CN109187962A - 血液样本免疫层析诊断试纸条、试剂盒和检测方法 - Google Patents

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Abstract

一种血液样本免疫层析诊断试纸条、试剂盒和检测方法，其中通过设置双向流动的血液样本免疫层析诊断试纸条的吸水垫以及隔离膜的结构，一方面，能够加快血液样本免疫层析诊断试纸条的检测速度，另一方面，使样品在反向流动时，不再与质控线的抗原抗体反应，进一步提高检测灵敏度。

Description

血液样本免疫层析诊断试纸条、试剂盒和检测方法
技术领域
本发明涉及免疫测定法，尤其是涉及一种血液样本免疫层析诊断试纸条以及试剂盒。
背景技术
免疫标记技术指用荧光素、放射性同位素、酶、铁蛋白、胶体金及化学（或生物）发光剂等作为示踪物，标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应，并借助于荧光显微镜、射线测量仪、酶标检测仪、电子显微镜和发光免疫测定仪等精密仪器，应用各种液相和固相免疫分析方法，对体液中的半抗原、抗原或抗体进行定性和定量测定的方法。
免疫层析技术基本原理就是通过毛细作用使待检样品溶液在层析条上迁移，迁移过程中层析材料上包被的检测物（抗原或抗体）对待检样品进行亲和特异识别，进行免疫结合，使待检物被富集在层析条的特定区域，然后通过酶反应或直观显色标记物(如胶体金)而得到肉眼可见的反应复合物，待包被检测物消耗完全，剩余游离标记物会越过检测区，最后迁移至质控区再与另一检测物免疫结合形成直观显色。
胶体金免疫层析是建立在酶联免疫吸附试验、乳胶凝集试验、单克隆抗体技术和免疫胶体金标记技术基础上的以胶体金为标记物，利用特异的抗原抗体反应来放大反应，通过直接观察就可以判定结果的新技术。该技术具有简单、快速、准确和无污染等优点，在临床医学检测、激素检测、食品安全检测、药物残留和毒品快速检测诸多诊断领域迅速发展。
胶体金免疫层析诊断试纸条是依据胶体金免疫层析技术制成的一种检测工具，不通过专业检测仪器直接通过肉眼判断结果，根据颜色即可判断阴性或阳性。现有技术中，胶体金免疫层析诊断试纸条通常采用单向层析的方式，样品沿着吸水垫方向，层析到吸水垫过程中与抗原抗体反应，呈现T线，C线，未反应的物质由于吸水作用继续层析至吸水纸。单向层析反应时间较短，检测灵敏度较低。
201110225454.5的发明专利提出了一种往返式免疫层析诊断试纸条，其通过在样品入口侧设置被可抽出防水隔离膜隔离的吸水纸，在检测样品层析至质控线后，将防水隔离膜抽出，样品进行反向层析，样品中的抗原或者抗体与反应线上的抗体或者抗原再次反应，从而增加检测的灵敏度。
但是201110225454.5发明中为了使样品能够反向层析，仅能够在试纸的样品入口侧设置吸水纸，而不能够在试纸的相对于样品入口侧的另一侧设置吸水纸，导致样品在正向层析时速度较慢，导致检测时间花费较长；同时，样品在反向层析时，将再次与质控线的抗原抗体反应，导致反向层析到反应线上的样品减少。
发明内容
本发明作为201110225454.5的改进，将其全文引用于此，提出了一种血液样本免疫层析诊断试纸条以及试剂盒，能够解决现有技术的上述问题。
