CN109091413A - 一种透皮性a型肉毒毒素、其制备方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种透皮性A型肉毒毒素、其制备方法及应用,涉及医学美容技术领域。该透皮性A型肉毒毒素的原料包括透皮肽、A型肉毒毒素和玻尿酸,透皮肽的氨基酸序列为ACSSTPSKHCG。其通过将透皮肽和A型肉毒毒素共用达到瘦脸的效果,且由二者和玻尿酸形成的配方作为瘦脸产品应用时可以通过涂抹的方式起到瘦脸的效果,避免了注射带来的不良影响,适合于在医疗美领域推广应用。
Description
技术领域
本发明涉及医学美容技术领域,且特别涉及一种透皮性A型肉毒毒素、其制备方法及应用。
背景技术
肉毒杆菌毒素是梭状芽孢杆菌属的肉毒杆菌在厌氧条件下产生的一种生物毒素较强的高分子蛋白神经毒素。西方科学家早在1990年便报道了采用A型肉毒杆菌毒素治疗双侧咬肌肥大的经验,被认为是一种革命性新方法。从此,肉毒素开始被广泛地应用于除皱、瘦脸等整形美容外科领域。肉毒素在我国使用已有10多年,它通过失神经营养作用使咬肌萎缩、变小,从而达到瘦脸的目的。目前临床上均采用A型肉毒毒素,因为该型毒性强而稳定、易于生产精制和保存。
在实际应用中,需要专业医生将一定量的A型肉毒毒素用注射的方式,在不同的方向和角度准确注射进咬肌的准确部位。A型肉毒毒素的面部注射属于难度较高的专业医学操作,必须在美容医院进行,因此产生了较高的医疗成本,使该项美容技术难以大范围推广。
发明内容
本发明的目的在于提供一种透皮性A型肉毒毒素,旨在降低瘦脸美容的操作难度。
本发明的另一目的在于提供一种透皮性A型肉毒毒素的制备方法,其方法简便易行,适于推广应用。
本发明的第三目的在于提供透皮性A型肉毒毒素在医学美容领域的应用。
本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
本发明提出了一种透皮性A型肉毒毒素,其原料包括透皮肽、A型肉毒毒素和玻尿酸,透皮肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还提出一种透皮性A型肉毒毒素的制备方法,包括以下步骤:
将透皮肽、A型肉毒毒素、玻尿酸和水混合。
上述透皮性A型肉毒毒素在医学美容中的应用。
本发明提供的一种透皮性A型肉毒毒素的有益效果是:其通过将透皮肽和A型肉毒毒素共用达到瘦脸的效果,且由二者和玻尿酸形成的配方作为瘦脸产品应用时可以通过涂抹的方式起到瘦脸的效果,避免了注射带来的不良影响,且瘦脸的效果十分明显,适合于在医疗美领域推广应用。
本发明还提供了一种透皮性A型肉毒毒素的制备方法,方法简便易行,适合于推广应用。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本发明实施例提供的一种透皮性A型肉毒毒素、其制备方法及应用进行具体说明。
本发明实施例提供了一种透皮性A型肉毒毒素,其原料包括透皮肽、A型肉毒毒素和玻尿酸,透皮肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
发明人发现,采用氨基酸序列为ACSSTPSKHCG的透皮肽和A型肉毒毒素配合可以起到很好的瘦脸效果,最为重要的是可以通过涂抹的作用方式达到效果。透皮肽作为一种工具,可以和A型肉毒毒素配合起到瘦脸的效果。
具体地,透皮性A型肉毒毒素的原料还包括水,在每毫升水中,透皮肽的用量为45-55mg,玻尿酸的用量为0.7-1.2mg,A型肉毒毒素活力为13-17U。优选地,在每毫升水中,透皮肽的用量为48-52mg,玻尿酸的用量为0.9-1.1mg,A型肉毒毒素活力为14-16U。
需要补充的是,在透皮性A型肉毒毒素的原料配方中各组分的用量需要严格控制,透皮肽的用量过大或过小均会影响A型肉毒毒素的作用效果,降低产品性能。
活性单位U是一种肉毒毒素的计量单位。肉毒毒素并没有一个确切的分子结构,因此在计量的时候只能用活性单位U进行计量。本专利中提到的肉毒毒素指的是美国Allergen公司生产的,属于市购产品。而实施例中的活力单位U也指的是美国Allergen公司的活力标准。如果换用其他品牌肉毒毒素,安全起见,需要与上述产品进行活力换算。
