CN109157635B - 一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方，属于中药复方技术领域，包括：忍冬藤30~50重量份，葡萄藤叶30~50重量份，姜黄10~20重量份，牡荆叶10~20重量份，重齿当归10~20重量份，非洲鼠尾草10~15重量份，麻绞叶地上部分20~30重量份，泽泻1~3重量份，紫龙胆根皮5~10重量份，小叶蛇葡萄5~10重量份，大豆25~35重量份，商陆3~6重量份，贯叶金丝桃5~10重量份，膜荚黄芪10~20重量份。本发明配伍合理，毒副作用小，安全级别高，治疗效果显著。该制备方法可操作性强，重现性好，所用溶剂无毒性，安全环保，对环境友好，制得的忍冬藤复方治疗痛风和/或类风湿性关节炎的疗效显著。

Description

一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方及其制备方法和应用，属于中药复方技术领域。

背景技术

痛风是一组嘌呤代谢紊乱所致的疾病，因尿酸盐沉积而引起的急、慢性炎症和组织损伤。其与高尿酸血症直接相关。近年来，随着人们生活水平的提高，痛风病的发病率也逐渐上升。在经历了长期的西药治疗痛风的过程中逐渐发现西药虽能较快改善患者的临床症状，但也仅以纠正高血尿酸为主要目的，且需长期甚至终身服药。然而其不良反应也限制了该类药物长期广泛的应用，迄今为止，现代医学对痛风的治疗尚未有安全而理想的药物及方法。而中医药治疗痛疗效显著，不良反应小，逐渐开始被医学界所重视。

类风湿性关节炎(RA)实为一种具有典型性的自身免疫性疾病，还是一种慢性系统性炎症，关节滑膜为其主要的靶组织，主要对足小关节及其他组织或器官造成侵犯。有报道指出，类风湿性关节炎患者血清中，通常会出现炎性细胞因子异常升高情况，而在其外周血中，其抗炎性细胞因子一般维持在比较低的水平，促使外周血中的细胞因子类型偏移至炎性表达。由此得知，RA患者的发病与抗炎性细胞因子减少及炎性细胞因子增多相关。近年来，中药复方辨证在治疗类风湿性关节炎取得了显著疗效，具有独特优势，表现出整体调节、多层次、多靶点的作用，常用驱邪、通络、祛风、散寒、除湿、清热、化痰、行瘀等法，兼以扶正治疗，而且还能缓解和对抗西药的毒副作用。

中药及中药制剂已广泛地应用于临床，因药物剂量过大、长期服用、炮制欠佳、配伍不当等原因，中药的毒副不良反应也随之出现，所以，如何合理使用中药以及正确认识中药的毒性成分，如何使中药及中药复方起到减毒增效的效果是目前亟待解决的技术问题。

现有的用于治疗痛风或类风湿性关节炎的中药复方一般起效慢，均需长期服药，且药量大，在实际临床应用中，该类长期服药患者少有胃部不适，吞酸纳差等症状。故本发明提供一种配伍合理，毒副作用小，安全级别高，治疗效果显著的忍冬藤复方及其制备方法和应用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种配伍合理，毒副作用小，安全级别高，治疗效果显著的具有抗抑郁作用的忍冬藤复方。

本发明还提供一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方的制备方法，该法可操作性强，重现性好，所用溶剂无毒性，安全环保，对环境友好，制得的忍冬藤复方药理作用显著。

本发明还提供一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方在痛风制剂和/或类风湿性关节炎制剂中的应用。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：

一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方，包括：忍冬藤，葡萄藤叶，姜黄，牡荆叶，重齿当归，非洲鼠尾草，麻绞叶地上部分，泽泻，紫龙胆根皮，小叶蛇葡萄，大豆，商陆，贯叶金丝桃，膜荚黄芪。

一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方，包括：忍冬藤30～50重量份，葡萄藤叶30～50重量份，姜黄10～20重量份，牡荆叶10～20重量份，重齿当归10～20重量份，非洲鼠尾草10～15重量份，麻绞叶地上部分20～30重量份，泽泻1～3重量份，紫龙胆根皮5～10重量份，小叶蛇葡萄5～10重量份，大豆25～35重量份，商陆3～6重量份，贯叶金丝桃5～10重量份，膜荚黄芪10～20重量份。

一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方的制备方法，包括以下步骤：

S01，取上述重量份的忍冬藤，姜黄，重齿当归，非洲鼠尾草，麻绞叶地上部分，泽泻，紫龙胆根皮，小叶蛇葡萄和商陆，加入10～20倍量的70～85％乙醇热回流提取至少2次，每次提取2～4h，合并提取液，减压浓缩至浓缩液热测密度为1.08～1.12，停止浓缩，静置至室温后过滤，滤液中加入石油醚萃取2～5次，每次石油醚萃取液的加入量为滤液重量的1～2倍量，每次萃取时间为至少30min，石油醚萃取完成后，取滤液层，滤液层过非极性大孔吸附树脂柱，非极性大孔吸附树脂柱的径高比为1：(4～6)，上次流速为(3～5)mL/min，上样完成后静态吸附6～10h，然后依次水洗8～15个柱体积，20～30％乙醇洗脱4～8个柱体积，60～70％乙醇洗脱3～5个柱体积，收集60～70％乙醇洗脱液，减压浓缩至无醇味后，干燥，干燥品采用纯乙醇或纯甲醇超声复溶，复溶溶剂的加入量为干燥品重量的3～5倍，复溶温度为50～60℃，超声复溶10～20min后，取出复溶溶液，放于-5～0℃冰箱静置过夜，次日取出，过滤，滤液中逐滴加入相当于复溶溶剂0.3～0.5倍量的乙酸乙酯或丙酮，边加边搅拌，滴加完毕后，室温静置2～3h后过滤，滤液浓缩干燥，得浸膏粉Ⅰ；

