CN108896506B - 检测碱性磷酸酶活性以及碱性磷酸酶抑制剂浓度的方法 - Google Patents

检测碱性磷酸酶活性以及碱性磷酸酶抑制剂浓度的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108896506B
CN108896506B CN201810777431.7A CN201810777431A CN108896506B CN 108896506 B CN108896506 B CN 108896506B CN 201810777431 A CN201810777431 A CN 201810777431A CN 108896506 B CN108896506 B CN 108896506B
Authority
CN
China
Prior art keywords
alkaline phosphatase
concentration
activity
sodium orthovanadate
ceo
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201810777431.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN108896506A (zh
Inventor
逯一中
倪朋娟
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Tju Binhai Industrial Research Institute Co ltd
Original Assignee
University of Jinan
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by University of Jinan filed Critical University of Jinan
Priority to CN201810777431.7A priority Critical patent/CN108896506B/zh
Publication of CN108896506A publication Critical patent/CN108896506A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN108896506B publication Critical patent/CN108896506B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/17Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
    • G01N21/25Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
    • G01N21/31Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry
    • G01N21/33Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry using ultraviolet light

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明提供了一种检测碱性磷酸酶活性的方法,其包括如下步骤:A1:将三(羟甲基)氨基甲烷、焦磷酸盐混匀后,分成若干份反应体系,每一份所述反应体系中分别加入不同浓度的碱性磷酸酶,在37℃下孵育后,在每一份反应体系中依次加入醋酸缓冲液、CeO2纳米粒子和3,3',5,5'‑四甲基联苯胺,在22~47℃下孵育后,分别进行紫外‑可见吸收光谱的测量,得到碱性磷酸酶活性与ΔA的关系方程;A2:将待测碱性磷酸酶按照步骤A1的操作进行紫外‑可见吸收光谱的测量,得到ΔA,将ΔA代入步骤A1中得到的碱性磷酸酶活性与ΔA的关系方程,计算出待测碱性磷酸酶的活性。本发明具有如下的有益效果:1、本发明所利用的CeO2纳米粒子在水溶液中分散较好;2、本发明所提出方法检测时间短。

