CN109042325A - 破布木的组织培育方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种破布木的组织培育方法，包括以下步骤：(1)外植体处理，(2)愈伤组织培养，(3)诱芽培养，(4)生根培养，（5）移植苗床培养，（6）苗床管理。本发明所述的破布木的组织培育方法，培育周期较短，具有繁殖速度快，腋芽分化快及生根迅速且根系发达等优点，培育出的破布木幼苗成活率高达95%以上，移栽成活率达92%以上；相对于传统的种子繁殖、扦插育苗或实生苗育苗，组织培养更利于实现破布木的工程化育苗，克服了破布木生长慢、培育周期长的缺点，有利于我国对于破布木的推广种植，对于破布木的进一步扩大栽培提供了新的思路。

Description

破布木的组织培育方法
技术领域
本发明涉及植物栽培技术领域，具体涉及破布木的组织培育方法。
背景技术
破布木（学名：Cordia dichotoma Forst. f.）是紫草科、破布木属乔木，树高可达20米，2～4月开花，6～8月结果，因老叶枯干时色泽暗淡、常有破洞而得名。别名青桐木、青桐翠木、纸鹞高树，又称破步子、树子、树子仔、破果子、破子、破斧子、仙枝子、风筝子；分布于中国西藏东南部、云南、贵州、广西、广东、福建及中国台湾。越南、印度北部、澳大利亚东北部及新喀里多尼亚岛有分布。生海拔300～1900米山坡疏林及山谷溪边。该种果实富含脂肪，可榨油，据中国科学院植物研究所油脂组分析：全果含油22.18%，干果含油35.94%，种子含油51.8%，是我国新发现的野生木本油料植物。根据印度《现代科学》1977 年46 卷15 期报道：破布木种仁的含油率为46% ，蛋白质含量为31%。醣质9.4% 、纤维3.6%、钙81毫克、磷67毫克、铁7. 2毫克。其木材可供建筑及农具用材。果实可入药，成熟可生食，破布子果实有镇咳、缓下剂、解毒与整场的功效，对于消化不良有极佳的疗效。树皮主治子宫炎、子宫脱出、肺出血、下消、炎肿或久年劳伤，内藏积淤，有散瘀活血的功效。民间有剥树皮，稍晒干，煎大锅水，过滤后加冰糖当茶饮用，对燥热性的虚火上升，口苦口臭，肺部积热难安功效尤佳。根可止汗，治高血压。枝干煮水喝可以治疗尿酸。
破布木是可供食用和药用的特用经济树种，有着较好的潜在经济价值。在中国台湾，破布木果实民间传统方法加工制成健康的小菜食品，具有开胃、健脾的功效，破布木果实还能消减芒果的毒性，可除去鱼或海鲜产品的腥味。目前，破布木产品的消费群体主要是中国台湾和日本、韩国、东南亚国家级打撸台商等传统消费者，深受医药界和美食界欢迎，在市场上有时还供不应求。但是在国内大陆地区对破布木的开发利用较少，近年来我国大陆也开始了对于破布木的研究和综合利用。《2017～2022年中国破布木属产业链趋势及销售渠道投资研究报告》对破布木属行业跟踪搜集的一手市场数据，采用与国际同步的科学分析模型，全面而准确地调查行业整体高度来架构分析体系。报告主要调查分析了破布木属行业的竞争现状、需求状况及增长态势；破布木属市场运营状况；破布木属消费者及消费行为偏好等，这也表明了我国对于破布木的综合利用的逐渐重视。因此，对于研究破布木的扦插育苗的相关技术，具有重要的意义。
目前公开文献中很少见有关于破布木的育苗的相关技术，专利文献更是少之又少，如专利：一种橙花破布木扦插育苗的方法；申请号：201710110479.8；申请日：2017.02.28；申请人：中国科学院华南植物园；发明人：刘东明简曙光任海王发国陈红锋邢福武；摘要：本发明公开了一种橙花破布木扦插育苗的方法，通过选择合适的1～2年生的橙花破布木枝条并按要求剪成插条并经生长调节剂和复硝酚钠溶液预处理，扦插在装有混合基质的营养袋中，放置于荫蔽度为80％的荫棚内进行苗床管理，再经适当的炼苗技术，从而实现了本发明的目的。本发明操作简便、成本低廉，短时间内为橙花破布木的规模化生产快速高效地提供优良种苗，通过采用本发明的方法，橙花破布木扦插育苗成活率可以达到90％，180天后可出圃大田种植，可以在270天至300天内生产出优质橙花破布木苗，满足珊瑚砂岛礁的绿化之需。
