CN109528589B

CN109528589B - 酪氨酸酶抑制剂和美白修护霜及其制备方法

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Publication number: CN109528589B
Application number: CN201811612873.2A
Authority: CN
Inventors: 杨登亮; 刘德海; 戴嘉彬; 江兰兰; 李华真; 林盛杰; 张伟杰; 张楚标
Original assignee: GUANGZHOU BAIYUN LIANJIA FINE CHEMICAL PLANT; Guangdong Danz Group Co Ltd; Guangzhou Keneng Cosmetic Research Co Ltd
Current assignee: Guangdong Danz Group Co Ltd; Guangzhou Keneng Cosmetic Research Co Ltd
Priority date: 2018-12-27
Filing date: 2018-12-27
Publication date: 2022-03-11
Anticipated expiration: 2038-12-27
Also published as: CN109528589A

Abstract

本发明提供一种酪氨酸酶抑制剂和美白修护霜及其制备方法。所述酪氨酸酶抑制剂包括葛根提取物和薄荷提取物，以所述酪氨酸酶抑制剂的总质量计，所述葛根提取物的加入量为0.1‑55％，所述薄荷提取物的加入量为45‑99.9％。本发明的酪氨酶酶抑制剂对酪氨酸酶活性的抑制作用优异，且对人体无副作用。进一步地，本发明的美白修护霜的配方温和，能够有效抑制酪氨酸酶的活性，从而起到美白的作用。

Description

酪氨酸酶抑制剂和美白修护霜及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种酪氨酸酶抑制剂和美白修护霜及其制备方法，属于化妆品领域。

背景技术

黑色素(Melanin)主要由人体皮肤表皮基底层的黑色素细胞(Melanocyte)产生，它能减小紫外线对皮肤的伤害。黑色素的含量及分布决定了皮肤的颜色。然而，黑色素在基底层的异常蓄积会造成色素沉着过度引起黑斑病、雀斑、老年斑等，影响人们的生活质量。随着对黑色素生物合成研究的不断深入，研究者发现酪氨酸酶(tyrosinase)在黑色素生物合成中扮演重要角色，它是酪氨酸和多巴向黑色素转变过程中的主要限速酶，它的过量表达是导致色素沉着过度的主要原因。因此，抑制酪氨酸酶的活性可以阻断黑色素的生物合成反应链，减少黑色素的生成，实现美白的效果。

酪氨酸酶具有多种特征性催化活性，既可以作为酪氨酸羟化酶、多巴氧化酶，又可以作为5,6-二羟基吲哚氧化酶，在黑色素生成过程中起着至关重要的作用。酪氨酸酶通过单酚酶活性将酪氨酸转化为多巴，通过二酚酶活性将多巴转化为多巴醌，是酪氨酸酶催化黑色素形成的关键限速步骤。一般认为，酪氨酸酶活性对皮肤黑色素沉积起着主要作用。而美白剂的作用是通过抑制酪氨酸酶活性或者阻断酪氨酸生成黑色素的氧化途径或者降低酪氨酸酶的表达，从而减少黑色素生成达到美白皮肤的效果。

现阶段，中草药因其天然药效温和且不良作和少而被广泛认同，从中了解到近年来崇尚自然，远离化学污染的理念。但是，现有的中草药美白祛斑制剂的效果欠佳，酪氨酸酶抑制作用差。因此，寻找开发高效且对人体无副作用或副作用小的天然中草药皮肤美白祛斑制剂己成为目前化妆品领域的一个较被重视的课题。

发明内容

发明要解决的问题

鉴于现有技术中的中草药美白祛斑制剂的效果欠佳，酪氨酸酶抑制作用差等问题，本发明首先提供了一种酪氨酶酶抑制剂。本发明的酪氨酶酶抑制剂对酪氨酸酶活性的抑制作用优异，且对人体无副作用。

进一步地，本发明还提供一种美白修护霜，其配方温和，能够有效抑制酪氨酸酶的活性，从而起到美白的作用。

进一步地，本发明还提供一种操作简单，原料易于获取的美白修护霜的制备方法。

用于解决问题的方案

本发明提供一种酪氨酸酶抑制剂，其包括：葛根提取物和薄荷提取物，以所述酪氨酸酶抑制剂的总质量计，所述葛根提取物的加入量为0.1-55％，所述薄荷提取物的加入量为45-99.9％。

根据本发明的酪氨酸酶抑制剂，其中，所述葛根提取物和所述薄荷提取物的质量比为1：0.9～75，优选为1：1～70，更优选为1：2～65，进一步优选为1：3～60，更进一步优选为1：4～55，再进一步优选为1：5～50。

