CN109562124A - 用于处理肌腱退化的方法和组合物 - Google Patents

用于处理肌腱退化的方法和组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN109562124A
CN109562124A CN201780039455.6A CN201780039455A CN109562124A CN 109562124 A CN109562124 A CN 109562124A CN 201780039455 A CN201780039455 A CN 201780039455A CN 109562124 A CN109562124 A CN 109562124A
Authority
CN
China
Prior art keywords
composition
tendon
carbohydrate
composition according
injection
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201780039455.6A
Other languages
English (en)
Inventor
C·D·怀特
E·S·安
S·D·诺尔
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Anika Therapeutics Inc
Original Assignee
Anika Therapeutics Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Anika Therapeutics Inc filed Critical Anika Therapeutics Inc
Publication of CN109562124A publication Critical patent/CN109562124A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/14—Macromolecular materials
    • A61L27/20—Polysaccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/39—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin, cold insoluble globulin [CIG]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
    • A61L27/38—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells
    • A61L27/3839—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells characterised by the site of application in the body
    • A61L27/3843—Connective tissue
    • A61L27/386—Ligaments, tendons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2400/00—Materials characterised by their function or physical properties
    • A61L2400/06—Flowable or injectable implant compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
    • A61L2430/10—Materials or treatment for tissue regeneration for reconstruction of tendons or ligaments

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Rehabilitation Therapy (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Infusion, Injection, And Reservoir Apparatuses (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Details Of Rigid Or Semi-Rigid Containers (AREA)

