CN108841859A - 一种基于msp1基因的转基因水稻不育系的培育方法 - Google Patents

一种基于msp1基因的转基因水稻不育系的培育方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108841859A
CN108841859A CN201810728703.4A CN201810728703A CN108841859A CN 108841859 A CN108841859 A CN 108841859A CN 201810728703 A CN201810728703 A CN 201810728703A CN 108841859 A CN108841859 A CN 108841859A
Authority
CN
China
Prior art keywords
gene
msp1
rice
wheat
amplification
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201810728703.4A
Other languages
English (en)
Inventor
米铁柱
张国栋
刘佳音
徐春莹
葛序娟
王克响
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Qingdao Yuance Group Co Ltd
Original Assignee
Qingdao Yuance Group Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Qingdao Yuance Group Co Ltd filed Critical Qingdao Yuance Group Co Ltd
Priority to CN201810728703.4A priority Critical patent/CN108841859A/zh
Publication of CN108841859A publication Critical patent/CN108841859A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8287—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for fertility modification, e.g. apomixis
    • C12N15/8289—Male sterility
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/65—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression using markers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/66—General methods for inserting a gene into a vector to form a recombinant vector using cleavage and ligation; Use of non-functional linkers or adaptors, e.g. linkers containing the sequence for a restriction endonuclease

Landscapes

  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本申请公开了一种基于MSP1基因的转基因水稻不育系的培育方法，包括以下步骤：A、mPlum基因表达盒的获得；B、水稻MSP1基因表达盒的获得；C、小麦致死基因Ki的扩增；D、小麦花粉特异性启动子Pg47的扩增；E、各基因表达元件的连接。所述步骤E、各基因表达元件的连接，进一步包括：第一步，将mPlum基因表达元件连接到pCAMBIA1301载体上；第二步，将完整的水稻MSP1基因引入第一步中已经引入mPlum基因表达元件的pCAMBIA1301载体上。本发明F1代杂合体在自交结实过程中遵循孟德尔分离定律，产生的后代既有能保持三连锁基因的杂合体，又有无育性的不育系。

