CN109422788B - 一种盐酸阿糖胞苷的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种盐酸阿糖胞苷的制备方法，包括以下步骤：A)胞苷和乙酰水杨酰氯进行酰化反应，得到乙酰环胞苷；B)乙酰环胞苷在盐酸甲醇溶液中进行脱保护，得到盐酸环胞苷；C)盐酸环胞苷进行开环得到盐酸阿糖胞苷。本发明提供的盐酸阿糖胞苷的制备方法，不仅原料廉价易得，而且避开了使用高毒、难去除物质，不仅安全环保，而且得到的产品收率和纯度均较高。

Description

一种盐酸阿糖胞苷的制备方法

技术领域

本发明涉及药物化学技术领域，尤其涉及一种盐酸阿糖胞苷的制备方法。

背景技术

盐酸阿糖胞苷的化学名称为1-β-D-阿拉伯胞嘧糖苷盐酸盐(1-β-D-Cytarabinehydrochloride)，在体内可以干扰脱氧核苷酸(DNA)的合成，从而抑制细胞增殖，是一种重要的抗肿瘤药物。盐酸阿糖胞苷主要用于治疗急性白血病及消化道癌，对眼部带状疱疹、单纯疱疹性结膜炎也有一定疗效。

关于盐酸阿糖胞苷的合成，国内外已有相关报道。最常见的一类合成方法为：以胞苷为原料，在脱水剂的作用下得到盐酸环胞苷，进一步开环得到盐酸阿糖胞苷。这一类合成方法具有所用原料廉价易得的优点，同时也具有收率低、成本高的缺点。另外，由于目前所用的脱水剂多为剧毒物质，对环境及工作人员的身体健康具有极大的危险性。如，1967年Roberts等人公开了一种盐酸阿糖胞苷的合成方法，该方法以胞苷为原料，在多聚磷酸作用下合成环胞苷，然后开环得到阿糖胞苷。其中所用的多聚磷酸有腐蚀性，且受热分解可产生剧毒的氧化磷烟气。又如，1974年北京医学院药学系公开了一种半合成盐酸阿糖胞苷的方法，该方法以5’-胞嘧啶核苷酸为原料，切磷后，在三氯氧磷和N，N-二甲基甲酰胺的作用下合成环胞苷，然后开环得到阿糖胞苷。其中所用到的三氯氧磷为危险试剂，遇水猛烈分解，产生大量的热和浓烟，致磷毒性，甚至爆炸，而且N，N-二甲基甲酰胺为高沸点溶剂，后处理难以除去。又如，2013年饶哲等人公开了一种盐酸阿糖胞苷的合成方法，该方法以胞苷为原料，在二丁基氧化锡的催化下，与甲苯磺酸酯反应生成盐酸环胞苷，进一步开环得到盐酸阿糖胞苷。其中用到的二丁基氧化锡是一种有机锡，具有剧毒，对人的眼睛和皮肤有刺激作用，高浓度时有强烈刺激作用，引起的中毒症状有剧烈头痛、恶心、呕吐、嗜睡，甚至昏迷。另外，由于这些物质不但毒性大、且沸点高、难去除，造成所得的产品纯度低，用于人体则易引发副作用。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种盐酸阿糖胞苷的制备方法，安全环保，且具有较高的收率和纯度。

本发明提供了一种盐酸阿糖胞苷的制备方法，包括以下步骤：

A)胞苷和乙酰水杨酰氯进行酰化反应，得到乙酰环胞苷；

B)乙酰环胞苷在盐酸甲醇溶液中进行脱保护，得到盐酸环胞苷；

C)盐酸环胞苷进行开环得到盐酸阿糖胞苷。

首先以胞苷为原料，以乙酰水杨酰氯为酰化剂，制备乙酰环胞苷。

本发明经比较，采用碳酸乙烯酯等常用酰化关环试剂，得到的环胞苷颜色发黑，且纯度低，将所得环胞苷制成盐酸阿糖胞苷收率很低且纯化困难。采用乙酰水杨酰氯为酰化剂，可以提高环胞苷的收率和纯度。

