CN108815515A - 一种外科免疫双轨疗法治疗癌症的制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种“以癌治癌”外科免疫双轨疗法治疗癌症的制剂及其临床制备方法。涉及外科切除自身瘤体，完成第一治疗；然后利用免疫法，将切取的自身瘤体制成冷冻抗癌抗原制剂(简称CAAP)，完成第二治疗。该制剂有去除非瘤组织的肿瘤手术标本、重组人白介素‑2、植物血球凝素(PHA)及20％脂肪乳剂制成。本发明利用自身瘤体，具有同人种、同脏器、同肿瘤的“三同原则”是双轨疗法的根本原则，严格的“专一性”和个性化治疗是双轨疗法显效的关键，本发明以患者自身肿瘤组织切取拆线，将外科和免疫法相结合构成双轨疗法，最终治疗癌变，术后康复快、接受度高，疗效显著。

Description

一种外科免疫双轨疗法治疗癌症的制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及外科切除自身瘤体，完成第一治疗；然后利用免疫法，将切取的自身瘤体制成冷冻抗癌抗原制剂(简称CAAP)，完成第二治疗，将外科和免疫法相结合构成双轨疗法，最终治疗癌变，术后康复快、接受度高，疗效显著。

背景技术

癌症的有效治疗方法仍是手术切除，但癌症往往在发现的时候已经扩散转移等，因此手术切除率低。目前常用的是化疗或放疗等，不良反应严重，且疗效并不令人满意。本研究通过大量实践将外科和免疫疗法相结合，涉及“以癌治癌”和中医理论“以毒攻毒”，利用超低温零下196℃的液氮按冷冻理论方法，将肿瘤组织的移植活性(毒性)完全破坏，并增强肿瘤的抗原活性制成冷冻抗癌抗原制剂(简称CAAP)，进一步发明的一种具有同人种、同脏器、同肿瘤“三同原则”的双轨疗法，该方法采用严格的“专一性”和个性化治疗，具有术后康复快、接受度高，疗效显著、安全性高等特点。

发明内容

本发明的目的是提供一种治疗癌症的外科免疫双轨疗法，发掘“以癌治癌”和中医理论“以毒攻毒”，选用去除非瘤组织的肿瘤手术标本、重组人白介素-2、植物血球凝素(PHA)、20％脂肪乳剂及生理盐水制成冷冻抗癌抗原制剂(简称CAAP)，它不是以原癌直接攻击病体，而是利用超低温零下196℃的液氮按冷冻理论方法，将肿瘤组织的移植活性(毒性)完全破坏而不需要放疗或化学药物，并增强肿瘤的抗原活性。

本发明制备临床用注射剂CAAP(冷冻抗癌抗原制剂)处方配比如下：

去除非瘤组织的肿瘤标本10g、植物血球凝集素(PHA)6ml、重组人白细胞介素-2100万单位、20％脂肪乳剂20ml。

该成果于上海进行了科技成果鉴定，鉴定委员会认为，该研究意义重大、为国内外首创，解决了多年来困扰肿瘤特异性治疗中癌灭活去毒和抗原性低下两大难题，有重要临床实用价值，作者发现了新现象，提出了新见解，丰富了低温生物学和低温医学理论。发明者选题新颖、设计合理，方法严谨，研究数据可靠，从基础到临床，历时18年，积累了大量资料，CAAP研究成果是对人类科学的巨大贡献。

具体实施方式

冷冻抗癌抗原制剂(简称CAAP)制备过程：

先将外科手术得到的肿瘤切取标本分离去除非瘤组织，以药用乙醚-0.9％生理盐水饱和液洗涤两次，称重，切成小块，置于灭菌的组织粉碎机中，加适量生理盐水进行组织粉碎后，移入无菌膏缸中，至液氮中快速冷冻，零下100-1000℃/分钟，时间6分钟，慢速冷冻零下1-10℃/分钟，缓慢自然融化30分钟，并反复冻融7次。依次冷冻方法使癌组织移植活性完全丧失而祛毒，不需福尔马林浸泡，不用放射线或化学药物灭活，实验安全可靠。

将PHA、白介素-2和20％脂肪乳加入上述膏缸中，混匀，将膏缸放入37℃的恒温箱中培养24h，通过微孔滤膜(0.25-0.45μm)减压过滤，包含肿瘤细胞构成的全部成分，而无完整细胞。微孔滤膜减压过滤后分装于2ml安瓿中，零下18-22℃冷冻备用。

所应用的皮肤实验：

第一次注射CAAP前和末次注射前，于患者前臂内侧皮内注射CAAP 0.1ml，观察是否有肤色红云反应，记录半小时后反应。无变化者可每日皮下注射一次上述制备的CAAP，连用三天后改为三天一次，注射12针后完成第一疗程，观察是否有肤色红云反应，记录半小时后反应；休息一个月后按上述方法开始第二个疗程，继续观察是否有肤色红云反应，记录半小时后反应。休息一个月后开启第三个疗程，一般三个疗程的治疗后可达到红云反应(+ ++)。

红云反应(+ -)：表示反应弱，视为体内尚有癌细胞存在；红云反应(+ +)：表示皮肤红云直径达2cm，反应较好；红云反应(+ + +)：表示皮肤红云直径达3cm，认为体内癌细胞已不存在；

处方配置中液氮超低温反复冻融7次，使肿瘤移植活性完全丧失。经冻融后的肿瘤匀浆置于37℃恒温箱中培养24h，促进肿瘤抗原免疫活性的转化与增强。以液氮超低温冷冻方法替代放疗或化疗药物破坏癌移植活性，既“去癌毒又能保留癌的抗原性”，是“以癌治癌”的关键手段，必须按照本法严格执行，是本专利申请的核心所在。

