CN108823084A - 一种自发增氧循环气液体菌种培养装置及培养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种自发增氧循环气液体菌种的培养方法,其属于微生物培养领域。本发明的自发增氧循环气液体菌种的培养装置,包括扩大培养罐、接种瓶、自发增氧装置、氧气收集储存罐;自发增氧装置通过管道与氧气收集储存罐相连接,氧气收集储存罐的顶部设置有氧气循环管道分别与扩大培养罐及接种瓶的底部相连接,在氧气收集储存罐的管道出口处设置有氧气循环泵;在扩大培养罐与接种瓶的顶部设置有氧气循环管道将氧气循环送回氧气收集储存罐。本发明生产方法的工艺流程更加优化,可以避免培养和扩大接种过程中出现菌种污染和老化的问题,实现循环无菌通气培养和接种生产的自动化。
Description
技术领域
本发明属于微生物培养领域,具体涉及一种自发增氧循环气液体菌种培养装置及培养方法。
背景技术
现行的菌种纯培养技术中,通常采用成熟的固体菌种培养技术。目前已有的液体菌种培养工艺,均是采用空气过滤搅拌培养,而即便过滤后的空气也不可避免的含有杂菌,在后续扩大接种培养过程中,容易造成污染或菌种老化而不能连续培养使用;不能实现无菌循环通气培养和接液体菌种自动化;不适用于规模化、工厂化无塑料袋菌棒制作。
发明内容
本发明的目的是提供一种自发增氧循环气液体菌种培养装置及培养方法,其生产工艺流程更加优化,可以避免培养和扩大接种过程中出现菌种污染和减少老化的问题,实现通气培养和接种生产的自动化。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的:
一种自发增氧循环气液体菌种的培养装置,包括扩大培养罐、接种瓶、自发增氧装置、氧气收集储存罐;自发增氧装置通过管道与氧气收集储存罐相连接,氧气收集储存罐的顶部设置有氧气循环管道分别与扩大培养罐及接种瓶的底部相连接,在氧气收集储存罐的管道出口处设置有氧气循环泵;在扩大培养罐与接种瓶的顶部设置有氧气循环管道将氧气循环送回氧气收集储存罐;扩大培养罐与接种瓶的顶部设置并联有热蒸汽管道;扩大培养罐与接种瓶之间设置有负压泵通过管道相连接,在接种瓶内设置有倒吸管,与负压泵相连接;自发增氧装置的顶部设置有两个电极,在其侧面设置有碱液入口;扩大培养罐与接种瓶的侧面均设置有进料口和出料口;在扩大培养罐、接种瓶、自发增氧装置上设置有观察窗;在扩大培养罐和接种瓶的进气口处设置有分子筛;在扩大培养罐的底部设置有氧气分流板;在扩大培养罐、接种瓶、自发增氧装置、氧气收集储存罐的顶部设置有压力表及安全阀;在扩大培养罐、接种瓶、自发增氧装置、氧气收集储存罐的管道出入口均设置有阀门。
作为技术方案的优选,利用自发增氧循环气液体菌种的培养装置进行培养的方法,包括如下步骤:
(1)准备工作:确认培养装置的连接完好,确保各个阀门和压力表正常工作,保证整个系统保持密闭状态;
(2)在培养液体菌种前,在接种瓶和扩大培养罐中利用负压原理吸入配置好的营养培养液;
(3)对整个培养装置进行灭菌;
(4)待培养装置冷却至常温后,在接种瓶接入固体菌种进行人工接种,以此作为母种;
(5)打开自发增氧装置,通入无菌氧气对接种瓶(2)进行通气搅拌培养一段时间得到液体菌种;
(6)打开接种瓶与扩大培养罐之间的阀门,利用负吸泵的负压自动将接种瓶中的母种吸入到扩大培养罐中;
(7)扩大培养罐中通入无菌氧气,进行通气搅拌培养;7-10天后完成液体菌种的扩大培养;
