CN109294942A - 一株吉氏库特菌及其在拆分1-苯基-1，2-乙二醇中的应用 - Google Patents

一株吉氏库特菌及其在拆分1-苯基-1，2-乙二醇中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一株吉氏库特菌及其在拆分1‑苯基‑1，2‑乙二醇中的应用。该菌株名称为吉氏库特菌(Kurthia gibsonii)SC0312，保藏号为CCTCC NO：M 2017157，该菌株于2017年3月31日保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心。本发明提供的吉氏库特菌可拆分外消旋的1‑苯基‑1，2‑乙二醇制备(S)‑1,2‑苯基乙二醇，具有催化选择性高，产物产率高，转化操作简单，安全，成本低廉，反应条件温和，环境友好的特点，可应用于医药、农药、化妆品、液晶材料等领域，具有良好的应用开发前景。

Description

一株吉氏库特菌及其在拆分1-苯基-1，2-乙二醇中的应用
技术领域
本发明属于生物化工领域，特别涉及一株吉氏库特菌及其在拆分1-苯基-1，2-乙二醇中的应用。
背景技术
手性邻位二醇是有机合成中极为重要的手性合成子，可进一步转化为许多具有生物活性的化合物，因而在医药、农药、化妆品等行业具有非常广阔的应用前景。(R)-1,2-苯基乙二醇是光学活性药物β-肾上腺素阻断剂(R-硝基心定，抗心律失常药)等的重要合成子；(R)-4-氯苯基乙二醇是合成神经保护药物Eliprodil(依利罗地)的关键性手性合成子；(S)-苯乙二醇可以作为液晶材料的手性添加剂，用于缩短液晶面板的响应时间。
用于制备手性1,2-苯基乙二醇的生物法主要包括：环氧化物水解酶水解环氧化物，羰基还原酶还原相应的酮和醇脱氢酶或脂肪酶拆分外消旋的对映体。
在上述主要方法中，应用全细胞动力学拆分外消旋的1-苯基-1，2-乙二醇已经被报道。然而普遍存在反应底物的浓度底的缺点。
发明内容
本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一株吉氏库特菌。
本发明的另一目的在于提供所述吉氏库特菌在拆分1-苯基-1，2-乙二醇中的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现：一株吉氏库特菌，名称为吉氏库特菌(Kurthia gibsonii)SC0312，保藏号为CCTCC NO：M 2017157，该菌株于2017年3月31日保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心(CCTCC)。
所述的吉氏库特菌的16S rDNA序列如下(SEQ ID NO.1)所示：
GAAATGCGGCAGCTATAATGCAAGTCGAGCGAATGACGAGAAGCTTGCTTCTCTGATTTAGCGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGCAACCTGCCCTACAGATCGGGATAACTCAGGGAAACCTGGGCTAATACCGGATAATCCTTCGAATCACATGTTTTGAAGTTGAAAGGCGCTTCGGCGTCACTGTAGGATGGGCCCGCGGTGCATTAGCTAGTTGGTGGGGTAACGGCCTACCAAGGCAACGATGCATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGAAAGTCTGATGGAGCAACGCCGCGTGAGTGATGAAGGTTTTCGGATCGTAAAACTCTGTTGTAAGGGAAGAACAAGTACGTTAGGAAATGAACGTACCTTGACGGTACCTTATTAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGCGCGCAGGTGGTTTCTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCACGGCTCAACCGTGGAGGGTCATTGGAAACTGGGGAACTTGAGTGCAGAAGAGGATAGTGGAATTCCAAGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATTTGGAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGACTGTCTGGTCTGTAACTGACACTGAGGCGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAAACGATGAGTGCTAAGTGTTAGGGGGTTTCCGCCCCTTAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCACTCCCGCCTGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCCGCACAAGCCGGTGGAGCATGTTGTTTAATTCGAAGCACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCCAATGACCGTTCTAGAGATAGGATTTTCCCCTTCGGGGACATTGGTGGACAGGTGGTG。
一种培养所述的吉氏库特菌的方法，具体步骤为：将吉氏库特菌接种于种子培养基中进行培养，再转接到发酵培养基中进行扩增培养。
所述的种子培养基的组成如下：蛋白胨5～10g，酵母粉3～10g，氯化钠5～10g，加蒸馏水至1L，pH 6.0～7.0。
所述的发酵培养基的组成如下：蛋白胨5～10g，酵母粉3～10g，氯化钠5～10g，加蒸馏水至1L，pH 6.0～7.0。
所述的种子培养基中培养的条件为：在30～37℃条件下培养10～12h；优选为：在转速150～180rpm、30～37℃条件下培养10～12h。
所述的扩增培养的条件为：在30～37℃条件下培养12～16h；优选为：在转速150～180rpm、30～37℃条件下培养12～16h。
所述的吉氏库特菌在催化合成光学手性化合物中的应用。
所述的吉氏库特菌在拆分1-苯基-1，2-乙二醇中的应用，该菌株可用于拆分外消旋的1-苯基-1，2-乙二醇制备对映体(S)-1,2-苯基乙二醇。
所述的吉氏库特菌在拆分1-苯基-1，2-乙二醇中的应用，通过如下步骤实现：
(1)将吉氏库特菌进行扩增培养，然后在4℃条件下离心，得到静息细胞；
(2)将静息细胞悬浮于磷酸盐缓冲液中，然后加入底物1-苯基-1，2-乙二醇进行催化反应，得到(S)-1,2-苯基乙二醇。
步骤(1)中所述的扩增培养优选为通过如下步骤实现：将吉氏库特菌接种于种子培养基中进行培养，然后将其转接到发酵培养基中进行扩增培养。
所述的种子培养基或发酵培养基的组成如下：蛋白胨5～10g，酵母粉3～10g，氯化钠5～10g，加蒸馏水至1L，pH 6.0～7.0。
所述的种子培养基中培养的条件为：在30～37℃条件下培养10～12h；优选为：在转速150～180rpm、30～37℃条件下培养10～12h。
所述的扩增培养的条件为：在30～37℃条件下培养12～16h；优选为：在转速150～180rpm、30～37℃条件下培养12～16h。
步骤(2)中所述的反应体系中1-苯基-1，2-乙二醇的终浓度为20～80mM，吉氏库特菌添加量以湿重计为15～30mg/mL。
步骤(2)中所述的磷酸盐缓冲液为pH 5.0～8.5的磷酸缓冲液；优选为pH 6.0～7.0的磷酸缓冲液(100mM)。
所述的吉氏库特菌在拆分1-苯基-1，2-乙二醇中的应用，还包括在步骤(2)中的反应体系中加入丙酮的步骤。
所述的丙酮的添加量按其在反应体系中终浓度为20～90mM添加；优选为按其在反应体系中终浓度为20～30mM添加。
步骤(2)中所述的催化反应的条件为：在25～45℃条件下催化5～22h；优选为：在转速150～180rpm、25～45℃条件下催化11～22h。
所述的吉氏库特菌在医药、农药、化妆品、液晶材料等领域中的应用。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
(1)本发明提供的吉氏库特菌(Kurthia gibsonii SC0312)催化选择性高，产物产率高，转化操作简单，安全，成本低廉，环境友好。
(2)采用本发明的吉氏库特氏菌拆分外消旋的1-苯基-1，2-乙二醇制备S型的1,2-苯基乙二醇，(S)-1,2-苯基乙二醇的得率为44～49％，光学纯度为93～100％。
(3)采用本发明的吉氏库特氏菌菌株催化合成光学纯手性化合物，不仅具有较好的催化效果，所生成的产物光学纯度较高，而且催化剂容易制备、反应条件温和，具有较好的应用开发前景。