Abstract

本文公开了用于治疗动物或人的受损肌腱的可注射的组合物和方法。可注射组合物包括可以增加骨质水合以及润滑的有效剂量的碳水化合物。

Description

用于处理肌腱退化的方法和组合物
相关申请的交叉引用
本申请要求2016年4月27日提交的美国临时申请62/328,396和2016年7月27日提交的美国临时申请62/367,377的优先权，其中每个的内容通过引用结合于此。
发明领域
本公开涉及用于治疗肌腱退化的方法和可注射的组合物。特别是，本公开内容提供了包含碳水化合物的可注射组合物，其用于通过增加任何关节处的肌腱骨交界面的水合和润滑来治疗动物或人的受损肌腱，特别是当该组合物通过骨腱内或骨腱周注射施用时。此外，本公开还涉及使用所公开的组合物治疗受试者中受损肌腱的方法。
背景技术
肌腱病是一种常见的临床疾病。最常见的肌腱病变，外上髁炎(网球肘)影响高达3％的一般人群。在高达20％的人群中，它可能导致受累肢体的实质性疼痛和功能丧失超过一年。目前的管理方案包括保守治疗，例如支具和物理治疗(66.5％的患者)；皮质类固醇注射(26％的患者)；或者手术切除肌腱的受损部分(7.5％的患者)，当患者的症状变得过于极端到无法忍受时，患者会进入下一阶段治疗。医生通常认为皮质类固醇的短期效果超过了他们在这种情况下过度使用造成的长期后果。其他常见的肌腱病包括肩关节(肩袖肌腱病)，每年影响1.1％的人口，踝关节(跟腱病)，膝关节(髌腱病)，以及表1中提到的其他肌腱的肌腱病。
肌腱病变
据说肌腱病变是影响肌腱的一种退行性疾病。这种退化的成因可被认为是由一种或多种因素引起，其中过度使用导致肌腱端的微创伤似乎是最被广泛接受的。然而，从业者一直将肌腱端作为单个整体进行处理，并且尚未认识到肌腱端内的生物力学变化。从业者将对整个单元进行治疗，导致临床结果不一致，而不是针对肌腱端内需要治疗的适当位置。本发明着重于骨腱连接处的治疗，而不是肌腱或肌腱连接处的治疗。
组织学研究结果表明，骨腱连接处的慢性肌腱损伤本质上是退行性的而不是炎症性的。没有炎性细胞(例如，巨噬细胞，嗜中性粒细胞，单核细胞)表明皮质类固醇治疗在肌腱病变中具有有限的益处。因此，在医学界内对于肌腱病变(例如，网球肘)没有共识的治疗方案。如前所述，这种缺乏共识可能是因为医学界将肌腱端视为一个整体单元而不是分割为各个适合治疗的区域。虽然肌腱病的传统治疗通过使用皮质类固醇注射来减轻疼痛，但已经表明皮质类固醇注射可以进一步加剧肌腱退化并有增加病情复发以及肌腱断裂的风险。尽管如此，皮质类固醇注射已被证明在某些情况下对于减轻肌腱病变的短期疼痛是有效的。该机制尚不清楚，但可认为，用类固醇成分浸润该区域可能会改变或干扰引起该区域疼痛刺激的局部化学物质。
肌腱病的其他治疗方法包括生物力学的减少肌腱上的重力，相对的休息和冰块，因为它是血管收缩剂(并且肌腱病变中可见血管的增加)和天然镇痛药。例如，通常使用休息(rest)，冰块(ice)，压缩(compression)和抬高(elevation)的“RICE”方案。典型的常规治疗还包括固定肌腱，例如通过使用夹板或其他内部或外部结构支撑，以允许肌腱愈合。在某些情况下，唯一的治疗方法是长时间的休息(例如几个月)，以确定病情是否会自行消退。
现有技术治疗集中于保护健康肌腱，而不是治疗退化肌腱(例如，肌腱连接处的一次或多次注射，其中肌腱不退化，以提供限制运动的结构和支撑，从而保护健康的肌腱)。对运动施加限制对于患者来说是不方便的，但更重要的是，这些治疗不能解决肌腱退化，而只是试图阻止损伤变得更糟。传统的治疗方案也存在明显的缺点。例如，使用皮质类固醇会使患者处于肌腱断裂的风险中，使用内部或外部支撑可能会对生活方式产生重大影响。如果可以提供治疗肌腱病的改进方法将是有益的。
发明内容
描述了用于治疗肌腱退化的方法和可注射的组合物。
在一个方面，公开了包含用于治疗动物或人的受损肌腱的碳水化合物的可注射组合物，其中所述组合物包含有效量的碳水化合物，当所述组合物通过在骨腱内或骨腱周围注射时，可在骨腱连接处增加肌腱水合和润滑。
在一些实施方案中，组合物通过骨腱周围注射施用。在进一步的实施方案中，组合物通过骨腱内注射施用。
在一些实施方案中，碳水化合物含有至少一种选自硫醇，醇，胺，羧基，醛，酰胺，酯，酮及其组合的官能团。
在一些实施方案中，碳水化合物具有约10,000至约10,000,000道尔顿的分子量。在进一步的实施方案中，碳水化合物具有约300,000至约3,000,000道尔顿的分子量。在更进一步的实施方案中，碳水化合物具有约1,000,000至约3,000,000道尔顿的分子量。
在一些实施方案中，碳水化合物不是交联的。在进一步的实施方案中，碳水化合物包含至少一个交联。在进一步的实施方案中，交联的碳水化合物至少约1％摩尔。在进一步的实施方案中，交联的碳水化合物约1％至约10％摩尔。在进一步的实施方案中，交联的碳水化合物约1％至约5％摩尔。在进一步的实施方案中，交联的碳水化合物是约1％摩尔。在进一步的实施方案中，交联的碳水化合物是约2％摩尔。在进一步的实施方案中，交联的碳水化合物是约3％摩尔。在进一步的实施方案中，交联的碳水化合物约为4％摩尔。在进一步的实施方案中，交联的碳水化合物是约5％摩尔。
在一些实施方案中，至少一种交联剂包含选自碳二亚胺交联剂，双碳二亚胺(“BCDI”)交联剂，二乙烯基砜交联剂，二环氧交联剂，二硫化物交联剂，二缩水甘油基交联剂，二丙烯酸酯交联剂，二醛交联剂，二酐交联剂，二酰基卤素交联剂，二甲基丙烯酸酐交联剂，二丙烯酸酐交联剂及其组合。在一些实施方案中，所述至少一种交联剂包含选自丁二醇二环氧(“BDDE”)交联剂和丁二醇二缩水甘油醚(“BDGE”)交联剂的交联剂。
在一些实施方案中，碳水化合物是自交联的。
在一些实施方案中，碳水化合物以约1-100mg/mL的浓度存在于所述组合物中。在进一步的实施方案中，碳水化合物以约2-30mg/mL的浓度存在于所述组合物中。在进一步的实施方案中，碳水化合物以约5-30mg/mL的浓度存在于所述组合物中。在进一步的实施方案中，碳水化合物以约10-20mg/ml的浓度存在于所述组合物中。在进一步的实施方案中，碳水化合物以约12.5-17.5mg/mL的浓度存在于所述组合物中。
在一些实施方案中，组合物还包含药学上可接受的载体。在进一步的实施方案中，药学上可接受的载体选自等渗溶液或低温贮存剂。
在一些实施方案中，组合物还包含另外的药剂。在一些实施方案中，另外的药剂包含重组蛋白。在进一步的实施方案中，另外的药剂包含小分子。在进一步的实施方案中，另外的药剂选自山梨糖醇，甘露醇，抗氧化剂(例如表没食子儿茶素没食子酸酯，白藜芦醇，姜黄素)，IGF-1，PDGF，VEGF，α-2-巨球蛋白及其组合。在进一步的实施方案中，另外的药剂包括干细胞。在进一步的实施方案中，另外的药剂包括体细胞。在进一步的实施方案中，另外的药剂包括富含血小板的血浆(PRP)，贫血小板血浆(PPP)，干细胞同种异体移植物，干细胞自体移植物，骨髓抽吸物(BMA)，骨髓抽吸物浓缩物(BMAC)，自体成纤维细胞或自体成肌细胞。
在一些实施方案中，碳水化合物包含至少一种选自胶原，明胶，多糖及其组合的碳水化合物。
在一些实施方案中，碳水化合物包含胶原蛋白。在一些实施方案中，胶原蛋白包含天然胶原蛋白。在进一步的实施方案中，胶原蛋白包含变性胶原蛋白。
在一些实施方案中，碳水化合物包含明胶。在进一步的实施方案中，明胶包含A型明胶。在更进一步的实施方案中，明胶包含B型明胶。在一些实施方案中，明胶的分子量为约80,000Da至约200,000Da。在进一步的实施方案中，明胶的多分散性为约1至约3。在更进一步的实施方案中，明胶的多分散性为约1.1至约2.4。
在一些实施方案中，碳水化合物包含多糖。在进一步的实施方案中，多糖选自由糖胺聚糖和葡糖胺聚糖的组合。在更进一步的实施方案中，多糖选自葡聚糖，乙酰肝素，肝素，透明质酸，藻酸盐，琼脂糖，卡拉胶，支链淀粉，直链淀粉，糖原，淀粉，纤维素，软骨素，皮肤素，角蛋白，甲壳质，壳聚糖，羧甲基纤维素(“CMC”)，黄原胶，结冷胶，半乳甘露聚糖及其组合。在一些实施方案中，多糖是硫酸化多糖。在进一步的实施方案中，硫酸化多糖选自硫酸化羟基磷灰石，硫酸乙酰肝素，硫酸软骨素，硫酸葡聚糖，硫酸皮肤素，硫酸角质素及其组合。
在一些实施方案中，多糖包含通过糖苷键彼此连接的多于约10个单糖残基。
在一些实施方案中，多糖的分子量为约2,000Da到大约8,000,000Da。在进一步的实施方案中，多糖具有约20,000Da至约5,000,000Da的分子量。在更进一步的实施方案中，多糖的分子量为约1,000,000Da至约3,000，000Da。
在一些实施方案中，多糖包含交联的羧基多糖。
在一些实施方案中，多糖包含过羧化多糖。
在一些实施方案中，碳水化合物包含多糖。在一些实施方案中，多糖包含葡聚糖。在一些实施方案中，葡聚糖的分子量为约300,000Da至约600,000Da。在一些实施方案中，葡聚糖的多分散性为约1至约3。在进一步的实施方案中，葡聚糖的多分散性为约1.1至约2.4。
在一些实施方案中，多糖包含透明质酸，或其酯，酰基脲，酰基异脲，二硫化物，卡波姆或其酰胺。在一些实施方案中，透明质酸选自乙酰透明质酸，透明质酸钠，透明质酸钾，透明质酸镁，透明质酸钙，透明质酸铵及其组合。在一些实施方案中，透明质酸包含至少一个交联。在一些实施方案中，透明质酸来源于细菌或动物(例如禽类透明质酸)。
在一些实施方案中，透明质酸包含硫酸化透明质酸或其酯或其酰胺。在进一步的实施方案中，透明质酸包含N-硫酸化的透明质酸，或其酯或其酰胺。
在一些实施方案中，透明质酸包含透明质酸酯。透明质酸酯是一种透明质酸分子，其中透明质酸的至少一个羧酸酯基团被醇酯化。在一些实施方案中，透明质酸酯是透明质酸与至少一种选自脂族，芳基-脂族，环脂族，芳族，环状和杂环醇的醇的酯。在一些实施方案中，透明质酸酯的酯化百分比为约20至约100％，更特别的为约50至约100％，在一些情况下为约75至约100％。在一些实施方案中，剩余的非酯化HA用有机或无机碱成盐。参见，例如，欧洲专利No.0 216 453和美国专利No.4,851,521，其内容通过引用整体并入本文。在一些实施方案中，透明质酸酯由分子式(IX)表示：
其中HA代表透明质酸，n是0-20的整数。在一些实施方案中，透明质酸酯选自以下的组合：
Hyaff302(Hyaff1 1/P75+25％C16酯)，Hyaff303(Hyaff1 1/P75+25％C18酯)和Hyaff304(Hyaff1 1/P75+25％C20酯)的组合。本文所用的术语“P75”表示75％的HA羧酸酯基团被酯化。
在一些实施方案中，透明质酸包含透明质酸酰胺。透明质酸酰胺是透明质酸分子，其中透明质酸的至少一个羧酸根基团与胺酰胺化。在一些实施方案中，透明质酸酰胺是透明质酸的酰胺，其具有至少一种选自脂族，芳基-脂族，环脂族，芳族，环状和杂环胺的酰胺。在一些实施方案中，透明质酸酰胺的酰胺化百分比为约0.1至约50％。在一些实施方案中，剩余的非酰胺化HA用有机或无机碱成盐。参见欧洲专利No.1 095 064，其内容通过引用整体并入本文。在一些实施方案中，透明质酸酰胺由分子式(X)表示：
其中HA代表透明质酸，m是0-20的整数。在一些实施方案中，透明质酸酰胺选自Hyadd1(“HA+苄胺酰胺“)，
的组合。
在一些实施方案中，碳水化合物是水溶性的。在一些实施方案中，碳水化合物在胶束或反胶束中自组装。
在一些实施方案中，组合物是水凝胶的形式。
在一些实施方案中，肌腱长期受损并且在组织学上表现出退行性变化。在一些实施方案中，组织学变化表现为所述肌腱状况的恶化，恶化通过视觉模拟量表(“VAS”)，手臂，肩膀和手的残疾(“DASH”)问卷中，以及与患者相关的网球肘评估(“PRTEE”)问卷中的一个或多个方式所测量。
在一些实施方案中，骨腱连接表现出以下至少一种退行性特征：(i)胶原蛋白III相对于正常肌腱的增加，(ii)胶原蛋白I相对于正常肌腱的减少，(iii)相对于正常肌腱的可见的微撕裂增加，(iv)相对于正常肌腱的胶原微网络的解体增加，(v)相对于正常肌腱的成纤维细胞浸润的增加(即，肌腱的退化部分比非退化部分每个区域包含更多的成纤维细胞)，(vi)相对于正常肌腱的细胞变圆增加，(vii)相对于正常肌腱的血管增加，(viii)相对于正常肌腱的细胞增加，(ix))相对于正常肌腱的肌腱滑动阻力增加，和(x)相对于正常肌腱的暗灰色外观。
在一些实施方案中，组合物的施用物理地减少了生物力学干扰。在进一步的实施方案中，组合物的施用在生物化学上降低了生物力学干扰。
在一些实施方案中，组合物的施用导致所述肌腱的状况的改善，改善通过视觉模拟评分(“VAS”)，手臂，肩膀和手的残疾(“DASH”)问卷以及患者相关的网球肘评估(“PRTEE”)问卷调查中的一个或多个所测量。
在一些实施方案中，该组合物用于治疗网球肘。在进一步的实施方案中，该组合物用于治疗肩袖肌腱病，跟腱病，髌腱病，以及表1中提到的其他肌腱的肌腱病。
在一些实施方案中，所述组合物用于远离肌腱连接处的部位注射。
在一些实施方案中，组合物不通过肌腱周围或肌腱内注射施用。
在一些实施方案中，将组合物包装在注射器中。
在另一个方面，公开了使用包含碳水化合物的可注射组合物来治疗动物或人的受损肌腱，其中所述组合物包含有效量的碳水化合物，通过骨腱内注射或骨腱周注射所述组合物，使增加骨腱连接处的肌腱水合和润滑。
在一些实施方案中，组合物通过骨腱周围注射施用。在进一步的实施方案中，组合物通过骨腱内注射施用。
在一些实施方案中，碳水化合物含有至少一种选自硫醇，醇，胺，羧基，醛，酮，酯，酰胺及其组合的官能团。
在一些实施方案中，碳水化合物具有约10,000至约10,000,000道尔顿的分子量。在进一步的实施方案中，碳水化合物具有约300,000至约3,000,000道尔顿的分子量。在更进一步的实施方案中，碳水化合物具有约1,000,000至约3,000,000道尔顿的分子量。
在另一方面，公开了包含本文公开的组合物的注射器。
在另一方面，本文公开了包含本文公开的可注射组合物的试剂盒或包含本文公开的组合物的注射器和使用所述组合物的说明书。
另一方面，本文公开了将本文公开的可注射组合物施用给有需要的受试者。
另一方面，本文公开了一种治疗受试者中受损肌腱的方法，该方法包括：将本文公开的包含有效量的碳水化合物的可注射的组合物，通过在骨腱内或骨腱周围注射施用给对其有需要的受试者。
在一些实施方案中，该方法增加骨腱水合和润滑。
在一些实施例中，该方法增加了受试者的运动范围。在一些实施例中，运动范围通过视觉模拟评分(“VAS”)，手臂，肩部和手部(“DASH”)问卷调查以及患者相关的网球肘评估(“PRTEE“)调查问卷中的一个或多个来评定。
在一些实施方案中，该方法不限制受试者的运动。
在一些实施方案中，在所述受试者中运动疼痛减少。
在一些实施方案中，患者对患者预后的满意度增加。在一些实施方案中，医生对患者预后的满意度增加。
在一些实施方案中，注射包括单次注射。
在一些实施方案中，该方法包括在不同时间多次注射所述组合物。
在一些实施方案中，该方法包括第一次注射所述组合物和第二次注射所述组合物，其中第二次注射在第一次注射后5至10天施用。在进一步的实施方案中，在第一次注射后一周施用第二次注射。
在一些实施方案中，注射包括扇形注射。在进一步的实施方案中，Pep注射。根据一些实施方案，用于注射的针将具有约22-27的规格，更特别地约25-27。
在一些实施方案中，该方法还包括在注射后立即进行注射后关节操作。在一些实施方案中，该方法还包括注射后一周至六个月的注射后关节操作，更特别是注射后一周至五个月，并且在一些情况下，注射后一周至四个月。在进一步的实施例中，注射后关节操纵包括横向旋转，内侧旋转，弯曲和伸展中的至少一个。在一些实施方案中，注射部位在注射后立即或在恢复和康复期间定期进行按摩。
附图的简要说明
提供以下附图仅用于说明的目的，而不是限制性的。
