CN109554456A - Gpr1基因在诊断或治疗骨生长或骨质异常疾病的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及GPR1基因在诊断或治疗骨代谢相关疾病的应用，具体公开了一种GPR1基因或GPR1蛋白作为药物靶点在筛选和/或制备预防和/或治疗骨代谢疾病药物中的用途，以及GPR1的激动剂在制备预防和/或治疗骨代谢疾病药物中的用途。

Description

GPR1基因在诊断或治疗骨生长或骨质异常疾病的应用
技术领域
本发明属于生物医药领域，具体涉及GPR1基因在诊断或治疗骨生长或骨质异常疾病的应用。
背景技术
G蛋白偶联受体(G-protein-coupled receptor，GPCR)是一类与G蛋白有信号连接，具有7次跨膜螺旋结构的膜受体，是迄今为止发现的最大的受体超家族，家族成员约有1000种。GPCR激活可启动一系列信号途径，包括G蛋白、β-arrestin、寡聚化和内化，从而将胞外信号跨膜传递到胞内。GPCR介导的信号通路参与包括神经精神系统疾病、心血管疾病、代谢性疾病和免疫性疾病等四大类重大疾病发生发展过程。目前著名上市药物如奥氮平、氯雷他定、雷尼替丁、替加色罗、普萘洛尔等都是以GPCR为作用靶点的，以GPCR为靶点的药物开发无疑是当今药物研究最重点之一，但是GPCR在抗骨质疏松药物上的应用目前并没有报道。
G蛋白偶联受体1(G-protein-coupled receptor 1，GPR1)，是脂肪因子Chemerin的受体之一，属于G蛋白偶联受体家族。本发明利用基因敲除技术制备的全基因敲除小鼠(GPR1–/–)，发现小鼠发生严重的骨质疏松现象，深入研究发现GPR1基因的缺失促进破骨细胞数目增多，破骨细胞活性和抑制成骨细胞活性。针对GPR1信号通路在调控小鼠骨形成中的新发现，验证了G蛋白偶联受体家族在骨质疏松疾病上的新用途，为开发抗骨质疏松药物提供新的GPCR靶点。
据统计，目前全世界约有2亿人患有骨质疏松症，其发病率已跃居世界常见病、多发病的第六位，世界卫生组织已将骨质疏松症列为三大老年病之一。而我国的骨质疏松症患者约有9000万人，占总人口的7％左右，50岁以上人群中，骨质疏松症总患病率为15.7％。随着老龄化进程加快，骨质疏松症发病率呈快速增长态势，已是世界上拥有最多骨质疏松症患者的国家。我国是一个人口大国，所面临的健康诉求尤为突出。随着我国经济的快速发展、生活方式的改变以及人口老龄化问题的不断加剧，重大疾病(如神经精神系统疾病、代谢性疾病、免疫性疾病、心脑血管疾病、肿瘤等)的发生和发展已经成为人民生活质量进一步提高的重要障碍，由此所产生的医疗费用及相关社会、经济等问题给个人、家庭和国家都带来沉重的负担。因此，开展重大疾病的发生、发展机制研究和创新药物的研发，进一步提高人民健康水平，是国民经济可持续发展、建设和谐社会的必然要求。
GPCR超家族是人类基因组中最大的蛋白家族，具有重要生理功能，也是药物研发的重要靶点体系。据美国《华尔街日报》统计，全球20种最畅销的药物中有12种靶向GPCR，每年的销售总额达500多亿美元。进一步开展和加强与GPCR密切相关的基础研究、临床转化研究和新药研发，不但意义重大而且非常迫切。GPCR及配体的结构与功能研究将为蛋白质科学领域的基础研究带来新的突破，为重大疾病诊断与治疗提供新的靶点和方法。
由于GPCR处于细胞内外信号转导的起始步骤，并介导多种多样的生理功能，其分布和表达量，甚至激活程度的差异以及功能失调均可导致各种重大疾病的发生和发展。例如，趋化因子受体的功能失调会导致免疫性疾病，甚至肿瘤的发生和转移。又如，β细胞表达众多GPCR，包括促胰岛素分泌的肠促胰岛素激素类GPCR，如GLP-1R和GIP-R等；胰岛脂类GPCR，如GPR40和GPR119等；胰岛多效肽类GPCR，如胰高血糖素(Glucagon)受体和脑肠肽(Ghrelin)受体等。这些受体的功能失调可能导致胰岛素分泌的不足，最终导致糖尿病等代谢性疾病的发生。再如，人体的心血管功能受GPCR的密切调控，中枢和外周神经系统对心血管系统功能的控制是通过交感和副交感神经实现的，而二者分别释放去甲肾上腺素和乙酰胆碱，又分别与肾上腺素受体和毒蕈碱受体结合引起心血管效应。此外，缓激肽、组胺、内皮素、腺苷及降钙素等也分别作用于特异的受体发挥局部体液调节的作用。