本发明实施例提供的一种透皮性A型肉毒毒素的制备方法,包括以下步骤:将透皮肽、A型肉毒毒素、玻尿酸和水混合。在实际制备中是先采用多肽固相合成法合成透皮肽,然后再与其他原料混合均匀。
具体地,多肽固相合成法为现有的合成多肽的方法,根据需要合成多肽的序列采用此常规的方法即可合成。
在原料混合过程中温度不宜过高,可以在常温下进行,也可以将温度控制在25-40℃。混合温度不宜超过50℃,否则容易诱发透皮肽降解。
采用本发明实施例提供的配方和制备方法得到的透皮性A型肉毒毒素在医学美容中可以得到应用,如将透皮性A型肉毒毒素作用于脸部咬肌处,能够起到瘦脸的效果。
具体地,透皮性A型肉毒毒素在应用过程中,包括将透皮性A型肉毒毒素涂覆于脸部咬肌处。透皮性A型肉毒毒素在涂覆过程中的用量为每1cm2面积皮肤给药0.08-0.12mL。最终给药是将本发明实施例中的配方做成制剂,涂抹于脸部咬肌处。
需要说明的是,肉毒毒素在透皮肽的作用下,直接透过皮肤抵达咬肌部位,达到缩小咬肌体积,缩小下颌角的瘦脸目的。相比传统技术,新技术具有成本低、适用性广、不需要专业医生和便于推广的优点,可以造福更多需要瘦脸美容的人群。
在其他实施例中,透皮性A型肉毒毒素的给药方式不限于涂覆,也可以采用注射等其他方式,但是本发明实施例提供的透皮性A型肉毒毒素的最大优势在于可以通过涂抹的方式给药达到瘦脸的效果,使用安全可靠。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供一种透皮性A型肉毒毒素,其包括水1mL、透皮肽45mg、玻尿酸0.7mg和A型肉毒毒素;其中A型肉毒毒素的活力为13U,透皮肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;SEQ ID NO.1的氨基酸序列为:ACSSTPSKHCG。
本实施例提供一种透皮性A型肉毒毒素的制备方法,其包括以下步骤:
将上述用量的水、透皮肽、玻尿酸和A型肉毒毒素在25℃的温度条件下混合,保证A型肉毒毒素的活力。
实施例2
本实施例提供一种透皮性A型肉毒毒素,其包括水1mL、透皮肽55mg、玻尿酸1.2mg和A型肉毒毒素;其中A型肉毒毒素的活力为17U,透皮肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;SEQ ID NO.1的氨基酸序列为:ACSSTPSKHCG。
本实施例提供一种透皮性A型肉毒毒素的制备方法,其包括以下步骤:
将上述用量的水、透皮肽、玻尿酸和A型肉毒毒素在40℃的温度条件下,保证A型肉毒毒素的活力。
实施例3
本实施例提供一种透皮性A型肉毒毒素,其包括水1mL、透皮肽48mg、玻尿酸0.9mg和A型肉毒毒素;其中A型肉毒毒素的活力为14U,透皮肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;SEQ ID NO.1的氨基酸序列为:ACSSTPSKHCG。
本实施例提供一种透皮性A型肉毒毒素的制备方法,其包括以下步骤:
将上述用量的水、透皮肽、玻尿酸和A型肉毒毒素在35℃的温度条件下,保证A型肉毒毒素的活力。
实施例4
本实施例提供一种透皮性A型肉毒毒素,其包括水1mL、透皮肽52mg、玻尿酸1.1mg和A型肉毒毒素;其中A型肉毒毒素的活力为16U,透皮肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;SEQ ID NO.1的氨基酸序列为:ACSSTPSKHCG。
本实施例提供一种透皮性A型肉毒毒素的制备方法,其包括以下步骤:
将上述用量的水、透皮肽、玻尿酸和A型肉毒毒素在35℃的温度条件下,保证A型肉毒毒素的活力。
实施例5
本实施例提供一种透皮性A型肉毒毒素,其包括水1mL、透皮肽50mg、玻尿酸1.0mg和A型肉毒毒素;其中A型肉毒毒素的活力为15U,透皮肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;SEQ ID NO.1的氨基酸序列为:ACSSTPSKHCG。
