CN109554314A - 一种耐盐生物脱硫菌剂及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于污水处理技术领域，涉及利用微生物菌剂处理污水的方法，具体涉及一种耐盐生物脱硫菌剂及其应用。所提供的生物脱硫菌剂包含巴斯德毕赤酵母，热带假丝酵母以及短小芽孢杆菌，其中巴斯德毕赤酵母，热带假丝酵母在中国微生物菌种保藏管理委员普通微生物中心进行了保藏，保藏编号分别为CGMCC NO.16155和CGMCC NO.16156。该耐盐生物脱硫菌剂可对全盐含量50g/L以下，硫化物浓度10g/L以下的废水进行处理，硫化物处理的容积负荷达到2.0kg/(m3·d)，出水硫化物不高于10mg/L，硫化物转化率能够稳定在99％以上，本发明工艺简单，运行成本低，处理效果明显，适于工业化应用。

Description

一种耐盐生物脱硫菌剂及其应用
技术领域
本发明属于污水处理技术领域，涉及利用微生物菌剂处理污水的方法，具体涉及一种耐盐生物脱硫菌剂及其应用。
背景技术
高盐含硫废水在不同行业如炼油、石化、燃料、制革以及制药等生产过程中都大量存在，废水中的硫化物具有毒性大、臭味浓、腐蚀性强等特点，不仅会对人体造成伤害，还会对环境造成巨大的污染,且会对废水的后续处理造成很大的影响，因此必须处理后才能排放，针对高盐、高浓度、难降解的含硫废水处理始终是各行业的高难课题。
目前，高盐含硫废水的常规处理方法为酸化回收法和湿式空气氧化法(WAO)。
常规的焚烧法、湿式氧化法处理高盐含硫废水存在投资大、运行成本高、产生二次污染等问题，本项目通过对耐盐的脱硫菌剂的研发，优化发酵工艺，对各菌剂进行复配效果验证，构建生物菌群，通过微生物的代谢活动使废水中的污染物转化为代谢最终产物CO2、水、硫单质或者硫酸盐等无害产物，该方法工艺简单，投资小、运行成本低，适于工业化应用，经济效益和社会效益明显。
发明内容
本发明的目的是针对上述存在的问题，提供了一种耐盐微生物脱硫菌剂及其应用。一种耐盐微生物脱硫菌剂是根据高盐含硫废水中盐含量高、COD高、硫化物含量高的性质而研发，通过微生物的代谢活动使废水中的高污染物转化为代谢最终产物CO2、水、硫单质或者硫酸盐等无害产物，降低废水中的硫化物和COD，将传统生化方法难以处理的高浓度、高毒性、难降解的高盐含硫废水以比较经济的处理方式处理成低浓度、低毒性的一般废水。
为达到以上技术效果，首先发明人提供了一种耐盐生物脱硫菌剂，包括巴斯德毕赤酵母，热带假丝酵母以及短小芽孢杆菌三个菌种，其中，巴斯德毕赤酵母优选YJY18-07菌株，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.16155；热带假丝酵母优选YJY18-08菌株，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.16156；短小芽孢杆菌购买自中国微生物菌种保藏管理委员普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.1.10291。
优选的，该菌剂中巴斯德毕赤酵母，热带假丝酵母以及短小芽孢杆菌的有效活菌数比例为3-5:10-14：80-140；该菌剂的有效活菌总数为3×109CFU/g-4×109CFU/g。这三个菌种均对高盐含硫废水有一定的脱硫作用，但从总体脱硫效果上看，三个微生物单菌脱硫的效果均不理想，实验表明单菌无法达到脱硫的要求，多种微生物的组合形成菌群有利于发挥综合优势提升脱硫的效率。
上述YJY18-07和YJY18-08菌株均为发明人筛选所得，通过观察和检测发现：
菌株YJY18-07，形态特征：细胞呈球形,椭圆形,拉长型,偶尔成锥形,但不形成尖顶。无性繁殖方式为多边芽殖,有些种类可形成节孢子。每个子囊通常包括1-4个子囊孢子,偶尔多于4个,孢子呈帽状、半球形或者球形有棱,子囊成熟后一般裂开，该菌株的理化性质见表1：
表1菌株YJY18-07的理化性质
+，阳性反应；－，阴性反应
菌株YJY18-08，形态特征：菌落乳白色、形状为规则圆形、表面较平坦、干燥，培养较长时间后，假菌丝分支分布，细胞呈圆形或椭圆形，该菌株的理化性质见表2：
表2菌株YJY18-08的理化性质
+，阳性反应；－，阴性反应
发明人对YJY18-07、YJY18-08分别进行了18S rDNA测序，所测得的序列进行BLSTN比对，比对结果显示，菌株YJY18-07的18S rDNA的核苷酸序列与酵母属(Bacillus sp.)不同菌株的核苷酸序列有大于99％的同源性，与其中明确标记为巴斯德毕赤酵母的5株菌株有100％的同源性，进一步确定为一株巴斯德毕赤酵母，同样的方法，鉴定出YJY18-08为热带假丝酵母。