本发明还提供一种美白修护霜，其包括本发明的酪氨酸酶抑制剂，以所述美白修护霜的总质量计，所述酪氨酸酶抑制剂的加入量为0.01-10％。

根据本发明的美白修护霜，其中，所述美白修护霜还包括：保湿剂、油脂、增稠剂、乳化剂、pH调节剂、皮肤调理剂、舒敏剂和抗氧化剂；其中，以所述美白修护霜的总质量计，所述保湿剂的加入量为0.01-20％；所述油脂的加入量为10-30％；所述乳化剂的加入量为0.01-5％；所述增稠剂的加入量为0.02-1.8％；所述pH调节剂的加入量为0.01-1％；所述皮肤调理剂的加入量为0.01-5％；所述舒敏剂的加入量为0.01-5％；所述抗氧化剂的加入量为0.01-2％。

根据本发明的美白修护霜，其中，所述保湿剂包括双丙甘醇、二丙二醇、丙二醇、丁二醇、甘油、泛醇、PEG/PPG-17/6共聚物、甜菜碱、甘油聚醚-26、甘油聚丙烯酸酯、透明质酸钠、海藻糖中的一种或两种以上的组合；和/或

所述油脂包括油醇芥酸酯、环聚二甲基硅氧烷、聚二甲基硅氧烷、辛酸/癸酸甘油三酯、氢化聚异丁烯、牛油果树果脂、棕榈酸乙基己酯、氢化聚癸烯、C20-24烷基聚二甲基硅氧烷、角鲨烷、C13-14异链烷烃、环己硅氧烷、C12-15醇苯甲酸酯、氢化大豆油、植物甾醇类中的一种或两种以上的组合。

根据本发明的美白修护霜，其中，所述乳化剂包括PEG-10油菜籽甾醇、异硬脂醇聚醚-20、山梨坦异硬脂酸酯、月桂醇聚醚-7、聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯、PEG/PPG-10/1聚二甲基硅氧烷、聚甘油-3二异硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯和PEG-100硬脂酸酯的复合物中的一种或两种以上的组合。

根据本发明的美白修护霜，其中，所述增稠剂包括黄原胶、聚二甲基硅氧烷/乙烯基聚二甲基硅氧烷交联聚合物、山嵛醇、聚丙烯酰胺、卡波姆、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物和异十六烷和聚山梨醇酯-60的复合物、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物中的一种或两种以上的组合。

根据本发明的美白修护霜，其中，所述pH调节剂包括氨甲基丙醇、精氨酸、柠檬酸、柠檬酸钠中的一种或两种以上的组合；和/或

所述抗氧化剂包括丁羟甲苯、番茄红素、生育酚、生育酚乙酸酯中的一种或两种以上的组合。

根据本发明的美白修护霜，其中，所述皮肤调理剂包括巨藻提取物、墨角藻提取物、水解胶原蛋白、绿藻提取物、尿囊素、乳酸杆菌/大豆发酵产物提取物、白果槲寄生叶提取物、白茅根提取物、β-葡聚糖、棕榈酰三肽-5、乙酰基六肽-8、仙人掌提取物中的一种或两种以上的组合；和/或

所述舒敏剂包括北美金缕梅水、红没药醇、姜根提取物、芦荟提取物中的一种或两种以上的组合。

本发明还提供一种根据本发明的美白修护霜的制备方法，其包括将所述美白修护霜的各组分混合的步骤。

发明的效果

本发明的酪氨酶酶抑制剂对酪氨酸酶活性的抑制作用优异，且对人体无副作用。

进一步地，本发明的美白修护霜的配方温和，能够有效抑制酪氨酸酶的活性，从而起到美白的作用。

进一步地，本发明的美白修护霜的制备方法的操作简单，原料易于获取，且能够批量生产。

附图说明

图1示出了本发明对比例1-5的葛根提取物的对数质量浓度-酪氨酸酶抑制率的关系图；

图2示出了本发明对比例6-10的薄荷提取物的对数质量浓度-酪氨酸酶抑制率的关系图；

图3示出了本发明实施例1-7的酪氨酸酶抑制剂的对数质量浓度-酪氨酸酶抑制率的关系图。

图4示出了本发明实施例1-7的酪氨酸酶抑制剂中葛根提取物的含量与相互作用系数的关系图。

图5示出了本发明应用实施例1-7以及应用对比例1-3的黑色素变化率的对比图。

具体实施方式

以下将详细说明本发明的各种示例性实施例、特征和方面。在这里专用的词“示例性”意为“用作例子、实施例或说明性”。这里作为“示例性”所说明的任何实施例不必解释为优于或好于其它实施例。