GPCR在制药领域中占有极其重要的地位，与GPCR靶点相关的药物种类多样，用途广泛，在临床研究中用于多种重大疾病治疗。按治疗领域分类，排在前20位的分别为：疼痛、哮喘、高血压、炎症、重度抑郁症、精神分裂症、焦虑症、肥胖症、癌症、老年痴呆症、精神病、帕金森病、糖尿病、偏头痛、肺病、心血管疾病、过敏、心力衰竭、认知障碍以及青光眼。其中治疗疼痛的GPCR药物739个、治疗哮喘的药物486个、高血压治疗药物480个、炎症治疗药物409个。可见，以GPCR为靶点的药物研究是当今世界药物研究的热点，是开发治疗重大疾病药物的最重要的靶点。然而，目前作为药物研发靶点的GPCR仅仅有50多个，而人类基因组中含有800多个GPCR，且并没有关于骨质疏松症的GPCR靶点的报道。因此，发明人从GPR1全基因敲除小鼠中发现严重骨丢失现象，说明GPR1可以成为治疗骨质疏松疾病的有效靶点，即开发GPR1的激动剂或者过表达技术，具有广阔的空间和前景。
发明内容
本发明的一个方面提供了一种GPR1基因或GPR1蛋白作为药物靶点在筛选和/或制备预防和/或治疗骨代谢疾病药物中的用途。
本发明的另一个方面提供了一种GPR1基因或GPR1蛋白作为骨代谢疾病诊断靶点的用途。
在本发明的技术方案中，所述骨代谢疾病为骨生长或骨质的异常增加或减少的相关疾病。
在本发明的技术方案中，所述骨代谢疾病为骨生长或骨质的异常增加的相关疾病为骨硬化症。
在本发明的技术方案中，所述骨代谢疾病为骨生长或骨质的异常减少的相关疾病为骨质疏松症、佩吉特病(Paget)、成骨不全、骨纤维发育不良、磷酸酶过少症以及恶性肿瘤的体液性高钙血症及多发性骨髓瘤诱导的骨质溶解。
本发明的另一个方面提供了一种用于模拟骨生长或骨质的异常减少相关疾病的动物模型，其特征在于，仅将动物的GPR1基因敲除。
本发明的另一个方面提供了一种用于模拟骨生长或骨质的异常减少相关疾病的动物模型的制备方法，其特征在于，仅将动物的GPR1基因敲除。
本发明的另一个方面提供了本发明所述的动物模型作为研究骨生长或骨质的异常减少相关疾病的动物模型。
本发明的另一个方面提供了一种GPR1基因或GPR1蛋白的抑制剂在制备预防或治疗骨生长或骨质的异常增加相关疾病或者成骨细胞数量或活性异常增加和/或破骨细胞数量或活性异常降低的相关疾病或者为骨髓间充质干细胞成骨分化活性增强和/或骨髓单核细胞破骨分化活性减弱导致的相关疾病的药物中的用途。
本发明的另一个方面提供了一种GPR1基因或GPR1蛋白的抑制剂在预防或治疗骨生长或骨质的异常增加相关疾病或者成骨细胞数量或活性异常增加和/或破骨细胞数量或活性异常降低的相关疾病或者为骨髓间充质干细胞成骨分化活性增强和/或骨髓单核细胞破骨分化活性减弱导致的相关疾病中的用途。
优选地，所述骨生长或骨质的异常增加相关疾病为骨硬化症。
其中，GPR1基因或GPR1蛋白的抑制剂选自GPR1拮抗多肽、GPR1shRNA、GPR1siRNA、GPR1miRNA。
本发明的另一个方面提供了一种GPR1基因或GPR1蛋白的激动剂在制备预防或治疗骨生长或骨质的异常降低相关疾病，或者成骨细胞数量或活性异常降低和/或破骨细胞数量或活性异常增高的相关疾病，或者骨髓间充质干细胞成骨分化活性减弱和/或骨髓单核细胞破骨分化活性增强导致的相关疾病的药物中的用途。
本发明的另一个方面提供了一种GPR1基因或GPR1蛋白的激动剂在预防或治疗骨生长或骨质的异常降低相关疾病，或者成骨细胞数量或活性异常降低和/或破骨细胞数量或活性异常增高的相关疾病，或者为骨髓间充质干细胞成骨分化活性减弱和/或骨髓单核细胞破骨分化活性增强导致的相关疾病中的用途。
优选地，所述骨生长或骨质的异常降低相关疾病为骨质疏松症、佩吉特病(Paget)、成骨不全、骨纤维发育不良、磷酸酶过少症以及恶性肿瘤的体液性高钙血症及多发性骨髓瘤诱导的骨质溶解。
本发明提供了一种GPR1基因或GPR1蛋白在调控骨髓细胞中成骨细胞和破骨细胞分化的用途，GPR1基因的缺失导致骨髓细胞中成骨细胞分化降低和破骨细胞分化增加，GPR1基因的上调导致骨髓细胞中成骨细胞分化增加和破骨细胞分化降低。