(8)利用负压原理将扩大培养罐中的培养好的液体菌种中的一部分倒吸入接种瓶中,作为下一次培养的液体菌种培养的母种,将扩大培养罐中剩余大部分的液体菌种导出进行接种,然后再吸入营养培养液,进行下一次的液体菌种培养,以此实现不间断的连续化生产。
作为技术方案的优选,所述液体菌种在接种瓶中的培养时间为5-7天。菌种在接种瓶中进行发酵培养,在纯氧条件下培养,培养出的液体菌种的活性更高,质量的提高为连续化的生产提供了条件。传统技术中通入的空气需要经过空气过滤器进行过滤后才能通入,空气过滤器的过滤效果难以保证,难以达到100%过滤效果,难免会将一些杂菌带入,影响菌种的培养。
作为技术方案的优选,所述液体菌种在扩大培养罐中的培养时间为7-10天。扩大培养罐中同样通入纯氧进行培养。并且在扩大培养罐中的液体菌种培养完成后,将一部分倒吸回接种瓶中作为下一次液体菌种培养的母种。在导出扩大培养罐中剩余大部分的液体菌种用于生产接种后,扩大培养罐再吸入营养培养液,经灭菌冷却后,将接种瓶中的液体菌种吸入扩大培养罐中,实现不间断连续性的生产,极大的缩短了菌种的培养时间,减少了母种的培养步骤,具有很高的实用性,为企业生产降低了成本,提高了效率。同时,传统技术的菌种培养时间久,周期长,不能连续性生产,不利于生产规模化、菌种接种自动化,生产成本高,本发明的液体菌种培养时间大大的缩短了,连续化生产时,每一批液体菌种平均培养时间仅为10天,与传统培养技术相比效率提高了70%,能够极大的提高生产效率,降低生产成本,提高经济效益。
作为技术方案的优选,所述液体菌种可以重复连续培养100-130次。在连续化的生产过程中,由于液体菌种在纯氧条件下培养的质量高,液体菌种可重复连续使用100-130次,减少了企业生产的成本,降低了多次接母种时,菌种污染的几率。同时也因为整个装置在一个密闭的空间内进行反应发酵,在反复接种和扩大培养的过程中,与外界完全隔离,避免了杂菌的滋生,避免了接种和培养过程中所造成菌种的污染。
作为技术方案的优选,所述液体菌种的培养温度采用常温培养,不用提供专门的保温设备,减少了生产的成本,优化了生产流程,并且由于采用常温培养,能够适用于大部分地区,利于推广使用。
作为技术方案的优选,所述液体菌种培养的整个系统保持0.1-0.4Mpa的压力。整个培养系统的压力维持在0.1-0.4Mpa的环境中,能够使水中的含氧量提高,使液体菌种的发酵效率提高,减少培养的时间,提高液体菌种的质量。
作为技术方案的优选,所述接种瓶的容量为4000-6000ml,扩大培养罐的容量为2000-3000L。接种瓶作为容纳母种的装置,用于进行母种的培养和收集;扩大培养罐用于母种的扩大培养。接种瓶和扩大培养罐底部均接有氧气入口,进行通气搅拌,顶部有氧气出口,将氧气收集用于反复利用。
作为技术方案的优选,所述的接种瓶和扩大培养罐可以并联多级。接种瓶和扩大培养罐可以根据企业的规模并联多级,用于扩大整个企业的生产规模,企业可以自由的选择。
作为技术方案的优选,所述自发增氧装置采用电解饱和NaOH来产生氧气,并设置有氧气收集储存罐。自发增氧装置采用电解饱和NaOH来产生氧气,产生的氧气纯度高,不含有杂菌,质量好。相较于传统采用空气过滤器的方法,其会采用消毒杀菌剂等将细菌杀死,但不可避免的会带有生命力顽强的细菌通过,造成液体菌种的污染。同时设有氧气收集储存罐,用收集产生的氧气和循环回来的氧气,起到缓冲和收集的作用。
作为技术方案的优选,所述无泄漏增减压系统用于控制整个系统中的压力,可以根据需要调整系统内的气压,调节接种瓶和扩大培养罐之间正负压,控制液体菌种的吸入和倒吸,实现自动化的接种。