另外，为了更好地说明本发明，在下文的具体实施方式中给出了众多的具体细节。本领域技术人员应当理解，没有某些具体细节，本发明同样可以实施。在另外一些实例中，对于本领域技术人员熟知的方法、手段、器材和步骤未作详细描述，以便于凸显本发明的主旨。

第一实施方式

本发明的第一实施方式提供一种酪氨酸酶抑制剂，包括：葛根提取物和薄荷提取物。以所述酪氨酸酶抑制剂的总质量计，所述葛根提取物的加入量为0.1-55％，所述薄荷提取物的加入量为45-99.9％。本发明的酪氨酸酶抑制剂能够很好的抑制酪氨酸酶的活性，在化妆品中使用时，特别是在美白修复霜中使用时，具有优异的美白效果。

葛根为豆科植物野葛(Pueraria lobata(wild)Ohwi)或甘葛藤(Puerariathomsonil Benth)的干燥根，甘葛藤又习称为粉葛。我国共有葛属植物11种，除粉葛以人工栽培为主外，其余均以野生为主。中国药典(1990年版)收载了野葛和粉葛两种葛属原植物。

葛根的主要组成是：淀粉、纤维素、蛋白质和总黄酮，另外还含有少量的脂肪、果胶、鞣质和生物碱等。葛根的淀粉中具有11种氨基酸，11种矿质元素，其中人体必需的微量元素有Fe、Cu、Zn、Mn、Si等。葛根总黄酮中含有异黄酮成分，它是葛根的主要活性成分。

葛根提取物一般用于抗衰老化妆品成分，可以使面部光润，具有除粉刺祛皱纹之功效，其机理主要与葛根异黄酮类具有抗氧化、增强机体免疫力有关。葛根异黄酮具有清除氧自由基及抗脂质过氧化之功效，可显著抑制氧化损伤引起的红细胞溶血，抑制对微粒体的活性氧类(-OH，O^2-·)造成的过氧化反应的发生，并能够提高体内SOD活性强度，调节体内氧自由基与自由基清除剂的平衡，所以说葛根有较好的抗衰老作用。

薄荷(Mentha haplocalyx Briq)为唇形科多年生宿根性薄荷属草本植物，又名水薄荷、苏薄荷、蕃荷叶等。薄荷是我国常用且重要的、种植面积广泛的传统的香料植物之一，薄荷上部分可入药，全株具有浓烈的清凉香味，是一种分布广泛、适应性极强的具有浓郁特殊芳香气味的植物。

薄荷植物中的挥发油是薄荷中的主要化学成分，研究最为深入的一类成分。研究表明，油中的主要化学成分为醇、酮、酯、萜烷、萜烯类化合物。薄荷的新鲜叶片中含挥发油约0.8～1％，干茎叶含有约1.3～2％。

另外，薄荷属植物分布广泛，生态适应力强，其形态和化学成分存在较多变异，导致提取的薄荷油成分差异较大。薄荷的非挥发油成分包括：氨基酸、黄酮类物质、有机酸和脂肪酸等。此外，还包括无机元素、维生素、胡萝卜素、乌索酸等。

本发明使用葛根提取物和薄荷提取物的组合，两者具有协同作用，能够进一步起到抑制酪氨酸酶活性的作用。在本发明中，作为优选，所述葛根提取物和所述薄荷提取物的质量比为1：0.9～75，优选为1：1～70，更优选为1：2～65，进一步优选为1：3～60，更进一步优选为1：4～55，再进一步优选为1：5～50。

第二实施方式

本发明的第二实施方式提供了一种美白修护霜，包括本发明第一实施方式的酪氨酸酶抑制剂，以所述美白修护霜的总质量计，所述酪氨酸酶抑制剂的加入量为0.01-10％。本发明通过添加本发明的酪氨酸酶抑制剂，能够抑制酪氨酸酶的活性，从而起到优异的美白效果。

本发明的美白修护霜还包括：保湿剂、油脂、增稠剂、乳化剂、pH调节剂、皮肤调理剂、舒敏剂和抗氧化剂；本发明的美白修护霜的配方组成温和，可以使本发明的酪氨酸酶抑制剂的功效得到充分发挥。具体而言：