Description

一种基于MSP1基因的转基因水稻不育系的培育方法
技术领域
本发明涉及分子生物学核酸化学技术领域，特别涉及一种水稻遗传工程不育系的制备方法。
背景技术
水稻是是世界上近一半的人口的主食，除可食用外，还可以酿酒、制糖和作为工业原料，人类对水稻的需求很大。多年来的生产实践表明，杂交水稻一般可比常规稻增产20％以上，因此杂交水稻彰显着巨大的增产潜力。
杂交水稻的发展依赖于杂交水稻不育系的培育。我国杂交水稻的研究始于上个世纪60年代，70年代开始大规模被种植。第一代杂交水稻是以核质互作雄性不育系为遗传工具的三系法，第二代杂交水稻是以光温敏雄性不育系为遗传工具的两系法，“三系法”和“两系法”杂交育种技术对粮食增产贡献巨大，但也存在问题。三系法中可利用的具有优良形状的父母本有限，配组不自由，野败保持系频率较低。
生产上现有的不育系间遗传差异小，杂交种育性稳定性不够，抵御逆境能力较差。而“两系法”中光温敏雄性不育系的育性受外界温度控制，易导致光温敏不育系自交结实，制种失败。因此开发新一代不育系对杂交水稻的发展至关重要。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于，提供了一种基于MSP1基因的转基因水稻不育系的培育方法。本发明将水稻普通核不育基因MSP1与小麦种的致死基因ki连锁，同时以远红外荧光蛋白mPlum基因作为报告基因，对水稻MSP1突变体进行基因改造，获得F1代杂合体。F1代杂合体在自交结实过程中遵循孟德尔分离定律，产生的后代既有能保持三连锁基因的杂合体，又有无育性的不育系。
为解决上述技术问题，本发明提供了一种基于MSP1基因的转基因水稻不育系的培育方法，包括以下步骤：
A、mPlum基因表达盒的获得；
B、小麦致死基因Ki的扩增；
C、水稻MSP1盒的获得：
D、小麦花粉特异性启动子Pg47的扩增；
E、各基因表达元件的连接。
所述步骤C、水稻MSP1盒的获得，进一步的包括：
提取水稻植株的基因组DNA，以基因组DNA为模板，以F3/R3为上下游引物进行完整MSP1基因表达盒的扩增，扩增过程中分别在上游引物和下游引物中引入Sma I和Sal I酶切位点，其扩增的水稻MSP1基因包含其上游的启动子和下游的终止子，同时包含所有的外显子和内含子。
所述步骤A、mPlum基因表达盒的获得，进一步包括：
以含有mPlum基因完整表达盒的质粒为模板，以F1/R1为上下游引物进行扩增，扩增过程中分别在上下游引物中引入AcsI和Kpn I位点，同时在下游引物引入的KpnI位点前面加入Msel酶切位点。
所述步骤B、小麦致死基因Ki的扩增，进一步包括：
以小麦基因组DNA为模板，以F2/R2为上下游引物进行小麦致死基因Ki的扩增，在上下游引物中引入Msel酶切位点；其扩增的致死基因Ki包含所有的外显子和内含子。
所述步骤D、小麦花粉特异性启动子Pg47的扩增，进一步包括：
以小麦基因组DNA为模板，以F4/R4为上下游引物进行花粉特异性启动Pg47扩增，在上下游引物中分别引入Kpn I和Sma I酶切位点。
所述步骤E、各基因表达元件的连接，进一步包括：
第一步，将mPlum基因表达元件连接到pCAMBIA1300载体上；
第二步，将完整的水稻MSP1基因引入第一步中已经引入mPlum基因表达元件的pCAMBIA1301载体上；
第三步，将小麦致死基因Ki连入到已经连有mPlum基因表达元件和水稻MSP1基因的pCAMBIA1301双元载体上；
第四步，将小麦花粉特异性启动Pg47连接到前三步已经连接上mPlum基因表达元件、水稻MSP1基因和小麦致死基因Ki的复合载体上。
为解决上述技术问题，本发明又提供了一种水稻普通核不育MSP1突变体的利用方法，应用水稻MSP1基因表达盒构建如前述任一项方法制备的水稻不育系。
为解决上述技术问题，本发明另提供了一种如前述任一项方法在水稻遗传育种中的应用。
本发明有益效果包括：本发明将水稻普通核不育基因MSP1与小麦种的致死基因Ki连锁，同时以远红外荧光蛋白mPlum基因作为报告基因，对水稻MSP1突变体进行基因改造，获得F1代杂合体。F1代杂合体在自交结实过程中遵循孟德尔分离定律，产生的后代既有能保持三连锁基因的杂合体，又有无育性的不育系。
附图说明
图1：mPlum基因完整表达盒PCR扩增凝胶电泳检测图；
图2：水稻MSP1基因表达盒PCR扩增凝胶电泳检测图；
图3：小麦致死基因Ki的扩增凝胶电泳检测图；
图4：小麦花粉特异性启动子Pg47的扩增凝胶电泳检测图；
图5：植物表达载体基因连锁、转录方向和酶切位点图谱；
图6：转基因植株结出的稻穗照片。
具体实施方式
下面结合实施例详述本发明。为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚、明确，以下参照附图并举实施例对本发明进一步详细说明，但本发明并不局限于这些实施例。
本发明是将水稻普通核不育基因MSP1与小麦的致死基因Ki连锁，同时以远红外荧光蛋白mPlum基因作为报告基因，对水稻MSP1突变体进行基因改造，获得F1代杂合体。F1代杂合体在自交结实过程中遵循孟德尔分离定律，产生的后代既有能保持三连锁基因的杂合体，又有无育性的不育系，即所谓的第三代不育系。
