CN109170363A - 一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料，属于水产饲料加工技术领域，该饲料利用蚯蚓小分子多肽提取物代替鱼粉作为主要动物蛋白源，再配合啤酒废酵母值得的酵母风味物质和诱食剂，对罗非鱼起到诱食作用，从味觉、嗅觉和视觉上刺激罗非鱼的摄食反应，达到高效诱食、改善摄食率的目的；上述酵母风味物质制备用控制剂中含有乙酰乙酸乙酯和泛酸钙。本发明所提供的一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料，其风味饱满圆滑，适口性优良，诱食效果佳，营养健康，毒副作用少，提高饲料利用效率和消化吸收速度，该饲料的制备方法具有耗时短、完成度和效率高、成本低、活性成分得率高的优点。

Description

一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料

技术领域

本发明属于水产饲料加工技术领域，具体涉及一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料。

背景技术

罗非鱼具有生长快、繁殖力强、食性杂、抗病力强等特点，适合于淡水或咸淡水的池塘、网箱、流水池高密度集约化养殖，并且罗非鱼出肉率高，产品价格适中，受到国内外消费者的欢迎，因此成为被联合国粮农组织(FAO)推荐向全世界推广养殖的优质鱼类，也是我国主导水产养殖品种之一，同时我国也是全球最大的罗非鱼出口国。2014年，全球罗非鱼产量达到545万吨，其中中国罗非鱼产量为169.8万吨。随着罗非鱼养殖业的快速发展，对饲料蛋白源的需求量不断增加。目前，高植物蛋白饲料在罗非鱼养殖中的应用越来越广泛。但高植物蛋白饲料适口性普遍较差，影响罗非鱼的生长和生理功能，如何通过添加适宜的促摄食物质改善罗非鱼的摄食和生长性能，并探讨其作用机制，在罗非鱼养殖中具有重要的理论意义和实际应用价值。

摄食是鱼类获得能量的唯一途径，鱼类通过摄食为个体生存、生长、发育、繁殖提供物质能量基础。在渔业生产中，摄食量不足是限制鱼类生产性能及基因潜力发挥的最主要因素之一。鱼粉因其具有较高的营养价值和良好的适口性，是水产饲料中应用最广泛的蛋白源，但随着饲料业、养殖业的日以发展，对鱼粉的需求量也越来越大，使得鱼粉供应日趋紧张，价格上升。而且由于海洋渔业资源逐渐衰竭、环境保护和饲料成本等多方面的原因，鱼粉产量在逐年降低，而养殖需求量却在不断上升，在水产养殖行业形成了尖锐的矛盾，在未来的水产饲料中，鱼粉的使用将逐渐受到限制，寻找其它质优廉价的动植物蛋白源部分或完全替代水产动物饲料中鱼粉已成为降低养殖成本、建立可持续水产动物养殖产业的关键环节之一。植物蛋白来源广泛，价格低廉，产量稳定，是较为理想的替代蛋白源。但是，植物替代蛋白含有一些败风味物质和抗营养因子，造成适口性差、消化吸收利用率低等问题。适口性差直接导致水产动物摄食不积极或拒食，饲料在水中时间过长，既造成饲料的浪费，同时也造成了养殖水体的污染。鱼类摄食量低，造成能量的摄入不足，会带来生长性能低，抗病力差，肉品质下降等一系列问题。因此，改善饲料的适口性，促进水产动物摄食，提高饲料利用率，降低饲料浪费和污染显得尤为重要。

现有技术如授权公告号为CN103250875B的中国发明专利，公开了一种罗非鱼专用配合饲料，由以下重量份的原料制成：鱼粉3～8份、豆粕15～30份、菜粕15～30份、棉粕10～15份、DDGS10～15份、面粉10～20份、玉米10～12份、沸石粉4～8份、豆油1～3份、鱼油1～2份、罗非鱼专用饲料添加剂0.6～1.2份，能保证罗非鱼的正常生长，提高鱼肉品质，但其中大量使用的菜粕、棉粕和豆粕因含有芥子甙、芥酸、植酸和单宁等多种抗营养因子，使饲料的适口性和营养价值降低，从而不能更好地提高罗非鱼的摄食量，影响罗非鱼的营养摄取。