其中，以所述美白修护霜的总质量计，所述保湿剂的加入量为0.01-20％，能够起到保湿补水的作用。为了使保湿剂的功效能够进一步发挥，本发明的保湿剂的加入量可以是1-19％，可以是3-17％，可以是4-16％，可以是5-15％，可以是6-14％，可以是7-13％，可以是8-12％。当保湿剂的含量低于0.01％时，保湿作用不明显；当保湿剂的含量高于20％时，会使美白修护霜有黏腻感。

在本发明中，所述保湿剂包括双丙甘醇、二丙二醇、丙二醇、丁二醇、甘油、泛醇、PEG/PPG-17/6共聚物、甜菜碱、甘油聚醚-26、甘油聚丙烯酸酯、透明质酸钠、海藻糖中的一种或两种以上的组合。使用多种保湿剂的组合，能够使本发明的美白修护霜具有更优异的保湿补水功效。

以所述美白修护霜的总质量计，所述油脂的加入量为10-30％，例如所述油脂的加入量可以是12％、15％、18％、20％、12％、25％、28％等。通过在美白修护霜中添加油脂，可以减少皮肤表面水分的蒸发，防止皮肤干裂。另外，通过添加油脂，可以在皮肤表面形成疏水性薄膜，防止外部有害物质的侵入。当油脂的含量小于10％时，不能减少皮肤表面水分的蒸发，且不能有效防止有害物质的侵入；当油脂的含量大于30％时，使美白修护霜过于油腻，使用感会有所下降。

在本发明中，以所述美白修护霜的总质量计，所述乳化剂的加入量为0.01-5％，例如：可以是0.1-4.5％，可以是1-4％等。本申请的乳化剂用量小于0.01％时，导致乳化不充分使得体系不稳定；乳化剂用量大于5％时，会对产品的稳定性也会造成一定的影响。

所述乳化剂包括PEG-10油菜籽甾醇、异硬脂醇聚醚-20、山梨坦异硬脂酸酯、月桂醇聚醚-7、聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯、PEG/PPG-10/1聚二甲基硅氧烷、聚甘油-3二异硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯和PEG-100硬脂酸酯的复合物中的一种或两种以上的组合。

本发明可以使用例如甘油硬脂酸酯和PEG-100硬脂酸酯的复合物等复合乳化剂，从而可以进一步使美白修护霜的稳定性优异。

以所述美白修护霜的总质量计，所述增稠剂的加入量为0.02-1.8％，例如所述增稠剂的加入量可以是0.1％、0.2％、0.4％、0.5％、0.6％、0.8％、1.0％、1.2％、1.5％等。当增稠剂的加入量在0.02-1.8％之间时，具有低粘稠感及优异的使用感，分散性好，吸收快。当增稠剂的加入量小于0.02％时，美白修护霜的质地较稀，无任何粘稠感；当增稠剂的加入量大于1.8％时，美白修护霜过于厚重，会增加皮肤的负担。

在本发明中，所述增稠剂包括黄原胶、聚二甲基硅氧烷/乙烯基聚二甲基硅氧烷交联聚合物、山嵛醇、聚丙烯酰胺、卡波姆、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物和异十六烷和聚山梨醇酯-60的复合物、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物中的一种或两种以上的组合。

本发明使用丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物和异十六烷和聚山梨醇酯-60的复合物等复合物增稠剂，可以改善美白修护霜的稳定性。

以所述美白修护霜的总质量计，所述pH调节剂的加入量为0.01-1％。通过添加pH调节剂，使美白修护霜的pH值更适宜人体皮肤。作为优选，本发明的pH调节剂的加入量可以是0.03-0.8％，可以是0.06-0.5％，可以是0.1-0.3％等。当pH调节剂的加入量大于1％或者小于0.01％时，均不能获得pH值合适的美白修护霜。在本发明中，所述pH调节剂包括氨甲基丙醇、精氨酸、柠檬酸、柠檬酸钠中的一种或两种以上的组合。

以所述美白修护霜的总质量计，所述皮肤调理剂的加入量为0.01-5％。所述皮肤调理剂的加入量可以是0.1-4％，可以是0.15-3％，可以是0.2-2％等。当皮肤调理剂的加入量小于0.01％时，无法起到相应的功效。

所述皮肤调理剂包括巨藻提取物、墨角藻提取物、水解胶原蛋白、绿藻提取物、尿囊素、乳酸杆菌/大豆发酵产物提取物、白果槲寄生叶提取物、白茅根提取物、β-葡聚糖、棕榈酰三肽-5、乙酰基六肽-8、仙人掌提取物中的一种或两种以上的组合。

