CN109422798A - 一种苯基丙酰胺类衍生物的游离碱晶型及其制备方法 - Google Patents

一种苯基丙酰胺类衍生物的游离碱晶型及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种苯基丙酰胺类衍生物的游离碱晶型及其制备方法。具体而言本发明涉及一种苯基丙酰胺类衍生物游离碱的新晶型，即式(I)所示化合物的I晶型。本发明还涉及该I晶型的制备方法、药物组合物及其制备预防和/或治疗KOR激动剂介导的相关疾病的药物中的用途。本发明所得到式(I)化合物的I晶型具备良好的稳定性，可更好地用于临床治疗。

Description

一种苯基丙酰胺类衍生物的游离碱晶型及其制备方法
技术领域
本发明属于药物化学领域，涉及化学名为(R)-N-((R)-6-氨基-1-(4-(3-甲基脲基)哌啶-1-基)-1-氧代己烷-2-基)-2-((R)-2-((R)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺的化合物的I晶型，及其制备方法、药物组合物和其在制备预防和/或治疗κ阿片样物质受体激动剂介导的相关疾病的药物中的用途。
背景技术
阿片受体是一类重要的G蛋白偶联受体，是内源性阿片肽及阿片类药物结合的靶点，阿片受体激活后对神经系统免疫及内分泌系统具有调节作用，阿片类药物是目前最强且常用的中枢镇痛药。内源性阿片肽是哺乳动物体内天然生成的阿片样活性物质，目前已知的内源性阿片肽大致分为脑啡肽、内啡肽、强啡肽和新啡肽几类(Pharmacol Rev 2007；59:88–123)，中枢神经系统中存在其相应的阿片受体，即μ、δ、κ受体等。
κ阿片受体(κ-opioid receptor,KOR)是中枢神经系统的重要阿片受体之一，以其为作用靶点的药物研发受到了极大关注。目前公开的KOR激动剂专利申请包括WO20071398、WO2008060552、WO09932510、WO2013184794、WO2014089019、WO2014184356和WO2015065867等。
KOR激动剂作为药物在医药行业具有良好的应用前景，本申请人在专利申请CN201710095021.X(申请日：2017.02.22)提供了一种新的具有优异效果和作用的KOR受体激动剂化合物，其化学名为(R)-N-((R)-6-氨基-1-(4-(3-甲基脲基)哌啶-1-基)-1-氧代己烷-2-基)-2-((R)-2-((R)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺，结构如下所示。
作为药用活性成分的晶型结构往往影响到该药物的化学稳定性，结晶形式、制备方法及储存条件的不同有可能导致化合物的晶型结构的变化，有时还会伴随着产生其他形态的晶型。一般来说，无定形的药物产品因没有规则的晶型结构，往往具有其它缺陷，比如产物稳定性较差、析晶较细、过滤较难、引湿性大，易结块、流动性差等，这些缺陷常常给实际大规模生产带来困难。因此，深入进行式(I)化合物的多晶型研究，获得纯度高且化学性质稳定的晶型，对开发适合工业生产且生物活性良好的药物具有重要意义。
发明内容
本发明解决的技术问题是提供了一种(R)-N-((R)-6-氨基-1-(4-(3-甲基脲基)哌啶-1-基)-1-氧代己烷-2-基)-2-((R)-2-((R)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺的I晶型及其制备方法。本发明所制备的晶型具备良好的稳定性。
本发明的技术方案如下：
本发明提供一种式(I)所示化合物的I晶型，其特征在于：使用Cu-Kα辐射，得到以衍射角2θ角度表示的X-射线粉末衍射图谱，其在7.48、10.76、11.12、11.90、14.88、16.88、17.88、18.68、19.60和21.64处有特征峰。
优选的，所述衍射谱图在5.32、7.48、10.76、11.12、11.90、14.10、14.88、16.88、17.88、18.68、19.60、21.64、22.40、23.16、24.16、24.74、25.66、27.98和29.30处有特征峰。