通过与Me₂C(OAc)COCl(2-乙酰氧基异丁酰氯)比较，发现乙酰水杨酰氯更能促进反应的转化率，而且在脱保护时更容易除去，利于提高产品的收率和纯度。

所述乙酰水杨酰氯与胞苷的重量比优选为240～410：100，更优选为240～350:100，最优选为246～280:100，在本发明的某些具体实施例中，所述重量比具体为246:100，在本发明的某些具体实施例中，所述重量比具体为240:100，在本发明的某些具体实施例中，所述重量比具体为300:100，在本发明的某些具体实施例中，所述重量比具体为410:100。

所述酰化反应的溶剂优选为乙腈和/或甲苯。所述乙腈和/或甲苯与胞苷的比例优选为500～1000mL：100g，更优选为500～850mL：100g，再优选为500～700mL：100g，最优选为600～650mL：100g，在本发明的某些具体实施例中，所述乙腈和/或甲苯与胞苷的比例具体为600mL：100g，在本发明的某些具体实施例中，所述乙腈和/或甲苯与胞苷的比例具体为500mL：100g，在本发明的某些具体实施例中，所述乙腈和/或甲苯与胞苷的比例具体为800mL：100g，在本发明的某些具体实施例中，所述乙腈和/或甲苯与胞苷的比例具体为1000mL：100g。

本发明经比较，采用丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷和乙酸乙酯等常用试剂，即使是在回流状态下长时间搅拌，反应仍然无法进行完全，影响最终收率。而采用乙腈和/或甲苯为溶剂，能够使反应进行的更充分。

上述酰化反应的温度优选为65～82℃，更优选为65～75℃，再优选为70～75℃，最优选为72℃，在本发明的某些具体实施例中，所述酰化反应的温度为72℃，在本发明的某些具体实施例中，所述酰化反应的温度为65℃，在本发明的某些具体实施例中，所述酰化反应的温度为78℃，在本发明的某些具体实施例中，所述酰化反应的温度为82℃。反应的时间优选为0.5～2h，更优选为0.8～1.3h，最优选为1h，在本发明的某些具体实施例中，所述反应的时间为1h，在本发明的某些具体实施例中，所述反应的时间为0.5h，在本发明的某些具体实施例中，所述反应的时间为1.5h，在本发明的某些具体实施例中，所述反应的时间为2h。

上述以乙酰水杨酰氯为酰化剂，以乙腈和/或甲苯为溶剂，进行酰化反应，能够使反应更充分，提高收率及纯度，且所用试剂毒性小。

反应结束后，优选对产物进行提纯，具体的：

采用甲醇和乙醇中的一种或多种带除溶剂，然后以乙酸乙酯作为打浆试剂，打浆后减压过滤，用乙酸乙酯、丙酮和甲基叔丁基醚中的一种或多种洗涤滤饼，干燥得到乙酰环胞苷纯品，为白色固体粉末状。本发明采用乙酸乙酯作为打浆试剂，过滤固体状态好，不发黏，TLC点板显示无杂质点，得到的产品纯度高。

然后以盐酸甲醇为脱保护剂，将乙酰环胞苷在盐酸甲醇溶液中进行脱保护，得到盐酸环胞苷。

所述盐酸甲醇溶液的浓度优选≥1.9mol/L。所述盐酸甲醇溶液与胞苷的比例优选为600～1000mL：100g，更优选为600～850mL：100g，再优选为600～650mL：100g，在本发明的某些具体实施例中，所述盐酸甲醇溶液与胞苷的比为600mL：100g，在本发明的某些具体实施例中，所述盐酸甲醇溶液与胞苷的比为620mL：100g，在本发明的某些具体实施例中，所述盐酸甲醇溶液与胞苷的比为800mL：100g，在本发明的某些具体实施例中，所述盐酸甲醇溶液与胞苷的比为1000mL：100g。所述盐酸甲醇溶液的加入方式优选如下：

