R12表示氢原子、任选地被-N(R3)-和/或-O-中断的烷基、芳基、芳烷基，杂芳基或杂芳烷基；
·R13表示氢原子、烷基、芳基、芳烷基、杂芳基或杂芳烷基；
·R14表示氢原子、烷基、芳基、芳烷基、杂芳基或杂芳烷基；
·R15表示-烷基-N(R4)2，每个R4独立地表示氢原子、烷基、烯基、炔基、烯炔基、芳基或C(＝NH)-NH2；和
·R16独立地表示氢原子、烷基、芳基、芳烷基、杂芳基或杂芳烷基；
R10、R11、R12、R13、R14和R16中的芳基，芳烷基、杂芳基和杂芳烷基任选地被一个或多个以下基团取代：羟基、卤素原子、烷基、烷基氨基、卤代烷基、烷氧基、氰基、氨基、烷基氨基、硝基、-N(卤代烷基)2、芳基、芳烷基、芳烷氧基或-C(＝O)芳基，
条件是环肽包含正好一个-X-和正好一个-Y-，和
条件是R11、R13和R14中不超过两个是氢原子，
其中-X-和-Y-一起形成式(II)或(II')的桥：
其中：
·*标识-X-的第一个原子，
·**标识-Y-的第一个原子，
·R5表示亚烷基、亚烯基、亚炔基或亚烯炔基，所述亚烷基、亚烯基、亚炔基或亚烯炔基任选地被-N(R9)-和/或-C(＝O)-中断，并且所述亚烷基、亚烯基、亚炔基或亚烯炔基任选地被一个或多个烷基或羟基取代，
·R6表示亚烷基、亚烯基、亚炔基、亚烯炔基或亚芳烷基，
·R7表示氢原子、烷基、烯基、环烷基烷基或芳烷基，
·R8表示氢原子或烷基，和
·R9表示氢原子、烷基或芳基。
2.根据权利要求1所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，所述氨基末端修饰基团是：
·直链或支链的1-8个碳原子的烷基，
·酰基RA-CO-，其中RA是疏水部分，或
·芳酰基(Ar-CO-)，其中Ar是芳基；
优选地，所述氨基末端修饰基团是所述酰基。
3.根据权利要求2所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，所述酰基是直链或支链的饱和或不饱和C1-C16或C3-C16酰基；优选直链或支链的饱和C1-C6酰基或直链或支链不饱和C3-C6酰基，更优选饱和C1-C6酰基，且最优选乙酰基。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R1表示氢原子。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，所述羧基末端修饰基团是：
·-C(＝O)-NHOH，
·-C(＝O)-NR20R21，其中R20和R21独立地表示氢原子，烷基、芳基或芳烷基，烷基优选为1-10个碳的烷基，
·腈基，或
·羟烷基，优选CH2OH。
6.根据权利要求5所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，-NR20R21是脂族胺，优选甲胺，异丁胺，异戊酰胺或环己胺。
7.根据权利要求5或6所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，-NR20R21是芳族胺或芳烷基胺，优选苯胺、萘胺、苄胺、肉桂胺或苯乙胺。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R2表示-CO2H。
9.根据权利要求1至7中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R2表示羧基末端修饰基团。
10.根据权利要求1至7中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R2表示-C(＝O)-NH2。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R3表示氢原子。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R5中的亚烷基、亚烯基、亚炔基或亚烯炔基是C3-C6，优选C3-C5，且更优选C4。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R5表示亚烷基、亚烯基或亚炔基，优选亚烷基或亚炔基，更优选亚炔基。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R5中的亚烷基、亚烯基、亚炔基或亚烯炔基被-N(R9)-和/或-C(＝O)中断。
15.根据权利要求1至13中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R5中的亚烷基、亚烯基、亚炔基或亚烯炔基是不中断的。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R5中的亚烷基、亚烯基、亚炔基或亚烯炔基被一个或多个烷基或羟基取代。
17.根据权利要求1至15中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R5中的亚烷基、亚烯基、亚炔基或亚烯炔基是未取代的。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R5表示C4亚炔基或C4亚炔基，优选正丁-2-亚炔基或正丁烯基，更优选正丁-2-亚炔基。
19.根据权利要求1至18中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R6表示C3-C6亚烷基、C3-C6亚烯基、C3-C6亚炔基、C3-C6亚烯炔基或芳基-C3-C6亚烷基，优选C3-C5亚烷基、C3-C5亚烯基、C3-C5亚炔基、C3-C5亚烯炔基或芳基-C3-C5亚烷基，更优选C3-C4亚烷基、C3-C4亚烯基、C3-C4亚炔基、C3-C6亚烯炔基或芳基-C3-C4亚烷基。
20.根据权利要求1至19中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R6表示亚烷基，优选C3-C6亚烷基或C3-C5亚烷基，更优选C3-C4亚烷基，且最优选正丙烯基或正丁烯基。
21.根据权利要求1至20中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R7中的芳烷基是芳甲基，优选苄基。
22.根据权利要求1至21中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R7中的烷基是C2-C6烷基，优选C2-C4烷基，更优选C3烷基，最优选正丙基和异丙基。