发明内容

本发明的目的在于提供一种风味饱满圆滑、适口性优良、诱食效果佳、营养健康、毒副作用少、提高饲料利用效率和消化吸收速度、能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料，该饲料的制备方法具有耗时短、完成度和效率高、成本低、活性成分得率高的优点。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料，该饲料中含有酵母风味物质，上述酵母风味物质制备用控制剂中含有乙酰乙酸乙酯和泛酸钙。该配合饲料中加入的酵母风味物质含有多种风味化合物，有良好的诱食效应，能促进水产动物的摄食和消化吸收，饲料的利用率高，降低饲料系数，减少饲料成本，既是饲料资源又是优质的诱食剂。

作为优选，上述控制剂的添加量为酵母自溶液重量的0.47～0.77％，其中乙酰乙酸乙酯和泛酸钙的重量比为3:1.7～2.3，乙酰乙酸乙酯和泛酸钙加入反应体系使得糖类基团位阻效应减小，加速糖苷键的断裂，释放羰基的同时，也将羰基α碳原子上活泼的氢钝化，以此降低1,2-烯醇化反应的发生率，使得产物中含有的对细胞具有毒性作用的羰甲基糠醛的含量降低，以降低最终产物对细胞的毒性，另外金属离子和乙酰乙酸乙酯能与氨基和羧基发生螯合，从而对美拉德反应产生一定的抑制效果，使得反应控制在适度的范围内，避免反应过度而影响酵母风味物质的品质和口感，产物适口性增加，也减少了营养物质的流失。

作为优选，酵母风味物质是以啤酒废酵母的自溶液作为氨基酸来源，进行美拉德反应制得。啤酒废酵母作为啤酒生产的副产品常常被当做工业废料而排放于江河中，但是啤酒废酵母的蛋白含量高，还含有丰富的B族维生素和矿物质，且啤酒废酵母中的核苷酸是风味增强剂，所谓风味增强剂是指其本身并不具有风味，但它的存在可以使体系的风味得到加强，因此啤酒废酵母经美拉德反应产生乙基香兰素、香兰素、茴香醚、特丁基对苯二酚和乙基麦芽酚等多种风味化合物，对鱼类具有明显的诱食效果，到达提高摄食量，促进水产品生长的作用。

进一步优选，酵母自溶液制备步骤为：将啤酒废酵母过筛后，送入碳酸氢钠溶液浸泡，离心得到酵母泥，然后加入酶制剂反应，灭酶，离心得到自溶液。为获得啤酒废酵母中的游离氨基酸，必须将其进行破壁处理，采用生物破壁中的自溶来获取氨基酸溶液，是一种很缓和的方法且没有有毒物质产生，酵母自溶是指酵母细胞中退化的酶被激活后溶解菌体，将大分子物质水解成小分子物质，同时啤酒废酵母中含有酒花以及一些代谢产物吸附其中，使其有明显苦味，因此自溶进行前需对其进行脱苦处理。

再进一步优选，上述酶制剂的添加量为酵母泥重量份的0.4～0.6％，酶活力为1.8～2.2×10⁴U/g，酶类是胰蛋白酶、胃蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、氨肽酶、羧肽酶、木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶、菠萝蛋白酶中的至少一种，最优选的为木瓜蛋白酶。木瓜蛋白酶是一种含疏基(-SH)肽链内切酶，具有蛋白酶和酯酶的活性，有较广泛的特异性，对动植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有较强的水解能力，外加木瓜蛋白酶可强烈的破坏啤酒废酵母细胞壁上的甘露聚糖，增强了自溶程度，对自溶起促进作用。

进一步优选，美拉德反应步骤为：向自溶液中加入木糖、L-半胱氨酸盐酸盐、硫胺素、控制剂和维生素C，在温度为100～125℃、pH为7～9的条件下反应1～1.5h，即得酵母风味物质。反应过程中会产生极其复杂多样的具有不同气味的中间物质，包括酮类、醛类和杂环化合物等，使得产物具有多种风味和色泽，其中一些风味物质具有肉类风味，使得饲料风味更加浓郁多样，对淡水养殖的肉食性、杂食性鱼类尤其是罗非鱼具有优良的诱食效果。