作为本发明的一个方面，提供一种血液样本免疫层析诊断试纸条，包括：基底，样品垫，胶体金垫，硝酸纤维膜以及第一吸水垫；所述样品垫用于输入检测血液样本，其设置于基底一侧；所述胶体金垫设置于所述样品端的末端，具有胶体金标记的抗原或者抗体；硝酸纤维膜，其设置于所述胶体金垫的一端，设置检测线和质控线，分别包被抗体或者抗原，用于指示血液样品的检测结果；第一吸水垫，其设置于基底的另一侧，末端与硝酸纤维膜搭接；还包括第二吸水垫以及防水隔离膜；所述第二吸水垫设置于所述第一吸水垫与所述基底之间，从基底的一端延伸到硝酸纤维膜的与该基地的一端相对的另一端；所述防水隔离膜为非固定隔离膜，能够从试纸条中抽出，其设置于所述第一吸水垫与所述第二吸水垫之间，略长于所述第二吸水垫的长度，检测时所述防水隔离膜在所述质控线显色后，将所述防水隔离膜从试纸条中抽出。
优选的，所述第二吸水垫的吸液量大于第一吸水垫的吸收液量。
作为本发明的另外一个方面，提供一种血液样本免疫层析诊断试纸条，包括：基底，样品垫，胶体金垫，硝酸纤维膜以及第一吸水垫；所述样品垫用于输入检测血液样本，其设置于基底一侧；所述胶体金垫设置于所述样品端的末端，具有胶体金标记的抗原或者抗体；硝酸纤维膜，其设置于所述胶体金垫的一端，设置检测线和质控线，分别包被抗体或者抗原，用于指示血液样品的检测结果；第一吸水垫，其设置于基底的另一侧，末端与硝酸纤维膜搭接；还包括：第二吸水垫，第一防水隔离膜，以及第二防水隔离膜；所述第二吸水垫设置于所述第一吸水垫与所述基底之间，从基底的一端延伸到略长于硝酸纤维膜的检测线的位置；所述第一防水隔离膜为非固定隔离膜，能够从试纸条中抽出，其设置于所述第一吸水垫与所述第二吸水垫之间，在基底上的长度略长于所述第一吸水垫的长度；所述第二防水隔离膜为固定隔离膜，其设置于所述第二吸水垫与所述硝酸纤维膜之间，其上设置开口区域，所述开口区域对应于检测线位置；所述开口区域上设置可抽离隔离膜元件。
优选的，检测时，所述第一防水隔离膜在所述质控线显色后，将所述第一防水隔离膜从试纸条中抽出。
优选的，所述第二吸水垫的吸液量大于第一吸水垫的吸收液量。
优选的，所述可抽离隔离膜元件能够从水平面上垂直于所述第一防水隔离膜抽出方向的方向抽出。
作为本发明的另外一个方面，提供一种血液样本免疫层析诊断试纸条的检测方法，包括如下步骤：（1）将血液样品加样于样品垫；（2）样品经过胶体金垫，硝酸纤维膜后被吸附到第一吸水垫；（3）在质控线显色后，将第一防水隔离膜从试纸条中抽出；（4）样品从第一吸水垫进一步释放到第二吸水垫；（5）将可抽离隔离膜元件从试纸条抽离；（6）观察检测线以及质控线的颜色，确定血液样品的检测结果。
作为本发明的另外一个方面，提供一种血液样本免疫层析诊断试剂盒，其包括上述血液样本免疫层析诊断试纸条。
附图说明
图1是本发明一个实施例的血液样本免疫层析诊断试纸条。
图2是本发明一个优选实施例的血液样本免疫层析诊断试纸条。
具体实施方式
为了更清楚地说明本发明的技术方案，下面将使用实施例对本发明进行简单地介绍，显而易见地，下面描述中的仅仅是本发明的一个实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些实施例获取其他的技术方案，也属于本发明的公开范围。
第一实施例
本发明第一实施例的血液样本免疫层析诊断试纸条，参见图1，包括基底10，样品垫20，胶体金垫30，硝酸纤维膜40，第一吸水垫50，防水隔离膜60以及第二吸水垫70。基底10为在塑料制粘合片，可以使用例如PVC制备基底10。血液样本免疫层析诊断试纸条的各构成部位的一部分或全部在基底10的粘合面上紧贴。
样品垫20设置于基底10的一端，其上设置样品输入口，用于输入检测血液样本。血液样本可以是全血、血清、血浆等。样品垫20可以是例如玻璃纤维、 纤维素、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚氨酯、聚醋酸酯、醋酸纤维素、 硝化纤维、尼龙、棉布等材料制备的。