图1显示了本文公开的用于治疗肘肌腱病的组合物的骨腱内或骨腱周围注射的示例性实施方案的示意图。
图2显示了本文公开的用于治疗肩袖肌腱病变的组合物的骨腱内或骨腱周围注射的示例性实施方案的示意图。
图3提供了条形图，其显示与注射盐水或透明质酸钠浸润相比，注射透明质酸钠可以改进肌腱生物力学。
图4显示注射透明质酸或盐水后猪肌腱的组织学染色(H&E)。
图5提供了在各种碳水化合物作用下的肌腱细胞增殖的条形图。
图6提供了显示碳水化合物对肌腱细胞胶原蛋白I产生的影响的条形图。
图7提供了显示碳水化合物对肌腱细胞胶原蛋白III产生的影响的条形图。
具体实施方式
本公开涉及用于治疗肌腱退化的方法和可注射组合物。更具体地，本公开涉及用于通过骨腱内或骨腱周注射治疗人或动物的肌腱退化的方法和可注射组合物。所公开的可注射组合物包括碳水化合物，其可增加肌腱骨界面处的肌腱水合和润滑。此外，碳水化合物的存在使该区域产生渗透势差异，从而导致水进入该环境。
本公开涉及治疗因过度使用所导致的骨腱连接处的肌腱退化。“骨腱连接处”是指肌腱附着于骨骼之处并且是机械应力集中的解剖位置。过度使用的结果是，退化可以通过，例如，过度使用诱导的微撕裂和/或在肌腱骨的肌腱组织良好且对齐的I型纤维内形成胶原III原纤维来表征。胶原III原纤维的形成破坏并干扰最高应力集中位置(即，骨腱连接处)的正常生物力学(例如，滑动阻力，抗偏移)，从而改变该部位的正常应力分布和生物力学。由于不自然的应力状态，进一步的运动导致应力越来越集中，导致更大的微撕裂和/或退化。因此，随着每次运动，骨腱连接处肌腱的机械性能继续恶化，退化增加，最终达到足以引起疼痛和功能丧失的程度。肌腱病的现有技术治疗集中于将肌腱固定在肌腱连接处，包括使用结构支撑，夹板和其它不能解决骨腱连接处受损生物力学的手段。事实上，这些治疗由于它们在肌腱连接处施用，此处的肌腱不退化(在骨腱连接处发生退化)，寻求稳定肌腱连接处的健康肌腱，限制运动并防止健康的肌腱退化。重要的是，并且次优地，这些治疗不能修复骨腱连接处的退化肌腱。另外，限制患者的运动可能是不方便的。
本发明人惊奇地发现，通过特别为肌腱-骨界面提供水合和润滑性来获得优异的结果，以减少生物力学干扰(例如，肌腱原纤维滑动阻力，抗偏移)。特别地，通过用具有高渗透势的流体保持介质(例如，水凝胶)使骨腱连接处饱和，减少生物力学干扰(例如，滑动阻力，抗偏移)并且产生更正常的应力分布，从而允许股腱连接处退化的肌腱在无需固定肌腱即可恢复，减轻疼痛和恢复功能。根据某些方面，本公开涉及在最大应变/生物力学应力区域(例如，骨腱连接处)，通过润滑和水合退化组织(例如肌腱)以减轻胶原蛋白解体的方法。与专注于肌腱未退化的肌腱连接处的治疗的现有技术不同，本文公开的本方法和组合物涉及治疗骨腱连接处，即最大生物力学应力点和随后导致的肌腱退化。本文公开的肌腱病治疗有利于退化肌腱的运动，而不是进一步限制健康肌腱的运动，从而提供优于现有技术治疗的改善结果。特别是本文公开的组合物和方法提供增加的运动，减少的疼痛和更好的患者便利性，依从性和结果，因为患者不应经历内部或外部固定。不希望受理论束缚，发明人认为本文公开的可注射组合物和方法中使用的碳水化合物通过在插入点处产生高渗透势的环境而发挥润滑作用，保护肌腱免受切力，扭转，张力和压缩力，增强碳水化合物和天然存在于受损肌腱周围的软组织中的其他组分的作用，并为受影响的部位提供润滑和水合作用，从而为受损组织的愈合提供有利的环境。此外，发明人认为通过减少由胶原III原纤维和/或胶原蛋白I的存在引起的摩擦，而产生更正常的应力分布，这通过特别是在注射区域增加肌束分离来实现，这减轻了退化，疼痛和恢复功能，从而使退化肌腱恢复。发明人已经发现，本文公开的可注射组合物和方法还可以促进通过渗透微裂纹来恢复胶原蛋白I排列的自然运动，以促进I型胶原的形成，而不是退化组织中存在的较弱的III型胶原。本文公开的可注射组合物和方法减轻了对支撑或固定的需要，无论是内部还是外部，并且与皮质类固醇激素不同，不会有造成肌腱断裂的风险。此外，本文公开的可注射组合物和方法可以在基于诊所的程序中施用，具有短等待期和持久效果，与手术相比提供了更划算的取代方案，例如用于晚期肌腱病患者。
本文使用的术语“治疗”等通常是指试图获得所需的药理学和/或生理学效果。该效果可以是预防性的完全或部分的预防或延缓其病症或症状的发作和/或可以是治疗性的使该病症或症状的部分或完全的稳定，改善或补救。
术语“骨腱连接”，“OTJ”，“肌腱-骨界面”和“引体”在本文中可互换使用，并且指的是肌腱和骨之间的连接部位。OTJ提供从腱到骨组织的逐渐过渡，并且实际上可以分为四个区域：(1)区域1，从肌腱侧开始，包括对齐的胶原蛋白I纤维和核心蛋白聚糖，并且展示肌腱生物力学性质；(2)第二区包括II型和III型胶原蛋白，聚集蛋白聚糖和核心蛋白聚糖，类似于纤维软骨组合物；(3)区域3包括矿化纤维软骨，由II型和X型胶原蛋白和聚集蛋白聚糖组成；(4)区域4包括I型矿化胶原，被认为是骨突起，提供专用的连接点。
本文所用的术语“碳水化合物”是指由碳，氢和氧组成的多羟基醛和酮。碳水化合物包括糖，糖类(如单糖，二糖和多糖)，淀粉和纤维素。示例性的碳水化合物包括透明质酸，脱乙酰壳多糖，明胶，葡聚糖，藻酸盐，羧甲基纤维素和它们的交联类似物。在一些实施方案中，如本文所用的术语“碳水化合物”包括多肽，例如胶原，明胶及其类似物。
如本文所用的术语“生物力学干扰”是指具有正常运动的物理阻力，其可导致疼痛，不适和/或减小的运动范围。在一些实施方案中，生物力学干扰是增加的肌腱原纤维滑动阻力，和/或相对于正常肌腱的增加的抗偏移性。
如本文所用，术语“药学上可接受的载体”是指本领域熟知的任何和所有溶剂，分散介质，包衣，抗细菌和抗真菌剂，等渗溶液，冷冻保护剂和药物活性物质的吸收延迟剂。如本文所用，术语“药物”或“药剂”包括生物药物，例如小分子，蛋白质，肽和寡核苷酸。除非任何常规介质或试剂与试剂不相容，否则可考虑将其用于治疗药物组合物中。补充化合物或生物药物也可以掺入药物组合物中。
表述“治疗有效量”是指本文公开的药剂的量，其有效预防，改善，治疗，治疗或延迟疾病或病症的发作。
本文所用的术语“患者”是指人和非人，例如灵长类动物，宠物和家畜。
本文公开的药物组合物可以施用于，能够在本文公开的方法和组合物中取得有益效果的任何动物。这些动物包括人类和非人类，如灵长类动物，宠物和家禽。
如本文所用的术语“骨腱内”是指骨腱连接处的肌腱内部。
本文所用的术语“骨腱周围”是指骨腱连接处的肌腱周围。
本文所用的术语“退行性病症”是指表现出至少一种本文所述的退化变化的肌腱。还可以基于组织学变化，症状持续时间和本领域普通技术人员已知的其他临床标准(例如，VAS，PRTEE，DASH评分)来鉴定退行性病症。
本文所用的术语“肌腱水合”是指增加肌腱的水含量。
本文所用的术语“肌腱润滑”是指减少肌腱生物力学干扰(例如，肌腱原纤维滑动阻力，抗偏移力)。
本文所用的术语“自交联”是指一个HA分子的羧酸酯基团与相同或不同HA分子的醇基团反应形成酯。
如本文所用的术语“慢性损伤的肌腱”是指表现出本文所述的至少一种退化变化的肌腱。还可以基于组织学变化，症状持续时间和本领域普通技术人员已知的其他临床标准(例如，VAS，PRTEE，DASH评分)来鉴定退行性病症。
本文所用的术语“退行性变化”是指如下特征：(i)胶原蛋白III相对于正常肌腱的增加，(ii)胶原蛋白I相对于正常肌腱的减少，(iii)可见微撕裂的增加相对于正常肌腱，(iv)相对于正常肌腱的胶原微网络的解体增加，(v)相对于正常肌腱的成纤维细胞浸润的增加(即，肌腱的退化部分每个区域包含更多的成纤维细胞)(vi)相对于正常肌腱的细胞变圆增加，(vii)相对于正常肌腱的血管增加，(viii)相对于正常肌腱的细胞增加，(ix)相对于正常肌腱的肌腱滑动阻力增加，和(x)相对于正常肌腱的暗灰色外观。在一些实施方案中，可以基于临床评估(例如，VAS，PRTEE，DASH评分)确定退行性变化。
如本文所用的术语“功能恢复”是指临床上的改善，通过临床实施例中的任何评分(例如DASH，PRTEE，VAS等)所确定的。
本文所用的术语“干细胞”是指在适当条件下(例如，在组织特异性分化培养基存在下)能够分化成至少骨，软骨和脂肪组织的能力的细胞。
术语“体细胞”是指除干细胞外的任何其他细胞。
目标患者档案
本公开的方法和可注射组合物对于治疗肌腱退化是有效的。某些现有技术的治疗方法被限制或仅显示对具有高频率肌腱使用的患者有效(例如，网球运动员和其他运动员)，与这些方法不同，本文公开的方法和组合物对于治疗整个范围的患者都是有效的。无论这些患者如何使用他们的肌腱。在一些实施方案中，肌腱退化表现为肌腱病变。在一些实施方案中，肌腱病变是外侧和/或内侧上髁。在一些实施方案中，肌腱退化表现为肩袖肌腱病，跟腱病，髌腱病，以及表1中提及的其他肌腱的肌腱病。在一些实施方案中，本文所述的方法和可注射组合物对于治疗导致骨腱连接处的肌腱退化的退行性过程中特别有效。在一些实施方案中，本公开的方法和可注射组合物提供由天然生物力学促进的修复过程。
本文公开的方法和可注射组合物对于治疗表现出退行性特征的肌腱是有效的。在一些实施方案中，通过本文公开的可注射组合物和方法治疗的肌腱的退行性特征在组织学上被鉴定，限定或量化。在一些实施方案中，组织学变化表现为：1)与未患病患者相比疼痛增加；2)与未患病患者相比功能下降；或者3)所述肌腱状况的恶化通过视觉模拟评分(“VAS”)，手臂，肩部和手部(“DASH”)问卷以及患者相关的网球肘测量的评估(“PRTEE”)问卷中的一个或多个测量。在一些实施方案中，通过本公开的方法和可注射组合物治疗的肌腱在骨腱连接处表现出一种或多种以下退行性特征：(i)胶原蛋白III相对于正常肌腱增加，(ii)胶原蛋白I相对于正常肌腱减少，(iii)相对于正常肌腱的微撕裂可见增加，(iv)相对于正常肌腱的胶原微网络的解体增加，(v)成纤维细胞浸润相对于正常肌腱增加，(vi)相对于正常肌腱的细胞变圆增加，(vii)相对于正常肌腱的血管增加，(viii)相对于正常肌腱的细胞增加，(ix)相对于正常肌腱的肌腱滑动阻力增加，和(x)相对于正常肌腱的暗灰色外观。在一些实施方案中，通过本文公开的可注射组合物和方法治疗的肌腱的退行性特征在临床上被鉴定，限定或量化，例如通过使用视觉模拟量表(“VAS”，例如10cm量表，0表示没有痛苦，10表示最大痛苦)，通过使用手臂，肩膀和手部问卷(“DASH”，例如5点分类量表，1表示功能和/或活动没有变化，5表示功能和/或活动最大变化)，通过患者评分的网球肘评估(“PRTEE”)问卷(例如10点分类量表，1分表示没有疼痛和/或执行任务有困难，10代表最难以想象的痛苦和/或无能力执行任务)。通过患者对伤害的全面评估(例如5点分类量表，1代表无残疾，5代表最大残疾)，通过患者对正常功能和/或活动的评估(例如5点分类量表，其中1表示功能和/或活动没有变化，5表示正常功能和/或活动的最大变化)，由医生的全局损伤评估(例如5点分类量表，1表示损伤对功能没有影响，5表示损伤对功能影响最大)，通过患者或医师的满意度评估(例如10点分类量表，1分表示对过程不满意，10表示对过程非常满意)，通过回顾患者日记和恢复疼痛以及无障碍运动或其组合。
在一些实施方案中，本文公开的可注射组合物可用于治疗表1中列出的一个或多个肌腱的肌腱病变：
表1
在一些实施方案中，可注射组合物用于治疗肘的外侧或内侧上髁的肌腱病。在一些实施方案中，可注射组合物用于治疗肩袖肌腱，跟腱或髌腱的肌腱病。
施用途径
本公开内容部分涉及通过骨腱内或骨腱周注射施用本文公开的组合物。
为了准备用于治疗患者的肌腱病的注射剂，在骨腱连接处周围触诊肌腱。该位置是肌腱附着于骨骼的区域中应力集中最高的部位。正是这种压力在硬组织界面处的浓度使得肌腱易于进一步退化并最终破裂。该位置可以根据位置和患者而在面积上变化，但是肌腱与骨骼连接的位置。
一旦确定骨腱连接，就确定注射部位。在一些实施方案中，注射部位直接位于骨腱连接处上方。在进一步的实施方案中，注射部位距离骨腱连接处正上方的近端点小于约0.50cm。在更进一步的实施方案中，注射部位距离骨腱连接处正上方的近端点小于约1.00cm。在更进一步的实施方案中，注射部位小于约0.10cm，小于约0.20cm，小于约0.30cm，小于约0.40cm，小于约0.50cm，小于约0.60cm，小于约0.70cm。距离骨腱连接处正上方的近端点小于约0.80cm，小于约0.90cm，或小于约1.00cm。在一些实施方案中，注射部位远离肌腱连接处(即，肌腱与肌肉相遇的地方)。在一些实施方案中，注射部位距外上髁超过1.00cm。在一些实施方案中，使用二维框架技术定位注射部位。
一旦识别出注射部位，将针头插入注射部位的皮肤并注射组合物。在一些实施方案中，将针插入骨腱连接处上方的骨周骨质空间中，并将组合物注射到骨腱连接结上方的骨周骨质空间中。在进一步的实施方案中，将针头骨内插入骨腱连接处，并将组合物注射到骨腱连接处的肌腱中。在更进一步的实施方案中，将针在骨腱连接处近端骨内插入，并将组合物注射到骨腱连接处附近的肌腱中。在一些实施方案中，将组合物注射到距离骨腱连接处的近端点小于约0.50cm的肌腱中。在一些实施方案中，将组合物注射到距离骨腱连接处的近端点小于约1.00cm的肌腱中。在一些实施方案中，将组合物注射到肌腱中小于约0.10cm，小于约0.20cm，小于约0.30cm，小于约0.40cm，小于约0.50cm，小于约0.60cm，小于约距离骨腱连接处的近端点0.70cm，小于约0.80cm，小于约0.90cm，或小于约1.00。在一些实施方案中，将组合物注射到外上髁的近侧。在一些实施方案中，将组合物注射到距外上髁小于约1.00cm的肌腱中。在一些实施方案中，将组合物注射到肌腱中小于约0.10cm，小于约0.20cm，小于约0.30cm，小于约0.40cm，小于约0.50cm，小于约0.60cm，小于约离外上髁的0.70cm，小于约0.80cm，小于约0.90cm，或小于约1.00。
由于组合物可以占据的体积是有限的，因此可以使用几种注射技术来增加注射体积和覆盖率。例如，对于骨质周围注射，一旦将针插入皮肤下，针可以被扇形化(例如，在分配一部分组合物时将针插入并稍微拉回；然后将针旋转90-180度(“扇形”)并注入组合物的其余部分。另一种技术是在骨腱连接处“胡椒化”多次注射，在骨膜周围或骨内注射，在每个注射部位注射一部分组合物。在一些实施方案中，注射部位处于疼痛区域。在进一步的实施方案中，大多数疼痛的区域是多次注射。在一些实施方案中，注射部位位于疼痛区域的远侧。在进一步的实施方案中，注射部位靠近疼痛区域。在一些实施方案中，组合物以单次注射施用。在一些实施方案中，在一天至一个月的一段时间后重复注射。在一些实施方案中，在一周的时间后重复注射。在一些实施方案中，在两周后重复注射。在一些实施方案中，在三周的时间后重复注射。在一些实施方案中，在多个深度提供注射。
各种针规可以与本公开结合使用。使用较小规格的针可用于最小化注射期间的组织创伤和患者不适。在一些实施例中，可用于本公开的针小于18规格。在进一步的实施方案中，可用于本公开的针小于20规格。在更进一步的实施方案中，可用于本公开的针小于22规格。在更进一步的实施方案中，可用于本公开的针小于25规格。在更进一步的实施方案中，可用于本公开的针小于27规格。
在一些实施方案中，可注射组合物以单次注射递送。在一些实施方案中，可注射组合物以两次注射递送。在一些实施方案中，可注射组合物以三次注射递送。在一些实施方案中，可注射组合物以四次注射递送。在一些实施方案中，可注射组合物以五次注射递送。在一些实施方案中，同时施用注射剂。在进一步的实施方案中，非同时施用注射剂。在一些实施方案中，非同期施用包括约一天至约六个月的时期。在一些实施方案中，非同期施用包括约一周的时期。在一些实施方案中，非同期施用包括每周注射。在一些实施方案中，非同期施用包括每隔一天注射一次。