为了保证菌剂中的有效活菌数以及菌种的存活率，提高硫化物的降解效率，优选的，该菌剂为固体菌剂。
该菌剂的具体制备方法如下：
1)菌种扩大培养：分别对三个微生物菌种进行扩大培养，优选的包括菌种活化，二级种子培养，发酵培养过程，具体为：
(1)菌种活化：制备种子培养基，按照1‰-2‰(v/v)的比例接种甘油保存的菌种，160-180r/min摇床培养20-25h；其中巴斯德毕赤酵母和热带假丝酵母的培养温度为28-32℃，短小芽孢杆菌的培养温度为30-35℃；
(2)二级种子培养：将活化的种子转接到新的种子培养基中进行二级种子培养，接种量为10％左右，160-180r/min摇床培养48h左右；其中巴斯德毕赤酵母和热带假丝酵母的培养温度为28-32℃，短小芽孢杆菌的培养温度为30-35℃；
步骤(1)和(2)中的巴斯德毕赤酵母和热带假丝酵母培养基均为：10g/L酵母膏，20g/L蛋白胨，20g/L葡萄糖；步骤(1)和(2)中的短小芽孢杆菌的培养基为：10g/L蛋白胨，5g/L酵母膏，10g/LNaCl，pH 7.2-7.4；
(3)发酵培养：将制备的二级种子按照5-10％的接种量接种到发酵罐中，控制罐压0.05MPa，溶氧≧20％进行发酵；
其中巴斯德毕赤酵母和热带假丝酵母的发酵培养基配方为：葡萄糖30g/L，豆粕21g/L，NH4Cl2.2g/L，硫酸镁0.5g/L，磷酸二氢钾1.1g/L，磷酸氢二钾0.44g/L，硫酸锰0.1g/L，消泡剂1ml/L；发酵条件为温度28-32℃，PH控制在5.1-5.3，培养时间24h左右；
短小芽孢杆菌的发酵培养基配方如下：葡萄糖40g/L，(NH4)2SO4 2g/L，豆粕20g/L，氯化钠5g/L，硫酸镁0.1g/L，磷酸二氢钾1g/L，硫酸亚铁0.04g/L，氯化钙0.3g/L，硫酸锰0.3g/L，消泡剂1ml/L；发酵条件为温度30-35℃，PH控制在6.7-6.9，培养时间48h左右；
优选，所得发酵液的有效活菌数分别为：巴斯德毕赤酵母1.8×109-2.2×109CFU/mL，热带假丝酵母5×109-7×109CFU/mL，短小芽孢杆菌1×1011-2×1011CFU/mL；
2)按比例混合发酵液：将制备的三个菌种的发酵液按照有效活菌数比例进行混合，获得耐盐生物脱硫液体菌剂；
3)制备固体菌剂：向步骤2)所得耐盐生物脱硫液体菌剂中添加硅藻土和麸皮，硅藻土添加比例为20-40g/L，麸皮添加比例为10-20g/L，转速1000r/min搅拌30min左右混合均匀，置于离心机中3500-4000r/min离心30-40min，直至离心机排污口处无发酵液流出，停止离心，收集菌体，然后20-30℃的鼓风干燥或自然通风晾干，直至水分含量≤10％，即得耐盐生物脱硫固体菌剂。
发明人进一步给出了利用上述耐盐生物脱硫菌剂的应用方法，具体如下：将菌剂投加到污水好氧处理池，初始投加比例为0.08-0.15kg/L，连续进出水，控制好氧池温度为25-35℃，溶解氧为2-6mg/L，污泥MLSS为3-10g/L，每隔10-15天补加一次耐盐脱硫菌剂，每次补加菌剂的比例为0.02-0.05kg/L；
优选的，污水全盐含量≤50g/L，硫化物浓度≤10g/L；
按照此方法处理，硫化物处理的容积负荷能可达到2.0kg/(m3·d)，最终出水硫化物不高于10mg/L，硫化物转化率达到99％以上。
发明人进一步将固体菌剂与直接加入相同量的液体菌剂的处理效果比较，降解率提高10％以上。制备成固体菌剂不仅方便了储存和运输，且固体载体中硅藻土在污水处理中能促进污水悬浮物的中和、絮凝、吸附、沉降和助滤的功能，麸皮也可以为菌种的繁殖提供营养，提高菌体的成活率。
综上所述，利用本发明所获得菌剂处理高盐含硫废水具有以下优点：
1、处理效果好，该方法能够处理的废水全盐含量可达50g/L，硫化物浓度高达10g/L，最终出水硫化物不超过10mg/L，硫化物转化率能够稳定在99％以上。
2、投资小、运行成本低。该菌剂在污水好氧处理池中即可使用，不需要额外增加装置和设备，运行成本仅为常规工艺的1/10-1/20，具有显著的经济效益和社会效益。
综上所述，本发明提供了一种耐盐生物脱硫菌剂及利用该菌剂处理高盐含硫废水的方法，可对全盐含量50g/L以下，硫化物浓度10g/L以下的废水进行处理，硫化物容积处理负荷达到2.0kg/(m3·d)，出水硫化物不高于10mg/L，硫化物转化率能够稳定在99％以上。
保藏信息
1.YJY18-07菌株：
保藏时间：2018年07月25日