S02，取上述重量份的葡萄藤叶，牡荆叶，大豆，贯叶金丝桃和膜荚黄芪，加入5～10倍量的纯化水，完全浸渍后，常温超声提取至少3次，每超声5～10min停止5～10min，如此往复，至每次提取总时间为30～60min，超声功率为120～180W，合并超声提取液，减压浓缩至热测密度为1.06～1.10，停止浓缩，将浓缩液转移至烧杯，自然晾凉至室温后过滤，滤液中加入活性炭柱状颗粒，活性炭柱状颗粒的加入量为原料总重的0.5～2％，磁力搅拌吸附至少4h，吸附次数为2～3次，吸附完成后，滤除活性炭柱状颗粒，吸附后滤液过极性大孔吸附树脂，极性大孔吸附树脂柱的径高比为1：(6～8)，上次流速为(2～4)mL/min，上样完成后静态吸附2～3h，然后依次水洗5～7个柱体积，5～10％乙醇洗脱至少10个柱体积，收集5～10％乙醇洗脱液，减压浓缩至无醇味后，过滤，滤液干燥，得浸膏粉Ⅱ；

S03，将浸膏粉Ⅰ和浸膏粉Ⅱ混合均匀后，得忍冬藤复方，再加入辅料，配制成忍冬藤复方制剂。

所述非极性大孔吸附树脂包括D101，HPD100，AB-8，X-5或H103。

所述极性大孔吸附树脂包括NKA-9，S-8或HPD-500。

所述忍冬藤复方制剂的剂型包括片剂、颗粒剂、胶囊剂或丸剂。

所述活性炭柱状颗粒的粒径为1～3mm。

一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方在抗抑郁制剂中的应用。

忍冬藤：具有清热解毒、疏风通络的功效。忍冬藤的化学成分主要包括有机酸类、三萜类、环烯醚萜类、黄酮类、挥发油类等，其中绿原酸、马钱苷是其指标性成分。

葡萄藤叶：为葡萄科葡萄属植物葡萄Vitis vinifera L.的藤叶。我国各地栽培。具有祛风除湿，解毒消肿之功效。常用于风湿痹痛，水肿，腹泻，风热目赤，痈肿疔疮。

本发明重用藤类清热药，藤类清热药更有通络之用。取藤类入药，善走经络，有祛风湿、解筋挛、舒筋活络的功效，正如《本草便读》云：“凡藤蔓之属,皆可通经入络,盖藤者缠绕蔓延，犹如网络，纵横交错，无所不至，其形如络脉。”《本草汇言》亦曰：藤类药以其“藤蔓之属，皆可通经入络”，故“蔓藤舒筋脉，枝条达四肢。”藤类药物更能改善类风湿关节炎活动期症状。本发明以忍冬藤和葡萄藤叶共同作为君药，二者均具有抗炎镇痛之功效。

姜黄：拉丁学名Curcuma longa L.又名：郁金、宝鼎香、毫命、黄姜等。芭蕉目、姜科、姜黄属多年生草本植物，姜黄能行气破瘀，通经止痛。主治胸腹胀痛，肩臂痹痛，心痛难忍，产后血痛，疮癣初发，月经不调，闭经，跌打损伤。研究表明，姜黄具有抗炎，治疗类风湿性关节炎的生物活性，姜黄约含3％～6％的姜黄素，姜黄素是植物界很稀少的具有二酮的色素，为二酮类化合物。姜黄素为橙黄色结晶粉末，味稍苦，不溶于水和乙醚，溶于乙醇、丙二醇，易溶于冰醋酸和碱溶液，医学研究表明，姜黄素具有降血脂、抗肿瘤、抗炎、利胆、抗氧化等作用。姜黄中提取的姜黄素已被证明优于标准的类风湿性关节炎药物。印度研究者将患者分为三组，第一组每天服用500毫克姜黄素，第二组每天服用50毫克双氯芬酸(一种止痛药)，第三组则二者同时服用。结果，只服用姜黄素的一组在压痛和关节肿胀等方面的改善最明显，比只吃药的一组效果好得多。研究还发现姜黄素很安全，没有任何不良反应。

牡荆叶：为马鞭草科植物牡荆Vitex negundo L.var.cannabifolia(Sieb.etZucc.)Hand.-Mazz.的叶。分布于华东及河北、湖南、湖北、广东、广西、四川、贵州。具有解表化湿，祛痰平喘，解毒之功效。用于伤风感冒，咳嗽哮喘，胃痛，腹痛，暑湿泻痢，脚气肿胀，风疹瘙痒，脚癣，乳痈肿痛，蛇虫咬伤。在类风湿关节炎患者中，痰湿体质实为偏颇体质(即亚健康)首位，使得化痰药，解表药必不可少。本发明其次重用叶类中药，叶类中药为本方剂中的臣药，叶主散，叶在四旁，则主四散，故能去周身皮肉内之风寒。本发明中的藤类中药和叶类中药二者配合共奏走经络、通关节之功。

重齿当归：学名Angelica biserrata(Shan et Yuan)Yuan et Shan，产四川(巫山、巫溪)、湖北(恩施、巴东)、江西(庐山)、安徽、浙江(天目山)等地。生长于阴湿山坡，林下草丛中或稀疏灌丛中。主治风寒湿痹，腰膝酸痛，头痛，齿痛、痈疡、漫肿等症。重齿当归具有补血活血之功效。类风湿关节炎患者的病因往往与寒、湿相关，治疗一般以祛风湿、补虚、活血化瘀三大类药物为主体，本方中采用重齿当归为活血化瘀药，兼具补血功能，本方选用重齿当归的治疗思路和“久病必淤，久病必虚”的中医理念相契合，在长期服用抗风湿药的同时起到补血，补益，活血化瘀的功能，使抗风湿药的副作用大大减小。

非洲鼠尾草：为唇形科植物，拉丁名Salvia aethiopis，取其根入药，其根内含有0.58％的非洲鼠尾草酮，为二酮类化合物，分子式C₂₀H₂₄O₂，分子量296，药理实验表明：非洲鼠尾草酮具有镇痛作用，在小鼠扭体试验和浸尾试验中有明显镇痛作用。另外还具有抗炎作用，可用于治疗类风湿性关节炎。

麻绞叶地上部分：为芸香科植物麻绞的叶。性味：味辛，性温。新鲜枝叶具有浓郁芳香气味。麻绞叶，也叫印度九里香，麻绞叶民间多用作镇静和消炎草药。麻绞叶里面含有柯氏九里香碱，是抗骨质疏松主要成份。麻绞叶为本方中的另一位叶类中药，在本方中为温阳通络之用，其作为藤类药的引经药，引藤类药直达全身经络以镇痛消炎，同时非常适合体寒患者使用，温经散寒疗效显著。