在本发明中，骨代谢疾病是指骨组织异常生长、发育、修复、吸收、降解或与稳态相关的紊乱。更进一步指骨生长或骨质的异常增加、成骨细胞数量或活性异常增加和/或破骨细胞数量或活性异常降低的相关疾病、骨髓间充质干细胞成骨分化活性减弱和/或骨髓单核细胞破骨分化活性增强导致的相关疾病。或者指的骨质疏松相关的炎症因子的相关疾病。
在本发明中，抗体为其最宽含义，包括例如，但不限于完整抗体及单链抗体、抗体片段和嵌合抗体。
本发明所述的GPR1基因为现有技术中已知基因且是唯一的序列，在NCBI的GeneID:NM_146250。具体序列如下SEQ ID No.1所示:
atggaagtctcaaaggaaatgttatttgaggagttggacaactattcctatgccttagattattactcccaggagtctgacccggaggagaaggtgtacctgggactcgttcactggatctccctgttcttatatgccctagcatttgttctgggcatcccaggaaatgccatcgtcatttggctcatgggattcaagtggaagaagacagtcaccactctttggttcctcaatctggccatcgcagacttcatctttgttctcttcctgcccctgtacatttcctacgtggccttgagtttccactggccctttggcctgtggctctgcaaggttaattccttcattgcccaactgaacatgttttccagtgttttcttcttgacagtgatcagcctggaccgctacatccacttgctccatcctggcttgtctcatcggcaccggactctaaagagctcactggttgttgttatacttgtctggctgttggcttctctgcttggaggtcctaccttatacttccgggacaccatggaggtcaacaaccacatcatttgttataataatttccaggagcatgaactcaccttgatgagacaccatgttctgacctgggtgaagttcctctttggctacctcttccctttgctaaccatgagctcctgctacttgtgcctcatcttcaagatgaaaaagcggaacatcctgatatctagaaagcatctctggatgatcctgtctgtggtcattgccttcttggtttgctggaccccttatcacctgtttagcatctgggagctcagcattcatcacaacagctctttccagaatgtgctgcagggtggaatccccctctcaactggcttagccttcctcaatagctgcttgaatcccatcctttacgtcctaataagcaagacgttccaagcccgcttcagggcctctgttgctgaggtactaaagcgttcgctgtgggaagccagctgctctggtacagtcagtgaacaactcaggagtgctgaaaccaagagcctgtctctcctagaaactgcccagtga SEQ ID No.1
有益效果
本发明首次证实了GPR1基因与代谢骨病之间的联系，为疾病的预防、诊断和治疗提供了依据。
附图说明
图1是micro CT扫描分析野生型(WT)和GPR1基因敲除型小鼠(GPR1–/–)的股骨的结果图。其中A是micro CT扫描数据3D重建图展示股骨和股骨远端生长板区域下松质骨骨小梁的分布情况；B是比较WT和GPR1–/–小鼠股骨的骨参数指标：骨密度(BMD),骨体积分数(BV/TV)和骨小梁数量(Tb.N)，**，P＜0.01。
②图2是野生型小鼠(WT)和GPR1基因敲除型小鼠(GPR1–/–)股骨石蜡切片的HE和TRAP染色的结果图。
③图3是野生型小鼠(WT)和GPR1基因敲除型小鼠(GPR1–/–)股骨石蜡切片的IHC染色的结果图，包括抗成骨marker蛋白Runx2和破骨marker蛋白NFATc1。
④图4是野生型小鼠(WT)和GPR1基因敲除型小鼠(GPR1–/–)血清中与骨质疏松相关炎症因子蛋白水平比较，**，P＜0.01。
具体实施方式
实施例1小鼠股骨样品的采集
