CN109010166B - 一种植物源小分子口腔清洁剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种植物源小分子口腔清洁剂的制备方法，包括以下步骤：步骤1，制备沙棘果液体；步骤2，制备枯草芽孢杆菌菌剂；步骤3，制备沼泽红假单胞菌菌剂；步骤4，制备植物乳杆菌菌剂步骤5，将步骤1‑4得到的沙棘果液体、枯草芽孢杆菌菌剂、沼泽红假单胞菌菌剂、植物乳杆菌菌剂与糖蜜按重量比例混合，制得植物源小分子口腔清洁剂产品；本发明还提供由上述制备方法制得的口腔清洁剂。本发明的口腔清洁剂及其制备方法，能够维持宠物的口腔健康和肠道菌群平衡，提高食物的利用率，增强宠物的免疫力，降低宠物的口腔及排泄物异味并预防蛀牙，具有很好的保健作用。

Description

一种植物源小分子口腔清洁剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及微生物发酵领域，尤其涉及一种植物源小分子口腔清洁剂及其制备方法。

背景技术

随着我国经济的迅速发展和人民生活水品的不断提高，越来越多的人们开始喂养宠物，宠物已经成为许多人生活的重要组成部分；同时，我国的宠物产业也随之迅猛发展，如宠物医院，宠物日常护理店，宠物食品加工等等行业；人们在不断提高宠物生活质量的同时，也在积极研究建立宠物与人类生活的和谐关系。

饲养宠物可以让人们生活的更健康，更充实。但是宠物，特别是小狗、小猫身上的异味，尤其是经营宠物店等饲养密度较高的场所尤为明显，宠物身上的这些异味对饲养者及周围环镜，均造成不小的困扰。其原因主要来源是宠物的自身分泌物、排泄物、玩耍滚爬所造成的污秽成份在细菌等微生物作用下分解而产生的。人与宠物的互动中，宠物的异味会在一定程度上影响两者的亲密关系，甚至许多人因为难以忍受宠物日常生活中产生的异味和排泄物难以处理而选择放弃喂养宠物。

宠物异味的产生主要有两大因素：

1、日粮搭配不合理和营养过剩导致肠道健康失衡。宠物食品通常添加了过量的蛋白原料，超出了宠物日常所需，不仅造成了不必要的浪费，还会给宠物的消化系统、代谢系统造成沉重的负担，导致消化、代谢功能紊乱；过剩的营养物质在后肠道内容易滋生有害菌，导致后肠道异常发酵，肠道菌群平衡被打破，肠道疾病频发，在严重危害宠物身体健康的同时，还极易造成宠物口腔及排泄物的异味。

2、口腔缺乏日常清洁护理滋生细菌造成口腔异味。宠物口腔内沉积的食物残渣极易被口腔内的有害菌利用，大量繁殖的口腔有害菌在分解食物残渣时会造成口腔内异味，而且还容易引发发周组织病变；成年犬类宠物因缺乏口腔护理造成的牙周疾病发病率高达60％-80％，病理状态下的牙周组织会增加口腔异味程度。

目前，针对宠物异味问题，在宠物食品加工方面通常采取以下几种措施:

1、日粮的全价营养方案。针对宠物敏感的消化系统，研制由动物蛋白为主要蛋白质来源的日粮，并在日粮中添加膳食纤维以促进胃肠消化功能。如利用高蛋白含量的鱼肉和牛肉作为主要原料，采用高温挤压膨化工艺，增加蛋白质的消化率及淀粉的糊化度，从而使宠物犬能有效利用日粮中的营养成分。此种方法在一定程度上提高了宠物对日粮的利用率，促进了宠物的胃肠道功能，但并不能完全抑制有害细菌对残留在口腔和进入后肠道的食物残渣的分解，异味依然存在。