上述专利的栽培技术只是针对生长于海南地区的橙花破布木品种，目的是生产出优质的橙花破布木苗，满足珊瑚砂岛礁的绿化之需。目前破布木主要还是野生居多，随着对破布木的深入研究和开发利用，研发更多的破布木的人工栽培技术势在必行，关于破布木的组织培育的相关技术还未见有记载。
发明内容
本发明提供一种破布木的组织培育方法，目的是为了方便我国对于破布木的推广栽培，提高破布木树苗的成活率，缩短破布木育苗的培育周期，
本发明通过以下技术方案实现：
破布木的组织培育方法，包括以下步骤：
（1）外植体处理：在春天破布木萌芽时，采集无病虫害的破布木完整嫩芽作为外植体，用纯净水冲洗3～4次，用质量分数为0.3～0.4%的高锰酸钾溶液消毒10～20min，再用无菌水冲洗1～2次，自然风干，备用；
（2）愈伤组织培养：在无菌环境下，横切出长3～5cm的芽段，将芽段放入愈伤组织培养基中培养，在温度25～28℃，湿度控制80～90%，暗培养25～28天，获得愈伤组织；
所述愈伤组织培养基配方为： MS培养基+0.4～0.45mg/L的萘乙酸+7.0～11.0g/L的蔗糖+ 1.0～2.0mg/L的吲哚丁酸+0.1～0.2%的活性碳+5.5～6.5g/L的琼脂。
（3）诱芽培养：在无菌操作下，选取没有被杂菌污染的愈伤组织，转入诱芽培养基上进行诱芽培养，培养40～46天；培养条件：温度22～28℃，光照强度3000～3500lux，腋芽生成较多时即可结束；
所述的诱芽培养基配方为：MS培养基 + 0.38～0.4mg/L 的2-异戊烯腺嘌呤+ 0.30～0.40mg/L的萘乙酸+ 0.05～0.08mg/L的吲哚乙酸钾+ 15～20%Wt的恶霉灵+5.5～6.5g/L的琼脂。
（4）生根培养：接种到生根培养基上进行生根培养，培养条件：温度22～30℃，光照强度2000～2500lux；培养40～45天；
所述生根培养基配方为：MS培养基+0.4～0.45mg/L的萘乙酸+4～5μg/g的高纯度α-萘乙酸钠+0.20～0.25mg/L吲哚乙酸+8.0～10.0g/L的蔗糖+5.5～6.5g/L的琼脂。
（5）移植苗床培养：选择阳光充足、通风的地方安置苗床，苗床基质由田园土：高岭土：蛭石：多菌灵按重量配比60:15:8:1配制而成；将生根培养完成的生根苗移栽至苗床，株行距按照25cm×35cm，挖穴种植，深度6～10cm，然后覆土，喷淋适量定根水，用质量分数为15%恶霉灵水剂450～500倍液喷于土面；
（6）苗床管理：移植后每隔7～10天定期浇水，浇水后1～2天内施加适量的腐殖酸肥，每株幼苗施加20～30克，后期适当减少水肥；保持温度24～30℃，注意防虫，发现害虫及时喷洒适量的恶霉灵水剂；待苗长至10～12cm高时，组培苗培养完毕，移栽至袋装培养土中继续培养或直接移栽定植。
本发明的有益效果：
1、破布木为高大乔木，其嫩芽在组培过程中分化较慢，且不容易成功，本发明通过对诱导培养基、增值培养基和生根培养基配方的筛选优化，经过优化后具有繁殖速度快，腋芽分化快及生根迅速且根系发达等优点，培育出的破布木幼苗成活率高达95%以上，移栽成活率达92%以上。
2、本发明所述的破布木的组织培育方法，培育出的破布木幼苗生生长茁壮、基本无病虫害，使用环境的能力强，方便移栽，可为破布木的人工栽培提供大量的健康的幼苗来源，有利于我国对于破布木的推广种植。
3、本发明所述的破布木的组织培育方法，培育周期较短，相对于传统的种子繁殖、扦插育苗或实生苗育苗，组织培养更利于实现破布木的工程化育苗，克服了破布木生长慢、培育周期长的缺点，有利于促进破布木的大批量种植，对于破布木的进一步扩大栽培提供了新的思路。
具体实施方式
为了使本发明的技术方案和优点更加清楚，下面结合本发明的实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述。
实施例1
破布木的组织培育方法，包括以下步骤：
（1）外植体处理：在春天破布木萌芽时，采集无病虫害的破布木完整嫩芽作为外植体，用纯净水冲洗3次，用质量分数为0.35%的高锰酸钾溶液消毒15min，再用无菌水冲洗2次，自然风干，备用；
（2）愈伤组织培养：在无菌环境下，横切出长3～5cm的芽段，将芽段放入愈伤组织培养基中培养，在温度25～28℃，湿度控制85～90%，暗培养25天，获得愈伤组织；