C57BL/6J背景的GRR1基因敲除小鼠(GPR1–/–)购自美国Deltagen有限公司，由美国斯坦福大学Zable博士课题组提供。C57BL/6J野生型小鼠(WT)来自中国科学院深圳先进技术研究院实验动物中心。小鼠饲养在一个具有12h明暗周期的恒定温度、湿度的无特定病原体(SPF)环境中，小鼠可随时自主的进食和饮水。小鼠的福利和实验步骤严格遵循实验动物操作细则及中国科学院深圳先进技术研究院动物委员会关于动物伦理的规定。将小鼠断颈处死后，取右侧股骨70％乙醇固定用于CT分析，左侧股骨4％PFA固定后脱钙石蜡包埋。
实施例2小鼠股骨CT扫描分析
使用德国BRUKER公司SkyScan1176MicroCT对小鼠股骨进行扫描，利用泡沫板固定股骨位置，仪器扫描参数设定为电压70kV，电流500μA，分辨率9μm。扫描重建完成后，对股骨干骺端骨小梁进行数据分析。从股骨远端干骺端生长板消失处继续往下弃去50层后，选取400层作为骨小梁重建区域进行分析，使用MicroCT自带软件进行重建，阈值为80。主要分析指标包括骨密度(BMD),骨体积分数(BV/TV),和骨小梁数量(Tb.N)三项指标。
实施例3骨切片H&E(hematoxylin-eosin)染色和TRAP(tartrate-resistant acidphosphatase)染色
使用博士德生物BOSTER H&E染色试剂盒(货号AR1180)，按照试剂盒说明书步骤对骨切片进行H&E染色：
①石蜡切片，常规脱蜡至水。
②滴加苏木素覆盖标本，染色3min。
③自来水将苏木素洗涤干净。
④将切片浸入返蓝液中60s，自来水洗涤干净。
⑤将切片浸入95％酒精30s后，直接滴加伊红染色1min。
⑥自来水洗涤。
⑦脱水，透明，封片，拍照。
使用Takara公司TRAP染色试剂盒(货号MK300)，按照试剂盒说明书步骤对骨切片进行TRAP染色：
①石蜡切片，常规脱蜡至水。
②滴加底物反应液覆盖标本，37℃孵育30min。
③蒸馏水将反应液洗涤干净，终止反应。
④蒸馏水洗3次，每次5min。
⑤直接滴加甘油封片，拍照。
实施例4免疫组化染色(IHC染色)
①石蜡切片股骨组织常规复水。二甲苯Ⅰ，10min→二甲苯Ⅱ，10min→100％酒精Ⅰ，5min→100％酒精Ⅱ，5min→90％酒精，5min→80％酒精，5min→70％酒精，5min。
②蛋白酶K法抗原修复。滴加蛋白酶K工作液(博士德生物，货号AR0022)覆盖标本，37℃孵育30min。
③消除内源性过氧化物酶活性。抗原修复后，1×PBS洗一次，5min；洗完后将片子置于3％过氧化氢/甲醇溶液(45ml甲醇+5ml30％过氧化氢，现配现用)中孵育0.5h。
④封闭。孵育后，1×PBS洗三次，每次5min；将片子放入湿盒中，在组织周围画圈(不要离组织太近)，滴入blocking buffer(1％BSA，1×PBS溶解)孵育1h。
⑤加一抗。孵育后，无需用PBS洗，甩去blocking液后，加入稀释好的一抗(1：100)，4℃过夜孵育。
⑥加二抗。取出室温放置30min；1×PBS洗三次，每次5min。加入稀释好的二抗(1：200)，孵育30min。
⑦DAB显色。1×PBS洗三次，每次5min。加入现配的DAB显色液(天根生化，货号PA110)，在显微镜下观察，显色反应通常发生在1-10min，显色完成后，及时放入自来水中终止反应。
⑧复染。将显色完成后的片子放入苏木素，染色2min，自来水中冲洗2min，盐酸酒精分化至片子染成粉红色，最后氨水返蓝3-5min；
⑨脱水，透明，封片，拍照。
实施例5ELISA分析
ELISA分析按照北京达科为生物技术有限公司试剂盒说明书步骤进行。
①使用前，将所有试剂充分混匀，避免产生泡沫。
②根据实验孔(空白和标准品)数量，确定所需的板条数目。样品(含标准品)和空白都应做复孔。
③加样：100μL/well加入稀释后的Cytokine standard至标准品孔，100μL/well加入样品至样品孔，设置空白孔，用Dilution buffer R(1×)代替样本和标准品。
④加检测抗体：50μL/well加入稀释后的Biotinylated antibody。混匀后，盖上封板膜，37℃温育90min。
