CN109224062A - 一种新型多肽高效抗菌素及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种新型多肽高效抗菌素，由下列重量份的原料加工而成：苦参2‑5份，八角金盘籽油2‑5份，百部2‑5份，甘草2‑5份，丹皮2‑5份，黄芩2‑5份，糖2‑5，谷胱甘肽0.5‑0.8份，水50‑100份。其制备方法为：S1、将苦参、百部、甘草、丹皮、黄芩、糖和水一起放入密封发酵罐中搅拌均匀；S2、密封发酵，控制发酵的温度为25‑32℃，时间36‑48h；S3、将发酵后的物料进行固液分离，留取发酵液；S4、将所述发酵液与配方量的八角金盘籽油和谷胱甘肽混合均匀，进行沉淀、过滤后得透明液体。该抗生素采用纯中药提取成分，对人体安全无副作用，对于细菌、真菌、病毒等均有特效，适用范围广，增效作用明显，几乎不产生耐药性。

Description

一种新型多肽高效抗菌素及其制备方法
技术领域
本发明属于中药抗菌技术领域 ，具体涉及一种全天然多植物酶解提取的新型多肽高效抗菌素及其制备方法。
背景技术
目前化学抗生素的耐药形势已经十分严峻，细菌对广泛使用的化学抗生素大多有较高的耐药率，根据我国细菌耐药检测网的数据，在国内一百余家医院内检出的细菌中，耐药率都在50%以上，不止如此，绝大多数抗菌药物都不能杀死的超级细菌也陆续出现，研发新型抗生素的速度已经远远赶不上细菌耐药的脚步。
基于目前化学抗生素的这种缺陷及市场上滥用抗生素加速细菌耐药性的现状，本发明提供了一种新型全天然多植物酶解提取的新型多肽高效抗菌素及其制备方法，采用纯中药提取成分，对人体安全无副作用，对于细菌、真菌、病毒等均有特效，适用范围广，增效作用明显，几乎不产生耐药性。
发明内容
本发明的目的之一在于解决现有技术的不足，提供一种新型多肽高效抗菌素。
本发明的目的之二在于解决现有技术的不足，提供一种新型多肽高效抗菌素的制备方法。
一种新型多肽高效抗菌素，所述抗菌素由下列重量份的原料加工而成：
苦参 2-5份，八角金盘籽油2-5份，百部 2-5份，甘草2-5份，丹皮 2-5份，黄芩2-5份，糖2-5，谷胱甘肽0.5-0.8份，水50-100份。
优选的，所述抗菌素由下列重量份的原料加工而成：
苦参3份，八角金盘籽油3份，百部3份，甘草3份，丹皮3份，黄芩3份，糖3份，谷胱甘肽0.6份，水75份。
优选的，所述八角金盘籽油的制备方法如下：
S1：八角金盘籽经拣选、去壳、烘干、粉碎、过筛至40～60目后，得八角金盘籽粉；
S2:按照八角金盘籽粉质量：提取溶剂体积为1：（5-6）g/ml的料液比向八角金盘籽粉中加入提取溶剂；
S3：超声波辅助处理，处理温度40-50℃，处理时间25-40min，然后减压抽滤、浓缩制得八角金盘籽油。
优选的，所述步骤S2中，提取溶剂为正己烷、石油醚、丙酮和无水乙醇中的任意一种，所述步骤S3中，超声波辅助处理的功率220～400W。
优选的，所述谷胱甘肽经不完全氧化处理，处理后氧化型谷胱甘肽占20-50份，余量为还原型谷胱甘肽。
优选的，所述谷胱甘肽不完全氧化处理的处理方法如下：
取还原型谷胱甘肽，于45-55℃溶解，获得50-60g/L的还原型谷胱甘肽溶液，测其pH值为A1；用氢氧化钡调pH至A2，7.0≤A2≤7.1；加入一定量双氧水，边加边搅拌，加完后继续搅拌反应0.2-0.3h；反应结束后，加入一定量二氧化锰，搅拌5-10min，然后充分滤去二氧化锰；用硫酸调节pH至A3，A1-0.05≤A3≤A1；充分滤去硫酸钡沉淀，喷雾干燥，获得不完全氧化处理后的还原型谷胱甘肽。