可以结合本公开注射各种体积的组合物。由于待治疗组织的空间限制，注射的体积不会引起患者的不适可能受到限制。在一些实施方案中，注射少于约10.0mL的组合物。在进一步的实施方案中，注射少于约9.0mL的组合物。在进一步的实施方案中，注射少于约8.0mL的组合物。在进一步的实施方案中，注射少于约7.0mL的组合物。在进一步的实施方案中，注射少于约6.0mL的组合物。在一些实施方案中，注射少于约5.0mL的组合物。在进一步的实施方案中，注射少于约4.0mL的组合物。在进一步的实施方案中，注射少于约3.0mL的组合物。在进一步的实施方案中，注射少于约2.0mL的组合物。在进一步的实施方案中，注射少于约1.0mL的组合物。在进一步的实施方案中，注射少于约0.8mL的组合物。在进一步的实施方案中，注射少于约0.5mL的组合物。在进一步的实施方案中，注射少于约0.4mL的组合物。在进一步的实施方案中，注射少于约0.3mL的组合物。在进一步的实施方案中，注射少于约0.2mL的组合物。在进一步的实施方案中，注射少于约0.1mL的组合物。
在一些实施方案中，每次注射包括约1mL的可注射组合物。在一些实施方案中，每次注射包括约2mL的可注射组合物。在一些实施方案中，每次注射包括约3mL的可注射组合物。在一些实施方案中，每次注射包括约4mL的可注射组合物。在一些实施方案中，每次注射包括约5mL的可注射组合物。在一些实施方案中，每次注射包括约6mL的可注射组合物。在一些实施方案中，每次注射包括约7mL的可注射组合物。在一些实施方案中，每次注射包括约8mL的可注射组合物。在一些实施方案中，每次注射包括约9mL的可注射组合物。在一些实施方案中，每次注射包括约10mL的可注射组合物。在一些实施方案中，注射的可注射组合物的总体积为约1mL。在一些实施方案中，注射的可注射组合物的总体积为约2mL。在一些实施方案中，注射的可注射组合物的总体积为约3mL。在一些实施方案中，注射的可注射组合物的总体积为约4mL。在一些实施方案中，注射的可注射组合物的总体积为约5mL。在一些实施方案中，注射的可注射组合物的总体积为约6mL。在一些实施方案中，注射的可注射组合物的总体积为约7mL。在一些实施方案中，注射的可注射组合物的总体积为约8mL。在一些实施方案中，注射的可注射组合物的总体积为约9mL。在一些实施方案中，注射的可注射组合物的总体积为约10mL。
在一些实施方案中，在注射本文公开的组合物之前，在注射部位处或周围施用镇痛剂。在一些实施方案中，镇痛药是利多卡因。在一些实施方案中，患者被麻醉。在一些实施方案中，注射在成像指导(例如，荧光镜检查，超声)下进行。
制备方法
对于本领域技术人员而言，制备具有一定量活性成分的各种组合物的方法是已知的，或者根据本公开内容将是显而易见的。制备所述组合物的方法可以根据Remington'sPharmaceutical Sciences，Martin，E.W.，ed.，Mack Publishing Company，19th ed(1995)中所述掺入其它合适的药物辅料及其制剂。
本领域普通技术人员将理解，向有需要的患者施用有效量的本文公开的可注射组合物的方法可以凭经验确定，或者通过医学领域中目前公认的标准确定。本文公开的组合物可以作为组合物施用于患者与一种或多种药学上可接受的辅料组合。应当理解，当给予人类患者时，本文公开的组合物的每日总用量将在主治医师的合理医学判断的范围内确定。任何特定患者的特定治疗有效剂量水平将取决于多种因素：要达到的反应的类型和程度；所用特定组合物的活性；所用的具体成分；患者的年龄，体重，一般健康状况，性别和饮食；给药时间，组合物或其组分的排泄率；治疗的持续时间；与特定成分组合或巧合使用的药物；以及医学领域众所周知的因素。本领域技术人员完全能够以低于实现所需治疗效果的剂量开始本文公开的组合物的剂量，并逐渐增加剂量直至达到所需效果。
还可以以患者特异性方式确定给药以在治疗区域中提供预定浓度的组合物，如通过本领域接受的技术和常规技术确定的。
剂量测定
通常，本文公开的可注射组合物可以以常规测试所定义的适当剂量单独使用或与其他治疗剂一起使用，以获得最佳功效同时使任何潜在毒性最小化。利用本文公开的可注射组合物的给药方案可根据多种因素进行选择，包括患者的类型，种类，年龄，体重，性别，医疗状况；待治疗病情的严重程度；给药途径；和使用的特定可注射组合物。具有普通技能的医生或兽医可以容易地确定和指定，预防，对抗或抑制病症进展所需的可注射组合物的有效量。
碳水化合物
本公开的可注射组合物包含碳水化合物。各种碳水化合物可以与本公开结合使用。在一些实施方案中，碳水化合物的注射提供润滑和水合作用。在一些实施方案中，碳水化合物是透明质酸，壳聚糖，明胶，葡聚糖，藻酸盐，羧甲基纤维素及其组合。在一些实施方案中，本文公开的碳水化合物具有约10,000至约10,000,000道尔顿的分子量。在进一步的实施方案中，本文公开的碳水化合物具有约300,000至约3,000,000道尔顿的分子量。在更进一步的实施方案中，本文公开的碳水化合物具有约1,000,000至约3,000,000道尔顿的分子量。在一些实施方案中，碳水化合物在灭菌后具有至少约3,000,000道尔顿的分子量。
在一些实施方案中，可注射组合物包含至少约1mg的碳水化合物。在一些实施方案中，可注射组合物包含至少约5mg的碳水化合物。在一些实施方案中，可注射组合物包含至少约10mg的碳水化合物。在一些实施方案中，可注射组合物包含至少约20mg的碳水化合物。在一些实施方案中，可注射组合物包含少于约100mg的碳水化合物。在一些实施方案中，可注射组合物包含少于约80mg的碳水化合物。在一些实施方案中，可注射组合物包含少于约60mg的碳水化合物。在一些实施方案中，可注射组合物包含少于约50mg的碳水化合物。在一些实施方案中，可注射组合物包含少于约40mg的碳水化合物。在一些实施方案中，可注射组合物包含少于约30mg的碳水化合物。在一些实施方案中，可注射组合物包含少于约20mg的碳水化合物。在一些实施方案中，可注射组合物包含少于约10mg的碳水化合物。在一些实施方案中，可注射组合物包含少于约5mg的碳水化合物。在一些实施方案中，可注射组合物包含约20mg至约80mg的碳水化合物。在一些实施方案中，可注射组合物包含约24mg的碳水化合物。在一些实施方案中，可注射组合物包含约30mg的碳水化合物。在一些实施方案中，可注射组合物包含约40mg的碳水化合物。在一些实施方案中，可注射组合物包含约60mg的碳水化合物。在一些实施方案中，可注射组合物包含约80mg的碳水化合物。
在一些实施方案中，可注射组合物以单剂量提供。在一些实施方案中，可注射组合物以多剂量提供。
在一些实施方案中，可注射组合物包含浓度为约1-100mg/mL的碳水化合物。在进一步的实施方案中，可注射组合物包含浓度为约1-50mg/mL的碳水化合物。在进一步的实施方案中，可注射组合物包含浓度为约2-30mg/mL的碳水化合物。在进一步的实施方案中，可注射组合物包含浓度为约5-30mg/mL的碳水化合物。在进一步的实施方案中，可注射组合物包含浓度为约12.5-17.5mg/mL的碳水化合物。在进一步的实施方案中，可注射组合物包含浓度为约1-20mg/mL的碳水化合物。在进一步的实施方案中，可注射组合物包含浓度为约1-10mg/mL的碳水化合物。在进一步的实施方案中，可注射组合物包含浓度为约1-5mg/mL的碳水化合物。
在一些实施方案中，碳水化合物以约0.01μM至约100mM的浓度存在于组合物中。在进一步的实施方案中，碳水化合物以约0.01mM至约50mM的浓度存在于组合物中。在进一步的实施方案中，碳水化合物以约0.1mM至约25mM的浓度存在于组合物中。在进一步的实施方案中，碳水化合物以约0.01mM至约10mM的浓度存在于组合物中。在进一步的实施方案中，碳水化合物以约1mM至约10mM的浓度存在于组合物中。在一些实施方案中，碳水化合物以约0.01μM至约1mM的浓度存在于组合物中。在进一步的实施方案中，碳水化合物以约0.1μM至约500μM的浓度存在于组合物中。在进一步的实施方案中，碳水化合物以约1μM至约250μM的浓度存在于组合物中。在进一步的实施方案中，碳水化合物以约1μM至约100μM的浓度存在于组合物中。在进一步的实施方案中，碳水化合物以约1μM至约50μM的浓度存在于组合物中。
在一些实施方案中，本文公开的碳水化合物和/或可注射组合物是灭菌和/或无菌加工的。可以使用本领域已知的常规灭菌程序完成灭菌。在一些实施例中，碳水化合物和/或可注射组合物通过环氧乙烷灭菌，辐射(例如γ辐射)，过氧化氢灭菌，加热灭菌，无菌过滤和本领域已知的其他此类方法灭菌。在一些实施方案中，加热灭菌通过高压灭菌器完成。在进一步的实施方案中，加热灭菌通过蒸汽灭菌完成。在一些实施方案中，在灭菌期间使用压缩空气的注入来人为地升高压力并防止沸腾。在进一步的实施方案中，无菌碳水化合物和/或可注射组合物可通过使用所有无菌组分并在无菌条件下进行所有反应和操作而获得。在一些实施方案中，碳水化合物和/或可注射组合物是蒸汽灭菌的。在一些实施方案中，碳水化合物和/或可注射组合物是无菌过滤的。
根据某些实施方案，碳水化合物可含有官能团。有用的官能团的实例包括：硫醇，醇，胺，醛，酰胺，酯，酮和羧基基团。
在一些实施方案中，碳水化合物是交联的。交联是指通过交联剂将线性碳水化合物彼此连接。
在一些实施方案中，通过衍生化碳水化合物的官能团来完成交联。在一些实施方案中，碳水化合物的至少一部分官能团各自独立地衍生化。在一些实施方案中，碳水化合物的至少一部分羧基基团被官能化以包括N-酰基脲或O-酰基异脲，或N-酰基脲和O-酰基异脲。N-酰基脲和O-酰基异脲衍生物显示在以下结构式(I)和(II)的括号中的片段：
在结构式(I)和(II)中，每个R1可以相同或不同。每个R1选自由氢；取代或未取代的烃基基团(直链或支链，或环状或非环状)，任选地被一个或多个杂原子间隔；取代或未取代的烷氧基；取代或未取代的芳氧基；和取代或未取代的芳烷氧基组成的组。取代或未取代烃基基团(直链或支链，或环状或无环)的实施例，任选地被一个或多个杂原子间隔包括任选地取代的脂族基团(例如，烷基，链烯基，炔基，环烷基，环烯基，环炔基和环脂基烷基)；任选地取代的芳基(包括杂芳基)；任选的取代的脂族被一个或多个杂原子间隔(例如，杂环基，环脂基烷基和杂环基烷基)；和任选的取代的，部分芳族和部分脂族基团的组合(例如芳烷基和杂芳烷基)。合适的任选的取代基基本上不会干扰所得交联碳水化合物组合物的性质。烃基基团碳原子的合适取代基包括-OH，卤素(-Br，-Cl，-I，-F)，ORa,-O-CORa,-CORa,-CN,-NCS,-NO2,-COOH,-SO3H,-NH2,-NHRa-N(RaRb),-COORa,-CHO,-CONH2,-CONHRa,-CON(RaRb),-NHCORa,-NRbCORa,-NHCONH2,-NHCONRaH,-NHCON(RaRb),-NRbCONH2,-NRbCONRaH,-NRcCON(RaRb),-C(＝NH)-NH2,-C(＝NH)-NHRa,-C(＝NH)-N(RaRb),-C(＝NRc)-NH2,-C(＝NRc)-NHRa,-C(＝NRc)-N(RaRb),-NH-C(＝NH)-NH2,-NH-C(＝NH)-NHRa,-NH-C(＝NH)-N(RaRb),-NH-C(＝NRc)-NH2,-NH-C(＝NRc)-NHRa,-NH-C(＝NRc)-N(RaRb),-NRdH-C(＝NH)-NH2,-NRd-C(＝NH)–N(RaRb),-NRd-C(＝NRc)-NH2,-NRd-C(＝NRc)-NHRa,-NRd-C(＝NRc)-N(RaRb),-NHNH2,-NHNHRa,-NHRaRb,-SO2NH2,-SO2NHRa,-SO2NRaRb,-SH,-SRa,-S(O)Ra,和-S(O)2Ra。另外，烷基，亚烷基，链烯基或亚烯基基团可以被取代或未取代的芳基基团取代形成，例如，芳烷基基团如苄基。类似地，芳基基团可以被取代或未取代的烷基或链烯基取代。
Ra-Rb是各自独立地烷基，芳基，包括杂芳基，非芳族杂环基或-N(RaRb)，一起形成取代或未取代的非芳香族杂环基基团。由Ra-Rb表示的烷基，芳族和非芳族杂环基团和由-N(RaRb)表示的非芳族杂环基团可任选地被取代。
在其他实施方案中，R1是任选地取代的脂族基团(环状或非环状，或直链或支链)。在一些实施方案中，R1是烷基基团，例如C1-C6烷基(例如甲基，乙基，丙基，丁基，2-丙基，叔丁基等)。在一些实施方案中，每个R1是乙基。
每个R2独立地是取代或未取代的连接基团，包括一个或多个任选被一个或多个杂原子中断的亚烃基基团(环状或非环状，或直链或支链)。实例包括任选取代的脂族基团(例如亚烷基，亚烯基，亚炔基，亚环烷基，亚环烯基，环亚炔基和环丙基二烯烃)；任选取代的亚芳基(包括杂芳基)；被一个或多个杂原子间隔的任选取代的脂族基团(例如，亚杂环基，环戊二烯基和杂环基亚烷基)；和任选取代的，部分芳族和部分脂族的基团(例如，亚芳烷基和杂亚芳烷基)。以上针对R 1描述了某些合适的任选取代基。
在一些实施方案中，R2包括其他基团或被其他基团中断，例如羰基，酰胺，氧基，硫化物，二硫化物等。在其他实施方案中，R2是脂环族，亚芳基，亚杂芳基或亚杂环基基团。在其他实施方案中，R2是1,6-六亚甲基，八亚甲基，十亚甲基，十二亚甲基，PEG，-CH 2CH 2-S-S-CH 2CH 2-，对-亚苯基-S-S-对-亚苯基，间-亚苯基-S-S-间-亚苯基，邻-亚苯基-S-S-邻-亚苯基，邻-亚苯基，间-亚苯基或对-亚苯基。在一些实施方案中，R 2是亚苯基。在进一步的实施方案中，R2是对-亚苯基。
在一个实施方案中，在结构式(I)和(II)中与R2连接的波浪线表示氢，取代或未取代的烃基基团(直链或支链，或环状或非环状)，任选被一个或多个杂原子中断；烷氧基；芳氧基；或芳烷基氧基，如R1所描述。在另一个实施方案中，结构式(I)和(II)中与R2连接的波浪线表示任选取代的N-酰基脲基或O-酰基异脲基，如下面结构式VI-VIII中所示。
在一些实施方案中，通过使碳水化合物与碳二亚胺反应制备改性的碳水化合物衍生物。在一些实施方案中，碳二亚胺是多官能碳二亚胺。在进一步的实施方案中，碳二亚胺是双碳二亚胺(“BCDI”)。
合适的碳二亚胺的实例包括单碳二亚胺和多官能碳二亚胺，例如双碳二亚胺。单碳二亚胺具有化学式：
R3-N＝C＝N-R4 (III)
其中R3和R4各自独立地如上对R1所述(例如，烃基，取代的烃基，烷氧基，芳氧基或烷芳氧基)。适合的单碳二亚胺实例包括：1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐(EDC)；1-环己基-3-(2-吗啉代乙基)碳二亚胺甲基对甲苯磺酸盐(CMC)；1-(3-(二甲基氨基)丙基)-3-乙基碳二亚胺甲基碘(EAC)；1,3-二环己基碳二亚胺(DCC)；和1-苄基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(BDC)。
合适的双碳二亚胺的实例可以由具有下式的双官能化合物表示：
R1-N＝C＝N-R2-N＝C＝N-R1 (IV)
每个R1可以不同或相同。R1和R2各自独立地如上所述。双碳二亚胺的合适具体实例包括1,6-己二烯亚乙基双(乙基碳二亚胺)，1,8-亚甲基双(乙基碳二亚胺)，1,10十亚甲基双(乙基碳二亚胺)，1,12十二亚甲基双(乙基碳二亚胺)，PEG-双(丙基)(乙基碳二亚胺))，2,2'-二硫代-双(乙基(乙基碳二亚胺))，1,1'-二硫代-邻-亚苯基-双(乙基碳二亚胺)，1,1'-二硫代-对-亚苯基-双(乙基碳二亚胺)和，1,1'-二硫代–间-亚苯基双(乙基碳二亚胺)。在一些实施例中，双碳二亚胺是对-亚苯基-双(乙基碳二亚胺)。制备双碳二亚胺的方法，描述于，例如，美国专利No.6,013,679；2,946,819；3,231,610；3,502,722；3,644,456；3,972,933；4,014,935；4,066,629；4,085,140；4,096,334；4,137,386,6,548,081,和6,620,927的内容通过引用整体并入本文。
