CN108977466A - 一种发酵制备黑牛肝菌黑色素的方法 - Google Patents

一种发酵制备黑牛肝菌黑色素的方法 Download PDF

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侯若琳
刘鑫
林文雄
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    • C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
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Abstract

本发明提供了一种发酵制备黑牛肝菌黑色素的方法，属于微生物发酵领域。发酵培养基的制备：在40重量份的大米中加入55~65重量份的营养液，然后在121℃下灭菌50 min，冷却后接入黑牛肝菌菌种，置于25‑28℃静置避光培养40‑50天，充分发酵，将发酵完后的基质置于烘箱50℃烘干，得大含有黑牛肝菌黑色素的发酵基质，提取得黑牛肝菌黑色素。本发酵制备黑牛肝菌黑色素的技术方法可快速大量生产黑牛肝菌黑色素，适用于工厂化生产，同时本发明提供技术方法实施可靠方便，生产加工成本低。

Description

一种发酵制备黑牛肝菌黑色素的方法
技术领域
本发明涉及一种发酵制备黑牛肝菌黑色素的方法，属于微生物发酵领域。
背景技术
黑牛肝菌（Boletus aereus，BA），属于牛肝菌中的一种，也是最香的牛肝菌之一。黑牛肝菌味道鲜美、营养价值丰富、高蛋白、富含种人体必需氨基酸及丰富的磷、钾、钙、镁、铁和锌等人体必须的矿质元素，是较高的营养价值和药用价值，具有止咳、防癌、补气等功效，并对高胆固醇、高血压和高血脂等病症也有较好的疗效，深得消费者喜爱。黑色素是生物的保护性色素，可为生物体提供结构性强度或保护生物免受紫外线、电离辐射、重金属污染、低温和高温等环境胁迫的伤害。近年来的研究还发现，黑色素具有抗蛇毒、抑制艾滋病病毒复制、治疗帕金森症等作用，由此可见，黑色素在医药、化妆品、食品、电子等方面有着广泛的应用前景，而黑色素作为黑牛肝菌的活性成分之一，却未见有关黑牛肝菌黑色素制备的研究报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种发酵制备黑牛肝菌黑色素的方法，该方法可快速大量生产黑牛肝菌黑色素，适用于工厂化生产，同时本发明提供技术方法实施可靠方便，生产加工成本低。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方法：
一种发酵制备黑牛肝菌黑色素的方法，将黑牛肝菌接种至固体发酵培养基进行发酵并对发酵基质的黑色素进行提取。
具体包括以下步骤：
（1）固体发酵培养基的制备：在40重量份的大米中加入55~65重量份的营养液，然后在121℃下灭菌50min，其中，营养液的配方按质量百分数计为：葡萄糖1.8%~2.2%、酵母提取粉0.4%~0.6%、磷酸氢二钾0.16%~0.20%、磷酸氢二钠0.14%~0.19%，余量为水，各组分之和为100%，pH自然；
（2）冷却后接入活化的黑牛肝菌菌种，置于25~28℃培养40-50d，静置避光培养；
（3）发酵结束后将发酵基质置于50℃烘干至恒重，用粉碎机粉碎，过筛，提取黑色素，得到产品。
步骤（3）中黑色素的提取方法：用0.8-1.2 mol/L NaOH常温超声提取发酵基质中黑色素1h，过滤取上清液用1 mol/L HCl调pH至1.5，75℃水浴10小时，离心取沉淀，用水、乙醇、氯仿和石油醚各洗三遍，得黑牛肝菌黑色素。
本发明的发酵为静置固体培养发酵。
本发明的显著优点：
本发明的发酵制备黑牛肝菌黑色素的方法可快速大量生产黑牛肝菌黑色素，其发酵基质中的黑色素含量可达到50%左右，可适用于工厂化生产，同时本发明提供技术方法实施可靠方便，生产加工成本低。
附图说明
图1 从固体发酵基质中提取得到的黑牛肝菌黑色素；
图2 固体发酵黑牛肝菌黑色素红外光谱特征。
具体实施方式
实施例1
