CN108982826B - 一种斑马鱼检测纳米颗粒对胚胎毒性的测试装置和测试方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于检测技术领域，尤其涉及一种斑马鱼检测纳米颗粒对胚胎毒性的测试装置和测试方法。本发明提供了一种测试装置，包括：盒体；所述盒体内设置有测试芯片、第一凹槽和第二凹槽和排水口，所述第一凹槽和所述第二凹槽与所述测试芯片内的芯片孔分别通过第一输液管和第二输液管连接；所述第一输液管和所述第二输液管分别设置有第一微量泵和第二微量泵，用于控制所述第一输液管和所述第二输液管内液体的输送；所述排水口通过第三输液管与所述芯片孔连接，解决了在斑马鱼胚胎毒性试验中，为了维持测试液的浓度，需要对测试液进行更换，更换测试液较为麻烦且容易对斑马鱼胚胎造成损伤的问题。
Description
技术领域
本发明属于检测技术领域，尤其涉及一种斑马鱼检测纳米颗粒对胚胎毒性的测试装置和测试方法。
背景技术
斑马鱼是一种小型热带淡水鱼，其基因与人类基因相似度达到87％，作为胚胎发育生物学和遗传学的实验动物模型被广泛地运用于早期胚胎发育基因表达控制的研究。成熟斑马鱼产卵周期短，每次产卵最高可达200颗，卵子体外受精，体外发育，胚胎发育周期短且透明，可直观地观察到其发育过程。斑马鱼的养殖成本较低，养殖条件简单，能大规模繁育，其众多的优点，吸引了研究者的注意。斑马鱼作为毒理学研究领域中最常用的模式动物，有体型小、产卵量大、遗传背景清晰、胚胎发育迅速且早期透明、便于观察等优点。斑马鱼胚胎也越来越广泛用于急性毒性实验中，评价环境污染物的急性毒性。近年来斑马鱼胚胎毒性试验以其特有的优势正逐步成为传统成鱼急性毒性试验的替代手段，可以建立毒理学、药理学等模型，研究和解决环境科学和医学等重大问题。
在斑马鱼胚胎毒性试验中，为了维持测试液的浓度，需要对测试液进行更换，更换测试液较为麻烦且容易对斑马鱼胚胎造成损伤。
发明内容
本发明提供了一种斑马鱼检测纳米颗粒对胚胎毒性的测试装置和测试方法，用于解决在斑马鱼胚胎毒性试验中，为了维持测试液的浓度，需要对测试液进行更换，更换测试液较为麻烦且容易对斑马鱼胚胎造成损伤的问题。
具体方案如下：
一种测试装置，包括：盒体；
所述盒体内设置有测试芯片、第一凹槽和第二凹槽和排水口，所述第一凹槽和所述第二凹槽与所述测试芯片内的芯片孔分别通过第一输液管和第二输液管连接；
所述第一输液管和所述第二输液管分别设置有第一微量泵和第二微量泵，用于控制所述第一输液管和所述第二输液管内液体的输送；
所述排水口通过第三输液管与所述芯片孔连接。
优选的，所述芯片孔设置有筛网。
优选的，所述盒体内设置有测试芯片槽，所述测试芯片设置于所述测试芯片槽内，所述测试芯片与所述盒体可拆卸式连接。
优选的，所述盒体内设置有第三凹槽，所述第三凹槽内设置有分散器。
优选的，所述测试芯片为24孔板。
优选的，所述第三输液管设置有第三微量泵，用于控制所述第三输液管内液体的输送。
本发明还提供了一种检测纳米颗粒对斑马鱼胚胎毒性的测试方法，采用上述技术方案所述测试装置，包括以下步骤：
a)在所述第一凹槽和所述第二凹槽分别装入营养液和纳米颗粒溶液，再通过所述第一输液管和所述第二输液管将所述营养液和所述纳米颗粒溶液输送至所述芯片孔，得到测试液；
b)在所述芯片孔内放置斑马鱼胚胎，检测纳米颗粒对所述斑马鱼胚胎的毒性。
优选的，步骤b)所述在所述芯片孔内放置斑马鱼胚胎之后，所述检测纳米颗粒对所述斑马鱼胚胎的毒性之前还包括：
通过所述第三输液管将所述测试液排出，再通过所述第一输液管和所述第二输液管输入新的测试液。
优选的，步骤b)检测纳米颗粒对所述斑马鱼胚胎的毒性具体包括：
记录斑马鱼胚胎的孵化率、畸形率和死亡率，判断所述纳米颗粒对所述斑马鱼胚胎的毒性。
优选的，所述测试液内的所述营养液和所述纳米颗粒的比例通过所述第一微量泵和所述第二微量泵进行调节。