Description

检测碱性磷酸酶活性以及碱性磷酸酶抑制剂浓度的方法
技术领域
本发明涉及一种检测碱性磷酸酶活性以及碱性磷酸酶抑制剂浓度的方法,属于分析测试技术领域。
背景技术
谭等人利用Cu-MOFs类过氧化物酶活性实现了碱性磷酸酶的检测(AnalyticaChimicaActa,2018,1004,74)。具体检测步骤:首先,将PPi及不同浓度ALP置于37℃恒温孵育40分钟;然后向溶液中依次加入Cu-MOFs、过氧化氢、ABTS及HEPES缓冲溶液,混合均匀后后置于37℃恒温孵育50分钟进行紫外-可见吸收光谱测试。该方法需要制备的Cu-MOFs分散性较差,检测时间较长,同时需要使用不稳定的过氧化氢用于氧化过氧化物酶底物。
发明内容
针对现有技术中的缺陷,本发明的目的是提供一种检测碱性磷酸酶活性以及碱性磷酸酶抑制剂浓度的方法。
本发明是通过以下技术方案实现的:
本发明提供了一种检测碱性磷酸酶活性的方法,其包括如下步骤:
A1:将三(羟甲基)氨基甲烷、焦磷酸盐混匀后,分成若干份反应体系,每一份所述反应体系中分别加入不同浓度的碱性磷酸酶,在37℃下孵育后,在每一份反应体系中依次加入醋酸缓冲液、CeO2纳米粒子和3,3',5,5'-四甲基联苯胺,在22~47℃下孵育后,分别进行紫外-可见吸收光谱的测量,得到碱性磷酸酶活性与ΔA的关系方程;
A2:将待测碱性磷酸酶按照步骤A1的操作进行紫外-可见吸收光谱的测量,得到ΔA,将ΔA代入步骤A1中得到的碱性磷酸酶活性与ΔA的关系方程,计算出待测碱性磷酸酶的活性。
作为优选方案,所述三(羟甲基)氨基甲烷的pH值为7.4,焦磷酸盐的浓度为0.07mM,CeO2纳米粒子的浓度为0.05~0.30mg/mL,3,3',5,5'-四甲基联苯胺的浓度为0.1~0.9mM。
作为优选方案,所述孵育时间不超过9min。
作为优选方案,所述醋酸缓冲液的pH值为3.6~5.6。
一种检测正钒酸钠浓度的方法,其包括如下步骤:
B1:将三(羟甲基)氨基甲烷、碱性磷酸酶混匀后,分成若干份反应体系,每一份所述反应体系中分别加入不同浓度的正钒酸钠,在37℃下孵育后,在每一份反应体系中依次加入焦磷酸盐,在22~47℃下孵育后,加入醋酸缓冲液、CeO2纳米粒子和3,3',5,5'-四甲基联苯胺,在22~47℃下孵育后,分别进行紫外-可见吸收光谱的测量,以正钒酸钠对碱性磷酸酶的抑制效率和正钒酸钠的浓度作图,得到正钒酸钠浓度与正钒酸钠对碱性磷酸酶的抑制效率的关系方程;
B2:将待测正钒酸钠按照步骤B1的操作进行紫外-可见吸收光谱的测量,计算得到抑制效率值,将抑制效率值代入步骤B1中得到的正钒酸钠浓度与正钒酸钠对碱性磷酸酶的抑制效率的关系方程,计算出待测正钒酸钠的浓度。
作为优选方案,所述焦磷酸盐的浓度为0.07mM,CeO2纳米粒子的浓度为0.25mg/mL,3,3',5,5'-四甲基联苯胺的浓度为0.5mM,三(羟甲基)氨基甲烷的pH值为7.4,醋酸缓冲液的pH值为4.0。
本发明的检测原理如图1所示:CeO2纳米粒子具有类过氧化物酶活性,可以直接氧化TMB生成oxTMB,溶液在652nm处有紫外-可见吸收峰;PPi加入后,CeO2纳米粒子类过氧化物酶活性升高,这是由于CeO2纳米粒子同时具有类磷酸酶活性可以使PPi水解释放大量的能量;ALP加入后,CeO2纳米粒子类过氧化物酶活性降低,表现为紫外-可见吸收峰强度降低;ALP抑制剂(Na3VO4)加入后,CeO2纳米粒子类过氧化物酶活性恢复,表现为紫外-可见吸收峰强度增大。基于体系紫外-可见吸收峰强度的变化,可实现ALP及其抑制剂的定量检测。
与现有技术相比,本发明具有如下的有益效果:
1、本发明所利用的CeO2纳米粒子在水溶液中分散较好;
2、本发明所提出方法检测时间短,在ALP与PPi孵育后加入氧化底物、CeO2纳米粒子及缓冲溶液后仅需孵育3分钟;
3、本发明所提出的方法无需使用不稳定的过氧化氢,较为简单。
附图说明
通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述,本发明的其它特征、目的和优点将会变得更明显:
图1为本发明中基于CeO2纳米粒子类过氧化物酶活性检测ALP及Na3VO4的原理示意图;
图2为本发明实施例1中CeO2-PPi体系中加入不同浓度ALP后的紫外-可见吸收光谱图;从上到下ALP的浓度依次为0、0.5、1、2、4、6、8、10、20、40mU/mL;
图3为本发明实施例1中ΔA与ALP的浓度关系;插图为ΔA与ALP浓度的线性关系及加入不同浓度ALP时溶液的数码照片(ALP浓度从左到右依次为0,0.5,1,2,4,6,8,10mU/mL);
图4为本发明实施例2中CeO2-PPi-ALP体系中加入不同浓度Na3VO4后的紫外-可见吸收光谱图;从下到上Na3VO4的浓度依次为0,0.005,0.01,0.03,0.05,0.06,0.07,0.08,0.09,0.1,0.15,0.20,0.25mM;
图5为本发明实施例2中CeO2-PPi-ALP体系对Na3VO4的抑制效率与Na3VO4的浓度关系;
