CN108982855B - 15-脂加氧酶代谢物在制备肺癌诊断试剂盒中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种15‑脂加氧酶代谢物在制备肺癌诊断试剂盒中的应用，其中，所述15‑脂加氧酶代谢物为15‑羟二十碳四烯酸和13‑羟基‑9,11‑十八碳二烯酸。本发明通过对人肺癌组织及癌旁组织中15‑脂加氧酶代谢物含量进行测定对比，发现15‑脂加氧酶代谢物在人肺癌组织中比癌旁正常肺组织中的含量显著降低，进一步测定显示在肺癌病人血清中15‑脂加氧酶代谢物水平也显著降低，与其在肺癌组织中的降低相一致。因此，本发明可将所述15‑脂加氧酶代谢物用于制备肺癌诊断试剂盒，所述试剂盒适合肺癌早期的鉴别诊断，具有良好的推广应用价值，为肺癌的早期诊断提供了一种新的临床诊断方法。

Description

15-脂加氧酶代谢物在制备肺癌诊断试剂盒中的应用

技术领域

本发明涉及生物医学领域，尤其涉及一种15-脂加氧酶代谢物在制备肺癌诊断试剂盒中的应用。

背景技术

肺癌早期检测或筛查是目前临床早期确诊肺癌面临的一大难题，随着医学检测科学的发展，应用某些特定的癌标志物辅助肺癌确诊已经有了很大的发展。

但至今仍存在一些问题，目前肺癌的诊断方法只能检测出癌症发生并且生长到一定大小后的肿瘤，而不能检测到在肺癌发展过程中潜在的早期病理变化。患者被诊断出肺癌的时候通常是肺癌晚期，因此错过了手术切除恶性肿瘤的最佳时间。获得肺部组织进行早期检测或筛查是很困难的，因为对吸烟者或潜在高风险的人进行肺部活组织检查并非临床例行检查，并且人们通常不会接受此类活组织检查。

因此，现有技术还有待于发展。

发明内容

鉴于上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种15-脂加氧酶代谢物在制备肺癌诊断试剂盒中的应用，旨在解决现有技术无法制备可用于有效检测早期肺癌试剂盒的问题。

本发明的技术方案如下：

一种15-脂加氧酶代谢物在制备诊断早期非小细胞肺癌试剂盒中的应用，其中，所述血清15-脂加氧酶代谢物为15-羟二十碳四烯酸和13-羟基-9,11-十八碳二烯酸。

有益效果：本发明提供一种15-脂加氧酶代谢物在制备肺癌诊断试剂盒中的应用，所述15-脂加氧酶代谢物为15-羟二十碳四烯酸和13-羟基-9,11-十八碳二烯酸。本发明通过对人肺癌组织及癌旁组织中15-脂加氧酶代谢物含量进行测定对比，发现15-脂加氧酶代谢物在人肺癌组织中比癌旁正常肺组织中的含量显著降低，进一步测定显示在肺癌病人血清中15-脂加氧酶代谢物水平也显著降低，与其在肺癌组织中的降低相一致。因此，本发明可将所述15-脂加氧酶代谢物用于制备肺癌诊断试剂盒，所述试剂盒适合肺癌早期的鉴别诊断，具有良好的推广应用价值，为肺癌的早期诊断提供了一种新的临床诊断方法。

附图说明

图1为本发明99例非小细胞肺癌患者及99例健康人血清中15(S)-HETE水平对照图。

图2为本发明99例非小细胞肺癌患者及99例健康人血清中13(S)-HODE水平对照图。

图3为本发明15(S)-HETE在血清和组织样本中的相关性结果示意图。

图4为本发明13(S)-HODE在血清和组织样本中的相关性结果示意图。

具体实施方式

本发明提供了一种15-脂加氧酶代谢物在制备肺癌诊断试剂盒中的应用，为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

在现有医疗环境中，获得肺部组织进行早期检测或筛查是很困难的，因为对吸烟者或潜在高风险的人进行肺部活组织检查并非临床例行检查，并且一般人们通常不会接受此类活组织检查。与肺部活组织检查相比，采集外周血非常容易并可被大多数人所接受。在临床检测中，血液标本的检测是十分便利以及无创性的检测。

本发明对15-脂加氧酶（15-LOX）的代谢物15(S)-HETE (15-羟二十碳四烯酸）和13(S)-HODE（13-羟基-9,11-十八碳二烯酸）在非小细胞肺癌的发生与发展过程中的变化进行了开创性的研究工作。

本发明对化学物质诱导的小鼠非小细胞肺癌模型进行15-脂加氧酶及其代谢物的定时检测，结果表明15-LOXs 的表达以及15(S)-HETE 和 13(S)-HODE 的水平在非小细胞肺癌成瘤以前就已经降低了。15-LOX的减少可导致15(S)-HETE 和 13(S)-HODE含量下降，而在非小细胞肺癌中低水平的15(S)-HETE 和13(S)-HODE不能有效地激活PPARγ。