综上所述，本发明提供了一种测试装置，包括：盒体；所述盒体内设置有测试芯片、第一凹槽和第二凹槽和排水口，所述第一凹槽和所述第二凹槽与所述测试芯片内的芯片孔分别通过第一输液管和第二输液管连接；所述第一输液管和所述第二输液管分别设置有第一微量泵和第二微量泵，用于控制所述第一输液管和所述第二输液管内液体的输送；所述排水口通过第三输液管与所述芯片孔连接。本发明中，第一凹槽和第二凹槽可用于分别放置营养液和待测试物，待测试物为液体，测试装置的第一凹槽和第二凹槽与测试芯片内的芯片孔分别通过第一输液管和第二输液管连接，第一输液管和第二输液管分别设置有第一微量泵和第二微量泵，用于控制第一输液管和第二输液管内液体的输送，可通过第一输液管和第二输液管将营养液和待测试物输送至测试芯片内的芯片孔中，营养液和待测试物在芯片孔内形成测试液，排水口通过第三输液管与芯片孔连接，在更换测试液时，可通过第三输液管将芯片孔内的测试液排出，再通过第一输液管和第二输液管输入新的测试液，并且，可通过第一微量泵和第二微量泵控制营养液和待测试物的比例，进而控制测试液中待测试物的浓度。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1为本发明实施例提供的一种测试装置的整体结构示意图；
图2为本发明实施例提供的一种测试装置的整体内部结构示意图；
图3为本发明实施例提供的一种测试装置的俯视图；
图4为本发明实施例提供的一种测试装置的主视图；
图5为本发明实施例提供的一种测试装置的测试芯片的主视图；
图6为本发明实施例提供的一种测试装置的测试芯片的俯视图；
图示说明：1.盒体；2.盒盖；3.测试芯片；4.测试芯片槽；5.第一凹槽；6、第二凹槽；7.第三凹槽；8.第一输液管；9.第一微量泵；10.第三输液管；11.第三微量泵；12.排水口。
具体实施方式
本发明提供了一种斑马鱼检测纳米颗粒对胚胎毒性的测试装置和测试方法，用于解决在斑马鱼胚胎毒性试验中，为了维持测试液的浓度，需要对测试液进行更换，更换测试液较为麻烦且容易对斑马鱼胚胎造成损伤的问题。
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
一种测试装置，包括：盒体1；
盒体1内设置有测试芯片3、第一凹槽5和第二凹槽6和排水口12，第一凹槽5和第二凹槽6与测试芯片3内的芯片孔分别通过第一输液管8和第二输液管连接；
第一输液管8和第二输液管分别设置有第一微量泵9和第二微量泵，用于控制第一输液管8和第二输液管内液体的输送；
排水口12通过第三输液管10与芯片孔连接。
本发明实施例中，第一凹槽5和第二凹槽6可用于分别放置营养液和待测试物，待测试物为液体，测试装置的第一凹槽5和第二凹槽6与测试芯片3内的芯片孔分别通过第一输液管8和第二输液管连接，第一输液管8和第二输液管分别设置有第一微量泵9和第二微量泵，用于控制第一输液管8和第二输液管内液体的输送，可通过第一输液管8和第二输液管将营养液和待测试物输送至测试芯片3内的芯片孔中，营养液和待测试物在芯片孔内形成测试液，测试芯片3的芯片孔内放置有斑马鱼胚胎进行斑马鱼胚胎毒性实验，排水口12通过第三输液管10与芯片孔连接，在更换测试液时，可通过第三输液管10将芯片孔内的测试液排出，再通过第一输液管8和第二输液管输入新的测试液，并且，可通过第一微量泵9和第二微量泵控制营养液和待测试物的比例，进而控制测试液中待测试物的浓度。
本发明实施例中，芯片孔设置有筛网，筛网设置于芯片孔的底部。
筛网在芯片孔的设置可进一步减少更换测试液对斑马鱼胚胎的影响。
本发明实施例中，测试装置还包括：盒盖2，盒盖2为遮光盖子。
本发明实施例中，盒体1内设置有测试芯片槽4，测试芯片3设置于测试芯片槽4内，测试芯片3与盒体1可拆卸式连接。当盒体1和盒盖2不透光时，可将测试芯片3取出，便于测试芯片3中芯片孔的观察。测试芯片3和测试芯片槽4垂直结合。
本发明实施例中，盒体1内设置有第三凹槽7，第三凹槽7内设置有分散器。分散器可用于将待测试物分散均匀，分散器具体为超声分散器。
本发明实施例中，测试芯片3为24孔板。第一输液管8和第二输液管可设置为具有两个以上分支的输液管，使得测试芯片3芯片孔内的测试液不同，可进行多组测试液的斑马鱼胚胎毒性测试。
本发明实施例中，第三输液管10设置有第三微量泵11，用于控制第三输液管10内液体的输送。
纳米技术的广泛应用和纳米颗粒的大规模生产不可避免地导致纳米颗粒及其副产物直接和间接释放到水生环境中。由于它们的纳米特性，纳米颗粒具有独特的物理化学性质，尽管纳米颗粒的大多数物理化学性质是有利的，但有可能对环境和人类健康产生不利影响。近年来，许多不同类型的纳米颗粒已被证明在不同的生物系统上发挥不同程度的负面影响，但其毒性机理尚不清楚。
本发明实施例测试装置适用于检测纳米颗粒对斑马鱼胚胎毒性，待测试物为纳米颗粒悬浮液，分散器带有超声系统，解决了纳米颗粒难溶于液体，易于沉降等纳米颗粒特有难题，并且，在斑马鱼胚胎毒性试验中，测试液的更换方便，能有效地维持纳米颗粒悬浮液在测试液中的浓度，可同时设置不同浓度纳米颗粒悬浮液的测试液，进行共同测试，操作简单，稳定性强，浓度控制精确，使用快捷，测试效率高，结果准确，应用范围广泛，且适用于非纳米颗粒的待测试物测试。