作为优选，配合饲料中含有以下重量份的原料：鱼粉0～3份、酵母风味物质3～5份、蚯蚓小分子多肽提取物10～12份、豆粕3～5份、面粉8～12份、磷脂油3～5份、磷酸氢钙1～2份、膨润土3～8份、复合维生素0.5～1份、复合矿物盐0.5～1份、诱食剂2～5份。该配合饲料富含蛋白质、多肽、游离氨基酸等，并具有一定的脂肪酸、核苷酸和生物碱等物质，以此减少现有饲料配比中鱼粉的含量而不影响营养价值，且能散发特殊香味，颜色明亮，从味觉、嗅觉和视觉上刺激鱼类的摄食反应，强烈吸引鱼类积极摄食饲料，有效地提高饲料利用效率和消化吸收速度，促进生长，提高成活率，具有高效诱食、改善摄食率的作用。

进一步优选，蚯蚓小分子多肽提取物是相对分子质量3000以下的小分子多肽和氨基酸，其中游离氨基酸总含量为25～46％。对蚯蚓的酶解液进行再处理，制备获得蚯蚓小分子多肽提取物，去除了蚯蚓自身所带的腥味，得到微黄色、带香味的粉末，不仅具有均衡的营养物质和诱食效应，而且具有较好的抗氧化活性。

进一步优选，制备蚯蚓小分子多肽提取物方法为：将经过破碎处理的蚯蚓加入促溶剂混匀，进行酶解反应，然后灭活并离心，取离心上清液经分子膜截留和冷冻干燥，即得。利用生物组织细胞中自身存在的各种水解酶对细胞组织进行分解，反应条件温和，能量消耗较少，氨基酸不被破坏，也不产生消旋作用，且效率高，在营养成分的保留上具有不可比拟的优点。

进一步优选，诱食剂中含有以下重量份的组分：2～5份核苷酸、2～4份含硫化合物、3～5份复合氨基酸、2～3份色素和1～1.5份抗氧化剂。再进一步优选，上述核苷酸是选自肌苷酸、腺苷二磷酸、腺苷三磷酸中的至少一种，上述含硫化合物是选自二甲亚砜、大蒜素、二甲基-β-丙酸噻亭中的至少一种，上述复合氨基酸是选自甘氨酸、牛磺酸、丙氨酸、谷氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、精氨酸、缬氨酸和谷胱甘肽中的至少两种，上述色素是虾黄质或维生素B2，上述抗氧化剂是选自维生素E、维生素C磷酸酯、乙氧基喹啉中的至少一种。

作为优选，低鱼粉配合饲料制备步骤如下：

步骤1：按重量份取4～8份啤酒废酵母过80～100目筛后，送入浓度为0.5％的碳酸氢钠溶液浸泡25～35min，再以4000～5000r/min离心8～10min得到酵母泥，然后以重量比1:3～4加入蒸馏水搅拌均匀，再加入酶制剂在40～55℃反应2～4h，然后沸水浴酶灭活15～25min，再以4000～5000r/min离心8～10min得到自溶液；

步骤2：向自溶液中加入木糖、L-半胱氨酸盐酸盐、硫胺素、控制剂和维生素C，在温度为100～125℃、pH为7～9的条件下反应1～1.5h，即得酵母风味物质，其中自溶液、木糖、L-半胱氨酸盐酸盐、硫胺素和维生素C的重量比为9～11:5～6:1:2～3:1，初始反应体系水分含量控制在10～15％；

步骤3：按重量份取10～15份蚯蚓洗净，置于清水中吐沙后，将蚯蚓送入高速捣碎机中捣碎，得到蚯蚓原液，按重量比1:1.5～2加入纯净水，然后在温度为30～60℃、pH为3～8的条件下自溶酶解3～7h，然后沸水浴酶灭活5～10min，再经8000～12000r/min的转速离心8～10min，上清液即为自溶酶解液，再将自溶酶解液先经相对分子质量为3000的超滤膜进行超滤，滤液再经相对分子质量为300的纳滤膜进行截留，即得截留液，将截留液冷冻干燥后，即得蚯蚓小分子多肽提取物；

步骤4：将鱼粉、酵母风味物质、蚯蚓小分子多肽提取物、豆粕、面粉、磷酸氢钙、膨润土、多维多矿预混物、诱食剂投入料仓混合后，送入调制器中，通入95～105℃蒸汽进行调制2～4min，然后在115～135℃的温度下进行膨化，再在85～95℃下干燥10～15min，得到颗粒状膨化产物；

步骤5：将磷脂油均匀地喷在膨化产物上，冷却，即得低鱼粉配合饲料。

本发明的有益效果为：

1)本发明饲料中加入啤酒废酵母酶解后经美拉德反应所得产物，使得饲料的风味物质更加饱满圆滑，香气浓郁天然，适口性也大大增加，产生的风味物质对水产动物的摄食和生长非常有益，营养健康，毒副作用少，同时做到了废物利用；