先加入50％的甲醇溶解乙酰环胞苷，然后加入50％的浓度≥3.8mol/L的盐酸甲醇溶液。

所述脱保护的温度优选为35～50℃，更优选为40～45℃。反应时间优选为15～24h，更优选为15～22h，最优选为16h。

采用盐酸甲醇作为脱保护剂，并控制反应温度为35～50℃，有利于促进反应的进行，缩短反应时间，同时提高产品的收率和纯度。

反应结束后，优选对产物进行提纯，具体的：

蒸除反应溶剂后，以乙酸乙酯或甲基叔丁基醚为打浆试剂，打浆后减压过滤，用乙酸乙酯或甲基叔丁基醚洗涤滤饼，干燥后得到盐酸环胞苷纯品，为白色固体粉末状。

对盐酸环胞苷进行开环，即可得到盐酸阿糖胞苷。

优选的，所述步骤C)具体为：

盐酸环胞苷在氨水的作用下开环，并在盐酸甲醇溶液中进行盐化反应，得到盐酸阿糖胞苷。

所述开环反应的温度优选为75～90℃，更优选80～85℃。反应的时间优选为0.5～1h，更优选为0.5～0.8h，最优选为0.5h。

所述盐化反应的温度优选为室温，时间优选为1～2h，更优选1～1.5h，最优选为1h。

本发明优选的，还包括：

将得到的盐酸阿糖胞苷在水和异丙醇的混合溶剂中进行重结晶提纯。

本发明采用水和异丙醇的混合溶剂作为重结晶溶剂，保证了产品纯度达到药典标准的同时，具有较高的收率。

优选的，所述重结晶提纯具体为：

盐酸阿糖胞苷粗品在水中加热溶解，过滤得滤液，滤液中加入异丙醇结晶，过滤得盐酸阿糖胞苷纯品。

所述水和异丙醇的体积比优选为1：(2.5～7.5)，更优选为1：(3.5～6)，在本发明的某些具体实施例中，所述体积比为1:4、1:4.9、1:3.75或1:5。

在本发明的某些具体实施例中，上述制备方法具体包括：

(1)：乙酰环胞苷的制备

在三口瓶中加入100g胞苷和500～1000ml(最优选600ml)乙腈和/或甲苯，搅拌分散均匀后，将240～410g(最优选246g)乙酰水杨酰氯加入反应瓶中，开启加热，升温至65～82℃(最优选72℃)时，基本溶清，开始计时，反应0.5～2h(最优选1h)；TLC显示原料反应完全，停止加热，自然降温搅拌，内温降至25-45℃(最优选45℃)时，滴入100-200ml(最优选150ml)甲醇或乙醇，滴加完毕后，室温搅拌0.5～1.5h(最优选0.5h)，然后减压蒸除溶剂；基本蒸干时加入1.5～2.5L(最优选1.65L)乙酸乙酯，室温打浆1～3h(最优选1h)，减压过滤，用乙酸乙酯或丙酮或甲基叔丁基醚淋洗2次，每次用量100～200ml，滤饼45～65℃(最优选60℃)真空干燥2～4h(最优选2h)；收料得白色固体粉末。

(2)：盐酸环胞苷的制备

在三口瓶中加入乙酰环胞苷和300～500ml(最优选310ml)甲醇，搅拌分散均匀后，加入300～500ml(最优选310ml)浓度大于3.8M(最优4M)的盐酸甲醇，开启加热，35～50℃(最优选40～45℃)反应15～24h(最优选16h)；TLC显示原料基本反应完全，减压蒸除溶剂，基本蒸干时加入1～2L(最优选1.3L)乙酸乙酯或甲基叔丁基醚室温打浆0.5～1.5h(最优选0.5h)，减压过滤，用乙酸乙酯或甲基叔丁基醚淋洗2次，每次用量50～100ml，滤饼40～60℃(最优选50℃)鼓风干燥4～16h(最优选16h)；收料得白色固体粉末。

(3)：盐酸阿糖胞苷的制备

在三口瓶中加入盐酸环胞苷和200～400ml(最优选355ml)水，搅拌分散均匀后，加入58～78g(最优选61g)浓氨水(浓度最优为26～28％)，然后开启加热，75～90℃(最优选80～85℃)反应0.5～1小时(最优选0.5h)；减压蒸除溶剂，基本蒸干时加入200～400ml(最优选250ml)甲醇加热搅拌，全部溶清时，加入100～150ml(最优选142ml)浓度大于3.8M(最优4M)的盐酸甲醇，加完后室温搅拌1～2h(最优选1h)；减压过滤，异丙醇淋洗2次，每次用量25～50ml，滤饼40～60℃(最优选50℃)鼓风干燥8～16h(最优选16h)；收料得白色固体粉末，即盐酸阿糖胞苷粗品。

(4)：纯化步骤

将盐酸阿糖胞苷粗品和60～120ml(最优选73ml)水，加热溶解，过滤，滤液在40～60℃(最优40～45℃)搅拌下，滴入300～450ml(最优选360ml)异丙醇，滴加完毕后，室温搅拌0.5～1.5h(最优选0.5h)；过滤，用异丙醇或甲醇或乙醇或甲基叔丁基醚淋洗2次，每次用量25～50ml，滤饼40～60℃(最优选50℃)鼓风干燥8～16h(最优选16h)；收料得白色结晶性粉末，即盐酸阿糖胞苷。

与现有技术相比，本发明提供了一种盐酸阿糖胞苷的制备方法，包括以下步骤：A)胞苷和乙酰水杨酰氯进行酰化反应，得到乙酰环胞苷；B)乙酰环胞苷在盐酸甲醇溶液中进行脱保护，得到盐酸环胞苷；C)盐酸环胞苷进行开环得到盐酸阿糖胞苷。本发明提供的盐酸阿糖胞苷的制备方法，不仅原料廉价易得，而且避开了使用高毒、难去除物质，不仅安全环保，而且得到的产品收率和纯度均较高。

附图说明

图1为实施例1制备的盐酸环胞苷HPLC图谱；

图2为实施例1制备的盐酸阿糖胞苷HPLC图谱。

具体实施方式

为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的盐酸阿糖胞苷的制备方法进行详细描述。

实施例1

(1)乙酰环胞苷的制备

在三口瓶中加入100g胞苷和600ml乙腈，搅拌分散均匀后，加入246g乙酰水杨酰氯，开启加热，升温至72℃，基本溶清后，开始计时，反应1h；TLC显示原料反应完全，停止加热，自然降温搅拌，降温至45℃时，滴入150ml甲醇，滴加完毕后，室温搅拌0.5h，然后减压蒸除溶剂；基本蒸干时加入1650ml乙酸乙酯，室温打浆1h，减压过滤，用乙酸乙酯淋洗2次，每次乙酸乙酯淋洗的用量为100ml，滤饼于60℃真空干燥2h；收料得白色固体粉末，称重131g。

(2)盐酸环胞苷的制备

在三口瓶中加入131g乙酰环胞苷和310ml甲醇，搅拌分散均匀后，加入310ml 4M盐酸甲醇，开启加热，40℃反应16h；TLC显示原料基本反应完全，减压蒸除溶剂，基本蒸干时加入1300ml乙酸乙酯，室温打浆0.5h，减压过滤，用乙酸乙酯淋洗2次，每次乙酸乙酯淋洗的用量为50ml。滤饼50℃条件下鼓风干燥16小时；收料得白色固体粉末，称重79g，两步收率72.6％，以胞苷计；纯度为94.03％。

采用HPLC对制备的盐酸环胞苷纯度进行检测，结果见表1。色谱图见附图1。

表1盐酸环胞苷实验数据

保留时间/min	峰面积	峰高	面积％
				2.983	6479.381	1153.26	94.03
5.811	4.441	0.49	0.06
				9.566	122.507	7.99	1.78
11.517	13.929	0.75	0.20
				15.206	10.526	0.86	0.15
17.188	3.804	0.27	0.06
				17.470	15.589	2.00	0.23
18.959	33.517	4.57	0.49
				20.304	7.788	1.17	0.11
21.811	20.564	2.79	0.30
				27.313	160.948	6.90	2.34
28.956	17.449	0.78	0.25
				总和	6890.442		100.00