⑤洗板：扣去孔内液体，300μL/well加入1×washing buffer；停留1min后弃去孔内液体。重复4次，每一次在滤纸上扣干。
⑥加酶：100μL/well加入稀释后的Streptavidin-HRP。盖上封板膜，37℃温育30min。
⑦洗板：重复步骤5。
⑧显色：100μL/well加入TMB，37℃避光温育10min，根据孔内颜色的深浅(深蓝色)来判定终止反应。
⑨终止反应：100μL/well迅速加入Stop solution终止反应。
⑩读板：终止后10min内，用检测波长(measurement wavelength)450nm读值。结果
①GRR1基因的缺失导致小鼠发生严重骨丢失现象
与野生型小鼠相比，Micro CT 3D重建图显示GPR1基因敲除小鼠在股骨远端的松质骨区域发生明显的骨小梁减少(图1A)，包括股骨的横切面和纵切面，都是相似的结果。随后，我们通过Micro CT自带软件CT analyser&CT-volume分析骨参数数据，在小鼠股骨远端(图1B)中，GPR1基因敲除小鼠的骨密度BMD、骨小梁的骨体积分数(BV/TV)和骨小梁的数量(Tb.N)均发生显著的降低，这与3D重建图是吻合的，进一步证明了GPR1基因敲除小鼠发生严重的骨丢失现象，这是世界上首次关于G蛋白偶联受体(GPR1)介导小鼠骨形成的体内数据报道。
②GRR1基因的缺失促进破骨细胞数目增多和破骨marker蛋白表达，抑制成骨marker蛋白表达
为研究小鼠骨头中发生的结构变化，我们对小鼠的股骨进行脱钙，然后石蜡包埋切片，HE染色可以清楚的观察小鼠骨小梁的结构变化，图2显示在GPR1基因敲除小鼠股骨远端松质骨区域骨小梁数目明显减少。骨生成与破骨细胞也有关系，我们用TRAP染色分析了骨小梁中破骨细胞的分布情况，结果显示在GPR1基因敲除小鼠股骨中破骨细胞明显增多。
随后对股骨组织石蜡切片进行IHC染色，我们选用成骨marker蛋白Runx2和破骨marker蛋白NFATc1作为一抗，图3染色结果显示，与野生型小鼠骨组织相比，GPR1基因敲除型小鼠(GPR1–/–)成骨marker蛋白Runx2表达显著减少，而破骨marker蛋白NFATc1表达显著增多，说明GRR1基因的缺失促进破骨而抑制成骨。
③GRR1基因的缺失导致与骨质疏松相关的炎症因子蛋白表达水平上升
据文献报道，炎症因子TNFγ、IL-6和IL-1β与骨质疏松疾病的发生发展有关，我们检测了小鼠血清中炎症因子的蛋白水平，图4结果显示，与野生型小鼠相比，GPR1基因敲除型小鼠中(GPR1–/–)炎症因子(TNFγ、IL-6和IL-1β)的蛋白水平发生显著的升高，说明GPR1基因的缺失导致小鼠骨质疏松炎症因子的上调，从侧面反应基因敲除小鼠发生骨丢失的现象。
本领域技术人员从以上描述可以容易地确定本发明的本质特征，而且在不偏离其精神和范围的情况下，可对本发明进行各种改变和改进以适用于各种病症和应用。
SEQUENCE LISTING
<110> 深圳先进技术研究院
<120> GPR1基因在诊断或治疗骨生长或骨质异常疾病的应用
<160> 1
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 1062
<212> DNA
<213> GPR1蛋白
<400> 1
atggaagtct caaaggaaat gttatttgag gagttggaca actattccta tgccttagat 60
tattactccc aggagtctga cccggaggag aaggtgtacc tgggactcgt tcactggatc 120
tccctgttct tatatgccct agcatttgtt ctgggcatcc caggaaatgc catcgtcatt 180
tggctcatgg gattcaagtg gaagaagaca gtcaccactc tttggttcct caatctggcc 240
atcgcagact tcatctttgt tctcttcctg cccctgtaca tttcctacgt ggccttgagt 300