附图说明
图1是本发明吉氏库特菌(Kurthia gibsonii)SC0312的系统发育树图。
图2是本发明实施例2中吉氏库特菌(Kurthia gibsonii)SC0312的生长过程中的OD值的变化，以及其在12h，16h，20h，24h氧化生成2-羟基苯乙酮的结果图(图中“v”表示单位菌体催化剂催化生成2-羟基苯乙酮的速率)。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。以下实施例中除特别说明外，均为本领域内的常规实验方法和操作步骤。
本发明中涉及的种子培养基和发酵培养基组成均如下：蛋白胨5～10g，酵母粉3～10g，氯化钠5～10g，加蒸馏水至1L，pH 6.0～7.0。121℃灭菌20min。
实施例1吉氏库特菌(Kurthia gibsonii)SC0312的分子生物学水平的鉴定
本发明的吉氏库特菌(Kurthia gibsonii)SC0312是从广州本地长期被油浸泡的土壤中筛选而得。其中，菌株系统发育树如图1所示，其16S rDNA基因序列测定结果如下：
GAAATGCGGCAGCTATAATGCAAGTCGAGCGAATGACGAGAAGCTTGCTTCTCTGATTTAGCGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGCAACCTGCCCTACAGATCGGGATAACTCAGGGAAACCTGGGCTAATACCGGATAATCCTTCGAATCACATGTTTTGAAGTTGAAAGGCGCTTCGGCGTCACTGTAGGATGGGCCCGCGGTGCATTAGCTAGTTGGTGGGGTAACGGCCTACCAAGGCAACGATGCATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGAAAGTCTGATGGAGCAACGCCGCGTGAGTGATGAAGGTTTTCGGATCGTAAAACTCTGTTGTAAGGGAAGAACAAGTACGTTAGGAAATGAACGTACCTTGACGGTACCTTATTAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGCGCGCAGGTGGTTTCTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCACGGCTCAACCGTGGAGGGTCATTGGAAACTGGGGAACTTGAGTGCAGAAGAGGATAGTGGAATTCCAAGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATTTGGAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGACTGTCTGGTCTGTAACTGACACTGAGGCGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAAACGATGAGTGCTAAGTGTTAGGGGGTTTCCGCCCCTTAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCACTCCCGCCTGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCCGCACAAGCCGGTGGAGCATGTTGTTTAATTCGAAGCACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCCAATGACCGTTCTAGAGATAGGATTTTCCCCTTCGGGGACATTGGTGGACAGGTGGTG。
将16S rRNA基因序列进行Blast结果分析，得到与Kurthia gibsonii同源性达到99％。根据分子生物学鉴定结果，将菌株鉴定为吉氏库特菌(Kurthia gibsonii，简称K.gibsonii)，并命名为吉氏库特菌(Kurthia gibsonii)SC0312。该菌株已保存于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为CCTCC NO：M 2017157，保藏日期为2017年3月31日，保藏地址为中国武汉武汉大学。