图6为本发明的方法的选择性测试结果。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明,但不以任何形式限制本发明。应当指出的是,对本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进。这些都属于本发明的保护范围。
本发明中涉及的缩写及术语解释:PPi:焦磷酸根;ALP:碱性磷酸酶;BSA:牛血清蛋白;CeO2:二氧化铈;TMB:3,3',5,5'-四甲基联苯胺;oxTMB:氧化态的3,3',5,5'-四甲基联苯胺;Tris:三羟甲基氨基甲烷;HEPES:4-羟乙基哌嗪乙磺酸;ABTS:2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸代替;Na3VO4:正钒酸钠;Cu-MOFs:铜基金属有机框架化合物;ΔA:ALP加入前后CeO2-PPi紫外-可见吸收峰强度的变化值;ALP抑制效率:IE(%)=100×(Ai-A)/ΔA,A和Ai分别代表抑制剂加入前后CeO2-PPi-ALP体系的紫外-可见吸收峰强度;IC50:ALP抑制效率效率为50%时所需抑制剂的浓度。
实施例1
本实施例涉及一种检测碱性磷酸酶(ALP)活性的方法,具体包括如下步骤:
80μL Tris-HCl(pH为7.4),10μL 7mM PPi和10μL不同浓度ALP(0.5,1,2,4,6,8,10,20,40mU/mL)依次加入到1.5mL离心管中,混合均匀后置于37℃水浴锅内孵育1小时。然后,向离心管中依次加入700μL醋酸缓冲溶液(pH为4.0),100μL 2.5mg/mL CeO2纳米粒子及100μL 5mM TMB,于37℃水浴锅内孵育3分钟后进行紫外-可见吸收光谱测量,如图2所示。利用ΔA与ALP活性进行线性拟合,得到的线性方程分别为:ΔA=-0.0031+0.0293c(c为ALP活性,单位是mU/mL)),线性系数为0.995,如图3所示。本实施例对实验条件进行了优化,包括醋酸缓冲溶液pH、CeO2纳米粒子和TMB的浓度,孵育时间及温度。醋酸缓冲溶液pH为:3.6~5.6;CeO2纳米粒子的浓度范围为:0.05~0.30mg/mL;TMB的浓度范围为:0.1~0.9mM;孵育时间范围为:0~9分钟;孵育温度为:22~47℃。
实施例2
本实施例涉及一种检测钒酸钠(Na3VO4)浓度的方法,具体包括如下步骤:将70μLTris-HCl(pH为7.4),10μL 2U/mL ALP及10μL不同浓度的Na3VO4(0,0.005,0.01,0.03,0.05,0.06,0.07,0.08,0.09,0.1,0.15,0.20,0.25mM)依次加入到1.5mL离心管中,混合均匀后置于37℃水浴锅内孵育30min;然后向离心管中10μL 7mM PPi置于37℃水浴锅内孵育1小时。然后,向离心管中依次加入700μL醋酸缓冲溶液(pH为4.0),100μL 2.5mg/mL CeO2纳米粒子及100μL 5mM TMB,于37℃水浴锅内孵育3分钟后进行紫外-可见吸收光谱测量,如图4所示。我们以抑制效率与Na3VO4浓度拟合曲线,如图5所示,得到其IC50值为71μM。
检测结果:最佳实验条件为:醋酸缓冲溶液pH为4.0,CeO2纳米粒子的浓度为0.25mg/mL,TMB浓度为0.5mM,孵育时间为3min,孵育温度为37℃。随着ALP浓度的升高,体系紫外-可见吸收峰强度逐渐降低;ALP检测线性范围为:0.5-10mU/mL,检测限为:0.32mU/mL;随着Na3VO4浓度的升高,体系紫外-可见吸收峰强度逐增大,IC50值为71μM。
实施例3
本实施例涉及一种抗干扰实验,具体步骤为:
80μL Tris-HCl(pH为7.4),10μL 7mM PPi和10μL 0.1mg/mL干扰物质(牛血清蛋白、溶菌酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶及胰酶)依次加入到1.5mL离心管中,混合均匀后置于37℃水浴锅内孵育1小时。然后,向离心管中依次加入700μL醋酸缓冲溶液(pH为4.0),100μL2.5mg/mL CeO2纳米粒子及100μL 5mM TMB,于37℃水浴锅内孵育3分钟后进行紫外-可见吸收光谱测量。
70μL Tris-HCl(pH为7.4),10μL 7mM PPi和10μL 0.1mg/mL碱性磷酸酶及干扰物质(牛血清蛋白、溶菌酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶及胰酶)依次加入到1.5mL离心管中,混合均匀后置于37℃水浴锅内孵育1小时。然后,向离心管中依次加入700μL醋酸缓冲溶液(pH为4.0),100μL 2.5mg/mL CeO2纳米粒子及100μL 5mM TMB,于37℃水浴锅内孵育3分钟后进行紫外-可见吸收光谱测量。
结果如图6所示,其它酶或BSA加入后体系紫外-可见吸收峰强度没有明显变化,说明该方法选择性较好。
以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是,本发明并不局限于上述特定实施方式,本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变形或修改,这并不影响本发明的实质内容。