23.根据权利要求1至22中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R7中的烯基是C2-C6烯基，优选C2-C4烯基，更优选C3烯基，最优选正丙-2-烯基。
24.根据权利要求1至23中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R7中的环烷基烷基中的环烷基是C3-6环烷基，优选C3-5环烷基，且更优选C3环烷基。
25.根据权利要求1至24中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R7中的环烷基烷基中的烷基是C1-C6烷基，优选C1-C3烷基，且更优选甲基。
26.根据权利要求1至25中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R7中的环烷基烷基是环丙基甲基。
27.根据权利要求1至26中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R7表示烷基、烯基、环烷基烷基或芳烷基，优选烯基。
28.根据权利要求1至27中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R8表示烷基。
29.根据权利要求1至27中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R8表示氢原子。
30.根据权利要求1至29中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，式(II)的桥是式(II)的桥的(S)-对映体。
31.根据权利要求1至29中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，式(II)的桥是式(II)的桥的(R)-对映体。
32.根据权利要求1至29中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，式(II)的桥是式(II)的桥的对映体的混合物。
33.根据权利要求1至32中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，式(II)的桥是式(III)的桥：
其中*标识-X-的第一个原子，并且**标识-Y-的第一个原子。
34.根据权利要求1至33中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，式(II)的桥是式(IV)的桥：
其中*标识-X-的第一个原子，**标识-Y-的第一个原子，并且一个井号(#)标识与邻近的羰基连接的-Y-基团的键。
35.根据权利要求1至34中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，式(II')的桥是式(II')的桥的顺式-非对映体。
36.根据权利要求1至34中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，式(II')的桥是式(II')的桥的反式-非对映体。
37.根据权利要求1至36中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，式(II')的桥是式(II')的桥的非对映体的混合物。
38.根据权利要求1至37中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，式(II')的桥是式(V)的桥：
其中*标识-X-的第一个原子，并且**标识-Y-的第一个原子。
39.根据权利要求1至38中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，式(II')的桥是式(VI)的桥：
其中：
*标识-X-的第一个原子，
**标识-Y-的第一个原子，
一个井号(#)标识与邻近的羰基(C＝O)基团连接的-Y-基团的键，并且
两个井号(##)标识与邻近的羰基(C＝O)基团连接的-X-基团的键。
40.根据权利要求1至39中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，所述-X-和所述-Y-形成式(II)的桥。
41.根据权利要求1至39中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，所述-X-和所述-Y-形成式(II')的桥。
42.根据权利要求1至41中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，带有R10和R16的碳原子为D-构型或L-构型或其任何混合物。
43.根据权利要求1至41中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，带有R10和R16的碳原子为L-构型。
44.根据权利要求1至41中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，带有R10和R16的碳原子为D-构型。
45.根据权利要求1至44中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，带有R11和R16的碳原子为D-构型或L-构型或其任何混合物。
46.根据权利要求1至44中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，带有R11和R16的碳原子为L-构型。
47.根据权利要求1至44中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，带有R11和R16的碳原子为D-构型。
48.根据权利要求1至47中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，带有R12和R16的碳原子为D-构型或L-构型或其任何混合物。
49.根据权利要求1至47中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，带有R12和R16的碳原子为L-构型。
50.根据权利要求1至47中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，带有R12和R16的碳原子为D-构型。