泽泻：学名Alisma plantago-aquatica Linn.，多年生水生或沼生草本。全株有毒，地下块茎毒性较大。泽泻所含苷类为具有刺激性的发泡物质，对皮肤及粘膜都具有较强的刺激作用，过量服用或服食鲜药，能够造成口腔、食道和整个消化道的炎性损伤。所含生物碱对中枢也有不同程度的抑制作用。本方中取泽泻根茎入药，用量少，并选用其脂溶性成分泽泻醇A单乙酸酯等入药，毒性小，副作用小，同时这些脂溶性成分还具有抗过敏反应以及利尿的作用，正气足邪不可干，邪之所凑正气必虚，久病必虚导致患者抵抗力差，外邪入侵，现代医学表明：一般体质差会导致皮肤的抵抗力下降，容易导致过敏的现象。另外，痛风易导致水肿。本方选用泽泻兼具利水和抗过敏作用，辅助藤类、叶类中药抗风湿的同时消除副作用。

紫龙胆根皮：为龙胆科植物獐牙莱(Swertia bimaculata)的根皮，具清热利湿、解表、止痢的功效。其中含有苦龙胆苷等成分，具有显著的保肝活性。

小叶蛇葡萄：拉丁名Ampelopsis brevipedunculata var.hancei，本方取其根入药，其中含顺式蛇葡萄素E等化学成分，具有抗肝毒作用。本方中小叶蛇葡萄与紫龙胆根皮共同作为保肝药，为人体最大的解毒器官-肝脏进行保护作用，故本方安全级别高，对患者身体副作用小，适合久病患者长期服用。

大豆：拉丁名Glycine max(Linn.)Merr.，通称黄豆，大豆中含有可促进胃液分泌的大豆皂苷部位群，在实际临床应用中，长期服药患者少有胃部不适症状。本方选用大豆促进胃液分泌，起到消食磨胃的作用，增强胃动力，助消化，起到消除长期服药患者胃部不适的症状。

商陆：拉丁名Phytolacca acinosa Roxb，为商陆科、商陆属多年生粗壮草本植物。根入药，以白色肥大者为佳，红根有剧毒，仅供外用。而本方选用果实入药，果实中含有商陆素B等减轻水肿的化学成分，同时无毒，安全级别高。本方中的商陆果与泽泻共同起到利水消肿、增效减毒、整体综合调节的功效，缓解长期服药患者的水肿症状，尤其适合老年人使用。

贯叶金丝桃：又称为贯叶连翘，为藤黄科植物贯叶金丝桃Hypericum perforatumL.的干燥地上部分。抑郁症作为高速发展的现代经济的“副产品”，已经越来越广泛地影响着人们的生活。在中国，抑郁症的患病率约为3％～5％并呈逐年上升趋势。对于痛风患者或者类风湿性关节炎患者，心情焦虑是诱发痛风或者类风湿性关节炎急性发作的危险因素。有报道显示，半数以上的痛风患者在痛风发作前有明显的精神诱因。一项针对86例痛风复发患者的研究显示，痛风复发的因素由高到低依次为：精神压力(28例)、疲劳过度(20例)、饮食(18例)、环境因素(9例)、外伤(5例)、手术(3例)。可见，精神因素也是痛风的一个重要诱因，但它常常被饮食、疲劳等常见因素遮盖。故痛风患者的精神状态需要格外重视，以减免或减少痛风急性发作次数，减少患者病痛。贯叶金丝桃提取物已成为治疗轻度和中度抑郁症的首选药，其疗效显著，又有着良好的安全性。贯叶金丝桃其中含有甲基贯叶金丝桃素等抗抑郁活性成分，其为多巴胺，5-羟色胺和去甲肾上腺素摄取抑制剂。

膜荚黄芪：拉丁名Astragalus membranaceus(Fisch.)，具有补气升阳，益卫固表，利水消肿，托疮生肌等作用。本方中膜荚黄芪与泽泻共用，膜荚黄芪免疫调节，泽泻抗过敏，二者相辅相成，共同阻挡外邪入侵。

本发明提供的一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方及其制备方法和应用，配伍合理，毒副作用小，安全级别高，治疗效果显著。该制备方法可操作性强，重现性好，所用溶剂无毒性，安全环保，对环境友好，制得的忍冬藤复方治疗痛风和/或类风湿性关节炎的疗效显著。

附图说明

图1为本发明的忍冬藤复方对大鼠持续性高尿酸模型肝脏XOD活力的影响图；

图2为本发明的忍冬藤复方对大鼠持续性高尿酸模型血清XOD活力的影响图；

图3为本发明的忍冬藤复方对大鼠肾脏功能有明显改善的肾脏病理照片。

具体实施方式

下面结合附图对本发明作更进一步的说明。

实施例1

一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方，包括：忍冬藤30重量份，葡萄藤叶30重量份，姜黄10重量份，牡荆叶10重量份，重齿当归10重量份，非洲鼠尾草10重量份，麻绞叶地上部分20重量份，泽泻1重量份，紫龙胆根皮5重量份，小叶蛇葡萄5重量份，大豆25重量份，商陆3重量份，贯叶金丝桃5重量份，膜荚黄芪10重量份。

一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方的制备方法，包括以下步骤：

S01，取上述重量份的忍冬藤，姜黄，重齿当归，非洲鼠尾草，麻绞叶地上部分，泽泻，紫龙胆根皮，小叶蛇葡萄和商陆，加入10倍量的70％乙醇热回流提取2次，每次提取2h，合并提取液，减压浓缩至浓缩液热测密度为1.08，停止浓缩，静置至室温后过滤，滤液中加入石油醚萃取2次，每次石油醚萃取液的加入量为滤液重量的1倍量，每次萃取时间为30min，石油醚萃取完成后，取滤液层，滤液层过D101非极性大孔吸附树脂柱，D101非极性大孔吸附树脂柱的径高比为1：4，上次流速为3mL/min，上样完成后静态吸附6h，然后依次水洗8个柱体积，20％乙醇洗脱4个柱体积，60％乙醇洗脱3个柱体积，收集60％乙醇洗脱液，减压浓缩至无醇味后，干燥，干燥品采用纯乙醇超声复溶，复溶溶剂的加入量为干燥品重量的3倍，复溶温度为50℃，超声复溶10min后，取出复溶溶液，放于-5℃冰箱静置过夜，次日取出，过滤，滤液中逐滴加入相当于复溶溶剂0.3倍量的乙酸乙酯，边加边搅拌，滴加完毕后，室温静置2h后过滤，滤液浓缩干燥，得浸膏粉Ⅰ；