Claims (6)

1.一种检测碱性磷酸酶活性的方法,其特征在于,包括如下步骤:
A1:将三(羟甲基)氨基甲烷、焦磷酸盐混匀后,分成若干份反应体系,每一份所述反应体系中分别加入不同活性的碱性磷酸酶,在37℃下孵育后,在每一份反应体系中依次加入醋酸缓冲液、CeO2纳米粒子和3,3',5,5'-四甲基联苯胺,在22~47℃下孵育后,分别进行紫外-可见吸收光谱的测量,得到碱性磷酸酶活性与ΔA的关系方程;ΔA为没有碱性磷酸酶和有碱性磷酸酶的条件下紫外-可见吸收峰强度的变化;
A2:将待测碱性磷酸酶按照步骤A1的操作进行紫外-可见吸收光谱的测量,得到ΔA,将ΔA代入步骤A1中得到的碱性磷酸酶活性与ΔA的关系方程,计算出待测碱性磷酸酶的活性。
2.如权利要求1所述的检测碱性磷酸酶活性的方法,其特征在于,所述三(羟甲基)氨基甲烷的pH值为7.4,焦磷酸盐的浓度为0.07 mM,CeO2纳米粒子的浓度为0.05~0.3 mg/mL,3,3',5,5'-四甲基联苯胺的浓度为0.1~0.9 mM。
3.如权利要求1所述的检测碱性磷酸酶活性的方法,其特征在于,所述在22~47℃孵育时间不超过9 min。
4.如权利要求1所述的检测碱性磷酸酶活性的方法,其特征在于,所述醋酸缓冲液的pH值为3.6~5.6。
5.一种检测正钒酸钠浓度的方法,其特征在于,包括如下步骤:
B1:将三(羟甲基)氨基甲烷、碱性磷酸酶混匀后,分成若干份反应体系,每一份所述反应体系中分别加入不同浓度的正钒酸钠,在37℃下孵育后,在每一份反应体系中依次加入焦磷酸盐,在37℃下孵育后,加入醋酸缓冲液、CeO2纳米粒子和3,3',5,5'-四甲基联苯胺,在22~47℃下孵育后,分别进行紫外-可见吸收光谱的测量,以正钒酸钠对碱性磷酸酶的抑制效率和正钒酸钠的浓度作图,得到正钒酸钠浓度与正钒酸钠对碱性磷酸酶的抑制效率的关系方程;
B2:将待测正钒酸钠按照步骤B1的操作进行紫外-可见吸收光谱的测量,计算得到抑制效率值,将抑制效率值代入步骤B1中得到的正钒酸钠浓度与正钒酸钠对碱性磷酸酶的抑制效率的关系方程,计算出待测正钒酸钠的浓度。
6.如权利要求5所述的检测正钒酸钠浓度的方法,其特征在于,在步骤B1的混合后,所述焦磷酸盐的浓度为0.07 mM,CeO2纳米粒子的浓度为0.25 mg/mL,3,3',5,5'-四甲基联苯胺的浓度为0.5 mM,在步骤B1的混合前,三(羟甲基)氨基甲烷的pH值为7.4,醋酸缓冲液的pH值为4.0。
CN201810777431.7A 2018-07-16 2018-07-16 检测碱性磷酸酶活性以及碱性磷酸酶抑制剂浓度的方法 Active CN108896506B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810777431.7A CN108896506B (zh) 2018-07-16 2018-07-16 检测碱性磷酸酶活性以及碱性磷酸酶抑制剂浓度的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810777431.7A CN108896506B (zh) 2018-07-16 2018-07-16 检测碱性磷酸酶活性以及碱性磷酸酶抑制剂浓度的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN108896506A CN108896506A (zh) 2018-11-27
CN108896506B true CN108896506B (zh) 2020-10-27

