CN109364529A - 一种治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备方法及装置 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备方法及装置,其制备方法为:①全血采集;②添加抗凝剂;③一次离心;④二次离心;⑤三次离心;⑥得到富血小板血浆;制备装置包括离心管,离心管包括外管、内管和密封盖,外管的内壁和内管的外壁紧密贴合,密封盖与外管及内管的上端密封连接,内管的底部设置有排液管,在排液管上设置有简易卡夹,内管的侧壁上设置有多个抽液孔,抽液孔内设置有可用针头穿透的侧壁密封件,制备装置结构简单,操作方便,在产品的制备过程中,可极大程度上降低血液的污染概率,制备得到的产品中血小板的浓度较高,提取效率较高,制备周期较短,可行性强,在临床上具有推广使用价值。
Description
技术领域
本发明属于富血小板血浆提取技术领域,具体涉及一种治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备方法及装置。
背景技术
压力性损伤常见的有压疮、褥疮等,是由于局部组织长期受压、营养不良、血液循环障碍使局部组织持续缺血、缺氧,最终导致局部组织的坏死,压力性损伤的护理较为困难,治疗难度较大。自体富血小板血浆,简称PRP,是自体全血通过离心而得到的含高浓度血小板的血浆,而血小板中含有大量的生长因子,如血小板衍生生长因子、转化生长因子、胰岛素样生长因子、表皮生长因子等,这些生长因子能精确的自我定位到损伤部位,控制炎症,从不同方面对细胞和组织再生起到促进作用,从而加速损伤组织的修复和愈合作用,可用于压力性损伤的治疗,且治疗效果比传统的治疗方法较好,治疗有效率较高,所以PRP在压力性损伤的治疗上具有较大的应用价值,而PRP的提取质量也是影响其治疗功能和效果的关键因素。
人体全血中血小板的浓度一般为1~3×105/ml,研究认为浓缩后的PRP血小板浓度的提高能有效提高干细胞的增殖和分化能力,也能够显著增加纤维细胞的增殖和Ⅰ型胶原蛋白的表达,目前PRP的提取有手工法和设备制备法,存在的问题如下:一是提取方法较为繁琐,设备昂贵且操作复杂;二是提取后的PRP浓度不高、纯度不佳,且在提取过程中易受到外界的污染;三是提取效率较低,这些问题使得PRP在压力性损伤的临床治疗上受到了一定的限制。因此,研制开发一种操作过程简单,血小板浓度高、纯度好,提取效率高的治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备方法及装置是客观需要的。
发明内容
为了解决背景技术中存在的问题,本发明的目的在于提供一种操作过程简单,血小板浓度高、纯度好,提取效率高的治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备方法及装置。
本发明所述的治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备方法, 包括以下步骤:
①全血采集:使用注射器取患者的外周静脉血6~48ml;
②添加抗凝剂:将步骤①取得的全血添加到含有抗凝剂的离心管内,并摇晃离心管使得抗凝剂和全血混合均匀,抗凝剂和全血的体积比为0.2:8~10,抗凝剂的浓度为12500单位/2ml,所述抗凝剂为肝素、水蛭素或乙二胺四乙酸;
③一次离心:将添加抗凝剂后的全血置于离心机中进行离心,离心的转速为2400~2600rpm,离心的时间为5~10min,使血液基本分成三层,从上到下依次为乏血小板血浆层、富血小板血浆层和红细胞层;
④二次离心:从离心机中取出离心管,使用注射器抽取乏血小板血浆层并注入到红细胞层,使得离心管内的血液分为两层,从上到下依次为富血小板血浆层和混合层,随后将离心管置于离心机进行离心,离心的转速为2700~2900rpm,离心的时间为5~10min,使血液再次分成三层,从上到下依次为乏血小板血浆层、富血小板血浆层和红细胞层;
