CN109169531A - 适于大豆食心虫防治的黏虫赤眼蜂驯化繁育方法及防治应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种适于大豆食心虫防治的黏虫赤眼蜂驯化繁育方法及防治应用，通过松毛虫赤眼蜂与黏虫赤眼蜂共寄生柞蚕卵，实施黏虫赤眼蜂对柞蚕卵的适应性驯化，松毛虫赤眼蜂可咬破柞蚕卵壳形成出蜂孔，使得更多的黏虫赤眼蜂个体得以出蜂并继续在柞蚕卵上产下后代，黏虫赤眼蜂能够保持数量较为稳定的种群，使得多代持续驯化得以实现，逐步优选获得对柞蚕卵具有更高适应性的黏虫赤眼蜂品系，进而实现黏虫赤眼蜂在柞蚕卵上的独立、连续繁育，为柞蚕卵规模化繁育黏虫赤眼蜂奠定了技术基础。本发明方法繁育出的黏虫赤眼蜂，在大豆食心虫卵上具有更高的寄生效率，尤其适用于大豆食心虫的生物防治。
Description
技术领域
本发明涉及赤眼蜂繁育及其防治应用，特别是一种适于大豆食心虫防治的黏虫赤眼蜂驯化繁育方法，及该黏虫赤眼蜂在大豆食心虫的防治应用。
背景技术
柞蚕(Antheraea pernyi)是一种大型鳞翅目昆虫，柞蚕卵可以被用来繁育赤眼蜂。与米蛾(Corcyra cephalonica)卵等其它常用的中间寄主卵相比，柞蚕卵体型较大，单个柞蚕卵内可寄生超过百头赤眼蜂，而米蛾卵内通常仅能寄生1头赤眼蜂，因此柞蚕卵特别适合开展赤眼蜂的规模化繁育，可大幅提升生产效率，降低生产成本。
但目前，仅有松毛虫赤眼蜂(Trichogramma dendrolimi)和少量螟黄赤眼蜂(Trichogramma chilonis)品系使用柞蚕卵成功开展了规模化繁育，其余多数优势赤眼蜂种类并不寄生柞蚕卵，或是寄生柞蚕卵后不能够顺利穿破卵壳羽化出蜂。
现有研究显示，黏虫赤眼蜂(Trichogramma leucaniae)是防治东北地区大豆食心虫的优势蜂种，可寄生柞蚕卵，并且少数子代蜂完成发育后能咬破柞蚕卵羽化出蜂，但其寄生率、羽化率过低，不足以实施规模化繁育。
由于黏虫赤眼蜂可寄生柞蚕卵，子代蜂也有极少量个体可咬破寄主卵壳出蜂，因此传统的驯化筛选工作是围绕能够成功出蜂的子代个体进行。这一筛选方式抛弃了大多数黏虫赤眼蜂个体，极大地降低了筛选对象的多样性；且由于成功出蜂的黏虫赤眼蜂个体很少，逐代繁育筛选的过程中种群中断的风险很高，难以获得可在柞蚕卵上连续繁育的黏虫赤眼蜂种群。
发明内容
发明目的：针对上述问题，本发明的目的是提供一种黏虫赤眼蜂的驯化繁育方法，以柞蚕卵为寄主，通过实施黏虫赤眼蜂对柞蚕卵的适应性驯化，进而繁育出黏虫赤眼蜂，并且这种黏虫赤眼蜂尤其适于大豆食心虫的防治。
技术方案：一种适于大豆食心虫防治的黏虫赤眼蜂驯化繁育方法，包括以下步骤：
步骤100：将经物种鉴定后的黏虫赤眼蜂原始种群使用米蛾卵进行保育，而后羽化出蜂；
步骤200：取柞蚕卵，同时准备松毛虫赤眼蜂蜂种，在环境温度23～26℃、空气相对湿度80±5％、光周期0L:24D条件下，按照松毛虫赤眼蜂蜂种∶黏虫赤眼蜂∶柞蚕卵的数量比为1∶4∶1～1∶6∶1，接蜂24～48小时；