本发明还提供了一种检测纳米颗粒对斑马鱼胚胎毒性的测试方法，采用上述技术方案测试装置，包括以下步骤：
a)在第一凹槽5和第二凹槽6分别装入营养液和纳米颗粒悬浮液，再通过第一输液管8和第二输液管将营养液和纳米颗粒悬浮液输送至芯片孔，得到测试液；
b)在芯片孔内放置斑马鱼胚胎，检测纳米颗粒对斑马鱼胚胎的毒性。
本发明实施例中，步骤b)在芯片孔内放置斑马鱼胚胎之后，检测纳米颗粒对斑马鱼胚胎的毒性之前还包括：
通过第三输液管将测试液排出，再通过第一输液管8和第二输液管输入新的测试液。
本发明实施例中，步骤b)检测纳米颗粒对斑马鱼胚胎的毒性具体包括：
记录斑马鱼胚胎的孵化率、畸形率和死亡率，判断纳米颗粒对斑马鱼胚胎的毒性。本发明实施例测试方法设置有空白对照组，空白对照组的测试液为营养液，通过与空白对照组比较，确定纳米颗粒对斑马鱼胚胎的毒性。
本发明实施例中，测试液内的营养液和纳米颗粒的比例通过第一微量泵9和第二微量泵进行调节，即可控制测试液中待测试物的浓度。
本发明实施例中，步骤a)之后，步骤b)之前，还包括：收集刚孵化的斑马鱼胚胎并筛选出健康的斑马鱼胚胎，具体包括：收集刚孵化的斑马鱼胚胎，通过体视显微镜筛选健康的同时期的斑马鱼胚胎。
在芯片孔内放置斑马鱼胚胎具体包括：用营养液将斑马鱼胚胎冲洗两遍后加入到芯片孔中，每孔最大加入量为100颗。
本发明实施例中，营养液的制备方法如下：将11.76g氯化钙、4.93g硫酸镁、2.59g碳酸氢钠、0.23g氯化钾分别溶于蒸馏水或去离子水中并分别稀释至1L。将以上四种溶液各取25ml加以混合并用蒸馏水或去离子水稀释至1L，即可得到营养液。营养液通过曝气将溶解氧浓度达到空气饱和值，pH稳定在7.8±0.2。
本发明实施例中，纳米颗粒悬浮液的制备方法如下：将纳米颗粒称重，加入营养液，在第三凹槽7中进行30min以上的超声形成悬浮液，分散均匀，即可得到纳米颗粒悬浮液。本发明实施例中，第二凹槽6的纳米颗粒悬浮液通过将在第三凹槽7分散后的纳米颗粒悬浮液转移得到。
本发明实施例中，检测纳米颗粒对斑马鱼胚胎毒性的测试方法在26℃～30℃环境下进行。
为了进一步理解本发明，下面结合具体实施例对本发明进行详细阐述。
实施例1
本实验例进行纳米氧化锌颗粒对斑马鱼胚胎急性毒性的测试，实验1至实验3采用本发明测试装置，实验4为常规的急性毒性实验，不采用本发明测试装置。实验分为6组，测试液中纳米氧化锌颗粒的浓度依次为0mg/L、1mg/L、5mg/L、10mg/L、20mg/L和50mg/L，其中，空白对照组的测试液中纳米氧化锌颗粒的浓度为0mg/L。
实验1至实验3的步骤相同，如下：
1)在第一凹槽5和第二凹槽6分别装入营养液和纳米氧化锌颗粒悬浮液，再通过第一输液管8和第二输液管将营养液和纳米氧化锌颗粒悬浮液输送至芯片孔，使得测试液中纳米氧化锌颗粒的浓度依次为0mg/L、1mg/L、5mg/L、10mg/L、20mg/L和50mg/L，芯片孔的总数为24个，每4个芯片孔内的测试液中纳米氧化锌颗粒的浓度相同，
2)在芯片孔内放置斑马鱼胚胎，每个芯片孔放置25个胚胎，每隔24h进行测试液的更换和胚胎发育过程的观察，记录每组斑马鱼胚胎的死亡率，判断纳米氧化锌颗粒对斑马鱼胚胎的毒性。
实验4的实验条件、分组设置、观察方法与实验组1、2、3相同。
72h后实验1至实验4的测试结果如表1所示，结果表明本发明测试装置的测试效率高，准确性高，灵敏度好，可快速地检测出不同浓度的纳米氧化锌颗粒的毒性。
表1实验1至实验4的测试结果
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (5)
1.一种测试装置，其特征在于，包括：盒体；
所述盒体内设置有测试芯片、第一凹槽和第二凹槽和排水口，所述第一凹槽和所述第二凹槽与所述测试芯片内的芯片孔分别通过第一输液管和第二输液管连接；
所述第一输液管和所述第二输液管分别设置有第一微量泵和第二微量泵，用于控制所述第一输液管和所述第二输液管内液体的输送；
所述排水口通过第三输液管与所述芯片孔连接；
所述芯片孔设置有筛网；
所述盒体内设置有第三凹槽，所述第三凹槽内设置有分散器；
所述第三输液管设置有第三微量泵，用于控制所述第三输液管内液体的输送；
所述第一凹槽和所述第二凹槽分别用于盛装营养液和纳米颗粒溶液；
所述第一输液管和所述第二输液管为具有两个以上分支的输液管，使得芯片孔内的测试液不同，实现多组测试液的斑马鱼胚胎毒性测试；