保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员普通微生物中心
保藏编号：CGMCC No.16155
保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院中科院微生物研究所
分类命名:巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)
2.YJY18-08菌株：
保藏时间：2018年07月25日
保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员普通微生物中心
保藏编号：CGMCC No.16156
保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院中科院微生物研究所
分类命名:热带假丝酵母(Candida tropicalis)
具体实施方式
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容做进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。除特殊说明外，以下实施例中均采用常规技术操作完成。
实施例1
一种耐盐生物脱硫菌剂的制备，其中毕赤酵母的发酵培养步骤如下：
(1)菌种活化：制备100ml种子培养基，加入2个玻璃片，无菌条件下接种-20℃条件下甘油管保存的菌100ul，摇床培养20h(温度28℃，转速160r/min)。
种子培养基：10g/L酵母膏，20g/L蛋白胨，20g/L葡萄糖，灭菌条件121℃，0.15Mpa，灭菌20min。
(2)二级种子的制备：将100ml活化种子转接至1L种子培养基中，摇床培养48h(温度28℃，转速160r/min)。
(3)发酵过程：
培养基配方如下：葡萄糖30g/L，豆粕21g/L，NH4Cl2.2g/L，硫酸镁0.5g/L，磷酸二氢钾1.1g/L，磷酸氢二钾0.44g/L，硫酸锰0.1g/L，消泡剂1ml/L。
控制条件：将制备的1L二级种子接种到20L发酵培养基中，控制温度28℃，罐压0.05MPa，溶氧≧20％，PH控制在5.1-5.3，发酵培养24h，获得19.2L巴斯德毕赤酵母发酵菌液，所得毕赤酵母发酵液的有效活菌数为1.8×109CFU/mL。
热带假丝酵母的发酵培养步骤如下：
(1)菌种活化：制备100ml种子培养基，加入2个玻璃片，无菌条件下接种-20℃条件下甘油管保存的菌150ul，摇床培养22h(温度30℃，转速170r/min)。
种子培养基：10g/L酵母膏，20g/L蛋白胨，20g/L葡萄糖，灭菌条件121℃，0.15Mpa，灭菌20min。
(2)二级种子的制备：将100ml活化种子转接至1L种子培养基中，摇床培养48h(温度30℃，转速170r/min)。
(3)发酵过程：
培养基配方如下：葡萄糖30g/L，豆粕21g/L，NH4Cl2.2g/L，硫酸镁0.5g/L，磷酸二氢钾1.1g/L，磷酸氢二钾0.44g/L，硫酸锰0.1g/L，消泡剂1ml/L。
控制条件：将制备的1L二级种子接种到15L发酵培养基中，控制温度30℃，罐压0.05MPa，溶氧≧20％，PH控制5.1-5.3，发酵培养24h，获得14.4L热带假丝酵母发酵菌液，所得热带假丝酵母发酵液的有效活菌数为5.2×109CFU/mL。
短小芽孢杆菌的发酵培养步骤如下：
(1)菌种活化：制备100ml种子培养基，加入3个玻璃片，无菌条件下接种-20℃条件下甘油管保存的菌200ul，摇床培养20h(温度30℃，转速160r/min)。
种子培养基：10g/L蛋白胨，5g/L酵母膏，10g/LNaCl，摇动容器直至溶质溶解，用5mol/L NaOH调pH至7.2-7.4，灭菌条件121℃，0.15Mpa，灭菌20min。
(2)二级种子的制备：将100ml活化种子转接至1L种子培养基中，摇床培养48h(温度30℃，转速180r/min)。
(3)发酵过程：
培养基配方如下：葡萄糖40g/L，(NH4)2SO4 2g/L，豆粕20g/L，氯化钠5g/L，硫酸镁0.1g/L，磷酸二氢钾1g/L，硫酸亚铁0.04g/L，氯化钙0.3g/L，硫酸锰0.3g/L，消泡剂1ml/L。
控制条件：将制备的1L二级种子接种到10L发酵罐中，控制温度30℃，罐压0.05MPa，溶氧≧20％，PH控制6.7-6.9，发酵培养48h，获得9.7L短小芽孢杆菌发酵菌液，所得短小芽孢杆菌发酵液的有效活菌数为1.3×1011CFU/mL。
固体菌剂的制备：