作为技术方案的优选,所述灭菌方法采用热饱和蒸汽灭菌法,灭菌温度为100-121℃,保温时间为1-5h,压力为0.1-0.205Mpa。热饱和蒸汽灭菌法为常规的灭菌方法,为后续液体菌种的培养提供适宜的无杂菌生长环境。
本发明的有益效果:
1、本发明的工艺流程更加优化,可以避免培养和扩大接种过程中出现菌种污染和减少老化的问题,实现通气培养和接种生产的自动化。
2、本发明采用自发增氧装置电解产生氧气,然后用于整个系统的循环和通气搅拌,可以使水中的含氧量提高,使菌种的反应发酵效率提高,缩短培养时间;同时由于系统保持有稍高于标准大气压的压力,所以含氧量进一步提高,效率也进一步的提高;相较于传统采用空气过滤器对通入的空气进行过滤,其效果更佳。
3、本发明的整个装置系统完全处于全封闭的状态,可以避免杂菌的侵入,防止液体菌种的污染,相较于传统采用空气过滤器的过滤空气的方法,空气过滤的效果低于95%,不可能达到100%的过滤效果,本发明的整个装置处于与外界完全隔离的状态,可以完全避免杂菌的入侵。
4、整个工艺流程的各个环节不采用消毒杀菌剂,可以避免对液体菌种造成伤害,提高接种的成功率;发明人采用本发明的方法进行生产,在连续规模化的生产过程中,其接种的成功率为100%。
5、本发明的液体菌种培养时间极大的缩短,连续化生产时,每一批液体菌种平均培养时间仅为10天,与传统培养技术相比效率提高了50%,能够极大提高生产效率,降低生产成本,提高经济效益。
6、采用本发明的生产方法,液体菌种可以重复利用100-130次,液体菌种培养的质量高,老化速度慢。
7、本发明中无泄漏增减压系统用于控制整个系统中的压力,可以根据需要调整系统内的压力,调节接种瓶和扩大培养罐之间正负压,控制液体菌种的吸入和倒吸,实现自动化的接种。
附图说明
图1是本发明流程的示意图。
附图标记:1.扩大培养罐、2.接种瓶、3.自发增氧装置、31.电极棒、4.氧气收集储存罐、5.压力表、6.安全阀、7.进料口、8.出料口、9.进气口、10.分子筛、11.氧气循环泵、12.观察窗、13.倒吸管、14.负压泵、15.氧气分流板、16.阀门、17.氧气循环管道、18.热蒸汽管道。
具体实施方式
下面结合附图以及具体实施例进一步说明本发明,以使本发明的优点和特征更易于被理解,应该理解的是,以下实施例仅仅是本发明的较佳方案,而不是对本发明的限制。
实施例1
一种自发增氧循环气液体菌种的培养装置,包括扩大培养罐1、接种瓶2、自发增氧装置3、氧气储存罐4;自发增氧装置3通过管道与氧气储存罐4相连接,氧气储存罐4的顶部设置有氧气循环管道17分别与扩大培养罐1及接种瓶2的底部相连接,在氧气储存罐4的管道出口处设置有氧气循环泵11;在扩大培养罐1与接种瓶2的顶部设置有氧气循环管道17将氧气循环送回氧气储存罐4;扩大培养罐1与接种瓶2的顶部设置并联有热蒸汽管道18;扩大培养罐1与接种瓶2之间设置有负压泵14通过管道相连接,在接种瓶2内设置有倒吸管13,与负压泵14相连接;自发增氧装置3的顶部设置有两个电极31,在其侧面设置有碱液入口;扩大培养罐1与接种瓶2的侧面均设置有进料口7和出料口8;在扩大培养罐1、接种瓶2、自发增氧装置3上设置有观察窗12;在扩大培养罐1和接种瓶2的进气口9处设置有分子筛10;在扩大培养罐1的底部设置有氧气分流板15;在扩大培养罐1、接种瓶2、自发增氧装置3、氧气储存罐4的顶部设置有压力表5及安全阀6;在扩大培养罐1、接种瓶2、自发增氧装置3、氧气储存罐4的管道出入口出均设置有阀门16。接种瓶2和扩大培养罐1并联有2级。