51.根据权利要求1至50中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，带有R13和R16的碳原子为D-构型或L-构型或其任何混合物。
52.根据权利要求1至50中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，带有R13和R16的碳原子为L-构型。
53.根据权利要求1至50中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，带有R13和R16的碳原子为D-构型。
54.根据权利要求1至53中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，带有R14和R16的碳原子为D-构型或L-构型或其任何混合物。
55.根据权利要求1至53中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，带有R14和R16的碳原子为L-构型。
56.根据权利要求1至53中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，带有R14和R16的碳原子为D-构型。
57.根据权利要求1至56中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，带有R15和R16的碳原子为D-构型或L-构型或其任何混合物。
58.根据权利要求1至56中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，带有R15和R16的碳原子为L-构型。
59.根据权利要求1至56中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，带有R15和R16的碳原子为D-构型。
60.根据权利要求1至59中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，任选地取代R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基的烷基、卤代烷基和/或烷氧基是C1-6烷基、卤代烷基或烷氧基，优选C1-4烷基、卤代烷基或烷氧基，更优选C1-2烷基、卤代烷基或烷氧基，优选C1烷基、卤代烷基或烷氧基。
61.根据权利要求1至60中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，任选地取代R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基的卤代烷基是全卤代烷基，优选全氟烷基，更优选-CF3。
62.根据权利要求1至61中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，任选地取代R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基的-N(卤代烷基)2是-N(2-氯乙基)2。
63.根据权利要求1至62中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，任选地取代R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基的芳基是苯基。
64.根据权利要求1至63中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，任选地取代R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基的芳烷氧基是苄氧基。
65.根据权利要求1至64中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，任选地取代R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基的-C(＝O)芳基是苯甲酰基。
66.根据权利要求1至65中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳烷基和/或杂芳烷基中的烷基任选被烷基、羟基或芳基取代。
67.根据权利要求1至66中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基任选被2或3个相同或不同的取代基取代，优选相同的取代基，优选卤素原子、羟基或烷氧基。
68.根据权利要求1至67中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳烷基和/或杂芳烷基中的烷基为C1-6烷基，优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基，且最优选甲基。
69.根据权利要求1至68中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳基和/或芳烷基中的芳基是苯基或萘基，优选苯基。
70.根据权利要求1至69中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳基和/或芳烷基中的芳基是未取代的或被取代，优选未取代的或被一个羟基取代，优选在苯基上的位置4处被取代。
71.根据权利要求1至70中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的芳烷基是：
·未取代的苄基，由此形成苯丙氨酸残基的侧链，
·被羟基取代的苄基，优选在苯环上的对位(4)处被羟基取代的苄基，由此形成酪氨酸残基的侧链，或
·-CH2-CH2-苯基，由此形成高苯丙氨酸残基的侧链。
72.根据权利要求1至71中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的杂芳基和/或杂芳烷基中的杂芳基是三唑基、咪唑基或吲哚基，优选咪唑基或吲哚基，优选1H-咪唑-4-基或1H-吲哚-3-基-。
73.根据权利要求1至72中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的杂芳基和/或杂芳烷基是未取代的。
74.根据权利要求1至73中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R10、R11、R12、R13、R14和/或R16中的杂芳烷基是：
·1H-吲哚-3-基-甲基，由此形成色氨酸残基的侧链，或
·1H-咪唑-4-基-甲基，由此形成组氨酸残基的侧链。