S02，取上述重量份的葡萄藤叶，牡荆叶，大豆，贯叶金丝桃和膜荚黄芪，加入5倍量的纯化水，完全浸渍后，常温超声提取3次，每超声5min停止5min，如此往复，至每次提取总时间为30min，超声功率为120W，合并超声提取液，减压浓缩至热测密度为1.06，停止浓缩，将浓缩液转移至烧杯，自然晾凉至室温后过滤，滤液中加入活性炭柱状颗粒，活性炭柱状颗粒的粒径为1mm，活性炭柱状颗粒的加入量为原料总重的0.5％，磁力搅拌吸附4h，吸附次数为2次，吸附完成后，滤除活性炭柱状颗粒，吸附后滤液过S-8极性大孔吸附树脂，S-8极性大孔吸附树脂柱的径高比为1：6，上次流速为2mL/min，上样完成后静态吸附2h，然后依次水洗5个柱体积，5％乙醇洗脱10个柱体积，收集5％乙醇洗脱液，减压浓缩至无醇味后，过滤，滤液干燥，得浸膏粉Ⅱ；

S03，将浸膏粉Ⅰ和浸膏粉Ⅱ混合均匀后，得忍冬藤复方，再加入辅料，配制成剂型为片剂的忍冬藤复方制剂。

一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方在痛风制剂和/或类风湿性关节炎制剂中的应用。

实施例2

一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方，包括：忍冬藤50重量份，葡萄藤叶50重量份，姜黄20重量份，牡荆叶20重量份，重齿当归20重量份，非洲鼠尾草15重量份，麻绞叶地上部分30重量份，泽泻3重量份，紫龙胆根皮10重量份，小叶蛇葡萄10重量份，大豆35重量份，商陆6重量份，贯叶金丝桃10重量份，膜荚黄芪20重量份。

一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方的制备方法，包括以下步骤：

S01，取上述重量份的忍冬藤，姜黄，重齿当归，非洲鼠尾草，麻绞叶地上部分，泽泻，紫龙胆根皮，小叶蛇葡萄和商陆，加入20倍量的85％乙醇热回流提取3次，每次提取4h，合并提取液，减压浓缩至浓缩液热测密度为1.12，停止浓缩，静置至室温后过滤，滤液中加入石油醚萃取5次，每次石油醚萃取液的加入量为滤液重量的2倍量，每次萃取时间为40min，石油醚萃取完成后，取滤液层，滤液层过HPD100非极性大孔吸附树脂柱，HPD100非极性大孔吸附树脂柱的径高比为1：6，上次流速为5mL/min，上样完成后静态吸附10h，然后依次水洗15个柱体积，30％乙醇洗脱8个柱体积，70％乙醇洗脱5个柱体积，收集70％乙醇洗脱液，减压浓缩至无醇味后，干燥，干燥品采用纯甲醇超声复溶，复溶溶剂的加入量为干燥品重量的5倍，复溶温度为60℃，超声复溶20min后，取出复溶溶液，放于0℃冰箱静置过夜，次日取出，过滤，滤液中逐滴加入相当于复溶溶剂0.5倍量的丙酮，边加边搅拌，滴加完毕后，室温静置3h后过滤，滤液浓缩干燥，得浸膏粉Ⅰ；

S02，取上述重量份的葡萄藤叶，牡荆叶，大豆，贯叶金丝桃和膜荚黄芪，加入10倍量的纯化水，完全浸渍后，常温超声提取4次，每超声10min停止10min，如此往复，至每次提取总时间为60min，超声功率为180W，合并超声提取液，减压浓缩至热测密度为1.10，停止浓缩，将浓缩液转移至烧杯，自然晾凉至室温后过滤，滤液中加入活性炭柱状颗粒，活性炭柱状颗粒的粒径为3mm，活性炭柱状颗粒的加入量为原料总重的2％，磁力搅拌吸附4.5h，吸附次数为3次，吸附完成后，滤除活性炭柱状颗粒，吸附后滤液过HPD-500极性大孔吸附树脂，HPD-500极性大孔吸附树脂柱的径高比为1：8，上次流速为4mL/min，上样完成后静态吸附3h，然后依次水洗7个柱体积，10％乙醇洗脱13个柱体积，收集10％乙醇洗脱液，减压浓缩至无醇味后，过滤，滤液干燥，得浸膏粉Ⅱ；

S03，将浸膏粉Ⅰ和浸膏粉Ⅱ混合均匀后，得忍冬藤复方，再加入辅料，配制成剂型为颗粒剂的忍冬藤复方制剂。

一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方在痛风制剂和/或类风湿性关节炎制剂中的应用。

实施例1和实施例2制备的忍冬藤复方治疗高尿酸血症并急性痛风性关节炎的药效学评价

1实验材料

1.1实验动物

实验用Wistar大鼠为8周龄雄性龄雄性清洁级健康大鼠，体重为(220±10)g，共70只，由扬州大学比较医学中心提供，生产许可证号:SCXK(苏)2012-0004，常温、常湿饲养，提供充足的饮用水及其饲料。观察鼠的一般状态，1周后大鼠状态良好，进行后续的实验研究。

1.2实验仪器

FA1104N电子天平，上海精密科学仪器有限公司；YP601N电子天平，上海精密科学仪器有限公司；TGL-16G型台式离心机，上海安亭科学仪器厂；超净工作台，中国上海精密仪器仪表公司；HSS-1(B)型恒温浴槽，成都仪器厂；日立7020全自动生化分析仪，日立仪器有限公司；YLS-7B大小鼠足趾肿胀测量仪，济南益延科技发展有限公司；其他相关仪器略。

1.3实验药品

秋水仙碱(0.5mg/片)；昆明制药集团股份有限公司；苯溴马隆片，德国赫曼大药厂；别嘌醇片，世贸天阶制药有限责任公司；次黄嘌呤，sigma进口分装；尿酸钠结晶，Sigma-Aldrich公司；尿酸试剂盒、黄嘌呤氧化酶试剂盒、考马斯亮蓝试剂盒，南京建成。高酵母饲料，和腺嘌呤均为市售。其他试剂均为国产分析纯。