本发明还提供了I晶型的制备方法，所述方法包括：将式(I)所示化合物溶解于溶剂中，析晶，过滤，干燥后即得目标I晶型；所述溶剂选自腈类溶剂、脂类溶剂、醚类溶剂、醇类溶剂或其混合溶剂；所述混合溶剂选自腈类与醚类的混合溶剂、腈类与醇类的混合溶剂、腈类与酯类的混合溶剂、脂类与醇类的混合溶剂或两种或多种醚类的混合溶剂；所述腈类溶剂选自乙腈，所述脂类溶剂选自乙酸乙酯，所述醚类溶剂选自四氢呋喃或甲基叔丁基醚，所述醇类溶剂选自异丙醇；所述析晶的方法选自室温析晶、冷却析晶、挥发溶剂析晶或加入晶种诱导析晶。
本发明还涉及I晶型的药物组合物，其特征在于还包含一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
本发明还涉及I晶型及I晶型的药物组合物在制备预防和/或治疗KOR激动剂介导的相关疾病的药物中的用途，所述疾病选自疼痛、炎症、瘙痒、水肿、低钠血症、低钾血症、肠梗阻、咳嗽和青光眼，优选疼痛或瘙痒。
通过X-射线粉末衍射图谱(XRPD)、差示扫描量热分析(DSC)、热重分析(TGA)及动态水分分析(DVS)对所得到式(I)所示化合物的晶型进行结构测定、晶型研究。
晶型重结晶的方法没有特别限定，可以用通常的重结晶操作方法进行。例如，可以用原料式(I)所示化合物在有机溶剂中溶解后析晶，结晶完成后，经过滤干燥，即可得到所需要的结晶。
本发明析晶的方法有室温析晶、冷却析晶、挥发溶剂析晶、加入晶种诱导析晶等。
本发明晶型制备方法中所用的起始原料可以是任意形式的式(I)所示化合物，具体形式包括但不限于：无定形、任意晶型等。
发明详述
在本申请的说明书和权利要求书中，除非另有说明，否则本文中使用的科学和技术名词具有本领域技术人员所通常理解的含义。然而，为了更好地理解本发明，下面提供了部分相关术语的定义和解释。另外，当本申请所提供的术语的定义和解释与本领域技术人员所通常理解的含义不一致时，以本申请所提供的术语的定义和解释为准。
本发明所述“C1-6烷基”表示直链或支链的含有1-6个碳原子的烷基，具体实例包括但不限于：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、2-甲基丁基、新戊基、1-乙基丙基、正己基、异己基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、1,2-二甲基丙基等。
本发明所述的“醚类溶剂”是指含有醚键-O-且碳原子数为1至10个的链状化合物或环状化合物，具体实例包括但不限于：四氢呋喃、乙醚、丙二醇甲醚、甲基叔丁基醚或1,4-二氧六环。
本发明所述的“醇类溶剂”是指一个或多个“羟基”取代“C1-6烷基”上的一个或多个氢原子所衍生的基团，所述“羟基”和“C1-6烷基”如前文所定义，具体实例包括但不限于：甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇、异戊醇或三氟乙醇。
本发明所述的“酯类溶剂”是指含碳原子数为1至4个的低级有机酸与含碳原子数为1至6个的低级醇的结合物，具体实例包括但不限于：乙酸乙酯、乙酸异丙酯或乙酸丁酯。
本发明所述的“腈类溶剂”是指一个或多个“氰基”取代“C1-6烷基”上一个或多个氢原子所衍生的基团，所述“氰基”和“C1-6烷基”如前文所定义，具体实例包括但不限于：乙腈或丙腈。
本发明所述的“混合溶剂”是指一种或多种不同种类的有机溶剂按照一定比例混合而成的溶剂；所述混合溶剂选自腈类与醚类的混合溶剂、腈类与醇类的混合溶剂、腈类与酯类的混合溶剂、脂类与醇类的混合溶剂或两种或多种醚类的混合溶剂；所述腈类、醇类、醚类、酯类溶剂如前文所定义。
本发明所述的“X-射线粉末衍射图谱或XRPD”是指根据布拉格公式2d sinθ＝nλ(式中，λ为X射线的波长，衍射的级数n为任何正整数，一般取一级衍射峰，n＝1)，当X射线以掠角θ(入射角的余角，又称为布拉格角)入射到晶体或部分晶体样品的某一具有d点阵平面间距的原子面上时，就能满足布拉格方程，从而测得了这组X射线粉末衍射图。
本发明所述的“差示扫描量热分析或DSC”是指在样品升温或恒温过程中，测量样品与参考物之间的温度差、热流差，以表征所有与热效应有关的物理变化和化学变化，得到样品的相变信息。
本发明所述的“2θ或2θ角度”是指衍射角，θ为布拉格角，单位为°或度，所述2θ的误差范围可以是±0.3、±0.2或±0.1。