一种新型多肽高效抗菌素，所述方法步骤如下：
S1、将苦参、百部、甘草、丹皮、黄芩、糖和水一起放入密封发酵罐中搅拌均匀；
S2、密封发酵，控制发酵的温度为25-32℃，时间36-48h；
S3、将发酵后的物料进行固液分离，留取发酵液；
S4、将所述发酵液与配方量的八角金盘籽油和谷胱甘肽混合均匀，进行沉淀、过滤后得透明液体；
所述步骤S2中密封发酵之前还添加发酵液质量0.2-0.3%的抑菌剂，所述抑菌剂为蜂胶粉。
本发明上述技术方案中，各物质具有以下效果
苦参：主要成分有苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱、槐定碱等多种生物碱，以苦参碱、氧化苦参碱含量最高，苦参碱是天然植物广谱抗菌素，具有抗菌抗病毒抗肿瘤抗过敏等多种作用。
百部：富含有大量的生物碱，根含百部碱、对叶百部碱、斯替宁碱、次百部碱、氧化百部碱，对多种至病菌具有抑制杀灭作用，显著的抗过敏作用。
甘草：主要成分有甘草甜素和黄酮类物质是甘草中最重要的生理活性物质，具有抗炎抗过敏作用。
丹皮：主要成分含丹皮酚、牡丹皮原甙、苯甲酸、植物甾醇、鞣质等，对伤寒杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎球菌等均有较强的抗菌作用。
黄芩：主要含有黄酮及其苷类，萜类化合物等成分，具有广谱抑菌作用，对多种真菌病毒等微生物具有较强的抑制作用。
本发明的作用机理：酶促反应理论上是水的1000倍左右，能轻而易举的将菌膜酶解穿孔，使菌核内容物外溢而不可逆的杀灭菌体，多肽的杀菌在于高活性多靶向，使病菌无法产生耐药性。
本发明具有以下有益效果：
1、本发明通过利用发酵工艺从苦参，百部，甘草、丹皮，黄芩中萃取有效成分，并通过沉淀、初滤、精滤的工艺制成透明液体，该透明液体具有消炎抗病菌真菌病毒等作用。
2、本发明通过自然菌种进行发酵，先让自然菌种发酵2天，然后跟枯草芽孢杆菌、酿酒酵母混合后对本发明的原料进行发酵，枯草芽孢杆菌酿酒酵母的添加可以抑制杂菌的生长，增加产品的稳定性。
3、本发明还可以用米面和糖化酶作为碳源起到平稳发酵延长稳定期的作用。
具体实施方式
下面通过具体实施例，对本发明的技术方案作进一步的具体说明。
实施例1：
一种新型多肽高效抗菌素，所述抗菌素由下列重量份的原料加工而成：
苦参 2份，八角金盘籽油2份，百部2份，甘草2份，丹皮 2份，黄芩 2份，糖 2-5份，谷胱甘肽0.5份，水50份。
八角金盘籽油的制备方法如下：
S1：八角金盘籽经拣选、去壳、烘干、粉碎、过筛至40目后，得八角金盘籽粉；
S2:按照八角金盘籽粉质量：提取溶剂体积为1：5g/ml的料液比向八角金盘籽粉中加入提取溶剂；
S3：超声波辅助处理，处理温度40℃，处理时间25min，然后减压抽滤、浓缩制得八角金盘籽油。
所述步骤S2中，提取溶剂为正己烷，所述步骤S3中，超声波辅助处理的功率220W。
所述谷胱甘肽经不完全氧化处理，处理后氧化型谷胱甘肽占20份，余量为还原型谷胱甘肽。
