CN109152728A - 口腔内环境改善用组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明的目的在于提供新型的口腔内环境改善用组合物。根据本发明，提供包含丙酸菌的发酵物作为有效成分的口腔内环境的改善用组合物。本发明的组合物能够以食品组合物的形式提供。丙酸菌优选为费氏丙酸杆菌(Propionibacterium freudenreichii)，发酵物优选为乳清发酵物。

Description

口腔内环境改善用组合物
本申请享受作为在先日本申请特愿2016-59662(申请日：2016年3月24日)的优先权的权益，通过引用其全部公开内容作为本说明书的一部分。
技术领域
本发明涉及口腔内环境改善用组合物，更详细而言，涉及口腔内环境改善用的食品组合物。
背景技术
近些年，消费者对口腔护理的关注提高，其中关于尤其以口臭护理为目的的商品，除了牙膏、漱口液之外，口腔清凉糖果的市场继续扩大。在以抑制口臭为目的的代表性的口腔清凉糖果中配混有薄荷香料、薄荷醇等赋予清凉感的成分，是可以得到暂时的清爽感/爽快感、从而可以得到减少口臭那样的体感的商品。
然而，由上述那样的口腔清凉糖果得到的体感是通过起因于赋予清凉感的配混成分的暂时的爽快感而实现的，从而无法从根本上解决口臭。另外，即使能使用包含杀菌成分的现有型的漱口剂局部或者暂时地排除口腔细菌，也有从其它部位传播·附着口腔细菌的担心，此外，由于使通过杀菌剂稳定的细菌菌群散乱，反而还有容易使病原菌附着的担心(非专利文献1)。
另一方面，已知口腔内除了口臭致病菌、牙周病致病菌等口腔内病原菌之外，作为口腔内常在菌(益生菌)还生存有双歧杆菌。然而，迄今尚未报道口腔内双歧杆菌的增殖会对口腔内环境产生何种影响。
现有技术文献
非专利文献
非专利文献1：光岡知足：《プロバイオティクス·プレバイオティクス·バイオジェニクス》(益生菌·益生元·益源素),财团法人日本双歧杆菌中心,2011,263-265
发明内容
本发明的目的在于提供新型的口腔内环境改善用组合物。
本发明人等发现：丙酸菌的发酵物促进源自人口腔的双歧杆菌属细菌的增殖；通过让被检者摄取含有丙酸菌的发酵物的片剂，来实际上促进口腔内的双歧杆菌属细菌的增殖；进而，通过让被检者摄取含有丙酸菌的发酵物的片剂来抑制口臭且减少口臭致病菌数。本发明是基于这些见解而完成的。
根据本发明提供以下的发明。
[1]一种口腔内环境的改善用组合物和口腔内环境的改善剂(以下有时称为“本发明的组合物和制剂”)，其包含丙酸菌的发酵物作为有效成分。
[2]根据上述[1]所述的组合物和制剂，其中，丙酸菌为费氏丙酸杆菌(Propionibacterium freudenreichii)。
[3]根据上述[1]或[2]所述的组合物和制剂，其中，发酵物为乳清发酵物。
[4]根据上述[1]～[3]中任一项所述的组合物和制剂，其中，口腔内环境的改善是通过口腔内的双歧杆菌属(Bifidobacterium)细菌的增加而实现的。
[5]根据上述[1]～[4]中任一项所述的组合物和制剂，其用于抑制口臭。
[6]根据上述[1]～[5]中任一项所述的组合物和制剂，其为食品组合物。
[7]根据上述[1]～[6]中任一项所述的组合物和制剂，其为片剂的形态。
[8]根据上述[1]～[7]中任一项所述的组合物和制剂，其为适于1次摄取的包装形态。
[9]根据上述[1]～[8]中任一项所述的组合物和制剂，其为适于多次摄取的包装形态。
[10]一种丙酸菌的发酵物在制造口腔内环境改善用组合物或口臭抑制用组合物中的应用。