将培养的巴斯德毕赤酵母发酵菌液、热带假丝酵母发酵菌液以及短小芽孢杆菌发酵菌液按照有效活菌数3:10:80的比例进行充分混合，制成复合菌液，向复合菌液中添加20g/L硅藻土和15g/L麸皮，转速1000r/min搅拌30min混合均匀，置于三足离心机中3500r/min离心30min，离心机排污口处无发酵液流出，停止离心，打开三足离心机，收集滤布上的菌剂，然后将湿菌剂在20℃的鼓风干燥箱内晾干，测定水分含量为8.9％，获得耐盐生物脱硫固体菌剂，通过平板计数，测得固体菌剂中所含的总有效活菌数达到3.1×109CFU/g，巴斯德毕赤酵母、热带假丝酵母以及短小芽孢杆菌的有效活菌数分别为：1.07×108CFU/g,2.44×108CFU/g,2.749×109CFU/g。
实施例2
一种耐盐生物脱硫菌剂的制备，其中巴斯德毕赤酵母的发酵培养步骤如下：
(1)菌种活化：制备100ml种子培养基，加入2个玻璃片，无菌条件下接种-20℃条件下甘油管保存的菌150ul，摇床培养23h(温度30℃，转速170r/min)。
种子培养基：10g/L酵母膏，20g/L蛋白胨，20g/L葡萄糖，灭菌条件121℃，0.15Mpa，灭菌20min。
(2)二级种子的制备：将100ml活化种子转接至1L种子培养基中，摇床培养48h(温度30℃，转速170r/min)。
(3)发酵过程：
培养基配方如下：葡萄糖30g/L，豆粕21g/L，NH4Cl2.2g/L，硫酸镁0.5g/L，磷酸二氢钾1.1g/L，磷酸氢二钾0.44g/L，硫酸锰0.1g/L，消泡剂1ml/L。
控制条件：将制备的1L二级种子接种到10L发酵培养基中，控制温度30℃，罐压0.05MPa，溶氧≧20％，PH控制在5.1-5.3，发酵培养24h，获得9.5L巴斯德毕赤酵母发酵菌液，所得巴斯德毕赤酵母发酵液的有效活菌数为2.0×109CFU/mL。
热带假丝酵母的发酵培养步骤如下：
(1)菌种活化：制备100ml种子培养基，加入2个玻璃片，无菌条件下接种-20℃条件下甘油管保存的菌200ul，摇床培养25h(温度28℃，转速160r/min)。
种子培养基：10g/L酵母膏，20g/L蛋白胨，20g/L葡萄糖，灭菌条件121℃，0.15Mpa，灭菌20min。
(2)二级种子的制备：将100ml活化种子转接至1L种子培养基中，摇床培养48h(温度28℃，转速160r/min)。
(3)发酵过程：
培养基配方如下：葡萄糖30g/L，豆粕21g/L，NH4Cl2.2g/L，硫酸镁0.5g/L，磷酸二氢钾1.1g/L，磷酸氢二钾0.44g/L，硫酸锰0.1g/L，消泡剂1ml/L。
控制条件：将制备的1L二级种子接种到10L发酵培养基中，控制温度32℃，罐压0.05MPa，溶氧≧20％，PH控制5.1-5.3，发酵培养24h，获得9.8L热带假丝酵母发酵菌液，所得热带假丝酵母发酵液的有效活菌数为6.1×109CFU/mL。
短小芽孢杆菌的发酵培养步骤如下：
(1)菌种活化：制备100ml种子培养基，加入3个玻璃片，无菌条件下接种-20℃条件下甘油管保存的菌100ul，摇床培养25h(温度33℃，转速170r/min)。
种子培养基：10g/L蛋白胨，5g/L酵母膏，10g/LNaCl，摇动容器直至溶质溶解，用5mol/L NaOH调pH至7.2-7.4，灭菌条件121℃，0.15Mpa，灭菌20min。
(2)二级种子的制备：将100ml活化种子转接至1L种子培养基中，摇床培养48h(温度33℃，转速170r/min)。
(3)发酵过程：
培养基配方如下：葡萄糖40g/L，(NH4)2SO4 2g/L，豆粕20g/L，氯化钠5g/L，硫酸镁0.1g/L，磷酸二氢钾1g/L，硫酸亚铁0.04g/L，氯化钙0.3g/L，硫酸锰0.3g/L，消泡剂1ml/L。
控制条件：将制备的1L二级种子接种到10L发酵罐中，控制温度32℃，罐压0.05MPa，溶氧≧20％，PH控制6.7-6.9，发酵培养48h，获得9.6L短小芽孢杆菌发酵菌液，所得短小芽孢杆菌发酵液的有效活菌数为1.6×1011CFU/mL。
固体菌剂的制备：
将培养的巴斯德毕赤酵母发酵菌液、热带假丝酵母发酵菌液以及短小芽孢杆菌发酵菌液按有效活菌数4:13:120的比例进行充分混合，制成复合菌液，向复合菌液中添加30g/L硅藻土和20g/L麸皮，转速1000r/min搅拌30min混合均匀，置于三足离心机中3800r/min离心35min，离心机排污口处无发酵液流出，停止离心，打开三足离心机，收集滤布上的菌剂，然后将湿菌剂在25℃的鼓风干燥箱内晾干，测定水分含量为8.3％，获得耐盐生物脱硫固体菌剂，通过平板计数，测得菌剂中所含的总有效活菌数达到3.5×109CFU/g，其中巴斯德毕赤酵母、热带假丝酵母以及短小芽孢杆菌的有效活菌数分别为：9.6×107CFU/g,2.88×108CFU/g,3.12×109CFU/g。