Family

ID=64349957

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810777431.7A Active CN108896506B (zh) 2018-07-16 2018-07-16 检测碱性磷酸酶活性以及碱性磷酸酶抑制剂浓度的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108896506B (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111220609B (zh) * 2020-02-05 2022-04-26 江苏大学 基于CeVO4的碱性磷酸酶活度比色检测法
CN111220608B (zh) * 2020-02-05 2022-02-15 江苏大学 基于硫化改性的CoOx的碱性磷酸酶活性比色检测法
CN113433103B (zh) * 2021-06-29 2022-10-04 中国农业大学 一种检测2,4-二氯苯氧乙酸的方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104897846A (zh) * 2015-06-23 2015-09-09 江南大学 一种基于原位形成光活性纳米材料模拟酶的碱性磷酸酯酶活性检测方法
CN105886596A (zh) * 2016-04-26 2016-08-24 南京师范大学 一种宫颈癌细胞检测试剂盒
CN106066325A (zh) * 2016-05-25 2016-11-02 安徽师范大学 一种检测碱性磷酸酶的方法
CN106596532A (zh) * 2016-11-24 2017-04-26 桂林理工大学 一种简单低成本的碱性磷酸酶活性的检测方法
WO2017214315A1 (en) * 2016-06-09 2017-12-14 The Regents Of The University Of California Biomarker concentration and signal amplification for use in paper-based immunoassays and a single platform for extracting, concentrating, and amplifying dna