(3)盐酸阿糖胞苷的制备

在三口瓶中加入79g盐酸环胞苷和355ml水，搅拌分散均匀后，加入61g浓氨水，然后开启加热，80℃反应0.5h；减压蒸除溶剂，基本蒸干时加入250ml甲醇加热搅拌，全部溶清时，加入142ml 4M盐酸甲醇，加完后室温搅拌1h；减压过滤，异丙醇淋洗2次，每次异丙醇用量为25ml，滤饼于50℃条件下鼓风干燥16h；收料得白色固体粉末，称重72.9g，即盐酸阿糖胞苷粗品，收率87％，以盐酸环胞苷计；纯度为99.5％。

(4)盐酸阿糖胞苷的纯化

在三口瓶中加入72.9g盐酸阿糖胞苷粗品和73ml水，加热溶解，过滤，滤液在40℃搅拌下，滴入360ml异丙醇，滴加完毕后，室温搅拌0.5h；过滤，用异丙醇淋洗2次，每次异丙醇用量为25ml，滤饼50℃条件下鼓风干燥16小时；收料得白色结晶性粉末，称重45.5g，即盐酸阿糖胞苷，收率62.4％，以盐酸阿糖胞苷粗品计；路线总收率为39.5％，以胞苷计；纯度为99.91％。

采用HPLC对制备的盐酸阿糖胞苷纯度进行检测，结果见表2。色谱图见附图2。

表2盐酸阿糖胞苷实验数据

保留时间/min	峰面积	峰高	面积％
				4.182	0.281	0.04	0.01
5.823	2.375	0.26	0.05
				7.254	4314.090	389.51	99.91
10.171	0.352	0.03	0.01
				11.349	0.802	0.05	0.02
总和	4317.900		100.00

实施例2

(1)乙酰环胞苷的制备

在三口瓶中加入100g胞苷和500ml乙腈，搅拌分散均匀后，加入240g乙酰水杨酰氯，开启加热，升温至65℃，基本溶清后，开始计时，反应0.5h；TLC显示原料反应完全，停止加热，自然降温搅拌，降温至25℃时，滴入100ml乙醇，滴加完毕后，室温搅拌1h，然后减压蒸除溶剂；基本蒸干时加入1500ml乙酸乙酯，室温打浆2h，减压过滤，用丙酮淋洗2次，每次丙酮的用量为130ml，滤饼于45℃真空干燥3h；收料得白色固体粉末，称重129g。

(2)盐酸环胞苷的制备

在三口瓶中加入129g乙酰环胞苷和300ml甲醇，搅拌分散均匀后，加入300ml 4M盐酸甲醇，开启加热，35℃反应15h；TLC显示原料基本反应完全，减压蒸除溶剂，基本蒸干时加入1000ml甲基叔丁基醚，室温打浆0.8h，减压过滤，用甲基叔丁基醚淋洗2次，每次甲基叔丁基醚的用量为70ml，滤饼40℃条件下鼓风干燥10小时；收料得白色固体粉末，称重78g，两步收率72.4％，以胞苷计；纯度为94.2％。

(3)盐酸阿糖胞苷的制备

在三口瓶中加入78g盐酸环胞苷和200ml水，搅拌分散均匀后，加入58g浓氨水，然后开启加热，75℃反应0.6h；减压蒸除溶剂，基本蒸干时加入200ml甲醇加热搅拌，全部溶清时，加入100ml 4M盐酸甲醇，加完后室温搅拌1.4h；减压过滤，异丙醇淋洗2次，每次异丙醇的用量为30ml，滤饼于40℃条件下鼓风干燥12h；收料得白色固体粉末，称重73g，即盐酸阿糖胞苷粗品，收率87.5％，以盐酸环胞苷计；纯度为99.4％。

(4)盐酸阿糖胞苷的纯化

在三口瓶中加入73g盐酸阿糖胞苷粗品和60ml水，加热溶解，过滤，滤液在45℃搅拌下，滴入300ml异丙醇，滴加完毕后，室温搅拌0.8h；过滤，用甲醇淋洗2次，每次甲醇的用量为30ml，滤饼40℃条件下鼓风干燥12小时；收料得白色结晶性粉末，称重44.9g，即盐酸阿糖胞苷，收率61.5％，以盐酸阿糖胞苷粗品计；路线总收率为39％，以胞苷计；纯度为99.82％。