其中，β-葡聚糖为天然植物胶聚糖，本发明中，该成分也有一定抗敏抗炎等作用。β-葡聚糖能与大多数原料有较好配伍性，无过敏反应，还能提高皮肤保湿能力。另外，在本发明中β-葡聚糖还能起到抗氧化和保护皮肤免受紫外线伤害的作用，能够减少皮肤皱纹，提高皮肤抵御外界伤害的能力。

水解胶原蛋白能够在人体皮肤中补充适当的胶原蛋白，可以作用于真皮层，延缓衰老。还可以改善微循环，祛斑祛皱，紧致肌肤，修复细纹。另外，水解胶原蛋白还可以收缩毛孔，补水保湿。

尿囊素可以降低角质层细胞的粘着力，加速表皮细胞更新，增强皮肤的修复能力，并且其安全度高。

巨藻提取物源自于巨藻，巨藻通过巨藻细胞的大量繁殖，使得巨藻提取物含有高含量的天然植物蛋白。因此，巨藻提取物具有补充细胞营养的功效，有效保湿的作用。

其中，棕榈酰三肽-5和/或乙酰基六肽-8可以促进肌肤细胞生长，抑制氧自由基和羟基自由基，促进基质蛋白(matrix protein)尤其是胶原蛋白的合成，同时还可能增加弹性蛋白、透明质酸、糖胺聚糖和纤维连接蛋白的生成。

以所述美白修复霜的总质量计，所述舒敏剂的加入量为0.01-5％。例如可以是0.5％、1％、2％、3％等。当舒敏剂的加入量小于0.01％时，舒敏效果不明显。当舒敏剂的加入量大于5％时，不能进一步起到舒敏的作用，而且成本过高。

在本发明中，所述舒敏剂包括北美金缕梅水、红没药醇、姜根提取物、芦荟提取物中的一种或两种以上的组合。

其中，红没药醇是从菊类植物中提取，有抗炎抑菌的作用，该成分稳定性好，和皮肤有很好的相容性，降低皮肤炎症，减轻皮肤粉刺，防止暗疮产生，提高皮肤的抗刺激能力，修复有炎症受伤的皮肤。红没药醇有明显的抗炎、缓和刺激和抗过敏功能。

以所述美白修护霜的总质量计，所述抗氧化剂的加入量为0.01-2％。本发明通过使用抗氧化剂，可以防止化妆品的油脂、蜡、烃类等油性成分接触空气中的氧，发生氧化作用，产生过氧化物、醛、酸等，使化妆品变色、酸败、质量下降等。所述抗氧化剂包括丁羟甲苯、番茄红素、生育酚、生育酚乙酸酯中的一种或两种以上的组合。

本发明的美白修护霜还可以适当添加螯合剂。以所述美白修护霜的总质量计，所述螯合剂的加入量为0-1％。所述螯合剂可以是EDTA-2Na和/或EDTA-4Na等。

另外，本发明的美白修护霜中还含有防腐剂和芳香剂。以所述美白修护霜的总质量计，本发明的美白修护霜中的防腐剂的加入量为0.01-1.5％，所述芳香剂的加入量为0.01-1％。所述防腐剂可以包括苯氧乙醇、羟苯甲酯、羟苯丙酯、苯甲酸及其盐中的一种或两种以上的组合。所述芳香剂可以是香精等。

本发明的美白修护霜不仅能够起到美白的作用，还具有保湿锁水，能够阻挡水分流失，为肌肤营造保湿屏障。同时，本发明的美白修护霜对肌肤产生修护作用，活化肌肤的机能。并且，本发明的美白修护霜的滋润性强、吸收快。

第三实施方式

本发明的第三实施方式提供了一种第二实施方式的美白修护霜的制备方法，包括将所述美白修护霜的各组分混合的步骤。

具体而言，所述的美白修护霜的制备方法包括以下步骤：

1、将油脂、乳化剂、部分增稠剂、舒敏剂、抗氧化剂、部分防腐剂、芳香剂原料加入乳化锅，搅拌并加热至80-85℃，使之充分溶解；

2、将水、保湿剂、部分皮肤调理剂、剩余的增稠剂、pH调节剂、任选存在的螯合剂加入水相锅，搅拌并加热到80-85℃，使之充分溶解；

3、将水相锅内的水相物质慢慢抽到乳化锅，搅拌、均质、真空乳化，保持乳化锅温度为80-85℃；

4、降温至40-50℃，加入酪氨酸酶抑制剂、剩余的皮肤调理剂以及剩余的防腐剂搅拌均匀；

5、冷却至35-40℃，出料，静置12-48小时。

实施例

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

对比例1-5

取葛根提取物作为酪氨酸酶抑制剂。将葛根提取物溶于5组不同体积的pH为6.8的磷酸缓冲液中，得到5组不同浓度的测试溶液。其中，葛根提取物的对数质量浓度如下表2所示。