为解决上述技术问题，本发明提供了一种基于MSP1基因的转基因水稻不育系的培育方法，包括以下步骤：
A、mPlum基因表达盒的获得；
B、小麦致死基因Ki的扩增；
C、水稻MSP1盒的获得：
D、小麦花粉特异性启动子Pg47的扩增；
E、各基因表达元件的连接。
所述步骤C、水稻MSP1盒的获得，进一步的包括：
提取水稻植株的基因组DNA，以基因组DNA为模板，以F3/R3为上下游引物进行完整MSP1基因表达盒的扩增，扩增过程中分别在上游引物和下游引物中引入Sma I和Sal I酶切位点，其扩增的水稻MSP1基因包含其上游的启动子和下游的终止子，同时包含所有的外显子和内含子。
所述步骤A、mPlum基因表达盒的获得，进一步包括：
以含有mPlum基因完整表达盒的质粒为模板，以F1/R1为上下游引物进行扩增，扩增过程中分别在上下游引物中引入AcsI和Kpn I位点，同时在下游引物引入的KpnI位点前面加入Msel酶切位点。
所述步骤B、小麦致死基因Ki的扩增，进一步包括：
以小麦基因组DNA为模板，以F2/R2为上下游引物进行小麦致死基因Ki的扩增，在上下游引物中引入Msel酶切位点；其扩增的致死基因Ki包含所有的外显子和内含子。
所述步骤D、小麦花粉特异性启动子Pg47的扩增，进一步包括：
以小麦基因组DNA为模板，以F4/R4为上下游引物进行花粉特异性启动Pg47扩增，在上下游引物中分别引入Kpn I和Sma I酶切位点。
所述步骤E、各基因表达元件的连接，进一步包括：
第一步，将mPlum基因表达元件连接到pCAMBIA1300载体上；
第二步，将完整的水稻MSP1基因引入第一步中已经引入mPlum基因表达元件的pCAMBIA1301载体上；
第三步，将小麦致死基因Ki连入到已经连有mP1um基因表达元件和水稻MSP1基因的pCAMBIA1301双元载体上；
第四步，将小麦花粉特异性启动Pg47连接到前三步已经连接上mPlum基因表达元件、水稻MSP1基因和小麦致死基因Ki的复合载体上。
为解决上述技术问题，本发明又提供了一种水稻普通核不育MSP1突变体的利用方法，应用水稻MSP1基因表达盒构建如前述任一项方法制备的水稻不育系。
为解决上述技术问题，本发明另提供了一种如前述任一项方法在水稻遗传育种中的应用。
1、水稻MSP1基因表达盒的获得
提取水稻武运粳10号植株的基因组DNA，以基因组DNA为模板，以F3/R3为上下游引物进行完整MSP1基因表达盒的扩增，扩增过程中分别在上游引物和下游引物中引入Sma I和Sal I酶切位点，其扩增的水稻MSP1基因包含其上游的启动子和下游的终止子，同时包含所有的外显子和内含子。
2、mPlum基因表达盒的获得
以实验室保存的含有mP1um基因完整表达盒的质粒为模板，以F1/R1为上下游引物进行扩增，扩增过程中分别在上下游引物中引入AcsI和Kpn I位点，同时在下游引物引入的KpnI位点前面加入Msel酶切位点。表达盒总长度为681bp，通过PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳检测，初步获得了mPlum基因完整表达盒。
3、小麦致死基因Ki的扩增
以小麦基因组DNA为模板，以F2/R2为上下游引物进行小麦致死基因Ki的扩增，在上下游引物中引入Msel酶切位点。其扩增的致死基因Ki包含所有的外显子和内含子。
4、小麦花粉特异性启动子Pg47的扩增
以小麦基因组DNA为模板，以F4/R4为上下游引物进行花粉特异性启动Pg47扩增，在上下游引物中分别引入Kpn I和Sma I酶切位点。
5、各基因表达元件的连接
第一步，利用上下游引物中引入的AcsI和Kpn1酶切位点和pCAMBIA1301双元载体上AcsI和Kpn1酶切位点，将mP1um基因表达元件连接到pCAMBIA1301载体上。第二步，连接MSP1基因，利用上下游引物中引入的Smal和Sal1酶切位点和pCAMBIA1301双元载体上的Smal和Sal1酶切位点，将完整的水稻MSP1基因引入第一步中已经引入mPlum基因表达元件的pCAMBIA1301载体上。第三步，利用上下游都引入的Msel酶切位点，将小麦致死基因Ki通过单酶切位点连入到已经连有mPlum基因表达元件和水稻MSP1基因的pCAMBIA1301双元载体上。最后一步，利用上下游引物中引入Kpn I和Sma I酶切位点和pCAMBIA1301双元载体上的Kpn I和Sma I酶切位点，将小麦花粉特异性启动Pg47连接到前三步已经连接上mPlum基因表达元件、水稻MSP1基因和小麦致死基因Ki的复合载体上。
表1：各基因扩增到的引物、引物中添加的酶切位点
以上所述，仅是本发明的几个实施例，并非对本发明做任何形式的限制，虽然本发明以较佳实施例揭示如上，然而并非用以限制本发明，任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案的范围内，利用上述揭示的技术内容做出些许的变动或修饰均等同于等效实施案例，均属于本发明技术方案保护范围内。