所述测试液内的所述营养液和所述纳米颗粒的比例通过所述第一微量泵和所述第二微量泵进行调节；
所述盒体内设置有测试芯片槽，所述测试芯片设置于所述测试芯片槽内，所述测试芯片与所述盒体可拆卸式连接；
所述测试芯片为24孔板。
2.一种检测纳米颗粒对斑马鱼胚胎毒性的测试方法，其特征在于，采用权利要求1所述测试装置，包括以下步骤：
a）在所述第一凹槽和所述第二凹槽分别装入营养液和纳米颗粒溶液，再通过所述第一输液管和所述第二输液管将所述营养液和所述纳米颗粒溶液输送至所述芯片孔，得到测试液；
b）在所述芯片孔内放置斑马鱼胚胎，检测纳米颗粒对所述斑马鱼胚胎的毒性。
3.根据权利要求2所述的测试方法，其特征在于，步骤b）所述在所述芯片孔内放置斑马鱼胚胎之后，所述检测纳米颗粒对所述斑马鱼胚胎的毒性之前还包括：
通过所述第三输液管将所述测试液排出，再通过所述第一输液管和所述第二输液管输入新的测试液。
4.根据权利要求2所述的测试方法，其特征在于，步骤b）检测纳米颗粒对所述斑马鱼胚胎的毒性具体包括：
记录斑马鱼胚胎的孵化率、畸形率和死亡率，判断所述纳米颗粒对所述斑马鱼胚胎的毒性。
5.根据权利要求2所述的测试方法，其特征在于，所述测试液内的所述营养液和所述纳米颗粒的比例通过所述第一微量泵和所述第二微量泵进行调节。
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Citations (28)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001040273A2 (en) * | 1999-11-30 | 2001-06-07 | Parker Hughes Institute | Transgenic zebra fish embryo model for hematopoiesis and lymphoproliferative disorders |
| WO2004047634A1 (en) * | 2002-11-20 | 2004-06-10 | The General Hospital Corporation | Zebrafish assay |
| WO2005073363A1 (en) * | 2003-09-30 | 2005-08-11 | Chengdu Kuachang Medical Industrial Limited | An analysis chip, an apparatus comprising the chip, the chip test kit and the measurement method thereof |
| CN1866025A (zh) * | 2006-06-01 | 2006-11-22 | 中国科学院海洋研究所 | 斑马鱼胚胎模型检测抗新生血管生成蛋白因子或促新生血管生成蛋白因子活性的方法及其应用 |
| CN200989905Y (zh) * | 2006-10-30 | 2007-12-12 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 全自动生化分析仪的液路系统 |
| CN101576557A (zh) * | 2008-05-07 | 2009-11-11 | 中国科学院电子学研究所 | 一种集成微流控芯片系统 |
| CN101978248A (zh) * | 2008-01-07 | 2011-02-16 | 动态通量生命科学仪器有限公司 | 具有整合微流化生物标记物光学检测阵列装置的发现工具和使用方法 |
| CN102023199A (zh) * | 2009-09-11 | 2011-04-20 | 华东理工大学 | 一种通过转基因斑马鱼胚胎模型测试纳米材料毒性的方法 |
| KR20110054952A (ko) * | 2009-11-19 | 2011-05-25 | 영남대학교 산학협력단 | 염증성 질환용 제브라피쉬 모델 및 이를 이용한 항염증제의 스크리닝 방법 |
| CN102757885A (zh) * | 2011-04-27 | 2012-10-31 | 北京大学 | 一种可用于对斑马鱼胚胎进行药物筛选的微流芯片 |
| CN102899383A (zh) * | 2012-11-13 | 2013-01-30 | 中国科学院华南植物园 | 斑马鱼测试水质及其毒性的用途和方法 |