2方法

2.1实验动物分组

实验选择70只雄性清洁级Wistar大鼠为研究对象，每组10只，将大鼠按照随机数字表随机分成正常对照组、模型组、秋水仙碱阳性对照组、苯溴马隆阳性对照组、别嘌醇片阳性对照组、实施例1组及实施例2组，共分7组。

2.2高尿酸血症合并痛风性关节炎模型复制

参照Coderre氏介绍的经典方法及文献报道的造模方法，模型组和给药组每日予高酵母饲料饲养，并给予腺嘌呤100mg/(kg·d)灌胃，持续14d。高尿酸血症模型成功后，第15d于造模组关节腔内注射25mg/ml尿酸钠晶体(MSU)溶液，在各大鼠右侧踝关节背侧从45°方向插入胫骨肌腱内侧，将0.2ml尿酸钠混悬液注入到踝关节腔，制备急性痛风性关节炎模型，正常组给与常规饲料，并在关节腔内注射等体积生理盐水。

2.3药物剂量的设定

(1)忍冬藤复方剂量的设定

一种忍冬藤复方包括忍冬藤30g，葡萄藤叶30g，姜黄10g，牡荆叶10g，重齿当归10g，非洲鼠尾草10g，麻绞叶地上部分20g，泽泻1g，紫龙胆根皮5g，小叶蛇葡萄5g，大豆25g，商陆3g，贯叶金丝桃5g，膜荚黄芪10g，共174g。依据大鼠和人的体表面积比值0.018：1，进行换算，求得标准体重大鼠中药组合物剂量是[(174g×0.018)/0.2kg，即15.66g/kg，作为实施例1组剂量。

另一种忍冬藤复方包括忍冬藤50g，葡萄藤叶50g，姜黄20g，牡荆叶20g，重齿当归20g，非洲鼠尾草15g，麻绞叶地上部分30g，泽泻3g，紫龙胆根皮10g，小叶蛇葡萄10g，大豆35g，商陆6g，贯叶金丝桃10g，膜荚黄芪20g。共289g。依据大鼠和人的体表面积比值0.018：1，进行换算，求得标准体重大鼠中药组合物剂量是[(289g×0.018)/0.2kg，即26.01g/kg，作为实施例2组剂量。

(2)阳性药物选择及剂量的设定

临床上降尿酸药物根据不同机制可分为两类，减少尿酸生成的别嘌醇片和促进尿酸排泄的苯溴马隆，痛风性关节炎急性发作常使用秋水仙碱，因此分别选择这三个阳性药进行对照。

别嘌醇片临床使用剂量为300mg，依据大鼠和人的体表面积比值为0.018：1，通过换算可以获取别嘌醇片降尿酸的常规可用剂量是(300mg×0.018)/0.2kg＝27mg/kg。

苯溴马隆临床使用剂量为50mg，依据大鼠和人的体表面积比值为0.018：1，通过换算可以获取苯溴马隆降尿酸的常规可用剂量是(50mg×0.018)/0.2kg＝4.5mg/kg。

秋水仙碱临床使用剂量为1.0mg，依据大鼠和人的体表面积比值为0.018：1，通过换算可以获取秋水仙碱治疗痛风性关节的常规可用剂量是(1.0mg×0.018)/0.2kg＝0.09mg/kg。

2.5实验动物给药

正常对照组、模型对照组给予生理盐水灌胃，其余各组分别灌胃给予相应药物，连续给药16d，并同时给予高酵母饲料饲养，腺嘌呤100mg/(kg·d)灌胃复制大鼠高尿酸血症模型，与造模第13天晚上，代谢笼接取12h尿液，第14天给药后右眼球后静脉取血1.5ml。第15d于造模组关节腔内注射25mg/ml尿酸钠晶体(MSU)溶液，在各大鼠右侧踝关节背侧从45°方向插入胫骨肌腱内侧，将0.2ml尿酸钠混悬液注入到踝关节腔，制备急性痛风性关节炎模型

2.6检测大鼠关节肿胀度

模型形成后，测定造模2h、4h、8h、12h、24h、48h后大鼠右踝关节周径，计算肿胀度。

肿胀度(cm)＝造模后踝周径(cm)－造模前踝周径(cm)。

2.7检测大鼠血清尿酸(SUA)、尿液尿酸(UUA)、肾脏中尿酸浓度(RUA)

取右侧肾脏，匀浆(10000r/min)，制备浓度为1％的肾匀浆，按试剂盒说明书测定血清、尿液、肾脏中尿酸浓度，并计算大鼠12h尿酸排泄量12h尿酸排泄量(mg)＝UUA(mg/ml)×12h尿量(ml)

2.8测定血液及肝脏中黄嘌呤氧化酶活性

解剖大鼠，取约0.3g肝脏，加生理盐水(1:9)，制备肝脏匀浆液，按试剂盒说明书测定血清和肝脏黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase，XOD)活性

2.9测定血清中BUN、Cr浓度

按试剂盒说明书测定血清中BUN、Cr浓度浓度，

2.10肾脏病理组织学检查

左侧肾脏10％福尔马林固定，病理组织学检查。

2.11统计分析

采用SPSS19.0软件分析各组实验小鼠的实验数据，且实验数据采用x±s表示，多组间比较采用单因素方差分析，P<0.05表示差异有统计学意义。

3结果

3.1忍冬藤复方对大鼠关节肿胀度的影响

结果见表1，大鼠关节腔注射尿酸钠后关节肿胀随时间加剧，24h时关节肿胀达到峰值。阳性药秋水仙碱和苯溴马隆均能缓解大鼠的关节肿胀，实施例1和实施例2剂量组能明显减轻造模后的关节肿胀度，其作用与秋水仙组相当，由于苯溴马隆组。

表1忍冬藤复方对急性痛风性关节炎大鼠右踝关节肿胀度的影响(

n＝10)

注：与模型组比较**P<0.01，*P<0.05

3.2忍冬藤复方对大鼠持续性高尿酸模型尿酸生成及排泄的影响

结果见表2，造模14天后大鼠血清、尿液及肾脏中尿酸浓度明显升高，实施例1和实施例2组降低血清及肾脏中尿酸水平优于苯溴马和秋水仙碱，促尿酸排泄作用与苯溴马隆相当。

表2忍冬藤复方对大鼠持续性高尿酸模型尿酸生成及排泄的影响(

n＝10)