本实施例提供一种透皮性A型肉毒毒素的制备方法,其包括以下步骤:
将上述用量的水、透皮肽、玻尿酸和A型肉毒毒素在35℃的温度条件下,保证A型肉毒毒素的活力。
对比例1
本对比例提供一种透皮性A型肉毒毒素,其与实施例5大致相同,不同之处仅在于透皮肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示;SEQ ID NO.2的氨基酸序列为:ACSTSPSKHCG。
对比例2
本对比例提供一种透皮性A型肉毒毒素,其与实施例5大致相同,不同之处仅在于透皮肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示;SEQ ID NO.3的氨基酸序列为:ACSTTPSKHCG。
对比例3
本对比例提供一种瘦脸产品,其与实施例5大致相同,不同之处仅在于不包括透皮肽。
试验例1
将实施例1-5和对比例1-3中制备得到的透皮性A型肉毒毒素或瘦脸产品进行性能测试,测试结果见表1。
测试方法:取健康的大鼠90只,平均分成9组,分别对应空白组、实施例1-5和对比例1-3。每组均在大鼠咬肌部位皮肤处,每1cm2面积皮肤处给0.1mL产品。连续给药30日,给药过程中各组动物定量进食饮水;空白组不做任何处理,保持正常的进食和饮水。实验结束后,处死动物,分离各组动物咬肌,进行厚度检验与质量检测。
检测第一天进行处理前对小鼠的情况进行了预先测定,小鼠的体重大致相同,约为200g;咬肌的质量也大致相同,约为6g;咬肌的厚度约为3mm。小鼠的生长状况和健康状况均大致相同,使整个检测试验误差性更小。
表1降低咬肌厚度和质量的测试结果
由表1可知,采用本发明实施例提供的透皮性A型肉毒毒素配方和制备方法制备得到的产品对于降低咬肌厚度和质量具有明显的效果,且不会引起全身性体重变化。此外,本发明实施例的配方中透皮肽的序列选择对于保证瘦脸效果具有重要影响。
试验例2
将实施例5制备得到的透皮性A型肉毒毒素进行药理性试验,测试其对皮肤刺激性。
测试方法:取大鼠16只,按性别和体质量分层随机分为2组,即完整皮肤组与破损皮肤组。给药24h前将背部两侧用脱毛剂脱毛,脱毛面积每侧约3cm×3cm破损皮肤组大鼠两侧脱毛区消毒后,用手术刀作井字状划破皮肤,以渗血为度。取待测样品涂抹在左侧脱毛区,用1层蜡纸和2层纱布覆盖,胶布与纱布固定,右侧脱毛区作为对照。4h后去掉药物,用温水轻轻将受试部位清洗干净,观察去除药物或辅料后1h、24h、48h、72h大鼠的皮肤反应情况,根据表2进行半定量评分,并根据表3进行皮肤刺激程度评价。
去除药物1h、24h、48h、72h后,完整皮肤组与破损皮肤组大鼠未见明显红斑与水肿反应,2组皮肤刺激性评分比较差异无统计意义(p>0.05)。提示药物对大鼠无刺激性,结果见表4。
表2皮肤刺激性和过敏性评分标准
表3皮肤刺激性评价标准
分值 | 0.00-0.30 | 0.30-1.00 | 1.00-4.00 | 4.00-6.00 |
刺激性 | 无 | 轻度 | 中毒 | 重度 |
表4药物对大鼠皮肤的刺激性试验结果
由表4可知,待测药物对大鼠完整皮肤与破损皮肤均未出现明显的刺激性反应,表明该制剂皮肤给药具有较好的安全性。
试验例3
将实施例5制备得到的透皮性A型肉毒毒素进行药理性试验,测试其对皮肤过敏性。
测试方法:取大鼠16只,按性别和体质量分层随机分为2组,即待测药物组与阳性对照组。给药前24h将豚鼠背部左侧用脱毛剂脱毛,面积3cm×3cm。将待测药物或1%的2,4-二硝基氯苯0.2mL滴于2.5cm×2.5cm的滤纸上,滤纸贴于左侧脱毛区,用1层蜡纸和2层纱布覆盖,胶布与纱布固定。分笼饲养,接触6h后去除药物,1次/d,连续3d。第16天豚鼠背部右侧脱毛,脱毛面积及用药方法同上。用药6h后清除药物观察,并于24,48,72h观测豚鼠皮肤过敏反应情况。按表2记录过敏反应分值并计算过敏发生率,按表5评价药物的过敏性。
使用2,4-二硝基氯苯激发6h后,大鼠皮肤出现不同程度的红斑或水肿,随着时间的延长而加重,48h达到高峰;用药组大鼠激发6h、24h、48h、72h后,皮肤均未见明显的红斑或水肿。与阳性对照组比较,药物各时间点皮肤过敏性评分显著降低(p>0.05)。提示药物对大鼠无过敏性。具体实验结果见表6。