| CN103424362A (zh) * | 2013-08-28 | 2013-12-04 | 江苏省中医药研究院 | 一种应用斑马鱼骨质疏松模型筛选中药抗骨质疏松活性成分新方法 |
| CN104165975A (zh) * | 2014-09-25 | 2014-11-26 | 重庆市食品药品检验所 | 一种用斑马鱼对药物功效的评价方法 |
| KR101476355B1 (ko) * | 2014-01-22 | 2014-12-24 | 강원대학교산학협력단 | 제브라피쉬 약물 행동 검사장치 |
| CN104505125A (zh) * | 2014-12-04 | 2015-04-08 | 中国科学院微电子研究所 | 一种多通道sram单粒子测试方法及装置 |
| CN204474693U (zh) * | 2015-02-16 | 2015-07-15 | 山东省科学院生物研究所 | 一种用于药物处理斑马鱼胚胎与幼鱼的专用培养装置 |
| CN204653429U (zh) * | 2015-06-02 | 2015-09-23 | 江西省科学院鄱阳湖研究中心 | 一种斑马鱼幼鱼实验室养殖装置 |
| WO2016013900A1 (ko) * | 2014-07-25 | 2016-01-28 | 한국생명공학연구원 | Dyrklaa 유전자가 결실된 제브라피쉬 모델 및 이를 이용한 혈관 발생 결함 예방 및 치료제 스크리닝 방법 |
| CN205067494U (zh) * | 2015-10-13 | 2016-03-02 | 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 | 鱼行为测试伴随给药装置 |
| CN205420440U (zh) * | 2016-03-24 | 2016-08-03 | 山东省科学院生物研究所 | 一种用于斑马鱼胚胎与幼鱼的便携式恒温培养装置 |
| CN206020408U (zh) * | 2016-09-23 | 2017-03-15 | 广东海洋大学 | 一种污染物对斑马鱼胚胎影响的检测装置 |
| CN106520541A (zh) * | 2016-12-16 | 2017-03-22 | 常州市环境监测中心 | 一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的试剂盒 |
| CN106719172A (zh) * | 2017-01-23 | 2017-05-31 | 浙江师范大学 | 实验用斑马鱼胚胎孵化装置 |
| WO2017104967A1 (ko) * | 2015-12-15 | 2017-06-22 | 사회복지법인 삼성생명공익재단 | Ｄｇａｔ２ 돌연변이 유전자가 도입된 제브라피쉬 모델 및 이의 용도 |
| CN206545021U (zh) * | 2016-12-16 | 2017-10-10 | 常州市环境监测中心 | 一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的试剂盒 |
| CN107966581A (zh) * | 2017-11-03 | 2018-04-27 | 同济大学 | 一种斑马鱼胚胎微孔板排列添加装置 |
| CN207528747U (zh) * | 2017-11-03 | 2018-06-22 | 同济大学 | 一种斑马鱼胚胎微孔板排列添加装置 |
| CN108359577A (zh) * | 2018-01-29 | 2018-08-03 | 燕山大学 | 基于微流体驱动的斑马鱼卵旋转微操作系统及控制方法 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7951989B2 (en) * | 1998-02-23 | 2011-05-31 | Phylonix Pharmaceuticals, Inc. | Methods of screening agents for activity using teleosts |
| IE20020619A1 (en) * | 2001-12-31 | 2003-07-23 | Provost Fellows And Scholors O | An assay assembly |