[11]一种口腔内环境的改善方法和口臭抑制方法，其包括：让需要改善口腔内环境或抑制口臭的对象摄取有效量的丙酸菌的发酵物或向该对象给予有效量的丙酸菌的发酵物。
根据本发明，能够提供将由丙酸菌得到的发酵物作为有效成分的口腔内环境改善用组合物和口腔内环境改善剂。本发明的组合物和制剂的有效成分是由一直以来用于制造食品的天然微生物得到的发酵物，另外，由于使用微生物而还能大量生产该发酵物，由此可以说本发明的组合物和制剂从安全性、成本的观点出发是非常有魅力的技术。
附图说明
图1是示出让被检者摄取配混有丙酸菌的乳清发酵物的片剂时的摄取前后的口腔内双歧杆菌的菌数变化的图。
图2是示出让被检者摄取配混有丙酸菌的乳清发酵物的片剂时的硫化氢浓度(A)变化和甲硫醇浓度(B)变化的图。
图3是示出让被检者摄取配混有丙酸菌的乳清发酵物的片剂时的作为口臭致病菌的具核梭杆菌的菌数变化的图。
具体实施方式
本发明的组合物和制剂是包含丙酸菌的发酵物作为有效成分而成的。用于本发明的丙酸菌的发酵物是通过培养丙酸菌而得到的发酵物，作为在培养工序中使用的培养基的营养源，可列举出：乳制品、酵母提取物、大豆提取物、它们的酶处理物等。作为培养用培养基，优选含有乳制品的蛋白质降解酶处理物的培养基。优选含有碳源的培养基，本发明中的碳源是指能被丙酸菌同化的碳源。作为能被丙酸菌同化的碳源，例如可列举出：乳糖、葡萄糖、乳酸、甘油、麸质、纤维素等，特别优选乳糖。培养开始前的培养基中的碳源含量优选4～8质量％、更优选4～7质量％、特别优选为4～6.7质量％。其中，作为含有乳糖作为碳源的培养基，可列举出：乳清粉、酪蛋白、脱脂奶粉、或者对乳清进行透析处理而减少了乳糖含量的乳清蛋白质浓缩物、或者进一步高纯度地分离了乳糖含量的乳清蛋白质分离物。这些物质可以直接使用，或者还可以进行蛋白酶处理来使用，可以通过添加如下物质来制备培养基：添加酵母提取物、胰蛋白酶解酪蛋白等蛋白胨；及葡萄糖、乳糖、乳糖的乳糖分解酶处理物等可以成为被丙酸菌同化的碳源的单糖类和/或2糖类等适量的糖类；及乳酸、甘油、麸质、纤维素、乳清矿物质等矿物质成分、根据需要添加牡蛎、生姜等富含矿物质成分的动植物性食品或其提取物。
作为用作培养用培养基的营养源的乳制品，可列举出：生奶、浓缩奶、全脂奶粉、脱脂奶、脱脂奶粉、乳蛋白浓缩物(MPC：milk protein concentrate))、酪蛋白、乳清、浓缩乳清、乳清蛋白质浓缩物(WPC)、乳清蛋白分离物(WPI)和乳清粉等，其中优选：乳清、浓缩乳清、乳清蛋白质浓缩物。本发明中将乳清、浓缩乳清或乳清蛋白质浓缩物的蛋白质降解酶处理物作为培养基的营养源的丙酸菌的发酵物称为“丙酸菌的乳清发酵物”。
可以在本发明中使用的丙酸菌有：丙酸杆菌(Propionibacterium)属、产丙酸单孢菌(Propionicimonas)属、产丙酸菌(Propioniferax)属、产丙酸微球菌(Propionimicrobium)属、丙酸弧菌(Propionivibrio)属等，没有特别限制，优选属于丙酸杆菌属的菌。作为丙酸杆菌属的菌，例如可列举出：费氏丙酸杆菌(Propionibacterium freudenreichii)、特氏丙酸杆菌(Propionibacterium thoenii)、产丙酸丙酸杆菌(Propionibacterium acidipropionici)、詹氏丙酸杆菌(Propionibacterium jensenii)、贪婪丙酸杆菌(Propionibacterium avidum)、痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)、嗜淋巴丙酸杆菌(Propionibacterium lymphophilum)、颗粒丙酸杆菌(Propionibacterium granulosam)等丙酸菌。其中，更优选费氏丙酸杆菌、特别优选费氏丙酸杆菌IFO12424、费氏丙酸杆菌ATCC6207、费氏丙酸杆菌ET-3株(FERM BP-8115)。