实施例3
一种耐盐生物脱硫菌剂的制备，其中巴斯德毕赤酵母的发酵培养步骤如下：
(1)菌种活化：制备1L种子培养基，加入3个玻璃片，无菌条件下接种-20℃条件下甘油管保存的菌2ml，摇床培养25h(温度32℃，转速180r/min)。
种子培养基：10g/L酵母膏，20g/L蛋白胨，20g/L葡萄糖，灭菌条件121℃，0.15Mpa，灭菌20min。
(2)二级种子的制备：将1L活化种子转接至10L种子培养基中，摇床培养48h(温度30℃，转速180r/min)。
(3)发酵过程：
培养基配方如下：葡萄糖30g/L，豆粕21g/L，NH4Cl2.2g/L，硫酸镁0.5g/L，磷酸二氢钾1.1g/L，磷酸氢二钾0.44g/L，硫酸锰0.1g/L，消泡剂1ml/L。
控制条件：将制备的10L二级种子接种到200L发酵培养基中，控制温度32℃，罐压0.05MPa，溶氧≧20％，PH控制在5.1-5.3，发酵培养24h，获得190L巴斯德毕赤酵母发酵菌液，所得巴斯德毕赤酵母发酵液的有效活菌数为2.1×109CFU/mL。
热带假丝酵母的发酵培养步骤如下：
(1)菌种活化：制备1L种子培养基，加入2个玻璃片，无菌条件下接种-20℃条件下甘油管保存的菌1ml，摇床培养20h(温度32℃，转速180r/min)。
种子培养基：10g/L酵母膏，20g/L蛋白胨，20g/L葡萄糖，灭菌条件121℃，0.15Mpa，灭菌20min。
(2)二级种子的制备：将1L活化种子转接至10L种子培养基中，摇床培养48h(温度32℃，转速180r/min)。
(3)发酵过程：
培养基配方如下：葡萄糖30g/L，豆粕21g/L，NH4Cl2.2g/L，硫酸镁0.5g/L，磷酸二氢钾1.1g/L，磷酸氢二钾0.44g/L，硫酸锰0.1g/L，消泡剂1ml/L。
控制条件：将制备的10L二级种子接种到200L发酵培养基中，控制温度30℃，罐压0.05MPa，溶氧≧20％，PH控制5.1-5.3，发酵培养24h，获得192L热带假丝酵母发酵菌液，所得热带假丝酵母发酵液的有效活菌数为6.8×109CFU/mL。
短小芽孢杆菌的发酵培养步骤如下：
(1)菌种活化：制备1L种子培养基，加入2个玻璃片，无菌条件下接种-20℃条件下甘油管保存的菌1.5ml，摇床培养25h(温度35℃，转速180r/min)。
种子培养基：10g/L蛋白胨，5g/L酵母膏，10g/LNaCl，摇动容器直至溶质溶解，用5mol/L NaOH调pH至7.2-7.4，灭菌条件121℃，0.15Mpa，灭菌20min。
(2)二级种子的制备：将1L活化种子转接至10L种子培养基中，摇床培养48h(温度35℃，转速180r/min)。
(3)发酵过程：
培养基配方如下：葡萄糖40g/L，(NH4)2SO4 2g/L，豆粕20g/L，氯化钠5g/L，硫酸镁0.1g/L，磷酸二氢钾1g/L，硫酸亚铁0.04g/L，氯化钙0.3g/L，硫酸锰0.3g/L，消泡剂1ml/L。
控制条件：将制备的10L二级种子接种到100L发酵罐中，控制温度35℃，罐压0.05MPa，溶氧≧20％，PH控制6.7-6.9，发酵培养48h，获得95L短小芽孢杆菌发酵菌液，所得短小芽孢杆菌发酵液的有效活菌数为1.9×1011CFU/mL。
固体菌剂的制备：
将培养的巴斯德毕赤酵母发酵菌液、热带假丝酵母发酵菌液以及短小芽孢杆菌发酵菌液按照有效活菌数5:12:80的比例进行充分混合，制成复合菌液，向复合菌液中添加40g/L硅藻土和10g/L麸皮，转速1000r/min搅拌30min混合均匀，置于三足离心机中4000r/min离心40min，离心机排污口处无发酵液流出，停止离心，打开三足离心机，收集滤布上的菌剂，然后将湿菌剂在30℃的鼓风干燥箱内晾干，测定水分含量为8.8％，获得耐盐生物脱硫固体菌剂，通过平板计数，测得菌剂中所含的有效活菌数达到3.8×109CFU/g，其中巴斯德毕赤酵母、热带假丝酵母以及短小芽孢杆菌的有效活菌数分别为：1.83×108CFU/g,5.12×108CFU/g,3.10×109CFU/g。
实施例4