Claims (8)

1.一种基于MSP1基因的转基因水稻不育系的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：
A、mPlum基因表达盒的获得；
B、小麦致死基因Ki的扩增；
C、水稻MSP1盒的获得；
D、小麦花粉特异性启动子Pg47的扩增；
E、各基因表达元件的连接。
2.根据权利要求1所述一种基于MSP1基因的转基因水稻不育系的培育方法，其特征在于：所述步骤C、水稻MSP1盒的获得，进一步的包括：
提取水稻植株的基因组DNA，以基因组DNA为模板，以F3/R3为上下游引物进行完整MSP1基因表达盒的扩增，扩增过程中分别在上游引物和下游引物中引入Sma I和Sal I酶切位点，其扩增的水稻MSP1基因包含其上游的启动子和下游的终止子，同时包含所有的外显子和内含子。
3.根据权利要求1所述一种基于MSP1基因的转基因水稻不育系的培育方法，其特征在于：所述步骤A、mPlum基因表达盒的获得，进一步包括：
以含有mPlum基因完整表达盒的质粒为模板，以F1/R1为上下游引物进行扩增，扩增过程中分别在上下游引物中引入AcsI和Kpn I位点，同时在下游引物引入的Kpn I位点前面加入Msel酶切位点。
4.根据权利要求1所述一种基于MSP1基因的转基因水稻不育系的培育方法，其特征在于：所述步骤B、小麦致死基因Ki的扩增，进一步包括：
以小麦基因组DNA为模板，以F2/R2为上下游引物进行小麦致死基因Ki的扩增，在上下游引物中引入Msel酶切位点；其扩增的致死基因Ki包含所有的外显子和内含子。
5.根据权利要求1所述一种基于MSP1基因的转基因水稻不育系的培育方法，其特征在于：所述步骤D、小麦花粉特异性启动子Pg47的扩增，进一步包括：
以小麦基因组DNA为模板，以F4/R4为上下游引物进行花粉特异性启动Pg47扩增，在上下游引物中分别引入Kpn I和Sma I酶切位点。
6.根据权利要求1所述一种基于MSP1基因的转基因水稻不育系的培育方法，其特征在于：所述步骤E、各基因表达元件的连接，进一步包括：
第一步，将mPlum基因表达元件连接到pCAMBIA1300载体上；
第二步，将完整的水稻MSP1基因引入第一步中已经引入mPlum基因表达元件的pCAMBIA1301载体上；
第三步，将小麦致死基因Ki连入到已经连有mP1um基因表达元件和水稻MSP1基因的pCAMBIA1301双元载体上；
第四步，将小麦花粉特异性启动Pg47连接到前三步已经连接上mPlum基因表达元件、水稻MSP1基因和小麦致死基因Ki的复合载体上。
7.一种基于MSP1基因的转基因水稻不育系的培育方法，其特征在于，应用水稻MSP1基因表达盒构建如权利要求1～6中任一项所述方法制备的水稻不育系。
8.一种如权利要求1～6中任一项所述方法在水稻遗传育种中的应用。
CN201810728703.4A 2018-07-04 2018-07-04 一种基于msp1基因的转基因水稻不育系的培育方法 Pending CN108841859A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810728703.4A CN108841859A (zh) 2018-07-04 2018-07-04 一种基于msp1基因的转基因水稻不育系的培育方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810728703.4A CN108841859A (zh) 2018-07-04 2018-07-04 一种基于msp1基因的转基因水稻不育系的培育方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108841859A true CN108841859A (zh) 2018-11-20

Family

ID=64201485

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810728703.4A Pending CN108841859A (zh) 2018-07-04 2018-07-04 一种基于msp1基因的转基因水稻不育系的培育方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108841859A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114480419A (zh) * 2022-01-24 2022-05-13 上海师范大学 一种植物温敏不育突变体tms15及其应用

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102876711A (zh) * 2012-10-31 2013-01-16 湖南杂交水稻研究中心 水稻工程保持系的培育方法及其在水稻普通核不育系繁殖中的应用
CN104846009A (zh) * 2015-05-18 2015-08-19 湖南杂交水稻研究中心 一种水稻工程保持系的构建方法及其应用
CN105063083A (zh) * 2015-07-16 2015-11-18 湖南杂交水稻研究中心 防止基因漂移的水稻工程保持系的创制方法及其应用
CN106701818A (zh) * 2017-01-09 2017-05-24 湖南杂交水稻研究中心 一种培育水稻普通核不育系的方法
CN107245495A (zh) * 2017-06-07 2017-10-13 湖南杂交水稻研究中心 水稻普通核不育系的创制方法和应用
CN108148855A (zh) * 2017-12-31 2018-06-12 青岛袁策生物科技有限公司 一种水稻遗传工程不育系选育方法
CN108239653A (zh) * 2017-12-31 2018-07-03 青岛袁策生物科技有限公司 水稻遗传工程不育系的制备方法