费氏丙酸杆菌ET-3株于平成13年8月9日保藏在独立行政法人产业技术综合研究所专利生物保藏中心(日本茨城县筑波市东1丁目1番1中央第6号)，然后，移交国际保藏并赋予保藏号FERM BP-8115。需要说明的是，如Buda pest Notification No.282(http://www.wipo.int/treaties/en/notifications/budape st/treaty_budapest_282.html)中所记载的那样，国家高级工业科学技术学院，国际专利生物保藏中心(IPOD,NITE)从独立行政法人产业技术综合研究所专利生物保藏中心(IPOD,AIST)承接了专利微生物保藏业务，因此费氏丙酸杆菌ET-3株现在以保藏号：FERM BP-8115保藏在国家高级工业科学技术学院，国际专利生物保藏中心(IPOD,NITE)(日本千叶县木更津市上总镰足2-5-8 120号室)。
丙酸菌的发酵物的制造例如可以按以下方式实施。
·将预培养的含丙酸菌的培养液接种在培养液(1～3L)中后，进行主培养。
·进行30～40℃的培养时，以氮气0.1～1L/分钟对培养液进行喷射，以搅拌速度50～200rpm进行140～160小时厌氧培养。此时，丙酸菌接种后培养1～2天，然后还可以以0.5～20mL/小时连续添加作为任意的培养基组成成分的糖质。
·进而，优选根据需要继上述厌氧培养后进行好氧培养，此时，将氮气替换为氧气并同样地进行通气，进行110～130小时好氧培养。
·由此操作来培养丙酸菌而得到丙酸菌的培养液，进而可以根据需要在该培养液中添加抗坏血酸等抗氧化剂，用作丙酸菌发酵物。
本发明的作为有效成分的丙酸菌的发酵物是对丙酸菌进行培养而得到的，包含丙酸菌和培养物这两者。可以直接使用得到的丙酸菌的发酵物，但还可以进行适宜的浓缩、稀释、干燥等。
丙酸菌的发酵物还可以依据国际公开第2003/016544号、国际公开第2005/099725号、国际公开第2009/107380号、国际公开第2012/132913号等中记载的公知的制造方法来制造。或者还可以使用含有丙酸菌的发酵物的市售品(例如，B.G.S.POWDER(BGS粉末)·明治株式会社制)。
本发明的组合物和制剂还可以单独使用丙酸菌的发酵物、或与其它成分混合来使用。本发明的组合物和制剂中的丙酸菌的发酵物的含量(固体成分换算基准)只要可发挥口腔内环境的改善效果就没有特别限定，可以设为10～100质量％，优选为10～50质量％、更优选为10～20质量％。本发明中，本发明的制剂可以设为由丙酸菌的发酵物构成的物质，可以将本发明的组合物设为包含丙酸菌的发酵物和其它成分而成的物质。
本发明的组合物和制剂除了丙酸菌的发酵物之外，还可以包含能被口腔内的双歧杆菌同化的糖类。作为这样的糖类，可列举出：葡萄糖、半乳糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、蜜二糖、乳糖等单糖、二糖类；棉子糖、乳酮糖、低聚果糖、低聚异麦芽糖、半乳寡聚糖等选择性地使双歧杆菌增殖的低聚糖、帕拉金糖。本发明的组合物和制剂中的能同化口腔内的双歧杆菌的糖类的含量(固体成分换算基准)只要可发挥口腔内环境的改善效果就没有特别限定，可以设为0～80质量％，优选为0～60质量％。