某农化合成A车间精喹装置每天产生高盐含硫废水5m3，经检测分析，废水主要指标为：全盐22.9％，硫化物2.56g/L以上，利用100m3好氧池对该股废水进行处理，好氧处理池中投加实施例3制备的5kg耐盐脱硫菌剂，利用车间生化装置外排水，将高盐含硫废水稀释5倍，连续往好氧处理池进出水，进水流量为1.05m3/h，停留时间为4天，控制好氧池温度为25-35℃，溶解氧为2-6mg/L，污泥浓度MLSS为3-10g/L，每隔15天补加2.5kg耐盐脱硫菌剂，每天跟踪检测出水指标，该套装置连续运行三个月，出水硫化物均低于10mg/L，硫化物去除率达到99.8％，达到预期效果，至今已经处理该股废水420m3，节约了生产成本，保证了精喹装置的正常生产。
表1进出水水质指标
实施例5
某石化公司炼化O车间每天产生高盐含硫废水8m3，经检测分析，废水主要指标为：全盐20.8％，硫化物10g/L左右，利用同集团的污水处理厂的的200m3好氧池对该股废水进行处理，好氧处理池中投加实施例3制备的8kg耐盐脱硫菌剂，利用污水处理厂外排水，将高盐含硫废水稀释5倍，连续往好氧处理池进出水，进水流量为1.7m3/h，停留时间为5天，控制好氧池温度为25-35℃，溶解氧为2-6mg/L，污泥浓度MLSS为3-10g/L，每隔10天补加1.6kg耐盐脱硫菌剂，每天跟踪检测出水指标，该套装置连续运行45日，出水硫化物均低于10mg/L，硫化物去除率达到99.5％，至今已经处理该股废水350m3，实现了该股废水的低成本无害化处理。
表2进出水水质指标
比较例
在处理上述炼化O车间高盐含硫废水时，公司也选购了市售脱硫菌剂进行了效果对比试验，实验室分别选取两组20L好氧池，加活性污泥，一组接种市售脱硫菌剂0.8g，一组接种实施例3制备的固体菌剂0.8g，分别取相同的高盐含硫废水800ml，用污水处理厂外排水稀释5倍至4L，连续往两组好氧处理池中进出水，进水流量均为170ml/h，停留时间为5天，两组实验装置条件一致，控制好氧池温度为25-35℃，溶解氧为2-6mg/L，污泥浓度MLSS为3-10g/L，每天跟踪检测两组的出水指标，装置连续运行10日，加市售脱硫菌剂实验组出水硫化物在500mg/L左右，硫化物去除率达到75％，加本发明所制得的固体制剂实验组出水硫化物均低于10mg/L，硫化物去除率达到99.5％。

Claims (10)

1.一种耐盐生物脱硫菌剂，其特征在于，包括巴斯德毕赤酵母，热带假丝酵母以及短小芽孢杆菌三个菌种，其中，巴斯德毕赤酵母为YJY18-07菌株，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.16155；热带假丝酵母为YJY18-08菌株，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.16156。
2.根据权利要求1所述的耐盐生物脱硫菌剂，其特征在于，该菌剂中赤酵母，热带假丝酵母以及短小芽孢杆菌的有效活菌数比例为3-5:10-14：80-140。
3.根据权利要求1所述的耐盐生物脱硫菌剂，其特征在于，该菌剂的有效活菌总数为3×109CFU/g-4×109CFU/g。
4.根据权利要求1或2或3所述的耐盐生物脱硫菌剂，其特征在于，该菌剂为固体菌剂。
5.权利要求1所述的耐盐生物脱硫菌剂的制备方法，包括1)菌种扩大培养，2)按比例混合发酵液，其特征在于，步骤1)所得发酵液的有效活菌数分别为：巴斯德毕赤酵母1.8×109-2.2×109CFU/mL，热带假丝酵母5×109-7×109CFU/mL，短小芽孢杆菌1×1011-2×1011CFU/mL。
6.根据权利要求5所述的耐盐生物脱硫菌剂的制备方法，其特征在于，还包括步骤3)制备固体菌剂，具体过程为：向耐盐生物脱硫液体菌剂中添加硅藻土和麸皮，离心，直至离心机排污口处无发酵液流出，停止离心，收集菌体，然后20-30℃的鼓风干燥或自然通风晾干，直至水分含量≤10％，即得耐盐生物脱硫固体菌剂。
7.根据权利要求6所述的耐盐生物脱硫菌剂的制备方法，其特征在于，所述的硅藻土添加比例为20-40g/L，麸皮添加比例为10-20g/L。
8.权利要求1所述耐盐生物脱硫菌剂的应用方法，其特征在于，将菌剂投加到污水好氧处理池，初始投加比例为0.08-0.15kg/L，连续进出水，控制好氧池温度为25-35℃，溶解氧为2-6mg/L，污泥MLSS为3-10g/L，每隔10-15天补加一次耐盐脱硫菌剂。
9.根据权利要求8所述的耐盐生物脱硫菌剂的应用方法，其特征在于，每次补加菌剂的比例为0.02-0.05kg/L。
10.根据权利要求8所述的耐盐生物脱硫菌剂的应用方法，其特征在于，污水全盐含量≤50g/L，硫化物浓度≤10g/L。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109456906A (zh) * 2018-12-27 2019-03-12 黄河三角洲京博化工研究院有限公司 一种含醇类有机物污水专用处理菌剂及处理方法