2、将对宠物肠道及牙周疾病有预防作用的物质添加到日粮中。Se EunKim(Korea,2008)研究了十六烷基氯化物对犬牙周炎及口臭的影响。在为期3周的动物实验中，无论是十六烷基氯化物的喷雾剂或是膏状物均对宠物的牙齿有很明显的保健效果。可是十六烷基氯化物是一类化学物质，非天然存在，虽然有很显著的牙齿保健效果，但由于没有相关数据表明此物质在长期毒理学实验中对动物无其他副作用，并且该物质的添加会影响日粮的适口性，故而无法进一步推广使用。

3、对宠物的牙周疾病进行治疗。3岁以上的成年犬牙周疾病的发病率为60％～80％，病理状态下的牙周软组织会增加口腔中恶臭的程度。对宠物的牙周疾病进行治疗可以改善宠物的异味问题。

目前市场的宠物牙齿护理虽然种类繁多，但多数的护齿性能达不到理想状态。

沙棘是胡颓子科沙棘属，耐旱，可抗风沙，被用于水土保持，沙棘的根、茎、叶，化，特别是沙棘果实含有丰富的营养物质和生物活性物质，广泛应用于各个领域，沙棘果实可以入药，能够止咳化痰，健胃消食，活血化瘀等，医学研究表明，沙棘在降低胆固醇，缓解心绞痛发作，还有防治冠状动脉粥样硬化等方面有很好的效果，沙棘果实酸甜，可以直接食用，也可以制作果汁露，果酱，果羹，果冻等。沙棘中的酚类化合物能够抗氧化，可以使许多生物活性物质保持其活性，沙棘叶和果中含有香豆素，能够增强毛细血管功能，可以解痉抗白癜风，麻醉，解热和利胆等。沙棘黄酮及其它活性物质具有降低高血压，软化血管，改善血液循环等作用，对缺血性脑血管病有防治和缓解作用，具有改善大脑供血供氧等作用。沙棘还可以清除人体内的自由基，提高免疫功能，对于提高人体的抗病能力，延缓人体衰老有着重要作用。另外，沙棘中的多种生物营养成分对护理皮肤，防皱抗衰也有很好额作用。沙棘中的生物活性成分白花青素、苦木素、香豆素可以直接抑制癌细胞作用以及阻断致癌因素的作用。因此，添加含有微生物发酵的沙棘制备得到的口腔清洁剂有助于改善由于上述因素导致的宠物异味的问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：针对现有技术的缺陷，提供一种植物源小分子口腔清洁剂及其制备方法，能够维持宠物的口腔健康和肠道菌群平衡，提高食物的利用率，增强宠物的免疫力，降低宠物的口腔及排泄物异味并预防蛀牙，具有很好的保健作用。