| US20040143865A1 (en) * | 2002-12-06 | 2004-07-22 | Rubinstein Amy L. | Transgenic zebrafish models for angiogenesis |
| US7671251B2 (en) * | 2005-01-07 | 2010-03-02 | Academia Sinica | In vivo assay for neurite outgrowth in zebrafish and its application in drug screening |
| TWI447275B (zh) * | 2012-04-20 | 2014-08-01 | Univ Nat Cheng Kung | 斑馬魚癲癇模式及其建立方法、及使用其篩選抗癲癇藥物之方法 |
-
2018
- 2018-09-28 CN CN201811142565.8A patent/CN108982826B/zh active Active
Patent Citations (28)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001040273A2 (en) * | 1999-11-30 | 2001-06-07 | Parker Hughes Institute | Transgenic zebra fish embryo model for hematopoiesis and lymphoproliferative disorders |
| WO2004047634A1 (en) * | 2002-11-20 | 2004-06-10 | The General Hospital Corporation | Zebrafish assay |
| WO2005073363A1 (en) * | 2003-09-30 | 2005-08-11 | Chengdu Kuachang Medical Industrial Limited | An analysis chip, an apparatus comprising the chip, the chip test kit and the measurement method thereof |
| CN1866025A (zh) * | 2006-06-01 | 2006-11-22 | 中国科学院海洋研究所 | 斑马鱼胚胎模型检测抗新生血管生成蛋白因子或促新生血管生成蛋白因子活性的方法及其应用 |
| CN200989905Y (zh) * | 2006-10-30 | 2007-12-12 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 全自动生化分析仪的液路系统 |
| CN101978248A (zh) * | 2008-01-07 | 2011-02-16 | 动态通量生命科学仪器有限公司 | 具有整合微流化生物标记物光学检测阵列装置的发现工具和使用方法 |
| CN101576557A (zh) * | 2008-05-07 | 2009-11-11 | 中国科学院电子学研究所 | 一种集成微流控芯片系统 |
| CN102023199A (zh) * | 2009-09-11 | 2011-04-20 | 华东理工大学 | 一种通过转基因斑马鱼胚胎模型测试纳米材料毒性的方法 |
| KR20110054952A (ko) * | 2009-11-19 | 2011-05-25 | 영남대학교 산학협력단 | 염증성 질환용 제브라피쉬 모델 및 이를 이용한 항염증제의 스크리닝 방법 |
| CN102757885A (zh) * | 2011-04-27 | 2012-10-31 | 北京大学 | 一种可用于对斑马鱼胚胎进行药物筛选的微流芯片 |
| CN102899383A (zh) * | 2012-11-13 | 2013-01-30 | 中国科学院华南植物园 | 斑马鱼测试水质及其毒性的用途和方法 |
| CN103424362A (zh) * | 2013-08-28 | 2013-12-04 | 江苏省中医药研究院 | 一种应用斑马鱼骨质疏松模型筛选中药抗骨质疏松活性成分新方法 |
| KR101476355B1 (ko) * | 2014-01-22 | 2014-12-24 | 강원대학교산학협력단 | 제브라피쉬 약물 행동 검사장치 |