本发明所述的“晶面间距或晶面间距(d值)”是指空间点阵选择3个不相平行的连结相邻两个点阵点的单位矢量a，b，c，它们将点阵划分成并置的平行六面体单位，称为晶面间距。空间点阵按照确定的平行六面体单位连线划分，获得一套直线网格，称为空间格子或晶格。点阵和晶格是分别用几何的点和线反映晶体结构的周期性，不同的晶面，其面间距(即相邻的两个平行晶面之间的距离)各不相同；单位为或埃。
本发明还涉及包括式(I)所示化合物的I晶型和任选的一种或多种药用载体和/或稀释剂的药物组合物。所述药物组合物可以制成药学上可接受的任一剂型。例如，本发明的式(I)所示化合物的I晶型或其药物制剂可以配制为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂、注射剂(包括注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液)、栓剂、吸入剂或喷雾剂。
此外，本发明所述药物组合物还可以以任何合适的给药方式，例如口服、肠胃外、直肠、经肺或局部给药等方式施用于需要这种治疗的患者或受试者。当用于口服给药时，所述药物组合物可制成口服制剂，例如口服固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；或，口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等。当制成口服制剂时，所述药物制剂还可包含适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。当用于肠胃外给药时，所述药物制剂可制成注射剂，包括注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液。当制成注射剂时，所述药物组合物可采用现有制药领域中的常规方法来进行生产。当配制注射剂时，所述药物制剂中可以不加入附加剂，也可根据药物的性质加入适宜的附加剂。当用于直肠给药时，所述药物制剂可制成栓剂等。用于经肺给药时，所述药物制剂可制成吸入剂或喷雾剂等。在某些优选的实施方案中，本发明的式(I)所示化合物的I晶型以治疗和/或预防有效量存在于药物组合物或药物中。在某些优选的实施方案中，本发明式(I)所示化合物的I晶型以单位剂量的形式存在于药物组合物或药物中。
本发明式(I)化合物或其I晶型可用于制备治疗KOR激动剂介导的相关疾病。因此，本发明还涉及式(I)化合物的I晶型用于制备药物的用途，所述药物用于治疗与KOR激动剂有关的疾病的药物中的用途。此外，本申请还涉及一种调节与KOR激动剂有关的疾病的方法，其包括给有此需要的受试者施用治疗和/或预防有效量的本发明式(I)化合物的I晶型或者本发明的药物组合物。
在某些优选的实施方案中，所述疾病为与KOR激动剂有关的疾病，所述疾病选自疼痛、炎症、瘙痒、水肿、低钠血症、低钾血症、肠梗阻、咳嗽和青光眼，优选疼痛或瘙痒。
发明的有益效果
与现有技术相比，本发明的技术方案具有以下优点：
经研究表明，本发明制备的式(I)所示化合物的I晶型稳定性良好、纯度较高；在高温、高湿、光照的条件下晶型经XRPD检测均未发生改变、晶型稳定性良好；本发明技术方案得到的式(I)所示化合物的I晶型能够满足生产运输储存的药用要求，生产工艺稳定、可重复可控，能够适应于工业化生产。
附图说明
图1为式(I)所示化合物无定型物的XRPD图谱。
图2为式(I)所示化合物I晶型的XRPD图谱。
图3为式(I)所示化合物I晶型的DSC图谱。
图4为式(I)所示化合物I晶型的TGA图谱。
具体实施方式
以下将结合实施例更详细地解释本发明，本发明的实施例仅用于说明本发明的技术方案，本发明的实质和范围并不局限于此。
实验所用仪器的测试条件：
化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或/和质谱(MS)来确定的。NMR位移(δ)以10-6(ppm)的单位给出。NMR的测定是用Bruker AVANCE-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)、氘代氯仿(CDCl3)、氘代甲醇(CD3OD)，内标为四甲基硅烷(TMS)。
MS的测定用FINNIGAN LCQAd(ESI)质谱仪(生产商：Thermo，型号：Finnigan LCQadvantage MAX)。