注：与模型组比较^**P<0.01，^*P<0.05

3.3忍冬藤复方对大鼠持续性高尿酸模型大鼠黄嘌呤氧化酶的影响

结果见图1、图2，阳性药别嘌醇对大鼠黄嘌呤氧化酶有明显抑制作用，从而抑制尿酸生成；而实施例1、实施例2也有一定的黄嘌呤氧化酶抑制作用，可减少尿酸生成。

注：与正常组比较^##P<0.01，^#P<0.05；与模型组比较^**P<0.01，^*P<0.05

3.3忍冬藤复方对大鼠持续性高尿酸模型大鼠肾脏功能的影响

结果见表3，造模后大鼠BUN、Cr水平均明显升高，实施例1、实施例2均可降低BUN、Cr水平。如图3所示，结合病理照片，忍冬藤复方对大鼠肾脏功能有明显改善。

表3忍冬藤复方对大鼠血清中BUN、Cr的影响(

n＝10)

注：与模型组比较^**P<0.01，^*P<0.05

实施例1和实施例2制备的忍冬藤复方治疗类风湿性关节炎药效学评价

1实验材料

1.1实验动物

实验用Wistar大鼠雄性龄雄性清洁级健康大鼠，体重为(160±10)g，共60只，由上海杰思捷实验动物有限公司提供，生产许可证号：SCXK(沪)：2013-0006。常温、常湿饲养，提供充足的饮用水及其饲料。观察鼠的一般状态，1周后大鼠状态良好，进行后续的实验研究。

1.2实验仪器

FA1104N电子天平，上海精密科学仪器有限公司；YP601N电子天平，上海精密科学仪器有限公司；TGL-16G型台式离心机，上海安亭科学仪器厂；超净工作台，中国上海精密仪器仪表公司；HSS-1(B)型恒温浴槽，成都仪器厂；日立7020全自动生化分析仪，日立仪器有限公司；YLS-7B大小鼠足趾肿胀测量仪，济南益延科技发展有限公司；其他相关仪器略。

1.3实验药品

福氏完全佐剂，美国Sigma公司；扶他林(双氯芬酸钠缓释片)，北京诺华制药有限公司；TNF-α和IL-6试剂盒，联科生物技术股份有限公司；其他试剂均为国产分析纯。

2方法

2.1实验动物分组

实验选择60只雄性清洁级Wistar大鼠为研究对象，每组15只，体重(160±10)g，将大鼠按照随机数字表随机分成模型对照组、双氯芬酸钠阳性对照组、实施例1组及实施例2组，共分4组。

2.2类风湿性关节炎模型复制

按照经典RA模型制作方法，将含有3.0g/L卡介苗的完全福氏佐剂(CFA)充分研磨至乳白色黏稠液体，使之乳化，于大鼠的背部2或3点及尾根部1处进行皮内注射0.3ml。并按照文献的方法对病变程度进行评分，无症状，0分；足趾关节红肿，1分；多个趾关节或趾跖关节肿胀，2分；踝关节以下的足爪肿胀，3分；全部足爪肿胀，4分。四肢关节炎积分为每只大鼠的关节炎指数，最高为16分。关节炎指数≥4分视为造模成功。模型组和实验组制作RA模型，正常组注射等剂量的生理盐水。

2.3药物剂量的设定

(1)忍冬藤复方剂量的设定

一种忍冬藤复方包括忍冬藤30g，葡萄藤叶30g，姜黄10g，牡荆叶10g，重齿当归10g，非洲鼠尾草10g，麻绞叶地上部分20g，泽泻1g，紫龙胆根皮5g，小叶蛇葡萄5g，大豆25g，商陆3g，贯叶金丝桃5g，膜荚黄芪10g，共174g。依据大鼠和人的体表面积比值0.018：1，进行换算，求得标准体重大鼠中药组合物剂量是[(174g×0.018)/0.2kg，即15.66g/kg，作为实施例1组剂量。

另一种忍冬藤复方包括忍冬藤50g，葡萄藤叶50g，姜黄20g，牡荆叶20g，重齿当归20g，非洲鼠尾草15g，麻绞叶地上部分30g，泽泻3g，紫龙胆根皮10g，小叶蛇葡萄10g，大豆35g，商陆6g，贯叶金丝桃10g，膜荚黄芪20g。共289g。依据大鼠和人的体表面积比值0.018：1，进行换算，求得标准体重大鼠中药组合物剂量是[(289g×0.018)/0.2kg，即26.01g/kg，作为实施例2组剂量。

(2)阳性药物选择及剂量的设定

临床上主要使用非甾体类抗炎药，本研究选择双氯芬酸钠缓释片作为阳性对照。双氯芬酸钠缓释片临床使用剂量为75mg，依据大鼠和人的体表面积比值为0.018：1，通过换算可以获取双氯芬酸钠缓释片的常规可用剂量是(74mg×0.018)/0.2kg＝6.75mg/kg。

2.4实验动物给药

实验动物在造模2w后，测量大鼠肿胀度，选取肿胀率高的40只大鼠分组，即正常对照组、模型组、扶他林阳性对照组、实施例1剂量组及实施例2剂量组，每组10只。正常对照组、模型对照组给予生理盐水灌胃，其余各组分别灌胃给予相应药物，给药体积为10ml/kg，连续给药15d。

2.5检测大鼠关节肿胀度

足趾容积测定：造模前、造模后、给药7天、15天检测右后肢容积。

2.6测定血清IL-6、TNF-a水平

肿胀度检测结束后，各组大鼠均腹主动脉取血后处死，分离血清，测采用Elisa法检测大鼠血清IL-6、TNF-a水平。

2.7大鼠关节病理检查

大鼠取右后踝关节浸于10％甲醛溶液48小时，待做病理检查。HE染色，给药后第15天处死大鼠，取大鼠继发侧膝关节，4％甲醛5d，10％EDTA脱钙液30d，每隔3d换1次脱钙液。取踝关节，制石蜡切片，HE染色，参照Chang等方法进行关节病理评分。软骨侵蚀评分:0分正常；1分少量侵蚀；2分少量的、深度部位侵蚀；3分大量的并且深度部位侵蚀。细胞侵润评分:0分无侵蚀；1分较少的局部侵蚀；2分广泛的局部侵蚀；3分广泛侵蚀到关节囊，并伴有凝聚体的生成。滑膜细胞增殖评分:0分无增殖；1分2～4层滑膜细胞；2分增殖4层以上；3分增殖过度，侵蚀邻近的骨、软骨及结缔组织。血管翳评分:0分无变化；1分出现部位2个；2分出现部位为4个，并伴软骨组织表面的侵蚀；3分出现部位为大于4个或2个部位有大范围的血管翳生成。