CN109554315A (zh) * 2018-12-27 2019-04-02 黄河三角洲京博化工研究院有限公司 一种黑臭水体微生物修复复合菌剂及其应用
CN110055193A (zh) * 2019-04-19 2019-07-26 西安紫瑞生物科技有限公司 生活垃圾焚烧发电预处理的复合微生物菌剂及其制备方法
CN110902957A (zh) * 2019-12-06 2020-03-24 山东海景天环保科技股份公司 一种利用硫自养反硝化工艺实现皮革废水同步脱硫除氮的方法

Citations (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060186042A1 (en) * 2001-10-03 2006-08-24 Keeton Jimmie A Jr Waste treatment method
EP1887081A2 (en) * 1999-02-25 2008-02-13 Ceres Incorporated DNA Sequences
JP2008237212A (ja) * 2007-02-28 2008-10-09 National Institute For Agro-Environmental Science 生分解性プラスチック分解菌およびその分解酵素製造方法
CA2739692A1 (en) * 2008-10-16 2010-04-22 Advanced Biocatalytics Corporation Enhanced performance hydrogen peroxide formulations comprising proteins and surfactants
EP2275542A2 (en) * 2006-02-28 2011-01-19 Suntory Holdings Limited Method for identifying useful proteins of brewery yeast
CN104004501A (zh) * 2014-06-16 2014-08-27 潍坊英雷生物科技有限公司 一种复合活性酶制剂及其用于制备褐煤类油田钻井液降滤失剂的方法
US20140273093A1 (en) * 2013-03-15 2014-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Methods of producing antibodies in yeast
CN104891669A (zh) * 2015-05-06 2015-09-09 沧州旺发生物技术研究所有限公司 一种多功能底改剂及其制备方法
CN105441345A (zh) * 2015-12-21 2016-03-30 宁波大学 一株热带假丝酵母菌及其在生物脱硫中的应用
CN105586302A (zh) * 2016-03-25 2016-05-18 江苏益客食品有限公司 净化鸭屠宰场污水的复合微生物菌剂及其使用方法和应用
CN105779357A (zh) * 2016-04-18 2016-07-20 福建美家园生物科技股份有限公司 一种除臭有机堆肥发酵菌剂及其应用
CN108029955A (zh) * 2017-12-29 2018-05-15 黄河三角洲京博化工研究院有限公司 一种富硒馒头及其制备方法
CN108559519A (zh) * 2018-05-17 2018-09-21 山东润禾生物工程有限公司 重金属镉稳定剂及其制备方法和在水稻土壤中的应用

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BRPI1015500A8 (pt) * 2010-12-22 2016-04-05 Univ Federal Do Parana Ufpr Processo integrado para produção de lipídios/óleos de origem microbiana e algal a partir de tubérculos amiláceos

Patent Citations (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1887081A2 (en) * 1999-02-25 2008-02-13 Ceres Incorporated DNA Sequences