75.根据权利要求1至74中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R16中的烷基是C1-6烷基，优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基，且最优选甲基。
76.根据权利要求1至75中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R16表示氢原子或烷基，优选氢原子。
77.根据权利要求1至76中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，A'表示-C(R10)(R16)-或-N(R10)-。
78.根据权利要求1至76中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，A'表示-C(R10)(R16)-。
79.根据权利要求1至76中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，A'表示-N(R10)-。
80.根据权利要求1至76中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，A'表示-X-。
81.根据权利要求1至80中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R10中的烷基是C1-6烷基，优选C1-4烷基，更优选C1-4烷基，还更优选甲基、丙基、或丁基，甚至更优选甲基，由此形成丙氨酸残基的侧链，优选形成L-丙氨酸残基的侧链，异丙基，由此形成缬氨酸残基的侧链，优选形成L-缬氨酸残基的侧链，仲丁基，由此形成亮氨酸残基的侧链，优选形成L-亮氨酸残基的侧链，和异丁基，由此形成异亮氨酸残基的侧链，优选形成L-异亮氨酸残基的侧链，更优选甲基或异丙基，且最优选甲基。
82.根据权利要求1至81中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R10中的杂芳烷基中的杂芳基是咪唑基，优选1H-咪唑-4-基。
83.根据权利要求1至84中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R10中的芳烷基和/或杂芳烷基中的烷基是C1-6烷基，优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基，且最优选甲基。
84.根据权利要求1至83中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R10中的杂芳烷基是1H-咪唑-4-基-甲基，由此形成组氨酸残基的侧链，优选形成L-组氨酸残基的侧链。
85.根据权利要求1至84中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R10是氢原子、烷基、芳烷基或杂芳烷基，更优选氢原子、烷基或杂芳烷基，最优选烷基。
86.根据权利要求1至85中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R10形成甘氨酸残基、丙氨酸残基、缬氨酸残基或组氨酸残基的侧链，其中丙氨酸残基优选L-丙氨酸残基，缬氨酸残基优选L-缬氨酸残基，组氨酸残基优选L-组氨酸残基。
87.根据权利要求1至86中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R10形成丙氨酸残基，优选L-丙氨酸残基。
88.根据权利要求1至87中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，B'表示共价键。
89.根据权利要求1至87中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，B'表示-N(R3)-X-C(＝O)-。
90.根据权利要求1至89中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，C'表示-C(R11)(R16)-或-X-。
91.根据权利要求1至89中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，C'表示-C(R11)(R16)-。
92.根据权利要求1至89中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，C'表示-N(R11)-。
93.根据权利要求1至89中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，C'表示-X-。
94.根据权利要求1至93中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R11中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基被取代，优选被羟基取代。
95.根据权利要求1至93中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R11中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基是未取代的。
96.根据权利要求1至95中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R11中的芳烷基中的芳基被取代，更优选被一个羟基取代，优选在位置4处取代。
97.根据权利要求1至96中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，在R11中形成芳基和/或芳烷基的芳基是取代或未取代的苯基或萘基，优选未取代的苯基或被羟基取代的苯基，优选在位置4处取代。
98.根据权利要求1至97中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，在R11中形成杂芳基和/或杂芳烷基的杂芳基是取代或未取代的三唑基、咪唑基或吲哚基，优选咪唑基或吲哚基，更优选1H-咪唑-4-基或1H-吲哚-3-基-，更优选未取代的。
99.根据权利要求1至98中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R11中的芳烷基和/或杂芳烷基中的烷基是C1-6烷基，优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基，且最优选甲基。