实施例3

(1)乙酰环胞苷的制备

在三口瓶中加入100g胞苷和800ml甲苯，搅拌分散均匀后，加入300g乙酰水杨酰氯，开启加热，升温至78℃，基本溶清后，开始计时，反应1.5h；TLC显示原料反应完全，停止加热，自然降温搅拌，降温至30℃时，滴入120ml甲醇，滴加完毕后，室温搅拌1.5h，然后减压蒸除溶剂；基本蒸干时加入2000ml乙酸乙酯，室温打浆1.5h，减压过滤，用甲基叔丁基醚淋洗2次，每次甲基叔丁基醚的用量为160ml，滤饼于50℃真空干燥2.5h；收料得白色固体粉末，称重134g。

(2)盐酸环胞苷的制备

在三口瓶中加入134g乙酰环胞苷和400ml甲醇，搅拌分散均匀后，加入400ml 4M盐酸甲醇，开启加热，45℃反应20h；TLC显示原料基本反应完全，减压蒸除溶剂，基本蒸干时加入1600ml乙酸乙酯，室温打浆1.2h，减压过滤，用乙酸乙酯淋洗2次，每次乙酸乙酯的用量为90ml，滤饼45℃条件下鼓风干燥7小时；收料得白色固体粉末，称重80g，两步收率74.32％，以胞苷计；纯度为93.7％。

(3)盐酸阿糖胞苷的制备

在三口瓶中加入80g盐酸环胞苷和300ml水，搅拌分散均匀后，加入70g浓氨水，然后开启加热，85℃反应0.8h；减压蒸除溶剂，基本蒸干时加入300ml甲醇加热搅拌，全部溶清时，加入120ml 4M盐酸甲醇，加完后室温搅拌1.6h；减压过滤，异丙醇淋洗2次，异丙醇的用量为40ml，滤饼于55℃条件下鼓风干燥10h；收料得白色固体粉末，称重73.5g，即盐酸阿糖胞苷粗品，收率85.9％，以盐酸环胞苷计；纯度为99.5％。

(4)盐酸阿糖胞苷的纯化

在三口瓶中加入73.5g盐酸阿糖胞苷粗品和100ml水，加热溶解，过滤，滤液在50℃搅拌下，滴入400ml异丙醇，滴加完毕后，室温搅拌1.0h；过滤，用乙醇淋洗2次，每次乙醇的用量为40ml滤饼55℃条件下鼓风干燥10小时；收料得白色结晶性粉末，称重44.8g，即盐酸阿糖胞苷，收率60.9％，以盐酸阿糖胞苷粗品计；路线总收率为38.9％，以胞苷计；纯度为99.8％。

实施例4

(1)乙酰环胞苷的制备

在三口瓶中加入100g胞苷和1000ml乙腈，搅拌分散均匀后，加入410g乙酰水杨酰氯，开启加热，升温至82℃，基本溶清后，开始计时，反应2h；TLC显示原料反应完全，停止加热，自然降温搅拌，降温至40℃时，滴入200ml甲醇，滴加完毕后，室温搅拌1.2h，然后减压蒸除溶剂；基本蒸干时加入2500ml乙酸乙酯，室温打浆3h，减压过滤，用乙酸乙酯淋洗2次，每次乙酸乙酯的用量为200ml，滤饼于65℃真空干燥4h；收料得白色固体粉末，称重130g。

(2)盐酸环胞苷的制备

在三口瓶中加入130g乙酰环胞苷和500ml甲醇，搅拌分散均匀后，加入500ml 4M盐酸甲醇，开启加热，50℃反应24h；TLC显示原料基本反应完全，减压蒸除溶剂，基本蒸干时加入2000ml乙酸乙酯，室温打浆1.5h，减压过滤，用乙酸乙酯淋洗2次，每次乙酸乙酯的用量为100ml，滤饼60℃条件下鼓风干燥4小时；收料得白色固体粉末，称重79g，两步收率73.3％，以胞苷计；纯度为94.5％。