所述谷胱甘肽不完全氧化处理的处理方法如下：取还原型谷胱甘肽，于45℃溶解，获得50g/L的还原型谷胱甘肽溶液，测其pH值为A1；用氢氧化钡调pH至A2=7.0；加入一定量双氧水，边加边搅拌，加完后继续搅拌反应0.2h；反应结束后，加入一定量二氧化锰，搅拌5min，然后充分滤去二氧化锰；用硫酸调节pH至A3=A1-0.05；充分滤去硫酸钡沉淀，喷雾干燥，获得不完全氧化处理后的还原型谷胱甘肽。
实施例1的新型多肽高效抗菌素制备方法步骤如下：
S1、将苦参、百部、甘草、丹皮、黄芩、糖和水一起放入密封发酵罐中搅拌均匀；
S2、密封发酵，控制发酵的温度为25℃，时间48h；
S3、将发酵后的物料进行固液分离，留取发酵液；
S4、将所述发酵液与配方量的八角金盘籽油和谷胱甘肽混合均匀，进行沉淀、过滤后得透明液体。
所述步骤S2中密封发酵之前还添加发酵液质量0.2%的抑菌剂，所述抑菌剂为蜂胶粉。
实施例二：
一种新型多肽高效抗菌素，所述抗菌素由下列重量份的原料加工而成：
苦参3份，八角金盘籽油3份，百部3份，甘草3份，丹皮3份，黄芩3份，糖3份，谷胱甘肽0.65份，水75份。
所述八角金盘籽油的制备方法如下：
S1：八角金盘籽经拣选、去壳、烘干、粉碎、过筛至50目后，得八角金盘籽粉；
S2:按照八角金盘籽粉质量：提取溶剂体积为1：5.5g/ml的料液比向八角金盘籽粉中加入提取溶剂；
S3：超声波辅助处理，处理温度45℃，处理时间30min，然后减压抽滤、浓缩制得八角金盘籽油。
所述步骤S2中，提取溶剂为石油醚，所述步骤S3中，超声波辅助处理的功率310W。
所述谷胱甘肽经不完全氧化处理，处理后氧化型谷胱甘肽占35份，余量为还原型谷胱甘肽。
所述谷胱甘肽不完全氧化处理的处理方法如下：取还原型谷胱甘肽，于50℃溶解，获得55g/L的还原型谷胱甘肽溶液，测其pH值为A1；用氢氧化钡调pH至A2=7.0；加入一定量双氧水，边加边搅拌，加完后继续搅拌反应0.25h；反应结束后，加入一定量二氧化锰，搅拌8min，然后充分滤去二氧化锰；用硫酸调节pH至A3=A1-0.03；充分滤去硫酸钡沉淀，喷雾干燥，获得不完全氧化处理后的还原型谷胱甘肽。
实施例2的新型多肽高效抗菌素制备方法步骤如下：
S1、将苦参、百部、甘草、丹皮、黄芩、糖和水一起放入密封发酵罐中搅拌均匀；
S2、密封发酵，控制发酵的温度为32℃，时间36h；
S3、将发酵后的物料进行固液分离，留取发酵液；
S4、将所述发酵液与配方量的八角金盘籽油和谷胱甘肽混合均匀，进行沉淀、过滤后得透明液体。
所述步骤S2中密封发酵之前还添加发酵液质量0.3%的抑菌剂，所述抑菌剂为蜂胶粉。
实施例三：
一种新型多肽高效抗菌素，所述抗菌素由下列重量份的原料加工而成：
苦参5份，八角金盘籽油5份，百部5份，甘草5份，丹皮5份，黄芩5份，糖5份，谷胱甘肽0.8份，水100份。
所述八角金盘籽油的制备方法如下：
S1：八角金盘籽经拣选、去壳、烘干、粉碎、过筛至60目后，得八角金盘籽粉；
S2:按照八角金盘籽粉质量：提取溶剂体积为1：6g/ml的料液比向八角金盘籽粉中加入提取溶剂；
S3：超声波辅助处理，处理温度50℃，处理时间40min，然后减压抽滤、浓缩制得八角金盘籽油。
所述步骤S2中，提取溶剂为丙酮，所述步骤S3中，超声波辅助处理的功率400W。
所述谷胱甘肽经不完全氧化处理，处理后氧化型谷胱甘肽占50份，余量为还原型谷胱甘肽。
所述谷胱甘肽不完全氧化处理的处理方法如下：取还原型谷胱甘肽，于55℃溶解，获得60g/L的还原型谷胱甘肽溶液，测其pH值为A1；用氢氧化钡调pH至A2=7.1；加入一定量双氧水，边加边搅拌，加完后继续搅拌反应0.3h；反应结束后，加入一定量二氧化锰，搅拌10min，然后充分滤去二氧化锰；用硫酸调节pH至A3=A1；充分滤去硫酸钡沉淀，喷雾干燥，获得不完全氧化处理后的还原型谷胱甘肽。