HPLC的测定使用安捷伦1200DAD高压液相色谱仪(Sunfire C18 150×4.6mm色谱柱)和Waters 2695-2996高压液相色谱仪(Gimini C18 150×4.6mm色谱柱)。
XRPD为X射线粉末衍射检测：测定使用Rigaku UltimaIV型号组合式多功能X射线衍射仪进行，具体采集信息：Cu阳极(40kV，40mA)，Cu-Kα1射线扫描速率20°/分钟、扫描范围(2q范围)：3～45°、扫描步长0.02、狭缝宽度0.01。
DSC为差示扫描量热：测定采用TA Q2000，升温速率10℃/min，30-300℃，氮气吹扫速度50mL/min。
TGA为热重分析：检测采用TAQ500，升温速率10℃/min，温度具体范围参照相应图谱，氮气吹扫速度60mL/min。
DVS为动态水分吸附：检测采用TAQ5000VSA，在25℃，湿度从10-90％，步进为10％，判断标准为10000min之内质量变化小于0.01％，循环两圈。
对比例1(专利申请CN201710095021.X中实施例1的制备方法)：
(R)-N-((R)-6-氨基-1-(4-(3-甲基脲基)哌啶-1-基)-1-氧代己烷-2-基)-2-((R)-2-((R)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺(式(I)化合物)的制备
第一步
4-((苯氧基羰基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯1b
将4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯1a(0.5g，2.5mmol)，吡啶(0.22g，2.75mmol)溶解于15mL四氢呋喃中，0℃下滴加氯甲酸苯酯(0.43g，2.75mmol)，反应液升至室温，搅拌反应2小时。反应液减压浓缩，残余物加入乙酸乙酯溶解，用水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，得到粗品标题产物1b(0.9g，白色固体)，产品不经纯化直接进行下步反应。
第二步
4-(3-甲基脲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯1c
将粗品1b(0.9g，2.5mmol)溶解于20mL甲醇中，加入1.3mL 2M甲胺的四氢呋喃溶液，50℃下搅拌反应12小时。反应液冷却至室温，减压浓缩，用薄层色谱法以展开剂体系A纯化所得残余物，得到标题产物1c(0.35g，无色油状物)，产率：55％。
MS m/z(ESI):256.1[M-1]
第三步
1-甲基-3-(哌啶-4-基)脲盐酸盐1d
将1c(0.35g，1.36mmol)溶解于5mL二氯甲烷中，加入1mL 4M氯化氢的1,4-二氧六环溶液，搅拌反应2小时。反应液减压浓缩，得到粗品标题产物1d(0.3g，白色固体)，产品不经纯化直接进行下一步反应。
第四步
(R)-(9H-芴-9-基)甲基叔丁基(6-(4-(3-甲基脲基)哌啶-1-基)-6-氧代己烷-1,5-二基)二氨基甲酸酯1f
将粗品1d(0.3g，1.36mmol)，(R)-2-(9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-6-((叔丁氧基羰基)氨基)己酸1e(637mg，1.36mmol，采用公知的方法“Tetrahedron,2002,58(27),5427-5439”制备而得)溶解于5mL N,N-二甲基甲酰胺中，加入2-(7-偶氮苯丙三氮唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(0.775g，2.04mmol)，三乙胺(0.38mL，2.72mmol)，搅拌反应12小时。反应液减压浓缩，用薄层色谱法以展开剂体系A纯化所得残余物，得到标题产物1f(390mg，浅黄色油状物)，产率：47％。
MS m/z(ESI):608.2[M+1]
第五步
(R)-(5-氨基-6-(4-(3-甲基脲基)哌啶-1-基)-6-氧代己基)氨基甲酸叔丁酯1g
将1f(120mg，0.197mmol)溶解于5mL二氯甲烷中，加入1mL六氢吡啶，搅拌反应12小时。反应液减压浓缩，用薄层色谱法以展开剂体系A纯化所得残余物，得到1g(76mg，白色固体)，产率：100％。