2)本发明中利用蚯蚓制备小分子肽提取物，其反应时间短，水解完成度和得率高，能将蛋白质水解成多肽和游离氨基酸，利用其香味刺激水产养殖动物摄食的同时，更易被消化吸收，增加了饲料利用率，降低了养殖成本；

3)本发明所制饲料富含蛋白质、多肽、游离氨基酸等，并具有一定的脂肪酸、核苷酸和生物碱等物质，以此减少现有饲料配比中鱼粉的含量而不影响营养价值，且能散发特殊香味，从味觉、嗅觉和视觉上刺激水产动物的摄食反应，强烈吸引水产养殖动物积极摄食，降低饲料系数，减少饲料成本，提高成活率，达到高效诱食、改善摄食率的作用；

4)本发明中配合饲料的制备方法操作简单易控制，反应条件温和，反应耗时短，反应效率和产率高，完全保留了营养成分和活性成分，达到高效诱食目的的同时，降低了生产成本，提高了经济效益。

本发明采用了上述技术方案提供一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料，弥补了现有技术的不足，设计合理，操作方便。

具体实施方式

以下结合具体实施方式对本发明的技术方案作进一步详细描述：

实施例1：

一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料，该饲料中含有酵母风味物质，上述酵母风味物质制备用控制剂中含有乙酰乙酸乙酯和泛酸钙。该配合饲料中加入的酵母风味物质含有多种风味化合物，有良好的诱食效应，能促进水产动物的摄食和消化吸收，饲料的利用率高，降低饲料系数，减少饲料成本，既是饲料资源又是优质的诱食剂。

上述控制剂的添加量为酵母自溶液重量的0.48％，其中乙酰乙酸乙酯和泛酸钙的重量比为3:1.7，乙酰乙酸乙酯和泛酸钙加入反应体系使得糖类基团位阻效应减小，加速糖苷键的断裂，释放羰基的同时，也将羰基α碳原子上活泼的氢钝化，以此降低1,2-烯醇化反应的发生率，使得产物中含有的对细胞具有毒性作用的羰甲基糠醛的含量降低，以降低最终产物对细胞的毒性，另外金属离子和乙酰乙酸乙酯能与氨基和羧基发生螯合，从而对美拉德反应产生一定的抑制效果，使得反应控制在适度的范围内，避免反应过度而影响酵母风味物质的品质和口感，产物适口性增加，也减少了营养物质的流失。

酵母风味物质是以啤酒废酵母的自溶液作为氨基酸来源，进行美拉德反应制得。啤酒废酵母作为啤酒生产的副产品常常被当做工业废料而排放于江河中，但是啤酒废酵母的蛋白含量高，还含有丰富的B族维生素和矿物质，且啤酒废酵母中的核苷酸是风味增强剂，所谓风味增强剂是指其本身并不具有风味，但它的存在可以使体系的风味得到加强，因此啤酒废酵母经美拉德反应产生乙基香兰素、香兰素、茴香醚、特丁基对苯二酚和乙基麦芽酚等多种风味化合物，对鱼类具有明显的诱食效果，到达提高摄食量，促进水产品生长的作用。

酵母自溶液制备步骤为：将啤酒废酵母过筛后，送入碳酸氢钠溶液浸泡，离心得到酵母泥，然后加入酶制剂反应，灭酶，离心得到自溶液。为获得啤酒废酵母中的游离氨基酸，必须将其进行破壁处理，采用生物破壁中的自溶来获取氨基酸溶液，是一种很缓和的方法且没有有毒物质产生，酵母自溶是指酵母细胞中退化的酶被激活后溶解菌体，将大分子物质水解成小分子物质，同时啤酒废酵母中含有酒花以及一些代谢产物吸附其中，使其有明显苦味，因此自溶进行前需对其进行脱苦处理。

上述酶制剂的添加量为酵母泥重量份的0.4％，酶活力为1.8×10⁴U/g，酶为木瓜蛋白酶。木瓜蛋白酶是一种含疏基(-SH)肽链内切酶，具有蛋白酶和酯酶的活性，有较广泛的特异性，对动植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有较强的水解能力，外加木瓜蛋白酶可强烈的破坏啤酒废酵母细胞壁上的甘露聚糖，增强了自溶程度，对自溶起促进作用。