实施例3的新型多肽高效抗菌素的制备方法步骤如下：
S1、将苦参、百部、甘草、丹皮、黄芩、糖和水一起放入密封发酵罐中搅拌均匀；
S2、密封发酵，控制发酵的温度为30℃，时间42h；
S3、将发酵后的物料进行固液分离，留取发酵液；
S4、将所述发酵液与配方量的八角金盘籽油和谷胱甘肽混合均匀，进行沉淀、过滤后得透明液体。
所述步骤S2中密封发酵之前还添加发酵液质量0.25%的抑菌剂，所述抑菌剂为蜂胶粉。
本发明的新型多肽高效抗菌素的优势： 1、高效，广普，安全，对细菌真菌病毒均有特效。 2、达到或超过新型抗生素和激素一样的水平而没有抗生素和激素的副作用。 3、操作简单，可同时完成伤口清洗，消毒，抗菌消炎，多肽蛋白能促进伤口愈合。 4、可以接触口，鼻，黏膜，可用于皮肤破溃及创伤处，长期大面积使用不产生抗药性。 5、各项检测指标远远优于国家制订的外用药安全标准。 6、解决了抗菌素杀灭致病菌靶向单一的难题。 7、解决了多种顽固性皮肤病没有特效药的难题。
8、解决了致病菌对抗菌素的耐药性及毒副作用的难题。
本发明的新型多肽高效抗菌素的适用范围：
1、适用于大面积烧烫伤，创伤。 2、军用战地救护及灾害中的创伤急救。
3、手癣、足癣、体癣、股癣、花斑癣，灰甲，妇科炎症，皮肤瘙痒，久病卧床的褥疮等。
本发明的新型多肽高效抗菌素的性能检测：
1.抗菌实验
实验菌种样本是芽孢杆菌。
2.灭菌样本
1、含量1%的高浓度二氧化氯溶液。
2、含量0.1%的乳酸依沙吖啶溶液。
3、含量0.1%的天然抗菌素溶液。
3.实验步骤
1、在ABC3个玻璃器皿中各加入10毫升芽孢杆菌培养液。
2、在A瓶中加入0.5毫升含量1%的高浓度二氧化氯溶液。
3、在B瓶中加入0.5毫升含量0.1%的乳酸依沙吖啶溶液。
4、在C瓶中加入0.5毫升含量0.1%的天然抗菌素液。
5、将ABC3个瓶子在30℃恒温箱中30分钟后在高倍电子显微镜下检测。
4.检测结果
A瓶中的芽孢杆菌成活率100%，灭菌无效。
B瓶中的芽孢杆菌成活率100%，灭菌无效。
C瓶中的芽孢杆菌成活率20%。
结论，天然抗菌素能高效杀灭芽孢杆菌，灭菌效率远高于二氧化氯和乳酸依沙吖啶。
5.抗真菌实验
在二个玻璃器皿中加入已接种真菌的培养基，一个放入0.1克具有代表性的抗真菌药复方酮康唑软膏，另一个放入0.1克多肽抗菌素，合上盖子放入恒温箱，温度30℃，时间48h，检查菌斑抑制面积。
复方酮康唑菌斑抑制面积为直径1.5厘米，在此面积内无真菌感染。
多肽抗菌素菌斑抑制面积为直径3厘米，在此面积内无真菌感染。
结论，多肽抗菌素的抑制真菌面积是复方酮康唑软膏的4倍左右。
6.抗耐药性实验步骤
1、在同等条件下观察复方酮康唑和天然抗菌素的抗耐药能力。
2、选择复方酮康唑作为实验对比样本是其抗真菌领域的代表性药物，而多肽抗菌素是广谱抗菌剂。
3、首先确定复方酮康唑和天然抗菌素的有效杀菌剂量和效率。
4、在AB二个玻璃器皿中各加入已接种真菌的液体培养基10毫升，将0.5毫升复方酮康唑软膏加入A瓶中摇匀，将0.5毫升天然抗菌素加入B瓶中摇匀，合上盖子放入恒温箱，温度30℃，时间30分钟。
5、30分钟后在高倍电子显微镜下检测A瓶复方酮康唑灭菌率为60%，B瓶天然抗菌素灭菌率为85%。