MS m/z(ESI):386.2[M+1]
第六步
N-[(5R)-5-[(2R)-2-[(2R)-2-[(2R)-2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3-苯基丙酰胺基]-3-苯基丙酰胺基]-4-甲基戊酰胺基]-6-{4-[(甲基氨基甲酰基)氨基]哌啶-1-基}-6-氧代己基]氨基甲酸叔丁酯1i
将1g(76mg，0.197mmol)，(6R,9R,12R)-6,9-二苄基-12-异丁基-2,2-二甲基-4,7,10-三氧代-3-氧杂-5,8,11-三氮杂十三烷-13-羧1h(104mg，0.197mmol，采用专利申请US20110212882公开的方法制备而得)，2-(7-偶氮苯丙三氮唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(112mg，0.296mmol)和三乙胺(0.055mL，0.394mmol)溶解于5mL N,N-二甲基甲酰胺中，搅拌反应12小时。反应液减压浓缩，用薄层色谱法以展开剂体系A纯化所得残余物，得到标题产物1i(100mg，白色固体)，产率：57％。
MS m/z(ESI):894.5[M+1]
第七步
(R)-N-((R)-6-氨基-1-(4-(3-甲基脲基)哌啶-1-基)-1-氧代己烷-2-基)-2-((R)-2-((R)-2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-4-甲基戊酰胺1
将1i(100mg，0.112mmol)溶解于5mL二氯甲烷中，加入0.5mL三氟乙酸，搅拌反应2小时。反应液减压浓缩，用高效液相色谱法纯化所得残余物，得到标题产物1(10mg，白色固体)，产率：14％。
经X-射线粉末衍射检测确定为无定型(见图1)，mDSC谱图如图2，Tg为91.94℃-95.08℃。
MS m/z(ESI):693.7[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.42(d,1H),8.19(d,1H),7.39-7.29(m,10H),7.22(d,1H),6.10(s,1H),5.12(s,4H),4.73(d,1H),4.41-4.37(m,2H),4.09(d,1H),3.74(d,1H),3.27-3.24(m,3H),3.02-2.96(m,4H),2.70(s,3H),2.16-1.90(m,2H),1.85-1.55(m,9H),1.51-1.25(m,6H),1.00(d,3H),0.96(d,3H).
测试例1
1、实验目的
本实验的目的是为了测试对比例1化合物对KOR受体的激动作用，根据EC50大小评价化合物的体外活性。
2、KOR活性的测试
2.1实验目的
对比例1化合物可以激活KOR受体(KOR)，从而降低细胞内cAMP的水平；第二信使cAMP进入细胞核与DNA的CRE相结合，可启动下游荧光素酶(Luciferase)的表达，荧光素酶与其底物反应可发出荧光，通过测定荧光信号反映化合物的激动活性。
2.2实验方法
对比例1化合物激动KOR影响下游cAMP水平变化的活性通过以下的方法进行测试。
2.2.1实验材料及仪器
1)实验仪器
仪器名称 供货公司 型号
酶标仪 PE Vector3
96孔圆底板 costar 3795
白色96孔平底板，透明底 Corning 3903
2)实验材料
2.2.2实验步骤
1)HEK293/KOR/CRE单克隆细胞株的获得
将KOR/pcDNA3.1(+)和CRE/pGL4.29转入HEK293细胞株，通过在培养基中加入G418和潮霉素(Hygromycin)，并在96孔细胞培养板中筛选出HEK293/KOR/CRE单克隆细胞株。
2)对比例1化合物对KOR激动作用实验