对比例6-10

取薄荷提取物作为酪氨酸酶抑制剂。将薄荷提取物溶于5组与对比例1-5对应体积的pH为6.8的磷酸缓冲液中，得到5组与对比例1-5对应浓度的测试溶液。其中，薄荷提取物的对数质量浓度如下表2所示。

实施例1-7

取葛根提取物和薄荷提取物作为酪氨酸酶抑制剂。将葛根提取物和薄荷提取物按质量比2:1(实施例1)、1:1(实施例2)、1:2(实施例3)、15:85(实施例4)、5:95(实施例5)、2:98(实施例6)、7:68(实施例7)混合后，得到酪氨酸酶抑制剂。将实施例1-5、7的酪氨酸酶抑制剂分别溶于5组与对比例1-5对应体积的pH为6.8的磷酸缓冲液中，将实施例6的酪氨酸酶抑制剂分别溶于4组与对比例1-4对应体积的pH为6.8的磷酸缓冲液中。

实施例1-7均可以得到5组(或4组)与对比例1-5(或对比例1-4)对应浓度的测试溶液。其中，酪氨酸酶抑制剂中，葛根提取物和薄荷提取物的含量(质量％)如下表1所示，酪氨酸酶抑制剂的对数质量浓度如下表3所示。

表1

体外测试

酪氨酸酶活性以催化L-多巴生成多巴醌的酪氨酸酶活力来衡量。具体为：

取1支试管，加入底物L-多巴溶液0.4mL(1.0mg/mL)，并添加pH为6.8的磷酸缓冲液2.4mL，30℃水浴保温10min后，然后加入酪氨酸酶的量为0.2mL(250U/mL)，得到反应液1。

取1支试管，加入酪氨酸酶的量为0.2mL(250U/mL)，并添加pH为6.8的磷酸缓冲液2.8mL，得到反应液2。

分别在44支试管中加入底物L-多巴溶液0.4mL(1.0mg/mL)，然后分别加入2.4mL的对比例1-10和实施例1-7的测试溶液，30℃水浴保温10min后，然后加入酪氨酸酶的量为0.2mL(250U/mL)，得到反应液3。

分别在44支试管中加入2.4mL的对比例1-10和实施例1-7的测试溶液，并添加pH为6.8的磷酸缓冲液0.4mL，30℃水浴保温10min后，然后加入酪氨酸酶的量为0.2mL(250U/mL)，得到反应液4。

酶促反应将L-多巴转化为红色产物多巴醌，在475nm处有最大吸收。读取从混匀开始1min时在475nm处的吸光度A₄₇₅，酶促反应的速度用每分钟A₄₇₅的增加值来表示。测定上述反应液在反应开始1min时在475nm处的吸光度A，并按如下公式计算对酪氨酸酶活性的抑制率。其中，表中的酪氨酸酶抑制剂的质量浓度均为酪氨酸酶抑制剂在测试体系中的终质量浓度。

抑制率＝[1-(A₃-A₄)/(A₁-A₂)]×100％

式中：A₁为不添加酪氨酸酶抑制剂，仅含有底物时的吸光度；

A₂为不添加酪氨酸酶抑制剂，且不添加底物时的吸光度；

A₃为含有酪氨酸酶抑制剂与底物时的吸光度；

A₄为含有酪氨酸酶抑制剂，且不添加底物时的吸光度。

分别计算得到葛根提取物(对比例1-5)和薄荷提取物(对比例6-10)各自的对酪氨酸酶活性的抑制率。并结合对数质量浓度-酪氨酸酶抑制率的关系图，换算求得葛根提取物的抑制率为50％时对应的质量浓度(IC_50A)和薄荷提取物的抑制率为50％时对应的质量浓度(IC_50B)，结果如表2所示。

表2

然后测出实施例1-7的酪氨酸酶抑制剂对酪氨酸酶活性的抑制率。并结合对数质量浓度-酪氨酸酶抑制率的关系图，换算求得葛根提取物和薄荷提取物复合作用产生等效抑制率(50％)时，葛根提取物的质量浓度(IC_50a)，葛根提取物和薄荷提取物复合作用产生等效抑制率(50％)时，薄荷提取物的质量浓度((IC_50b)，结果如表3所示。