实施例2吉氏库特菌(K.gibsonii)SC0312培养过程曲线及催化活力变化
(1)将保存在甘油管中的菌种按0.1％(v/v)接种于50ml的种子培养基中，180rpm、37℃培养12h后，按0.1％(v/v)的比例接种于100ml的发酵培养基中，180rpm、37℃培养0～32h。监测菌种生长过程中的OD(600nm)的变化(每隔4个小时测量一次)。结果如图2所示。
(2)分别将步骤(1)中在发酵培养基中培养了12h，16h，20h，24h的菌在4℃条件下离心，收集菌体得到静息细胞，然后将收获的静息细胞分别重新悬浮于磷酸盐缓冲液(100mM，pH 6.5)中，加入外消旋的1-苯基-1，2-乙二醇(底物1-苯基-1，2-乙二醇终浓度为20mM)，其中湿菌体终浓度为30mg/mL，催化条件为温度为35℃，摇床培养箱转速为180rpm。催化30min取样，监测其氧化生成2-羟基苯乙酮的活力。催化活力的定义为单位菌体(mg)每分钟生成2-羟基苯乙酮的量(umol)。其中2-羟基苯乙酮为是拆分1-苯基-1，2-乙二醇时产生的一个产物，用它的生成速度来评价活性的大小。结果如图2所示，培养12～16h的菌的催化活力最佳。
(3)催化30min取样，分析(S)-1,2-苯基乙二醇(PED)的得率。使用反相高效液相色谱分析2-羟基苯乙酮的浓度，流动相为乙腈与水(含0.1％(v/v)三氟乙酸)＝2：3(体积比)，流速为0.5mL/min，色谱柱：Waters XBridge C18,4.6mm×250mm，波长245nm。
实施例3吉氏库特菌(K.gibsonii)SC0312制备(S)-PED
(1)将保存在甘油管中的菌种按0.1％(v/v)接种于50ml的种子培养基中，180rpm、37℃培养12h后，按0.1％(v/v)的比例接种于100mL的发酵培养基中，180rpm、37℃培养16h。
(2)4℃下离心收集菌体，再重新悬浮于磷酸盐缓冲液中，加入1-苯基-1，2-乙二醇进行催化反应，其催化体系反应介质为磷酸盐缓冲液(100mM，pH 5)，底物1-苯基-1，2-乙二醇终浓度为20mM，湿菌体终浓度为30mg/mL，丙酮终浓度30mM。催化条件为温度为45℃，摇床培养箱转速为180rpm。催化11h后取样，分析(S)-1,2-苯基乙二醇(PED)的得率和对映体过量率。
(3)使用反相高效液相色谱分析(S)-PED的浓度，流动相为乙腈：水(含0.1％(v/v)三氟乙酸)＝2：3(体积比)，流速为0.5mL/min，色谱柱：Waters XBridge C18,4.6mm×250mm，波长215nm。使用正相高效液相色谱分析(S)-PED的过量率，流动相为正己烷：异丙醇＝9：1(体积比)，流速为0.7mL/min，色谱柱为：OB-H,4.6mm×150mm，波长215nm。
催化结束后，(S)-PED的产率为44％，对映体过量率为100％。
实施例4吉氏库特菌(K.gibsonii)SC0312制备(S)-PED
(1)将保存在甘油管中的菌种按0.1％(v/v)接种于50ml的种子培养基中，180rpm、35℃培养10h后，按0.1％(v/v)的比例接种于100mL的发酵培养基中，180rpm、35℃培养14h。
(2)4℃下离心收集菌体，再重新悬浮于磷酸盐缓冲液中，加入1-苯基-1，2-乙二醇进行催化反应，其催化体系反应介质磷酸盐缓冲液(100mM，pH 6)，底物1-苯基-1，2-乙二醇终浓度为50mM，湿菌体终浓度为30mg/mL，丙酮终浓度20mM。催化条件为温度为25℃，摇床培养箱转速为180rpm。催化22h后取样，分析(S)-1,2-苯基乙二醇的得率和对映体过量率。
(3)使用反相高效液相色谱分析(S)-PED的浓度，流动相为乙腈：水(含0.1％(v/v)三氟乙酸)＝2：3(体积比)，流速为0.5mL/min，色谱柱：Waters XBridge C18,4.6mm×250mm，波长215nm。使用正相高效液相色谱分析(S)-PED的过量率，流动相为正己烷：异丙醇＝9：1(体积比)，流速为0.7mL/min，色谱柱为：OB-H,4.6mm×150mm，波长215nm。
催化结束后，(S)-PED的产率为47％，对映体过量率为93％。
实施例5不同吉氏库特菌(K.gibsonii)SC0312菌体添加量制备(S)-PED