利用自发增氧循环气液体菌种的培养装置进行培养的方法,包括如下步骤:
(1)准备工作:确认培养装置(如图1所示)连接完好,确保各个阀门16和压力表5正常工作,保证整个系统保持密闭状态;
(2)在培养液体菌种前,在接种瓶2和扩大培养罐1中利用负压原理吸入配置好的营养培养液,接种瓶2的容量为4000ml,扩大培养罐1的容量为2000L;
(3)对整个培养装置进行灭菌,灭菌方法采用热饱和蒸汽灭菌法,灭菌温度为100℃,保温时间为5h;
(4)待培养装置冷却至常温后,在接种瓶2中采用固体菌种进行人工接种,以此作为母种;
(5)打开自发增氧装置3,自发增氧装置3采用电解饱和NaOH来产生氧气,并设置有氧气收集储存罐4,通入无菌氧气搅拌常温培养,在接种瓶2中的培养时间为5天,得到液体菌种;
(6)打开接种瓶2与扩大培养罐1之间的阀门16,利用负压自动将接种瓶2中的母种吸入扩大培养罐1中;
(7)扩大培养罐1中通入无菌氧气,进行通气搅拌常温培养,在扩大培养罐1中的培养时间为7天;
(8)利用负压原理将扩大培养罐1中的培养好的液体菌种中的一部分倒吸入接种瓶2中,作为下一次培养的液体菌种培养的母种,将扩大培养罐1中剩余大部分的液体菌种通过出料口8导出,然后再通过进料口7吸入营养培养液,进行下一次的液体菌种培养,以此实现不间断的连续化生产。
本发明的液体菌种可以重复连续培养100次。液体菌种在连续生产过程中,接种成功率为100%。液体菌种的活性更高,连续培养的时间短,与传统液体菌种的培养方法相比,效率提高了50%以上。
实施例2
一种自发增氧循环气液体菌种的培养装置,包括扩大培养罐1、接种瓶2、自发增氧装置3、氧气储存罐4;自发增氧装置3通过管道与氧气储存罐4相连接,氧气储存罐4的顶部设置有氧气循环管道17分别与扩大培养罐1及接种瓶2的底部相连接,在氧气储存罐4的管道出口处设置有氧气循环泵11;在扩大培养罐1与接种瓶2的顶部设置有氧气循环管道17将氧气循环送回氧气储存罐4;扩大培养罐1与接种瓶2的顶部设置并联有热蒸汽管道18;扩大培养罐1与接种瓶2之间设置有负压泵14通过管道相连接,在接种瓶2内设置有倒吸管13,与负压泵14相连接;自发增氧装置3的顶部设置有两个电极31,在其侧面设置有碱液入口;扩大培养罐1与接种瓶2的侧面均设置有进料口7和出料口8;在扩大培养罐1、接种瓶2、自发增氧装置3上设置有观察窗12;在扩大培养罐1和接种瓶2的进气口9处设置有分子筛10;在扩大培养罐1的底部设置有氧气分流板15;在扩大培养罐1、接种瓶2、自发增氧装置3、氧气储存罐4的顶部设置有压力表5及安全阀6;在扩大培养罐1、接种瓶2、自发增氧装置3、氧气储存罐4的管道出入口出均设置有阀门16。接种瓶2和扩大培养罐1并联有6级。
利用自发增氧循环气液体菌种的培养装置进行培养的方法,包括如下步骤:
(1)准备工作:确认培养装置连接完好,确保各个阀门16和压力表5正常工作,保证整个系统保持密闭状态;
(2)在培养液体菌种前,在接种瓶2和扩大培养罐1中利用负压原理吸入配置好的营养培养液,接种瓶2的容量为6000ml,扩大培养罐1的容量为3000L;
(3)对整个培养装置进行灭菌,灭菌方法采用热饱和蒸汽灭菌法,灭菌温度为121℃,保温时间为1h;
(4)待培养装置冷却至常温后,在接种瓶2中采用固体菌种进行人工接种,以此作为母种;
(5)打开自发增氧装置3,自发增氧装置3采用电解饱和NaOH来产生氧气,并设置有氧气收集储存罐4,通入无菌氧气搅拌常温培养,在接种瓶2中的培养时间为7天,得到液体菌种;