步骤300：子代赤眼蜂完成发育后自行咬破柞蚕卵壳出蜂，对于子代松毛虫赤眼蜂雌蜂占比不低于90％的情况下，从中分离出子代黏虫赤眼蜂并重复步骤200，使子代黏虫赤眼蜂继续重新与松毛虫赤眼蜂蜂种共寄生柞蚕卵进行驯化，对于子代松毛虫赤眼蜂雌蜂占比低于90％的情况下，从中分离出子代黏虫赤眼蜂单独寄生柞蚕卵；
步骤400：对于步骤300中分离出子代黏虫赤眼蜂单独寄生柞蚕卵，初次寄生柞蚕卵时，按照蜂卵的数量比为5∶1～7∶1提供柞蚕卵，此后逐代继续繁育时按照亲代寄主卵与子代新鲜卵的卵卵数量比为1∶3～1∶5提供柞蚕卵，在环境温度26±1℃、空气相对湿度75±5％、光周期0L:24D条件下，接蜂持续24～48小时，而后除去蜂种，子代蜂在环境温度26±1℃、空气相对湿度75±5％、光周期14L:10D～16L:8D条件下开始发育；
步骤500：对于步骤400中单独寄生柞蚕卵繁育出的子代黏虫赤眼蜂，进行逐代抽检，根据寄生率、羽化率、单卵蜂数、雌性比指标评估蜂种质量，
在不符合繁育预期时，使用复壮寄主卵繁育1代进行复壮，复壮后若蜂种质量符合要求则再单独寄生柞蚕卵繁育，若蜂种质量仍不符合要求则从步骤200重新开始；在符合繁育预期时，得到繁育出的黏虫赤眼蜂，并继续在柞蚕卵上繁育。
最佳的，步骤200、步骤400中，空气相对湿度均为75±3％。
最佳的，步骤400中，初次寄生柞蚕卵时，按照蜂卵的数量比为6∶1提供柞蚕卵，此后逐代继续繁育时按照亲代寄主卵与子代新鲜卵的卵卵数量比为1∶3提供柞蚕卵。
最佳的，步骤500中，在符合繁育预期并连续繁育至第5代时，使用复壮寄主卵繁育1代进行复壮，再单独寄生柞蚕卵繁育。
最佳的，步骤200中，取用的柞蚕卵，需清洗后去除杂色卵粒、干瘪或外形不规则的卵粒。
进一步的，步骤300中，通过体色区分子代松毛虫赤眼蜂雌蜂。
进一步的，所述复壮寄主卵为大豆食心虫卵或米蛾卵。
一种上述的方法繁育出的黏虫赤眼蜂的防治应用，将繁育出的黏虫赤眼蜂应用于大豆食心虫的防治。
进一步的，防治应用是将繁育出的黏虫赤眼蜂在田间释放，每亩放蜂量8000～10000头，按4点平均分布进行释放，连续释放3次，每次间隔5～7天，每亩总计放蜂25000～30000头。
有益效果：与现有技术相比，本发明的优点是：
1、通过松毛虫赤眼蜂与黏虫赤眼蜂共寄生柞蚕卵，实施黏虫赤眼蜂对柞蚕卵的适应性驯化，松毛虫赤眼蜂可咬破柞蚕卵壳形成出蜂孔，使得更多的黏虫赤眼蜂个体得以出蜂并继续在柞蚕卵上产下后代，黏虫赤眼蜂能够保持数量较为稳定的种群，使得多代持续驯化得以实现，逐步优选获得对柞蚕卵具有更高适应性的黏虫赤眼蜂品系，进而实现黏虫赤眼蜂在柞蚕卵上的独立、连续繁育，为柞蚕卵规模化繁育黏虫赤眼蜂奠定了技术基础；
2、本发明方法繁育出的黏虫赤眼蜂，与按传统方式以米蛾卵繁育的黏虫赤眼蜂相比，在大豆食心虫卵上具有更高的寄生效率，尤其适用于大豆食心虫的生物防治。
附图说明
图1为本发明驯化繁育方法的流程图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例，进一步阐明本发明，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。