(3)盐酸阿糖胞苷的制备

在三口瓶中加入79g盐酸环胞苷和400ml水，搅拌分散均匀后，加入78g浓氨水，然后开启加热，90℃反应1h；减压蒸除溶剂，基本蒸干时加入400ml甲醇加热搅拌，全部溶清时，加入158ml 4M盐酸甲醇，加完后室温搅拌2h；减压过滤，异丙醇淋洗2次，每次异丙醇的用量为50ml，滤饼于60℃条件下鼓风干燥8h；收料得白色固体粉末，称重72.8g，即盐酸阿糖胞苷粗品，收率86.2％，以盐酸环胞苷计；纯度为99.5％。

(4)盐酸阿糖胞苷的纯化

在三口瓶中加入72.8g盐酸阿糖胞苷粗品和120ml水，加热溶解，过滤，滤液在60℃搅拌下，滴入450ml异丙醇，滴加完毕后，室温搅拌1.5h；过滤，用甲基叔丁基醚淋洗2次，每次甲基叔丁基醚用量为50ml，滤饼60℃条件下鼓风干燥8小时；收料得白色结晶性粉末，称重44.9g，即盐酸阿糖胞苷，收率61.6％，以盐酸阿糖胞苷粗品计；路线总收率为39％，以胞苷计；纯度为99.93％。

对比例1

(1)乙酰环胞苷的制备

在三口瓶中加入100g胞苷和600ml乙腈，搅拌分散均匀后，加入250g Me₂C(OAc)COCl，开启加热，升温至72℃，基本溶清后，开始计时，反应1h；TLC显示原料反应完全，停止加热，自然降温搅拌，降温至45℃时，滴入150ml甲醇，滴加完毕后，室温搅拌0.5h，然后减压蒸除溶剂；基本蒸干时加入1650ml乙酸乙酯，室温打浆1h，减压过滤，用乙酸乙酯淋洗2次，每次乙酸乙酯淋洗的用量为100ml，滤饼于60℃真空干燥2h；收料得白色固体粉末，称重102g。

(2)盐酸环胞苷的制备

在三口瓶中加入102g乙酰环胞苷和310ml甲醇，搅拌分散均匀后，加入310ml 4M盐酸甲醇，开启加热，40℃反应16h；TLC显示原料基本反应完全，减压蒸除溶剂，基本蒸干时加入1300ml乙酸乙酯，室温打浆0.5h，减压过滤，用乙酸乙酯淋洗2次，每次乙酸乙酯淋洗的用量为50ml。滤饼50℃条件下鼓风干燥16小时；收料得白色固体粉末，称重49g，两步收率45.8％％，以胞苷计；纯度为91.3％。

(3)盐酸阿糖胞苷的制备

在三口瓶中加入49g盐酸环胞苷和355ml水，搅拌分散均匀后，加入61g浓氨水，然后开启加热，80℃反应0.5h；减压蒸除溶剂，基本蒸干时加入250ml甲醇加热搅拌，全部溶清时，加入142ml 4M盐酸甲醇，加完后室温搅拌1h；减压过滤，异丙醇淋洗2次，每次异丙醇用量为25ml，滤饼于50℃条件下鼓风干燥16h；收料得白色固体粉末，称重40.5g，即盐酸阿糖胞苷粗品，收率77.3％，以盐酸环胞苷计；纯度为94.7％。

(4)盐酸阿糖胞苷的纯化

在三口瓶中加入40.5g盐酸阿糖胞苷粗品和73ml水，加热溶解，过滤，滤液在40℃搅拌下，滴入360ml异丙醇，滴加完毕后，室温搅拌0.5h；过滤，用异丙醇淋洗2次，每次异丙醇用量为25ml，滤饼50℃条件下鼓风干燥16小时；收料得白色结晶性粉末，称重21.6g，即盐酸阿糖胞苷，收率53.3％，以盐酸阿糖胞苷粗品计；路线总收率为18.8％，以胞苷计；纯度为98.2％。