US20060186042A1 (en) * 2001-10-03 2006-08-24 Keeton Jimmie A Jr Waste treatment method
EP2275542A2 (en) * 2006-02-28 2011-01-19 Suntory Holdings Limited Method for identifying useful proteins of brewery yeast
JP2008237212A (ja) * 2007-02-28 2008-10-09 National Institute For Agro-Environmental Science 生分解性プラスチック分解菌およびその分解酵素製造方法
CA2739692A1 (en) * 2008-10-16 2010-04-22 Advanced Biocatalytics Corporation Enhanced performance hydrogen peroxide formulations comprising proteins and surfactants
US20140273093A1 (en) * 2013-03-15 2014-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Methods of producing antibodies in yeast
CN104004501A (zh) * 2014-06-16 2014-08-27 潍坊英雷生物科技有限公司 一种复合活性酶制剂及其用于制备褐煤类油田钻井液降滤失剂的方法
CN104891669A (zh) * 2015-05-06 2015-09-09 沧州旺发生物技术研究所有限公司 一种多功能底改剂及其制备方法
CN105441345A (zh) * 2015-12-21 2016-03-30 宁波大学 一株热带假丝酵母菌及其在生物脱硫中的应用
CN105586302A (zh) * 2016-03-25 2016-05-18 江苏益客食品有限公司 净化鸭屠宰场污水的复合微生物菌剂及其使用方法和应用
CN105779357A (zh) * 2016-04-18 2016-07-20 福建美家园生物科技股份有限公司 一种除臭有机堆肥发酵菌剂及其应用
CN108029955A (zh) * 2017-12-29 2018-05-15 黄河三角洲京博化工研究院有限公司 一种富硒馒头及其制备方法
CN108559519A (zh) * 2018-05-17 2018-09-21 山东润禾生物工程有限公司 重金属镉稳定剂及其制备方法和在水稻土壤中的应用

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LI KY等: "Roles of the mammalian cytosolic cysteine desulfurase,ISCS,and scaffold protein,ISCU,in iron sulfur cluster assembly", 《JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY》 *
倪娜等: "降解柴油的耐盐酵母菌的鉴定及性质研究", 《科学技术与工程》 *
刘国防等: "油脂废水生物处理研究进展", 《应用生态学报》 *
李佳忠等: "一种大肠杆菌胆碱脱氢酶活性的测定方法", 《山东科学》 *
毛培宏等: "轻工业废液生产单细胞蛋白优良酵母菌的研究", 《新疆农业科学》 *
温洪宇等: "盐度对细菌菌株降解苯酚的影响", 《环境科学与技术》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109456906A (zh) * 2018-12-27 2019-03-12 黄河三角洲京博化工研究院有限公司 一种含醇类有机物污水专用处理菌剂及处理方法
CN109554315A (zh) * 2018-12-27 2019-04-02 黄河三角洲京博化工研究院有限公司 一种黑臭水体微生物修复复合菌剂及其应用
CN110055193A (zh) * 2019-04-19 2019-07-26 西安紫瑞生物科技有限公司 生活垃圾焚烧发电预处理的复合微生物菌剂及其制备方法
CN110902957A (zh) * 2019-12-06 2020-03-24 山东海景天环保科技股份公司 一种利用硫自养反硝化工艺实现皮革废水同步脱硫除氮的方法

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