美拉德反应步骤为：向自溶液中加入木糖、L-半胱氨酸盐酸盐、硫胺素、控制剂和维生素C，在温度为100℃、pH为9的条件下反应1.5h，即得酵母风味物质。反应过程中会产生极其复杂多样的具有不同气味的中间物质，包括酮类、醛类和杂环化合物等，使得产物具有多种风味和色泽，其中一些风味物质具有肉类风味，使得饲料风味更加浓郁多样，对淡水养殖的肉食性、杂食性鱼类尤其是罗非鱼具有优良的诱食效果。

配合饲料中含有以下重量份的原料：鱼粉0.5份、酵母风味物质3份、蚯蚓小分子多肽提取物10.5份、豆粕3份、面粉8份、磷脂油3.5份、磷酸氢钙1份、膨润土3份、复合维生素0.5份、复合矿物盐0.5份、诱食剂2.5份。该配合饲料富含蛋白质、多肽、游离氨基酸等，并具有一定的脂肪酸、核苷酸和生物碱等物质，以此减少现有饲料配比中鱼粉的含量而不影响营养价值，且能散发特殊香味，颜色明亮，从味觉、嗅觉和视觉上刺激鱼类的摄食反应，强烈吸引鱼类积极摄食饲料，有效地提高饲料利用效率和消化吸收速度，促进生长，提高成活率，具有高效诱食、改善摄食率的作用。

蚯蚓小分子多肽提取物是相对分子质量3000以下的小分子多肽和氨基酸，其中游离氨基酸总含量为36.94％，其中赖氨酸2.53％、组氨酸2.01％、甘氨酸2.07％、苯丙氨酸2.78％、苏氨酸3.05％、异亮氨酸2.79％、亮氨酸5.36％、缬氨酸2.28％。对蚯蚓的酶解液进行再处理，制备获得蚯蚓小分子多肽提取物，去除了蚯蚓自身所带的腥味，得到微黄色、带香味的粉末，不仅具有均衡的营养物质和诱食效应，而且具有较好的抗氧化活性。

制备蚯蚓小分子多肽提取物方法为：将经过破碎处理的蚯蚓加入促溶剂混匀，进行酶解反应，然后灭活并离心，取离心上清液经分子膜截留和冷冻干燥，即得。利用生物组织细胞中自身存在的各种水解酶对细胞组织进行分解，反应条件温和，能量消耗较少，氨基酸不被破坏，也不产生消旋作用，且效率高，在营养成分的保留上具有不可比拟的优点。

诱食剂中含有以下重量份的组分：2份核苷酸、2.5份含硫化合物、3份复合氨基酸、2.5份色素和1.5份抗氧化剂，上述核苷酸是肌苷酸，含硫化合物是二甲基-β-丙酸噻亭，复合氨基酸是甘氨酸、牛磺酸、丙氨酸和谷胱甘肽等比例混合物，色素是虾黄质，抗氧化剂是维生素C磷酸酯。

复合矿物盐和复合维生素可以选择市售的复合矿物盐和复合维生素，也可以分别按重量比取49mgMgSO₄·7H₂O，0.7mgCuSO₄·H₂O，35mgFeSO₄·7H₂O，0.58mgCoCl₂·6H₂O，2.5mgMnSO₄·H₂O，0.06mgNa₂SeO₃，2.1mgZnSO₄·H₂O，0.06mgKI，以纤维素填充到1g，制成复合矿物盐；按重量比取2.4×10⁷IU维生素D，1.1×10⁷IU维生素A，10.28mg维生素E，0.5mg维生素K，0.19mg生物素，0.5mg叶酸，22mg肌醇，1.5mg烟酸，4.5mg泛酸钙，63mg维生素C，5mg维生素B₁，15mg维生素B₂，3.3mg维生素B₆，以纤维素填充到1g，制成复合维生素。

低鱼粉配合饲料制备步骤具体如下：

步骤1：按重量份取4份啤酒废酵母过80目筛后，送入浓度为0.5％的碳酸氢钠溶液浸泡25min，再以4000r/min离心8min得到酵母泥，然后以重量比1:3加入蒸馏水搅拌均匀，再加入酶制剂在43℃反应2h，然后沸水浴酶灭活15min，再以4000r/min离心8min得到自溶液；

