CN109081842A - 一种深海真菌来源蒽醌类化合物及其在制备抗过敏药物中的应用 - Google Patents

一种深海真菌来源蒽醌类化合物及其在制备抗过敏药物中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种深海真菌来源蒽醌类化合物及其在制备抗过敏药物中的应用。所述深海真菌来源蒽醌类化合物，其结构如式(I)所示，可用于制备抗过敏药物。

Description

一种深海真菌来源蒽醌类化合物及其在制备抗过敏药物中的 应用
技术领域
本发明属于海洋微生物药物的应用领域，更具体地说，本发明涉及一种蒽醌类化合物及其在制备抗过敏药物中的应用。
背景技术
过敏是指某种特定物质(如食物、药物等)进入人体后，免疫系统对过敏原进行特异性免疫应答所致的可累及全身不同器官的可重复性不良反应，可引起荨麻疹、鼻塞鼻痒、喘息、恶心呕吐、心动过速等多系统反应。这些反应可以是轻微的局部反应，也有可能是危及生命的严重反应。
过敏是一个全球性的健康问题，患者数量以百万计。流行病学研究结果显示近20年过敏的患病率不断升高，目前推荐的过敏治疗方法仍以严格禁止接触过敏原为主。但目前医学上能明确确定的过敏源种类有限，对于未明过敏源的过敏反应，仍是防不胜防。因此，人们越来越迫切地希望能找到治疗乃至根治的方法。
发明内容
本发明的目的在于：克服现有技术中存在的上述问题，提供一种蒽醌类化合物在抗过敏药物中的应用。
为了实现上述发明目的，本发明提供了一种蒽醌类化合物及其盐类在制备抗过敏药物中的应用，所述蒽醌类化合物的结构式如式(I)所示：
具体地，上述蒽醌类化合物或其盐类可以用于制备抗过敏的药物。
本发明还提供了一种抗过敏的药物，其包括有效剂量的作为活性成分的蒽醌类化合物及其盐类中的一种或几种的组合，以及药学上可以接受的载体。
本发明所述“盐类”，包括“药学上可接受的盐类”。
本发明的蒽醌类化合物从深海真菌构巢曲霉Aspergillus nidulans发酵物中分离得到，经详细的结构解析，确定为结构如式(I)所示，化学式为C19H12O7。
经研究发现上述蒽醌类化合物具有很强的抑制肥大细胞脱颗粒的作用，可用于制备抑制肥大细胞脱颗粒的药物。肥大细胞是参与过敏反应的主要效应细胞，其胞浆含有大量嗜碱性颗粒，当受到免疫介导或药理性介导的刺激时，能发生脱颗粒释放各种活性介质，如组织胺、白三烯、血小板活化因子、缓激肽等，从而导致机体的各种过敏反应症状。进一步计算可知化合物具有很强的抗过敏活性，可用于制备和开发抗过敏药物以治疗过敏性疾病。
本发明还提供一种制备上述蒽醌类化合物的方法，包括以下步骤：
S1、将构巢曲霉Aspergillus nidulans进行发酵培养，得到发酵物；所述构巢曲霉Aspergillus nidulans保藏于中国海洋微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为MCCC3A00050；
S2、将发酵物萃取，所得萃取物经分离纯化，得到所述蒽醌类化合物。
具体地，上述方法可以采用以下步骤：
(1)将构巢曲霉Aspergillus nidulans，加入燕麦中培养，加乙酸乙酯提取，经石油醚及二氯甲烷除脂，浓缩得到发酵粗提物；
(2)将步骤(1)中发酵粗提物进行硅胶柱分离，采用二氯甲烷-甲醇溶液为洗脱剂进行梯度洗脱；
(3)收集步骤(2)中二氯甲烷-甲醇体积比为20:80洗脱的馏分，进行ODS色谱柱分离，采用甲醇-水溶液为洗脱剂进行梯度洗脱；
(4)收集步骤(3)中甲醇-水体积比为50:50至70:30洗脱的馏分，用葡聚糖凝胶色谱柱分离，使用甲醇进行洗脱；
(5)合并步骤(4)中的洗脱液，减压浓缩蒸干后得到所述蒽醌类化合物。
本发明为研发抗过敏药物提供了新的化合物来源，对我国海洋药物开发具有重要意义，还可促进深海生物资源的有效应用，具有良好的应用前景。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案和技术效果更加清晰，以下结合实施例，对本发明进行详细说明。应当理解的是，本说明书中描述的实施例仅仅是为了解释本发明，并非为了限定本发明，实施例的参数、比例等可因地制宜做出选择而对结果并无实质性影响。
实施例1：蒽醌类化合物的制备
(1)将构巢曲霉Aspergillus nidulans(可从中国海洋微生物菌种保藏管理中心购买得到，保藏编号：MCCC 3A00050)，加入到40个1L含80g燕麦的Erlenmeyer三角瓶中，25℃静置培养40天，加乙酸乙酯提取，经石油醚及二氯甲烷除脂，低压浓缩，得到100g发酵粗提物；
(2)将步骤(1)中发酵粗提物进行硅胶柱(49×460mm)分离，采用二氯甲烷-甲醇溶液梯度洗脱(CH2Cl2-MeOH，100:0→0:100)分成7个馏分(Fr.1–Fr.7)；
(3)将步骤(2)中的第五个馏分Fr.5(CH2Cl2-MeOH，20:80洗脱得到)进行ODS色谱柱(26×310mm)分离，采用甲醇-水溶液进行梯度洗脱(MeOH-H2O，5:95→100:0)，分成6个子馏分(Fr.5.1–Fr.5.6)；