| WO2016013900A1 (ko) * | 2014-07-25 | 2016-01-28 | 한국생명공학연구원 | Dyrklaa 유전자가 결실된 제브라피쉬 모델 및 이를 이용한 혈관 발생 결함 예방 및 치료제 스크리닝 방법 |
| CN104165975A (zh) * | 2014-09-25 | 2014-11-26 | 重庆市食品药品检验所 | 一种用斑马鱼对药物功效的评价方法 |
| CN104505125A (zh) * | 2014-12-04 | 2015-04-08 | 中国科学院微电子研究所 | 一种多通道sram单粒子测试方法及装置 |
| CN204474693U (zh) * | 2015-02-16 | 2015-07-15 | 山东省科学院生物研究所 | 一种用于药物处理斑马鱼胚胎与幼鱼的专用培养装置 |
| CN204653429U (zh) * | 2015-06-02 | 2015-09-23 | 江西省科学院鄱阳湖研究中心 | 一种斑马鱼幼鱼实验室养殖装置 |
| CN205067494U (zh) * | 2015-10-13 | 2016-03-02 | 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 | 鱼行为测试伴随给药装置 |
| WO2017104967A1 (ko) * | 2015-12-15 | 2017-06-22 | 사회복지법인 삼성생명공익재단 | Ｄｇａｔ２ 돌연변이 유전자가 도입된 제브라피쉬 모델 및 이의 용도 |
| CN205420440U (zh) * | 2016-03-24 | 2016-08-03 | 山东省科学院生物研究所 | 一种用于斑马鱼胚胎与幼鱼的便携式恒温培养装置 |
| CN206020408U (zh) * | 2016-09-23 | 2017-03-15 | 广东海洋大学 | 一种污染物对斑马鱼胚胎影响的检测装置 |
| CN106520541A (zh) * | 2016-12-16 | 2017-03-22 | 常州市环境监测中心 | 一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的试剂盒 |
| CN206545021U (zh) * | 2016-12-16 | 2017-10-10 | 常州市环境监测中心 | 一种斑马鱼胚胎急性毒性实验的试剂盒 |
| CN106719172A (zh) * | 2017-01-23 | 2017-05-31 | 浙江师范大学 | 实验用斑马鱼胚胎孵化装置 |
| CN107966581A (zh) * | 2017-11-03 | 2018-04-27 | 同济大学 | 一种斑马鱼胚胎微孔板排列添加装置 |
| CN207528747U (zh) * | 2017-11-03 | 2018-06-22 | 同济大学 | 一种斑马鱼胚胎微孔板排列添加装置 |
| CN108359577A (zh) * | 2018-01-29 | 2018-08-03 | 燕山大学 | 基于微流体驱动的斑马鱼卵旋转微操作系统及控制方法 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| Stages of embryonic development of the zebrafish;Charles B.kimmel 等;Dev DYN;203(3);全文 * |
| Zebrafish as a developmental model organism for pediatric research;Matthew B Veldman 等;Pediatric Research;64;全文 * |
| 崔雨晴 等.斑马鱼在纳米毒理学研究中的应用概述.南京大学学报(自然科学).2017,53(2),全文. * |
| 徐诚 等.纳米氧化锌暴露对斑马鱼胚胎心脏发育的毒性效应和机制研究.中国药理学与毒理学杂志.2017,31(6),全文. * |
| 斑马鱼胚胎发育毒性评价方法的建立;常嘉;陆亮;林金杏;常艳;马;;世界临床药物(11);全文 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN108982826A (zh) | 2018-12-11 |
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