本发明的组合物用于改善口腔内环境，能够用作口腔内环境改善剂。此处，口腔内环境的改善是指包括口腔内细菌菌群的改善的意思，例如包括：口臭致病菌、牙周病相关菌等口腔内病原菌的总菌数的减少和/或增殖的抑制、口腔内双歧杆菌等的所谓的益生菌的总菌数的增加和/或增殖的促进。
此处，作为口臭致病菌，可列举出：具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum)等梭杆菌属细菌、殊异韦荣球菌(Veillonella dispar)等韦荣球菌属细菌(Veillonellabacteria)等。
另外，作为牙周病相关菌，可列举出：牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)等卟啉单胞菌属细菌、中间普雷沃菌(Prevotella intermedia)、变黑普氏菌(Prevotella nigrescens)等普雷沃菌属细菌、齿垢密螺旋体(Treponema denticola)、福赛斯坦纳菌(Tannella forsythensis)、伴放线放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans)等。
作为口腔内的双歧杆菌，可列举出：齿双歧杆菌(Bifidobacterium dentium)、青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、膀胱双歧杆菌(Bifidobacterium urinalis)等双歧杆菌属细菌。
根据本发明的组合物和制剂，能够减少口臭致病菌、牙周病相关菌等口腔内病原菌的总菌数，或者抑制增殖，进而，能够预防或治疗口臭、牙周病等口腔内疾患。即，本发明的组合物和制剂能用于抑制口臭，能够用作口臭抑制剂。此处，“口臭”是指人感觉到的呼气中包含的口臭成分，与呼气一起从口腔中散发的恶臭的总称。作为该恶臭的代表性成分，可列举出硫化氢、甲硫醇之类的挥发性含硫化合物。
本发明的组合物和制剂只要发挥具有口腔内环境的改善作用，其形态、形状就没有特别限制，可以是固体状的形态，还可以是液体、半液体、凝胶状、糊剂状、粉末状等的形态。作为本发明的组合物和制剂，例如可列举出：片剂(例如，锭剂、咀嚼片)、口香糖(gum)、树胶(gummi)、软糖、压片糖、饮料、酸奶、果冻等的食品组合物、可食性膜、牙膏剂、漱口剂、漱口药、义齿清洗剂、口腔崩解片、凝胶等口腔护理组合物，从携带性、口腔内滞留性的观点出发，优选：片剂、口香糖、树胶、软糖。本发明的组合物和制剂根据其剂型，除了丙酸菌的发酵物以外可以配混其它公知的添加剂作为任意成分。
将本发明的组合物和制剂以片剂的形式提供时，除了丙酸菌的发酵物以外，可以配混选自糖质、赋形剂、甜味剂、酸味剂、香料、着色剂、保存剂、稳定化剂、乳化剂、植物提取物、果汁粉末等中的1种或2种以上的成分并利用常规方法来制造。
丙酸菌的发酵物具有优异的口腔内环境的改善作用，因此还可以以在日常摄取的食品中、作为营养强化剂摄取的食品中含有的方式来提供。即，本发明的组合物和制剂可以以食品组合物的形式来提供。以食品组合物的形式提供本发明的组合物和制剂时，本发明的组合物和制剂除了配混作为有效成分的丙酸菌的发酵物以外，可以依据该食品的通常的制造步骤来制造。
将本发明的作为有效成分的丙酸菌的发酵物以食品组合物形式提供时，可以通过在食品中直接含有丙酸菌的发酵物来制备，该食品组合物是含有有效量的丙酸菌的发酵物的食品。此处，“含有有效量”的丙酸菌的发酵物是指，对于各食品在摄取通常食用量的情况下，以规定的范围摄取丙酸菌的发酵物那样的含量。需要说明的是，将本发明的作为有效成分的丙酸菌的发酵物本身或者包含其的组合物添加在摄取者的食品(例如，饮料、酸奶)中来制成食品组合物的方式也包括在本发明的范围内。