本发明的小鼠实验确认小鼠体内PPARγ蛋白含量随着吸烟化合物诱导的肺癌的发展而逐渐升高。但是正常或高表达的PPARγ却不代表其具有相应的活性，与对照组相比，化合物诱导的肺癌组织中PPARγ活性(而非表达水平)降低。因此，我们的研究证明在肺癌肿瘤的发生过程中，低水平的15-LOXs及其代谢产物15(S)-HETE 和 13(S)-HODE显著降低，参与肺癌发生。

与本发明的研究结果相一致的是15-LOX的表达水平与肿瘤分级呈现典型的负相关。本发明还测定了人非小细胞肺癌中两个酶15-LOX（15-LOX1 和 15-LOX2）的表达水平以及15(S)-HETE 和13(S)-HODE含量水平。结果显示，在非小细胞肺癌组织中分别产生15(S)-HETE 和 13(S)-HODE的两个酶15-LOX1 和 15-LOX2的水平显著降低，并且15-LOXs表达水平的降低与肿瘤肺肿瘤发展恶性阶段以及肿瘤大小显著正相关。与此结果一致的是15(S)-HETE 和13(S)-HODE含量显著下降。本发明开创性的研究证明了15-LOXs以及其代谢产物15(S)-HETE 和13(S)-HODE的水平降低作为非小细胞肺癌发生的早期诊断价值。

进一步地，本发明通过酶联免疫方法检测了99位非小细胞肺癌患者血清与99位正常健康人血清中的15(S)-HETE 和 13(S)-HODE水平，结果如图1和图2所示，从图中可以看出相对于正常健康人血清，15(S)-HETE 和 13(S)-HODE的表达水平在肺癌患者血清中显著降低。

采用Pearson分析15（S）-HETE和13(S)-HODE在血清和组织样本中的相关性，结果如图3和图4所示，从图中可看出15（S）-HETE和13（S）-HODE水平在血清和组织中具有正相关的关系，说明非小细胞肺患者血清中15(S)-HETE和13(S)-HODE水平可真实反映肺癌组织中的水平。此外，以上两个代谢产物15（S）-HETE和13(S)-HODE在非小细胞肺患者和健康人血清中差异明显大于组织中的差异，证明血清可以替代组织样本用于检测。由此可见，用血清15-脂加氧酶代谢物15(S)-HETE 和 13(S)-HODE水平诊断临床早期非小细胞肺癌是经济便利有效的方法，值得推广。

基于上述研究，本发明提供一种15-脂加氧酶代谢物在制备诊断早期非小细胞肺癌试剂盒中的应用，所述15-脂加氧酶代谢物为15-羟二十碳四烯酸和13-羟基-9,11-十八碳二烯酸。所述诊断早期非小细胞肺癌试剂盒可定性定量检测人体血清中的15-羟二十碳四烯酸和13-羟基-9,11-十八碳二烯酸代谢水平，通过对待测样本血清中的15-羟二十碳四烯酸和13-羟基-9,11-十八碳二烯酸代谢含量与正常人血清中的15-羟二十碳四烯酸和13-羟基-9,11-十八碳二烯酸标准含量进行比对，根据所述比对结果对所述待测样本进行肺癌诊断。

检测血标本中15(S)-HETE和13(S)-HODE水平作为肺癌的早期发生标记物是十分经济的手段，所述15(S)-HETE 和 13(S)-HODE 可用酶联免疫法（ELISA）试剂盒便可检测。

较佳地，本发明制备的试剂盒还可以人的唾液或上呼吸道分泌物作为待测样本，检测其中的15-羟二十碳四烯酸和13-羟基-9,11-十八碳二烯酸代谢水平，并与正常人唾液或上呼吸道分泌物中的15-羟二十碳四烯酸和13-羟基-9,11-十八碳二烯酸标准含量进行比对，根据所述比对结果对所述待测样本进行肺癌诊断。

综上所述，本发明提供一种15-脂加氧酶代谢物在制备肺癌诊断试剂盒中的应用，所述15-脂加氧酶代谢物为15-羟二十碳四烯酸和13-羟基-9,11-十八碳二烯酸。本发明通过对人肺癌组织及癌旁组织中15-脂加氧酶代谢物含量进行测定对比，发现15-脂加氧酶代谢物在人肺癌组织中比癌旁正常肺组织中的含量显著降低，进一步测定显示在肺癌病人血清中15-脂加氧酶代谢物水平也显著降低，与其在肺癌组织中的降低相一致。因此，本发明可将所述15-脂加氧酶代谢物用于制备肺癌诊断试剂盒，所述试剂盒适合肺癌早期的鉴别诊断，具有良好的推广应用价值，为肺癌的早期诊断提供了一种新的临床诊断方法。

应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。

Claims (1)

1.一种15-脂加氧酶代谢物作为血清标记物在制备诊断早期非小细胞肺癌试剂盒中的应用，其特征在于，所述15-脂加氧酶代谢物为15-羟二十碳四烯酸和13(S)-羟基-9,11-十八碳二烯酸。

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