⑤三次离心:除去经过二次离心血液中的最下层,即红细胞层,摇晃离心管,使离心管内的乏血小板血浆层和富血小板血浆层混合均匀,然后将离心管置于离心机中进行离心,离心的转速为3000~3200rpm,离心的时间为3~5min,使血液分成两层,从上到下依次为乏血小板血浆层和富血小板血浆层;
⑥得到富血小板血浆:抽除步骤⑤中血液上层的乏血小板血浆层,剩下在离心管内的血液即为富血小板血浆。
进一步的,在步骤①中,外周静脉血为患者肘部的外周静脉血,且为新鲜的全血。
进一步的,在步骤⑥中,抽除乏血小板血浆层后,保证留取的富血小板血浆体积是步骤①中外周静脉血体积的1/10~1/5。
本发明所述的治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备装置, 包括离心管,离心管包括外管、内管和密封盖,外管的内壁和内管的外壁紧密贴合,密封盖与外管及内管的上端密封连接,密封盖上设置有注入孔和通气孔,注入孔和通气孔的上部均螺接有密封塞,注入孔的下部设置有可用针头穿透的顶部密封件,外管的内壁上设置有一体连接的支承部,内管的下底面抵在支承部上,内管的底部设置有排液管,排液管的下端穿过支承部伸出到支承部的下方,在排液管上设置有简易卡夹,简易卡夹可方便的夹紧和松开排液管,内管的侧壁上设置有多个抽液孔,抽液孔竖直间隔均匀布置,且在抽液孔内设置有可用针头穿透的侧壁密封件,与侧壁密封件相对应的外管侧壁上设置有开口。
进一步的,密封盖与外管的外壁螺纹连接,密封盖的下端设置有上口大下口小的锥形台,内管的内壁上设置有与锥形台配合密封的斜坡。
进一步的,内管外壁上沿圆周均布有数个竖条形凸起,在外管的内壁上设置有与竖条形凸起相配合的凹槽。
进一步的,外管的外壁上设置有刻度线。
进一步的,顶部密封件和侧壁密封件为橡胶堵头。
本发明的有益效果为:装置在使用过程中,注入全血和抽取部分血液时都是使用注射器的针头穿入密封件,使得内管中的血液始终处于隔离和密闭的环境中,可以保证制备产品处于无菌环境中,不被外界所污染;在抽取乏血小板血浆时,可直接使用针头穿过侧壁密封件进行抽取,同样的,在将乏血小板血浆注入红细胞层时,也可直接使用针头穿过侧壁密封件进行注入,后期在除去红细胞时,可打开简易卡夹,处于内管底部的红细胞从排液管中排出,可将红细胞排除干净,省去了现有技术中更换离心管的操作流程,使用同一个离心管即可完成产品的制备,提高了离心后富血小板的浓度、纯度和制备效率;其次,本装置的外管为离心管状,可以适配市面上通用的离心设备,避免了现有技术中制备装置和离心机适配性不好的问题;另外,本发明在离心操作时,采用了合理的离心转速和离心时间,更为利于富血小板血浆的提取。上述治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备方法和装置,制备装置结构简单,操作方便,在产品的制备过程中,可极大程度上降低血液的污染概率,制备得到的产品中血小板的浓度较高,提取效率较高,制备周期较短,可行性强,在临床上具有推广使用价值。
附图说明
图1为本发明的结构示意图;
图2为本发明的外形示意图;
图3为本发明外管和内管的俯视结构示意图。
图中:1-外管,2-内管,3-密封盖,4-注入孔,5-通气孔,6-密封塞,7-顶部密封件,8-支承部,9-排液管,10-简易卡夹,11-抽液孔,12-侧壁密封件,13-开口,14-锥形台,15-竖条形凸起,16-刻度线。
具体实施方式
下面结合实施例和附图说明对本发明作进一步的说明,但不以任何方式对本发明加以限制,基于本发明教导所作的任何变换或替换,均实施例属于本发明的保护范围。
实施例1:
本实施例所述的治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备装置,包括离心管,离心管包括外管1、内管2和密封盖3,外管1的内壁和内管2的外壁紧密贴合,密封盖3与外管1及内管2的上端密封连接,密封盖3上设置有注入孔4和通气孔5,注入孔4和通气孔5的上部均螺接有密封塞6,注入孔4的下部设置有可用针头穿透的顶部密封件7,外管1的内壁上设置有一体连接的支承部8,内管2的下底面抵在支承部8上,内管2的底部设置有排液管9,排液管9的下端穿过支承部8伸出到支承部8的下方,在排液管9上设置有简易卡夹10,简易卡夹10可方便的夹紧和松开排液管10,内管2的侧壁上设置有多个抽液孔11,抽液孔11竖向间隔布置,抽液孔11内设置有可用针头穿透的侧壁密封件12,与侧壁密封件12相对应的外管1侧壁上设置有开口13。
本装置在使用时,首先将全血从注入孔4中注入到离心管,然后进行离心操作,离心操作后可使用注射器刺穿侧壁密封件12抽取乏血小板血浆,并注入到红细胞中,再次离心后,可打开排液管9上的简易卡夹10,将红细胞排除干净,最后离心操作后,再次使用注射器将乏血小板血浆抽除,剩下在离心管中的就是浓度和纯度较高的富血小板血浆。
密封盖3与外管1的外壁螺纹连接,密封盖3的下端设置有上口大下口小的锥形台14,内管2的内壁上设置有与锥形台14配合密封的斜坡。
为了避免内管2与外管1之间产生相对转动,内管2的外壁上设置有竖条形凸起15,在外管1的内壁上设置有与竖条形凸起15相配合的凹槽。
为了便于掌握离心管内血液的体积,外管1的外壁上设置有刻度线16。
为了方便注射器的针头刺穿密封件,顶部密封件7和侧壁密封件12为橡胶堵头。
本发明所述的治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备方法,包括以下步骤:
①全血采集:使用注射器取患者的外周静脉血48ml,外周静脉血为患者肘部的外周静脉血,且为新鲜的全血;
②添加抗凝剂:将步骤①取得的全血添加到含有抗凝剂的离心管内,并摇晃离心管使得抗凝剂和全血混合均匀,抗凝剂和全血的体积比为0.2:8,抗凝剂的浓度为12500单位/2ml,抗凝剂为肝素、水蛭素或乙二胺四乙酸;
③一次离心:将添加抗凝剂后的全血置于离心机中进行离心,离心的转速为2400rpm,离心的时间为5min,使血液基本分成三层,从上到下依次为乏血小板血浆层、富血小板血浆层和红细胞层;
④二次离心:从离心机中取出离心管,使用注射器抽取乏血小板血浆层并注入到红细胞层,使得离心管内的血液分为两层,从上到下依次为富血小板血浆层和混合层,随后将离心管置于离心机进行离心,离心的转速为2700rpm,离心的时间为5min,使血液再次分成三层,从上到下依次为乏血小板血浆层、富血小板血浆层和红细胞层;
⑤三次离心:使用注射器抽去经过二次离心血液中的最下层,即红细胞层,摇晃离心管,使离心管内的乏血小板血浆层和富血小板血浆层混合均匀,然后将离心管置于离心机中进行离心,离心的转速为3000rpm,离心的时间为3min,使血液分成两层,从上到下依次为乏血小板血浆层和富血小板血浆层;
⑥得到富血小板血浆:抽除步骤⑤中血液上层的乏血小板血浆层,剩下在离心管内的血液即为富血小板血浆,抽除的乏血小板血浆层的体积后,保证留取的富血小板血浆体积是步骤①中外周静脉血体积的1/10。
上述制备方法各步骤中用到的离心管,即为前述提到的治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备装置。
经验证,本发明所述的压力性损伤用自体富血小板血浆的制备方法和装置,制备装置结构简单,操作方便,在产品的制备过程中,极大程度上降低了血液的污染概率,制备得到的产品中血小板的浓度较高,提取效率较高,经统计,采取本方法制得的富血小板血浆的浓度为离心前全血中血小板浓度的4.6倍,对压力性损伤患者具有较高的治愈率,在临床上具有推广使用价值。
实施例2:
本实施例所述的治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备装置,包括离心管,离心管包括外管1、内管2和密封盖3,外管1的内壁和内管2的外壁紧密贴合,密封盖3与外管1及内管2的上端密封连接,密封盖3上设置有注入孔4和通气孔5,注入孔4和通气孔5的上部均螺接有密封塞6,注入孔4的下部设置有可用针头穿透的顶部密封件7,外管1的内壁上设置有一体连接的支承部8,内管2的下底面抵在支承部8上,内管2的底部设置有排液管9,排液管9的下端穿过支承部8伸出到支承部8的下方,在排液管9上设置有简易卡夹10,简易卡夹10可方便的夹紧和松开排液管10,内管2的侧壁上设置有多个抽液孔11,抽液孔11竖向间隔布置,抽液孔11内设置有可用针头穿透的侧壁密封件12,与侧壁密封件12相对应的外管1侧壁上设置有开口13。
本装置在使用时,首先将全血从注入孔4中注入到离心管,然后进行离心操作,离心操作后可使用注射器刺穿侧壁密封件12抽取乏血小板血浆,并注入到红细胞中,再次离心后,可打开排液管9上的简易卡夹10,将红细胞排除干净,最后离心操作后,再次使用注射器将乏血小板血浆抽除,剩下在离心管中的就是浓度和纯度较高的富血小板血浆。
密封盖3与外管1的外壁螺纹连接,密封盖3的下端设置有上口大下口小的锥形台14,内管2的内壁上设置有与锥形台14配合密封的斜坡。
为了避免内管2与外管1之间产生相对转动,内管2的外壁上设置有竖条形凸起15,在外管1的内壁上设置有与竖条形凸起15相配合的凹槽。
为了便于掌握离心管内血液的体积,外管1的外壁上设置有刻度线16。
为了方便注射器的针头刺穿密封件,顶部密封件7和侧壁密封件12为橡胶堵头。
本发明所述的治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备方法,包括以下步骤:
①全血采集:使用注射器取患者的外周静脉血30ml,外周静脉血为患者肘部的外周静脉血,且为新鲜的全血;
②添加抗凝剂:将步骤①取得的全血添加到含有抗凝剂的离心管内,并摇晃离心管使得抗凝剂和全血混合均匀,抗凝剂和全血的体积比为0.2:9,抗凝剂的浓度为12500单位/2ml,抗凝剂为肝素、水蛭素或乙二胺四乙酸;
③一次离心:将添加抗凝剂后的全血置于离心机中进行离心,离心的转速为2500rpm,离心的时间为8min,使血液基本分成三层,从上到下依次为乏血小板血浆层、富血小板血浆层和红细胞层;
④二次离心:从离心机中取出离心管,使用注射器抽取乏血小板血浆层并注入到红细胞层,使得离心管内的血液分为两层,从上到下依次为富血小板血浆层和混合层,随后将离心管置于离心机进行离心,离心的转速为2800rpm,离心的时间为7min,使血液再次分成三层,从上到下依次为乏血小板血浆层、富血小板血浆层和红细胞层;
⑤三次离心:使用注射器抽去经过二次离心血液中的最下层,即红细胞层,摇晃离心管,使离心管内的乏血小板血浆层和富血小板血浆层混合均匀,然后将离心管置于离心机中进行离心,离心的转速为3100rpm,离心的时间为4min,使血液分成两层,从上到下依次为乏血小板血浆层和富血小板血浆层;
⑥得到富血小板血浆:抽除步骤⑤中血液上层的乏血小板血浆层,剩下在离心管内的血液即为富血小板血浆,抽除的乏血小板血浆层的体积后,保证留取的富血小板血浆体积是步骤①中外周静脉血体积的1/8。
经验证,本发明所述的压力性损伤用自体富血小板血浆的制备方法和装置,制备装置结构简单,操作方便,在产品的制备过程中,极大程度上降低了血液的污染概率,制备得到的产品中血小板的浓度较高,提取效率较高,经统计,采取本方法制得的富血小板血浆的浓度为离心前全血中血小板浓度的4.1倍,对压力性损伤患者具有较高的治愈率,在临床上具有推广使用价值。
实施例3:
本实施例所述的治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备装置,包括离心管,离心管包括外管1、内管2和密封盖3,外管1的内壁和内管2的外壁紧密贴合,密封盖3与外管1及内管2的上端密封连接,密封盖3上设置有注入孔4和通气孔5,注入孔4和通气孔5的上部均螺接有密封塞6,注入孔4的下部设置有可用针头穿透的顶部密封件7,外管1的内壁上设置有一体连接的支承部8,内管2的下底面抵在支承部8上,内管2的底部设置有排液管9,排液管9的下端穿过支承部8伸出到支承部8的下方,在排液管9上设置有简易卡夹10,简易卡夹10可方便的夹紧和松开排液管10,内管2的侧壁上设置有多个抽液孔11,抽液孔11竖向间隔布置,抽液孔11内设置有可用针头穿透的侧壁密封件12,与侧壁密封件12相对应的外管1侧壁上设置有开口13。
本装置在使用时,首先将全血从注入孔4中注入到离心管,然后进行离心操作,离心操作后可使用注射器刺穿侧壁密封件12抽取乏血小板血浆,并注入到红细胞中,再次离心后,可打开排液管9上的简易卡夹10,将红细胞排除干净,最后离心操作后,再次使用注射器将乏血小板血浆抽除,剩下在离心管中的就是浓度和纯度较高的富血小板血浆。
密封盖3与外管1的外壁螺纹连接,密封盖3的下端设置有上口大下口小的锥形台14,内管2的内壁上设置有与锥形台14配合密封的斜坡。
为了避免内管2与外管1之间产生相对转动,内管2的外壁上设置有竖条形凸起15,在外管1的内壁上设置有与竖条形凸起15相配合的凹槽。
为了便于掌握离心管内血液的体积,外管1的外壁上设置有刻度线16。
为了方便注射器的针头刺穿密封件,顶部密封件7和侧壁密封件12为橡胶堵头。
本发明所述的治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备方法,包括以下步骤:
①全血采集:使用注射器取患者的外周静脉血6ml,外周静脉血为患者肘部的外周静脉血,且为新鲜的全血;
②添加抗凝剂:将步骤①取得的全血添加到含有抗凝剂的离心管内,并摇晃离心管使得抗凝剂和全血混合均匀,抗凝剂和全血的体积比为0.2:10,抗凝剂的浓度为12500单位/2ml,抗凝剂为肝素、水蛭素或乙二胺四乙酸;
③一次离心:将添加抗凝剂后的全血置于离心机中进行离心,离心的转速为2600rpm,离心的时间为10min,使血液基本分成三层,从上到下依次为乏血小板血浆层、富血小板血浆层和红细胞层;
④二次离心:从离心机中取出离心管,使用注射器抽取乏血小板血浆层并注入到红细胞层,使得离心管内的血液分为两层,从上到下依次为富血小板血浆层和混合层,随后将离心管置于离心机进行离心,离心的转速为2900rpm,离心的时间为10min,使血液再次分成三层,从上到下依次为乏血小板血浆层、富血小板血浆层和红细胞层;
⑤三次离心:使用注射器抽去经过二次离心血液中的最下层,即红细胞层,摇晃离心管,使离心管内的乏血小板血浆层和富血小板血浆层混合均匀,然后将离心管置于离心机中进行离心,离心的转速为3200rpm,离心的时间为5min,使血液分成两层,从上到下依次为乏血小板血浆层和富血小板血浆层;
⑥得到富血小板血浆:抽除步骤⑤中血液上层的乏血小板血浆层,剩下在离心管内的血液即为富血小板血浆,抽除的乏血小板血浆层的体积后,保证留取的富血小板血浆体积是步骤①中外周静脉血体积的1/5。
经验证,本发明所述的压力性损伤用自体富血小板血浆的制备方法和装置,制备装置结构简单,操作方便,在产品的制备过程中,极大程度上降低了血液的污染概率,制备得到的产品中血小板的浓度较高,提取效率较高,经统计,采取本方法制得的富血小板血浆的浓度为离心前全血中血小板浓度的4.4倍,对压力性损伤患者具有较高的治愈率,在临床上具有推广使用价值。
Claims (8)
1.一种治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
①全血采集:使用50ml注射器取患者的外周静脉血6~48ml;
②添加抗凝剂:将步骤①取得的全血添加到含有抗凝剂的离心管内,并摇晃离心管使得抗凝剂和全血混合均匀,抗凝剂和全血的体积比为0.2:8~10,抗凝剂的浓度为12500单位/2ml,所述抗凝剂为肝素、水蛭素或乙二胺四乙酸;