步骤2：向自溶液中加入木糖、L-半胱氨酸盐酸盐、硫胺素、控制剂和维生素C，在温度为100℃、pH为9的条件下反应1.5h，即得酵母风味物质，其中自溶液、木糖、L-半胱氨酸盐酸盐、硫胺素和维生素C的重量比为9:5.5:1:2:1，初始反应体系水分含量控制在10％；

步骤3：按重量份取10份蚯蚓洗净，置于清水中吐沙后，将蚯蚓送入高速捣碎机中捣碎，得到蚯蚓原液，按重量比1:1.5加入纯净水，然后在温度为35℃、pH为3的条件下自溶酶解6.5h，然后沸水浴酶灭活5min，再经8000r/min的转速离心8min，上清液即为自溶酶解液，再将自溶酶解液先经相对分子质量为3000的超滤膜进行超滤，滤液再经相对分子质量为300的纳滤膜进行截留，即得截留液，将截留液冷冻干燥后，即得蚯蚓小分子多肽提取物；

步骤4：将鱼粉、酵母风味物质、蚯蚓小分子多肽提取物、豆粕、面粉、磷酸氢钙、膨润土、多维多矿预混物、诱食剂投入料仓混合后，送入调制器中，通入95℃蒸汽进行调制2min，然后在115℃的温度下进行膨化，再在85℃下干燥10min，得到颗粒状膨化产物；

步骤5：将磷脂油均匀地喷在膨化产物上，冷却，即得低鱼粉配合饲料。

实施例2：

一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料，该饲料中含有以下重量份的原料：鱼粉0份、酵母风味物质5份、蚯蚓小分子多肽提取物12份、豆粕4份、面粉10份、磷脂油5份、磷酸氢钙1份、膨润土5份、复合维生素0.7份、复合矿物盐0.7份、诱食剂4份。

一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料的制备步骤具体如下：

步骤1：按重量份取7份啤酒废酵母过100目筛后，送入浓度为0.5％的碳酸氢钠溶液浸泡30min，再以5000r/min离心10min得到酵母泥，然后以重量比1:4加入蒸馏水搅拌均匀，再加入酶制剂在53℃反应2.5h，然后沸水浴酶灭活20min，再以5000r/min离心10min得到自溶液，上述酶制剂的添加量为酵母泥重量的0.45％，酶为木瓜蛋白酶，酶活力为2.2×10⁴U/g；

步骤2：向自溶液中加入木糖、L-半胱氨酸盐酸盐、硫胺素、控制剂和维生素C，在温度为120℃、pH为8的条件下反应1h，即得酵母风味物质，其中自溶液、木糖、L-半胱氨酸盐酸盐、硫胺素和维生素C的重量比为11:6:1:3:1，初始反应体系水分含量控制在12％，上述控制剂的添加量为自溶液重量的0.72％。其中乙酰乙酸乙酯和泛酸钙的重量比为3:2.1；

步骤3：按重量份取14份蚯蚓洗净，置于清水中吐沙后，将蚯蚓送入高速捣碎机中捣碎，得到蚯蚓原液，按重量比1:2加入纯净水，然后在温度为45℃、pH为7的条件下自溶酶解5.5h，然后沸水浴酶灭活10min，再经10000r/min的转速离心10min，上清液即为自溶酶解液，再将自溶酶解液先经相对分子质量为3000的超滤膜进行超滤，滤液再经相对分子质量为300的纳滤膜进行截留，即得截留液，将截留液冷冻干燥后，即得蚯蚓小分子多肽提取物；

步骤4：将鱼粉、酵母风味物质、蚯蚓小分子多肽提取物、豆粕、面粉、磷酸氢钙、膨润土、多维多矿预混物、诱食剂投入料仓混合后，送入调制器中，通入105℃蒸汽进行调制3min，然后在125℃的温度下进行膨化，再在90℃下干燥15min，得到颗粒状膨化产物；

步骤5：将磷脂油均匀地喷在膨化产物上，冷却，即得低鱼粉配合饲料。

上述诱食剂中含有以下重量份的组分：4份核苷酸、3份含硫化合物、5份复合氨基酸、3份色素和1.5份抗氧化剂，上述核苷酸是肌苷酸，含硫化合物是二甲基-β-丙酸噻亭，复合氨基酸是甘氨酸、牛磺酸、丙氨酸和谷胱甘肽等比例混合物，色素是虾黄质，抗氧化剂是维生素C磷酸酯。