本发明的组合物和制剂可以以如下方式提供：包含对于改善口腔内环境有效的1次摄取量的丙酸菌的发酵物而成的组合物和制剂。对于改善口腔环境有效的1次量的丙酸菌的发酵物的摄取量、每天的摄取次数可以依赖于摄取者的年龄、症状、体感来确定。若进行示例，对于改善口腔内环境有效的丙酸菌的发酵物1次摄取量以固体成分换算质量计为100mg～1000mg/次、优选为100mg～300mg/次。另外，对于口腔内环境的改善有效的每天的丙酸菌的发酵物的摄取次数为1～10次/天、优选为1～5次/天。
以包含1次量的摄取量的丙酸菌的发酵物的组合物的形式提供本发明的组合物和制剂时，期望的是以能够摄取1次有效摄取量的方式以单位包装形态提供该组合物。以包装形态提供时，期望的是以包装形态提供有关摄取量的说明以便能够摄取1次有效摄取量、或与有该说明的资料一起提供。另外，本发明的组合物和制剂持续摄取而能够发挥显示出更优异的口腔内环境的改善效果。例如，通过多个包装来提供1天有效摄取量时，为了方便摄取，还可以以套装形式提供1天量的有效摄取量的多个包装。
用于提供本发明的组合物和制剂的包装形态只要是限定一定量的形态就没有特别限定，例如可列举出：包装纸、包装片、袋、软皮袋、纸容器、罐、瓶、胶囊、塑料盒等能收纳的容器等。
对于本发明的组合物和制剂，摄取者自身可以根据体感确定摄取量来摄取。因此，本发明的组合物和制剂优选以能够根据摄取者的喜好而可调整摄取量的形态提供，即以适于多次摄取的形态提供，作为这样的形态，例如可列举出：片剂、粉末、口香糖、树胶、软糖。另外作为适于多次摄取的包装形态，可列举出：塑料盒、罐、瓶、包装纸等。例如，本发明的组合物和制剂可以以含有多次量(例如，10～15次量)的摄取量的多个片剂的形式来提供，此时的片剂优选通过1个～多个(例如，1～10个左右)可摄取1次摄取量那样的形态。多次(例如，10～15次)摄取量的片剂可以制成前述那样的包装形态中的任一种，从保存和携带的便利性和摄取的容易性方面考虑，优选塑料盒。
本发明的组合物和制剂为了更好地发挥其效果，优选持续摄取3天以上，给药和摄取期间更优选为1～2周、特别优选为1～4周。此处，“持续地”是指每天持续摄取经确定的量。以包装形态提供本发明的组合物和制剂时，为了持续地摄取还可以以套装的形式提供一定期间(例如，1周)的有效摄取量。
根据本发明的另一方案，提供一种口腔内环境的改善方法和口臭抑制方法，其包括让需要口腔内环境的改善或口臭抑制的对象摄取有效量的丙酸菌的发酵物或者向该对象给予有效量的丙酸菌的发酵物。本发明的口腔内环境的改善方法和口臭抑制方法可以依据有关本发明的组合物和制剂的记载来实施。摄取或给药对象是包括人的哺乳动物、人或非人哺乳动物。
根据本发明的另一方案，提供一种丙酸菌的发酵物在制造口腔内环境的改善用组合物或口臭抑制组合物中的应用。根据本发明，还提供丙酸菌的发酵物在制造口腔内环境改善剂或口臭抑制剂中的应用。根据本发明进一步提供用于改善口腔内环境或抑制口臭的丙酸菌的发酵物。根据本发明进一步提供丙酸菌的发酵物作为口腔内环境改善剂或口臭抑制剂的应用。本发明的这些应用可以依据有关本发明的组合物和制剂中的记载来实施。
实施例
基于以下的例子对本发明进行更具体地说明，但本发明不限定于这些例子。
例1：通过丙酸菌的乳清发酵物得到的源自人口腔的双歧杆菌属细菌的增殖促进 作用的确认
(1)丙酸菌的乳清发酵物的制备