2.8统计分析

采用SPSS19.0软件分析各组实验小鼠的实验数据，且实验数据采用x±s表示，多组间比较采用单因素方差分析，P<0.05表示差异有统计学意义。

3结果

3.1忍冬藤复方对类风湿性关节炎大鼠足趾肿胀的影响

结果见表4，造模14天后，各组足趾容积明显增加，给予药物治疗后肿胀明显减轻，实施例1、实施例2作用相当于双氯芬酸钠组。

表4忍冬藤复方对大鼠足跖肿胀度的影响(

n＝10)

注：与模型组比较^**P<0.01，^*P<0.05

3.2忍冬藤复方对类风湿性关节炎大鼠血清中IL-6、TNF-a的影响

实验结果见表5，药物组IL-6、TNF-a均明显降低，作用相当于双氯芬酸钠。

表5忍冬藤复方对类风湿性关节炎大鼠血清中IL-6、TNF-a的影响(

n＝10)

注：与模型组比较^**P<0.01，^*P<0.05

3.3忍冬藤复方对类风湿性关节炎大鼠关节病变评分的影响

病变主要表现为关节滑膜组织充血水肿、炎细胞浸润。滑膜被覆细胞变性、坏死，部分区域滑膜组织增生，周围皮肤炎症反应。给药后病变明显减轻，结果表6，实施例1、实施例2的作用相当于双氯芬酸钠。

表6忍冬藤复方对MSU致大鼠关节肿胀影响的关节病变评分(

n＝10)

注：与模型组比较^**P<0.01，^*P<0.05

实施例1和实施例2制备的忍冬藤复方抗抑郁作用药效学评价

1实验材料

1.1实验动物

实验用SD大鼠为8周龄雄性龄雄性清洁级健康大鼠，体重为(180±10)g，共75只，由上海杰思捷实验动物有限公司提供，生产许可证号:SCXK(沪)2013-0006，常温、常湿饲养，提供充足的饮用水及其饲料。观察鼠的一般状态，1周后大鼠状态良好，进行后续的实验研究。

1.2实验仪器

FA1104N电子天平，上海精密科学仪器有限公司；YP601N电子天平，上海精密科学仪器有限公司；TGL-16G型台式离心机，上海安亭科学仪器厂；超净工作台，中国上海精密仪器仪表公司；HSS-1(B)型恒温浴槽，成都仪器厂；日立7020全自动生化分析仪，日立仪器有限公司；Mini-PROTEAN3电泳系统、Mini Trans-Blot转移系统均购自Bio-Rad；其他相关仪器略。

1.3实验药品

盐酸氟西汀(fluoxetine，20mg)购自美国礼来苏州制药有限公司；5-羟色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)、多巴胺(dopamine，DA)和去甲肾上腺素(norepinephrine，NE)的ELISA试剂盒，联科生物技术股份有限公司。其他试剂均为国产分析纯。

2方法

2.1实验动物分组

实验选择75只雄性清洁级Wistar大鼠为研究对象，每组15只，体重(180±10)g，将大鼠按照随机数字表随机分成正常对照组、模型组、盐酸氟西汀阳性对照组、实施例1剂量组及实施例2剂量组，共分5组。

2.2大鼠抑郁症模型复制

采用CUMS结合孤养的方式制备CUMS抑郁症模型。应激包括禁食24h、禁水24h、昼夜颠倒24h、45℃热水游泳5min、4℃冰水游泳5min、悬尾20min、夹尾2min、潮湿垫料24h等8种方式，每天随机给予1种应激方式，但相邻2d给予不同方式应激，使应激具有不可预见性，共持续28d。

2.3药物剂量的设定

(1)忍冬藤复方剂量的设定

一种忍冬藤复方包括忍冬藤30g，葡萄藤叶30g，姜黄10g，牡荆叶10g，重齿当归10g，非洲鼠尾草10g，麻绞叶地上部分20g，泽泻1g，紫龙胆根皮5g，小叶蛇葡萄5g，大豆25g，商陆3g，贯叶金丝桃5g，膜荚黄芪10g，共174g。依据大鼠和人的体表面积比值0.018：1，进行换算，求得标准体重大鼠中药组合物剂量是[(174g×0.018)/0.2kg，即15.66g/kg，作为实施例1组剂量。

另一种忍冬藤复方包括忍冬藤50g，葡萄藤叶50g，姜黄20g，牡荆叶20g，重齿当归20g，非洲鼠尾草15g，麻绞叶地上部分30g，泽泻3g，紫龙胆根皮10g，小叶蛇葡萄10g，大豆35g，商陆6g，贯叶金丝桃10g，膜荚黄芪20g。共289g。依据大鼠和人的体表面积比值0.018：1，进行换算，求得标准体重大鼠中药组合物剂量是[(289g×0.018)/0.2kg，即26.01g/kg，作为实施例2组剂量。

(2)阳性药物选择及剂量的设定

选择临床常用于治疗抑郁症的盐酸氟西汀作为阳性药，盐酸氟西汀临床使用剂量为20mg，依据大鼠和人的体表面积比值为0.018：1，通过换算可以获取别嘌醇片降尿酸的常规可用剂量是(20mg×0.018)/0.2kg＝1.8mg/kg。

2.5实验动物给药

正常对照组、模型组、盐酸氟西汀阳性对照组、实施例1组及实施例2组。正常对照组、模型对照组给予生理盐水灌胃，其余各组分别灌胃给予相应药物，连续给药15d，末次给药24h后进行行为学实验。

2.6强迫游泳实验

实验装置为上口径40cm、下口径33cm的不透明圆形塑料桶，水深30cm，水温(24±1)℃，实验时保持安静。将大鼠头部面向桶壁，缓慢放入塑料桶内，让其自由游泳，用秒表记录大鼠5min内的不动时间。

2.7糖水偏好实验

禁食禁水24h，同时放置1瓶纯水和1瓶1％蔗糖溶液(均为200mL)，0.5h后调换2瓶位置，继续放置，0.5h后，测量并计算每只大鼠的糖水偏好量，糖水偏好量(％)＝糖水消耗量/(糖水消耗量+纯水消耗量)×100％。