本发明为解决上述技术问题采用以下技术方案：

一方面，本发明提供一种植物源小分子口腔清洁剂的制备方法，包括以下步骤：

步骤1，以沙棘果实为原料，制得沙棘果液体；

步骤2，按照枯草芽孢杆菌3-5wt％、枯草芽孢杆菌培养基95-97wt％的重量百分比37℃配制发酵菌液，好氧发酵，制得枯草芽孢杆菌菌剂；

步骤3，按照沼泽红假单胞菌5-10wt％、沼泽红假单胞菌培养基90-95wt％的重量百分比配制发酵菌液，32-37℃厌氧光照发酵10天，制得沼泽红假单胞菌菌剂；

步骤4，按照植物乳杆菌5-10wt％、植物乳杆菌培养基90-95wt％的重量百分比配制发酵菌液，30-37℃条件下密闭发酵10-15天，制得植物乳杆菌菌剂；

步骤5，将步骤1-4得到的沙棘果液体、枯草芽孢杆菌菌剂、沼泽红假单胞菌菌剂、植物乳杆菌菌剂与糖蜜按重量比例混合，制得植物源小分子口腔清洁剂产品。

为了优化上述的技术方案，本发明采取的技术措施还包括：

进一步地，步骤1中，所述沙棘果液体的制备方法具体包括以下步骤：

(1)，选取100g无虫无蛀的植物果实，去除杂质，清洗后烘干备用；烘干采用40～50℃的恒温干燥箱；

(2)，将烘干后的植物果实用粉碎机粉碎，过40～80目筛，得到植物果实粉末，放置在干燥环境中备用；

(3)，将植物果实粉末按照1g：3～5ml的重量体积比加入到甲醇溶液中，微波萃取，得到黄褐色半固体溶液；所述甲醇溶液的体积浓度为60％～95％；

(4)，将黄褐色半固体溶液离心过滤，去除不溶性杂质，得到深黄褐色液体；

(5)，将深黄褐色液体通过旋转蒸发仪真空浓缩，得到甲醇粗提取物并回收甲醇，所述甲醇粗提取物为沙棘果液体。

进一步地，所述沙棘果液体的制备方法的步骤(3)中，在微波萃取前，先将植物果实粉末在甲醇溶液中浸泡0.5～3h，在微波萃取时，将植物果实粉末加入到甲醇溶液中，微波萃取的温度为20℃～60℃，微波频率为915MHz～2450MHz，萃取时间为1～6h，萃取得到黄褐色半固体溶液。

进一步地，所述沙棘果液体的制备方法的步骤(5)中，所述旋转蒸发仪的温度设定为40～60℃。

进一步地，所述沙棘果液体的制备方法的步骤(5)之后还包括以下步骤，将所述甲醇粗提取物真空灭菌干燥，真空灭菌干燥的温度为40～50℃，真空度为≤30Pa，干燥时间为5～10h，得到淡黄色固体，用作食品生产中使用的天然防腐剂。

进一步地，所述枯草芽孢杆菌为中国农业微生物菌种保藏中心保藏，保藏编号为ACCC 10144；所述沼泽红假单胞菌为中国农业微生物菌种保藏管理中心保藏，保藏编号为ACCC 10649。

进一步地，步骤2中，所述枯草芽孢杆菌培养基包括以下组分和重量百分比：豆粕粉3-4wt％、蛋白胨0.5-1wt％、玉米粉2-5wt％、葡萄糖0-5wt％、磷酸氢二钠0.3-1.0wt％、硫酸钾0.1-0.5wt％、尿素0.1-0.5wt％、水83-94wt％。

进一步地，步骤3中，所述沼泽红假单胞菌培养基包括以下组分和重量百分比：糖蜜5-10wt％、碳酸氢钠5-10wt％、磷酸二氢钾0.1-0.5wt％、硫酸镁0.05-0.1wt％、水79.4-89wt％。

进一步地，步骤4中，所述植物乳杆菌培养基包括以下组分和重量百分比：酪蛋白胨(胰酶消化)10wt％，肉汤提取物10wt％，酵母粉5wt％，葡萄糖20wt％，吐温80 1wt％，磷酸氢二钾2wt％，醋酸钠5wt％，柠檬酸二铵2wt％，七水硫酸镁0.2wt％，硫酸锰0.05wt％，水44.75wt％。

进一步地，所述植物乳杆菌培养基的PH为6.2-6.5。

进一步地，步骤5中，所述沙棘果液体、枯草芽孢杆菌菌剂、沼泽红假单胞菌菌剂、植物乳杆菌菌剂与糖蜜按照以下重量比例混合：

另一方面，本发明还提供一种由上述制备方法制得的植物源小分子口腔清洁剂。

本发明采用上述技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：

本发明的植物源小分子口腔清洁剂含有微生物发酵的沙棘成分，不但能够消炎消肿，止血之痛，而且能够帮助牙龈，牙齿抗氧化，有效修复受损牙龈和牙齿，帮助保护宠物牙齿预防松动，提高其免疫力，让受损牙齿恢复自然坚固状态，全面解决口腔问题。

