CN109253978A - 酶标仪定量检测尿液及唾液全碘浓度的检测试剂及检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了酶标仪定量检测尿液及唾液全碘浓度的检测试剂,其特征在于由以下成份组成:(1)、消解液:过硫酸铵溶液[(NH4)2S2O8,Mt=228.2]浓度=0.5~2.0mol/L;(2)、还原剂:亚砷酸溶液[c(H3AsO3)]浓度=0.01~0.2mol/L];(3)、氧化剂:硫酸铈铵溶液[Ce(NH4)4(SO4)4·2H2O,Mr=632.6]浓度=0.01~0.2mol/L;(4)定标液:(碘酸钾溶液KIO3,Mr=214.0)。
Description
技术领域
本发明涉及医学检测领域,尤其涉及酶标仪定量检测尿液及唾液全碘浓度的检测试剂及检测方法。
背景技术
碘的英文名为Iodine,元素符号:I,原子量为126.90447。碘是人体的必需微量元素之一,有“智力元素”之称。健康成人体内的碘的总量约为30mg(20~50mg),其中70%~80%存在于甲状腺,碘是维持人体甲状腺正常功能所必需的元素,但是人体摄入过多的碘也是有害的,日常饮食碘过量会引起“甲亢”。
碘含量的测定方法颇多,常用方法有:砷铈催化分光光度法、离子选择性电极法、X-射线荧光法、阴极溶出伏安法、同位素稀释质谱法、电感耦合等离子体原子发射光谱法和中子活化法等,其中中子活化法(ICP-MS)被认为是测定尿碘的最好方法,但是该法所用的仪器特别昂贵,操作相对比较复杂,不适合大多数基层医院实验室的尿碘监测工作。
过硫酸铵通常用于漂白过程及在分析测定中用做氧化剂,过硫酸铵具有其无毒、无爆、易溶于水(便于制成高浓度溶液提高消化效率)等优点,在用于尿样消化过程中,所用的消化温度较低,不产生有害气体,无需在通风橱中进行消化,所以又具有方便、经济等优点,该法于1996年由Sam.Pino用于尿碘测定。
而对于砷铈催化分光光度法,需要人工定时加样,分光光度计一次读一个结果,人为误差较大,因此虽然经济,但是准确度不高,影响了其应用。
发明内容
本发明公开了酶标仪定量检测尿液及唾液全碘浓度的检测试剂及检测方法,用以解决现有技术的不足。
为解决上述问题,本发明的技术解决方案是:
酶标仪定量检测尿液及唾液全碘浓度的检测试剂,由以下成份组成:
(1)、消解液:过硫酸铵溶液[(NH4)2S2O8,Mt=228.2]浓度=0.5~2.0mol/L;
(2)、还原剂:亚砷酸溶液[c(H3AsO3)]浓度=0.01~0.2mol/L];
(3)、氧化剂:硫酸铈铵溶液[Ce(NH4)4(SO4)4·2H2O,Mr=632.6]浓度=0.01~0.2mol/L;
(4)定标液:(碘酸钾溶液KIO3,Mr=214.0)。
所述的定标液的数量为七份,其浓度分别为:0μg/L、25μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L、400μg/L、600μg/L。
其检测方法,包括以下步骤:
(1)、分别取七份0.1mL的定标液及尿液或唾液(取样前摇匀样品,使沉淀物混悬)加入到12支φ13mm×75的耐高温玻璃试管中,再分别往试管中加入消解液(过硫酸铵溶液)0.4mL,混匀后置于100℃的消化控温加热装置中,消化60min后,取下冷却至20℃~35℃之间的稳定温度环境中。
(2)、将前处理好的反应底物按次序分别从试管中取0.05mL到酶标板相对应反应孔中,各孔加入还原剂(亚砷酸溶液)0.1mL,随后加入氧化剂(硫酸铈铵溶液)0.05mL,充分混匀。
(3)、计时30分钟后,放入酶标仪上读取吸光度值,在上酶标仪前先在酶标仪上设置把好参数如下:检测波长为:405nm、波长拟合类型:线性回归(LLS)、浓度转换:线性、标记:平均值。
(4)、采用回归方程法进行碘浓度c的计算,
所述的回归方程式如下:
c=a+b·lgA或c=a+b·lnA
式中:
c——定标液(及所测样品)中碘的质量浓度,单位为微克每升(μg/L);
A——定标液(或所测样品)测定的吸光度值;
a——标准曲线回归方程的截距;
b——标准曲线回归方程的斜率。
本发明的有益效果是:通过缩短加样时间,延长反应时间,把样品间反应时间差对实验的影响减小到不实验的范围内,准确定量检测的人体尿液及唾液中全碘浓度,能准确定量的浓度为0~600μg/L,本检测方式成本低,检验结构较准确,适合大多数基层医院实验室的尿碘监测工作。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。
本发明酶标仪定量检测尿液及唾液全碘浓度的检测试剂,由以下成份组成:
(1)、消解液:过硫酸铵溶液[(NH4)2S2O8,Mt=228.2]浓度=0.5~2.0mol/L;
(2)、还原剂:亚砷酸溶液[c(H3AsO3)]浓度=0.01~0.2mol/L];
(3)、氧化剂:硫酸铈铵溶液[Ce(NH4)4(SO4)4·2H2O,Mr=632.6]浓度=0.01~0.2mol/L;
(4)定标液:(碘酸钾溶液KIO3,Mr=214.0)。