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102876711A (zh) * 2012-10-31 2013-01-16 湖南杂交水稻研究中心 水稻工程保持系的培育方法及其在水稻普通核不育系繁殖中的应用
CN104846009A (zh) * 2015-05-18 2015-08-19 湖南杂交水稻研究中心 一种水稻工程保持系的构建方法及其应用
CN105063083A (zh) * 2015-07-16 2015-11-18 湖南杂交水稻研究中心 防止基因漂移的水稻工程保持系的创制方法及其应用
CN106701818A (zh) * 2017-01-09 2017-05-24 湖南杂交水稻研究中心 一种培育水稻普通核不育系的方法
CN107245495A (zh) * 2017-06-07 2017-10-13 湖南杂交水稻研究中心 水稻普通核不育系的创制方法和应用
CN107667853A (zh) * 2017-06-07 2018-02-09 湖南杂交水稻研究中心 水稻普通核不育系的创制方法和应用
CN108148855A (zh) * 2017-12-31 2018-06-12 青岛袁策生物科技有限公司 一种水稻遗传工程不育系选育方法
CN108239653A (zh) * 2017-12-31 2018-07-03 青岛袁策生物科技有限公司 水稻遗传工程不育系的制备方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HAIYAN REN 等: "Cysteine Sulfoxidation Increases the Photostability of Red Fluorescent Proteins", 《ACS CHEM. BIOL.》 *
王东芳等: "内置双重安全控制机制的水稻生物反应器表达药物蛋白质", 《中国博士学位论文全文数据库 农业科技辑》 *
王鹏等: "小麦花粉致死基因Ki的SSR标记分析", 《中国农业通报》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114480419A (zh) * 2022-01-24 2022-05-13 上海师范大学 一种植物温敏不育突变体tms15及其应用
CN114480419B (zh) * 2022-01-24 2023-06-09 上海师范大学 一种植物温敏不育突变体tms15及其应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108148855A (zh) 一种水稻遗传工程不育系选育方法
CN108239653A (zh) 水稻遗传工程不育系的制备方法
CN102154281B (zh) 与谷子抽穗期基因紧密连锁的分子标记SIsv0010
CN106967803B (zh) 一种检测萝卜Ogura-CMS育性恢复基因的高通量分子标记及应用
CN113637789B (zh) 小麦抗条锈病基因YrTD121连锁的KASP分子标记及引物、试剂盒和应用
CN109593881A (zh) 检测水稻低直链淀粉含量基因Wxmq的KASP分子标记及方法
CN114107537B (zh) 与小麦苗期侧根数目主效qtl紧密连锁的分子标记、其检测引物及其应用
CN103789419B (zh) 鉴别水稻光温敏核不育基因p/tms12-1等位基因类型的共显性标记引物组及其应用
CN102690812B (zh) 与谷子抽穗期基因紧密连锁的分子标记SIsv0067
CN108841859A (zh) 一种基于msp1基因的转基因水稻不育系的培育方法
CN108841860A (zh) 一种基于gamyb基因的转基因水稻不育系的培育方法
CN108949813A (zh) 一种基于zmaa1基因的转基因水稻不育系的培育方法
CN111593135A (zh) 一种鉴别转基因材料及其自交、杂交、回交后代中内、外源基因的检测引物和方法
CN108949816A (zh) 一种基于pair1基因的转基因水稻不育系的培育方法
CN108841857A (zh) 一种基于cyp703a3基因的转基因水稻不育系的培育方法
CN108949776A (zh) 一种基于udt1基因的转基因水稻不育系的培育方法
CN108949814A (zh) 一种基于tdr基因的转基因水稻不育系的培育方法
CN108949815A (zh) 一种基于ptc1基因的转基因水稻不育系的培育方法
CN108949777A (zh) 一种基于mil1基因的转基因水稻不育系的培育方法
CN108949810A (zh) 一种基于cyp704b2基因的转基因水稻不育系的培育方法
CN108949817A (zh) 一种基于mtr1基因的转基因水稻不育系的培育方法
CN108841858A (zh) 一种基于aid1基因的转基因水稻不育系的培育方法
CN108949811A (zh) 一种基于c6基因的转基因水稻不育系的培育方法
CN112575101A (zh) 与西葫芦prsv-w病毒病抗性相关的分子标记及其应用
CN108949808A (zh) 一种基于dpw基因的转基因水稻不育系的培育方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20181120

RJ01 Rejection of invention patent application after publication