HEK293/KOR/CRE单克隆细胞株在DMEM/高葡萄糖培养基(10％FBS,1mg/ml G418，200ug/ml潮霉素，混匀)中培养，每3天传代一次。实验当天以新鲜细胞培养基制取细胞悬液，20,000细胞/孔铺96孔板(BD，#356692)，5％二氧化碳37℃培养。第二天，先将化合物溶解在纯DMSO中浓度为20mM，再用DMSO配制成首个浓度200nM，并以3倍依次稀释成8个浓度，设置成空白和对照的孔加入90μl DMSO；用含10μM Forskolin的DMEM/高葡萄糖(SH30243.01B，Hyclone)培养基稀释20倍。取出第一天接种的细胞培养板，每孔分别加入10μl稀释后药物或对照(0.5％DMSO)，轻轻振荡混匀，放置37℃培养4小时。在96孔细胞培养板中，每孔加入100μl荧光素酶检测液(Promega，#E6110)，室温放置5分钟，采用Victor3.0的冷光模式测吸收值。用Graphpad Prism软件根据化合物各浓度与相应的信号值计算化合物的EC50值。Emax为化合物引起cAMP水平变化的最大效应。
2.3测试结果
对比例1化合物激动KOR影响下游cAMP水平的变化通过以上的试验进行测定，测得的EC50值为0.5pM。
实施例1(I晶型的制备)
将式(I)所示化合物(11.1g，16.02mmol)加入反应瓶中，加入55mL乙腈，升温至回流搅拌至溶清，搅拌0.5小时，自然降温至室温，搅拌反应16小时，析出白色固体。反应液过滤，滤饼用乙腈淋洗(10mL×3)，收集滤饼，40℃真空干燥，得到产物(8g，产率：72％)。经X-粉末衍射检测，将该晶型定义为I晶型，XRPD谱图如图2所示，其特征峰位置如表1所示；DSC谱图如图3；TGA谱图如图4。
表1.I晶型特征峰
实施例2(I晶型的制备)
将式(I)所示化合物(60mg，0.0866mmol)和0.5mL乙腈加入反应瓶中，室温搅拌0.5小时，未溶清，升温至60℃搅拌至溶清，补加入式(I)所示化合物(30mg，0.0433mmol)，60℃搅拌2小时，自然降温至室温，有固体析出，搅拌16小时。反应液过滤，收集滤饼，真空干燥，得到产物(50mg，产率：83.3％)。经X-粉末衍射检测，该晶型化合物为I晶型。
实施例3(I晶型的制备)
将式(I)所示化合物(100mg，0.144mmol)和0.7mL乙腈加入反应瓶中，升温至80℃搅拌至溶清，滴加0.5mL甲基叔丁基醚，80℃搅拌0.5小时，自然降温至室温，有固体析出，搅拌4小时。反应液过滤，收集滤饼，真空干燥，得到产物(100mg，产率：100％)。经X-粉末衍射检测，该晶型化合物为I晶型。
实施例4(I晶型的制备)
将式(I)所示化合物(100mg，0.144mmol)和0.7mL乙腈加入反应瓶中，升温至80℃搅拌至溶清，滴加0.7mL异丙醇，80℃搅拌0.5小时，自然降温至室温，有固体析出，搅拌反应4小时。反应液过滤，收集滤饼，真空干燥，得到产物(100mg，产率：100％)。经X-粉末衍射检测，该晶型化合物为I晶型。
实施例5(I晶型的制备)
将式(I)所示化合物(100mg，0.144mmol)和0.6mL乙腈加入反应瓶中，升温至80℃搅拌至溶清，滴加0.8mL乙酸乙酯，80℃搅拌0.5小时，自然降温至室温，有固体析出，搅拌反应4小时。反应液过滤，收集滤饼，真空干燥，得到产物(100mg，产率：100％)。经X-粉末衍射检测，该晶型化合物为I晶型。
实施例6(I晶型的制备)
将式(I)所示化合物(100mg，0.144mmol)加入反应瓶中，加入0.6mL乙腈和异丙醇的混合溶剂(V/V＝10:1)，升温至65℃搅拌至溶清，自然降温至室温，搅拌16小时。反应液过滤，收集滤饼，真空干燥，得到产物(50mg，产率：50％)。经X-粉末衍射检测，该晶型化合物为I晶型。
实施例7(I晶型的制备)
将式(I)所示化合物(100mg，0.144mmol)和3mL乙酸乙酯加入反应瓶中，升温至70℃搅拌至溶清，自然降温至60℃，加入晶种，60℃搅拌1小时，自然降温至室温，搅拌4小时。反应液过滤，收集滤饼，真空干燥，得到产物(50mg，产率：50％)。经X-粉末衍射检测，该晶型化合物为I晶型。
实施例8(I晶型的制备)
将式(I)所示化合物(100mg，0.144mmol)加入反应瓶中，加入2.2mL乙酸乙酯和0.2mL异丙醇，升温至70℃搅拌至溶清，自然降温至55℃，加入晶种，55℃搅拌1小时，自然降温至室温，搅拌4小时。反应液过滤，收集滤饼，真空干燥，得到产物(50mg，产率：50％)。经X-粉末衍射检测，该晶型化合物为I晶型。
实施例9(I晶型的制备)
将式(I)所示化合物(100mg，0.144mmol)加入反应瓶中，加入0.7mL乙腈和0.7mL乙酸乙酯，升温至70℃搅拌至溶清，自然降温至55℃，加入晶种，55℃搅拌1小时，自然降温至室温，搅拌4小时。反应液过滤，收集滤饼，真空干燥，得到产物(50mg，产率：50％)。经X-粉末衍射检测，该晶型化合物为I晶型。