胶体金垫30设置于样品垫20的末端，由玻璃纤维组成。胶体金垫30具有胶体金标记的针对分析物的抗体或者抗原。
硝酸纤维膜40，其设置于胶体金垫30的一端，用于将检测的血液样品进行层析。硝酸纤维膜40设置上检测线41和质控线42，分别包被抗体或者抗原，用于指示血液样品的检测结果。
第一吸水垫50，其设置于基底10的另一侧，末端与硝酸纤维膜40搭接。第一吸水垫50可以使用吸水纸制备，用于引导样品在硝酸纤维膜40的层析。
第二吸水垫70设置于第一吸水垫50与基底10之间，从基底10的一端延伸到硝酸纤维膜40的与该基底10的一端相对的另一端。第二吸收垫70用于在血液样品层析至质控线42后，将其进行反向层析。第二吸水垫70可以使用与第一吸水垫50相同的材料。优选的，第二吸水垫70可以使用吸水能力大于第一吸水垫50的材料。
防水隔离膜60其设置于第一吸水垫50与第二吸水垫60之间，其一端伸出基底10外，另一端在基底10上的长度略长于第二吸水垫70的长度。防水隔离膜60为非固定隔离膜，能够从试纸条中抽出，检测时在血液样品层析至质控线42后，将第一防水隔离膜60从试纸条中抽出，从而使样本反向移动到检测线41。
本实施例的血液样本免疫层析诊断试纸条的检测方法，包括如下步骤：（1）将血液样品加样于样品垫；（2）样品经过胶体金垫，硝酸纤维膜后被吸附到第一吸水垫；（3）在质控线显色后，将防水隔离膜从试纸条中抽出；（4）样品从第一吸水垫进一步释放到第二吸水垫；（5）观察检测线以及质控线的颜色，确定血液样品的检测结果。
通过本发明上述实施例，能够使双向流动的血液样本免疫层析诊断试纸条,在正向流动时也能够通过吸水纸引导，从而加快血液样本免疫层析诊断试纸条的检测速度。
第二实施例
本发明优选的实施例，参见图2，包括基底10，样品垫20，胶体金垫30，硝酸纤维膜40，第一吸水垫50，第一防水隔离膜60，第二吸水垫70以及第二防水隔离膜80。
基底10为在塑料制粘合片，可以使用例如PVC制备基底10。血液样本免疫层析诊断试纸条的各构成部位的一部分或全部在基底10的粘合面上紧贴。
样品垫20设置于基底10的一端，其上设置样品输入口，用于输入检测血液样本。血液样本可以是全血、血清、血浆等。样品垫20可以是例如玻璃纤维、 纤维素、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚氨酯、聚醋酸酯、醋酸纤维素、 硝化纤维、尼龙、棉布等材料制备的。
胶体金垫30设置于样品垫20的末端，由玻璃纤维组成。胶体金垫30具有胶体金标记的针对分析物的抗体或者抗原。
硝酸纤维膜40，其设置于胶体金垫30的一端，用于将检测的血液样品进行层析。硝酸纤维膜40设置上检测线41和质控线42，分别包被抗体或者抗原，用于指示血液样品的检测结果。
第一吸水垫50，其设置于基底10的另一侧，末端与硝酸纤维膜40搭接。第一吸水垫50可以使用吸水纸制备，用于引导样品在硝酸纤维膜40的层析。
第二吸水垫70设置于第一吸水垫50与基底10之间，从基底10的一端延伸到略长于硝酸纤维膜40的检测线41的位置。第二吸收垫70用于在血液样品层析至质控线42后，将其进行反向层析。第二吸水垫70可以使用与第一吸水垫50相同的材料。优选的，第二吸水垫70可以使用吸水能力大于第一吸水垫50的材料。
第一防水隔离膜60其设置于第一吸水垫50与第二吸水垫60之间，其一端伸出基底10外，另一端在基底10上的长度略长于第一吸水垫50的长度。防水隔离膜60为非固定隔离膜，能够从试纸条中抽出，从而使样本反向移动到检测线41。