100.根据权利要求1至99中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R11中的杂芳烷基为1H-吲哚-3-基-甲基，由此形成色氨酸残基的侧链，优选D-色氨酸残基的侧链；或1H-咪唑-4-基-甲基，由此形成组氨酸残基的侧链，优选D-组氨酸残基的侧链，优选1H-咪唑-4-基-甲基。
101.根据权利要求1至100中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R11中的芳烷基是：
·未取代的苄基，由此形成苯丙氨酸残基的侧链，优选D-苯丙氨酸残基的侧链，
·被羟基取代的苄基，优选在苯环上的对位处被羟基取代的苄基，由此形成酪氨酸残基的侧链，优选D-酪氨酸残基的侧链，或
·-CH2-CH2-苯基，由此形成高苯丙氨酸残基的侧链，优选D-高苯丙氨酸残基的侧链。
102.根据权利要求1至101中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R11表示芳基、芳烷基、杂芳基或杂芳烷基，优选芳烷基或杂芳烷基，更优选杂芳烷基。
103.根据权利要求1至102中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R11形成色氨酸残基的侧链，优选形成D-色氨酸残基的侧链。
104.根据权利要求1至103中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，D'表示-C(R12)(R16)-或-X-。
105.根据权利要求1至103中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，D'表示-C(R12)(R16)-。
106.根据权利要求1至103中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，D'表示-N(R12)-。
107.根据权利要求1至103中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，D'表示-X-。
108.根据权利要求1至107中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R12是任选地被-N(R3)-和/或-O-中断的烷基，R12中的烷基优选是不中断的。
109.根据权利要求1至108中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R12中的烷基是C1-6烷基，优选C1-4烷基，更优选C1-3烷基，并且还更优选甲基，由此形成丙氨酸残基的侧链，优选形成L-丙氨酸残基的侧链。
110.根据权利要求1至109中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，E'表示-C(R13)(R16)-。
111.根据权利要求1至109中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，E'表示-N(R13)-。
112.根据权利要求1至109中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，E'表示-X-。
113.根据权利要求1至109中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，E'表示-Y-。
114.根据权利要求1至113中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R13中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基被取代，优选在对位处被取代，优选被羟基或烷氧基取代，优选被烷氧基取代，更优选被甲氧基取代。
115.根据权利要求1至113中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R13中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基是未取代的。
116.根据权利要求1至115中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，在R13中形成芳基和/或芳烷基的芳基是取代或未取代的苯基或萘基，优选未取代的苯基或被羟基或烷氧基取代的苯基，优选被烷氧基取代的苯基，更优选被甲氧基取代的苯基，优选在对位处取代。
117.根据权利要求1至116中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，在R13中形成杂芳基和/或杂芳烷基的杂芳基是取代或未取代的三唑基、咪唑基或吲哚基，优选咪唑基或吲哚基，更优选1H-咪唑-4-基或1H-吲哚-3-基-，最优选未取代的。
118.根据权利要求1至117中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R13中的芳烷基和/或杂芳烷基中的烷基是C1-6烷基，优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基，且最优选甲基。
119.根据权利要求1至118中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R13中的杂芳烷基是1H-吲哚-3-基-甲基，由此形成色氨酸残基的侧链，优选形成L-色氨酸残基的侧链；或1H-咪唑-4-基-甲基由此形成组氨酸残基的侧链，优选形成L-组氨酸残基的侧链；优选1H-吲哚-3-基-甲基。
120.根据权利要求1至119中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R13中的芳烷基是：
·未取代的苄基，由此形成苯丙氨酸残基的侧链，优选形成L-苯丙氨酸残基的侧链，
·被羟基取代的苄基，优选在苯环上的对位处被羟基取代的苄基，由此形成酪氨酸残基，优选形成L-酪氨酸残基的侧链，或
·被取代的苄基烷氧基，优选甲氧基取代的苄基，优选在苯环上的对位处被取代，由此形成O-甲基酪氨酸残基的侧链，优选形成L-O-甲基酪氨酸残基的侧链，或
·-CH2-CH2-苯基，由此形成高苯丙氨酸残基的侧链，优选形成L-高苯丙氨酸残基的侧链，