(4)将步骤(3)中所得的第六个子馏分Fr.5.6(MeOH-H2O，50:50→70:30洗脱得到)用葡聚糖凝胶Sephadex LH-20色谱柱(2×100cm)分离，使用甲醇进行洗脱；
(5)根据TLC检测结果，合并步骤(4)中的洗脱液，减压浓缩蒸干后得到产物，重量为4.2mg。
将上述步骤(5)所得产物进行结构鉴定。
产物为浅黄色粉末；1H-NMR(DMSO-d6,400MHz):δH 13.64(1H,s,1-OH),7.09(1H,s,H-4),7.20(1H,d,J＝2.2Hz,H-5),11.23(1H,s,6-OH),6.84(1H,d,J＝2.2Hz,H-7),6.90(1H,d,J＝7.2Hz,H-1'),4.76(1H,dt,J＝7.2,2.1Hz,H-2'),5.42(1H,t,J＝2.6Hz,H-3'),6.75(1H,t,J＝2.5Hz,H-4'),3.90(3H,s,8-OMe)；13C NMR(DMSO-d6,100MHz):δC 158.8(s,C-1),120.7(s,C-2),163.4(s,C-3),100.1(d,C-4),107.1(d,C-5),164.3(s,C-6),105.5(d,C-7),162.5(s,C-8),186.0(s,C-9),181.8(s,C-10),112.9(d,C-1'),47.5(d,C-2'),101.6(d,C-3'),145.8(d,C-4'),134.2(s,C-4a),112.6(s,C-8a),112.3(s,C-9a),136.6(s,C-10a),56.3(q,8-OMe)；ESIMS m/z 353。以上数据，结合详细的2D NMR、HRESIMS及OR分析，最终确定产物为蒽醌类化合物，其化学式为C19H12O7，结构如式(I)所示：
实施例2实施例1制备所得化合物的体外抗过敏活性测试
肥大细胞目前尚未获得较好的细胞株，不能在体外传代培养，因此很难获得大量特性均一的细胞用于实验研究。RBL-2H3细胞系具有与肥大细胞相似的细胞结构和脱颗粒反应机制，更重要的是，该细胞株可在体外稳定传代培养，因此常作为肥大细胞的替代模型来研究肥大细胞的功能，并进一步应用于过敏性疾病研究。
本实施例选择IgE介导的RBL-2H3细胞模型，检测细胞致敏后的脱颗粒效率，计算化合物对细胞脱颗粒效率的抑制率，并进一步计算化合物的抗过敏活性。
本实施例分为以下4组：
(1)阴性对照组(未激活组)；
(2)空白对照组(DNP-BSA激活组)；
(3)阳性对照组(氯雷他定组)；
(4)化合物实验组：实施例1中步骤(5)所得发酵化合物；
本实施例采用如下操作：
(1)敏化细胞：胰酶消化回收RBL-2H3细胞，每孔100μL加入96孔板，同时添加anti-DNP-IgE至终浓度1μg/mL敏化细胞，培养箱(37℃，5％CO2)孵育过夜。
(2)预保护细胞：阴性对照组添加5μL PBS+95μL Tyrode’s缓冲液；空白对照组添加5μL DNP-BSA+95μL Tyrode’s缓冲液；阳性对照组添加5μL不同浓度的氯雷他定溶液+95μL Tyrode’s缓冲液；化合物实验组添加5μL化合物溶液(溶于PBS中，终浓度为1.25、0.625、0.3125、0.15625、0.078125、0.0390625μg/mL)+加95μL Tyrode’s缓冲液。分组添加试剂后，每组分别取95μL加到培养板中，继续培养1h。
(3)刺激细胞：阴性对照组添加5μL PBS；其他三组加5μL的DNP-BSA至终浓度1μg/mL刺激RBL-2H3细胞。继续培养1小时。
(4)裂解细胞：回收细胞培养上清液后，向培养板中加Tyrode’s缓冲液(含0.1％TritonX-100)裂解细胞得到细胞裂解液。
(5)β-氨基己糖苷酶的活性测定：用25μL上清液或细胞裂解液分别入96孔荧光板，每孔加1.2mM的4-methylumbellife-ryl-N-acetyl-β-D-glucosaminide试剂100μL，37℃下反应30min，用酶标仪获取每孔溶液360nm激发、450nm发射的荧光值。
(6)脱颗粒效率计算：
采用如下公式：
(7)抗过敏抑制率计算：
采用如下公式：
结果显示上述蒽醌类化合物有极强的肥大细胞活化脱颗粒反应抑制作用，可开发用于制备抑制肥大细胞脱颗粒的药物。进一步计算可知化合物具有极强的抗过敏活性，其IC50(表示抗过敏抑制率为50％时的化合物浓度)为1.87μM，优于阳性对照药氯雷他定(91.6μM)，提示化合物可开发用于抗过敏药物(表1)。
表1化合物的抗过敏活性结果
根据上述说明书的揭示和教导，本发明所属领域的技术人员还可以对上述实施方式进行适当的变更和修改。因此，本发明并不局限于上面揭示和描述的具体实施方式，对本发明的一些修改和变更也应当落入本发明的权利要求的保护范围内。此外，尽管本说明书中使用了一些特定的术语，但这些术语只是为了方便说明，并不对本发明构成任何限制。