本发明采用糖蜜作为载体，糖蜜在作为微生物发酵所需的营养的同时，还可作为产品的防霉剂，并且因为犬类动物喜欢甜食，糖蜜还可作为调整项目产品口感的调味剂。

宠物通过对本发明的口腔清洁剂进行舔舐，口腔清洁剂中的各种有效成分进入宠物口腔和肠道后，能够维持宠物的口腔健康和肠道菌群平衡，提高食物的利用率，增强宠物的免疫力，降低宠物的口腔及排泄物异味并预防蛀牙，具有很好的保健作用。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的技术方案做进一步的详细说明。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案，而不能以此来限制本发明的保护范围。

实施例1

一、制备沙棘果液体

(1)，选取100g无虫无蛀的植物果实，去除杂质，清洗后烘干备用；烘干采用40℃的恒温干燥箱；

(2)，将烘干后的植物果实用粉碎机粉碎，过40目筛，得到植物果实粉末，放置在干燥环境中备用；

(3)，将植物果实粉末按照1g：3ml的重量体积比加入到甲醇溶液中，微波萃取，甲醇溶液的体积浓度为60％；微波萃取步骤前，先将植物果实粉末在甲醇溶液中浸泡0.5h；微波萃取步骤时，将植物果实粉末加入到甲醇溶液中，微波萃取的温度为20℃，微波频率为915MHz，萃取时间为6h；得到黄褐色半固体溶液；

(4)，将黄褐色半固体溶液离心过滤，去除不溶性杂质，得到深黄褐色液体；

(5)，将深黄褐色液体通过旋转蒸发仪真空浓缩，旋转蒸发仪的温度设定为60℃，得到甲醇粗提取物并回收甲醇。

二、制备口腔清洁剂

(1)，按照枯草芽孢杆菌3wt％、枯草芽孢杆菌培养基97wt％的重量百分比配制发酵菌液，好氧发酵，制得枯草芽孢杆菌菌剂；

其中，上述枯草芽孢杆菌培养基各组分重量百分配比为：豆粕粉3wt％、蛋白胨1wt％、玉米粉5wt％、葡萄糖1wt％、磷酸氢二钠0.3wt％、硫酸钾0.5wt％、尿素0.1wt％、水89.1wt％；

所述枯草芽孢杆菌为中国农业微生物菌种保藏中心保藏，菌株号ACCC10144；

(2)，按照沼泽红假单胞菌5wt％、沼泽红假单胞菌培养基95wt％的重量百分比配制发酵菌液，32℃厌氧光照发酵10天，制得沼泽红假单胞菌菌剂；

所述沼泽红假单胞菌为中国农业微生物菌种保藏管理中心保藏，菌株号ACCC10649；

其中，上述沼泽红假单胞菌培养基各组分重量百分配比为：糖蜜5.4wt％、碳酸氢钠5wt％、磷酸二氢钾0.5wt％、硫酸镁0.1wt％、水89wt％；

(3)，按照植物乳杆菌5wt％、植物乳杆菌培养基95wt％的重量百分比配制发酵菌液，30℃条件下进行密闭发酵15天，制得植物乳杆菌菌剂；

其中，上述植物乳杆菌培养基各组分重量百分配比为：酪蛋白胨(胰酶消化)10wt％，肉汤提取物10wt％，酵母粉5wt％，葡萄糖20wt％，吐温80 1wt％，磷酸氢二钾2wt％，醋酸钠5wt％，柠檬酸二铵2wt％，七水硫酸镁0.2wt％，硫酸锰0.05wt％，水44.75wt％；

上述植物乳杆菌培养基的PH值为6.2；

(4)，将上述步骤制得的沙棘果液体、枯草芽孢杆菌菌剂、沼泽红假单胞菌菌剂、植物乳杆菌菌剂与糖蜜按照下列重量百分比进行混合：

制得植物源小分子口腔清洁剂产品。

实施例2

一、制备沙棘果液体

(1)，选取100g无虫无蛀的植物果实，去除杂质，清洗后烘干备用；烘干采用50℃的恒温干燥箱；

(2)，将烘干后的植物果实用粉碎机粉碎，过80目筛，得到植物果实粉末，放置在干燥环境中备用；

(3)，将植物果实粉末按照1g：5ml的重量体积比加入到甲醇溶液中，微波萃取，甲醇溶液的体积浓度为95％；微波萃取步骤前，先将植物果实粉末在甲醇溶液中浸泡0.5h；微波萃取步骤时，将植物果实粉末加入到甲醇溶液中，微波萃取的温度为40℃，微波频率为1500MHz，萃取时间为3h；得到黄褐色半固体溶液；