(6)打开接种瓶2与扩大培养罐1之间的阀门16,利用负压自动将接种瓶2中的母种吸入扩大培养罐1中;
(7)扩大培养罐1中通入无菌氧气,进行通气搅拌常温培养,在扩大培养罐1中的培养时间为10天;
(8)利用负压原理将扩大培养罐1中的培养好的液体菌种中的一部分倒吸入接种瓶2中,作为下一次培养的液体菌种培养的母种,将扩大培养罐1中剩余大部分的液体菌种通过出料口8导出,然后再通过进料口7吸入营养培养液,进行下一次的液体菌种培养,以此实现不间断的连续化生产。
本发明的液体菌种可以重复连续培养130次。液体菌种在连续生产过程中,接种成功率为100%。液体菌种的活性更高,连续培养的时间短,与传统液体菌种的培养方法相比,效率提高了50%以上。
实施例3
一种自发增氧循环气液体菌种的培养装置,包括扩大培养罐1、接种瓶2、自发增氧装置3、氧气储存罐4;自发增氧装置3通过管道与氧气储存罐4相连接,氧气储存罐4的顶部设置有氧气循环管道17分别与扩大培养罐1及接种瓶2的底部相连接,在氧气储存罐4的管道出口处设置有氧气循环泵11;在扩大培养罐1与接种瓶2的顶部设置有氧气循环管道17将氧气循环送回氧气储存罐4;扩大培养罐1与接种瓶2的顶部设置并联有热蒸汽管道18;扩大培养罐1与接种瓶2之间设置有负压泵14通过管道相连接,在接种瓶2内设置有倒吸管13,与负压泵14相连接;自发增氧装置3的顶部设置有两个电极31,在其侧面设置有碱液入口;扩大培养罐1与接种瓶2的侧面均设置有进料口7和出料口8;在扩大培养罐1、接种瓶2、自发增氧装置3上设置有观察窗12;在扩大培养罐1和接种瓶2的进气口9处设置有分子筛10;在扩大培养罐1的底部设置有氧气分流板15;在扩大培养罐1、接种瓶2、自发增氧装置3、氧气储存罐4的顶部设置有压力表5及安全阀6;在扩大培养罐1、接种瓶2、自发增氧装置3、氧气储存罐4的管道出入口出均设置有阀门16。接种瓶2和扩大培养罐1并联有5级。
利用自发增氧循环气液体菌种的培养装置进行培养的方法,包括如下步骤:
(1)准备工作:确认培养装置连接完好,确保各个阀门16和压力表5正常工作,保证整个系统保持密闭状态;
(2)在培养液体菌种前,在接种瓶2和扩大培养罐1中利用负压原理吸入配置好的营养培养液,接种瓶2的容量为4500ml,扩大培养罐1的容量为2300L;
(3)对整个培养装置进行灭菌,灭菌方法采用热饱和蒸汽灭菌法,灭菌温度为105℃,保温时间为4h;
(4)待培养装置冷却至常温后,在接种瓶2中采用固体菌种进行人工接种,以此作为母种;
(5)打开自发增氧装置3,自发增氧装置3采用电解饱和NaOH来产生氧气,并设置有氧气收集储存罐4,通入无菌氧气搅拌常温培养,在接种瓶2中的培养时间为7天,得到液体菌种;
(6)打开接种瓶2与扩大培养罐1之间的阀门16,利用负压自动将接种瓶2中的母种吸入扩大培养罐1中;
(7)扩大培养罐1中通入无菌氧气,进行通气搅拌常温培养,在扩大培养罐1中的培养时间为9天;
(8)利用负压原理将扩大培养罐1中的培养好的液体菌种中的一部分倒吸入接种瓶2中,作为下一次培养的液体菌种培养的母种,将扩大培养罐1中剩余大部分的液体菌种通过出料口8导出,然后再通过进料口7吸入营养培养液,进行下一次的液体菌种培养,以此实现不间断的连续化生产。
本发明的液体菌种可以重复连续培养110次。液体菌种在连续生产过程中,接种成功率为100%。液体菌种的活性更高,连续培养的时间短,与传统液体菌种的培养方法相比,效率提高了50%以上。