对比例2

(1)盐酸环胞苷的制备

在三口瓶中加入100g胞苷和500ml N,N-二甲基甲酰胺，搅拌分散均匀后，加入410g碳酸乙烯酯，开启加热，升温至82℃，基本溶清后，开始计时，反应2h；TLC显示原料反应完全，停止加热，自然降温搅拌，降温至40℃时，滴入200ml甲醇，滴加完毕后，室温搅拌1.2h，然后减压蒸除溶剂；基本蒸干时加入2500ml甲醇，室温打浆3h，减压过滤，用乙酸乙酯淋洗2次，每次乙酸乙酯的用量为200ml，滤饼于65℃真空干燥4h；收料得灰色固体粉末，称重51.4g，收率为47.7％，以胞苷计，纯度为79％。

(2)盐酸阿糖胞苷的制备

在三口瓶中加入51.4g盐酸环胞苷和200ml水，搅拌分散均匀后，加入52g浓氨水，然后开启加热，90℃反应1h；减压蒸除溶剂，基本蒸干时加入200ml甲醇加热搅拌，全部溶清时，加入105ml 4M盐酸甲醇，加完后室温搅拌2h；减压过滤，异丙醇淋洗2次，每次异丙醇的用量为50ml，滤饼于60℃条件下鼓风干燥8h；收料得白色固体粉末，称重23.1g，即盐酸阿糖胞苷粗品，收率39.8％，以盐酸环胞苷计；纯度为90.1％。

(3)盐酸阿糖胞苷的纯化

在三口瓶中加入23.1g盐酸阿糖胞苷粗品和30ml水，加热溶解，过滤，滤液在60℃搅拌下，滴入150ml乙醇，滴加完毕后，室温搅拌1.5h；过滤，用甲基叔丁基醚淋洗2次，每次甲基叔丁基醚用量为50ml，滤饼60℃条件下鼓风干燥8小时；收料得类白色粉末，称重11.3g，即盐酸阿糖胞苷，收率48.9％，以盐酸阿糖胞苷粗品计；路线总收率为9.8％，以胞苷计；纯度为98％。

由上述实施例及比较例可知，本发明提供的制备方法具有更高的收率和纯度，且避免了高毒或易残留试剂的使用。

以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。

Claims (5)

1.一种盐酸阿糖胞苷的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

A)胞苷和乙酰水杨酰氯进行酰化反应，得到乙酰环胞苷；所述酰化反应的温度为65～82℃，反应时间为0.5～2h；

反应后还包括对产物进行提纯：

采用甲醇和乙醇中的一种或多种带除溶剂，然后以乙酸乙酯作为打浆试剂，打浆后减压过滤，用乙酸乙酯、丙酮和甲基叔丁基醚中的一种或多种洗涤滤饼，干燥得到乙酰环胞苷纯品；

B)乙酰环胞苷在盐酸甲醇溶液中进行脱保护，得到盐酸环胞苷；

反应后还包括对产物进行提纯：

蒸除反应溶剂后，以乙酸乙酯或甲基叔丁基醚为打浆试剂，打浆后减压过滤，用乙酸乙酯或甲基叔丁基醚洗涤滤饼，干燥后得到盐酸环胞苷纯品；

C)盐酸环胞苷在氨水的作用下开环，并在盐酸甲醇溶液中进行盐化反应，得到盐酸阿糖胞苷；

将得到的盐酸阿糖胞苷在水和异丙醇的混合溶剂中进行重结晶提纯；

所述步骤A)反应的溶剂为乙腈和/或甲苯；

所述步骤B)脱保护的温度为35～50℃；

所述乙腈和/或甲苯与胞苷的比例为500～1000mL：100g；

所述盐酸甲醇溶液的浓度≥1.9mol/L。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述乙酰水杨酰氯与胞苷的重量比为240～410：100。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，盐酸甲醇溶液与胞苷的比例为600～1000mL：100g。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤C)之后还包括：

盐酸阿糖胞苷粗品在水和异丙醇的混合溶剂中进行重结晶提纯。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述重结晶提纯具体为：

盐酸阿糖胞苷粗品在水中加热溶解，过滤得滤液，滤液中加入异丙醇结晶，过滤得盐酸阿糖胞苷纯品。

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