上述复合矿物盐和复合维生素可以选择市售的复合矿物盐和复合维生素，也可以分别按重量比取49mgMgSO₄·7H₂O，0.7mgCuSO₄·H₂O，35mgFeSO₄·7H₂O，0.58mgCoCl₂·6H₂O，2.5mgMnSO₄·H₂O，0.06mgNa₂SeO₃，2.1mgZnSO₄·H₂O，0.06mgKI，以纤维素填充到1g，制成复合矿物盐；按重量比取2.4×10⁷IU维生素D，1.1×10⁷IU维生素A，10.28mg维生素E，0.5mg维生素K，0.19mg生物素，0.5mg叶酸，22mg肌醇，1.5mg烟酸，4.5mg泛酸钙，63mg维生素C，5mg维生素B₁，15mg维生素B₂，3.3mg维生素B₆，以纤维素填充到1g，制成复合维生素。

上述蚯蚓小分子多肽提取物中游离氨基酸总含量为39.48％，其中赖氨酸2.67％、组氨酸2.38％、甘氨酸2.76％、苯丙氨酸3.14％、苏氨酸3.05％、异亮氨酸3.28％、亮氨酸6.23％、缬氨酸2.88％。

实施例3：

一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料的制备方法中，对步骤3即蚯蚓小分子多肽提取物的制备步骤进行优化，具体优化措施如下：按重量份取14份蚯蚓洗净，置于清水中吐沙后，将蚯蚓送入高速捣碎机中捣碎，得到蚯蚓原液，然后向蚯蚓原液中加入重量占比为0.65％的促溶剂混匀，再按重量比1:2加入纯净水，然后在温度为45℃、pH为7的条件下自溶酶解5.5h，然后沸水浴酶灭活10min，再经10000r/min的转速离心10min，上清液即为自溶酶解液，再将自溶酶解液先经相对分子质量为3000的超滤膜进行超滤，滤液再经相对分子质量为300的纳滤膜进行截留，即得截留液，将截留液冷冻干燥后，即得蚯蚓小分子多肽提取物，上述促溶剂中含有薄荷醇和月桂氮酮，其重量比为3:1.8，薄荷脑和月桂氮酮在向细胞内渗透的过程中引起细胞膜上的脂质与蛋白结构变性，并能选择性地刺激细胞黏膜的冷觉感受器，使细胞膜产生收缩，导致细胞膜上的孔隙扩大，由此促进细胞内容物外溢，从而加速蚯蚓细胞自溶，缩短生产时间，提高了细胞内容物的得率，同时由于细胞内容物中同样发生脂质与蛋白结构变性，使得蛋白质不再受脂肪包裹，减少了脂肪对它的束缚，因而易被酶解，使蛋白质水解完成度得以提高，降低生产成本。

上述所制蚯蚓小分子多肽提取物中游离氨基酸总含量为44.35％，其中赖氨酸3.35％、组氨酸2.63％、甘氨酸2.74％、苯丙氨酸3.25％、苏氨酸3.58％、异亮氨酸3.73％、亮氨酸6.94％、缬氨酸3.77％。

本实施例是在实施例2的基础上进行优化，所制配合饲料用原料及其它制备步骤与实施例2一致，制得低鱼粉配合饲料。

对比例：

一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料的制备方法中，其中步骤2即酵母自溶液的美拉德方法步骤如下：向自溶液中加入木糖、L-半胱氨酸盐酸盐、硫胺素、控制剂和维生素C，在温度为120℃、pH为8的条件下反应1h，即得酵母风味物质，其中自溶液、木糖、L-半胱氨酸盐酸盐、硫胺素和维生素C的重量比为11:6:1:3:1，初始反应体系水分含量控制在12％，上述控制剂的添加量为自溶液重量的0％。

本对比例是在实施例2的基础上进行对比试验，所制配合饲料用原料及其它制备步骤与实施例2一致，制得低鱼粉配合饲料。

实施例4：

低鱼粉配合饲料饲养试验

在某淡水养殖生产基地，以实施例1～3所制配合饲料作为试验组1～3，对比例所制配合饲料作为对照组，以某市售水产配合饲料为空白组，随机选择10个塘口，分为2组平行，放养相同数量、初始体重无显著差异的罗非鱼鱼苗后，日投喂3～4次，日投饵量为鱼体重的2～3％，并根据天气和吃食情况，作适量的调整。养殖过程中加强全程管理，半个月后，采集样品分析，结果如下表1、2。