2.8脑组织中5-HT、DA和NE的含量测定

实验10％水合氯醛麻醉大鼠，断头取出新鲜脑组织，称重，加入预冷的PBS缓冲液，冰上用玻璃匀浆器匀浆，12 000r/min低温离心15min，提取上清液，按照ELISA试剂盒说明书检测5-HT、DA和NE的含量。

3.结果

3.1忍冬藤复方改善CUMS大鼠抑郁样行为

实验结果见表7，强迫游泳实验和糖水偏好实验结果显示，与对照组相比，模型组大鼠的强迫游泳不动时间明显延长，糖水偏好量明显降低(P＜0.05)；与模型组相比，实施例1、实施例2组的游泳不动时间延长，糖水偏好量降低。

表7忍冬藤复方对CUMS大鼠抑郁样行为的影响(

n＝15)

注：与模型组比较^**P<0.01，^*P<0.05

3.2忍冬藤复方对CUMS大鼠脑内5-HT、DA和NE的含量的影响

与对照组相比，模型组脑组织的5-HT、DA和NE含量明显降低(P＜0.05)；与模型组相比，盐酸氟西汀组和实施例1、实施例2组的5-HT、DA和NE含量明显增加(P＜0.05)，见表8。

表8忍冬藤复方对CUMS大鼠抑郁样行为的影响(

n＝10)

注：与模型组比较^**P<0.01，^*P<0.05

结论：本发明中，实施例1组及实施例2组有明显减低血清尿酸、促进尿酸排泄，及黄嘌呤氧化酶抑制作用，对高尿酸血症及痛风性关节炎均有明显治疗作用；并能降低血清中BUN、Cr水平，对肾脏有一定的保护作用；施例1组及实施例2组还可以明显改善类风湿性关节模型的关节肿胀度及血清中IL-6、TNF-α水平，降低关节病变评分；施例1组及实施例2组可以改善抑郁模型大鼠的行为学评分，并增加大鼠脑组织中5-HT、DA和NE含量。综上所以所述本发明实施例1、实施例2有治疗痛风、高尿酸血症、保护肾脏、治疗类风湿性关节炎以及抗抑郁作用。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出：对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (6)

1.一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方的制备方法，其特征在于，由以下组分组成：忍冬藤30~50重量份，葡萄藤叶30~50重量份，姜黄10~20重量份，牡荆叶10~20重量份，重齿当归10~20重量份，非洲鼠尾草10~15重量份，麻绞叶地上部分20~30重量份，泽泻1~3重量份，紫龙胆根皮5~10重量份，小叶蛇葡萄5~10重量份，大豆25~35重量份，商陆3~6重量份，贯叶金丝桃5~10重量份，膜荚黄芪10~20重量份；

其制备步骤如下：

S01，取上述重量份的忍冬藤，姜黄，重齿当归，非洲鼠尾草，麻绞叶地上部分，泽泻，紫龙胆根皮，小叶蛇葡萄和商陆，加入10~20倍量的70~85%乙醇热回流提取至少2次，每次提取2~4h，合并提取液，减压浓缩至浓缩液热测密度为1.08~1.12，停止浓缩，静置至室温后过滤，滤液中加入石油醚萃取2~5次，每次石油醚萃取液的加入量为滤液重量的1~2倍量，每次萃取时间为至少30min，石油醚萃取完成后，取滤液层，滤液层过非极性大孔吸附树脂柱，非极性大孔吸附树脂柱的径高比为1：（4~6），上次流速为3~5mL/min，上样完成后静态吸附6~10h，然后依次水洗8~15个柱体积，20~30%乙醇洗脱4~8个柱体积，60~70%乙醇洗脱3~5个柱体积，收集60~70%乙醇洗脱液，减压浓缩至无醇味后，干燥，干燥品采用纯乙醇或纯甲醇超声复溶，复溶溶剂的加入量为干燥品重量的3~5倍，复溶温度为50~60℃，超声复溶10~20min后，取出复溶溶液，放于-5~0℃冰箱静置过夜，次日取出，过滤，滤液中逐滴加入相当于复溶溶剂0.3~0.5倍量的乙酸乙酯或丙酮，边加边搅拌，滴加完毕后，室温静置2~3h后过滤，滤液浓缩干燥，得浸膏粉Ⅰ；

S02，取上述重量份的葡萄藤叶，牡荆叶，大豆，贯叶金丝桃和膜荚黄芪，加入5~10倍量的纯化水，完全浸渍后，常温超声提取至少3次，每超声5~10min停止5~10min，如此往复，至每次提取总时间为30~60min，超声功率为120~180W，合并超声提取液，减压浓缩至热测密度为1.06~1.10，停止浓缩，将浓缩液转移至烧杯，自然晾凉至室温后过滤，滤液中加入活性炭柱状颗粒，活性炭柱状颗粒的加入量为原料总重的0.5~2%，磁力搅拌吸附至少4h，吸附次数为2~3次，吸附完成后，滤除活性炭柱状颗粒，吸附后滤液过极性大孔吸附树脂，极性大孔吸附树脂柱的径高比为1：（6~8），上次流速为2~4mL/min，上样完成后静态吸附2~3h，然后依次水洗5~7个柱体积，5~10%乙醇洗脱至少10个柱体积，收集5~10%乙醇洗脱液，减压浓缩至无醇味后，过滤，滤液干燥，得浸膏粉Ⅱ；

S03，将浸膏粉Ⅰ和浸膏粉Ⅱ混合均匀后，得忍冬藤复方，再加入辅料，配制成忍冬藤复方制剂。

2.根据权利要求1所述的一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方的制备方法，其特征在于，所述非极性大孔吸附树脂包括D101，HPD100，AB-8，X-5或H103。

3.根据权利要求1所述的一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方的制备方法，其特征在于，所述极性大孔吸附树脂包括NKA-9，S-8或HPD-500。

4.根据权利要求1所述的一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方的制备方法，其特征在于，所述忍冬藤复方制剂的剂型包括片剂、颗粒剂、胶囊剂或丸剂。

5.根据权利要求1所述的一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方的制备方法，其特征在于，所述活性炭柱状颗粒的粒径为1~3mm。

6.根据权利要求1~5任一项所述的一种具有抗抑郁作用的忍冬藤复方的制备方法获得的忍冬藤复方在制备抗抑郁制剂中的应用。

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