实施例10(I晶型的制备)
将式(I)所示化合物(60mg，0.0866mmol)加入反应瓶中，加入0.4mL四氢呋喃和0.4mL甲基叔丁基醚，升温至回流搅拌至溶清，自然降温至45℃，加入晶种，自然降温至室温，搅拌反应16小时，有固体析出。反应液过滤，收集滤饼，真空干燥，得到产物(50mg，产率：83.3％)。经X-粉末衍射检测，该晶型化合物为I晶型。
实施例11(I晶型的制备)
将式(I)所示化合物(1.0g，1.44mmol)加入反应瓶中，加入5mL乙腈，升温至回流搅拌至溶清，自然降温至60℃，加入20mg晶种，60℃搅拌1小时，自然降温至室温，搅拌反应16小时。反应液过滤，滤饼用少量乙腈淋洗，收集滤饼，真空干燥，得到产物(730mg，产率：73％)。经X-粉末衍射检测，该晶型化合物为I晶型。
实施例12(I晶型的引湿性研究)
采用TAQ5000VSA，在25℃，湿度从10-90％，步进为10％，判断标准为10000min之内质量变化小于0.01％，循环两圈。
实验结果：
表2.本发明I晶型引湿性考察结果
实验结论：
由表2可知，本发明式(I)化合物的I晶型样品在25℃的条件下，在10.0％RH-90.0％RH之间随着湿度的增加吸水量也在增加，重量变化为10.46％，小于15％但不小于2％，该样品有引湿性。在10％-95％的湿度变化过程中，该样品的解吸附过程与吸附过程基本不重合，测定DVS前后晶型未发生转变。
实施例13(I晶型的影响因素实验)
将式(I)化合物I晶型(实施例1)样品敞口平摊放置，考察在加热(40℃)、光照(4500Lux)、高湿(RH75％)条件下样品的稳定性。取样考察期为0、5天。
实验结果:
表3.式(I)化合物I晶型影响因素实验结果
实验结论：
由表3的影响因素实验结果表明：温度对式(I)化合物无定型和晶型I样品均有影响。无定型在湿度75％条件增重超过30％，而晶型I的样品增重不到10％，晶型I化合物在引湿性方面较无定型物有优势。
实施例14(I晶型的长期加速稳定性实验)
式(I)化合物I晶型进行4.5个月的长期加速稳定性考察。
实验结果：
表4.式(I)化合物I晶型样品长期加速稳定性实验结果：
实验结论：
由表4的长期加速稳定性实验结果显示：长期加速稳定性条件下放置4.5个月的式(I)化合物I晶型化学稳定性良好，适于进一步开发。

Claims (5)

1.一种式(I)所示化合物的I晶型，其特征在于：使用Cu-Ka辐射，得到以衍射角2θ角度表示的X-射线粉末衍射图谱，其在7.48、10.76、11.12、11.90、14.88、16.88、17.88、18.68、19.60和21.64处有特征峰。
2.如权利要求1所述的I晶型，其特征在于：使用Cu-Ka辐射，得到以衍射角2θ角度表示的X-射线粉末衍射图谱，其在5.32、7.48、10.76、11.12、11.90、14.10、14.88、16.88、17.88、18.68、19.60、21.64、22.40、23.16、24.16、24.74、25.66、27.98和29.30处有特征峰。
3.权利要求1-2任一项所述的I晶型的制备方法，其包括：将式(I)所示化合物溶解于溶剂中，析晶，过滤，干燥后即得目标I晶型；所述溶剂选自腈类溶剂、脂类溶剂、醚类溶剂、醇类溶剂或其混合溶剂；所述混合溶剂选自腈类与醚类的混合溶剂、腈类与醇类的混合溶剂、腈类与酯类的混合溶剂、脂类与醇类的混合溶剂或两种或多种醚类的混合溶剂；所选腈类溶剂选自乙腈，所述脂类溶剂选自乙酸乙酯，所述醚类溶剂选自四氢呋喃或甲基叔丁基醚，所述醇类溶剂选自异丙醇；所述析晶的方法选自室温析晶、冷却析晶、挥发溶剂析晶或加入晶种诱导析晶。
4.含有权利要求1-2中任一项所述的I晶型的药物组合物，其特征在于包含一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
5.权利要求1-2中任一项所述的I晶型、权利要求4所述的药物组合物在制备预防和/或治疗KOR激动剂介导的相关疾病的药物中的用途，所述疾病选自疼痛、炎症、瘙痒、水肿、低钠血症、低钾血症、肠梗阻、咳嗽和青光眼，优选疼痛或瘙痒。
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