一种发酵制备黑牛肝菌黑色素的方法，包括以下步骤 ：
（1）固体发酵培养基的制备：在40重量份的添加大米中加入65重量份的营养液（营养液配方按质量百分数计为：葡萄糖2.2%、酵母提取粉0.6%、磷酸氢二钾0.20%、磷酸氢二钠0.19%，余量为水，各组分之和为100%，pH自然），然后在121℃下灭菌50min。
（2）冷却后接入活化的黑牛肝菌菌种，置于28℃培养50d，静置避光培养。
（3）发酵结束后将发酵基质置于50℃烘干至恒重，用粉碎机粉碎，过筛，提取黑色素，得到产品。
步骤（3）中黑色素的提取方法：用1.2 mol/L NaOH常温超声提取发酵基质中黑色素1h，过滤取上清液用1 mol/L HCl调pH至1.5左右，75℃水浴10小时，离心取沉淀，用水、乙醇、氯仿和石油醚各洗三遍，得黑牛肝菌黑色素。
实施例2
一种发酵制备黑牛肝菌黑色素的方法，包括以下步骤 ：
（1）固体发酵培养基的制备：在40重量份的添加大米中加入55重量份的营养液（营养液配方按质量百分数计为：葡萄糖1.8%、酵母提取粉0.4%、磷酸氢二钾0.16%、磷酸氢二钠0.14%，余量为水，各组分之和为100%，pH自然），然后在121℃下灭菌50min。
（2）冷却后接入活化的黑牛肝菌菌种，置于25℃培养50d，静置避光培养。
（3）发酵结束后将发酵基质置于50℃烘干至恒重，用粉碎机粉碎，过筛，提取黑色素，得到产品。
步骤（3）中黑色素的提取方法：用0.8mol/L NaOH常温超声提取发酵基质中黑色素1h，过滤取上清液用1 mol/L HCl调pH至1.5左右，75℃水浴10小时，离心取沉淀，用水、乙醇、氯仿和石油醚各洗三遍，得黑牛肝菌黑色素。
实施例3
一种发酵制备黑牛肝菌黑色素的方法，包括以下步骤 ：
（1）固体发酵培养基的制备：在40重量份的添加大米中加入60重量份的营养液（营养液配方按质量百分数计为：葡萄糖2.0%、酵母提取粉0.4%、磷酸氢二钾0.18%、磷酸氢二钠0.17%，余量为水，各组分之和为100%，pH自然），然后在121℃下灭菌50min。
（2）冷却后接入活化的黑牛肝菌菌种，置于26℃培养45d，静置避光培养。
（3）发酵结束后将发酵基质置于50℃烘干至恒重，用粉碎机粉碎，过筛，提取黑色素，得到产品。
步骤（3）中黑色素的提取方法：用1.0 mol/L NaOH常温超声提取发酵基质中黑色素1h，过滤取上清液用1 mol/L HCl调酸至1.5左右，75℃水浴10小时，离心取沉淀，用水、乙醇、氯仿和石油醚各洗三遍，得黑牛肝菌黑色素。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。

Claims (4)

1.一种发酵制备黑牛肝菌黑色素的方法，其特征在于，将黑牛肝菌接种至固体发酵培养基进行发酵，然后对发酵基质的黑色素进行提取。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
（1）固体发酵培养基的制备：在40重量份的大米中加入55~65重量份的营养液，然后在121℃下灭菌50min，其中，营养液的配方按质量百分数计为：葡萄糖1.8%~2.2%、酵母提取粉0.4%~0.6%、磷酸氢二钾0.16%~0.20%、磷酸氢二钠0.14%~0.19%，余量为水，各组分之和为100%，pH自然；
（2）冷却后接入活化的黑牛肝菌菌种，置于25~28℃培养40-50d，静置避光培养；
（3）发酵结束后将发酵基质置于50℃烘干至恒重，用粉碎机粉碎，过筛，提取黑色素，得到产品。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）中黑色素的提取方法：用0.8-1.2 mol/L NaOH常温超声提取发酵基质中黑色素1h，过滤取上清液用1 mol/L HCl调pH至1.5，75℃水浴10小时，离心取沉淀，用水、乙醇、氯仿和石油醚各洗三遍，得黑牛肝菌黑色素。
4.权利要求1-3任一所述制备方法制得的黑牛肝菌黑色素。
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