Claims (7)

1.蒽醌类化合物，其结构式如式(I)所示：
2.蒽醌类化合物或其盐类在制备抗过敏药物中的应用，所述蒽醌类化合物的结构式如式(I)所示：
3.一种抗过敏的药物，其特征在于，包括有效剂量的作为活性成分的蒽醌类化合物及其盐类中的一种或几种的组合，以及药学上可以接受的载体；所述蒽醌类化合物的结构式如式(I)所示：
4.蒽醌类化合物或其盐类在制备抑制肥大细胞脱颗粒的药物中的应用，所述蒽醌类化合物的结构式如式(I)所示：
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述药物用于治疗过敏性疾病。
6.制备如权利要求1所述的蒽醌类化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、将构巢曲霉Aspergillus nidulans进行发酵培养，得到发酵物；所述构巢曲霉Aspergillus nidulans保藏于中国海洋微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为MCCC3A00050；
S2、将发酵物萃取，所得萃取物经分离纯化，得到所述蒽醌类化合物。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将构巢曲霉Aspergillus nidulans，加入燕麦中培养，加乙酸乙酯提取，经石油醚及二氯甲烷除脂，浓缩得到发酵粗提物；
(2)将步骤(1)中发酵粗提物进行硅胶柱分离，采用二氯甲烷-甲醇溶液为洗脱剂进行梯度洗脱；
(3)收集步骤(2)中二氯甲烷-甲醇体积比为20:80洗脱的馏分，进行ODS色谱柱分离，采用甲醇-水溶液为洗脱剂进行梯度洗脱；
(4)收集步骤(3)中甲醇-水体积比为50:50至70:30洗脱的馏分，用葡聚糖凝胶色谱柱分离，使用甲醇进行洗脱；
(5)合并步骤(4)中的洗脱液，减压浓缩蒸干后得到所述蒽醌类化合物。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110368389A (zh) * 2019-08-06 2019-10-25 自然资源部第三海洋研究所 酚类化合物的制备方法及其应用和抗过敏药物

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108265007A (zh) * 2017-12-18 2018-07-10 国家海洋局第三海洋研究所 深海真菌3a00421及其发酵化合物的应用

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108265007A (zh) * 2017-12-18 2018-07-10 国家海洋局第三海洋研究所 深海真菌3a00421及其发酵化合物的应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
YANLI DOU,ET AL.,: "Metabolites from Aspergillus versicolor, an endolichenic fungus from the lichen Lobaria retigera", 《DRUG DISCOVERIES & THERAPEUTICS》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110368389A (zh) * 2019-08-06 2019-10-25 自然资源部第三海洋研究所 酚类化合物的制备方法及其应用和抗过敏药物

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