(4)，将黄褐色半固体溶液离心过滤，去除不溶性杂质，得到深黄褐色液体；

(5)，将深黄褐色液体通过旋转蒸发仪真空浓缩，旋转蒸发仪的温度设定为50℃，得到甲醇粗提取物并回收甲醇；

(6)，将甲醇粗提取物真空灭菌干燥，真空灭菌干燥的温度为40℃，真空度为≤30Pa，干燥时间为6h；得到淡黄色固体，用作食品生产中使用的天然防腐剂。

二、制备口腔清洁剂

(1)，按照枯草芽孢杆菌4wt％、枯草芽孢杆菌培养基96wt％的重量百分比37℃配制发酵菌液，好氧发酵，制得枯草芽孢杆菌菌剂；

其中，上述枯草芽孢杆菌培养基各组分重量百分配比为：豆粕粉4wt％、蛋白胨1wt％、玉米粉3wt％、葡萄糖2wt％、磷酸氢二钠0.5wt％、硫酸钾0.2wt％、尿素0.2wt％、水89.1wt％；

所述枯草芽孢杆菌为中国农业微生物菌种保藏中心保藏，菌株号ACCC10144；

(2)，按照沼泽红假单胞菌10wt％、沼泽红假单胞菌培养基90wt％的重量百分比配制发酵菌液，37℃厌氧光照发酵10天，制得沼泽红假单胞菌菌剂；

所述沼泽红假单胞菌为中国农业微生物菌种保藏管理中心保藏，菌株号ACCC10649；

其中，上述沼泽红假单胞菌培养基各组分重量百分配比为：糖蜜6wt％、碳酸氢钠5wt％、磷酸二氢钾0.3wt％、硫酸镁0.09t％、水87.8wt％；

(3)，按照植物乳杆菌8wt％、植物乳杆菌培养基92wt％的重量百分比配制发酵菌液，35℃条件下进行密闭发酵12天，制得植物乳杆菌菌剂；

其中，上述植物乳杆菌培养基各组分重量百分配比为：酪蛋白胨(胰酶消化)10wt％，肉汤提取物10wt％，酵母粉5wt％，葡萄糖20wt％，吐温80 1wt％，磷酸氢二钾2wt％，醋酸钠5wt％，柠檬酸二铵2wt％，七水硫酸镁0.2wt％，硫酸锰0.05wt％，水44.75wt％；

上述植物乳杆菌培养基的PH值为6.5；

(4)，将上述步骤制得的沙棘果液体、枯草芽孢杆菌菌剂、沼泽红假单胞菌菌剂、植物乳杆菌菌剂与糖蜜按照下列重量百分比进行混合：

制得植物源小分子口腔清洁剂产品。

实施例3

随机选取30只患有口腔异味的宠物狗作为实验对象，以上述实施例1-2制得的植物源小分子口腔清洁剂作为实验组1-2，以市售普通的宠物用口腔清洁剂作为对照组，随机将30只宠物狗分为3组，每组10只，分别施用实验组1-2和对照组的口腔清洁剂，早晚各一次，每天观察宠物狗的口腔异味的改善情况，持续30天，记录口腔异味的消除的时间(取平均值)，即使口腔异味消除后仍然保持观察，记录每组出现复发的数量，结果如下表1：