在一些实施方案中，交联剂包含二乙烯基砜。在进一步的实施方案中，交联剂包含二环氧交联剂。在一些实施方案中，交联剂包含丁二醇二环氧(“BDDE”)交联剂。在一些实施方案中，交联剂包含丁二醇二缩水甘油醚(“BDGE”)交联剂。在一些实施方案中，交联剂包含1,4-丁二醇二缩水甘油醚。在一些实施方案中，交联剂选自二醛交联剂，二酐交联剂，二酰基卤素交联剂，二甲基丙烯酸酐交联剂和二丙烯酸酐交联剂的组合。
在一些实施方案中，碳水化合物是自交联的。在一些实施方案中，碳水化合物通过使用碳二亚胺进行自交联。
在一个实施方案中，碳水化合物衍生物是交联的。在另一个实施方案中，碳水化合物衍生物至少约1％摩尔交联，并且碳水化合物衍生物包括至少一个交联，例如通过每个末端的基团U连接到碳水化合物分子的连接基团，如下结构式(V)所示：
碳水化合物-U-R2-U-碳水化合物 (V)
在进一步的实施方案中，碳水化合物衍生物在交联的0％至20％摩尔之间。在进一步的实施方案中，碳水化合物衍生物在交联的摩尔数为0％至10％之间。在进一步的实施方案中，碳水化合物衍生物交联的摩尔数为1％-10％之间。在进一步的实施方案中，碳水化合物衍生物交联的摩尔数为1％-5％之间。在进一步的实施方案中，碳水化合物衍生物是交联的1％至2.5％摩尔之间。在进一步的实施方案中，碳水化合物衍生物是1％摩尔交联的。在进一步的实施方案中，碳水化合物衍生物是2％摩尔交联的。在进一步的实施方案中，碳水化合物衍生物是3％摩尔交联的。在进一步的实施方案中，碳水化合物衍生物是4％摩尔交联的。在进一步的实施方案中，碳水化合物衍生物是5％摩尔交联的。在进一步的实施方案中，碳水化合物衍生物是6％摩尔交联的。在进一步的实施方案中，碳水化合物衍生物是7％摩尔交联的。在进一步的实施方案中，碳水化合物衍生物是8％摩尔交联的。在进一步的实施方案中，碳水化合物衍生物是9％摩尔交联的。在进一步的实施方案中，碳水化合物衍生物是10％摩尔交联的。
在另一个实施方案中，至少约1％摩尔，例如至少约2％摩尔，至少约5％摩尔，或约1％摩尔至约20％摩尔的，被衍生的改性碳水化合物酸的官能团。在另一个实施方案中，至少约25％摩尔，例如约25％摩尔至约75％摩尔的衍生化官能团是O-酰基异脲和/或N-酰基脲。在另一个实施方案中，被衍生的改性碳水化合物的官能团，并且衍生的羧基官能团由碳水化合物与上述多官能碳二亚胺的交联产生。在一些实施方案中，多官能碳二亚胺是双碳二亚胺。
前述配方中的每种碳水化合物可以是不同或相同的碳水化合物分子，例如交联可以是分子间或分子内交联。每个U可以相同或不同，并且是任选的取代的N-酰基脲或O-酰基异脲。如本文所用，术语“至少约1％摩尔交联”是指碳水化合物通过碳水化合物的衍生化官能团彼此交联，例如O-酰基异脲或N-酰基脲，其中衍生的官能团占单个碳水化合物的总官能团的至少约1％摩尔。
在另一个实施方案中，N-酰基脲或O-酰基异脲是由与多官能碳二亚胺的交联产生的。在进一步的实施方案中，单碳二亚胺可以与多官能碳二亚胺组合使用。以上描述了单碳二亚胺和多官能碳二亚胺的某些合适的实例。使用多官能碳二亚胺制备改性的碳水化合物衍生物引起碳水化合物的交联。例如，使用双碳二亚胺导致碳水化合物重复单元中存在的羧基之间的交联，因为双碳二亚胺是双官能的。羧基可以存在于相同的聚合物链中，产生分子内交联产物，或存在于两个不同的聚合物链上，产生分子间交联产物。
碳水化合物与双碳二亚胺的反应而不是单碳二亚胺，不会改变反应机理，但可以使产物交联。
在可获得的质子存在下，碳水化合物与双碳二亚胺交联剂的反应被认为在第一步中包括质子化。然后酸阴离子可以与形成的阳离子的碳原子连接，从而形成O-酰基异脲中间体。中间体中的酰基可以从氧原子迁移到氮原子以产生碳水化合物的N-酰基异脲衍生物。据信O至N迁移可能是不完全的，导致产物反应混合物可包括N-酰基脲和O-酰基异脲。因此，由双碳二亚胺与未交联的碳水化合物前体反应产生的交联通常可含有通过R2连接的两个O-酰基异构体，如以下结构式(VI)中所示
或通过R2连接的O-酰基异脲和N-酰基脲，如下列结构式(VII)所示：
或通过R2连接的两个N-酰基脲，如以下结构式(VIII)所示：
混合产物可以单独使用或一起使用以制备根据本公开内容的实施方案的可注射组合物。
本文所用的术语“烃基”是指从母体烃中除去氢原子后得到的单价部分。如本文所用，亚烃基是二价烃。通常，烃基和亚烃基基团含有1-25个碳原子，1-12个碳原子或1-6个碳原子。烃基和亚烃基基团可以独立地是取代或未取代的，环状或非环状的，支链或非支链的，和饱和的或不饱和的。任选地，烃基和亚烃基基团独立地可以被一个或多个杂原子(例如氧，硫和氮)间隔。烃基基团的实例包括脂族和芳基基团。取代的烃基和亚烃基基团可独立地具有多于一个取代基。
本文所用的术语“取代基”是指取代分子的氢原子的化学基团。这些基团的代表是卤素(例如-F，-Cl，-Br，-I)，氨基，硝基，氰基，-OH，烷氧基，烷基，烯基，炔基，芳基，卤代烷氧基，卤代烷基，卤代烯基，卤代炔基，烷基。氨基，卤代烷基氨基，芳基酰氨基，磺酰氨基，硫酸根，磺酸根，磷酸根，膦基，膦酸根，羧酸根，甲酰胺基等。
如本文所用，“烷基”基团是饱和脂族基团。烷基基团可以是直链或支链的，或环状或非环状的。通常，烷基基团具有1-25个碳原子。烷基的实例包括甲基，乙基，丙基，丁基，戊基，己基，庚基，辛基，壬基，癸基，十一烷基，十二烷基，十三烷基，十四烷基，十五烷基，十六烷基，十七烷基，十八烷基，十癸基，二十烷基，二十一烷基，二十二烷基，二十三烷基，二十四烷基，二十五烷基及其异构体形式。烷基基团可以被一个或多个独立地选择用于每个位置的取代基取代。
如本文所用，“亚烷基”基团是饱和脂族基团，其通过单个共价键与两个其他基团键合。亚烷基可以是直链或支链的，或环状或非环状的。通常，亚烷基具有1-25个碳原子。亚烷基的实例包括亚甲基，亚乙基，亚丙基，亚丁基，亚戊基，亚己基，亚庚基，亚辛基，1,6-亚己基，1,8-亚辛基，1,10-十亚甲基，1,12-十二亚甲基及其异构形式。亚烷基可以被一个或多个独立地选择用于每个位置的取代基取代。
如本文所用，“烯基”基团是含有双键的脂族基团。通常，链烯基具有2至25个碳原子。实例包括乙烯基，烯丙基，丁烯基，戊烯基，己烯基，辛烯基，壬烯基，癸烯基，十一碳烯基，十二烯基，十三烯基，十四烯基，十五烯基，十六烯基，十七烯基，十八烯基，十九烯基，二十烯基，二十二烯基，二十二碳烯基，三苄基，二十四烯基，五十二烯基和其异构体形式。
如本文所用，“亚烯基”基团是含有双键的脂族基团。通常，亚烯基基团具有2至25个碳原子。实例包括丁烯，戊烯，亚己烯，亚辛烯，亚壬基及其异构体形式。
如本文所用，“炔基”基团是含有三键的脂族基团。通常，炔基基团具有2至25个碳原子。实例包括乙烯基，烯丙基，丁炔基，戊炔基，己炔基，辛炔基，壬炔基，癸炔基，十一烷基，十二烷基，十三烷基，十四烷基，十五烷基，十六烷基，十七烷基，十八烷基，十九烷基，二十二烷基，二十二炔基，二十二烷基，三嗪基，二炔基，二炔基和其异构体形式。
如本文所用，“亚炔基”基团是含有三键的脂族基团。通常，亚炔基基团具有2至25个碳原子。实例包括亚乙烯基，亚烯基，亚丁炔基，亚戊炔基，亚己炔基，亚辛基和其异构体形式。
本文所用的术语“芳基”是指芳环(包括杂芳环)。特别地，包括一个或多个杂原子的芳基基团在本文中称为“杂芳基”。芳基基团的实例包括苯基，甲苯基，二甲苯基，萘基联苯基，三苯基和杂芳基，例如吡咯基，噻吩基，呋喃基，吡啶基，恶唑基，异恶唑基，噻唑基，异噻唑基和喹啉基。芳基基团可以被一个或多个独立地选择用于每个位置的取代基取代。
如本文所用的术语“亚芳基”是指分子中的芳基环，其通过来自其两个环原子的单个共价键与另外两个基团键合。特别地，包含一个或多个杂原子的亚芳基基团在本文中称为“亚杂芳基”。亚芳基的实例包括亚苯基[-(C6H4)-]，如间亚苯基和对亚苯基；和杂芳基，如吡啶[-(C5H3N)-]；和呋喃[-(C4H2O)-]。亚芳基可以被一个或多个独立地选择用于每个位置的取代基取代。
烷基，亚烷基，链烯基，亚烯基基团，炔基或亚炔基可任选地被取代或未取代的芳基基团取代而形成，例如，芳烷基基团(例如苯甲基)，或芳炔(例如-CH2-(C 6H 4)-或-CH＝CH 2-(C6H 4)-)。类似地，芳基或亚芳基基团可任选地被取代基或未取代的烷基，烯基或炔基取代。
术语“杂环基”是指其中一个或多个环碳原子被杂原子取代的环烷基基团，例如氮杂环丙烷基，氮杂环丁烷基，吡咯烷基，哌啶基，硫杂丙酰基，硫杂环丁基，四氢噻吩基，四氢噻喃基，环氧乙烷基，氧杂环丁烷基，四氢呋喃基，四氢吡喃基，吗啉基等等。
术语“亚杂环基”是指亚环烷基基团，其中一个或多个环碳原子被杂原子取代，例如2,5-四氢呋喃。
烷氧基是通过氧原子连接的烷基基团，例如甲氧基，乙氧基，丙氧基等。
芳氧基基团是通过氧原子连接的芳基基团，例如苯氧基等。
芳烷氧基基团是通过氧原子连接的芳烷基基团，例如苄氧基等。
在一个实施方案中，改性的碳水化合物衍生物至少约1％摩尔交联。交联的碳水化合物凝胶可以是水溶性的或基本上不溶于水的。
在一些实施方案中，组合物的粘度大于室温盐水的粘度。在一些实施方案中，组合物在室温下的粘度为约10,000至1000,000cSt，更特别地为约30,000至90,000cSt，并且在一些情况下为约50,000至70,000cSt。碳水化合物组合物应具有足以在注射/管理位置周围保持一段时间的粘度。在一些实施方案中，组合物具有最大粘度，使得其可以通过25号针头以小于或等于约12.5磅的力从5mL注射器挤出。在一些实施方案中，组合物具有最大粘度，使得其可以通过25号针头以小于或等于约10磅的力从5mL注射器挤出。在一些实施方案中，组合物具有最大粘度，使得其可以通过25号针头以小于或等于约9磅的力从5mL注射器挤出。在一些实施方案中，组合物具有最大粘度，使得其可以通过25号针头以小于或等于约8磅的力从5mL注射器挤出。在一些实施方案中，组合物具有最大粘度，使得其可以通过25号针头以小于或等于约7.5磅的力从5mL注射器挤出。在一些实施方案中，组合物具有最大粘度，使得其可以通过25号针头以小于或等于约7磅的力从5mL注射器挤出。在一些实施方案中，组合物具有最大粘度，使得其可以通过25号针头以小于或等于约6磅的力从5mL注射器挤出。在一些实施方案中，组合物具有最大粘度，使得其可以通过25号针头以小于或等于约5磅的力从5mL注射器挤出。在一些实施方案中，组合物具有最大粘度，使得其可以通过25号针头以小于或等于约4磅的力从5mL注射器挤出。在一些实施方案中，组合物具有最大粘度，使得其可以通过25号针头以小于或等于约3磅的力从5mL注射器挤出。在一些实施方案中，组合物具有最大粘度，使得其可以通过25号针头以小于或等于约2磅的力从5mL注射器挤出。在一些实施方案中，组合物具有最大粘度，使得其可以通过25号针头以小于或等于约1磅的力从5mL注射器挤出。
在一些实施方案中，碳水化合物是胶原蛋白。胶原蛋白是动物细胞外基质的主要蛋白质成分。胶原蛋白组装成复杂的纤维组织。原纤维组装成形成纤维的束。原纤维由五个微纤维以交错排列的方式制成。每个微纤维都是胶原棒的集合。每个胶原棒都是右旋三螺旋，每个链本身都是左旋螺旋。胶原纤维通过共价的分子内和分子间交联而增强，这使得成熟动物的组织不溶于冷水。
在一些实施方案中，碳水化合物是变性胶原。当使用合适的处理时，胶原棒被提取并溶解，它们保持其构造为三螺旋。这是变性胶原蛋白，不同于天然形式的胶原蛋白，但未经过足够的热处理或化学处理以破坏胶原蛋白中发现的分子内稳定共价键。
在一些实施方案中，碳水化合物是明胶。当胶原蛋白溶液被广泛加热时，或当含有天然胶原蛋白的组织经受化学和热处理时，稳定胶原螺旋的氢和共价键被破坏，并且分子采用无序的形式。通过断开这些氢键，极性胺和羧酸基团现在可用于结合来自其他来源或其自身的极性基团。该材料是明胶，在40-45℃下是水溶性的。明胶可以通过源自皮肤，白色结缔组织或动物骨骼的胶原的部分水解来获得。明胶可以衍生自酸处理的前体或碱处理的前体。衍生自酸处理的前体的明胶称为A型，源自碱处理的前体的明胶称为B型。与胶原降解相关的大分子结构变化对于化学和部分热水解基本相同。在热和酸催化降解的情况下，水解分裂在单个胶原链内占优势。在碱性水解中，分子间和分子内交联的裂解占主导地位。在一些实施方案中，明胶的分子量为约80,000至约200,000Da。在一些实施方案中，明胶分子量的多分散性为约1至约3。在一些实施方案中，明胶分子量的多分散性为约1.1至约2.4。在一些实施方案中，明胶在组合物中以约0.01mM至约10mM的浓度存在。
在一些实施方案中，碳水化合物是多糖。在一些实施方案中，多糖是硫酸化多糖。在一些实施方案中，多糖包含通过糖苷键彼此连接的多于约10个单糖残基。在一些实施方案中，多糖选自糖胺聚糖和葡糖胺聚糖的组合。在一些实施方案中，多糖选自葡聚糖，乙酰肝素，肝素，透明质酸，藻酸盐，琼脂糖，角叉菜胶，支链淀粉，直链淀粉，糖原，淀粉，纤维素，甲壳质，黄原胶，结冷胶，半乳甘露聚糖和壳聚糖的组合。在一些实施方案中，多糖是硫酸化多糖，其选自硫酸乙酰肝素，硫酸软骨素，硫酸葡聚糖，硫酸皮肤素和硫酸角质素的组合。在一些实施方案中，多糖具有约2,000至约8,000,000Da的分子量。在进一步的实施方案中，多糖具有约20,000至约3,000,000Da的分子量。在更进一步的实施方案中，多糖具有约20,000Da至约1,000,000Da的分子量。交联的羧基多糖描述于美国专利No.5,676,964中，其全部内容通过引用并入本文。过羧化多糖及其制备方法描述于美国专利No.7,683,038中，其全部内容通过引用并入本文。
在一些实施方案中，碳水化合物是葡聚糖。在一些实施方案中，葡聚糖具有约300,000至约600,000Da的分子量。在一些实施方案中，葡聚糖分子量的多分散性为约1至约3。在一些实施方案中，葡聚糖分子量的多分散性为约1.1至约2.4。在一些实施方案中，葡聚糖以约0.01mM至约10mM的浓度存在于组合物中。
在一些实施方案中，碳水化合物是硫酸葡聚糖。硫酸葡聚糖是葡聚糖的糖胺聚糖样聚合衍生物，并且已被证明可用作治疗高脂血症的生物材料和药物。它可以通过葡聚糖的酯化来制备，葡聚糖是由某些细菌菌株合成的亲水性葡萄糖聚合物。
在一些实施方案中，碳水化合物是多糖透明质酸。透明质酸，也称为“HA”，是天然存在的水溶性多糖，包含D-葡萄糖醛酸(GlcUA)和N-乙酰-D-氨基葡萄糖(GlcNAc)的二糖单元，它们交替连接，形成线性聚合物，是细胞外基质的主要成分，广泛分布于动物体内组织。高分子量HA可包含100至10,000个二糖单元。HA通常以钠盐，透明质酸钠的形式天然存在。HA，透明质酸钠和HA或透明质酸钠的制剂通常被称为“透明质酸“。天然存在的HA通常具有约6×104至约1.2×107道尔顿的分子量范围。它具有优异的生物相容性，并且在植入或注射到患者体内时不会产生异物或过敏反应。即使在相对低的溶质浓度下，透明质酸的水溶液也是粘稠的。制备市售透明质酸的方法是众所周知的。还已知各种偶联HA和交联HA的方法，以降低HA的水溶性和扩散性，并增加HA的粘度。参见，例如，美国专利号5,356,883,6,013,679,6,537,979,6,548,081,7,125,860,8,124,120和8,323,617，其全部公开内容通过引用并入本文。不希望受理论束缚，发明人认为，因为HA是肌腱基质的天然组分，其中其起到保护肌腱免受切力和压力影响的润滑作用，本发明的HA的可注射组合物可以是在目前公开的可注射组合物和方法中有效的。由于其润滑性和粘弹性以及渗透势，HA可降低生物力学阻力并促进骨腱连接处的生理修复过程。