实施例4
一种自发增氧循环气液体菌种的培养装置,包括扩大培养罐1、接种瓶2、自发增氧装置3、氧气储存罐4;自发增氧装置3通过管道与氧气储存罐4相连接,氧气储存罐4的顶部设置有氧气循环管道17分别与扩大培养罐1及接种瓶2的底部相连接,在氧气储存罐4的管道出口处设置有氧气循环泵11;在扩大培养罐1与接种瓶2的顶部设置有氧气循环管道17将氧气循环送回氧气储存罐4;扩大培养罐1与接种瓶2的顶部设置并联有热蒸汽管道18;扩大培养罐1与接种瓶2之间设置有负压泵14通过管道相连接,在接种瓶2内设置有倒吸管13,与负压泵14相连接;自发增氧装置3的顶部设置有两个电极31,在其侧面设置有碱液入口;扩大培养罐1与接种瓶2的侧面均设置有进料口7和出料口8;在扩大培养罐1、接种瓶2、自发增氧装置3上设置有观察窗12;在扩大培养罐1和接种瓶2的进气口9处设置有分子筛10;在扩大培养罐1的底部设置有氧气分流板15;在扩大培养罐1、接种瓶2、自发增氧装置3、氧气储存罐4的顶部设置有压力表5及安全阀6;在扩大培养罐1、接种瓶2、自发增氧装置3、氧气储存罐4的管道出入口出均设置有阀门16。接种瓶2和扩大培养罐1并联有10级。
利用自发增氧循环气液体菌种的培养装置进行培养的方法,包括如下步骤:
(1)准备工作:确认培养装置连接完好,确保各个阀门16和压力表5正常工作,保证整个系统保持密闭状态;
(2)在培养液体菌种前,在接种瓶2和扩大培养罐1中利用负压原理吸入配置好的营养培养液,接种瓶2的容量为5500ml,扩大培养罐1的容量为2800L;
(3)对整个培养装置进行灭菌,灭菌方法采用热饱和蒸汽灭菌法,灭菌温度为110℃,保温时间为3h;
(4)待培养装置冷却至常温后,在接种瓶2中采用固体菌种进行人工接种,以此作为母种;
(5)打开自发增氧装置3,自发增氧装置3采用电解饱和NaOH来产生氧气,并设置有氧气收集储存罐4,通入无菌氧气搅拌常温培养,在接种瓶2中的培养时间为6天,得到液体菌种;
(6)打开接种瓶2与扩大培养罐1之间的阀门16,利用负压自动将接种瓶2中的母种吸入扩大培养罐1中;
(7)扩大培养罐1中通入无菌氧气,进行通气搅拌常温培养,在扩大培养罐1中的培养时间为8天;
(8)利用负压原理将扩大培养罐1中的培养好的液体菌种中的一部分倒吸入接种瓶2中,作为下一次培养的液体菌种培养的母种,将扩大培养罐1中剩余大部分的液体菌种通过出料口8导出,然后再通过进料口7吸入营养培养液,进行下一次的液体菌种培养,以此实现不间断的连续化生产。
本发明的液体菌种可以重复连续培养100次。液体菌种在通气搅拌培养的过程中,整个系统的压力维持在0.3Mpa。液体菌种在连续生产过程中,接种成功率为100%。液体菌种的活性更高,连续培养的时间短,与传统液体菌种的培养方法相比,效率提高了50%以上。
Claims (10)
1.一种自发增氧循环气液体菌种的培养装置,其特征在于:包括扩大培养罐(1)、接种瓶(2)、自发增氧装置(3)、氧气收集储存罐(4);自发增氧装置(3)通过管道与氧气收集储存罐(4)相连接,氧气收集储存罐(4)的顶部设置有氧气循环管道(17)分别与扩大培养罐(1)及接种瓶(2)的底部相连接,在氧气收集储存罐(4)的管道出口处设置有氧气循环泵(11);在扩大培养罐(1)与接种瓶(2)的顶部设置有氧气循环管道(17)将氧气循环送回氧气收集储存罐(4);扩大培养罐(1)与接种瓶(2)的顶部设置并联有热蒸汽管道(18);扩大培养罐(1)与接种瓶(2)之间设置有负压泵(14)通过管道相连接,在接种瓶(2)内设置有倒吸管(13),与负压泵(14)相连接;