	实验组1	实验组2	对照组
				口腔异味消除的时间(天)	3.8	4.2	8.9
复发数量	0	0	2

由表1结果可见，本发明的植物源小分子口腔清洁剂能够快速消除宠物的口腔异味，并防止复发。

通过上述实施例可知，本发明的植物源小分子口腔清洁剂及其制备方法，能够维持宠物的口腔健康和肠道菌群平衡，提高食物的利用率，增强宠物的免疫力，降低宠物的口腔及排泄物异味并预防蛀牙，具有很好的保健作用。

以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。

Claims (2)

1.一种宠物用植物源小分子口腔清洁剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，以沙棘果实为原料，制得沙棘果液体；

所述沙棘果液体的制备方法具体包括以下步骤：

(1)，选取100g无虫无蛀的植物果实，去除杂质，清洗后烘干备用；

(2)，将烘干后的植物果实用粉碎机粉碎，过40～80目筛，得到植物果实粉末，放置在干燥环境中备用；

(3)，将植物果实粉末按照1g：3～5ml的重量体积比加入到甲醇溶液中，微波萃取，得到黄褐色半固体溶液；所述甲醇溶液的体积浓度为60％～95％；

(4)，将黄褐色半固体溶液离心过滤，去除不溶性杂质，得到深黄褐色液体；

(5)，将深黄褐色液体通过旋转蒸发仪真空浓缩，得到甲醇粗提取物并回收甲醇，所述甲醇粗提取物为沙棘果液体；

步骤2，按照枯草芽孢杆菌3-5wt％、枯草芽孢杆菌培养基95-97wt％的重量百分比37℃配制发酵菌液，好氧发酵，制得枯草芽孢杆菌菌剂；

步骤3，按照沼泽红假单胞菌5-10wt％、沼泽红假单胞菌培养基90-95wt％的重量百分比配制发酵菌液，32-37℃厌氧光照发酵10天，制得沼泽红假单胞菌菌剂；

步骤4，按照植物乳杆菌5-10wt％、植物乳杆菌培养基90-95wt％的重量百分比配制发酵菌液，30-37℃条件下密闭发酵10-15天，制得植物乳杆菌菌剂；

步骤5，将步骤1-4得到的沙棘果液体、枯草芽孢杆菌菌剂、沼泽红假单胞菌菌剂、植物乳杆菌菌剂与糖蜜按重量比例混合，制得植物源小分子口腔清洁剂产品；

步骤2中，所述枯草芽孢杆菌培养基包括以下组分和重量百分比：豆粕粉3-4wt％、蛋白胨0.5-1wt％、玉米粉2-5wt％、葡萄糖0-5wt％、磷酸氢二钠0.3-1.0wt％、硫酸钾0.1-0.5wt％、尿素0.1-0.5wt％、水83-94wt％；

步骤3中，所述沼泽红假单胞菌培养基包括以下组分和重量百分比：糖蜜5-10wt％、碳酸氢钠5-10wt％、磷酸二氢钾0.1-0.5wt％、硫酸镁0.05-0.1wt％、水79.4-89wt％；

步骤4中，所述植物乳杆菌培养基包括以下组分和重量百分比：酪蛋白胨10wt％，肉汤提取物10wt％，酵母粉5wt％，葡萄糖20wt％，吐温80 1wt％，磷酸氢二钾2wt％，醋酸钠5wt％，柠檬酸二铵2wt％，七水硫酸镁0.2wt％，硫酸锰0.05wt％，水44.75wt％；所述植物乳杆菌培养基的pH 为6.2-6.5；所述酪蛋白胨为胰酶消化酪蛋白胨；

步骤5中，所述沙棘果液体、枯草芽孢杆菌菌剂、沼泽红假单胞菌菌剂、植物乳杆菌菌剂与糖蜜按照以下重量比例混合：

所述沼泽红假单胞菌为中国农业微生物菌种保藏管理中心保藏，保藏编号为ACCC10649；

所述枯草芽孢杆菌为中国农业微生物菌种保藏中心保藏，保藏编号为ACCC 10144。

2.一种由权利要求1所述的制备方法制得的宠物用植物源小分子口腔清洁剂。