如本文所用，术语“透明质酸”，“HA”和“透明质烷”还指任何其他透明质酸盐，包括但不限于透明质酸钠，透明质酸钾，透明质酸镁，透明质酸钙和透明质酸铵，包括源自细菌或动物的HA(例如禽类HA)和交联的HA。在一些实施方案中，碳水化合物包含交联的透明质酸。在一些实施方案中，碳水化合物包含透明质酸酯。透明质酸酯是透明质酸分子其中透明质酸的至少一个羧酸酯基团用醇酯化。透明质酸的酯描述于美国专利4,851,521,7,462,606,8,178,663和8,178,499中，其全部内容通过引用并入本文。在一些实施方案中，透明质酸酯是透明质酸与至少一种选自脂族，芳基-脂族，环脂族，芳族，环状和杂环醇的醇组合的酯。在一些实施方案中，透明质酸酯的酯化百分比为约20％至约80％。在一些实施方案中，剩余的非酯化HA用有机或无机碱成盐。参见，例如，欧洲专利No.0 216 453和美国专利No.4,851,521，其内容通过引用整体并入本文。在一些实施方案中，透明质酸酯由分子式(IX)表示：
其中HA代表透明质酸，n是0-20之间的整数。在一些实施方案中，透明质酸酯选自
Hyaff302(Hyaff1 1/P75+25％C16酯)，Hyaff303(Hyaff1 1/P75+25％C18酯)和Hyaff304(Hyaff1 1/P75+25％C20酯)的组合。(P75表示75％酯化)。在一些实施方案中，透明质酸酯选自表2中公开的透明质酸酯：
表2：
在一些实施方案中，碳水化合物包含透明质酸酰胺。透明质酸酰胺是透明质酸分子，其中透明质酸的至少一个羧酸根基团与胺酰胺化。透明质酸的酰胺描述于美国专利号7,884,087中，其全部内容通过引用并入本文。在一些实施方案中，透明质酸酰胺是透明质酸的酰胺，其具有至少一种选自脂族，芳基-脂族，环脂族，芳族，环状和杂环胺的组合的酰胺。在一些实施方案中，透明质酸酰胺的酰胺化百分比为约0.1至约50％。在一些实施方案中，剩余的非酰胺化HA用有机或无机碱成盐。参见欧洲专利No.1 095 064，其内容通过引用整体并入本文。在一些实施方案中，透明质酸酰胺由分子式(X)表示：
其中HA代表透明质酸，m是0-20的整数。在一些实施方案中，透明质酸酰胺选自Hyadd1(“HA异烟肼3++苯甲胺+C8酰胺“), 的组合。
在一些实施方案中，碳水化合物是硫酸化透明质酸或其酯或酰胺。硫酸化透明质酸及其酯描述于美国专利No.6,027,741中，其全部内容通过引用并入本文。包含N-硫酸化透明质酸化合物或其衍生物的生物材料描述于美国专利No.6,579,978中，其全部内容通过引用并入本文。
本文公开的碳水化合物可以形成为水凝胶，凝胶颗粒或胶束。如本文所用，术语“水凝胶”是交联的大分子网络，其可以在水或生物流体中肿胀，并且可以在其结构内保留大部分水而不溶解。施用作为水凝胶形成的碳水化合物导致渗透势增加，从而将水吸入注射部位周围的区域。如本文所用，术语“肿胀”是指通过凝胶吸收液体(例如水)，体积增加，通常伴随加热和加压。制备交联的生物活性水凝胶基质的方法是已知的，例如在美国专利No.8,053,423中，其全部内容通过引用并入本文。用于通过光固化制备水凝胶材料的透明质酸的酯衍生物描述于美国专利No.7,462,606中，其全部内容通过引用并入本文。如本文所用，术语“胶束”是指分子组装，其中两亲性分子以球形结构排列，使得分子的所有疏水部分向内引导，使亲水部分与周围的水相接触。如本文所用，术语“反胶束”是指分子组装，其中两亲性分子排列成球形结构，使得分子的所有亲水部分向内引导，使疏水部分与周围溶剂相接触。
在一些实施方案中，本文公开的碳水化合物在其注射的生理介质中代谢清除和/或不稳定。在一些实施方案中，一旦注射，碳水化合物具有约3天至约60天的清除或稳定性半衰期。在进一步的实施方案中，一旦注射，碳水化合物具有约45天的清除或稳定性半衰期。在进一步的实施方案中，一旦注射，碳水化合物具有约30天的清除或稳定性半衰期。在进一步的实施方案中，一旦注射，碳水化合物具有约25天的清除或稳定性半衰期。在进一步的实施方案中，一旦注射，碳水化合物具有约20天的清除或稳定性半衰期。在进一步的实施方案中，一旦注射，碳水化合物具有约15天的清除或稳定性半衰期。在进一步的实施方案中，一旦注射，碳水化合物具有约14天的清除或稳定性半衰期。在进一步的实施方案中，一旦注射，碳水化合物具有约7天的清除或稳定性半衰期。在进一步的实施方案中，一旦注射，碳水化合物具有约5天的清除或稳定性半衰期。在进一步的实施方案中，一旦注射，碳水化合物具有约3天的清除或稳定性半衰期。
药物组合物
本公开还涉及包含本文公开的碳水化合物的药物组合物。还公开了给药途径和有效量的药物组合物的剂量。本文公开的可注射组合物可以各种方案与其他药剂组合施用，用于有效治疗本文所述的病症。
本文公开的可注射组合物按本文所公开施用。给药剂量取决于接受者的年龄和健康状况，同期治疗的种类(如果有的话)，治疗频率和所需效果的性质。
除了本文公开的组分外，本文公开的可注射组合物还可包含至少一种任何合适的助剂，包括但不限于稀释剂，粘合剂，稳定剂，缓冲剂，盐，亲脂性溶剂，防腐剂，佐剂等。药学上可接受的助剂是优选的。制备这种无菌溶液的实例和方法是本领域熟知的，并且可以在众所周知的文献中找到，例如但不限于Remington’s Pharmaceutical Sciences,Martin,E.W.,ed.,Mack Publishing Company,19th ed.(1995)。药学上可接受的载体可以常规的被选择，并适合于可注射组合物的给药方式，溶解度和/或稳定性的。
可用于本文公开的可注射组合物的药物辅料和添加剂还可包括但不限于蛋白质，肽，氨基酸，脂质和其他碳水化合物(例如，糖，包括单糖，二-，三-，四-，和低聚糖；衍生的糖如醛醇，醛糖酸，酯化糖等；和多糖或糖聚合物)，它们可以单独或组合存在，单独或组合包含0.01-99.99％(重量)或体积。示例性蛋白质赋形剂包括血清白蛋白，例如人血清白蛋白(HSA)，重组人白蛋白(rHA)，明胶，酪蛋白等。代表性的氨基酸组分，其也可以起缓冲作用，包括丙氨酸，甘氨酸，精氨酸，甜菜碱，组氨酸，谷氨酸，天冬氨酸，半胱氨酸，赖氨酸，亮氨酸，异亮氨酸，缬氨酸，蛋氨酸，苯丙氨酸，阿斯巴甜等。。可用于本文公开的可注射组合物的其他缓冲剂包括EDTA。
在一些实施方案中，本公开的可注射组合物可进一步包含另外的药剂。在一些实施方案中，另外的药剂是小分子。在一些实施方案中，小分子是蛋白酶激动剂。在一些实施方案中，小分子是抗炎剂。在一些实施方案中，另外的药剂选自生长和/或分化因子和/或激素(例如，BMPs，GDFs，白细胞介素，前列腺素，血栓烷，白三烯和细胞因子)，抗生素(例如青霉素，链霉素和林可霉素)，抗真菌药，镇痛药，麻醉药，甾体和非甾体抗炎剂，软骨退变剂，软骨保护剂，基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂，基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)，骨保护剂，骨再生剂，骨合成代谢剂，骨吸收抑制剂和骨破骨细胞抑制剂，其任何合成类似物和药学活性片段，及其组合。在一些实施方案中，另外的药剂选自山梨糖醇，甘露醇，抗氧化剂(例如表没食子儿茶素没食子酸酯，白藜芦醇，姜黄素)，IGF-1，PDGF，VEGF，α-2-巨球蛋白及其组合。在一些实施方案中，另外的药剂是细胞。在进一步的实施方案中，另外的药剂是选自干细胞，体细胞，富含血小板的血浆，贫血小板血浆及其组合的细胞。在一些实施方案中，另外的药剂是甾醇，甾烷醇或其衍生物。在一些实施方案中，另外的药剂选自胆固醇，豆甾醇，豆甾醇，植物甾醇，谷甾醇，β-谷甾醇，麦角甾醇，菜油甾醇，菜子甾醇，硫代胆固醇及其混合物。在进一步的实施方案中，另外的试剂是三萜醇或其衍生物。在一些实施方案中，另外的药剂选自羽扇豆醇，环蒿烯醇及其混合物。
附图详述
图1显示了本文公开的用于治疗肘肌腱病的组合物的骨腱周围或骨腱内注射的示例性实施方案的示意图。将包含本文所公开的组合物108的注射器107注射到注射部位105中，注射部位105设置在骨腱连接部104处，该部位是退化肌腱102与骨101相遇的位置(在这种情况下，外上髁110)。骨腱连接部104远离肌腱连接部109，这是健康肌腱102与肌肉103相遇的地方。将针106插入注射部位105，并将力施加到注射器107上以排出组合物108，通过针106并进入骨腱连接部104的肌腱(即，骨腱内)或进入骨腱连接部104周围的空间(即，骨腱周)。
图2显示了本文公开的用于治疗肩袖肌腱病变的组合物的骨腱周围或骨腱内注射的示例性实施方案的示意图。将含有本文所公开的组合物209的注射器208注射到注射部位205中，注射部位205设置在骨腱连接部204处，该连接部204是退化肌腱202与骨201相遇的位置。该骨腱连接部204远离肌腱连接部206，其是健康肌腱202与肌肉203相遇的地方。将针207插入注射部位205，并将力施加到注射器208，以将组合物209通过针207排出并进入骨腱连接部204处的肌腱(即，骨腱内)或进入骨腱接合部204周围的空间。(即，骨腱周)。
实施例
以下实施例进一步描述和说明了本公开范围内的实施方案。给出的实施例仅用于说明的目的，而不应解释为对本发明的限制，因为在不脱离本发明的精神和范围的情况下，可以对其进行许多变化。
实施例1：肌腱损伤的临床鉴定
该实施例提供了用于评估可用本文公开的组合物和方法治疗的肌腱损伤的示例性方法。患者按VAS表在休息时和握力评估后评定疼痛，如使用JAMAR液压手动测力计(Sammons Preston，Bolingbrook，Illinois)测定的。在患者的肘部完全伸展，肩部处于中立位置并且测力计的手柄处于中间位置的情况下进行评估。患者对受影响的手臂进行三次握力测试，计算平均得分并用于分析。
二者择一的，或者除此之外，医生使用手臂，肩膀和手的残疾(“DASH”)问卷来识别肌腱损伤。要求患者按照1到5的分数完成对各种活动进行排序的问卷(例如，打开紧的罐子，写或转动一个钥匙)，其中1表示没有困难，2表示轻度难度，3表示中等难度，4是严重困难，5是不能。DASH分数通过以下分子式计算：
其中n等于完成的答复数。如果调查问卷中缺少三个以上的答复，则可能无法计算DASH分数。
二者择一的，或者除此之外，医生使用与患者相关的网球肘评估(“PRTEE”)问卷来识别肌腱损伤。要求患者按1到10的分数完成对各种活动(例如，休息时的疼痛，转动钥匙或进行家务劳动)进行排序的问卷，其中1表示没有疼痛和/或执行任务有困难，10表示最难以想象的痛苦或无法完成任务。活动可分为疼痛评分和功能评分。通过向患者确认如果他们无法完成任务，应将其记录为10，并鼓励他们估计平均难度，从而最小化不答复。如果患者从未进行过活动，则应将其留空。报告疼痛子量表，功能子量表和总分。
实施例2：体外测试碳水化合物生物力学功效的方法
该实施例提供了体外测试的示例性方法，以评估碳水化合物可与本文公开的组合物和方法结合使用的生物力学功效。在碳水化合物中浸泡30分钟，或将盐水或碳水化合物注入肌腱后，评估猪腱的生物力学特性。在最大生物力学应变区域进行注射以模拟有需要的患者的骨腱连接处的注射。沐浴在透明质酸钠溶液中的测试组用于模拟远离最大生物力学应变区域，包括肌腱连接区，的位点的过量溶液的“流动”。检查拉伸载荷曲线下的机械性能。对每组进行零时间组织学以记录和检查基于常规石蜡组织学的治疗效果。该部分研究还检查了根据体重，生理盐水或碳水化合物对肌腱肿胀的影响。
表3：猪腱的生物力学测试
测试组# 处理方式 应力松弛
1 盐水注射 1取代(2mm)和n＝6
2 碳水化合物浸泡 1取代(2mm)和n＝6
3 碳水化合物注射 1取代(2mm)和n＝6
使用校准的伺服液压测试机进行机械测试。实验设计评估肌腱在应力松弛中的体外力学性质。如表3所示，执行两个位移水平。应力松弛研究进行300秒，并分析数据的松弛差异，包括到最大负荷的平均能量和平均刚度。结果表明，相对于注射盐水或浸泡在碳水化合物中，碳水化合物注射导致到最大负荷，刚度和应力松弛的最大力的能量显着降低。见图3。结果进一步表明，在浸泡实验中碳水化合物注射优于盐水。
对每组的两个肌腱进行时间0组织学处理，以确定治疗条件是否在组织学水平上改变了肌腱。固定后，对肌腱进行石蜡组织学处理。将这些单元放入嵌入块中进行石蜡加工。使用Leica切片机将每个石蜡块切片(5微米)并置于载玻片上，用于苏木精-伊红(H&E)染色，苦味酸天狼猩红染色和四色染色。使用Olympus显微镜光学显微镜下检查染色切片，并用Olympus DP72高分辨率摄像机拍摄图像。评审员对时间点和治疗组不知情。对每组进行组织学定性评估，并编写摘要。拍摄每张幻灯片的低功率和高功率的代表性图像。在低倍率下检查染色的载玻片，使用1.25x物镜(比例尺＝1mm)提供用于记录目的部分的概览。在更高倍率(4倍物镜，比例尺＝200微米)以及高功率领域(10x物镜，比例尺＝100微米，20x物镜，比例尺＝50微米，40x物镜，比例尺＝20微米)。还根据湿重和干重检查每组的两个肌腱的水合作用。结果显示，在超微结构水平，由于组合物的粘度，注射碳水化合物导致肌束水平的肌腱分离。(参见图4，其中较亮区域表示肌束分离区域)。
实施例3：体外测试碳水化合物生化功效的方法
该实施例提供了示例性体外方法，用于评估可与本文公开的组合物和方法结合使用的碳水化合物的功效。
为了评价透明质酸(HA)对肌腱细胞生物学的影响，将肌腱细胞(Zen-Bio，RTP，NC)以1×105个细胞/cm 2的密度接种在6孔大鼠I型胶原板中(VWR，Radnor，PA)。含有肌腱细胞培养基(Zen-Bio，RTP，NC)，补充有低(1％)或正常(10％)水平的血清。用各种碳水化合物处理肌腱细胞，包括葡聚糖，羧甲基纤维素，透明质酸和藻酸盐，以评估它们对肌腱细胞增殖的影响(图5)。通过在室温下在旋转器上与肌腱细胞培养基混合过夜来制备所有碳水化合物。使用Cell Titer Glo测定试剂盒(Promega，Madison，WI)评估增殖。还使用透明质酸(HA#1和HA#2)处理肌腱细胞，以使用人Col I(Chondrex，Redmond，WA)和人Col III(MyBiosource，San Diego，CA)ELISA检测试剂盒测定它们对胶原蛋白I和III产生的影响。结果表明与单独的培养基对照HA#1和HA#2刺激胶原蛋白I的产生(参见图6)，然而，在胶原蛋白III的产生上没有观察到效果(参见图7)。通过培养基对照碳水化合物对肌腱细胞没有增殖作用(参见图5)。
实施例4：治疗肌腱病的方法
该实施例提供了本文公开的治疗肌腱病的示例性方法。需要治疗的患者在骨腱周围或骨腱内注射碳水化合物。注射具体发生在肌腱-骨界面(即，骨腱连接处)，并且远离肌腱连接处。使用扇形或Pep技术进行注射。一旦注射完成，肢体在内侧和侧面旋转五次，并弯曲和伸展五次。分别使用临床评估(例如，VAS，DASH，PRTEE等)减轻和恢复患者的疼痛和功能。静息时和握持期间的VAS评分显示注射后30天至少一个单位的改善。DASH评分显示注射后30天至少一个单位的改善。PRTEE分数表明注射后30天至少改善一个单位。治疗包括每周注射，然后注射后屈曲，伸展，内侧和外侧旋转直到六个月。治疗不涉及使用结构支架，无论是内部还是外部，取而代之的是促进受伤肢体的运动。
通过阅读本公开内容，对于本领域普通技术人员显而易见的是，本公开可以以不同于上面具体公开的那些形式实施。因此，上述特定实施例被认为是说明性的而非限制性的。仅使用常规实验，本领域技术人员将认识到或能够确定本文所述具体实施方案的许多等同物。本公开的范围如所附权利要求及其等同物所阐述，而不是限于前述描述中包含的示例。本文公开的所有参考文献的内容通过引用整体并入。