自发增氧装置(3)的顶部设置有两个电极棒(31),在其侧面设置有碱液入口;扩大培养罐(1)与接种瓶(2)的侧面均设置有进料口(7)和出料口(8);在扩大培养罐(1)、接种瓶(2)、自发增氧装置(3)上设置有观察窗(12);在扩大培养罐(1)和接种瓶(2)的进气口(9)处设置有分子筛(10);在扩大培养罐(1)的底部设置有氧气分流板(15);在扩大培养罐(1)、接种瓶(2)、自发增氧装置(3)、氧气收集储存罐(4)的顶部设置有压力表(5)及安全阀(6);在扩大培养罐(1)、接种瓶(2)、自发增氧装置(3)、氧气收集储存罐(4)的管道出入口出均设置有阀门(16)。
2.利用如权利要求1所述的自发增氧循环液体菌种的培养装置进行培养的方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)准备工作:确认培养装置的连接完好,确保各个阀门和压力表正常工作,保证整个系统保持密闭状态;
(2)在培养液体菌种前,在接种瓶(2)和扩大培养罐(1)中利用负压原理吸入配置好的营养培养液;
(3)对整个培养装置进行灭菌;
(4)待培养装置冷却至常温后,在接种瓶(2)投入固体菌种进行人工接种,以此作为母种;
(5)打开自发增氧装置(3),通入无菌氧气对接种瓶(2)进行搅拌培养一段时间得到液体菌种;
(6)打开接种瓶(2)与扩大培养罐(1)之间的阀门,利用负吸泵(14)的负压自动将接种瓶(2)中的母种吸入扩大培养罐(1)中;
(7)扩大培养罐(1)中通入无菌氧气,进行通气搅拌培养;7-10天后完成液体菌种的扩大培养;
(8)利用负压原理将扩大培养罐(1)中的培养好的液体菌种中的一部分倒吸入接种瓶(2)中,作为下一次培养的液体菌种培养的母种,将扩大培养罐(1)中剩余大部分的液体菌种导出进行接种,然后再吸入营养培养液,进行下一次的液体菌种培养,以此实现不间断的连续化生产。
3.根据权利要求2所述的利用自发增氧循环液体菌种的培养装置进行培养的方法,其特征在于:所述液体菌种在接种瓶(2)中的培养时间为5-7天。
4.根据权利要求2所述的利用自发增氧循环气液体菌种的培养装置进行培养的方法,其特征在于:所述液体菌种可以重复连续培养100-130次。
5.根据权利要求2所述的利用自发增氧循环气液体菌种的培养装置进行培养的方法,其特征在于:所述液体菌种的培养温度采用常温培养。
6.根据权利要求2所述的利用自发增氧循环气液体菌种的培养装置进行培养的方法,其特征在于:所述液体菌种培养的整个系统保持0.1-0.4Mpa的压力。
7.根据权利要求2所述的利用自发增氧循环气液体菌种的培养装置进行培养的方法,其特征在于:所述接种瓶(2)的容量为4000-6000ml,扩大培养罐(1)的容量为2000-3000L。
8.根据权利要求7所述的利用自发增氧循环气液体菌种的培养装置进行培养的方法,其特征在于:所述的接种瓶(2)和扩大培养罐(1)可以并联多级。
9.根据权利要求2所述的利用自发增氧循环气液体菌种的培养装置进行培养的方法,其特征在于:所述自发增氧装置(3)采用电解饱和NaOH来产生氧气,并设置有氧气收集储存罐。
10.根据权利要求2所述的利用自发增氧循环气液体菌种的培养装置进行培养的方法,其特征在于:所述灭菌方法采用热饱和蒸汽灭菌法,灭菌温度为100-121℃,保温时间为1-5h。
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