第二防水隔离膜80为固定隔离膜，其于第一防水隔离膜60相邻设置，位于第二吸水垫70与硝酸纤维膜40之间。第二防水隔离膜80在基底10上延伸的长度略长于第二吸水垫70。
第二防水隔离膜80上设置开口区域81，开口区域81对应于检测线41的位置。开口区域81上设置可抽离隔离膜元件82。可抽离隔离膜元件82能够从水平面上垂直于第一防水隔离膜60抽出方向的方向抽出。
本实施例的血液样本免疫层析诊断试纸条的检测方法，包括如下步骤：（1）将血液样品加样于样品垫；（2）样品经过胶体金垫，硝酸纤维膜后被吸附到第一吸水垫；（3）在质控线显色后，将第一防水隔离膜从试纸条中抽出；（4）样品从第一吸水垫进一步释放到第二吸水垫；（5）将可抽离隔离膜元件从试纸条抽离；（6）观察检测线以及质控线的颜色，确定血液样品的检测结果。
通过本发明优选实施例中的设置，一方面，能够加快血液样本免疫层析诊断试纸条的检测速度，另一方面，使样品在反向流动时，不再与质控线的抗原抗体反应，进一步提高检测灵敏度。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用于限定本发明的保护范围。本发明附图中的相对尺寸仅是为了显示需要而设置，并非对其进行具体限定。例如本发明中防水隔离膜的厚度可以相对于其他元件可以是很薄的。本发明中描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均包含在本发明的保护范围内。

Claims (5)

1.一种血液样本免疫层析诊断试纸条，包括：基底，样品垫，胶体金垫，硝酸纤维膜以及第一吸水垫；所述样品垫用于输入检测血液样本，其设置于基底一侧；所述胶体金垫设置于所述样品端的末端，具有胶体金标记的抗原或者抗体；硝酸纤维膜，其设置于所述胶体金垫的一端，设置检测线和质控线，分别包被抗体或者抗原，用于指示血液样品的检测结果；第一吸水垫，其设置于基底的另一侧，末端与硝酸纤维膜搭接；其特征在于还包括：第二吸水垫，第一防水隔离膜，以及第二防水隔离膜；所述第二吸水垫设置于所述第一吸水垫与所述基底之间，从基底的一端延伸到略长于硝酸纤维膜的检测线的位置；所述第一防水隔离膜为非固定隔离膜，能够从试纸条中抽出，其设置于所述第一吸水垫与所述第二吸水垫之间，在基底上的长度略长于所述第一吸水垫的长度；所述第二防水隔离膜为固定隔离膜，其设置于所述第二吸水垫与所述硝酸纤维膜之间，其上设置开口区域，所述开口区域对应于检测线位置；所述开口区域上设置可抽离隔离膜元件。
2.根据权利要求1所述的血液样本免疫层析诊断试纸条，其特征在于：检测时，所述第一防水隔离膜在所述质控线显色后，将所述第一防水隔离膜从试纸条中抽出。
3.根据权利要求1所述的血液样本免疫层析诊断试纸条，其特征在于：所述可抽离隔离膜元件能够从水平面上垂直于所述第一防水隔离膜抽出方向的方向抽出。
4.一种血液样本免疫层析诊断试纸条的检测方法，包括如下步骤：（1）将血液样品加样于样品垫；（2）样品经过胶体金垫，硝酸纤维膜后被吸附到第一吸水垫；（3）在质控线显色后，将第一防水隔离膜从试纸条中抽出；（4）样品从第一吸水垫进一步释放到第二吸水垫；（5）将可抽离隔离膜元件从试纸条抽离；（6）观察检测线以及质控线的颜色，确定血液样品的检测结果。
5.一种血液样本免疫层析诊断试剂盒，其包括上述权利要求之一所述的血液样本免疫层析诊断试纸条。
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