(1)将保存在甘油管中的菌种按0.1％(v/v)接种于50ml的种子培养基中，160rpm、30℃培养12h后，按0.1％(v/v)的比例接种于100mL的发酵培养基中，160rpm、30℃培养12h。
(2)4℃下离心收集菌体。催化体系反应介质磷酸盐缓冲液(100mM，pH 8.5)，底物1-苯基-1，2-乙二醇终浓度为20mM，湿菌体终浓度为15mg/mL，丙酮终浓度90mM。催化条件为温度为30℃，摇床培养箱转速为160rpm。催化5h后取样，分析(S)-1,2-苯基乙二醇(PED)的得率和对映体过量率。
(3)使用反相高效液相色谱分析(S)-PED的浓度，流动相为乙腈：水(含0.1％(v/v)三氟乙酸)＝2：3(体积比)，流速为0.5mL/min，色谱柱：Waters XBridge C18,4.6mm×250mm，波长215nm。使用正相高效液相色谱分析(S)-PED的过量率，流动相为正己烷：异丙醇＝9：1(体积比)，流速为0.7mL/min，色谱柱为：OB-H,4.6mm×150mm，波长215nm。
催化结束后，(S)-PED的产率为49％，对映体过量率为98％。
实施例6吉氏库特菌(K.gibsonii)SC0312在不同底物浓度下制备(S)-PED
(1)将保存在甘油管中的菌种按0.1％(v/v)接种于50ml的种子培养基中，180rpm、35℃培养10h后，按0.1％(v/v)的比例接种于100mL的发酵培养基中，180rpm、35℃培养15h。
(2)4℃下离心收集菌体。催化体系反应介质磷酸盐缓冲液(100mM，pH 8)，底物1-苯基-1，2-乙二醇终浓度为80mM，湿菌体终浓度为20mg/mL，丙酮终浓度60mM。催化条件为温度为37℃，摇床培养箱转速为180rpm。催化15h后取样，分析(S)-1,2-苯基乙二醇(PED)的得率和对映体过量率。
(3)使用反相高效液相色谱分析(S)-PED的浓度，流动相为乙腈：水(含0.1％(v/v)三氟乙酸)＝2：3(体积比)，流速为0.5mL/min，色谱柱：Waters XBridge C18,4.6mm×250mm，波长215nm。使用正相高效液相色谱分析(S)-PED的过量率，流动相为正己烷：异丙醇＝9：1(体积比)，流速为0.7mL/min，色谱柱为：OB-H,4.6mm×150mm，波长215nm。
催化结束后，(S)-PED的产率为47％，对映体过量率为94％。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
序列表
<110> 华南理工大学
<120> 一株吉氏库特菌及其在拆分1-苯基-1，2-乙二醇中的应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1028
<212> DNA
<213> Kurthia gibsonii
<220>
<223> 吉氏库特菌（Kurthia gibsonii ）SC0312
<400> 1
gaaatgcggc agctataatg caagtcgagc gaatgacgag aagcttgctt ctctgattta 60
gcggcggacg ggtgagtaac acgtgggcaa cctgccctac agatcgggat aactcaggga 120
aacctgggct aataccggat aatccttcga atcacatgtt ttgaagttga aaggcgcttc 180
ggcgtcactg taggatgggc ccgcggtgca ttagctagtt ggtggggtaa cggcctacca 240
aggcaacgat gcatagccga cctgagaggg tgatcggcca cattgggact gagacacggc 300
ccaaactcct acgggaggca gcagtaggga atcttccaca atggacgaaa gtctgatgga 360
gcaacgccgc gtgagtgatg aaggttttcg gatcgtaaaa ctctgttgta agggaagaac 420
aagtacgtta ggaaatgaac gtaccttgac ggtaccttat tagaaagcca cggctaacta 480
cgtgccagca gccgcggtaa tacgtaggtg gcaagcgttg tccggattta ttgggcgtaa 540