所述愈伤组织培养基配方为：MS培养基+0.42mg/L的萘乙酸+7.8g/L的蔗糖+ 1.6 mg/L的吲哚丁酸+0.14%的活性碳+5.8g/L的琼脂。
（3）诱芽培养：在无菌操作下，选取没有被杂菌污染的愈伤组织，转入诱芽培养基上进行诱芽培养，培养44天；培养条件：温度22～28℃，光照强度3300lux，腋芽生成较多时结束；
所述的诱芽培养基配方为：MS培养基 + 0.38mg/L 的2-异戊烯腺嘌呤+ 0.36mg/L的萘乙酸+ 0.06mg/L的吲哚乙酸钾+ 16%Wt的恶霉灵+5.8g/L的琼脂。
（4）生根培养：接种到生根培养基上进行生根培养，培养条件：温度22～30℃，光照强度2000～2500lux；培养42天；
所述生根培养基配方为：MS培养基+0.42mg/L的萘乙酸+4.2μg/g的高纯度α-萘乙酸钠+0.20mg/L吲哚乙酸+8.5g/L的蔗糖+5.8g/L的琼脂。
（5）移植苗床培养：选择阳光充足、通风的地方安置苗床，苗床基质由田园土：高岭土：蛭石：多菌灵按重量配比60:15:8:1配制而成；将生根培养完成的生根苗移栽至苗床，株行距按照25cm×35cm，挖穴种植，深度8cm，然后覆土，喷淋适量定根水，用质量分数为15%恶霉灵水剂500倍液喷于土面；
（6）苗床管理：移植后每隔7天定期浇水，浇水后第二天施加适量的腐殖酸肥，每株幼苗施加25克，后期适当减少水肥；保持温度24～30℃，注意防虫，发现害虫及时喷洒适量的恶霉灵水剂；待苗长至10cm高时，组培苗培养完毕，移栽至袋装培养土中继续培养。
实施例2
破布木的组织培育方法，包括以下步骤：
（1）外植体处理：在春天破布木萌芽时，采集无病虫害的破布木完整嫩芽作为外植体，用纯净水冲洗3次，用质量分数为0.35%的高锰酸钾溶液消毒15min，再用无菌水冲洗2次，自然风干，备用；
（2）愈伤组织培养：在无菌环境下，横切出长3～5cm的芽段，将芽段放入愈伤组织培养基中培养，在温度25～28℃，湿度控制85～90%，暗培养25天，获得愈伤组织；
所述愈伤组织培养基配方为：MS培养基+0.42mg/L的萘乙酸+7.8g/L的蔗糖+ 1.6 mg/L的吲哚丁酸+0.14%的活性碳+6.0g/L的琼脂。
（3）诱芽培养：在无菌操作下，选取没有被杂菌污染的愈伤组织，转入诱芽培养基上进行诱芽培养，培养44天；培养条件：温度22～28℃，光照强度3300lux，腋芽生成较多时结束；
所述的诱芽培养基配方为：MS培养基 + 0.4mg/L 的2-异戊烯腺嘌呤+ 0.35mg/L的萘乙酸+ 0.06mg/L的吲哚乙酸钾+ 15%Wt的恶霉灵+6.0g/L的琼脂。
（4）生根培养：接种到生根培养基上进行生根培养，培养条件：温度22～30℃，光照强度2000～2500lux；培养42天；
所述生根培养基配方为：MS培养基+0.42mg/L的萘乙酸+4.2μg/g的高纯度α-萘乙酸钠+0.24mg/L吲哚乙酸+9.0g/L的蔗糖+6.0g/L的琼脂。
（5）移植苗床培养：选择阳光充足、通风的地方安置苗床，苗床基质由田园土：高岭土：蛭石：多菌灵按重量配比60:15:8:1配制而成；将生根培养完成的生根苗移栽至苗床，株行距按照25cm×35cm，挖穴种植，深度8cm，然后覆土，喷淋适量定根水，用质量分数为15%恶霉灵水剂500倍液喷于土面；
（6）苗床管理：移植后每隔7天定期浇水，浇水后第二天施加适量的腐殖酸肥，每株幼苗施加25克，后期适当减少水肥；保持温度24～30℃，注意防虫，发现害虫及时喷洒适量的恶霉灵水剂；待苗长至10cm高时，组培苗培养完毕，移栽至袋装培养土中继续培养。
实施例3
破布木的组织培育方法，包括以下步骤：
（1）外植体处理：在春天破布木萌芽时，采集无病虫害的破布木完整嫩芽作为外植体，用纯净水冲洗3次，用质量分数为0.35%的高锰酸钾溶液消毒15min，再用无菌水冲洗2次，自然风干，备用；
（2）愈伤组织培养：在无菌环境下，横切出长3～5cm的芽段，将芽段放入愈伤组织培养基中培养，在温度25～28℃，湿度控制85～90%，暗培养25天，获得愈伤组织；
所述愈伤组织培养基配方为：MS培养基+0.42mg/L的萘乙酸+7.8g/L的蔗糖+ 1.6 mg/L的吲哚丁酸+0.14%的活性碳+6.0g/L的琼脂。