葛根提取物和薄荷提取物的复合作用的效应，可以用相互作用系数γ来评价，具体结果如表3所示。

γ＝IC_50a/IC_50A+IC_50b/IC_50B

其中，IC_50A表示葛根提取物的抑制率为50％时对应的质量浓度；

IC_50B表示薄荷提取物的抑制率为50％时对应的质量浓度；

IC_50a表示葛根提取物和薄荷提取物复合作用产生等效抑制率(50％)时，葛根提取物的质量浓度；

IC_50b表示葛根提取物和薄荷提取物复合作用产生等效抑制率(50％)时，薄荷提取物的质量浓度；

其中，γ＝1，表示葛根提取物和薄荷提取物表现为简单相加效应；γ＜1为葛根提取物和薄荷提取物表现为协同效应，γ值越小，协同效应越强；γ＞1为葛根提取物和薄荷提取物表现为拮抗效应，γ值越大，拮抗效应越大。

表3

由表3可以看出，本发明的酪氨酸酶抑制剂中的相互作用系数小于1，且其相互作用系数值可以在0.6以下，因此葛根提取物和薄荷提取物可以表现为优异的协同效应。

应用实施例1-7

根据下表4-5中的应用实施例1-7的美白修复霜配方中各组分的含量(质量百分比)，并按照下述生产工艺步骤制备得到美白修复霜。生产工艺步骤如下：

1、将A相原料加入乳化锅，搅拌并加热至80-85℃，使之充分溶解；

2、将B相加入水相锅，搅拌并加热到80-85℃，使之充分溶解；

3、将水相锅内水相物质慢慢抽到乳化锅，搅拌、均质、真空乳化，保持乳化锅温度为80-85℃；

4、降温至42℃，加入C相搅拌均匀；

5、冷却至37℃，出料，静置24小时；

6、检验合格后，分装、包装，再检验，成品入库。

A相：棕榈酸乙基己酯、环聚二甲基硅氧烷、辛酸/癸酸甘油三酯、油醇芥酸酯、聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯、牛油果树果脂、聚二甲基硅氧烷、环己硅氧烷、甘油硬脂酸酯和PEG-100硬脂酸酯的复合物、C12-15醇苯甲酸酯、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物、角鲨烷、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物和异十六烷和聚山梨醇酯-60的复合物、番茄红素、生育酚乙酸酯、红没药醇、羟苯甲酯、羟苯丙酯、丁羟甲苯、香精；

B相：水、甘油、丁二醇、丙二醇、泛醇、双丙甘醇、尿囊素、甜菜碱、卡波姆、氨甲基丙醇；

C相：巨藻提取物、葛根提取物、薄荷提取物、苯氧乙醇、水解胶原蛋白、棕榈酰三肽-5、β-葡聚糖。

其中，棕榈酸乙基己酯、环聚二甲基硅氧烷、辛酸/癸酸甘油三酯、油醇芥酸酯、牛油果树果脂、聚二甲基硅氧烷、环己硅氧烷、C12-15醇苯甲酸酯、角鲨烷是油脂；

聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯和PEG-100硬脂酸酯的复合物是乳化剂；

丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物和异十六烷和聚山梨醇酯-60的复合物、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物、卡波姆是增稠剂；

甘油、丁二醇、丙二醇、泛醇、双丙甘醇、甜菜碱是保湿剂；

氨甲基丙醇是pH调节剂；

巨藻提取物、水解胶原蛋白、棕榈酰三肽-5、β-葡聚糖、尿囊素是皮肤调理剂。

葛根提取物、薄荷提取物是酪氨酸酶抑制剂；红没药醇是舒敏剂；

丁羟甲苯、番茄红素、生育酚乙酸酯是抗氧化剂；

香精是芳香剂；苯氧乙醇、羟苯甲酯、羟苯丙酯是防腐剂。

本发明中，甘油硬脂酸酯和PEG-100硬脂酸酯的复合物，生产厂家，禾大公司，牌号：ARLACEL 165；

丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物和异十六烷和聚山梨醇酯-60的复合物，生产厂家：赛比克公司，牌号Simugel FL；

葛根提取物，生产厂家：衢州市展宏生物科技有限公司；

薄荷提取物，生产厂家：衢州市展宏生物科技有限公司。

应用对比例1-3

根据下表5中的应用对比例1-3的修护霜配方中各组分的含量(质量百分比)，并按照与应用实施例1-7相同的方法，制备得到修护霜。

表4

表5

美白功效测试

皮肤黑色素变化率的测试方法：通过测定特定波长的光照在人体皮肤上后的反射量来确定皮肤中黑色素的含量。探头的发射器发出波长分别为568nm、660nm、和880nm三种波长的光照射在皮肤表面，接受器测得皮肤反射的光，并测定被皮肤吸收的光的量，从而可以得出皮肤黑色素的变化率。