表5皮肤过敏性评价标准
过敏发生率 | 0-10 | 10-30 | 30-60 | 60-80 | 80-100 |
过敏性 | 无 | 轻度 | 中度 | 高度 | 极度 |
表6药物的过敏性测试
由表6可知,待测药物对豚鼠皮肤未见明显过敏性反应,表明该制剂皮肤给药具有较好的安全性。
综上所述,本发明提供的一种透皮性A型肉毒毒素,其通过将透皮肽和A型肉毒毒素共用达到瘦脸的效果,且由二者和玻尿酸形成的配方作为瘦脸产品应用时可以通过涂抹的方式起到瘦脸的效果,避免了注射带来的不良影响,且瘦脸的效果十分明显,适合于在医疗美领域推广应用。
本发明还提供了一种透皮性A型肉毒毒素的制备方法,方法简便易行,适合于推广应用。
以上所描述的实施例是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围,而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
SEQUENCE LISTING
<110> 深圳市新鸿镁医疗器械有限公司
<120> 一种透皮性A型肉毒毒素、其制备方法及应用
<160> 3
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工合成
<400> 1
Ala Cys Ser Ser Thr Pro Ser Lys His Cys Gly
1 5 10
<210> 2
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工合成
<400> 2
Ala Cys Ser Thr Ser Pro Ser Lys His Cys Gly
1 5 10
<210> 3
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工合成
<400> 3
Ala Cys Ser Thr Thr Pro Ser Lys His Cys Gly
1 5 10
Claims (10)
1.一种透皮性A型肉毒毒素,其特征在于,其原料包括透皮肽、A型肉毒毒素和玻尿酸,所述透皮肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的透皮性A型肉毒毒素,其特征在于,所述透皮性A型肉毒毒素的原料还包括水;
在每毫升水中,所述透皮肽的用量为45-55mg,所述玻尿酸的用量为0.7-1.2mg,所述A型肉毒毒素活力为13-17U。
3.根据权利要求1所述的透皮性A型肉毒毒素,其特征在于,在每毫升水中,所述透皮肽的用量为48-52mg,所述玻尿酸的用量为0.9-1.1mg,所述A型肉毒毒素活力为14-16U。
4.根据权利要求2或3中所述的透皮性A型肉毒毒素的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
将所述透皮肽、所述A型肉毒毒素、所述玻尿酸和水混合。
5.根据权利要求4所述的透皮性A型肉毒毒素的制备方法,其特征在于,原料的混合温度为25-40℃。
6.根据权利要求4所述的透皮性A型肉毒毒素的制备方法,其特征在于,所述透皮肽采用多肽固相合成法合成。
7.权利要求1-6中任一项所述的透皮性A型肉毒毒素在医学美容中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述医学美容过程包括将所述透皮性A型肉毒毒素作用于脸部咬肌处。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述透皮性A型肉毒毒素在应用过程中,包括将所述透皮性A型肉毒毒素涂覆于脸部咬肌处。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述透皮性A型肉毒毒素在涂覆过程中的用量为每1cm2面积皮肤给药0.08-0.12mL。
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