ttccactggc cctttggcct gtggctctgc aaggttaatt ccttcattgc ccaactgaac 360
atgttttcca gtgttttctt cttgacagtg atcagcctgg accgctacat ccacttgctc 420
catcctggct tgtctcatcg gcaccggact ctaaagagct cactggttgt tgttatactt 480
gtctggctgt tggcttctct gcttggaggt cctaccttat acttccggga caccatggag 540
gtcaacaacc acatcatttg ttataataat ttccaggagc atgaactcac cttgatgaga 600
caccatgttc tgacctgggt gaagttcctc tttggctacc tcttcccttt gctaaccatg 660
agctcctgct acttgtgcct catcttcaag atgaaaaagc ggaacatcct gatatctaga 720
aagcatctct ggatgatcct gtctgtggtc attgccttct tggtttgctg gaccccttat 780
cacctgttta gcatctggga gctcagcatt catcacaaca gctctttcca gaatgtgctg 840
cagggtggaa tccccctctc aactggctta gccttcctca atagctgctt gaatcccatc 900
ctttacgtcc taataagcaa gacgttccaa gcccgcttca gggcctctgt tgctgaggta 960
ctaaagcgtt cgctgtggga agccagctgc tctggtacag tcagtgaaca actcaggagt 1020
gctgaaacca agagcctgtc tctcctagaa actgcccagt ga 1062

Claims (10)

1.一种GPR1基因或GPR1蛋白在筛选用于治疗或预防骨代谢疾病的药物靶点的用途。
2.一种GPR1基因或GPR1蛋白作为预防和/或治疗骨代谢疾病治疗靶点、或者作为骨代谢疾病诊断靶点的用途。
3.根据权利要求1或2所述的用途,所述骨代谢疾病为骨生长或骨质的异常增加或减少的相关疾病；优选为骨质疏松症、骨硬化症、佩吉特病(Paget)、成骨不全、骨纤维发育不良、磷酸酶过少症以及恶性肿瘤的体液性高钙血症及多发性骨髓瘤诱导的骨质溶解。
4.一种GPR1基因或GPR1蛋白的抑制剂在制备预防或治疗骨生长或骨质的异常增加相关疾病或者成骨细胞数量或活性异常增加和/或破骨细胞数量或活性异常降低的相关疾病或者为骨髓间充质干细胞成骨分化活性增强和/或骨髓单核细胞破骨分化活性减弱导致的相关疾病的药物中的用途。
5.根据权利要求4所述的用途，所述骨生长或骨质的异常增加相关疾病为骨硬化症。
6.根据权利要求4所述的用途，其中，GPR1基因或GPR1蛋白的抑制剂选自GPR1拮抗多肽、GPR1shRNA、GPR1siRNA、GPR1miRNA。
7.一种GPR1基因或GPR1蛋白的激动剂在制备预防或治疗骨生长或骨质的异常降低相关疾病，或者成骨细胞数量或活性异常降低和/或破骨细胞数量或活性异常增高的相关疾病，或者骨髓间充质干细胞成骨分化活性减弱和/或骨髓单核细胞破骨分化活性增强导致的相关疾病的药物中的用途。
8.根据权利要求7所述的用途，所述骨生长或骨质的异常降低相关疾病为骨质疏松症、佩吉特病(Paget)、成骨不全、骨纤维发育不良、磷酸酶过少症以及恶性肿瘤的体液性高钙血症及多发性骨髓瘤诱导的骨质溶解。
9.一种GPR1基因或GPR1蛋白在调控骨髓细胞中成骨细胞和破骨细胞分化的用途，GPR1基因的缺失导致骨髓细胞中成骨细胞分化降低和破骨细胞分化增加，GPR1基因的上调导致骨髓细胞中成骨细胞分化增加和破骨细胞分化降低。
10.一种用于模拟骨生长或骨质的异常减少相关疾病的动物模型的制备方法，其特征在于，仅将动物的GPR1基因敲除。
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