Claims (101)

1.一种可注射的组合物，包含一种碳水化合物用于治疗动物或人的受损伤肌腱，其中所述组合物包含有效剂量的碳水化合物，当所述组合物通过骨腱内或骨腱周围注射给药时，可使骨腱连接处增加肌腱水合和润滑。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物通过骨腱周围注射给药。
3.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物通过骨腱内注射给药。
4.根据前述任一权利要求所述的组合物，其中所述碳水化合物含有至少一种选自硫醇，醇，胺，羧基，醛，酰胺，酯，酮及其组合的官能团。
5.根据前述任一权利要求所述的组合物，其中所述碳水化合物的分子量为约10,000至约10,000,000道尔顿。
6.根据权利要求5所述的组合物，其中所述碳水化合物的分子量为约300,000至约5,000,000道尔顿。
7.根据权利要求6所述的组合物，其中所述碳水化合物的分子量为约1,000,000至约3,000,000道尔顿。
8.根据前述任一权利要求所述的组合物，其中所述碳水化合物不是交联的。
9.根据权利要求1-7中任一权利要求所述的组合物，其中所述碳水化合物包含至少一个交联。
10.根据权利要求9所述的组合物，其中所述交联碳水化合物至少约1％摩尔百分比。
11.根据权利要求9-10中任一权利要求所述的组合物，其中所述交联碳水化合物约为1％至约10％摩尔。
12.根据权利要求9-11中任一权利要求所述的组合物，其中所述交联碳水化合物约1％至约5％摩尔。
13.根据权利要求9-12中任一权利要求所述的组合物，其中所述交联碳水化合物约为1％摩尔。
14.根据权利要求9-13中任一权利要求所述的组合物，其中所述交联碳水化合物是约2％摩尔。
15.根据权利要求9-14中任一权利要求所述的组合物，其中所述交联碳水化合物是约3％摩尔。
16.根据权利要求9-15中任一权利要求所述的组合物，其中所述交联碳水化合物是约4％摩尔。
17.根据权利要求9-16中任一权利要求所述的组合物，其中所述交联碳水化合物是约5％摩尔。
18.根据权利要求9-17中任一权利要求所述的组合物，其中所述至少一种交联剂包含选自碳二亚胺交联剂，双碳二亚胺(“BCDI”)交联剂，二乙烯基砜交联剂，二环氧交联剂，丁二醇二环氧(“BDDE”)交联剂，二硫化物交联剂，二缩水甘油基交联剂，二丙烯酸酯二硫化物交联剂及其组合。
19.根据权利要求18所述的组合物，其中所述至少一种交联剂包含选自丁二醇二缩水甘油醚(“BDGE”)交联剂和1,4-丁二醇二缩水甘油醚交联剂的组合。
20.根据权利要求9所述的组合物，其中碳水化合物是自交联的。
21.根据前述任一权利要求所述的组合物，其中所述碳水化合物存在于所述组合物中的浓度约1-100mg/mL。
22.根据权利要求21所述的组合物，其中所述碳水化合物存在于所述组合物中的浓度约2-30mg/mL。
23.根据权利要求21所述的组合物，其中所述碳水化合物存在于所述组合物中的浓度约5-30mg/mL。
24.根据权利要求21所述的组合物，其中所述碳水化合物存在于所述组合物中的浓度约10-20mg/mL。
25.根据权利要求21所述的组合物，其中所述碳水化合物存在于所述组合物中的浓度约12.5-17.5mg/mL。
26.根据前述任一权利要求所述的组合物，其中所述碳水化合物存在于所述组合物中的浓度约0.01mM至约100mM。
27.根据权利要求26所述的组合物，其中所述碳水化合物存在于所述组合物中的浓度约0.01mM至约10mM。
28.前述任一权利要求中所述的组合物还包含药学上可接受的载体。
29.根据权利要求28所述的组合物，其中所述药学上可接受的载体包括等渗溶液或冷冻保护剂。
30.前述任一权利要求所述的组合物，其中所述组合物还包含另外的药剂。
31.根据权利要求30所述的组合物，其中所述另外的药剂包括重组蛋白。
32.根据权利要求30所述的组合物，其中所述另外的药剂包括小分子。
33.根据权利要求32所述的组合物，其中所述小分子选自山梨糖醇，甘露醇，抗氧化剂，IGF-1，PDGF，VEGF，α-2-巨球蛋白及其组合。
34.根据权利要求30所述的组合物，其中所述另外的药剂包括干细胞。
35.根据权利要求30所述的组合物，其中所述另外的药剂包括体细胞，富含血小板的血浆(PRP)，贫血小板血浆(PPP)，干细胞同种异体移植物，干细胞自体移植物，骨髓抽吸物(BMA)，骨髓抽吸物浓缩物(BMAC)，自体成纤维细胞或自体成肌细胞。
36.根据前述任一权利要求所述的组合物，其中所述碳水化合物包含至少一种选自胶原蛋白，明胶，多糖及其组合的碳水化合物。
37.根据权利要求36所述的组合物，其中所述碳水化合物包括胶原蛋白。
38.根据权利要求37所述的组合物，其中所述胶原包含天然胶原蛋白。
39.根据权利要求37所述的组合物，其中所述胶原蛋白包含变性胶原蛋白。
40.根据权利要求36所述的组合物，其中所述碳水化合物包括明胶。
41.根据权利要求40所述的组合物，其中所述明胶包含A型明胶。
42.根据权利要求40所述的组合物，其中所述明胶包含B型明胶。
43.根据权利要求40-42中任一权利要求所述所述的组合物，其中所述明胶的分子量为约80,000Da至约200,000Da。
44.根据权利要求40-42中任一权利要求所述所述的组合物，其中所述明胶的多分散性为约1至约3。
45.根据权利要求44所述的组合物，其中所述明胶的多分散性为约1.1至约2.4。
46.根据权利要求36所述的组合物，其中所述碳水化合物包括多糖。
47.根据权利要求46所述的组合物，其中所述多糖选自糖胺聚糖和葡糖胺聚糖的组合。
48.根据权利要求46所述的组合物，其中所述多糖选自葡聚糖，乙酰肝素，肝素，透明质酸，藻酸盐，琼脂糖，卡拉胶，支链淀粉，直链淀粉，糖原，淀粉，纤维素，软骨素，皮肤素，角蛋白，甲壳质，壳聚糖，羧甲基纤维素(“CMC”)，黄原胶，结冷胶，半乳甘露聚糖及其组合。
49.根据权利要求46所述的组合物，其中所述多糖是硫酸化多糖。
50.根据权利要求49所述的组合物，其中所述硫酸化多糖选自硫酸乙酰肝素，硫酸软骨素，硫酸葡聚糖，硫酸皮肤素，角蛋白，硫酸盐及其组合。
51.根据权利要求46-50中任一权利要求所述的组合物，其中所述多糖包含多于约10个通过糖苷键彼此连接的单糖残基。
52.根据权利要求46-51中任一权利要求所述的组合物，其中所述多糖的分子量为约2,000Da至约8,000,000Da。
53.根据权利要求52所述的组合物，其中所述多糖的分子量为约20,000Da至约3,000,000Da。
54.根据权利要求46-53中任一权利要求所述的组合物，其中所述多糖包含交联的羧基多糖。
55.根据权利要求46-53中任一权利要求所述的组合物，其中所述多糖包含过羧化多糖。
56.根据权利要求46所述的组合物，其中所述碳水化合物包括葡聚糖。
57.根据权利要求56所述的组合物，其中所述葡聚糖的分子量为约300,000Da至约600,000Da。
58.根据权利要求56-57中任一权利要求所述的组合物，其中葡聚糖的多分散性为约1至约3。
59.根据权利要求58所述的组合物，其中葡聚糖的多分散性为约1.1至约2.4。
60.根据权利要求46所述的组合物，其中所述碳水化合物包括透明质酸，或其酯，酰基脲，酰基异脲，二硫化物，或其酰胺。
61.根据权利要求60所述的组合物，其中所述透明质酸选自透明质烷，透明质酸钠，透明质酸钾，透明质酸镁，透明质酸钙，透明质酸铵及其组合。
62.根据权利要求60-61中任一权利要求所述的组合物，其中所述透明质酸包含至少一个交联。
63.根据权利要求60-62中任一权利要求所述的组合物，其中所述透明质酸来源于细菌或动物。
64.根据权利要求60-63中任一权利要求所述的组合物，其中所述透明质酸包括硫酸化透明质酸，或其酯，酰基脲，酰基异脲，卡波姆，二硫化物或其酰胺。
65.根据权利要求64所述的组合物，其中透明质酸包括N-硫酸化透明质酸，或其酯，酰基脲，酰基异脲，卡波姆，二硫化物或其酰胺。
66.根据权利要求60-65中任一权利要求所述的组合物，其中所述透明质酸包含透明质酸酯。
67.根据权利要求66所述的组合物，其中透明质酸酯的酯化量为约20-100％。
68.根据权利要求67所述的组合物，其中非酯化的透明质酸用有机或无机碱成盐。
69.根据权利要求66所述的组合物，其中透明质酸酯选自以下的组合：
Hyaff302(Hyaff11/P75+25％C16酯),Hyaff303(Hyaff11/P75+25％C18酯),和Hyaff304(Hyaff11/P75+25％C20酯)。
70.根据权利要求60-65中任一权利要求所述的组合物，其中所述透明质酸包含透明质酸酰胺。
71.根据权利要求70所述的组合物，其中透明质酸酰胺的酰胺化百分比为0.1-50％。
72.根据权利要求71所述的组合物，其中非酰胺化透明质酸用有机或无机碱成盐。
73.根据权利要求70所述的组合物，其中透明质酸酰胺选自
的组合。
74.根据前述权利要求中任一权利要求所述的组合物，其中所述碳水化合物是水溶性的。
75.根据前述权利要求中任一权利要求所述的组合物，其中组合物是水凝胶的形式。
76.根据前述权利要求中任一权利要求所述的组合物，其中所述肌腱长期受损并且表现出组织学上的退行性变化。
77.根据权利要求76所述的组合物，其中所述骨腱连接表现出至少一项退化特征，选自以下(i)胶原蛋白III相对于正常肌腱的增加，(ii)胶原蛋白I相对于正常肌腱的减少，(iii)相对于正常肌腱，可见的微观撕裂增加，(iv)胶原蛋白微网络相对于正常肌腱的解体增加，(v)成纤维细胞浸润相对于正常肌腱的增加，(vi)细胞环绕相对于正常肌腱增加，(vii)相对于正常肌腱的血管生成增加，(viii)相对于正常肌腱的细胞数增加，(ix)相对于正常肌腱的肌腱滑动阻力增加，和(x)暗灰色外观相对于正常肌腱的组合。
78.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中组合物的施用在生物力学上减少了生物力学干扰。
79.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中组合物的施用在生物化学上减少了生物力学干扰。
80.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中组合物的施用导致所述肌腱的状况的改善，所述肌腱的状况通过视觉模拟量表(“VAS”)，手臂，肩膀和手的残疾(“DASH”)问卷中，以及与患者相关的网球肘评估(“PRTEE”)问卷中的一个或多个方式所测量。
81.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述组合物用于治疗网球肘。
82.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述组合物用于治疗以下肌腱中的一个或多个的肌腱病：
83.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中的组合物用于远离肌腱连接处的部位注射。
84.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，前提条件是所述组合物不通过肌腱周围或肌腱内注射给药。
85.包含前述权利要求任一项的组合物的注射器。
86.包含前述权利要求任一项的可注射组合物或注射器的试剂盒和使用所述组合物的说明书。
87.根据权利要求86所述的试剂盒，其中所述组合物包装在注射器中。
88.包含前述权利要求任一项的可注射组合物施用给对其有需要的受试者。
89.一种治疗受试者受伤肌腱的方法，包括：通过骨腱内或骨腱周注射给予有需要的受试者可注射组合物，所述组合物包含有效量的权利要求1-84中任一项的碳水化合物。
90.根据权利要求89所述的方法，其中所述方法增加骨质水合和润滑。
91.根据权利要求89所述的方法，其中在所述受试者中运动范围增加。
92.根据权利要求89所述的方法，其中在所述受试者中运动疼痛减少。
93.根据权利要求89-92中任一权利要求所述的方法，其中所述方法包括在不同时间多次注射所述组合物。
94.根据权利要求93所述的方法，包括第一次注射所述组合物和第二次注射所述组合物，其中第二次注射在第一次注射后5至10天施用。
95.根据权利要求94所述的方法，其中在第一次注射后一周施用第二次注射。
96.根据权利要求89-95中任一权利要求所述的方法，其中所述注射包括扇形注射。
97.根据权利要求89-96中任一权利要求所述的方法，其中所述注射包括Pep注射。
98.根据权利要求89-97中任一权利要求所述的方法，其中所述注射包括单次注射。
99.根据权利要求89-98中任一项所述的方法，其中所述方法还包括注射后立即，或注射后一周至六个月，或注射后一周至五个月或注射后一周至四个月的关节操作或按摩。
100.根据权利要求99所述的方法，其中所述注射后关节操纵包括侧向旋转，内侧旋转，屈曲和伸展中的至少一种。
101.根据权利要求99所述的方法，其中所述该方法恢复正应力分布。
CN201780039455.6A 2016-04-27 2017-04-26 用于处理肌腱退化的方法和组合物 Pending CN109562124A (zh)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201662328396P 2016-04-27 2016-04-27
US62/328,396 2016-04-27
US201662367377P 2016-07-27 2016-07-27
US62/367,377 2016-07-27
PCT/US2017/029635 WO2017189723A1 (en) 2016-04-27 2017-04-26 Compositions for use in treating tendon degeneration