“皮肤试验”是发明人根据免疫学原理所创立，方法简便易行，深受医患双方欢迎，疗程开始前于患者手臂行0.1ml CAAP皮内注射，观察局部皮肤变化，以确定患者体内癌细胞存在情况，同人种、同脏器、同肿瘤分型“三同原则”是双轨疗法的根本原则，严格的“专一性”和个性化治疗是双轨疗法显效的关键，以患者自身肿瘤组织切取，患者手术后一个半月即可转入健康阶段，患者接受度高，随着本疗法多年的实践，成立医养结合健康养生院，培训专科人员，使“以癌治癌”发扬光大。

外科，常规方法切除自身瘤体，完成第一治疗；免疫法，以上述切取的自身瘤体制成CAAP，完成第二治疗。两者结合，最终治疗癌变，康复长寿。外科免疫治疗双轨疗法经过实验研究多方面多手段多种实验动物验证，具有“以癌治癌”特性。临床多种癌病得到治愈和寿命的延长，癌组织冷冻灭活制成CAAP注射入人体后，数百例病例无一例发生癌种植。

以下通过典型病例来进一步阐述本发明的临床疗效：

台南翁某，82岁，胃癌术后8个月复发，用CAAP治疗四个疗程后，癌细胞得到控制，至今22年无复发；

山东宋某，72岁，乳腺癌根治术后3月复发，经CAAP治疗后，至今30年未复发；

山东孙某，68岁，原发性肝癌合并肝硬化，经CAAP治疗后，至今8年未复发。(肝癌患者82例，将在下列临床对比试验中介绍)

以下通过临床对比试验来进一步阐述本发明的疗效：

1.一般资料：肝癌82例，男45例，女37例，年龄32～80岁，平均64岁。全部病例经病理证实：原发性肝癌77例，转移性肝癌5例。合并肝硬化70例。2例肝癌直径≤5cm，无临床肝癌症状和体征，体检时偶尔发现。72例有肝癌症状和体征，无明显黄疸，有少量腹水。1例有明显黄疸及腹水。术前甲胎蛋白(AFP)＞20ng/L者65例。

2.方法：所有患者随机分为两组，A组拟性传统的手术切除法，共40例；B组拟行本发明的免疫治疗双轨疗法，共42例，两组患者年龄、性别、身体状况等临床一般资料无统计学差异。

3.随访与疗效评价：所有病例治疗后1个月检查增强CT和甲胎蛋白，以判别治疗效果，记录每次随访情况。随访过程中，原病灶之外出现新病灶，或甲胎蛋白重新升高，拟为治疗后复发。

4.结果：A组手术全程无死亡，1例术后曾出现肝功能衰竭(肝昏迷)，7例腹水，8例黄疸，1例消化道出血，术前AFP异常的患者在治疗后2个月内降至正常的占86.6％，全组术后1、2、3年的生存率分别为91.8％、84.3％和68.5％；B组治疗全程无死亡，1例术后曾出现腹水，4例黄疸，术前AFP异常的患者在治疗后2个月内降至正常的占92.1％，全组术后1、2、3年的生存率分别为94.2％、87.1％和77.9％。

5.结论：与传统手术切除法相比，应用本发明免疫治疗双轨疗法，患者生存率高，并发症少，疗效确切。

以下测定本发明的皮肤试验：

1.试验动物：白色豚鼠，体重250-300g，共用10只。

2.方法：试验前把豚鼠背部的毛脱去约10cm².试验第1天，第7天及第14天将本发明冷冻抗癌抗原制剂(简称CAAP)皮下注射0.1ml，10分钟后，每一小时观察皮肤反应情况一次，第21天再用一次，方法同前，看皮肤有无反应发生。

3.结果：按皮肤反应标准评分，根据反应差别判断反应程度。10支动物平均反应值为零(红斑及水肿形成总分为零)，致敏率(％)(皮肤红斑及水肿动物数)亦为零。

4.结论：本发明冷冻抗癌抗原制剂(简称CAAP)无皮肤反应。

Claims (3)

1.一种外科免疫双轨疗法治疗癌症的制剂，其特征在于该配方各成分的用量为：去除非瘤组织的肿瘤标本10g、植物血球凝集素(PHA)6ml、100万单位重组人白细胞介素-2、20％脂肪乳剂20ml。

2.根据权利要求1所述的外科免疫双轨疗法治疗癌症的制剂，其特征在于：将上述去除非瘤组织的肿瘤标本，以药用乙醚-0.9％生理盐水饱和液洗涤两次，称重，切成小块，置于灭菌的组织粉碎机中，加适量生理盐水进行组织粉碎后，移入无菌膏缸中，至液氮中快速冷冻，零下100-1000℃/分钟，时间6分钟，慢速冷冻零下1-10℃/分钟，缓慢自然融化30分钟，并反复冻融7次。

3.根据权利要求2所述的外科免疫双轨疗法治疗癌症的制剂，其特征在于：将上述PHA、白介素-2和20％脂肪乳加入上述膏缸中，混匀，将膏缸放入37℃的恒温箱中培养24h，通过微孔滤膜(0.25-0.45μm)减压过滤，包含肿瘤细胞构成的全部成分，而无完整细胞。微孔滤膜减压过滤后分装于2ml安瓿中，零下18-22℃冷冻备用。