依据国际公开第2012/132913号的实施例1制备了丙酸菌的乳清发酵物。即，在30℃、厌氧条件下使费氏丙酸杆菌ET-3株(FERM BP-8115)活化并进行48小时预培养，然后进一步在30℃、厌氧条件下培养72小时。将培养物离心分离(离心分离条件：8000rpm、4℃、10分钟)，回收培养上清液，用过滤器进行灭菌，得到培养上清液。将该培养上清液用作丙酸菌的乳清发酵物。需要说明的是，确认了丙酸菌的乳清发酵物中包含1,4-二羟基-2-萘甲酸(DHNA)作为主要的活性成分。
(2)试验方法
在MN1培养基5mL中以DHNA为25或50ng/mL的方式添加丙酸菌的发酵物，进而，分别接种表1所示的源自人口腔的各种双歧杆菌属细菌或对照菌(具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum)和牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis))10～30μL，在37℃下进行培养。培养15～21小时后使用分光光度计(Beckman公司制)测定了吸光度。
上述MN1培养基通过如下方式制备：将胰化酪蛋白胨2g、植物蛋白胨0.75g、酵母提取物1.25g、K2HPO40.5g、KH2PO40.75g、MgCl2·6H2O 0.125g、L-半胱氨酸·盐酸盐0.125g、FeSO4·7H2O 2.5mg、葡萄糖20g溶解在纯水1000mL中，通过盐酸或氢氧化钠调整至pH6.5后，进行121℃、15分钟高压釜处理。
另外，乳清发酵物中的DHNA的含量使用带有紫外分光光度型检测器的高效液相色谱(HPLC-UV)分析装置并利用以下的HPLC分析条件进行了测定。
＜HPLC分析条件＞
检测波长：UV254nm
柱：CAPCELL PAK C18MGII(i.d.2.0×100mm、3μm；资生堂公司制)
柱温：45℃
流动相：使用在甲醇(高效液相色谱用)、纯化水和乙酸的混合液(混合比(体积)＝50：49：1)1L中添加二硫苏糖醇50mg并溶解而成的溶液
流速：0.2mL/分钟
试样溶液注入量：5μL
(3)结果
将该结果示于表1。
[表1]
表1:通过丙酸菌发酵物得到的人口腔内双歧杆菌属细菌的增值促进作用的评价
由表1的结果可知，通过添加丙酸菌的发酵物而可促进源自人口腔的各种双歧杆菌属细菌的增殖。另一方面，可知的是未促进作为口臭致病菌已知的具核梭杆菌、作为牙周病菌已知的牙龈卟啉单胞菌的增殖。根据以上结果启示出：丙酸菌的发酵物具有不促进口腔内病原菌的增殖而促进口腔内双歧杆菌属细菌的增殖的作用。
需要说明的是，本发明人等确认了：将口腔内双歧杆菌属细菌与作为牙周病菌已知的牙龈卟啉单胞菌进行共培养时，由于双歧杆菌属细菌增殖而可抑制牙龈卟啉单胞菌的增殖(省略数据)。因此可认为：通过丙酸菌的发酵物来促进口腔内双歧杆菌属细菌的增殖，由此能够抑制牙龈卟啉单胞菌等口腔内病原菌的增殖。
例2：丙酸菌的乳清发酵物的摄取试验
(1)试验食品
利用常规方法制备配混了以丙酸菌的乳清发酵物作为主要成分的粉末的片剂，作为试验食品使用。在该片剂中，每1粒(500mg)以固体成分质量计配混了95mg乳清发酵物(依据例1的(1)制备)，且配混了308mg葡萄糖。
(2)试验方法
将20岁～50岁的成人男性9名作为被检者，将试验食品以每天3粒2周不咀嚼地舔舐摄取(口腔滞留时间大约为3～5分钟左右)。摄取时机为上午、下午、晚上(18点以后)的各时间带各1粒，共计3次。将摄取开始日作为第1天，在摄取开始日前一天(第0天)、摄取第7天和摄取最终日(第14天)进行了唾液中的细菌检查。
对于细菌检查，采集刚起床后的唾液，利用实时PCR法对唾液中的双歧杆菌属细菌的菌数进行了计数。
对于得到的结果，在摄取前(第0天)和摄取后(第7天、第14天)之间进行Wilcoxon符号秩检验进行检测，危险率(p值)低于5％的情况判定为有显著差异，低于10％的情况判定为有显著差异倾向。