表1低鱼粉配合饲料对罗非鱼摄食量及生长性能的影响

表2低鱼粉配合饲料对罗非鱼肌肉营养成分的影响

	试验组1	试验组2	试验组3	对照组	空白组
						粗蛋白/％	17.18	17.16	17.71	16.97	16.99
粗脂肪/％	1.39	1.22	1.39	1.15	1.24
						粗灰分/％	1.18	1.18	1.20	1.19	1.21
水分/％	79.71	80.14	79.41	80.59	79.94

由表1可知，试验组在末均重和摄食量上显著优于对照组和空白组，在特定生长率、蛋白质效率和饲料效率上，试验组和对照组的差异较小，但都显著优于空白组，而肥满度、脏体比、肝体比和存活率上，各组别各有优劣，总体差距并不明显；由表2可知，试验组在粗蛋白上都高于对照组和空白组，尤其是试验组3的粗蛋白含量显著优于其他，说明优化后的饲料对罗非鱼肉质有增益效果，其他营养成分各组差异并不明显。由试验结果表明，本发明中所制低鱼粉配合饲料即使减少现有饲料配比中鱼粉的含量也不影响营养价值，且从味觉、嗅觉和视觉上刺激罗非鱼的摄食反应，强烈吸引其积极摄食，降低饲料系数，减少饲料成本，提高成活率，达到高效诱食、改善摄食率的目的。

上述实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，故在此不再详细赘述。

以上实施方式仅用于说明本发明，而并非对本发明的限制，本领域的普通技术人员，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，还可以做出各种变化和变型。因此，所有等同的技术方案也属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由权利要求限定。

Claims (10)

1.一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料，其特征在于：饲料中含有酵母风味物质，所述酵母风味物质制备用控制剂中含有乙酰乙酸乙酯和泛酸钙。

2.根据权利要求1所述的一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料，其特征在于：所述酵母风味物质是以啤酒废酵母的自溶液作为氨基酸来源，进行美拉德反应制得。

3.根据权利要求2所述的一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料，其特征在于：所述自溶液制备步骤为：将啤酒废酵母过筛后，送入碳酸氢钠溶液浸泡，离心得到酵母泥，然后加入酶制剂反应，灭酶，离心得到自溶液。

4.根据权利要求2所述的一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料，其特征在于：所述美拉德反应步骤为：向自溶液中加入木糖、L-半胱氨酸盐酸盐、硫胺素、控制剂和维生素C，在温度为100~125℃、pH为7~9的条件下反应1~1.5h，即得酵母风味物质。

5.根据权利要求1或4所述的一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料，其特征在于：所述控制剂的添加量为自溶液重量的0.47~0.77%。

6.根据权利要求1所述的一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料，其特征在于：所述配合饲料中含有以下重量份的原料：鱼粉0~3份、酵母风味物质3~5份、蚯蚓小分子多肽提取物10~12份、豆粕3~5份、面粉8~12份、磷脂油3~5份、磷酸氢钙1~2份、膨润土3~8份、复合维生素0.5~1份、复合矿物盐0.5~1份、诱食剂2~5份。

7.根据权利要求6所述的一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料，其特征在于：所述蚯蚓小分子多肽提取物是相对分子质量3000以下的小分子多肽和氨基酸，其中游离氨基酸总含量为35~46%。

8.根据权利要求6或7所述的一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料，其特征在于：所述制备蚯蚓小分子多肽提取物方法为：将经过破碎处理的蚯蚓进行酶解反应，然后灭活并离心，取离心上清液经分子膜截留和冷冻干燥，即得。

9.根据权利要求6所述的一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料，其特征在于：所述诱食剂中含有核苷酸、含硫化合物、复合氨基酸、色素和抗氧化剂。

10.根据权利要求1~9任一项所述的一种能够改善养殖罗非鱼摄食率的低鱼粉配合饲料，其特征在于：所述配合饲料制备步骤为：

步骤1：制备酵母自溶液；

步骤2：取酵母自溶液进行美拉德反应，制备酵母风味物质；

步骤3：制备蚯蚓小分子多肽提取物；

步骤4：将鱼粉、酵母风味物质、蚯蚓小分子多肽提取物、豆粕、面粉、磷酸氢钙、膨润土、多维多矿预混物、诱食剂投入料仓混合后，调制，膨化，再干燥，得到颗粒状膨化产物；

步骤5：将磷脂油均匀地喷在膨化产物上，冷却，即得低鱼粉配合饲料。