一种适于大豆食心虫防治的黏虫赤眼蜂驯化繁育方法，如附图1所示，包括以下步骤。
步骤100：通过野外诱集、采集等方式获得黏虫赤眼蜂原始种群，经物种鉴定后使用米蛾卵进行种群保育，待黏虫赤眼蜂羽化出蜂。
步骤200：取人工剖腹的柞蚕卵，清洗后去除杂色卵粒、干瘪或外形不规则的卵粒；准备松毛虫赤眼蜂蜂种，以及步骤100羽化出蜂的黏虫赤眼蜂。在环境温度23～26℃、空气相对湿度80±5％、光周期0L:24D条件下，按照松毛虫赤眼蜂蜂种∶黏虫赤眼蜂∶柞蚕卵的数量比为1∶4∶1～1∶6∶1，接蜂24～48小时。
步骤300：子代赤眼蜂完成发育后自行咬破柞蚕卵壳出蜂。由于松毛虫赤眼蜂雌蜂的体色为纯黄色，而黏虫赤眼蜂雌雄蜂、松毛虫赤眼蜂雄蜂的体色带有明显黑色，因此可以根据体色在解剖镜下快速区分出松毛虫赤眼蜂雌蜂。对于子代松毛虫赤眼蜂雌蜂占比不低于90％的情况下，从中分离出子代黏虫赤眼蜂并重复步骤200，使子代黏虫赤眼蜂继续重新与松毛虫赤眼蜂蜂种共寄生柞蚕卵进行驯化，对于子代松毛虫赤眼蜂雌蜂占比低于90％的情况下，从中分离出子代黏虫赤眼蜂单独寄生柞蚕卵。
步骤100～步骤300实现黏虫赤眼蜂种群建立与驯化。
步骤400：对于步骤300中分离出子代黏虫赤眼蜂单独寄生柞蚕卵，初次寄生柞蚕卵时，按照蜂卵的数量比为5∶1～7∶1提供柞蚕卵，此后逐代继续繁育时按照亲代寄主卵与子代新鲜卵的卵卵数量比为1∶3～1∶5提供柞蚕卵，在环境温度26±1℃、空气相对湿度75±5％、光周期0L:24D条件下，接蜂持续24～48小时，而后除去蜂种，子代蜂在环境温度26±1℃、空气相对湿度75±5％、光周期14L:10D～16L:8D条件下开始发育。
步骤500：对于步骤400中单独寄生柞蚕卵繁育出的子代黏虫赤眼蜂，进行逐代抽检，根据寄生率、羽化率、单卵蜂数、雌性比指标评估蜂种质量。在不符合繁育预期时，使用大豆食心虫卵或米蛾卵作为寄主卵繁育1代进行复壮，复壮后若蜂种质量符合要求则再单独寄生柞蚕卵繁育，若蜂种质量仍不符合要求，则淘汰该蜂种，将其从步骤200重新开始与松毛虫赤眼蜂蜂种共寄生。在符合繁育预期时，得到繁育出的黏虫赤眼蜂，并继续在柞蚕卵上繁育，一般在连续繁育至第5代时，使用大豆食心虫卵或米蛾卵作为寄主卵繁育1代进行复壮，再单独寄生柞蚕卵繁育。
步骤400～步骤500实现利用柞蚕卵连续繁育黏虫赤眼蜂。
以下通过实验对比本发明方法繁育黏虫赤眼蜂的效果。
1.实验材料
蜂种：与松毛虫赤眼蜂共寄生柞蚕卵驯化2代后的黏虫赤眼蜂；未经驯化的野生黏虫赤眼蜂。
寄主卵：当日人工剖腹的柞蚕卵。
2.实验环境
环境温度26±1℃，空气相对湿度75±3％，14L:10D。
3.实验方法
3.1驯化种群的连续繁育
(1)取与松毛虫赤眼蜂共寄生柞蚕卵驯化2代后的黏虫赤眼蜂，镜检将黏虫赤眼蜂与松毛虫赤眼蜂分离；(2)分离出的黏虫赤眼蜂初次寄生柞蚕卵时，按照蜂卵的数量比为6∶1提供柞蚕卵，此后每代黏虫赤眼蜂出蜂后，按照亲代寄主卵与子代新鲜卵的卵卵数量比为1∶3提供柞蚕卵，接蜂持续24小时，期间遮光使黏虫赤眼蜂完全处于黑暗环境寄生柞蚕卵，而后除去遮光物，除去蜂种，子代蜂开始发育。连续繁育6代，统计子代黏虫赤眼蜂寄生率、羽化率等指标评估蜂种质量。