(3)结果
将其结果示于图1。图1的结果可知：通过摄取乳清发酵物，使唾液中(口腔内)的双歧杆菌属细菌的数量增加。由以上结果确认了通过摄取丙酸菌的乳清发酵物，从而能够促进口腔内的双歧杆菌属细菌的增殖。
例3：通过摄取含丙酸菌的发酵物的片剂得到的口腔环境改善作用的评价
对本实施例中丙酸菌的乳清发酵物对口腔环境产生的影响进行了评价。
(1)试验食品
利用常规方法制备配混有以丙酸菌的乳清发酵物作为主要成分的粉末的片剂，作为试验食品使用。在该片剂中，每1粒(900mg)以固体成分质量计配混了95mg乳清发酵物(依据例1的(1)制备)。
(2)试验方法
将20岁～50岁的成人男性9名作为被检者，将试验食品分别以每天3粒4周不咀嚼地舔舐摄取(口腔滞留时间大约为3～5分钟左右)。摄取时机为上午、下午、晚上(18点以后)的各时间带各1粒，共计3次。将摄取开始日作为第1天，在摄取开始日的前一天(第0天)、摄取第14天和摄取最终日(第28天)进行了口臭测定和唾液中的细菌检查。
对于口臭测定，使用OralChroma(Abilit-medical-and-environmental)，通过测定作为口腔气体中的口臭原因物质的挥发性硫化合物(硫化氢、甲硫醇)的浓度来进行。
对于细菌检查，采集刚起床后的唾液，利用实时PCR法对已知作为口臭致病菌的具核梭杆菌的菌数进行了计数。
对于得到的结果，在摄取前(第0天)和摄取后(第14天、第28天)之间进行Wilcoxon符号秩检验，危险率(p值)低于5％的情况判定为有显著差异，低于10％的情况判定为有显著差异倾向。
(3)结果
将口臭测定的结果示于图2。由图2的结果可知；通过摄取4周含有丙酸菌的乳清发酵物的片剂，显著地抑制了硫化氢和甲硫醇的浓度。由以上结果确认了通过摄取丙酸菌的乳清发酵物而可抑制口臭。
将细菌检查的结果示于图3。由图3的结果可知：通过摄取4周含有丙酸菌的乳清发酵物的片剂，从而使唾液中(口腔内)的具核梭杆菌的菌数减少。
由以上结果证实了通过摄取丙酸菌的发酵物从而能够改善口腔环境。
PCT/RO/134表

Claims (11)

1.一种口腔内环境的改善用组合物，其包含丙酸菌的发酵物作为有效成分。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中，丙酸菌为费氏丙酸杆菌(Propionibacterium freudenreichii)。
3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中，发酵物为乳清发酵物。
4.根据权利要求1～3中任一项所述的组合物，其中，口腔内环境的改善是通过口腔内的双歧杆菌属(Bifidobacterium)细菌的增加而实现的。
5.根据权利要求1～4中任一项所述的组合物，其用于抑制口臭。
6.根据权利要求1～5中任一项所述的组合物，其为食品组合物。
7.根据权利要求1～6中任一项所述的组合物，其为片剂的形态。
8.根据权利要求1～7中任一项所述的组合物，其为适于1次摄取的包装形态。
9.根据权利要求1～8中任一项所述的组合物，其为适于多次摄取的包装形态。
10.一种丙酸菌的发酵物在制造口腔内环境改善用组合物或口臭抑制用组合物中的应用。
11.一种口腔内环境的改善方法和口臭抑制方法，其包括：让需要改善口腔内环境或抑制口臭的对象摄取有效量的丙酸菌的发酵物或向该对象给予有效量的丙酸菌的发酵物。
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