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN109562124A true CN109562124A (zh) 2019-04-02

Family

ID=58709560

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201780039455.6A Pending CN109562124A (zh) 2016-04-27 2017-04-26 用于处理肌腱退化的方法和组合物

Country Status (15)

Country Link
US (1) US10441677B2 (zh)
EP (1) EP3448394B1 (zh)
JP (1) JP6826657B2 (zh)
KR (1) KR20190009303A (zh)
CN (1) CN109562124A (zh)
AU (1) AU2017257956B2 (zh)
CA (1) CA3021764C (zh)
IL (1) IL262507B (zh)
MX (1) MX2018012964A (zh)
NZ (1) NZ747413A (zh)
RU (1) RU2018141386A (zh)
SG (2) SG10201913342UA (zh)
TW (2) TWI755392B (zh)
WO (1) WO2017189723A1 (zh)
ZA (1) ZA201807136B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3735204B1 (en) 2018-01-02 2023-09-06 Cartiheal (2009) Ltd. Implantation tool for optimized solid substrates promoting cell and tissue growth

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1859918A (zh) * 2003-10-09 2006-11-08 罗伯特·约翰·佩特雷拉 使用透明质酸治疗急性和过劳扭伤、拉伤的方法
CN102665412A (zh) * 2009-09-23 2012-09-12 克能药物有限公司 用于诱导或加强结缔组织修复的组合物和方法
CN104703612A (zh) * 2012-09-26 2015-06-10 骨治疗公司 包含溶剂/去污剂处理过的血浆(s/d血浆)的制剂及其用途

Family Cites Families (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2946819A (en) 1958-04-14 1960-07-26 Gen Aniline & Film Corp Process of producing carbodimides
DE1156401B (de) 1960-05-24 1963-10-31 Bayer Ag Verfahren zur Herstellung von Carbodiimiden
DE1149712B (de) 1961-11-14 1963-06-06 Bayer Ag Verfahren zur Herstellung von Carbodiimiden
US3644456A (en) 1964-08-12 1972-02-22 Upjohn Co Di((isocyanatobenzyl)-phenyl) carbodiimides and preparation of organic carbodiimides
US3972933A (en) 1974-05-28 1976-08-03 Monsanto Company Preparation of carbodiimides from ureas by dehydration
GB1476088A (en) 1975-04-03 1977-06-10 Ici Ltd Carbodiimides
DE2556760A1 (de) 1975-12-17 1977-06-30 Hoechst Ag Verfahren zur herstellung von carbodiimiden
GB1584153A (en) 1976-09-22 1981-02-04 Ici Ltd Carbodimides
US4066629A (en) 1976-10-28 1978-01-03 Celanese Corporation Process for preparing carbodiimides utilizing a phosphonium salt catalyst
US4098973A (en) 1977-01-31 1978-07-04 The Upjohn Company Compounds and process
US4851521A (en) 1985-07-08 1989-07-25 Fidia, S.P.A. Esters of hyaluronic acid
IT1219587B (it) 1988-05-13 1990-05-18 Fidia Farmaceutici Polisaccaridi carbossiilici autoreticolati
US5356883A (en) 1989-08-01 1994-10-18 Research Foundation Of State University Of N.Y. Water-insoluble derivatives of hyaluronic acid and their methods of preparation and use
ITPD940054A1 (it) 1994-03-23 1995-09-23 Fidia Advanced Biopolymers Srl Polisaccaridi solfatati
ES2189166T3 (es) 1997-04-04 2003-07-01 Fidia Advanced Biopolymers Srl Compuestos del acido hialuronico n-sulfatado, sus derivados y proceso para su preparacion.
ITPD980169A1 (it) 1998-07-06 2000-01-06 Fidia Advanced Biopolymers Srl Ammidi dell'acido ialuronico e dei suoi derivati e processo per la loro preparazione.
EP1237585B1 (en) 1999-12-09 2003-06-18 Biosyntech Canada Inc. Mineral-polymer hybrid composition
WO2002009792A1 (en) 2000-07-28 2002-02-07 Anika Therapeutics, Inc. Bioabsorbable composites of derivatized hyaluronic acid
IT1317359B1 (it) 2000-08-31 2003-06-16 Fidia Advanced Biopolymers Srl Polisaccaridi percarbossilati, quali l'acido ialuronico, processo perla loro preparazione e loro impiego in campo farmaceutico e
IT1317358B1 (it) 2000-08-31 2003-06-16 Fidia Advanced Biopolymers Srl Derivati cross-linkati dell'acido ialuronico.
CA2437417C (en) 2001-02-22 2016-07-26 Anika Therapeutics, Inc. Thiol-modified hyaluronan
US20060272221A1 (en) 2001-11-29 2006-12-07 Treibacher Schleifmittel Gmbh Al2O3 and ZrO2 based abrasive grain, method for the production and use thereof
CA2476653C (en) 2002-02-21 2009-01-27 Encelle, Inc. Cross-linked bioactive hydrogel matrices
ITPD20020064A1 (it) 2002-03-12 2003-09-12 Fidia Advanced Biopolymers Srl Derivati esterei dell'acido ialuronico per la preparazione di idrogelda utilizzare in campo biomedico, sanitario e chirurgico e come sistem
US7393405B2 (en) 2002-06-19 2008-07-01 H.C. Robert Mathys Stiftung Hydraulic cement based on calcium phosphate for surgical use
US8455458B2 (en) * 2002-10-16 2013-06-04 Arthrodynamic Technologies, Animal Health Division, Inc. Composition and method for treating connective tissue damage
DE10257554B4 (de) 2002-12-10 2008-04-10 Treibacher Schleifmittel Gmbh Schleifkörner mit einer Ummantelung aus einem wässrigen Bindemittel und einer komplexen feinkörnigen Oxidverbindung, Verfahren zur Behandlung derartiger Schleifkörner sowie ihre Verwendung für kunstharzgebundene Schleifmittel
US8124120B2 (en) 2003-12-22 2012-02-28 Anika Therapeutics, Inc. Crosslinked hyaluronic acid compositions for tissue augmentation
EP1968614A2 (en) 2005-12-14 2008-09-17 Anika Therapeutics Inc. Treatment of arthritis and other musculoskeletal disorders with crosslinked hyaluronic acid
EP1891984A1 (en) 2006-08-24 2008-02-27 Graftys Macroporous and highly resorbable apatitic calcium-phosphate cement
IT1393419B1 (it) 2009-03-19 2012-04-20 Medivis S R L Composizioni oftalmiche a base di acidi grassi polinsaturi omega-3 e omega-6.
WO2012170805A2 (en) 2011-06-09 2012-12-13 Knee Creations, Llc Instruments and devices for subchondral joint repair
US9649190B2 (en) 2012-03-22 2017-05-16 Trb Chemedica International S.A. Method for repair of ligament or tendon
AU2015221389B2 (en) * 2014-02-20 2018-12-13 Ortho Regenerative Technologies Inc. Freeze-dried polymer compositions for mixing with platelet rich plasma to form implants for tissue repair and/or compositions for therapeutic intra-articular injections

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1859918A (zh) * 2003-10-09 2006-11-08 罗伯特·约翰·佩特雷拉 使用透明质酸治疗急性和过劳扭伤、拉伤的方法
CN102665412A (zh) * 2009-09-23 2012-09-12 克能药物有限公司 用于诱导或加强结缔组织修复的组合物和方法
CN104703612A (zh) * 2012-09-26 2015-06-10 骨治疗公司 包含溶剂/去污剂处理过的血浆(s/d血浆)的制剂及其用途

Also Published As

Publication number Publication date
AU2017257956B2 (en) 2019-11-07
CA3021764C (en) 2021-01-19
JP6826657B2 (ja) 2021-02-03
IL262507B (en) 2020-10-29
IL262507A (en) 2018-12-31
TW202114712A (zh) 2021-04-16
US10441677B2 (en) 2019-10-15
MX2018012964A (es) 2019-06-10
ZA201807136B (en) 2021-05-26
KR20190009303A (ko) 2019-01-28
US20170326271A1 (en) 2017-11-16
JP2019516784A (ja) 2019-06-20
RU2018141386A (ru) 2020-05-27
EP3448394A1 (en) 2019-03-06
WO2017189723A1 (en) 2017-11-02
EP3448394C0 (en) 2023-09-13
TWI755392B (zh) 2022-02-21
NZ747413A (en) 2020-09-25
SG10201913342UA (en) 2020-03-30
AU2017257956A1 (en) 2018-11-15
RU2018141386A3 (zh) 2020-05-27
EP3448394B1 (en) 2023-09-13
SG11201809197XA (en) 2018-11-29
CA3021764A1 (en) 2017-11-02
WO2017189723A9 (en) 2018-06-28
TW201739457A (zh) 2017-11-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Duranti et al. Injectable hyaluronic acid gel for soft tissue augmentation: A clinical and histological study
Oryan et al. Effects of sodium-hyaluronate and glucosamine-chondroitin sulfate on remodeling stage of tenotomized superficial digital flexor tendon in rabbits: a clinical, histopathological, ultrastructural, and biomechanical study
US9220734B2 (en) Injectable polydeoxyribonucleotide composition for the treatment of osteoarticular diseases
JP6598929B2 (ja) 高い弾性を有するヒアルロナンの組成物およびその使用
Corona et al. Tacrolimus as an adjunct to autologous minced muscle grafts for the repair of a volumetric muscle loss injury
US7371399B2 (en) Polymer gel containing hyaluronic acid and collagen, and its use in joints
CN109562124A (zh) 用于处理肌腱退化的方法和组合物
JP2012521270A (ja) 軟骨修復
TWI698241B (zh) 用於治療缺血的肝素組合物
TWI775934B (zh) 用於治療缺血的黏性組合物
Gorelick et al. Results of treatment of greater trochanteric pain syndrome in diabetic patients by single hyaluronic acid injection

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 40006859

Country of ref document: HK

RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20190402