3.2未驯化种群的连续繁育
取未经驯化的野生黏虫赤眼蜂寄生柞蚕卵，其余方法同3.1-(2)。
4.实验结果
表1柞蚕卵繁育不同代数黏虫赤眼蜂的繁育指标
5.结论与讨论
实验结果显示，经本发明方法驯化后，黏虫赤眼蜂在柞蚕卵上的繁育效果优于野生种群，表现为连续繁殖代数增加，寄生率提高。
将本发明方法繁育出的黏虫赤眼蜂应用在大豆食心虫的防治，防治应用方法主要是将繁育出的黏虫赤眼蜂在田间释放，每亩放蜂量8000～10000头，按4点平均分布进行释放，连续释放3次，每次间隔5～7天，每亩总计放蜂25000～30000头。
一、以下通过室内实验对比不同黏虫赤眼蜂品系对大豆食心虫卵的寄生效果。
1.实验材料
蜂种：本发明方法以柞蚕卵单独繁育2代后的黏虫赤眼蜂；以米蛾卵繁育2代后的黏虫赤眼蜂。
寄主卵：0、2、4日龄的大豆食心虫卵块。
2.实验环境
环境温度26±1℃，空气相对湿度70±2％，14L:10D。
3.实验方法
取羽化8h内的雌蜂1头，分别提供足量的0、2、4日龄的大豆食心虫卵粒，24h后移除蜂。寄生卵粒在同一环境内发育至子代蜂羽化飞出，而后统计寄生率、羽化率等指标评估寄生适应效果。
4.实验结果
表2不同黏虫赤眼蜂品系寄生大豆食心虫卵的效果
5.结论与讨论
实验结果显示，本发明方法繁育获得的黏虫赤眼蜂品系对大豆食心虫卵的寄生效率优于以米蛾卵繁育获得的黏虫赤眼蜂品系，表现为单位时间内可寄生更多数量的大豆食心虫卵粒。
二、以下通过田间实验对比本发明方法繁育获得的黏虫赤眼蜂品系对大豆食心虫的防治效果。
1.实验材料
黏虫赤眼蜂：以柞蚕卵单独繁育4代的黏虫赤眼蜂，在黏虫赤眼蜂发育至蛹期时，制作卵卡。
2.实验方法
在7月下旬开始利用性诱剂监测大豆食心虫成虫的发生动态，于8月上旬监测到成虫发生数量显著增加时，田间释放即将羽化的黏虫赤眼蜂，每亩放蜂量10000头，按3、4、5点平均分布进行释放，连续释放3次，每次间隔5天，每亩总计放蜂30000头。以无任何防治措施处理作为对照，每个处理试验面积为2亩，不同处理之间间隔20米。秋收前采用5点取样法(每点随机取100个豆荚)调查不同放蜂数量点的虫食率。
3.实验结果
表3
| 放蜂方法 | 虫食率(％) | 防治效果(％) |
| 平均3点释放/亩 | 6.9 | 81.6 |
| 平均4点释放/亩 | 5.0 | 86.7 |
| 平均5点释放/亩 | 5.5 | 85.4 |
| 无任何防治措施 | 37.6 | - |
4.结论与讨论
实验结果显示，在大豆食心虫发生期，本发明方法通过柞蚕卵繁育获得的黏虫赤眼蜂，每亩放蜂量10000头，按4点平均分布进行释放，连续释放3次，每次间隔5天，每亩总计放蜂30000头，对大豆食心虫为害造成的虫口豆的防治效果高达86.7％，表现出很好的防治效果。
Claims (9)
1.一种适于大豆食心虫防治的黏虫赤眼蜂驯化繁育方法，其特征在于包括以下步骤：
步骤100：将经物种鉴定后的黏虫赤眼蜂原始种群使用米蛾卵进行保育，而后羽化出蜂；
步骤200：取柞蚕卵，同时准备松毛虫赤眼蜂蜂种，在环境温度23～26℃、空气相对湿度80±5％、光周期0L:24D条件下，按照松毛虫赤眼蜂蜂种∶黏虫赤眼蜂∶柞蚕卵的数量比为1∶4∶1～1∶6∶1，接蜂24～48小时；