优选地，所述芳烷基是在对位处被甲氧基取代的苄基。
121.根据权利要求1至120中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R13形成色氨酸残基，优选L-色氨酸残基；或形成O-甲基酪氨酸残基，优选L-O-甲基酪氨酸残基；更优选R13形成色氨酸残基，优选L-色氨酸残基。
122.根据权利要求1至121中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R13表示芳基、芳烷基、杂芳基或杂芳烷基，优选杂芳烷基或芳烷基，且更优选杂芳烷基。
123.根据权利要求1至122中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，F'表示-C(R14)-。
124.根据权利要求1至122中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，F'表示-N(R14)-。
125.根据权利要求1至124中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R14中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基被取代，优选在苯环上的对位处被取代，优选被羟基取代。
126.根据权利要求1至124中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R14中的芳基、芳烷基、杂芳基和/或杂芳烷基是未取代的。
127.根据权利要求1至126中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，在R14中形成芳基和/或芳烷基的芳基是取代或未取代的苯基或萘基，优选未取代的或被羟基取代的苯基，优选在苯环上的对位处被取代。
128.根据权利要求1至127中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，在R14中形成杂芳基和/或杂芳烷基的杂芳基是取代或未取代的三唑基、咪唑基或吲哚基，优选咪唑基或吲哚基，更优选1H-咪唑-4-基或1H-吲哚-3-基-，更优选未取代的。
129.根据权利要求1至128中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R14中的芳烷基和/或杂芳烷基中的烷基是C1-6烷基，优选C1-3烷基，更优选C1-2烷基，且最优选甲基。
130.根据权利要求1至129中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R14中的杂芳烷基是1H-吲哚-3-基-甲基，由此形成色氨酸残基，优选D-色氨酸残基；或1H-咪唑-4-基-甲基，由此形成组氨酸残基，优选D-组氨酸残基。
131.根据权利要求1至130中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R14中的芳烷基是：
·未取代的苄基，由此形成苯丙氨酸残基，优选形成D-苯丙氨酸残基，
·被羟基取代的苄基，优选在苯环上的对位处被羟基取代的苄基，由此形成酪氨酸残基，优选形成D-酪氨酸残基，或
·被烷氧基取代的苄基，优选被甲氧基取代的苄基，优选在对位处被取代，由此形成O-甲基酪氨酸残基，优选形成D-O-甲基酪氨酸残基，或
·-CH2-CH2-苯基，由此形成高苯丙氨酸残基，优选形成D-高苯丙氨酸残基，
优选地，所述芳烷基是未取代的苄基。
132.根据权利要求1至131中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R14表示芳基、芳烷基、杂芳基或杂芳烷基，优选芳烷基。
133.根据权利要求1至132中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R14形成苯丙氨酸残基，优选形成D-苯丙氨酸残基。
134.根据权利要求1至133中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，G'表示-C(R15)(R16)-或-Y-。
135.根据权利要求1至133中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，G'表示-C(R15)-。
136.根据权利要求1至133中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，G'表示-N(R15)-。
137.根据权利要求1至133中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，G'表示-Y-。
138.根据权利要求1至137中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R15中的-烷基-N(R4)2是C1-6烷基，优选C3-5烷基，更优选C4烷基，优选正丁基。
139.根据权利要求1至138中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R4中的一个或两个表示氢原子，优选两个表示氢原子。
140.根据权利要求1至139中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，R15表示氨基丁基，由此形成赖氨酸残基，优选形成L-赖氨酸残基。
141.根据权利要求1至140中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，A'表示-C(R10)-或-N(R10)-。
142.根据权利要求1至140中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，A'表示-X-。
143.根据权利要求1至141中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，B'表示-N(R3)-X-C(＝O)-。
144.根据权利要求1至141中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，C'表示-X-。
145.根据权利要求1至141中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，D'表示-X-。