所述的定标液的数量为七份,其浓度分别为:0μg/L、25μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L、400μg/L、600μg/L。
其检测方法是,包括以下步骤:
(1)、分别取七份0.1mL的定标液及尿液或唾液(取样前摇匀样品,使沉淀物混悬)加入到12支φ13mm×75的耐高温玻璃试管中,再分别往试管中加入消解液(过硫酸铵溶液)0.4mL,混匀后置于100℃的消化控温加热装置中,消化60min后,取下冷却至20℃~35℃之间的稳定温度环境中。
(2)、将前处理好的反应底物按次序分别从试管中取0.05mL到酶标板相对应反应孔中,各孔加入还原剂(亚砷酸溶液)0.1mL,随后加入氧化剂(硫酸铈铵溶液)0.05mL,充分混匀。
(3)、计时30分钟后,放入酶标仪上读取吸光度值,在上酶标仪前先在酶标仪上设置把好参数如下:检测波长为:405nm、波长拟合类型:线性回归(LLS)、浓度转换:线性、标记:平均值。
(4)、采用回归方程法进行碘浓度c的计算,
所述的回归方程式如下:
c=a+b·lgA或c=a+b·lnA
式中:
c——碘标准系列溶液(及所测样品)中碘的质量浓度,单位为微克每升(μg/L);
A——碘标准系列溶液(或所测样品)测定的吸光度值;
a——标准曲线回归方程的截距;
b——标准曲线回归方程的斜率。
在实际应用中,本发明所用方法为砷铈催化分光光度法,样品加入过硫酸铵溶液后在100℃的控温加热装置中消化60分钟,取出冷却至室温,后移取反应底物到酶标板相对应反应孔中,加入亚砷酸溶液混匀,随后加入硫酸铈铵溶液混匀,混匀后置于30℃水浴中温浴(或者在相对恒温的室内)30分钟,取出放入酶标仪上读取吸光度值,该方法的灵敏度为5μg/L,标准曲线的范围为0~600μg/L,在曲线范围内线性关系良好,硫氰酸根、维生素C和维生素B2对分析的潜在影响得以消除,改进后具有准确、可靠、方便快速、经济等优点,特别适合一般实验室对碘缺乏病的监测该方法将国标法优化,改变人工定时加样,分光光度计一次读一个结果,减小实验中的人为误差,通过缩短加样时间,延长反应时间,把样品间反应时间差对实验的影响减小到不实验的范围内,准确定量检测的人体尿液及唾液中全碘浓度,能准确定量的浓度为0~600μg/L。
上述具体实施方式为本发明的优选实施例,并不能对本发明进行限定,其他的任何未背离本发明的技术方案而所做的改变或其它等效的置换方式,都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.酶标仪定量检测尿液及唾液全碘浓度的检测试剂,其特征在于由以下成份组成:
(1)、消解液:过硫酸铵溶液[(NH4)2S2O8,Mt=228.2]浓度=0.5~2.0mol/L;
(2)、还原剂:亚砷酸溶液[c(H3AsO3)]浓度=0.01~0.2mol/L];
(3)、氧化剂:硫酸铈铵溶液[Ce(NH4)4(SO4)4·2H2O,Mr=632.6]浓度=0.01~0.2mol/L;
(4)定标液:(碘酸钾溶液KIO3,Mr=214.0)。
2.根据权利要求1所述的酶标仪定量检测尿液及唾液全碘浓度的检测试剂,其特征在于:所述的定标液的数量为七份,其浓度分别为:0μg/L、25μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L、400μg/L、600μg/L。
3.酶标仪定量检测尿液及唾液全碘浓度的检测方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)、分别取七份0.1mL的定标液及尿液或唾液(取样前摇匀样品,使沉淀物混悬)加入到12支φ13mm×75的耐高温玻璃试管中,再分别往试管中加入消解液(过硫酸铵溶液)0.4mL,混匀后置于100℃的消化控温加热装置中,消化60min后,取下冷却至20℃~35℃之间的稳定温度环境中。
(2)、将前处理好的反应底物按次序分别从试管中取0.05mL到酶标板相对应反应孔中,各孔加入还原剂(亚砷酸溶液)0.1mL,随后加入氧化剂(硫酸铈铵溶液)0.05mL,充分混匀。
(3)、计时30分钟后,放入酶标仪上读取吸光度值,在上酶标仪前先在酶标仪上设置把好参数如下:检测波长为:405nm、波长拟合类型:线性回归(LLS)、浓度转换:线性、标记:平均值。
(4)、采用回归方程法进行碘浓度c的计算。
4.根据权利要求3所述的酶标仪定量检测尿液及唾液全碘浓度的检测方法,其特征在于所述的回归方程式如下:
c=a+b·lgA或c=a+b·lnA
式中:
c——定标液(及所测样品)中碘的质量浓度,单位为微克每升(μg/L);
A——定标液(或所测样品)测定的吸光度值;
a——标准曲线回归方程的截距;
b——标准曲线回归方程的斜率。
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CN112595710A (zh) * | 2020-11-23 | 2021-04-02 | 长沙塞克陆德医疗科技有限公司 | 一种用于血清样本中碘离子的快速检测试剂盒及检测方法 |
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