步骤300：子代赤眼蜂完成发育后自行咬破柞蚕卵壳出蜂，对于子代松毛虫赤眼蜂雌蜂占比不低于90％的情况下，从中分离出子代黏虫赤眼蜂并重复步骤200，使子代黏虫赤眼蜂继续重新与松毛虫赤眼蜂蜂种共寄生柞蚕卵进行驯化，对于子代松毛虫赤眼蜂雌蜂占比低于90％的情况下，从中分离出子代黏虫赤眼蜂单独寄生柞蚕卵；
步骤400：对于步骤300中分离出子代黏虫赤眼蜂单独寄生柞蚕卵，初次寄生柞蚕卵时，按照蜂卵的数量比为5∶1～7∶1提供柞蚕卵，此后逐代继续繁育时按照亲代寄主卵与子代新鲜卵的卵卵数量比为1∶3～1∶5提供柞蚕卵，在环境温度26±1℃、空气相对湿度75±5％、光周期0L:24D条件下，接蜂持续24～48小时，而后除去蜂种，子代蜂在环境温度26±1℃、空气相对湿度75±5％、光周期14L:10D～16L:8D条件下开始发育；
步骤500：对于步骤400中单独寄生柞蚕卵繁育出的子代黏虫赤眼蜂，进行逐代抽检，根据寄生率、羽化率、单卵蜂数、雌性比指标评估蜂种质量，
在不符合繁育预期时，使用复壮寄主卵繁育1代进行复壮，复壮后若蜂种质量符合要求则再单独寄生柞蚕卵繁育，若蜂种质量仍不符合要求则从步骤200重新开始；在符合繁育预期时，得到繁育出的黏虫赤眼蜂，并继续在柞蚕卵上繁育。
2.根据权利要求1所述的适于大豆食心虫防治的黏虫赤眼蜂驯化繁育方法，其特征在于：步骤200、步骤400中，空气相对湿度均为75±3％。
3.根据权利要求1所述的适于大豆食心虫防治的黏虫赤眼蜂驯化繁育方法，其特征在于：步骤400中，初次寄生柞蚕卵时，按照蜂卵的数量比为6∶1提供柞蚕卵，此后逐代继续繁育时按照亲代寄主卵与子代新鲜卵的卵卵数量比为1∶3提供柞蚕卵。
4.根据权利要求1所述的适于大豆食心虫防治的黏虫赤眼蜂驯化繁育方法，其特征在于：步骤500中，在符合繁育预期并连续繁育至第5代时，使用复壮寄主卵繁育1代进行复壮，再单独寄生柞蚕卵繁育。
5.根据权利要求1所述的适于大豆食心虫防治的黏虫赤眼蜂驯化繁育方法，其特征在于：步骤200中，取用的柞蚕卵，需清洗后去除杂色卵粒、干瘪或外形不规则的卵粒。
6.根据权利要求1所述的适于大豆食心虫防治的黏虫赤眼蜂驯化繁育方法，其特征在于：步骤300中，通过体色区分子代松毛虫赤眼蜂雌蜂。
7.根据权利要求1或4所述的适于大豆食心虫防治的黏虫赤眼蜂驯化繁育方法，其特征在于：所述复壮寄主卵为大豆食心虫卵或米蛾卵。
8.一种权利要求1～7任一所述的方法繁育出的黏虫赤眼蜂的防治应用，其特征在于：将繁育出的黏虫赤眼蜂应用于大豆食心虫的防治。
9.根据权利要求8所述的防治应用，其特征在于：将繁育出的黏虫赤眼蜂在田间释放，每亩放蜂量8000～10000头，按4点平均分布进行释放，连续释放3次，每次间隔5～7天，每亩总计放蜂25000～30000头。
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2018
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