agcgcgcgca ggtggtttct taagtctgat gtgaaagccc acggctcaac cgtggagggt 600
cattggaaac tggggaactt gagtgcagaa gaggatagtg gaattccaag tgtagcggtg 660
aaatgcgtag agatttggag gaacaccagt ggcgaaggcg actgtctggt ctgtaactga 720
cactgaggcg cgaaagcgtg gggagcaaac aggattagat accctggtag tccacgccgt 780
aaaacgatga gtgctaagtg ttagggggtt tccgcccctt agtgctgcag ctaacgcatt 840
aagcactccc gcctggggag tacgaccgca aggttgaaac tcaaaggaat tgacgggggc 900
cccgcacaag ccggtggagc atgttgttta attcgaagca cgcgaagaac cttaccaggt 960
cttgacatcc caatgaccgt tctagagata ggattttccc cttcggggac attggtggac 1020
aggtggtg 1028

Claims (10)

1.一株吉氏库特菌，其特征在于：名称为吉氏库特菌(Kurthia gibsonii)SC0312，保藏号为CCTCC NO：M 2017157，该菌株于2017年3月31日保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心。
2.根据权利要求1所述的吉氏库特菌，其特征在于：所述的吉氏库特菌的16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示。
3.一种培养权利要求1或2所述的吉氏库特菌的方法，其特征在于，具体步骤为：将吉氏库特菌接种于种子培养基中进行培养，再转接到发酵培养基中进行扩增培养；
所述的种子培养基的组成如下：蛋白胨5～10g，酵母粉3～10g，氯化钠5～10g，加蒸馏水至1L，pH 6.0～7.0；
所述的发酵培养基的组成如下：蛋白胨5～10g，酵母粉3～10g，氯化钠5～10g，加蒸馏水至1L，pH 6.0～7.0。
4.根据权利要求3所述的培养所述的吉氏库特菌的方法，其特征在于：
所述的种子培养基中培养的条件为：在30～37℃条件下培养10～12h；
所述的扩增培养的条件为：在30～37℃条件下培养12～16h。
5.权利要求1或2所述的吉氏库特菌在拆分1-苯基-1，2-乙二醇中的应用。
6.根据权利要求5所述的吉氏库特菌在拆分1-苯基-1，2-乙二醇中的应用，其特征在于，通过如下步骤实现：
(1)将吉氏库特菌进行扩增培养，然后在4℃条件下离心，得到静息细胞；
(2)将静息细胞悬浮于磷酸盐缓冲液中，然后加入底物1-苯基-1，2-乙二醇进行催化反应，得到(S)-1-苯基-1,2-乙二醇。
7.根据权利要求6所述的吉氏库特菌在拆分1-苯基-1，2-乙二醇中的应用，其特征在于：还包括在步骤(2)中的反应体系中加入丙酮的步骤；所述的丙酮的添加量按其在反应体系中终浓度为20～90mM添加。
8.根据权利要求6所述的吉氏库特菌在拆分1-苯基-1，2-乙二醇中的应用，其特征在于：
步骤(2)中所述的反应体系中1-苯基-1，2-乙二醇的终浓度为20～80mM，吉氏库特菌添加量以湿重计为15～30mg/mL；
步骤(2)中所述的磷酸盐缓冲液为pH 5.0～8.5的磷酸缓冲液；
步骤(2)中所述的催化反应的条件为：在25～45℃条件下催化5～22h。
9.根据权利要求6所述的吉氏库特菌在拆分1-苯基-1，2-乙二醇中的应用，其特征在于：
步骤(1)中所述的扩增培养通过如下步骤实现：将吉氏库特菌接种于种子培养基中进行培养，然后将其转接到发酵培养基中进行扩增培养；
所述的种子培养基或发酵培养基的组成如下：蛋白胨5～10g，酵母粉3～10g，氯化钠5～10g，加蒸馏水至1L，pH 6.0～7.0；
所述的种子培养基中培养的条件为：在30～37℃条件下培养10～12h；
所述的扩增培养的条件为：在30～37℃条件下培养12～16h。
10.权利要求1或2所述的吉氏库特菌在医药、农药、化妆品或液晶材料中的应用。
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