皮肤黑色素变化率的测试采用德国CK公司的色素检测仪进行测试，其中，皮肤黑色素的测试探头MX 18由光源发射器和接收器组成，另有弹簧以保持检测时对皮肤的压力恒定。探头的测量范围是0-999，测量数值越高，可以说明皮肤中黑色素的含量越高。

受试者人数为33人，试验周期为4周，试验选取应用实施例1-7的美白修护霜以及应用对比例1-3的修护霜，每天早晚涂抹于前臂内侧的不同区域，分别测定实验前(Day1)和使用28天时(Day28)的受试区域的皮肤在特定波长的光照后的反射量以确定皮肤中黑色素的含量，进而表征黑色素的变化率，具体黑色素的变化率的结果如图5所示。

由图5可以看出，本申请的应用实施例1-7的黑色素的变化率较大，即黑色素含量降低，因此，使用葛根提取物和薄荷提取物作为酪氨酸酶抑制剂，能够有效美白皮肤。

另外，本申请的应用实施例6-7中，由于葛根提取物的含量较高，其黑色素含量降低量稍低。

本申请的应用对比例1-3中，在单一使用葛根提取物或者单一使用薄荷提取物作为酪氨酸酶抑制剂，或者酪氨酸酶抑制剂中葛根提取物的含量过高时，其黑色素含量变化率小，黑色素含量降低少，美白效果较差。

本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。

Claims

1.一种美白修护霜，其特征在于，包括酪氨酸酶抑制剂、保湿剂、油脂、增稠剂、乳化剂、pH调节剂、皮肤调理剂、舒敏剂和抗氧化剂，以所述美白修护霜的总质量计，所述酪氨酸酶抑制剂的加入量为0.01-10％；所述保湿剂的加入量为0.01-20％；所述油脂的加入量为10-30％；所述乳化剂的加入量为0.01-5％；所述增稠剂的加入量为0.02-1.8％；所述pH调节剂的加入量为0.01-1％；所述皮肤调理剂的加入量为0.01-5％；所述舒敏剂的加入量为0.01-5％；所述抗氧化剂的加入量为0.01-2％；

其中，所述酪氨酸酶抑制剂为葛根提取物和薄荷提取物，以所述酪氨酸酶抑制剂的总质量计，所述葛根提取物的加入量为0.1-55％，所述薄荷提取物的加入量为45-99.9％；

所述葛根提取物和所述薄荷提取物的质量比为1：5～50；

所述葛根提取物购自衢州市展宏生物科技有限公司；

所述薄荷提取物购自衢州市展宏生物科技有限公司。

2.根据权利要求1所述的美白修护霜，其特征在于，所述保湿剂包括双丙甘醇、丙二醇、丁二醇、甘油、泛醇、PEG/PPG-17/6共聚物、甜菜碱、甘油聚醚-26、甘油聚丙烯酸酯、透明质酸钠、海藻糖中的一种或两种以上的组合；和/或

3.根据权利要求1所述的美白修护霜，其特征在于，所述乳化剂包括PEG-10油菜籽甾醇、异硬脂醇聚醚-20、山梨坦异硬脂酸酯、月桂醇聚醚-7、聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯、PEG/PPG-10/1聚二甲基硅氧烷、聚甘油-3二异硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯和PEG-100硬脂酸酯的复合物中的一种或两种以上的组合。

4.根据权利要求1所述的美白修护霜，其特征在于，所述增稠剂包括黄原胶、聚二甲基硅氧烷/乙烯基聚二甲基硅氧烷交联聚合物、山嵛醇、聚丙烯酰胺、卡波姆、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物和异十六烷和聚山梨醇酯-60的复合物、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物中的一种或两种以上的组合。

5.根据权利要求1所述的美白修护霜，其特征在于，所述pH调节剂包括氨甲基丙醇、精氨酸、柠檬酸、柠檬酸钠中的一种或两种以上的组合；和/或

6.根据权利要求1所述的美白修护霜，其特征在于，所述皮肤调理剂包括巨藻提取物、墨角藻提取物、水解胶原蛋白、绿藻提取物、尿囊素、乳酸杆菌/大豆发酵产物提取物、白果槲寄生叶提取物、白茅根提取物、β-葡聚糖、棕榈酰三肽-5、乙酰基六肽-8、仙人掌提取物中的一种或两种以上的组合；和/或

7.一种根据权利要求1-6任一项所述的美白修护霜的制备方法，其特征在于，包括将所述美白修护霜的各组分混合的步骤。