7.抗耐药性实验
1、在AB二个玻璃器皿中各加入已接种真菌的液体培养基10毫升。
2、将0.1毫升复方酮康唑软膏加入A瓶中，将0.1毫升天然抗菌素加入B瓶中，每过24小时各加0.1克，直至第5天合计各加0.5毫升。
3、5天后在高倍电子显微镜下检测A瓶灭菌率为30%，B瓶灭菌率为80%。
结论，当复方酮康唑5天后恢复到0.5毫升剂量时，真菌已明显产生耐药性，而天然抗菌素的增效作用明显，几乎不产生耐药性。
以上所述的实施例只是本发明的一种较佳的方案，并非对本发明作任何形式上的限制，在不超出权利要求所记载的技术方案的前提下还有其它的变体及改型。

Claims (8)

1.一种新型多肽高效抗菌素，其特征在于，所述抗菌素由下列重量份的原料加工而成：
苦参 2-5份，八角金盘籽油2-5份，百部 2-5份，甘草2-5份，丹皮 2-5份，黄芩2-5份，糖2-5，谷胱甘肽0.5-0.8份，水50-100份。
2.根据权利要求1所述的一种新型多肽高效抗菌素，其特征在于，所述抗菌素由下列重量份的原料加工而成：
苦参3份，八角金盘籽油3份，百部3份，甘草3份，丹皮3份，黄芩3份，糖3份，谷胱甘肽0.6份，水75份。
3.根据权利要求1或2所述的一种新型多肽高效抗菌素，其特征在于：所述八角金盘籽油的制备方法如下：
S1：八角金盘籽经拣选、去壳、烘干、粉碎、过筛至40～60目后，得八角金盘籽粉；
S2:按照八角金盘籽粉质量：提取溶剂体积为1：（5-6）g/ml的料液比向八角金盘籽粉中加入提取溶剂；
S3：超声波辅助处理，处理温度40-50℃，处理时间25-40min，然后减压抽滤、浓缩制得八角金盘籽油。
4.根据权利要求3所述的一种新型多肽高效抗菌素，其特征在于，所述步骤S2中，提取溶剂为正己烷、石油醚、丙酮和无水乙醇中的任意一种，所述步骤S3中，超声波辅助处理的功率220～400W。
5.根据权利要求1所述的一种新型多肽高效抗菌素，其特征在于：
所述谷胱甘肽经不完全氧化处理，处理后氧化型谷胱甘肽占20-50份，余量为还原型谷胱甘肽。
6.根据权利要求5所述的一种新型多肽高效抗菌素，其特征在于：所述谷胱甘肽不完全氧化处理的处理方法如下：取还原型谷胱甘肽，于45-55℃溶解，获得50-60g/L的还原型谷胱甘肽溶液，测其pH值为A1；用氢氧化钡调pH至A2，7.0≤A2≤7.1；加入一定量双氧水，边加边搅拌，加完后继续搅拌反应0.2-0.3h；反应结束后，加入一定量二氧化锰，搅拌5-10min，然后充分滤去二氧化锰；用硫酸调节pH至A3，A1-0.05≤A3≤A1；充分滤去硫酸钡沉淀，喷雾干燥，获得不完全氧化处理后的还原型谷胱甘肽。
7.一种权利要求1-6任意一种新型多肽高效抗菌素的制备方法，其特征在于：所述方法步骤如下：
S1、将苦参、百部、甘草、丹皮、黄芩、糖和水一起放入密封发酵罐中搅拌均匀；
S2、密封发酵，控制发酵的温度为25-32℃，时间36-48h；
S3、将发酵后的物料进行固液分离，留取发酵液；
S4、将所述发酵液与配方量的八角金盘籽油和谷胱甘肽混合均匀，进行沉淀、过滤后得透明液体。
8.根据权利要求7所述新型多肽高效抗菌素的制备方法，其特征在于：所述步骤S2中密封发酵之前还添加发酵液质量0.2-0.3%的抑菌剂，所述抑菌剂为蜂胶粉。
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