（3）诱芽培养：在无菌操作下，选取没有被杂菌污染的愈伤组织，转入诱芽培养基上进行诱芽培养，培养44天；培养条件：温度22～28℃，光照强度3300lux，腋芽生成较多时结束；
所述的诱芽培养基配方为：MS培养基 + 0.40mg/L 的2-异戊烯腺嘌呤+ 0.35mg/L的萘乙酸+ 0.06mg/L的吲哚乙酸钾+ 18%Wt的恶霉灵+6.0g/L的琼脂。
（4）生根培养：接种到生根培养基上进行生根培养，培养条件：温度22～30℃，光照强度2000～2500lux；培养42天；
所述生根培养基配方为：MS培养基+0.42mg/L的萘乙酸+4.2μg/g的高纯度α-萘乙酸钠+0.24mg/L吲哚乙酸+8.5g/L的蔗糖++6.0g/L的琼脂。
（5）移植苗床培养：选择阳光充足、通风的地方安置苗床，苗床基质由田园土：高岭土：蛭石：多菌灵按重量配比60:15:8:1配制而成；将生根培养完成的生根苗移栽至苗床，株行距按照25cm×35cm，挖穴种植，深度8cm，然后覆土，喷淋适量定根水，用质量分数为15%恶霉灵水剂500倍液喷于土面；
（6）苗床管理：移植后每隔7天定期浇水，浇水后第二天施加适量的腐殖酸肥，每株幼苗施加25克，后期适当减少水肥；保持温度24～30℃，注意防虫，发现害虫及时喷洒适量的恶霉灵水剂；待苗长至10cm高时，组培苗培养完毕，移栽至袋装培养土中继续培养。

Claims (4)

1.破布木的组织培育方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）外植体处理：在春天破布木萌芽时，采集无病虫害的破布木完整嫩芽作为外植体，用纯净水冲洗3～4次，用质量分数为0.3～0.4%的高锰酸钾溶液消毒10～20min，再用无菌水冲洗1～2次，自然风干，备用；
（2）愈伤组织培养：在无菌环境下，横切出长3～5cm的芽段，将芽段放入愈伤组织培养基中培养，在温度25～28℃，湿度控制80～90%，暗培养25～28天，获得愈伤组织；
（3）诱芽培养：在无菌操作下，选取没有被杂菌污染的愈伤组织，转入诱芽培养基上进行诱芽培养，培养40～46天；培养条件：温度22～28℃，光照强度3000～3500lux，腋芽生成较多时即可结束；
（4）生根培养：接种到生根培养基上进行生根培养，培养条件：温度22～30℃，光照强度2000～2500lux；培养40～45天；
（5）移植苗床培养：选择阳光充足、通风的地方安置苗床，苗床基质由田园土：高岭土：蛭石：多菌灵按重量配比60:15:8:1配制而成；将生根培养完成的生根苗移栽至苗床，株行距按照25cm×35cm，挖穴种植，深度6～10cm，然后覆土，喷淋适量定根水，用质量分数为15%恶霉灵水剂450～500倍液喷于土面；
（6）苗床管理：移植后每隔7～10天定期浇水，浇水后1～2天内施加适量的腐殖酸肥，每株幼苗施加20～30克，后期适当减少水肥；保持温度24～30℃，注意防虫，发现害虫及时喷洒适量的恶霉灵水剂；待苗长至10～12cm高时，组培苗培养完毕，移栽至袋装培养土中继续培养或直接移栽定植。
2.根据权利要求1所述破布木的组织培育方法，其特征在于，所述愈伤组织培养基配方为： MS培养基+0.4～0.45mg/L的萘乙酸+7.0～11.0g/L的蔗糖+ 1.0～2.0mg/L的吲哚丁酸+0.1～0.2%的活性碳+5.5～6.5g/L的琼脂。
3.根据权利要求1所述破布木的组织培育方法，其特征在于，所述的诱芽培养基配方为：MS培养基 + 0.38～0.4mg/L 的2-异戊烯腺嘌呤+ 0.30～0.40mg/L的萘乙酸+ 0.05～0.08mg/L的吲哚乙酸钾+ 15～20%Wt的恶霉灵+5.5～6.5g/L的琼脂。
4.根据权利要求1所述破布木的组织培育方法，其特征在于，所述生根培养基配方为：MS培养基+0.4～0.45mg/L的萘乙酸+4～5μg/g的高纯度α-萘乙酸钠+0.20～0.25mg/L吲哚乙酸+8.0～10.0g/L的蔗糖+5.5～6.5g/L的琼脂。
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