146.根据权利要求1至141中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，E'表示-X-。
147.根据权利要求1至145中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，E'表示-Y-。
148.根据权利要求1至146中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，G'表示-Y-。
149.根据权利要求1至148中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，条件是当E'表示-Y-时，A'表示-X-或B'表示-N(R3)-X-C(＝O)-。
150.根据权利要求1至149中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其中，条件是当A'表示-X-时，G'表示-C(R15)-或-N(R15)-。
151.根据权利要求1至150中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其是：
或其药学上可接受的盐。
152.根据权利要求151所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其是MPE-075，MPE-111，MPE-189，MPE-191，MPE-192，MPE-266，MPE-267，MPE-298，MPE-300，MPE-308或MPE-310或其药学上可接受的盐。
153.根据权利要求152所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其是MPE-267，MPE-298，MPE-075或MPE-192或其药学上可接受的盐。
154.根据权利要求153所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其是MPE-267或其药学上可接受的盐。
155.根据权利要求153所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其是MPE-075或其药学上可接受的盐。
156.根据权利要求53所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其是MPE-298或其药学上可接受的盐。
157.根据权利要求153所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，其是MPE-192或其药学上可接受的盐。
158.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至157中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。
159.一种治疗CD36相关疾病、紊乱或病症的方法，该方法包括向有需要的受试者施用有效量的根据权利要求1至157中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，或根据权利要求158所述的药物组合物。
160.根据权利要求160所述的方法，其中，所述疾病、紊乱或病症是TLR2介导的炎性疾病、紊乱或病症。
161.根据权利要求160或161所述的方法，其中，所述疾病、紊乱或病症是动脉粥样硬化，异常血管生成，年龄相关性黄斑变性，脂质代谢异常，非酒精性脂肪肝病NAFLD，非酒精性脂肪性肝炎NASH，异常去除凋亡细胞，缺血，缺血再灌注损伤，输尿管梗阻，慢性肾病中的纤维蛋白原发生，中风，阿尔茨海默病，糖尿病，糖尿病肾病或肥胖症。
162.根据权利要求162所述的方法，其中，所述疾病、紊乱或病症是动脉粥样硬化。
163.根据权利要求162所述的方法，其中，所述疾病、紊乱或病症是年龄相关性黄斑变性。
164.根据权利要求160至164中任一项所述的方法，其中，所述受试者是人受试者。
165.根据权利要求1至158中任一项所述的环肽或其药学上可接受的盐或酯，或根据权利要求159所述的药物组合物在治疗受试者中CD36相关疾病、紊乱或病症中的用途。
166.根据权利要求1至158中任一项所述的环肽或其药学上可接受的酯或盐，或根据权利要求159所述的药物组合物在制备用于治疗受试者中CD36相关疾病、紊乱或病症的药物中的用途。
167.根据权利要求166或167所述的用途，其中，所述疾病、紊乱或病症是TLR2介导的炎性疾病、紊乱或病症。
168.根据权利要求166至168中任一项所述的用途，其中，所述疾病、紊乱或病症是动脉粥样硬化，异常血管生成，年龄相关性黄斑变性，脂质代谢异常，非酒精性脂肪肝病NAFLD，非酒精性脂肪性肝炎NASH，异常去除凋亡细胞，缺血，缺血再灌注损伤，输尿管梗阻，慢性肾病中的纤维蛋白原发生，中风，阿尔茨海默病，糖尿病，糖尿病肾病或肥胖症。
169.根据权利要求169所述的用途，其中，所述疾病、紊乱或病症是动脉粥样硬化。
170.根据权利要求169所述的用途，其中，所述疾病、紊乱或病症是年龄相关性黄斑变性。
171.根据权利要求166至171中任一项所述的用途，其中，所述受试者是人受试者。
172.根据权利要求1至158中任一项所述的环肽或其药学上可接受的酯或盐，或根据权利要求159所述的药物组合物的环肽或其药学上可接受的酯或盐，其用于治疗受试者中CD36相关疾病、紊乱或病症。
173.根据权利要求173所述的环肽或其药学上可接受的酯或其盐，或药物组合物的用途，其中，所述疾病、紊乱或病症是TLR2介导的炎性疾病、紊乱或病症。
174.根据权利要求173或174所述的环肽或其药学上可接受的酯或其盐，或药物组合物的用途，其中，所述疾病、紊乱或病症是动脉粥样硬化，异常血管生成，年龄相关性黄斑变性，脂质代谢异常，非酒精性脂肪肝病(NAFLD)，非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，异常去除凋亡细胞，缺血，缺血再灌注损伤，输尿管梗阻，慢性肾病中的纤维蛋白原发生，中风，阿尔茨海默病，糖尿病，糖尿病肾病或肥胖症。
175.根据权利要求175所述的环肽或其药学上可接受的酯或其盐，或药物组合物的用途，其中，所述疾病、紊乱或病症是动脉粥样硬化。
176.根据权利要求175所述的环肽或其药学上可接受的酯或其盐，或药物组合物的用途，其中，所述疾病、紊乱或病症是年龄相关性黄斑变性。
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