③一次离心:将添加抗凝剂后的全血置于离心机中进行离心,离心的转速为2400~2600rpm,离心的时间为5~10min,使血液基本分成三层,从上到下依次为乏血小板血浆层、富血小板血浆层和红细胞层;
④二次离心:从离心机中取出离心管,使用注射器抽取乏血小板血浆层并注入到红细胞层,使得离心管内的血液分为两层,从上到下依次为富血小板血浆层和混合层,随后将离心管置于离心机进行离心,离心的转速为2700~2900rpm,离心的时间为5~10min,使血液再次分成三层,从上到下依次为乏血小板血浆层、富血小板血浆层和红细胞层;
⑤三次离心:使用注射器抽去经过二次离心血液中的最下层,即红细胞层,摇晃离心管,使离心管内的乏血小板血浆层和富血小板血浆层混合均匀,然后将离心管置于离心机中进行离心,离心的转速为3000~3200rpm,离心的时间为3~5min,使血液分成两层,从上到下依次为乏血小板血浆层和富血小板血浆层;
⑥得到富血小板血浆:抽除步骤⑤中血液上层的乏血小板血浆层,剩下在离心管内的血液即为富血小板血浆。
2.根据权利要求1所述的一种治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备方法,其特征在于:在步骤①中,所述外周静脉血为患者肘部的外周静脉血,且为新鲜的全血。
3.根据权利要求1所述的一种治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备方法,其特征在于:在步骤⑥中,抽除乏血小板血浆层后,保证留取的富血小板血浆体积是步骤①中外周静脉血体积的1/10~1/5。
4.一种治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备装置, 包括离心管,其特征在于:所述离心管包括外管(1)、内管(2)和密封盖(3),外管(1)的内壁和内管(2)的外壁紧密贴合,密封盖(3)与外管(1)及内管(2)的上端密封连接,所述密封盖(3)上设置有注入孔(4)和通气孔(5),注入孔(4)和通气孔(5)的上部均螺接有密封塞(6),所述注入孔(4)的下部设置有可用针头穿透的顶部密封件(7);所述外管(1)的内壁上设置有一体连接的支承部(8),内管(2)的下底面抵在支承部(8)上,内管(2)的底部设置有排液管(9),排液管(9)的下端穿过支承部(8)伸出到支承部(8)的下方,在排液管(9)上设置有简易卡夹(10),所述简易卡夹(10)可方便的夹紧和松开排液管(10),所述内管(2)的侧壁上设置有多个抽液孔(11),抽液孔(11)竖向间隔布置,抽液孔(11)内设置有可用针头穿透的侧壁密封件(12),与侧壁密封件(12)相对应的外管(1)侧壁上设置有开口(13)。
5.根据权利要求4所述的一种治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备装置,其特征在于:所述密封盖(3)与外管(1)的外壁螺纹连接,密封盖(3)的下端设置有上口大下口小的锥形台(14),内管(2)的内壁上设置有与锥形台(14)配合密封的斜坡。
6.根据权利要求4所述的一种治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备装置,其特征在于:所述内管(2)的外壁上设置有竖条形凸起(15),在外管(1)的内壁上设置有与竖条形凸起(15)相配合的凹槽。
7.根据权利要求4所述的一种治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备装置,其特征在于:所述外管(1)的外壁上设置有刻度线(16)。
8.根据权利要求4所述的一种治疗压力性损伤用自体富血小板血浆的制备装置,其特征在于:所述顶部密封件(7)和侧壁密封件(12)为橡胶堵头。
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