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2011521916A (ja) * 2008-05-19 2011-07-28 バーナム インスティテュート フォー メディカル リサーチ 腸アルカリホスファターゼモジュレーターおよびそれの使用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104897846A (zh) * 2015-06-23 2015-09-09 江南大学 一种基于原位形成光活性纳米材料模拟酶的碱性磷酸酯酶活性检测方法
CN105886596A (zh) * 2016-04-26 2016-08-24 南京师范大学 一种宫颈癌细胞检测试剂盒
CN106066325A (zh) * 2016-05-25 2016-11-02 安徽师范大学 一种检测碱性磷酸酶的方法
WO2017214315A1 (en) * 2016-06-09 2017-12-14 The Regents Of The University Of California Biomarker concentration and signal amplification for use in paper-based immunoassays and a single platform for extracting, concentrating, and amplifying dna
CN106596532A (zh) * 2016-11-24 2017-04-26 桂林理工大学 一种简单低成本的碱性磷酸酶活性的检测方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Colorimetric logic gate for alkaline phosphatase based on copper (II)-based metal-organic frameworks with peroxidase-like activity;Caihong Wang et al;《Analytica Chimica Acta》;20171212;全文 *
Nanoceria Particles As Catalytic Amplifiers for Alkaline Phosphatase Assays;Akhtar Hayat et al;《American Chemical Society》;20130923;全文 *
Spectrophotometric determination of the activity of alkaline phosphatase and detection of its inhibitors by exploiting the pyrophosphate-accelerated oxidase-like activity of nanoceria;Pengjuan Ni et al;《Microchimica Acta》;20190502;全文 *
纳米二氧化铈的毒理学研究进展;李园园等;《工业卫生与职业病》;20141231;第40卷(第3期);全文 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN108896506A (zh) 2018-11-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108896506B (zh) 检测碱性磷酸酶活性以及碱性磷酸酶抑制剂浓度的方法
EP0186134B1 (de) Mittel zur Verbesserung des Nachweises Wasserstoffperoxid liefernder Oxidase-Reaktionen und seine Verwendung
Nanjo et al. Amperometric determination of alcohols, aldehydes and carboxylic acids with an immobilized alcohol oxidase enzyme electrode
CN105572197B (zh) 一种基于磁性纳米光敏材料的光电化学雌二醇传感器的制备方法及应用
Wang et al. A carbon dot-based ratiometric fluorometric and colorimetric method for determination of ascorbic acid and of the activity of ascorbic acid oxidase
CN110455786B (zh) 一种基于CeO2@SnS2促进鲁米诺电致化学发光传感器的制备方法
Tang et al. In situ amplified electronic signal for determination of low-abundance proteins coupling with nanocatalyst-based redox cycling
CN110455756A (zh) 一种同时检测二价铅离子和二价铜离子的方法
CN104155252A (zh) 汞离子检测试剂盒及汞离子检测方法
Yu et al. A sensitive chemiluminescence method for the determination of cysteine based on silver nanoclusters
CN113244916A (zh) 一种纳米酶及其应用
De Vos et al. Determination of manganese in blood and urine by flameless atomic absorption spectrophotometry
Luetkmeyer et al. Analysis of Free and Total Glycerol in Biodiesel Using an Electrochemical Assay Based on a Two‐Enzyme Oxygen‐Electrode System
Wang et al. Adsorptive stripping measurements of trace aluminum in the presence of cupferron
CN113683092B (zh) 一种氮硫共掺杂Ti3C2-MXene纳米片及其制备方法与应用
Chen et al. A nonenzymatic approach for selective and sensitive determination of glycerol in biodiesel based on a PtRu-modified screen-printed edge band ultramicroelectrode
CN108760696B (zh) 一种基于磷光铜纳米簇检测胰蛋白酶及其抑制剂的方法
Fernandez et al. Sensitive Method for the Determination of Submicrogram Quantities of Manganese and Its Application to Human Serum.
Zhang et al. Colorimetric copper (Ⅱ) ions detection in aqueous solution based on the system of 3′ 3′ 5′ 5′-tetramethylbenzidine and AgNPs in the presence of Na2S2O3
CN111965136A (zh) 一种类过氧化物纳米酶β-FeOOH的制备方法及其在H2O2检测中的应用
Sun et al. New optical method for the determination of β-galactosidase and α-fetoprotein based on oxidase-like activity of fluorescein
CN110702907A (zh) 一种降低发光底物自身本底的酶促化学发光免疫检测方法
CN113295685B (zh) 一种比色检测葡萄糖的纳米酶的制备方法及应用
CN112179877B (zh) 一种基于催化反应原位荧光检测无机焦磷酸酶的方法
Müller Oxidation‐Reduction Potentials Measured with the Dropping Mercury Electrode: Part V. Anomalous Polarographic Waves in Dilute Solutions of Certain Dyes

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20240207

Address after: Room 214, Building 3, No. 48 Jialingjiang Road, Lingang Economic Zone, Binhai New Area, Tianjin, 300452

Patentee after: TJU BINHAI INDUSTRIAL RESEARCH INSTITUTE CO.,LTD.

Country or region after: China

Address before: No. 336, West Road, South Xin Zhuang, Shandong, Shandong

Patentee before: University of Jinan

Country or region before: China